CZ293957B6

CZ293957B6 - @@Azetidinony substituované cukernými zbytkyŹ použitelné jako hypocholesterolemikaŹ farmaceutický prostředek a kit je obsahující

Info

Publication number: CZ293957B6
Application number: CZ19981294A
Authority: CZ
Inventors: Yumibeánathanáp; Altonákevináb; Vanáheekámargaret; Davisáharryár; Vaccaroáwayneád
Original assignee: Scheringácorporation
Priority date: 1995-10-31
Filing date: 1996-10-29
Publication date: 2004-08-18
Also published as: BR9612998B1; EP0877750B1; NZ321766A; HUP9802539A2; SK283552B6; SK48398A3; NO981950L; DK0877750T3; MX9803447A; CN1205707A; KR19990067202A; CN1103780C; ATE219495T1; DE69621952T2; CA2235943A1; WO1997016455A1; GEP20033006B; JP2001048895A; NO311692B1; HU226822B1

Abstract

Hypocholesterolemické @@azetidinonyŹ substituované cukernými zbytkyŹ použitelné jako léčivo pro snižování hladiny cholesterolu@ Farmaceutické přípravky je obsahující a použití kombinace @@azetidinonů substituovaných cukernými zbytkyŹ tedy látek snižujících hladinu cholesteroluŹ a inhibitoru biosyntézy cholesterolu při léčbě a prevenci aterosklerózy@ Kit obsahující výše uvedené aktivní látkyŕ

Description

2-Azetidinony substituované cukernými zbytky, použitelné jako hypocholesterolemika, farmaceutický prostředek a kit je obsahující

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká 2-azetidinonů substituovaných cukernými zbytky, použitelných jako hypocholesterolemika při léčbě a prevenci aterosklerózy a spolu s inhibitorem biosyntézy cholesterolu jako součást kombinovaného přípravku použitelného rovněž při léčbě a prevenci aterosklerózy.

Dosavadní stav techniky

Aterosklerotické koronární onemocnění srdce představuje hlavní příčinu smrti a úmrtnosti na kardiovaskulární choroby v západním světě. Mezi rizikové faktory aterosklerotického koronárního onemocnění srdce patří hypertenze, diabetes mellitus, rodinná anamnéza, mužské pohlaví, kouření a cholesterol v séru. Celkové zvýšení hladiny cholesterolu na 225 až 250 mg/dl představuje už významné riziko.

Estery cholesterolu jsou hlavní složkou aterosklerotických lézí a hlavní formou ukládání cholesterolu v buňkách tepenných stěn. Tvorba esterů cholesterolu je rovněž klíčovým krokem intestinální absorpce cholesterolu pocházejícího z potravy. Kromě regulace cholesterolu pocházejícího z potravy zahrnuje regulace homeostázy veškerého cholesterolu v lidském i živočišném těle i modulaci biosyntézy cholesterolu, biosyntézy žlučových kyselin a katabolismus plazmatických lipoproteinů obsahujících cholesterol. Játra, jako hlavní orgán zodpovídající za biosyntézu a katabolismus cholesterolu, primárně určují plazmatické hladiny cholesterolu. Játra jsou místem syntézy a sekrece lipoproteinů o velmi nízké hustotě (VLDL), které jsou dále v oběhu metabolizovány na lipoproteiny o nízké hustotě (LDL). V plazmě jsou LDL převládajícími lipoproteiny obsahujícími cholesterol a proto vzrůst jejich koncentrace koreluje se zvýšenou aterosklerózou.

Jakékoliv snížení intestinální absorpce cholesterolu vede k nižší dodávce cholesterolu do jater. Následuje snížení tvorby jatemího lipoproteinů (VLDL) a úbytek plazmatického cholesterolu, převážně ve formě LDL. Přímým účinkem inhibice intestinální absorpce cholesterolu je snížení plazmatických hladin cholesterolu.

Je známo, že některé sloučeniny 2-azetidinonu snižují hladiny cholesterolu a/nebo inhibují tvorbu lézí obsahujících cholesterol v tepenných stěnách u savců: WO 93/02 048 popisuje 2-azetidinonové sloučeniny substituované v poloze 3 arylalkandiylem, arylalkendiylem nebo arylalkandiylem, kde alkandiyl, alkendiyl nebo část alkandiylu je přerušena heteroatomem, fenylenem nebo cykloalkandiylem; WO 94/17 038 popisuje 2-azetidinonové sloučeniny substituované v poloze 3 arylalkylspirocyklickou skupinou; WO 95/08 532 popisuje 2-azetidinonové sloučeniny substituované v poloze 3 arylalkandiylovou skupinou, jejíž alkenylová část obsahuje hydroxylovou skupinu; WO 95/26 334 popisuje sloučeniny substituované v poloze 3 aryl(oxo- nebo thio—) alkandiylovou skupinou, jejíž alkandiylová část obsahuje hydroxylovou skupinu; a WO 96/16 037 popisuje přípravu sloučenin substituovaných v poloze 3 arylalkandiylovou skupinou, jejíž alkandiylová část obsahuje hydroxylovou skupinu a kde je alkendiylová skupina připojena k azetidinonovému kruhu skupinou -S(0)o.r~. Citované patentové přihlášky jsou uvedeny v odkazech.

Dále evropský patent EP99 630 a evropská patentová přihláška EP 337 549 uvádějí, že inhibitory elastázy, substituované azetidinony se používají při léčbě zánětlivých stavů poškozujících tkáně a doprovázejících různá onemocnění, např. aterosklerózu.

-1CZ 293957 B6

Dalšími známými hypocholesterolemiky jsou rostlinné extrakty jako sapogeniny, zejména tigogenin a diosgenin. Glykosidické deriváty tigogeninu a/nebo diosgeninu jsou popsány v PCT mezinárodní publikaci WO 94/00 480 a WO 95/18 143.

Bylo zjištěno, že inhibice biosyntézy cholesterolu 3-hydroxy-3-methylglutaryl koenzym A reduktázou (EC 1.1.1.34) je účinnou cestou snižování plazmatické hladiny cholesterolu (Witzum, Circulation 80, 5 (1989), str. 1101-1114) a zmírnění aterosklerózy. Bylo potvrzeno, že kombinovaná terapie HMG CoA reduktázovým inhibitorem s odstraňováním žlučových kyselin je mnohem účinnější léčbou hyperlipidemických pacientů než terapie pouze jednou z uvedených látek (Illingworth, Drugs, 36, (Suppl. 3) (1988), str. 63-71).

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se týká 2-azetidinonů substituovaných cukernými zbytky, zvláště konjugátů 2-azetidinonů snižujících hladinu cholesterolu s cukry odvozenými od glukózy, které nesou arylovou nebo substituovanou arylovou skupinu v poloze 1 a fenylovou skupinu substituovanou hydroxylem, speciálně 4-hydroxyfenylovou skupinu, v poloze 4.

2-Azetidinony předkládaného vynálezu jsou látky obecného vzorce I, nebo příslušné farmaceuticky přijatelné soli,

(I), kde

R²⁶ jeHneboOG¹;

G a G¹ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující

za předpokladu, že pokud R²⁶ je H nebo OH, pak G je jiné než H;

R, R^a a R^b jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, -OH, halogen, -NH>, azido, (Cj-C₆ alkoxy)-(Ci-C₆ alkoxy) nebo -W-R³⁰;

-2CZ 293957 B6

W je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující -NH-C(O)-, -O-C(O)-, -O-C(O)-N(R³¹)-, -NH-C(O)-N(R³¹)- a -O-C(S}-N(R³¹)-;

R² a R⁶ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, C]-C6 alkyl, aryl a aryl(C|-C₆ alkyl);

R³, R⁴, R⁵, R⁷, R^3a a R^4a jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci~C₆ alkyl, aryl(Ci-Ce alkyl), -C(O)(Ci-C₆ alkyl) a -C(O)aryl;

R³⁰ je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující T substituované R³², T-(Ci-C6 alkyl) substituované R³², (C2-C4 alkenyl) substituovaný R³², (Cj-Có alkyl) substituovaný R³², (C3-C7 cykloalkyl) substituovaný R³² a (C3-C7 cykloalkyl)(Ci-Ce alkyl) substituovaný R³²;

R³¹ je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující H, C_t-C₄ alkyl;

T je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující fenyl, furyl, thienyl, pyrrolyl, oxazolyl, izoxazolyl, thiazolyl, izothiazolyl, benzothiazolyl, thiadiazolyl, pyrazolyl, imidazolyl a pyridyl;

R³² je nezávisle voleno z jednoho až tří substituentů nezávisle pocházejících ze skupiny zahrnující halogen, C1-C4 alkyl, -OH, fenoxy, -CF₃, -NO₂, C1-C4 alkoxy, methylendioxy, oxo, C1-C4 alkylsulfanyl, C]-C4 alkylsulfinyl, C1-C4 alkylsulfonyl, -N(CH₃)₂, -C(O)-NH(Ci-C4 alkyl), -C(Oy-N(Ci-C₄ alkyl)₂, -C(O)-(Ci-C4 alkyl), -C(O)-(Ci-C4 alkoxy) a pyrrolidinylkarbonyl; nebo R³² představuje kovalentní vazbu a R³¹ dusík, k němuž vazba vede a R³² je tak součástí skupiny pyrrolidinyl, piperidinyl, N-methyl-piperazinyl, indolinyl nebo morfolinyl, nebo C1-C4 alkoxykarbonyl-substituovaný pyrrolidinyl, piperidinyl, N-methylpiperazinyl, indolinyl nebo morfolinyl;

Ar¹ je aryl nebo R^I0-substituovaný aryl;

Ar² je aryl nebo R¹'-substituovaný aryl;

Q je vazba, nebo s atomem C₃-azetidinonového kruhu (r¹³)₈ (R¹⁴)b----tvoří spiroskupinu; a

R¹ je voleno ze skupiny zahrnující —(CH₂)_q, kde q je 2 až 6 a v případě, že Q je součástí spiro kruhu je q 0 nebo 1;

-(CH₂)_e-E-(CH₂)r, kde E je -0-, -C(O}-, fenylen, -NR²² nebo -S(O)₀.₂-, e je 0 až 5 za podmínky, že součet e a r je 1 až 6;

—C₂—C₆ alkylen; a

-<CH₂)f-V-(CH₂)g-, kde V je C3-C6 cykloalkylen, f je 1 až 5 za podmínky že součet f a g je 1 až 6;

-3CZ 293957 B6

R¹² představuje ii iii i

-CH-, -_C(Ci-C6 alkyl)-, -CF-, -C(OH)-, -C(CeH<-R²³)-, —H— nebo

- ⁺NO- ;

R¹³ a R¹⁴ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -CH2-, -CH(C]-C6 alkyl)-,

-C(di(C]-C6 alkyl))-, -CH=CH a -C(Ci-Ce alkyl)=CH~; nebo R¹² spolu se sousední R¹³, nebo

R¹² spolu se sousední R¹⁴ tvoří skupiny

-C =CHnebo

-c =C(Ci-Cb alkyl)-;

a i b jsou nezávisle 0,1,2 nebo 3 za podmínky, že nejsou současně 0;

za podmínky, že pokud R¹³ je -CH=CH- nebo -C(Ci-C₆ alkyl)=CH-, a je 1;

za podmínky, že pokud R¹⁴ je -CH=CH- nebo -QQ-Ce alkyl)=CH-, b je 1;

za podmínky, že pokud a je 2 nebo 3, jsou substituenty R¹³ stejné nebo odlišné; a za podmínky, že pokud b je 2 nebo 3, jsou substituenty R¹⁴ stejné nebo odlišné;

a pokud Q je vazba, R¹ může též představovat:

R¹ 5

R^{1 7} R¹⁵

R15

- M-Yd -C—Zh -, -Xrn -(c )_s -Yn - ( C)t -Zp - nebo -Xj - (C) v-Yk -S (O)o - 2 - ;

R^{1 6} ria Ri ® R’⁶

M je -0-, —S—, —S(O)— nebo —S(O)2—;

X, Y a Z jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -CH₂-, -CH(Ci-C₆ alkyl)-, -C(di(C!-C₆ alkyl))-,

R¹⁰ a R¹¹ jsou nezávisle voleny ze skupiny jednoho až tři substituentů nezávisle pocházejících ze skupiny zahrnující Cj-Ce alkyl, -OR¹⁹, -O(CO)R¹⁹, -O(CO)OR²¹, -0((2¾)^ OR¹⁹, -O(CO)NR¹⁹R²⁰, -NR¹⁹R²⁰, NR¹⁹(CO)R²⁰, NR^I9(CO)OR²¹, NR^,9(CO)NNR²⁰R^2s, NR¹⁹SO2R²¹, -COOR¹⁹, CONR¹⁹R²⁰, COR¹⁹, -SO2NR^l9R²⁰, S(0)o.2R²¹, -O(CH2)₁._1(rCOOR¹⁹, -OíChJmqCONR¹⁹R²⁰, -(Ci-C6 alkylen)-COOR¹⁹, -CH=CH-COOR¹⁹, -CF3, -<N, -NO₂ a halogen;

-4CZ 293957 B6

R¹⁵ a R¹⁷ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -OR¹⁹, -O(CO)R¹⁹, -O(C0)0R²¹a-O(CO)NR^,9R²⁰;

R¹⁶ a R¹⁸ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Q-Cé alkyl a aryl; nebo

R¹⁵ a R¹⁶ spolu tvoří =0, nebo R¹⁷ a R¹⁸ spolu tvoří =0;

d je 1,2 nebo 3;

h je 0,1, 2, 3 nebo 4;

s je 0 nebo 1; t je 0 nebo 1; m, n a p jsou nezávisle 0 až 4 za podmínky, že nejméně jeden z indexů s nebo t je 1 a součet m, n, p, s a t je 1 až 6, za podmínky, že pokud p je 0 a t je 1, je součet m,san 1 až 5; a za podmínky, že pokud p je 0 a s je 1, je součet m,tan 1 až 5;

v je 0 nebo 1;

j a k jsou nezávisle 1 až 5, za podmínky, že součet j, k a v je 1 až 5;

a pokud Q je vazba a R¹ je

R^{1 5}

I

-Xj~(C)v-Yk-S(O)o-2-,

I

R¹ 6

Ar¹ lze volit ze skupin pyridyl, izoxazolyl, furanyl, pyrrolyl, thienyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, pyrazinyl, pyrimidinyl nebo pyridazinyl;

R¹⁹ a R²⁰ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, C]-Ců alkyl a aryl-substituovaný Ci-C₆ alkyl;

R²¹ je Ci-C₆ alkyl, aryl nebo R²⁴-substituovaný aryl;

R²² je H, Cj-Cfi alkyl, aryHCi-C₆ alkyl), -C(O)R¹⁹ nebo -COOR¹⁹;

R²³ a R²⁴ jsou nezávisle 1 až 3 substituenty nezávisle volené ze skupiny zahrnující H, Ci-Cé alkyl, C]-C₆ alkoxy, -COOH, NO₂, -NR¹⁹R²⁰, -OH a halogen;

R²⁵ je H, -OH nebo C]-C₆ alkoxy.

Ar² je výhodně fenyl nebo R¹'-substituovaný fenyl, zejména (4-R)-substituovaný fenyl. R je výhodně nižší alkoxy, zejména methoxy, a halogen, zejména fluór.

Ar¹ je výhodně fenyl nebo R¹⁰-substituovaný fenyl, zejména (4-R¹⁰)-substituovaný fenyl. R¹⁰ je výhodně halogen, zejména fluór.

Pro skupinu -R'-Q- platí některé výhodné kombinace:

Q je vazba a R¹ je nižší alkylen, výhodně propylen;

-5CZ 293957 B6

Q je spiroskupina definovaná výše, kde R¹³ a R¹⁴ jsou výhodně ethylen, R¹² je výhodně

I —CH— nebo -C(OH)a R¹ je —(CH₂)_q, kde q je 0 až 6;

Q je vazba a R¹ je _R1 5

I

- M-Yd-C-Zh-,

I

R16 kde proměnné jsou voleny tak, že R¹ je -O-CH₂-CH(OH)-;

Q je vazba a R¹ je

R^{1 7} _R15

-Xn>-(C)_s-Yn-(C)t-Z_P-, _R18 _R16 kde proměnné jsou voleny tak, že R¹ je-CH(OH)-(CH₂)₂-; a

Q je vazba a R¹ je _R1 5

I

-Xj -(C)v-Yk-S(O)o-2~,

I _R1 6 kde proměnné jsou voleny tak, že R¹ je -CH(OH)-CH₂-S(0)o.₂-.

Výhodná sloučenina obecného vzorce I je tedy látka, v níž pro G a G¹ platí výše uvedené definice a pro zbývající proměnné platí:

Ar¹ je fenyl nebo R¹⁰-substituovaný fenyl, kde R¹⁰ je halogen;

Ar² je fenyl nebo R¹'-substituovaný fenyl, kde R¹¹ je 1 až 3 substituenty nezávisle volené ze skupiny zahrnující C|-C6 alkoxy a halogen;

-6CZ 293957 B6

Q je vazba a R¹ je nižší alkylen; Q s atomem C₃-azetidinonového kruhu tvoří spiroskupinu ^X R----(R¹³)a (R^l4)b----kde obě skupiny R¹³ a R¹⁴ jsou ethylen, a i b jsou 1 a kde R¹² je

I I

-CH- nebo -C(OH)Q je vazba a R¹ je -O-CH2-CH(OH)-; Q je vazba a R¹ je -CH(OH)-(CH2)₂-, nebo Q je vazba a R¹ je -CH(OH)-CH₂-S(0)o.₂-.

Výhodné proměnné substituenty pro skupiny G a G¹ následujících obecných vzorců

jsou:

R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R⁷ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, C1-C6 alkyl, benzyl a acetyl.

Výhodné proměnné substituenty skupiny G nebo G¹ obecného vzorce

jsou:

R³, R^3a, R⁴ a R^4a jsou voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-C₆ alkyl, benzyl a acetyl.

R, R^a a R^b jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, -OH, halogen, -NH2, azid, (Ci-C6 alkoxy)-(Ci-C6 alkoxy) a -W-R³⁰, kde W je -O-C(O)- nebo -O-C(O)-NR³¹, R³¹ je H a R³⁰ je Ci-C6 alkyl, -C(O)-(Ci-C4 alkoxyXCi-C₆ alkyl), T, T-(Ci-C6 alkyl), nebo T nebo T-(Ci-C₆alkyl), kde T je substituovaný jedním nebo dvěma halogenovými atomy nebo skupinou C]-C₆alkyl.

Výhodné substituenty R³⁰ jsou 2-fluorfenyl, 2,4-difluorfenyl, 2,6-dichlorfenyl, 2-methylfenyl, 2-thienylmethyl; 2-methoxykarbonylethyl, thiazol-2-yl-methyl, 2—furyl, 2-methoxykarbonylbutyl a fenyl. Výhodné kombinace skupin R, R^a a R^b jsou: 1) R, R^a a R^b jsou nezávisle

-OH nebo -O-€(O)-NH-R^3(>, zvláště kde R^a je -OH a R a R^b jsou -O-C(O)-NH-R³⁰ a R³⁰ je voleno z výhodných substituentů uvedených výše, nebo kde R a R^a jsou -OH a R^b je -O-C(O)NH-R³⁰, kde R³⁰ je 2-fluorfenyl, 2,4-difluorfenyl, 2,6-dichlorfenyl; 2) R^a je -OH, halogen, azid nebo (Ci-06 alkoxy)-(Ci-C6 alkoxy), R^b je H, halogen, azid nebo (Ci-06 alkoxy)-(Ci-C6 5 alkoxy), a R je -O-C(O)-NH-R³⁰, zvláště sloučeniny kde R^a je -OH, R^b je H a R³⁰ je 2-fluorfenyl; 3) R, R^a a R^b jsou nezávisle -OH nebo -O-C(O)-R³⁰, a R³⁰ je Ci-Ce alkyl, T nebo T substituované jedním nebo dvěma halogenovými atomy nebo skupinami Cj-Cé alkyl, zejména sloučeniny, kde R je -OH a R^a a R^b jsou -O-C(O)-R³⁰, kde R³⁰ je furyl; a 4) R, R^a a R^b jsou nezávisle -OH nebo halogen. Tři další třídy výhodných sloučenin jsou takové, kde C¹ anomemí 10 kyslík je v konfiguraci beta, kde C² anomemí kyslík je beta a skupina R je alfa.

G a G¹ jsou výhodně voleny z následujících skupin:

PhCH,q. OCH₂Ph PhCH^ _>0CH₂Ph —< Y«lOCH₂Ph

CO₂CH₂Ph ^•^>OCH₂Ph _O-f^OCH3 —<Ť^S-HOCH₂Ph /CHs-O^OC^Ph ,

CH₂OCH₂Ph OCH₂Ph°^CH:?Ph °AC _OAC OH _QH —^-UOAc , —( \.>|OH

CH₂OAc CO₂CH₃ pAc _LOCH₃

PH

CH_?OH ch₂oh

-CH₂ t

CH₂OAc •>IOH f

CH₂OAc

CH₂OH ch₂oh

kde Ac je acetyl a Ph je fenyl. Výhodně R²⁶ je H nebo -OH, výhodněji H. Substituent -0-G je 15 výhodně v poloze ’4-fenylového kruhu, k němuž je připojen.

-8CZ 293957 Β6

Předkládaný vynález se také týká použití 2-azetidinonu substituovaného cukerným zbytkem, zejména azetidinonu obecného vzorce I jako hypocholesterolemika při léčbě savců.

Předkládaný vynález se dále týká farmaceutického přípravku obsahujícího 2-azetidinon substituovaný cukerným zbytkem, zejména azetidinon obecného vzorce I, a farmaceuticky přijatelný nosič.

Předkládaný vynález se dále týká způsobu snížení hladiny esteru cholesterolu v játrech, způsobu snížení hladiny cholesterolu v plazmě a způsobu léčby či prevence aterosklerózy, který spočívá v podání účinného množství kombinace předkládaného 2-azetidinonu substituovaného cukerným zbytkem, zejména sloučeniny obecného vzorce I, a inhibitoru biosyntézy cholesterolu. Předkládaný vynález se týká použití 2-azetidinonu substituovaného cukerným zbytkem v kombinaci s inhibitorem biosyntézy cholesterolu (a analogicky použití inhibitoru biosyntézy cholesterolu v kombinaci s 2-azetidinonem substituovaným cukerným zbytkem) při léčbě a prevenci aterosklerózy nebo ke snížení plazmatických hladin cholesterolu.

Předkládaný vynález se dále týká farmaceutického přípravku obsahujícího účinné množství 2-azetidinonu substituovaného cukerným zbytkem, účinné množství inhibitoru biosyntézy cholesterolu a farmaceuticky přijatelný nosič.

Konečně vynález zahrnuje kit obsahující oddělené balení účinného množství 2-azetidinonu substituovaného cukerným zbytkem ve farmaceuticky přijatelném nosiči a oddělené balení účinného množství inhibitoru biosyntézy cholesterolu ve farmaceuticky přijatelném nosiči.

Podrobný popis vynálezu

Výraz „alkyl“ nebo „nižší alkyl“ představuje přímé nebo rozvětvené Cj-Ce alkylové řetězce, výraz „alkoxy“ se analogicky týká C]-C₆ alkoxylových skupin.

Výraz „alkenyl“ představuje přímé nebo rozvětvené uhlíkaté řetězce obsahující jednu a více dvojných vazeb, konjugovaných i nekonjugovaných.

Podobně výraz „alkynyl“ představuje přímé nebo rozvětvené uhlíkaté řetězce obsahující jednu a více trojných vazeb. Pokud se alkylový, alkenylový či alkynylový řetězec váže na další dvě proměnné skupiny a je tedy dvojvazný, je použito označení alkylen, alkenylen či alkynylen.

Výraz „cykloalkyl“ představuje nasycený C₃-C6 kruh, výraz „cykloalkylen“ znamená odpovídající dvojvazný C₃-C₆ kruh, zahrnující všechny případné polohové izomery.

Výraz „halogen“ zahrnuje fluór, chlór, bróm nebo jód.

Výraz „aryl“ znamená fenyl, naftyl, indenyl, tetrahydronaftyl nebo indanyl. „Fenylen“ je dvojvazná fenylová skupina zahrnující orto-, meta- i para-substituci. R²⁴-benzyl a R²⁴-benzyloxy jsou benzylové a benzyloxy radikály substituované na fenylovém kruhu.

Tvrzení, vyskytující se ve výše uvedených definicích, např. R¹⁹, R²⁰ a R²⁵ jsou nezávisle voleny ze skupiny substituentů, znamená, že R¹⁹, R²⁰ a R²⁵ jsou voleny nezávisle, ale také, že kde se proměnné R¹⁹, R²⁰ a R²⁵ v molekule vyskytují více než jednou, mohou pokaždé představovat jinou skupinu (např. je-li R¹⁰ skupina -OR¹⁹, kde R¹⁹ je H, může R¹¹ být skupina -OR¹⁹, kde R¹⁹je nižší alkyl). Odborník v oboru ví, že velikost a povaha substituentu(ů) ovlivňuje možné celkové množství substituentů.

-9CZ 293957 B6

Vzhledem k tomu, že předkládané sloučeniny mají nejméně jeden asymetrický uhlíkový atom, zahrnuje předkládaný vynález všechny izomeiy, včetně diastereomerů a rotačních izomerů. Vynález zahrnuje d- a 1- izomery v čisté formě, ve směsi i racemické směsi. Izomery lze připravit konvenčními postupy, reakcí opticky čistých nebo obohacených výchozích látek, nebo separací izomerů sloučenin obecného vzorce I.

Odborník v oboru jistě pozná, že některé izomery sloučenin obecného vzorce I budou vykazovat větší farmakologickou účinnost než jiné.

Sloučeniny obecného vzorce I předkládaného vynálezu obsahující aminoskupinu mohou tvořit farmaceuticky přijatelné soli s některými organickými a anorganickými kyselinami. Vhodné kyseliny jsou například chlorovodíková, sírová, fosforečná, octová, citrónová, šťavelová, malonová, salicylová, jablečná, fumarová, jantarová, askorbová, maleinová, methansulfonová a další minerální i karboxylové kyseliny známé v oboru techniky. Soli lze připravit přímou reakcí báze s dostatečným množstvím kyseliny. Volnou bázi lze regenerovat ze soli zředěným roztokem vhodné báze, jako je např. hydrogenuhličitan sodný. Volná báze se může od soli lišit některými fyzikálními vlastnostmi, například rozpustností v polárních rozpouštědlech, ale pro účely předkládaného vynálezu jsou sůl i volná báze ekvivalentní.

Některé předkládané sloučeniny jsou kyselé (např. sloučeniny obsahující karboxylovou skupinu). Tyto sloučeniny tvoří farmaceuticky přijatelné soli s některými organickými a anorganickými bázemi. Příkladem takových solí jsou soli sodné, draselné, vápenaté, hlinité, zlatnaté a stříbrné. Vynález zahrnuje i soli s farmaceuticky přijatelnými aminy jako jsou amoniak, alkylaminy, hydroxyalkylaminy, N-methylglukamin a pod.

Jako inhibitory biosyntézy cholesterolu použitelné v kombinaci se sloučeninami předkládaného vynálezu jsou vhodné inhibitoiy HMG CoA reduktázy jako lovastatin, pravastatin, fluvastatin, simvastatin a Cl-981; inhibitory HMG CoA syntetázy jako jsou 1-659,699 ((E,E-ll-(3’7?(hydroxy-methyl)-4’-oxo-2’7?-oxetanyl]-3,5,7Á-trimethyl-2,4-undekan-dienová kyselina); inhibitory syntézy skvalenu, např. skvalestatin 1; a inhibitoiy skvalen epoxidázy, např. NB-598 ((£)-7V-ethyl-V-(6,6-dimethyl-2-hepten-4-ynyl)-3-[(3,3’-bi-thiofen-5-yl)methoxy]benzenmethanamin hydrochlorid). Výhodné jsou inhibitory HMG CoA reduktázy lovastatin, pravastatin, fluvastatin, simvastatin.

Některé části 2-azetidinonových sloučenin obecného vzorce I lze připravit známými postupy. Například WO 93/02 048 popisuje přípravu sloučenin, kde -R’-Q- je alkylen, alkenylen nebo alkylen přerušený heteroatomem, fenylen nebo cykíoalkylen; WO 94/17 038 popisuje přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde Q je spirocyklická skupina; WO 95/08 532 popisuje přípravu sloučenin kde -R'-Q- je hydroxy-substituovaný alkylen; WO 95/26 334 popisuje sloučeniny, kde —R¹—Q— je hydroxy-substituovaný alkylen připojený k Ar¹ skupině přes -O nebo -S(0)o.₂můstek; a WO 96/16 037 popisuje přípravu sloučenin, kde -R*-Q- je hydroxy-substituovaný alkylen připojený k azetidinonovému kruhu -S(O)₀.₂- můstkem.

Sloučeniny předkládaného vynálezu se obecně připravují reakcí 4-(hydroxy nebo dihydroxy)fenyl-2-azetidinonu s derivátem cukru. Například azetidinon obecného vzorce II, kde R^26A je H nebo OH, se nechá reagovat s jedním ekvivalentem derivátu cukru obecného vzorce III:

-10CZ 293957 B6 kde R³⁰ je H nebo -CNHCC1₃ a zbývající proměnné mají výše uvedený význam, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IA, kde R^26A je H nebo OH. Při přípravě sloučeniny obecného vzorce IB, kde R²⁶ je OG¹, kde G* není H a G je H, se nechá reagovat azetidinon obecného vzorce IIA, kde R²⁶ je OH a R²⁷ je vhodná chránící skupina hydroxylu, s derivátem cukru obecného vzorce IILA, kde R³⁰ má výše definovaný význam a poté se odstraní chránící skupiny R²⁷:

Při přípravě sloučeniny obecného vzorce IC, kde G i G¹ jsou stejné ale ne H, se nechá reagovat dihydroxy sloučenina obecného vzorce IIC s nadbytkem G-OR³⁰:

Při přípravě sloučeniny obecného vzorce ID, kde G i G¹ nejsou H, ani stejný cukerný derivát, se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce IA, kde R^26A je OH, s cukrem obecného vzorce G'-OR³⁰. Alternativně lze jednu z hydroxylových skupin v poloze 4- fenylu sloučeniny obecného vzorce IIC chránit před reakcí druhé hydroxylové skupiny s cukerným derivátem. Po reakci se chránící skupina odštěpí a provede reakce původně chráněného hydroxylu s druhým cukerným derivátem. Například:

Cukry a jejich deriváty obecného vzorce G’-OR³⁰ jsou v oblasti techniky známé a lehce dostupné známými postupy.

Pro výše uvedené postupy je výhodné, pokud nereagující hydroxylové skupiny cukerné složky jsou chráněny vhodnými chránícími skupinami. Pokud skupiny R², R³, R , R⁴, R^4a, R⁵ a R⁷nepředstavují H, jsou výhodně nižší alkyl, acetyl nebo benzyl. Tyto chránící skupiny se po vytvoření konjugátu odštěpují. Pokud postranní řetězce 2-azetidinonu v polohách 1- a 3- nesou na substituentech skupiny, které jsou v podmínkách syntézy reaktivní, je vhodné tyto skupiny rovněž před zamýšlenou reakcí s cukernou složkou chránit vhodnou chránící skupinou a po provedené reakci je opět odstranit. Podle povahy chránících skupin lze chránící skupiny

-11 CZ 293957 B6 z cukerné části molekuly i z 1- a 3- postranních řetězců azetidinonu odštěpovat postupně nebo najednou.

Například sloučeniny obecného vzorce I, kde Ar^,-R¹-Q-je Ar^!-CH(OH)-(CH2)2-, tj. sloučeniny obecného vzorce Ia a Ib, lze připravit podle následujícího reakčního schématu: azetidinon obecného vzorce Ha se nechá reagovat s cukerným derivátem obecného vzorce G-OCNHCCI3. Schéma uvádí reakční postup pro sloučeniny, kde R²⁶ je H a skupina H-OCNHCCI3 je uvedena konkrétně, ale analogické schéma platí obecně pro sloučeniny, kde R²⁶je -OG¹ a pro jiné skupiny G-OCNHCCI3.

V prvním kroku se nechá reagovat azetidinon obecného vzorce Ha s cukerným derivátem strukturního vzorce lila v přítomnosti kondenzačního činidla, např. BF₃ etherátu v inertním rozpouštědle, jako je CH2CI2. Reakce se provádí při teplotě -20 až -25 °C, 2 h. Ve druhém kroku se buď na azetidinon strukturního vzorce IV substituovaný cukrem působí bází, např. triethylaminem v methanolu nebo ve vodě k odstranění acetylových a alkylových chránících skupin za vzniku sloučeniny obecného vzorce Ia, nebo se azetidinon strukturního vzorce IV substituovaný cukrem nechá reagovat s činidlem jako je KCN v rozpouštědle jako je methanol, k odstranění pouze acetylových chránících skupin za vzniku sloučeniny obecného vzorce Ib. Sloučeninu obecného vzorce Ib lze dále redukovat činidlem jako je LiOH za vzniku sloučeniny obecného vzorce Ia.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde Ar’-R’-Q-je Ar^l-(CH2)3-, tj. sloučeniny obecného vzorce Ic, lze připravit podle následujícího reakčního schématu. Azetidinon obecného vzorce lib se nechá reagovat s cukerným derivátem obecného vzorce G-OH. Schéma uvádí reakční postup pro

- 12CZ 293957 B6 sloučeniny, kde R²⁶ je H a pro konkrétní skupinu G-OH, ale analogické schéma platí obecně pro sloučeniny, kde R²⁶ je -OG¹ a pro jiné skupiny G-OH.

OCHoPh lllb

V prvním kroku se nechá azetidinon obecného vzorce lib reagovat s cukerným derivátem strukturního vzorce lllb v inertním rozpouštědle jako je tetrahydrofuran v přítomnosti n-tributylfosfinu a l,l’-(azodikarbonyl)dipiperidinu. Vzniklý azetidinon substituovaný cukrem se pak redukuje činidlem, jako je Pd(OH)₂/C v alkoholickém rozpouštědle v plynném H₂ k odstranění benzylových chránících skupin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I.

Výchozí látky obecného vzorce lib jsou známy. Sloučeniny obecného vzorce Ha lze připravit z odpovídajícího (3-hydroxy-3-Ar’-propyl)-2-azetidinonu reakcí s acetanhydridem a dimethylaminopyridinem (DMAP) v inertním rozpouštědle jako je CH₂C1₂, za vzniku odpovídající diacetyl sloučeniny a následující reakcí s guanidinem za vniku 4-hydroxyfenylové sloučeniny. Výchozí látky obecného vzorce II, kde Αγ’^’-Ο- má význam uvedený u vzorce I, lze připravit analogickým postupem, nebo postupy známými v oblasti techniky.

Výchozí látka vzorce lllb je v oblasti techniky známa, stejně jako postupy její přípravy. Sloučeniny vzorce lila se připravují působením trichloracetonitrilu na sloučeniny lllb v inertním rozpouštědle jako je CH₂C1₂ v přítomnosti Cs₂CO₃.

Reaktivní skupiny, které se neúčastní reakcí výše uvedeného postupu, lze chránit během reakcí běžnými chránícími skupinami, které lze po syntéze odstranit standardními postupy. V tabulce 1 jsou uvedeny některé typické chránící skupiny:

-13 CZ 293957 B6

Tabulka 1

Reaktivní skupina -COOH >NH)

Reaktivní skupina chráněná chránící skupinou_________________________

-COOalkyI,-COObenzyl,-COOfenyl >NCOalkyl; >NCObenzyl; >NCOfenyl; >NCH₂OCH₂CH₂Si(CH₃)₃; >NC(O)OC(CH₃)₃; >N-benzyl; >NSi(CH₃)₃;

CH3 /

>NSi-C(CH3)3 \

CH3

-NH₂

-OH

-OCH₃, -OCH₂OCH₃, -OSí(CH₃)₃;

CH3 / -OS1-C(CH3)3 \

CH3 nebo -OCH₂ fenyl

Bylo zjištěno, že sloučeniny předkládaného vynálezu snižují plazmatické a jatemí hladiny cholesterolu. Inhibují intestinální absorpci cholesterolu a významně snižují tvorbu cholesteryl esterů v játrech zvířecích modelů. Sloučeniny předkládaného vynálezu jsou tedy hypocholesterolemickými činidly díky schopnosti inhibovat esterifikaci a/nebo intestinální absorpci cholesterolu; jsou proto použitelné při léčbě a prevenci aterosklerózy u savců, zejména u lidí.

Proti 2-azetidinonovým hypocholesterolemickým látkám, které nejsou substituovány cukrem, mají předkládané deriváty některé farmakologicky a fyzikálně výhodné vlastnosti. Předkládané deriváty jsou absorbovány nižší rychlostí, mají nižší plazmatické hladiny a vyšší intestinální hladiny. Dřívější testy naznačily, že pravděpodobným místem účinku 2-azetidinonových sloučenin nesubstituovaných cukrem jsou vnitřnosti. Viz Sybertz, E.J. et al, „SCH 48461, a Novel Inhibitor of Cholesterol Absorption, „Atherosclerosis X, ed. Woodward, F.P. et al (Elsevier, 1995), str. 311-315; a Salisbury, B.G. etal., „Hypocholesterolemic Activity of a Novel Inhibitor of Cholesterol Absorption,“ Atherosclerosis, 115 (1995), str. 45-63. Předkládané nárokované sloučeniny jsou vylučovány žlučí, což představuje dostatečný způsob dodávky do požadovaného místa účinku při minimálním zatížení organismu a tedy menším riziku toxicity.

Předkládaný vynález se kromě účinných sloučenin zabývá rovněž způsobem snižování plazmatických hladin cholesterolu, představujícím podávání účinných dávek předkládaných hypocholesterolemických sloučenin obecného vzorce I pacientům. Sloučenina je výhodně 25 podávána ve farmaceuticky přijatelném nosiči vhodném pro perorální cestu.

Předkládaný vynález se rovněž zabývá farmaceutickými přípravky obsahujícími předkládanou sloučeninu obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelný nosič. Sloučeniny obecného vzorce I lze podávat v libovolných perorálních dávkových formách jako jsou kapsle, tablety, prášky, tobolky, 30 suspenze nebo roztoky. Léčivé a farmaceutické přípravky jsou připravovány běžnými postupy s využitím farmaceuticky přijatelných excipientů a aditiv. Mezi farmaceuticky přijatelné

-14CZ 293957 B6 excipienty a aditiva patří netoxická kompatibilní plniva, pojivá, dezintegranty, pufry, konzervační látky, anti-oxidanty, lubrikanty, aromatické látky, zahušťovadla, barviva, emulzifikátory a pod.

Denní hypocholesterolemická dávka sloučeniny obecného vzorce I představuje 0,001 až 30 mg/kg tělesné hmotnosti a den, výhodná 0,001 až 1 mg/kg tělesné hmotnosti a den. Pro pacienta o průměrné tělesné hmotnosti 70 kg, je tedy denní dávka 0,1 až 100 mg účinné látky ne den ve formě jedné dávky nebo rozdělena na 2 až 4 částečné dávky. Přesné dávkování však rozhoduje ošetřující lékař podle účinnosti zvoleného léčiva stáří, hmotnosti, celkovém stavu a vnímavosti pacienta.

Při kombinovaném podávání předkládaných substituovaných azetidinonů s inhibitory biosyntézy cholesterolu je typická denní dávka inhibitoru biosyntézy cholesterolu 0,1 až 80 mg/kg tělesné hmotnosti, podávaná najednou nebo v několika částečných dávkách, obvykle jednou až dvakrát denně: například HMG CoA reduktázový inhibitor je podáván jednou až dvakrát denně v množství 10 až 40 mg na dávku, celková denní dávka je tedy 10 až 80 mg, jiný inhibitor biosyntézy cholesterolu je podáván jednou až dvakrát denně v množství 1 až 1000 mg na dávku, celková denní dávka je tedy 1 mg až 2 g. Přesné dávkování obou kombinovaných složek však rozhoduje ošetřující lékař podle účinnosti zvoleného léčiva, stáří, hmotnosti, celkovém stavu a vnímavosti pacienta.

Pokud jsou jednotlivé složky kombinace podávány odděleně, množství denních dávek nemusí být stejné, např. složka s dlouhodobou účinností může být podávána méně často.

Protože se předkládaný vynález zabývá snížením plazmatické hladiny cholesterolu léčbou spočívající v podávání kombinace účinných složek, které mohou být podávány i odděleně, zahrnuje předkládaný vynález i kombinaci jednotlivých farmaceutických přípravků ve formě kitu. Tzn. kit je uvažován v případě, že jsou kombinovány jednotlivé složky: farmaceutický přípravek obsahující inhibitor biosyntézy cholesterolu a farmaceutický přípravek obsahující inhibitor absorpce 2-azetidinon substituovaný cukrem. Kit dále výhodně obsahuje směrnice pro podávání jednotlivých složek. Forma kitu je zvláště výhodná v případech, kdy se jednotlivé přípravky podávají v různých dávkových formách (např. perorálně a parenterálně) nebo v různých časových intervalech.

Následují příklady příprav sloučenin obecného vzorce I. Uvedené stereochemické údaje jsou relativní, pokud není řečeno jinak. Značení cis a trans se týká vzájemné orientace poloh 3- a 4- β-laktamu.

Příklady provedení vynálezu

Příprava A

1- (4-Fluorfenyl-3(7?)-[3(₁S)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)-propyl)]-4(5)-[4-hydroxyoxyfenyl)-

2- azetidinon

Krok 1:

1-(4-Fluorfeny 1-3(7? )-[3(5)-acety loxy-3-( 4-fluorfeny l)-propyl)]-4(S)-(4-acety loxyfenyl)-2azetidinon

Acetanhydrid (1,03 ml; 10,96 mmol) byl přidán za laboratorní teploty k roztoku l-(4-fluorfenyl3(7?)-[3(>S)-hydroxy-3-(4-fluorfenyl)-propyl)]-4(S)-(4-hydroxyoxyfenyl)-2-azetidinonu (2,04 g; 4,98 mmol) a dimethylaminopyridinu (DMAP) (1,46 g; 11,96 mmol) v tetrahydrofuranu (THF) (15 ml). Po zreagování veškerého výchozího materiálu dle TLC (5% CHjOH/toluen)

- 15CZ 293957 B6 (10 min), byla reakční směs zředěna diethyletherem (Et₂O), promyta 1 mol.I'¹ HC1 a solným roztokem. Organická část byla sušena bezvodým Na₂SO₄, odpařena do pevné pěny produktu s výtěžkem 2,47 g (100 %). Produkt byl použit bez purifikace do další reakce.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,33 (2H, d, J = 8,6 Hz); 7,27 (2H, m); 7,21 (2H, m); 7,11 (2H, d, J = 8,5 Hz); 7,02 (2H; t, J = 8,6 Hz); 6,94 (2H, d, J = 8,5 Hz); 5,70 (1H, t, J = 7 Hz); 4,60 (1H, d, J = 2,4 Hz); 3,06 (1H, dt, J = 7,9; 2,4 Hz); 2,31 (3H, s); 2,06 (3H, s); 2,03 (1H, m); 1,86 (2H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₂₈H₂₅NO5F₂, 493,1701; nalezeno 493,1695.

Krok 2:

Ethoxid sodný (0,338 g; 4,97 mmol) byl přidán při laboratorní teplotě k roztoku guanidin hydrochloridu (0,499 g; 5,23 mmol) vCH₃OH (15 ml). Po 10 min byl vzniklý roztok opatrně přidán pipetou k roztoku produktu kroku 1 (2,45 g, 4,97 mmol) v CH₃OH (15 ml). Reakce byla monitorována TLC (15% EtOAc/toluen) a po zreagování výchozího materiálu (1 h) byla reakční směs zahuštěna při laboratorní teplotě ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu (EtOAc) a zakoncentrován s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na sloupec silikagelu připravený ve směsi 15% EtOAc/toluen. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem 1,31 g (95 %) titulní sloučeniny ve formě skla. HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₂₆H₂₄NO₄F₂,452,1873; nalezeno 452,1661.

Příprava A2

7raM5-(3R,4S)-l-[4-(benzoyl)fenyl)-3-(3-fenyl)propyl]-4-(4—hydroxy)fenyl-2-azetidinon

Krokl:

Směs 4-nitrobenzofenonu (20,94 g; 92,2 mmol), ethylenglykolu (25,6 ml; 461 mmol), kyseliny p-toluensulfonové (0,87 g; 4,61 mmol) a toluenu (125 ml) byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem přes noc za azeotropického odebírání vody Dean-Starkovým uzávěrem. Reakční směs byla ochlazena na laboratorní teplotu, zředěna Et₂O, organická fáze byla promyta 1 mol.r¹ NaOH, vodou a solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zahuštěna s výtěžkem 24,81 g (99 %) bílé pevné látky.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 8,18 (2H, d, J = 9,0Hz); 7,12 (2H, d, J = 9,0Hz); 7,50 (2H, d, J = 8,0 Hz); 7,34 (3H, m); 4,09 (4H, m).

Krok 2:

Produkt kroku 1 (24,8 g; 92 mmol) byl rozpuštěn v ethylacetátu (75 ml), zředěn ethanolem (75 ml) a roztok probublán N₂. Raney Nikl (40 g) byl třikrát propláchnut ethanolem a přenesen do reakční nádoby. Výsledná směs byla hydrogenována v Parrově třepačce při 413,69 kPa (60 psi) do vymizení výchozího materiálu dle TLC (30% EtOAC/hexan) (2 h). Směs byla přefiltrována přes celit pod vrstvou N₂. Pevné složky byly promyty 50% EtOAc/ethanolem a filtrát zahuštěn s výtěžkem 21,6 g (97 %) pevné látky.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,50 (2H, d, J = 8,0 Hz); 7,30 (5H, m); 6,22 (2H, d, J = 8,6 Hz); 4,03 (4H,m).

Krok 3:

Produkt kroku 2 (8,49 g; 35,2 mmol) a 4-(benzyloxy)benzaldehyd (7,47 g; 35,2 mmol) byly rozpuštěny v horkém izopropanolu (150 ml). Směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem a zahuštěna na objem 73 ml. Vzniklý roztok byl zředěn hexanem (200 ml) a ponechán přes noc

-16CZ 293957 B6 stát. Vzniklé krystaly byly odfiltrovány, promyty hexanem a sušeny ve vakuu s výtěžkem 14,4 g (95 %) bílých krystalů.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 8,36 (1H, s); 7,54 (4H, m); 7,37 (8H, m); 7,08 (2H, m); 5,15 (2H, s); 4,08 (4H, s). MS(C1) 436 (M+H, 78); 358(39), 149(100).

Krok 4:

5-Fenylvaleryl chlorid (10,7 ml; 53,1 mmol) byl přidán k roztoku vroucímu pod zpětným chladičem produktu kroku 3 (15,4 g; 35,4 mmol) a tributylaminu (25,3 ml; 106,3 mmol) v toluenu (350 ml). Reakční směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem přes noc. Směs byla ochlazena na laboratorní teplotu, zředěna 1 mol.l'¹ HC1 a extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla promyta vodou a solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 20% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem 14 g pevné látky. Produkt byl překrystalován ze směsi EtOAc/hexan s výtěžkem 8,54 (40 %) produktu ve formě bílých krystalů.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,30 (21H, m); 6,94 (2H, d, J = 2,4 Hz); 4,01 (4H, s); 3,07 (1H, s); 2,36 (2H, t, J = 7,0 Hz); 1,92 (1H, m); 1,81 (3H, m).

Krok 5:

mol.l'¹ HC1 (30 ml) byla přidána k roztoku produktu kroku 4 (4,4 g; 7,4 mmol) v THF (120 ml). Po 7 h byla reakční směs zředěna EtOAc, organická fáze promyta nasyceným NaHCO₃ a solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zahuštěna s výtěžkem 4,11 g (100 %) bílého skla.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,72 (4H, m); 7,55 (1H, m); 7,40 (8H, m); 7,27 (3H, m); 7,187 (3H, m); 6,98 (2H, d, J = 8,8Hz); 5,05 (2H, s); 4,65 (1H, d, J = 2,44 Hz); 3,16 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,6Hz); 1,98 (1H, m); 1,85 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃₈H₃₄NO₃, 552,2539; nalezeno 552,2541.

Krok 6:

Chlorid boritý-dimethylsulfid (14 ml; 28,3 mmol; 2 mol.l'¹ v CH₂C1₂) byl přidán při laboratorní teplotě k roztoku produktu kroku 5 (4,56 g; 2,83 mmol) v CH₂C1₂ (30 ml). Po zreagování veškerého výchozího materiálu dle TLC (20% EtOAc/hexan) byla reakční směs zředěna nasyceným NaHCO₃ a extrahována ethylacetátem. Organická fáze byla promyta vodou a solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 33% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem 1,02 g (78 %) látky ve formě bílého skla.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,73 (4H, m); 7,56 (1H, t, J = 7,6 Hz); 7,45 (2H, t, J = 7,6 Hz); 6,85 (2H, d, J = 8,3 Hz); 4,65 (1H, d, J = 2,4 Hz); 3,15 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,6 Hz); 1,98 [1H, m); 1,85 (3H, m).

Krok 7:

Acetanhydrid (0,43 ml; 4,51 mmol) byl přidán za laboratorní teploty k roztoku produktu kroku 6 (1,61 g; 3,75 mmol) a ΛζΛ^’-dimethylaminopyridinu (0,69 g; 5,64 mmol) v CH₂C1₂ (20 ml). Po zreagování veškerého výchozího materiálu dle TLC (30% EtOAc/hexan), byla reakční směs zředěna EtOAc. Organická část byla promyta 1 mol.l'¹ HC1, vodou, solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký

- 17CZ 293957 B6 prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 30% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem 1,64 g (78 %) látky ve formě bílého skla. Rozdělením produktu pomocí chirální preparativní HPLC (Chiracel OD sloupec, 20% EtOH/hexan, 65 ml/min) vzniklo 0,55 g enantiomeru A a 0,93 g enantiomeru B.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,73 (4H, m); 7,56 (1H, t, J = 7,2 Hz); 7,46 (2H, t, J = 7,7 Hz); 7,32 (6H, m); 7,19 (3H, m); 7,12 (2H, d, J = 8,4 Hz); 4,70 (1H, d, J = 2,44 Hz); 3,17 (1H, m); 2,67 (2H, t, J = 7,6 Hz); 2,31 (2H, s); 1,97 (1H, m); 1,86 (3H, m). MS(C1) 504 (M+H, 100), 224 (100). Analytické HPLC (Chiracel OD, 20% EtOH/hexan, 1 ml/min), enantiomer A, Rt= 16,83 min, enantiomer B, Rt = 23,83 min.

Krok 8:

LiOH (0,098 g; 2,35 mmol) byl rozpuštěn ve vodě (2,5 ml) a přidán k roztoku produktu kroku 7, enantiomer B (0,91 g; 1,8 mmol) v THF (7,5 ml). Směs byla míchána přes noc až do zreagování výchozího materiálu dle TLC (30% EtOAc/hexan). Reakční směs byla zředěna 1 mol.!’* HC1, EtOAc, organická část promyta 1 mokl'¹ HC1, vodou, solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 30% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem0,36 g (46 %) látky ve formě bílého skla. Analytické HPLC (Chiracel OD, 20% EtOH/hexan, 0,5 ml/min), Rt = 26,81 min.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,77 (4H, m); 7,56 (1H, t, J = 7,6 Hz); 7,45 (2H, t, J = 7,6 Hz); 7,34 (2H, d, J = 8,6 Hz); 7,28 (2H, m); 7,21 (3H, m); 7,16 (2H, d, J = 7 Hz); 6,85 (2H, d, J = 8,4 Hz); 4,65 (1H, d, J = 2,4 Hz); 3,15 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,4 Hz); 1,98 (1H, m); 1,85 (3H, m).

Příprava B

Methyl-(2,3,4-tri-č)-acetyl-D-glukopyranosyl)uronát l-(2,2,2-trichloracetamidát

Cs₂CO₃ (0,49 g; 1,5 mmol) byl přidán za laboratorní teploty k roztoku methyl 2,3,4-tri—O~ acetyl-D-glukopyranuronátu (5,0 g; 15 mmol) a trichloracetonitrilu (3,75 ml; 37,4 mmol) v CH₂C1₂ (48 ml) a směs byla míchána přes noc. Vzniklý hnědý roztok byl přefiltrován přes bavlněnou zátku, filtrát byl promyt vodou, sušen Na₃SO₄ a zahuštěn. Zbytek byl rozpuštěn v EtOAC a zakoncentrován s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografícký sloupec připravený ve směsi 30% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí a odebrány pouze nejčistší frakce s výtěžkem 4,35 g (61 %) látky ve formě skla.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 8,74 (1H, s); 6,65 (1H, d, J = 3,7 Hz); 5,64 (1H, t, J = 9,8 Hz); 5,27 (1H, t, J = 9,5 Hz); 5,15 (1H, dd, J = 3,6; 10 Hz); 4,50 (1H, d, J = 10,1 Hz); 3,76 (3H, s); 2,06 (6H, s); 2,02 (3H, s).

Analogicky byly připraveny

-18CZ 293957 B6

Příprava B2

2,3,6-Tri-(9-acetyl-4-(9-(2,3,4,6-tetra-C>-acetyl-B-D-glukopyranosyl)-a-D-glukopyranosyll-(2,2,2-trichloracetimidát

NMR (400 MHz, CDC1₃) 8,66 (1H, s); 6,49 (1H, d, J = 3,7 Hz); 5,53 (1H, t, J = 10 Hz); 5,12 (3H, m); 4,94 (1H, t, J = 8,2Hz); 4,53 (2H, m); 4,40 (1H, dd, J = 4,2; 12,6 Hz); 4,12 (2H, m); 4,05 (1H, dd, J = 2,1; 12,5 Hz); 3,85 (1H, d, J = 9,4 Hz); 3,67 (1H, m); 2,12 (3H, s); 2,10 (3H, s); 2,05 (3H, s); 2,04 (3H, s); 2,02 (3H, s); 2,011 (3H, s); 2,00 (3H, s).

Příprava B3

2,3,4,6-Tetra-0-acetyl-a-D-glukopyranosyl-l-(2,2,2-trichloracetimidát

NMR (400 MHz, CDC1₃) 8,70 (1H, s); 6,57 (1H, d, J = 3,8 Hz); 5,57 (1H, t, J = 9,8 Hz); 5,19 (1H, t, J = 9,8 Hz); 5,14 (1H, dd, J = 3,7; 10,2 Hz); 4,29 (1H, dd, J = 4; 12,2 Hz); 4,13 (1H, m); 2,09 (3H, s); 2,06 (3H, s); 2,04 (3H, s); 2,03 (3H, s); MS(Elektrospray): 509 (M+NH₄)

Příklad 1 l-(7-[4-[ Trans~(3R, 45)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-4-fluorfenyl)propyl]]-4azetidinyl]fenyl]-B-D-glukuronová kyselina

Krokl:

Methylester 2,3,4-tri-O-acetyl-l-<9-[4-[íra«5-(3J?,4ó'-3-[3-[(5)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-4-azetidinyl]fenyl]-P-D-glukopyranuronové kyseliny

BF₃.etherát (0,091 ml; 0,74 mmol) byl přidán při -25 °C k roztoku sloučeniny z přípravy A (3,33 g; 7,38 mmol) a sloučeniny z přípravy B (4,24 g; 8,86 mmol) v CH₂C1₂ (74 ml) a reakční směs byla udržována při teplotě -20 °C 2 h. Během dalších 2 h teplota vystoupila na 10 °C. Reakční směs byla zředěna nasyceným NH4C1, EtOAc, organická část promyta nasyceným NH4CI, vodou a solným roztokem, sušena bezvodým Na₂SO₄ a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 40% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna rovněž zmíněnou směsí s výtěžkem 5,39g (95 %) látky ve formě pěny.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,26 (4H, m); 7,21 (2H, m); 7,01 (4H, m); 6,93 (2H, t, J = 8,4 Hz); 5,69 (1H, t, J = 6,7 Hz); 5,34 (2H, m); 5,29 (1H, m); 5,15 (1H, d, J = 7,2 Hz); 4,56 (1H, d, J = 2,1 Hz); 4,17 (1H, m); 3,73 (3H, s); 3,02 (1H, dt, J = 7,6; 2,3 Hz); 2,07 (14H, m); 1,85 (2H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃9H₄₀NOi3F₂, 768,2468; nalezeno 768,2460.

Krok 2:

Produkt kroku 1 (5,08 g; 6,98 mmol) byl rozpuštěn ve směsi CH₂OH (127 ml) a triethylaminu (Et₃N) (127 ml) při laboratorní teplotě. Přikapávačkou byla pomalu přidána voda (445 ml) během 10 min, aby vznikající roztok zůstával homogenní, světle žlutý roztok byl míchán přes noc. Aliquot reakční směsi ve zkumavce byl zředěn 1 mol.l'¹ HC1 a EtOAc a v organické vrstvě monitorováno vymizení výchozího materiálu dle TLC (5% kyselina octová (HOAc)/20% CH3OH/75% CH2C12). CH3OH a Et3N byly odstraněny na rotační vakuové odparce, zbývající roztok okyselen 1 mol.l’¹ HC1, zředěn EtOAc a extrahován EtOAc. Organické extrakty byly spojeny, promyty 1 mol.l'¹ HC1, vodou a solným roztokem, sušeny bezvodým Na2SO₄ a odpařeny do bílé pevné látky s výtěžkem 3,82 (93 %). Odparek byl rozpuštěn V CH₂C1₂ a zakoncentrován

-19CZ 293957 B6 s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografícký sloupec připravený ve směsi 15% CH₃OH/CH₂C1₂. Eluce byla prováděna směsí (5%HOAc/20%CH₃OH/75%CH₂Cl₂). Frakce obsahující titulní sloučeninu byly spojeny, kodestilovány s toluenem (3x) a CH₂OH (5x). Výsledná pevná látka byla sušena ve vakuu při 60 °C k odstranění zbývajících rozpouštědel s výtěžkem 2,6 g (64 %) titulní sloučeniny ve formě bílé pevné látky.

NMR (400 MHz, CDCI3) 7,29 (6H, m); 7,09 (1H, d, J = 8,6 Hz); 6,70 (4H, m); 4,96 (1H, m); 4,80 (1H, d, J = 2,0 Hz); 4,59 (1H, m); 3,97 (1H, d, J = 9,6 Hz); 3,59 (1H, m); 3,49 (3H, m); 3,09 (1H, m); 1,86 (4H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C3oH₃oN0₉F₂, 586,1889; nalezeno 586,1883.

Příklad IA l-0-[4-[7ra«5-(31?,4₁S)-l-(4-jodfenyl)-2-oxo-2-[3-[(>S)-hydroxy-4-fluorfenyl)propyl))-4azetidinyl)fenyl)-p-D-glukuronová kyselina l-(4-Jodfenyl)-3(7?)-[3(>S)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl)]-4(5)-(4-hydroxyfenyl)-2-azetidinon a produkt přípravy B se nechaly reagovat dle postupu příkladu 1 za vzniku titulní sloučeniny. Teplota tání 135-137 °C; MS (FAB) vypočteno pro C₃₀H₂₉FINO₉ NaCI m/z = 751,05; nalezeno m/z = 751,2.

Příklad 2 l-O-[4-[7ran5-(3J?,45)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(S)-hydroxy-4-fluorfenyl)propyl])-4azetidinyl]fenyl]-3-O-(3-D-glukopyranosyl)-[3-D-glukopyranóza

Krok 1:

2,3,6-Tri-O-acetyl-4-(7-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-P-D-glukopyranosyl)-l-O-[4-[/raws-(3/?,45j-3-[3(ó)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4—fluorfenyl)-2-oxo-4—azetidinyljfenylj-βD-glukopyran

Stejně jako v příkladu 1, krok 1 se nechala reagovat sloučenina z přípravy A a sloučenina z přípravy B2 za vzniku titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,23 (6H, m); 6,97 (6H, m); 5,69 (1H, t, J = 6,6Hz); 5,26 (1H, t, J = 9,1 Hz); 5,11 (4H, m); 4,95 (1H, t, J = 8,2 Hz); 4,54 (3H, m); 4,39 (1H, dd, J = 4,3; 12,5 Hz); 4,06 (2H, m); 3,87 (1H, t, J = 9,5 Hz); 3,75 (1H, m); 3,68 (1H, m); 3,02 (1H, dt, J = 2,1; 7,6 Hz); 2,06 (26H, m); 1,85 (2H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+Na C₅₂H₅7NO₂iF₂Na, 1092,3289; nalezeno 1092,3308.

Krok 2:

Stejným postupem jako v příkladu 1, krok 2 se nechal reagovat produkt kroku 1 za vzniku titulní sloučeniny příkladu 2.

NMR (400 MHz, CD₃OD) 7,29 (6H; m); 7,10 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,01 (4H, m); 4,96 (1H, pod CD3OD); 4,81 (1H, d, J = 2,2Hz); 4,60 (1H, m); 4,48 (1H, d, J = 7,9Hz); 3,88 (3H, m); 3,62 (4H, m); 3,51 (1H, d, J = 8,9 Hz); 3,34 (2H, m); 3,24 (1H, t, J = 8,8Hz); 3,08 (1H, m); 1,88 (7H, m). MS (FAB): 756 (M+Na, 70); 734 (M+, 100), 716 (716,20).

-20CZ 293957 B6

Příklad 3 l-O-[4-[7’rawí-(3J?,45)-3-[3(5)-hydroxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-4azetidinyl]fenyl]-p-D-glukopyranóza

Krok 1:

2,3,4,5-T etra-O-acety 1-1 -O-[4-[rra/M-(37?,45)-3-[3 (5)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-1 (4-fluorfenyl)-2-oxo-4-azetid inyl] feny 1 ]—β—E>—gl ukopyran

Stejně jako v příkladu 1, krok 1 se nechala reagovat sloučenina z přípravy A a sloučenina z přípravy B3 za vzniku titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,26 (4H, m); 7,20 (2H, m); 7,01 (4H, m); 6,93 (2H, t, J = 8,5 Hz); 5,69 (1H, t, J = 6,5 Hz); 5,29 (2H, m); 5,18 (1H, t, J = 9,7 Hz); 5,09 (1H, d, J = 7,3 Hz); 4,56 (1H, d, J = 2,2 Hz); 4,29 (1H, dd, J = 5,2; 12,2 Hz); 4,17 (1H, dd, J = 2,2; 12,2 Hz); 3,85 (1H, m); 3,03 (1H; dt, J = 2,1; 7,5 Hz); 2,06 (17H, m); 1,85 (2H, m); HRMS [FAB) vypočteno pro M+Na C₄oH4iNO|₃F₂Na, 804,2444; nalezeno 804,2432.

Krok 2:

Stejným postupem jako v příkladu 1, krok 2 se nechal reagovat produkt kroku 1 za vzniku titulní sloučeniny příkladu 3.

NMR (400 MHz, CD₃OD) 7,29 (6H, m); 7,11 (2H, d, J = 8,8 Hz); 6,98 (4H, m); 4,89 (1H, pod CD₃OD); 4,80 (1H, d, J = 2,2 Hz); 4,60 (1H, m); 3,88 (1H, dd, J = 2,0; 12,0 Hz); 3,68 (1H, dd, J = 5,4; 12,0 Hz); 3,41 (3H, m); 3,08 (1H, m); 1,86 (4H, m). MS (FAB): 572 (M+H, 40); 392 (100).

Příklad 4

Methylester 1 -O-[4-[/raw5-(3 R,4S)~ 1 -(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-4-fluorfeny 1)propyl)]-4-azetidinyl]fenyl]-p-D-glukuronové kyseliny

KCN (0,028 g; 0,43 mmol) byl přidán za laboratorní teploty k roztoku produktu příkladu 1, krok 1 (0,312 g; 0,43 mmol) v CH₃OH (5 ml) a směs byla míchána přes noc. Průběh reakce byl monitorován TLC [10% CH₃OH/CH₂C1₂); reakční směs byla zahřívána na 40 °C, 2,5 h. Reakční směs byla ochlazena na laboratorní teplotu a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 5% CH₃OH/CH₂C1₂. Eluce byla prováděna směsí 5% CH₃OH/CH₂C1₂. Nejčistší frakce byly spojeny s výtěžkem 0,116 g titulní sloučeniny.

NMR (400 MHz, CDC1₃/CD₃OD) 7,16 (6H, m); 6,95 (4H, m); 6,86 (2H, t, J = 8,6 Hz); 4,83 (1H, d, J = 7,6 Hz); 4,56 (1H, t, J = 6,0 Hz); 4,55 (1H; d, J = 2,1 Hz); 3,90 (1H, d, J = 9,8 Hz); 3,73 (3H, s); 3,67 (1H, t, J = 9,1 Hz); 3,51 (1H, m); 3,46 (1H, t, J = 9,2Hz); 3,30 (1H, s); 2,98 (1H, m); 1,80 (4H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃iH₃₂NO₉F₂, 600,2045; nalezeno 600,2049.

-21 CZ 293957 B6

Příklad 5

Methylester l-0-[4-[trans-(37ř,4₁S)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-[3-fenyl)propyl]-4-azetidiny 1] fenyl]-[3-D-glukuronové kysel iny

Krokl:

Methylester 2,3,4-tri-C)-acetyl-l-C>-[4-[írans-(3Á,4S)-3-[3-[(S)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-4-azetidinyl]fenyl]-|3-D-glukopyranuronové kyseliny

Trifenylfosfín (0,19 g; 0,73 mmol) byl přidán při 0°C do roztoku l,l’-(azodikarbonyl)dipiperidinu (0,18 g; 0,72 mmol) v THF (3 ml). Po 10 min byl přidán (37?,4ó)-4-(4-hydroxyfenyl)-l-(4-methoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinon (0,2 g; 0,52 mmol) a poté 2,3,4-tri-O-acetyl-D-glukopyranuronát (0,21 g; 0,62 mmol). Teplota reakční směsi přes noc vystoupila na laboratorní teplotu. Reakční směs byla zahuštěna a zakoncentrována s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografický sloupec připravený ve směsi 30% EtOAc/hexan. Eluce byla prováděna směsí 30-50% EtOAc/hexan s výtěžkem 0,198 g materiálu, který byl dále chromatografován na silikagelu eluční soustavou 20% CH3OH/CH2CI2 s výtěžkem 0,074 g titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDCI3) 7,27 (4H, m); 7,17 (5H, m); 6,98 (2H, J = 8,5 Hz); 6,77 (2H, m); 5,30 (3H, m); 5,13 (1H, d, J = 7,3 Hz); 4,56 (1H, d, J= 1,9 Hz); 4,17 (1H, m); 3,74 (3H, s); 3,73 (3H, s); 3,04 (1H, m); 2,64 (1H, t, J = 7,6 Hz); 2,05 (9H, m); 1,97 (1H, m); 1,82 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C3_gH4₂NOi₂, 704,2707; nalezeno 704,2696.

Krok 2:

Produkt kroku 1 se nechal reagovat podle postupu příkladu 4 za vzniku titulní sloučeniny.

NMR (400 MHz, CDCI3) 7,27 (4H, m); 7,17 (5H, m); 7,04 (2H, J = 8,6Hz); 6,75 (2H, J = 9,1 Hz); 4,90 (1H, d, J = 7,0 Hz); 4,55 (1H, d, J = 1,8 Hz); 3,98 (1H, d, J = 9,7 Hz); 3,88 (1H, t, J = 8,6 Hz); 3,76 (8H, m); 3,03 (1H, m); 2,63 (2H, t, J = 6,7 Hz); 1,95 (1H, m); 1,81 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C32H36NO9, 578,2390; nalezeno 578,2379.

Příklad 6

Methylester l-O-[4-[7rans-(37?,4S)-l-(4-benzoyl)fenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]-P-D-glukuronové kyseliny

Krokl:

Methylester 2,3,4-tri-O-acetyl-l-í>-[4-[/ran5-(3J?,4₁S)-l-(4-(benzoyl)fenyl)-2-oxo-3-(3fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]-j3-D-glukuronové kyseliny

Stejným postupem jako v příkladu 5, krok 1 se nechal reagovat (3J?,4S)-l-(4-benzoylfenyl)-4(4-hydroxyfenyl)-3-(fenylpropyl)-2-azetidinon a methyl-2,3,4-tri-O-acetyl-D-glukopyranuronát za vzniku titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDCI3) 7,73 (4H, m); 7,57 (1H, t, J = 7,0 Hz); 7,46 (2H, t, J = 8,0 Hz); 7,30 (6H, m); 7,21 (1H, d, J = 7,1 Hz); 7,16 (2H, d, J = 8,0 Hz); 7,01 (2H, d, J = 8,5 Hz); 5,31 (3H, m); 5,15 (1H, d, J = 7,3 Hz); 4,67 (1H, d, J = 2,2 Hz); 4,17 (1H, dd, J = 2,7; 6,7 Hz); 3,73 (3H, s); 3,14 (1H, m); 2,66 (2H, t, J = 7,4 Hz); 2,06 (9H, m); 1,98 (1H, m); 1,85 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C44H44NO12, 778,2864; nalezeno 778,2849.

-22CZ 293957 B6

Krok 2:

Stejným postupem jako v příkladu 4 se nechal reagovat produkt kroku 1 za vzniku titulní sloučeniny.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,72 (2H, překrývající se d, J = 8,6; 7,6 Hz); 7,36 (1H, t, J = 7,6 Hz); 7,45 (2H, t, J = 7,7 Hz); 7,30 (6H, m); 7,20 (1H, d, J = 7,0 Hz); 7,16 (2H, d, J = 7,6 Hz); 7,08 (2H, d, J = 8,6 Hz); 4,93 (1H, d, J = 7,0 Hz); 4,67 (1H, dd, J = 2,1 Hz); 3,99 (1H, d, J = 9,8 Hz); 3,88 (1H, t, J = 8,6 Hz); 3,81 (3H, s); 3,73 (2H, m); 3,14 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,6 Hz); 1,98 (1H, m); 1,84 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃₈H_3gNC>9, 652,2547; nalezeno 652,2528.

Příklad 7 l-O-[4-[7>aM5-(3J?,4₁S)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]β-D-glukopyranóza

Krokl:

l-O-[4-[7rans-(3R, 45)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenylpropyl)-4-azetidinyl]fenyl]-

2,3,4,6-tetra-(9-(fenylmethyl)-β-D-glukopyranóza

A-tributylfosfin (1,45 ml; 5,81 mmol) byl přidán při 0 °C do roztoku l,l’-(azodikarbonyl)dipiperidinu (1,47 g; 5,81 mmol) v THF (30 ml). Po 5 min byl přidán (3J?,45)-4-(4-hydroxyfenyl)-l-(4-methoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinon (1,5 g; 3,87 mmol) a poté 2,3,4,6tetra-O-benzyl-D-glukopyranóza (2,72 g; 5,03 mmol). Reakční směs zhoustla a k usnadnění míchání byl přidán ještě THF (30 ml); teplota reakční směsi přes noc vystoupila na laboratorní teplotu. Reakční směs byla přefiltrována přes celit, filtrační koláč byl promyt EtOAc a filtrát zakoncentrován s dostatečným množstvím silikagelu tak, aby vznikl sypký prášek. Připravený silikagelový prášek byl nanesen na chromatografícký sloupec připravený ve směsi 5% EtOAc/toluen. Eluce byla prováděna stejnou eluční směsí s výtěžkem 3,57 g (100%) titulní sloučeniny kroku 1, ve formě hustého sirupu.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,16 (19H, m); 7,19 (10H, m); 7,04 (2H, d, J = 8,7 Hz); 6,76 (2H, d, J = 9,2 Hz); 4,98 (3H, m); 4,83 (3H, m); 4,55 (4H, m); 3,70 (9H, m); 3,05 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,3 Hz); 1,96 (1H, m); 1,83 (1H, m). MS (FAB): 910(M+, 55), 568 (40), 478 (100), 386 (55).

Krok 2:

Produkt kroku 1 (0,20 g; 0,35 mmol) byl rozpuštěn v CH₃OH (4,5 ml); roztok zředěn EtOAc (4,5 ml) a probublán dusíkem. Do směsi byl přidán Pd(OH)₂/C (0,35 g), vzniklá směs byla probublána H₂ (3x) a míchána přes noc v atmosféře H₂. Směs byla přefiltrována přes celit, filtrační koláč promyt EtOAc a filtrát byl odpařen do čiré pěny (0,161 g, 83 % surový produkt). Surový produkt byl chromatografován na silikagelu v eluční soustavě 5% CH₃OH/EtOAc s výtěžkem 0,127 g (66 %) titulní sloučeniny jako bílého prášku.

NMR (400 MHz, CD₃OD) 7,18 (11H, m); 6,78 (2H, d, J = 8,9 Hz); 4,88 (1H, částečně překryt CD₃OD); 4,72 (1H, d, J = 1,2 Hz); 3,88 (1H, d, J = 11,7 Hz); 3,70 (4H, m); 3,41 (4H, m); 3,03 (1H, m); 2,60 (2H, t, J = 7,0 Hz); 1,79 (4H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃₁H₃₆NO₈, 550,2441; nalezeno 500,2424.

-23 CZ 293957 B6

Příklad 8 l-0-[4-[7’raws-(3J?,4>S)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-2-(3-fenylpropyl)-4-azetidinyl]fenyl]-pD-glukuronová kyselina

Krok 1:

Stejným postupem jako v příkladu 7, krok 1 se nechal reagovat (3J?,45)-4-(4-hydroxyfenyl)-l(4-methoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinon a benzyl-2,3,4-tri-C)-benzyl-D-glukopyranuronát za vzniku titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,22 (29H, m); 7,01 (2H, d, J = 8,7 Hz); 6,77 (2H, d, J = 9,2 Hz); 5,15 (2H, app.d, J = 3,8 Hz); 5,01 (1H, d, J = 7,2 Hz); 4,97 (1H, d, J = 11 Hz); 4,80 (2H, d, J = 11 Hz); 4,74 (1H, d, J= 10,7 Hz); 4,56 (1H, d, J = 2,2Hz); 4,50 (1H, d, J= 10,7 Hz); 4,04 (1H, d, J = 9,6 Hz); 3,93 (1H, t, J = 8,6 Hz); 3,73 (5H, m); 3,05 (1H, m); 2,65 (2H, t, J = 7,6 Hz); 1,96 (1H, m); 1,83 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C59H58NO9, 924,4112; nalezeno 924,4119.

Krok 2:

Stejným postupem jako v příkladu 7, krok 2 se nechal reagovat produkt kroku 1 za vzniku titulní sloučeniny příkladu 8.

NMR (400 MHz, CD₃OD) 7,31 (2H, d, J = 8,9 Hz); 7,21 (7H, m); 7,09 (2H, d, J = 8,7 Hz); 7,81 (2H, d, J = 8,9 Hz); 4,97 (1H, dd, J = 1,9; 5,5 Hz); 4,76 (1H, d, J = 2,0Hz); 3,97 (1H, d, J = 9,7 Hz); 3,72 (3H, s); 3,60 (1H, m); 3,49 (2H, m); 3,08 (1H, m); 2,64 (2H, t, J = 7,2 Hz); 1,83 (4H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃]H₃4NO9, 564,2234; nalezeno 564,2242.

Příklad 9

Methyl-6-0-[4-[řraMs-[3Jř,4S)-l-(4-methoxyfenyl}-2-oxo-3-(3-fenylpropyl)-4-azetidinyl)fenyl]-a-D-glukopyranosid

Krokl:

l-Methyl-2,3,4~č>-benzyl-6-O-[4-(/rans-(3J?,45)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenylpropyl)-4-azetidinyl]fenyl]-oi-D-glukopyranosid

Stejným postupem jako v příkladu 7, krok 1 se nechal reagovat (37?,45)-4-[4-hydroxyfenyl)-l(4-methoxyfenyl)-3-(3-fenylpropyl)-2-azetidinon a methyl 2,3,4-tri-O-benzyl-D-glukopyranosid za vzniku titulní sloučeniny kroku 1.

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,26 (24H, m); 6,85 (2H, d, J = 8,6 Hz); 6,74 (2H, d, J = 9 Hz); 5,01 (2H, d, J= 10,7 Hz); 4,86 (1H, d, J= 11,0 Hz); 4,85 (1H, d, J= 10,7 Hz); 4,84 (1H, d, J = 12,1 Hz); 4,69 (1H, d, J = 12,1 Hz); 4,63 (1H, d, J = 3,6 Hz); 4,54 (1H, d, J = 2,3 Hz); 4,51 (1H, d, J = 11,0 Hz); 4,09 (1H, d, J = 2,8 Hz); 4,03 (1H, t, J = 9,6 Hz); 3,90 (1H, t, J = 10,1 Hz); 3,72 (3H, s); 3,60 (1H, dd, J = 3,6; 9,6 Hz); 3,38 (3H, s); 3,06 (1H, m); 2,64 (2H, t, J = 7,6 Hz); 1,97 (1H, m); 1,83 (3H, m).

Krok 2:

Stejným postupem jako v příkladu 7, krok 2 se nechal reagovat produkt kroku 1 za vzniku titulní sloučeniny příkladu 9.

-24CZ 293957 B6

NMR (400 MHz, CDC1₃) 7,22 (9H, m); 6,94 (2H, d, J = 8,6 Hz); 6,76 (2H, d, J = 8,9 Hz); 4,81 (1H, d, J = 3,9 Hz); 4,54 (1H, d, J = 2,2 Hz); 4,22 (2H, m); 3,97 (1H, m); 3,71 (5H, m); 3,56 (1H, dd, J = 3,9; 9,1 Hz); 3,44 (3H, s); 3,06 (1H, m); 2,64 (2H, d, J = 7,4Hz); 1,91 (1H, m); 1,82 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃₂H₃₈NO₈, 564,2597; nalezeno 564,2578.

Příklad 10 l-0-[4-[7’raMs-(3J?,4₁S)-l-(4-benzoyl)fenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]β-D-glukuronová kyselina

LiOH (0,6 ml; 0,6 mmol; 1 mol.1'¹) byl přidán za laboratorní teploty k produktu příkladu 6 (0,064 g; 0,1 mmol) v THF (2 ml). Po 50 min byla reakční směs zředěna EtOAc, rozložena HC1 (1 mol.1'¹), organická fáze promyta HC1 (1 mol.1'¹), solným roztokem, sušena Na₂SO₄ a zahuštěna do bílé pěny 0,60 g (97 %).

NMR (400 MHz, CD₃OD) 7,67 (4H, m); 7,60 (1H, m); 7,48 (3H, m); 7,36 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,34 (2H, d, J = 8,8 Hz); 7,23 (2H, m); 7,14 (2H, d, J = 7,5 Hz); 7,10 (2H, d, J = 8,7 Hz); 4,97 (1H, m); 4,87 (1H, d, J = 2,2Hz); 3,97 (1H, d, J = 9,7Hz); 3,60 (1H, m); 3,42 (2H, m); 3,17 (1H, m); 2,63 (2H, t, J = 7,4 Hz); 1,89 (1H, m); 1,81 (3H, m). HRMS (FAB) vypočteno pro M+H C₃₇H₃₆NO₉,638,2390; nalezeno 638,2377.

Příklad 11 l-ř?-[4-[7rařu-(31ř,4S)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(₎S)-hydroxy-4-jodfenyl)propyl]]-4azetidinyl]fenyl]-3~D-glukuronová kyselina

Krok 1:

1- (4-fluorfenyl)-3(7?)-[3(ó)-acetyloxy-3-(4-bromfenyl)propyl)]-4(S)-hydroxyfenyl)-2-azetidinon se nechal kondenzovat s produktem přípravy B a BF₃.etherátem podle postupu příkladu 1. K roztoku vzniklého tetraacetátu (250 mg; 0,30 mmol) v CH₃OH (2 ml) při 0 °C byl přidán KCN (10 mg; 0,15 mmol) a směs byla míchána při laboratorní teplotě 2 h, pak při 45 °C 4,5 h. Reakční směs byla ochlazena a rozdělena mezi vodu (20 ml) a EtOAC (30 ml). EtOAc vrstva byla promyta vodou a solným roztokem, sušena (Na₂SO₄) a zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl naadsorbován na silikagel a chromatografován na silikagelu (25 g) gradientovou eluční směsí

2- 10% CH₃OH v CH₂C1₂, s výtěžkem 84 mg (43 %) arylbromidu jako pevné látky.

Krok 2:

K roztoku produktu kroku 2 (25 mg; 0,038 mmol) v odplyněném DMF (0,4 ml) byl přidán hexabutyldicín (220 mg; 38 mmol) a tetrakis trifenylfosfin palladium (4,4 mg; 0,0038 mmol) a směs byla zahřívána na 95 °C pod argonem 5 h. Reakční směs byla ochlazena, zahuštěna ve vakuu, zbytek naadsorbován přímo na silikagel a chromatografován na silikagelu (4 g) gradientovou eluční směsí 0-10% CH₃OH v CH₂C1₂. Frakce s produktem byly ještě jednou chromatografovány stejným postupem a zahuštěny s výtěžkem 7,4 mg (22 %) očekávaného aryl stannanu jako voskovité pevné látky.

Krok 3:

K roztoku produktu kroku 2 (11,8 mg; 0,0135 mmol) vCH₃OH (2 ml) obsahujícím fosfátový pufr o pH 5,8 (0,3 ml) byl přidán 1 mol.1'¹ roztok Nal ve vodě (14 μΐ; 0,014 mmol). Ke směsi byly přidány 68 iodobeads^R (37 mmol) a směs jemně protřepávána 1,5 h při laboratorní teplotě. Iodobeads byly odfiltrovány, promyty EtOH a malým množstvím etheru. Filtrát byl zahuštěn

-25CZ 293957 B6 a zbytek roztřepán mezi EtOAc a 10% vodný Na₂SO₃, EtOAc vrstva byla sušena (MgSO₄) a odpařena ve vakuu. Zbytek byl naadsorbován na silikagel a chromatografován na silikagelu (2 g) gradientovou eluční směsí 0-6% CH₃OH v CH2CI2. Frakce s produktem byly odpařeny s výtěžkem 6,1 mg (64%) methylesteru titulní sloučeniny jako pevné bílé látky.

Krok 4:

Roztok produktu kroku 3 (6,1 mg; 8,6 mmol) ve směsi vody (0,7 ml), triethylaminu (0,2 ml) aCH₃OH (0,1 ml) byl míchán při laboratorní teplotě 30 min. Směs byla odpařena ve vakuu s výtěžkem 5 mg (83%) titulní sloučeniny jako pevné bílé látky. Teplota tání 157-159 °C. MS (FAB) vypočteno pro C30H30FINO9, m/z = 694,1; nalezeno m/z = 694,1.

Následující příklady popisují některé dávkové formy předkládaného vynálezu. Ve všech příkladech znamená výraz „účinná sloučenina“ sloučenina obecného vzorce I.

Příklad A

Tablety

č.	složka	mg/tableta	mg/tableta
1	účinná látka	100	500
2	laktóza USP	122	113
3	obilný škrob*	30	40
4	obilný škrob**	45	40
5	magnézium stearát	3	7
	celkem	300	700

* potravinářská čistota, 10% pasta v čisté vodě ** potravinářská čistota.

Postup přípravy

Složky č. 1 a č. 2 byly míchány ve vhodném mixéru 10-15 min. Směs byla granulována se složkou č. 3. Vlhké granule lze, pokud je to žádoucí, protlačit hrubým sítem (např. 0,63 cm). Dále byly vlhké granule sušeny. Suché granule lze, pokud je to žádoucí, opět prosít. Dále byly granule míchány se složkou č.5 1-3 min. Výsledná směs byla komprimována ve vhodném tabletovacím zařízení na tablety příslušné velikosti a hmotnosti.

Příklad B

Kapsle

č.	složka	mg/kapsle	mg/kapsle
1	účinná látka	100	500
2	laktóza USP	106	123
3	obilný škrob*	40	70
4	magnézium stearát NF	4	7
	celkem	250	700

potravinářská čistota.

-26CZ 293957 B6

Postup přípravy

Složky č. 1 a č. 2 byly míchány ve vhodném míchadle 10-15 min. Ke směsi byla přidána složka č. 4 a směs mixována 1-3 min. Směs byla rozplněna do tvrdých želatinových kapslí ve vhodném zařízení.

Přípravky obsahující inhibitor biosyntézy cholesterolu jsou v oblasti techniky známé. Lze předpokládat, že na základě znalostí dosavadního stavu techniky lze modifikovat výše popsanou přípravu dávkové formy obsahující substituované azetidinonové sloučeniny na přípravu přípravku obsahujícího dvě účinné složky.

Účinnost sloučenin obecného vzorce I in vivo byla stanovena následujícím postupem.

Test účinnosti hypolipidemických sloučenin in vivo na modelu hyperlipidemického křečka

Křečci byli rozděleni do skupin po šesti a krmeni kontrolovanou cholesterolovou dietou (Purina Chow #5001 obsahující 0,5 % cholesterolu) 7 dní. Příjem potravy byl monitorován a stanovena expozice cholesterolu v přítomnosti testovaných sloučenin. Zvířata dostávala testovanou sloučeninu jednou denně od zahájení kontrolované diety. Jako perorální dávky byly podávány 0,2 ml samotného obilného oleje (kontrolní skupina), nebo roztoku (suspenze) testované sloučeniny v obilném oleji. Všechna skomírající zvířata i zvířata ve špatném fyzickém stavu byla usmrcena. Po 7 dnech byla testovaná zvířata uspána IM injekcí ketaminu a usmrcena dekapitací. Jejich krev byla odebrána do zkumavek Vacutainer™ s obsahem EDTA pro analýzu celkového množství cholesterolu a triglyceridů v plazmě, dále byla vyjmuta játra pro analýzu volného a esterifikovaného cholesterolu a triglyceridů v tkáni. Výsledky byly vyjádřeny jako procentuální snížení plazmatické hladiny cholesterolu a jatemí hladiny esterů cholesterolu proti kontrolním hladinám.

Výsledky uvedeného testu in vivo pro sloučeniny obecného vzorce I. Výsledky byly vyjádřeny jako procentuální změna (procentuální snížení plazmatické hladiny cholesterolu a jatemí hladiny esterů cholesterolu) proti kontrole, proto záporné hodnoty znamenají pozitivní účinek sloučeniny, tedy snižující hladinu cholesterolu. U racemických sloučenin obecného vzorce I nebo účinných diastereomerů nebo enantiomerů sloučenin obecného vzorce I vykazují dávky 3 až 10 mg/kg redukci jatemí hladiny esterů cholesterolu v rozmezí 0 až -98 %, zatímco dávky 0,01 až 1 mg/kg vykazují redukci jaterní hladiny esterů cholesterolu v rozmezí -19 až -94 %. Sloučeniny výhodně vykazují redukci jaterní hladiny esterů cholesterolu v rozmezí -50 až -98 % při dávkách 0,01 až 1 mg/kg.

Průmyslová využitelnost

Práce popisuje farmaceutické přípravky s hypocholesterolemickými účinky, využitelné při léčbě a prevenci aterosklerózy. Farmaceutické přípravky jako účinnou složku obsahují předkládané 2-azetidiny substituované cukernými zbytky a případně jako druhou účinnou složku inhibitor biosyntézy cholesterolu.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 2-Azetidinony, substituované cukernými zbytky, obecného vzorce I:

(I) nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, kde

R²⁶ jeHneboOG¹;

G a G¹ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující za předpokladu, že pokud R²⁶ je H nebo OH, pak G je jiné než H;

R, R’aR^b jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, -OH, halogen, -NH₂, azido, (C]-C6 alkoxyHCi-Ce alkoxy) nebo -W-R³⁰;

W je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující -NH-C(O)-, -O-C(Q)-, -O-C(O)-N(R³¹)-, -NH-C(O)-N(R³¹)- a -O-C(S)-N(R³¹)-;

R² a R⁶ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-C₆ alkyl, aryl a aryl(Ci-C₆ alkyl);

přičemž aryl je fenyl, naftyl, indenyl, tetrahydronaftyl nebo indanyl;

R³, R⁴, R⁵, R⁷, R^3a a R^4a jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, C]-Cé alkyl, aryl(C]-C₆alkyl), -C(O)(Ci-C₆ alkyl) a -C(O)aryl;

R³⁰ je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující R³²-substituované-T, R³²-substituovaný-T(Cj-Có alkyl), R³²-substituovaný-(C2-C4 alkenyl), R³²-substituovaný-(C|-C6 alkyl), R³²-substituovaný-(C3-C7 cykloalkyl) a R³²-substituovaný-(C3-C₇ cykloalkyl)(Ci-C6 alkyl);

-28CZ 293957 B6

R³¹ je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující H, C1-C4 alkyl;

T je nezávisle voleno ze skupiny zahrnující fenyl, furyl, thienyl, pyrrolyl, oxazolyl, izoxazolyl, thiazolyl, izothiazolyl, benzothiazolyl, thiadiazolyl, pyrazolyl, imidazolyl a pyridyl;

R³² je nezávisle voleno z jednoho až tří substituentů nezávisle volených ze skupiny zahrnující halogen, C1-C4 alkyl, -OH, fenoxy, -CF₃, -NO₂, Q-C4 alkoxy, methylendioxy, oxo, C1-C4 alkylsulfanyl, Cj-C₄ alkylsulfmyl, C,-C₄ alkylsulfonyl, -N(CH₃)₂, -0(0)-ΝΗ(0ι-0₄ alkyl), -C(O)-N(Ci -C₄ alkyl)₂, -C(O)-(Ci-C4 alkyl), -C(O)-(Ci-C4 alkoxy) a pyrrolidinylkarbonyl;

Ar¹ je aryl nebo aryl substituovaný R¹⁰;

Ar² je aryl nebo aryl substituovaný R¹¹;

Q je vazba, nebo s atomem uhlíku v poloze 3 azetidinonového kruhu tvoří spiroskupinu a

R¹ je voleno ze skupiny zahrnující

-(CH₂)_q-, kde q je 2 až 6 a v případě, že Q tvoříí spiro kruh je q 0 nebo 1;

-(CH₂)_e-E-(CH₂)_r, kde E je -0-, -C(O)-, fenylen, -NR²²— nebo -S(0)o-₂~, e je 0 až 5 za podmínky, že součet e a r je 1 až 6;

-C₂-C₆ alkendiyl; a

-(CH₂)r-V-(CH₂)g-, kde V je C₃-Ců cykloalkandiyl, f je 1 až 5 za podmínky že součet f a g je 1 až 6;

R¹² představuje

-CH-, _ CÍC1-C6 alkyl)-, -CF-, -C(OH)-, —C ( Ce H<-R^{2 3} )—, -N- nebo —⁺NO

R¹³ a R¹⁴ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -CH₂-, -CH^-Ce alkyl)-, -C(di(C]-C₆alkyl))-, -CH=CH a -C(Ci~C6 alkyl)=CH-; nebo R¹² spolu se sousední R¹³, nebo R¹² spolu se sousední R¹⁴ tvoří skupiny

-C =CH-29CZ 293957 B6 nebo —C =C(Ci-Ce alkyl)-:

a i b jsou nezávisle 0, 1, 2 nebo 3 za podmínky, že nejsou současně 0;

za podmínky, že pokud R¹³ je -CH=CH- nebo -C(Ci-C6 alkyl)=CH-, a je 1;

za podmínky, že pokud R¹⁴ je -CH=CH- nebo -C(C]-C₆ alkyI)=CH-, b je 1;

za podmínky, že pokud a je 2 nebo 3, jsou substituenty R¹³ stejné nebo odlišné;

za podmínky, že pokud b je 2 nebo 3, jsou substituenty R¹⁴ stejné nebo odlišné;

a pokud Q je vazba, R¹ také může být:

R^{1 5} _R17 _R15 _R15

III I

- M—Yd -C—Zh - . -Xm - ( c )s — Yn - ( C )t -Zp - nebo -Xj - ( C ) v ~Yk ~S (O)o - 2 - ;

M je -O-, -S-, -S(O)- nebo -S(O)₂-;

X, Y a Z jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -CH₂~, -CH(Ci-C₆ alkyl)-, -<(όί(^-<6 alkyl))-,

R¹⁰ a R¹¹ jsou nezávisle voleny ze skupiny jednoho až tři substituentů nezávisle volených ze

CONR^I9R²⁰, COR¹⁹, -SO2NR'⁹R²⁰, S(0)o.2R , -O(CH₂)i.₁₀-COOR, -OíCH^.jo-CONR^R²⁰, -(C,-C6 alkandiyl)-COOR¹⁹, -CH=CH-COOR¹⁹, -CF3, -CN, -NO₂ a halogen;

R¹⁵ a R¹⁷ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující -OR¹⁹, -O(CO)R¹⁹, -O(CO)OR²¹a-O(CO)NR¹⁹R²⁰;

R¹⁶ a R¹⁸ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-C₆ alkyl a aryl; nebo

R¹⁵ a R¹⁶ spolu tvoří =0, nebo R¹⁷ a R¹⁸ spolu představují =0;

d je 1,2 nebo 3;

h je 0,1,2, 3 nebo 4;

s je 0 nebo 1; t je 0 nebo 1; m, n a p jsou nezávisle 0 až 4 za podmínky, že nejméně jeden z indexů s nebo t je 1 a součet m, n, p, s a t je 1 až 6, za podmínky, že pokud p je 0 a t je 1, je součet m, s a η 1 až 5; a za podmínky, že pokud p je 0 a s je 1, je součet m, t a η 1 až 5;

v je 0 nebo 1;

j a k jsou nezávisle 1 až 5, za podmínky, že součet j, k a v je 1 až 5;

-30CZ 293957 B6 a pokud Q je vazba a R¹ je

R1 5

I

-Xj-(C)v-Yk-S(O)o-2I

R^{1 6}

Ar' lze také volit ze skupin pyridyl, izoxazolyl, furanyl, pyrrolyl, thienyl, imidazolyl, pyrazolyl, thiazolyl, pyrazinyl, pyrimidinyl nebo pyridazinyl;

R¹⁹ a R²⁰ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-Cň alkyl a aryl substituovaný Ci-C₆alkylem;

R²¹ je Ci-C₆ alkyl, aryl nebo aryl substituovaný R²⁴;

R²² je H, Cj-C₆ alkyl, aryl-fC^e alkyl), -C(O)R¹⁹ nebo -COOR¹⁹;

R²³ a R²⁴ jsou nezávisle 1 až 3 substituenty nezávisle volené ze skupiny zahrnující H, Ci-C₆alkyl, C,-C₆ alkoxy, -COOH, NO₂, -NR¹⁹R²⁰, -OH a halogen;

R²⁵ je H, -OH nebo Ci-C₆ alkoxy.
2. 2-Azetidinony podle nároku 1 obecného vzorce I, kde:

Ar* je fenyl nebo fenyl substituovaný halogenem;

Ar² je fenyl nebo fenyl substituovaný C]-C6 alkoxylem, fenyl substituovaný halogenem;

Q je vazba a R¹ je -Ci-C₆- alkandiyl;

Q s atomem uhlíku v poloze 3 azetidinonového kruhu tvoří spiroskupinu ^S Rll—(R¹³)_a (R¹⁴)b----kde R¹³ a R¹⁴ jsou každý ethylen, a a b jsou obě 1

R¹² je

I I

-CH- nebo -C(OH)5

Q je vazba a R¹ je -O(CH₂)-CH(OH)-;

Q je vazba a R¹ je -CH(OH)-(CH₂)₂-; nebo

Q je vazba a R¹ je -CH(OH)-(CH₂)-S(O)₀.₂-.

-31 CZ 293957 B6
3. 2-Azetidinony podle kteréhokoliv z nároků 1 nebo 2 obecného vzorce I, kde G a G¹ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, »

OR³ •>I OR^ q

OR⁷

OR³® kde:

R² a R⁶ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Cj-Có alkyl nebo benzyl;

R³, R⁴, R⁵ a R⁷ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, C]-C₆ alkyl, benzyl a acetyl;

R³, R^3a, R⁴ a R^4a jsou voleny ze skupiny zahrnující H, Cj-C₆ alkyl, benzyl a acetyl; a

R, R^a a R^b jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, -OH, halogen, -NH2, azid, (Ci-Ce alkoxy)-(Ci-C6 alkoxy) a -W-R³⁰, kde W je -O-C(O)- nebo -O-C(O)-NR³¹, R³¹ je H a R³⁰ je substituovaný C2-C6 alkyl, -C(O)-(Ci-C4 alkoxy)-(Ci-C6 alkyl), T nebo T-(Ci-C6 alkyl), kde T je substituované jedním nebo dvěma halogeny nebo (Ci-C₆)alkylovými skupinami.
4. 2-Azetidinony podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3 obecného vzorce I, kde R²⁶ je H nebo OH a G je voleno ze skupiny zahrnující

H, kde

R² a R⁶ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-Ce alkyl nebo benzyl;

R³, R⁴, R⁵ a R⁷ jsou nezávisle voleny ze skupiny zahrnující H, Ci-C₆ alkyl, benzyl a acetyl.
5. 2-Azetidinony, substituované cukernými zbytky podle nároku 1, kterými jsou methylester 2,3,4-tri-O-acetyl-l-O-[4-[/razz'>-(3Á,4>S)-3-[3-[(S)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-4-azetidinyl]fenyl]-p-D-glukopyranuronové kyseliny;

!-<>-[4-[rraws-(3/?,4₁S)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(ó)-hydroxy—4-fluorfenyl)propyl]]—4azetidinyl]fenyl]-p-D-glukuronová kyselina;

-32CZ 293957 B6 l-0-[4-[/rara-(3J?,45)-l-(4-jodfenyl-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-^l-fluorfenyl)propyl]]-4azetidinyl]fenyl]-p-D-glukuronová kyselina;

2,3,6-tri-0-acetyl-4-0-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-p-D-glukopyranosyl)-l-0-[4-[ZraM5-(37?,45)-3-[3(5)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-4-azetidinyl]-fenyl]β-D-glukopyran;

l-O-[4-[/raní-(37?, 45)-1-( 4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-4-fluorfenyl)propyl]]-4azetidinyl]fenyl]-3-0-(p-D-glukopyranosyl)-P-D-glukopyranóza;

2,3,4,5-tetra-0-acetyl-l-0-[4-[/ra»5-(3Á,45)-3-[3(5)-acetyloxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l(4-fluorfenyl)-2-oxo-4-azetidinyl]fenyl]-p-D-glukopyran;

l-0-[4-tra«5-(3Á,45)-3-[3-[(5)-hydroxy-3-(4-fluorfenyl)propyl-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-4azetidinyl]fenyl]-p~D-glukopyranóza;

methylester l-(7-[4-[Zrans-(3J?,45)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-4-fluorfenyl)propyl]]-4-azetidinyl]-fenyl]-p-D-glukopyranuronové kyseliny;

methylester l-O-[4-|7rúra-(37?,45)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl)-P-D-glukopyranuronové kyseliny;

methylester l-O-[4-[řra«5-(3Á,45)-1-( 4-(benzoyl)fenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]-P~D-glukopyranuronové kyseliny;

l-0-[4-[/raws-(3J?,4S)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]-PD-glukopyranóza;

l-O-[4-[/ra»5-(3A, 45)-1-( 4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]-pD-glukuronová kyselina;

l-methyl-6-<9-[4-[/ra«5-(3J?,45)-l-(4-methoxyfenyl)-2-oxo-3-(3-fenylpropyl)-4-azetidinyl)fenyl]-a-D-glukopyranosid;

l-0-[4-[/ra«5-(37?,45)-l-(4-(benzoyl)fenyl)-2-oxo-3-(3-fenyl)propyl]-4-azetidinyl]fenyl]p-D-glukuronová kyselina; a l-0-[4-[/rans-(3J?,45)-l-(4-fluorfenyl)-2-oxo-3-[3-[(5)-hydroxy-4-jodfenyl)propyl]]-4azetidinyl]fenyl]-p-D-glukuronová kyselina.
6. Farmaceutický přípravek na léčbu a prevenci aterosklerózy, nebo na snížení hladin cholesterolu, vyznačující se tím, že obsahuje 2-azetidinon podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 samotný, nebo v kombinaci s inhibitorem biosyntézy cholesterolu a farmaceuticky přijatelný nosič.
7. Způsob přípravy farmaceutického přípravku podle nároku 6, vyznačující se tím, že se smíchá 2-azetidinon podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 samotný, nebo v kombinaci s inhibitorem biosyntézy cholesterolu, s farmaceuticky přijatelným nosičem.
8. Použití 2-azetidinonu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 samotného, nebo v kombinaci s inhibitorem biosyntézy cholesterolu, pro přípravu léčiva určeného na léčbu a prevenci aterosklerózy, nebo na snížení hladin cholesterolu.

-33CZ 293957 B6
9. Kit obsahující v jednom balení odděleně adjustované farmaceutické přípravky pro kombinované použití při léčbě a prevenci aterosklerózy, nebo na snížení hladin cholesterolu, vyznačující se tím, že v oddělených obalech obsahuje účinné množství inhibitoru biosyntézy cholesterolu ve farmaceuticky přijatelném nosiči a účinné množství 2-azetidinonu podle 5 kteréhokoliv z nároků 1 až 5 ve farmaceuticky přijatelném nosiči.