CZ290935B6

CZ290935B6 - Opticky aktivní pyrrolopyridazinové deriváty, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek je obsahující

Info

Publication number: CZ290935B6
Application number: CZ20014505A
Authority: CZ
Inventors: Masahiko Hagihara; Nobuhiko Shibakawa; Keijí Matsunobu; Hiroshi Fujiwara; Keiichi Ito
Original assignee: Sankyo Company, Limited; Ube Industries, Ltd.
Priority date: 1999-06-15
Filing date: 2000-06-15
Publication date: 2002-11-13
Also published as: MXPA01013011A; IL147088A; NZ516194A; AU5426900A; TR200103685T2; AU757611B2; NO20016099D0; ES2198319T3; US6670360B2; EP1186607A1; DK1186607T3; BR0011666A; CZ20014505A3; DE60002860T2; PT1186607E; HUP0201434A2; HK1044341B; CA2375848A1; HK1044341A1; NO20016099L

Abstract

Opticky aktivn pyrrolopyridazinov² deriv t obecn ho vzorce I nebo jeho farmaceuticky p°ijateln s l, kde R.sup.1.n. je alkylov skupina, R.sup.2.n. a R.sup.3.n. jsou navz jem nez visl alkylov skupiny, R.sup.4.n. je p° padn substituovan arylov skupina, a A je imino skupina, atom kysl ku nebo atom s ry. Pyrrolopyridazinov deriv ty obecn ho vzorce I nebo jejich farmaceuticky p°ijateln soli vykazuj vynikaj c inhibici vylu ov n alude n kyseliny a vynikaj c ochranu alude n sliznice, jako i vynikaj c antibakteri ln · inek v i Helicobacter pyroli. Jsou to · inn l ky a p°edev m jsou · inn pro l bu nebo prevenci v°edovit ho onemocn n .\

Description

Tento vynález se týká opticky aktivních pyrrolopyridazinových derivátů obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.

Tento vynález se dále týká farmaceutických prostředků obsahujících opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl (výhodně prostředků pro prevenci nebo léčbu vředovitého onemocnění) jako aktivní složku.

Dále se tento vynález týká použití opticky pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu farmaceutického prostředku (výhodně prostředku pro prevenci nebo léčbu vředovitého onemocnění).

Dále se tento vynález týká metody prevence nebo léčby onemocnění (výhodně vředovitého onemocnění), která zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli horkokrevnému živočichovi (výhodně člověku), je-li takováto léčba potřebná.

Kromě toho se tento vynález dále týká způsobu přípravy opticky aktivních pyrrolopyridazinových derivátů obecného vzorce I ajejich farmaceuticky přijatelných solí.

Dosavadní stav techniky

Panuje názor, že nerovnováha mezi agresivními faktory a ochrannými faktory působícími na žaludeční sliznici indukuje peptický vřed. Agresivním faktorem je vylučování žaludeční kyseliny a potlačení vylučování žaludeční kyseliny se klinicky používaly anticholinergické léky, léky typu histamin H2-receptorových antagonistů jako je cimetidin a inhibitory protonové pumpy jako je omeprazol. Ačkoliv jsou tyto léky vynikajícími léčebnými činidly na vředovitá onemocnění, onemocnění se někdy po skončení léčby vrací. Nedávno bylo uveřejněno že za recidivu vředovitého onemocnění je zodpovědná Helicobacter pyroli. Dokonce byly určité pokusy použít inhibitor vylučování žaludeční kyseliny v kombinaci s antibakteriálním činidlem pro léčbu tohoto onemocnění.

Proto lze sloučeninu, která vykazuje účinnou inhibici vylučování žaludeční kyseliny, která poskytuje vynikající ochranu žaludeční sliznice, a která vykazuje silný antibakteriální účinek vůči Helicobacter pyroli, považovat za vynikající činidlo pro prevenci a léčbu žaludečního vředovitého onemocnění.

Některé pyrrolopyridazinové deriváty, které vykazují inhibici vylučování žaludeční kyseliny a chrání žaludeční sliznici jsou popsány ve WO 91/17 164, WO 92/06 979 a WO 93/08 190. Aktivita některých pyrroloridazinových derivátů vůči Helicobacter pyroli je také popsána v Japanese Patent Application Publication Hei 7 - 247 285.

Za účelem objevení sloučenin, které vykazují účinnou inhibici vylučování žaludeční kyseliny, které chrání žaludeční sliznici, a které vykazují silný antibakteriální účinek vůči Helicobacter pyroli, se dále dlouhou dobu pokračovalo ve výzkumu farmakologických aktivit pyrrolopyridazinových derivátů. Bylo prokázáno, že některé opticky aktivní pyrrolopyridazinové deriváty substituované frans-alkylcyklopropylmethylovou skupinou mají takovéto účinky a jsou kvalitnějším lékem než je odpovídající racemát.

-1 CZ 290935 B6

Podstata vynálezu

Dále se tento vynález týká použití opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli pro přípravu farmaceutických prostředků (výhodně prostředku pro prevenci nebo léčbu vředovitého onemocnění).

Dále se tento vynález týká metody pro prevenci nebo léčbu onemocnění (výhodně vředovitého onemocnění), která zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli horkokrevnému živočichovi (výhodně člověku), je-li takováto léčba potřebná.

Kromě toho se tento vynález týká také způsobu přípravy opticky aktivních pyrrolopyridazinových derivátů obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.

Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát tohoto vynálezu obecného vzorce I,

(l), kde,

R¹ jeC i-C₆ alkylová skupina,

3

R a R jsou navzájem nezávislé Ci-C₆ alkylové skupiny,

R⁴ je C₆-Cio arylová skupina, která je výhodně substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující C]-C₆ alkyl, halogenovaný Cj-Cé alkyl, Ci-Ců alkoxy skupinu, halogenovanou C]-C₆ alkoxy skupinu a halogen,

A je imino skupina, atom kyslíku nebo atom síry.

Ci-C₆ alkylovým zbytkem je u alkylových skupin v definicích R¹, R², R³ a R⁴ a u halogenované Ci-C6 alkylové skupiny, C]-C6 alkoxy skupiny a halogenované Cj-C6 alkoxy skupiny zahrnuté v definici R⁴ například methylová, ethylová, propylová, isopropylová, butylová, isobutylová, s-butylová, t-butylová, pentylová nebo hexylová skupina, výhodně C]-C6 alkylová skupina, výhodněji methylová nebo ethylová skupina a nej výhodněji methyl.

-2CZ 290935 B6

Atom halogenu zahrnutý v definici R⁴ je například atom fluoru, chloru, bromu, jodu, výhodně atom fluoru, chloru nebo bromu a výhodněji atom fluoru nebo chloru.

C₆-Cio arylová skupina v definici R⁴ je například fenylová nebo naftylová skupina, výhodně fenylová skupina. Počet substituentů arylové skupiny se pohybuje od 1 do 5, výhodně od 1 do 3, výhodněji 1 nebo 2 a nejvýhodněji je 1. C₆-Ci₀ arylová skupina je případně substituována jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující Ci-Cň alkyl, halogenovaný Ci-C₆ alkyl, Ci-C₆ alkoxy skupinu, halogenovanou Ci-C₆ alkoxy skupinu a halogen, což je výhodně například fenylová, methylfenylová, trifluormethylfenylová, methoxyfenylová, trifluormethoxyfenylová, difluorfenylová, chlorfluorfenylová, dichlorfenylová, trifluorfenylová, trichlorfenylová, naftylová, methylnaftylová, metoxynaftylová, fluomaftylová, chlomaftylová nebo bromnaftylová skupina, výhodněji fenylová, 4-methylfenylová, 4-(trifluormethyl)fenylová, 4-methoxyfenylová,

4-(trifluormethoxy)fenylová, 4-(difluormethoxy)fenylová, 2-, 3- nebo 4-fluorfenylová, 2-,

3- nebo 4-chlorfenylová, 4-bromfenylová, 2,4- nebo 2,6-difluorfenylová, 4-chlor-2-fluorfenylová, 2-chlor-4-fluorfenylová, 2,4- nebo 2,6-dichlorfenylová, 2,4,6-trifluorfenylová nebo

2,4,6-trichlorfenylová skupina, výhodněji 4-fluorfenylová, 4-chlorfenylová, 2,4-difluorfenylová, 4-chlor-2-fluorfenylová, 2-chlor-4-fluorfenylová nebo 2,4-dichlorfenylová skupina, nejvýhodněji 4-fluorfenylová nebo 4-chlorfenylová skupina.

A je výhodně atom kyslíku nebo atom síry, výhodněji atom kyslíku.

Mezi farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce I patří adiční sůl kyseliny jako je například sůl kyseliny halogenovodíkové jako je fluorvodík, chlorovodík, bromvodík a jodovodík, dále dusičnan, chloristan, síran, fosforečnan, uhličitan, dále C]-C₆ alkylsulfonát, který je případně substituován atomem (-my) fluoru jako je methansulfonát, trifluormethansulfonát, ethansulfonát, pentafluorethansulfonát, propansulfonát, butansulfonát, pentansulfonát a hexansulfonát, dále C₆-Ci₀ arylsulfonát jako je benzensulfonát a p-toluensulfonát, dále karboxylát jako je acetát, propionát, butyrát, benzoát, fumarát, maleát, sukcinát, citrát, vinan, oxalát a malonát, nebo dále sůl aminokyseliny jako je glutamát a aspartát, výhodně chlorovodík, síran nebo karboxylát, výhodněji chlorovodík.

Sloučenina obecného vzorce I tohoto vynálezu nebo jeho sůl existuje také ve formě hydrátu a rámec tohoto vynálezu tyto formy hydrátu zahrnuje.

Mezi výhodné sloučeniny obecného vzorce I tohoto vynálezu patří:

(1) sloučenina, kde R¹ je C1-C4 alkylová skupina, (2) výhodně sloučenina, kde R¹ je methylová skupina, (3) sloučenina, kde R² a R³ jsou navzájem nezávislé C1-C4 alkylové skupiny, (4) výhodně sloučenina, kde R² a R³ jsou methylové skupiny, (5) sloučenina, kde R⁴ je fenylová skupina substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující C1-C4 alkyl, halogenovaný C1-C4 alkyl, C1-C4 alkoxy skupinu, halogenovanou C]—C₄ alkoxy skupinu, fluor, chlor a brom, (6) výhodně sloučenina, kde R⁴ je fenylová skupina substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující methyl, trifluormethyl, methoxy skupinu, trifluormethoxy skupinu, difluormethoxy skupinu, fluor, chlor a brom, (7) výhodněji sloučenina, kde R⁴ je fenylová skupina substituovaná na pozicích 2-, 4- a/nebo 6- 1 nebo 2 substituenty vybranými ze skupiny obsahující fluor a chlor,

-3 CZ 290935 B6 (8) výhodněji sloučenina, kde R⁴ je fenylová skupina substituovaná na pozici 4- substituentem vybraným ze skupiny obsahující fluor nebo chlor a nebo fenylová skupina substituovaná na pozicích 2- a 4- dvěma substituenty vy branými ze skupiny obsahující fluor a chlor, (9) sloučenina, kde A je atom kyslíku nebo síry, a/nebo (10) výhodněji sloučenina, kde A je atom kyslíku.

Mezi výhodné sloučeniny obecného vzorce I také patří sloučeniny, kde R¹ je vybráno ze skupiny obsahující (1) a (2) R² a R³ jsou vvbrány ze skupiny obsahující (3) a (4), R⁴ je vybráno ze skupiny obsahující (5), (6), (7) a (8) a A je vybráno ze skupiny obsahující (9) a (10).

Mezi takovéto sloučeniny patří například (11) sloučenina, kde R¹ je C|-C4 alkylová skupina, R² a R³ jsou navzájem nezávislé C]—C4 alkylové skupiny, R⁴ je fenylová skupina substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující Ci-C₄ alkyl, halogenovaný Ci-C₄ alkyl, C]-C₄ alkoxy skupinu, halogenovanou Ci-C₄ alkoxy skupinu, fluor, chlor a brom, a A je atom kyslíku nebo atom síry .

(12) výhodně sloučenina, kde R¹ je methylová skupina, R² a R³ jsou methylové skupiny, R⁴ je fenylová skupina substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující methyl, trifluormethyl, methoxy skupinu, trifluormethoxy skupinu, difluormethoxy skupinu, fluor, chlor a brom, a A je atom kyslíku nebo atom síry, (13) výhodněji sloučenina, kde R¹ je methylová skupina, R² a R³ jsou methylové skupiny, R⁴ je fenylová skupina substituovaná na pozicích 2-, 4- a/nebo 6- 1 nebo 2 substituenty vybranými ze skupiny obsahující fluor a chlor, a A je atom kyslíku, a (14) výhodněji sloučenina, kde R¹ je methylová skupina, R² a R³ jsou methylové skupiny, R⁴ je fenylová skupina substituovaná na pozici 4- substituentem vybraným ze skupiny obsahující fluor nebo chlor nebo fenylová skupina substituovaná na pozicích 2- a 4- dvěma substituenty vy branými ze skupiny obsahující fluor a chlor, a A je atom kyslíku. ^V

V tabulce 1 jsou uvedeny typické příklady výhodných sloučenin obecného vzorce I.

(Ia)

-4CZ 290935 B6

Tabulka 1: Znázornění sloučenin.

Číslo sloučeniny	A	R⁴
1	0	Ph
2	0	2-FPh
3	0	3-FPh
4	0	4-FPh
5	0	2.4-diFPh
6	0	2.6-diFPh
7	0	2.4,6-triFPh
8	0	2-ClPh
9	0	4-ClPh
10	0	2,4—diCIPh
11	0	2,4,6—triCIPh
12	0	4-MePh
13	0	4-CF₃Ph
14	0	4-OMePh
15	0	4-OCHF₂Ph
16	0	2-Cl-6-FPh
17	0	2-Cl-4-FPh
18	0	4-Cl-2-FPh
19	S	Ph
20	S	2-FPh
21	S	4-FPh
22	S	2,4-diFPh
23	S	2,4,6-triFPh
24	S	4-ClPh
25	s	2,4-diClPh
26	s	2,4,6-triClPh
27	s	4-CF₃Ph
28	s	2-Cl-4-FPh
29	s	4-Cl-2-FPh
30	NH	Ph
31	NH	4-FPh
32	NH	2,4-diFPh
33	NH	2,4,6-triFPh
34	NH	4-ClPh
35	NH	2,4—diCIPh
36	NH	4-CF₃Ph
37	NH	2-Cl-4-FPh
38	NH	4-Cl-2-FPh
39	0	4-OCF₃Ph
40	0	3-ClPh
41	0	4-BrPh
42	0	2,6—diCIPh
43	s	4-OCF₃Ph
44	s	4-OCHF₂Ph
45	s	3-FPh
46	s	2-ClPh
47	s	4-BrPh
48	s	2.6-diFPh
49	s	2,6-diClPh

-5CZ 290935 B6

Tabulka 1 - pokračování

Číslo sloučeniny	A	R⁴
50	NH	4-OCFjPh
51	NH	2-FPh
52	NH	2-ClPh
53	NH	2,6-diFPh
54	NH	2,6-diClPh
55	NH	2,4,6-triClPh

Symboly Me a Ph použité v tabulce 1 označují methylové nebo fenylové skupiny.

Mezi výhodné sloučeniny, které sou uvedené v tabulce 1, patři sloučeniny s číslem 1, 2, 4, 5, 7,9, 10, 11, 13, 17, 18, 19,21,22, 23,24, 25, 28, 29, 30, 31, 32, 34, 37 a 38, mezi výhodnější patří 1, 4, 5, 7, 9, 10, 17, 18, 21, 22, 24, 25, 31, 32 a 34, mezi ještě výhodnější patří 4, 5, 9, 10, 21, 22 a 24, a mezi nej výhodnější patří

4: 7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3djpyridazin,

5: 7-(2,4-difluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazin, a

9: 7-(4-chlorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3djpyridazin.

Tyto pyrrolopyridazinové deriváty obecného vzorce I lze připravit metodou zobrazenou na následujícím reakčním schématu.

-6CZ 290935 B6

Ve vzorcích ve výše uvedeném reakčním schématu jsou R¹. R², R'. R⁴ a A definovány již výše, R⁵ je Cj—C₆ alkylová skupina, R⁶ je atom vodíku nebo formy tová skupina. X je atom halogenu (výhodně atom chloru, brom nebo jodu) nebo Ci-Cí alkansulfonyloxy skupina nebo Cí-Cio arylsulfonyloxy skupina jako je methansulfonyloxy skupina, ethansulfonyloxy skupina, butansulfonyloxy skupina, benzensulfonyloxy skupina, toluensulfonyloxy skupina a naftalensulfonyloxy skupina (výhodně methansulfonyloxy skupina, ethansulfonyloxy skupina, benzensulfonyloxy skupina nebo p- toluensulfonyloxy skupina) a Y je atom halogenu (výhodně atom chloru, bromu nebo jodu).

V kroku 1, ve kterém vzniká sloučenina obecného vzorce IV, reaguje sloučenina obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III za přítomnosti zásady v inertním rozpouštědle. Pokud je R⁶ atom vodíku, dochází k formylaci reakčního produktu.

Mezi zásadu použitou při reakci sloučeniny obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III patří například hydrid alkalického kovu jako je hydrid lithný, hydrid sodný nebo hydrid draselný, dále amid alkalického kovu jako je amid lithný, amid sodný nebo amid draselný, dále uhličitan alkalického kovu jako je uhličitan lithný, uhličitan sodný nebo uhličitan draselný, dále alkyloxid alkalického kovu jako je methoxid lithný, methoxid sodný, ethoxid sodný nebo terc.-butoxid draselný, dále organický aminoderivát jako je triethylamin. tributy lamin, diisopropylethylamin, N-ethylmorfolin, pyridin, pikolin, 4-(N.N-dimethylamino)pyridin, chinolin, N,N-dimethylanilin, Ν,Ν-diethylanilin, l,5-diazabicyklo[4,3,0]non-5-en (DBN), 1,4-diazabicyklo[2,2,2,]oktan (DABCO) nebo 1,8- diazabicyklo[5,4,0]undek-4-en (DBU), výhodněji hydrid alkalického kovu (především hydrid sodný) nebo alkyloxid alkalického kovu (především terc.-butoxid draselný).

Typ inertního rozpouštědla v kroku 1 není omezen za předpokladu, že nemá nežádoucí účinek na reakci a rozpouští výchozí látky v dostatečném množství. Mezi takovéto rozpouštědlo patří například alifatický uhlovodík jako je hexan, heptan, ligroin (lehký primární benzín) nebo petrolether, dále aromatický uhlovodík jako je benzen, toluen nebo xylen, dále halogenovaný jako je methylchlorid, chlorofrom, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, dále ether jako je diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethan nebo diethylenglykoldimethylether, dále keton jako je aceton, methylethylketon, methylisobutylketon, isoform nebo cyklohexanon, dále amid jako je formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid, N-methyl-2-pyrrolidom nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, dále sulfoxid jako je dimethylsulfoxid nebo sulfolan, nebo dále jejich směsi, a výhodně ether (především tetrahydrofuran nebo dioxan).

Reakční teplota 1 je obvykle v rozsahu od 0 do 250 °C (výhodně od teploty místnosti do 150 °C). Reakční doba kroku 1 závisí na reakční teplotě apod. a je v rozsahu od minuty do 50 hodin (výhodně od 10 minut do 30 hodin).

Do reakční směsi lze pro účinné provedení reakce přidat kvartémí amoniovou sůl jako je benzyltrimethylamonium chlorid, tetrabutylamonium chlorid nebo tetrabutylamonium bromid nebo dále crown ether (korunový ether) jako je 18-crown-6 ether nebo dibenzo-18-crown-6 ether.

Když je R⁶ vodík, dochází u produktu, který se získá reakcí sloučeniny obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III, následně kjeho formylaci reakcí s Vilsmeierovým činidlem v přítomnosti nebo nepřítomnosti inertního rozpouštědla.

Vilsmeierovo činidlo je známo v chemické literatuře a jedná se například o kombinaci halogenačního činidla a dimethylformamidu jako je oxychlorid-dimethylformamid fosforu, oxybromiddimethylformamid fosforu nebo oxalylchlorid-dimethylformamid fosforu, a výhodně oxychlorid-dimethylformamid fosforu.

-8CZ 290935 B6

Typ inertního rozpouštědla ve Vilsmeierově reakci není omezen za předpokladu, že nemá nežádoucí účinek na reakci a rozpouští výchozí látky v dostatečném množství. Mezi takovéto rozpouštědlo patří například aromatický uhlovodík jako je benzen, toluen nebo xylen, dále halogenovaný uhlovodík jako je methylchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan. 5 chlorbenzen nebo dichlorbenzen, dále ether jako je diethyleether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethen nebo diethylenglykoldimethylether, nebo dále amid jako je dimethylformamid, a výhodně halogenovaný uhlovodík (především methylchlorid, chloroform nebo dichlorethan).

Reakční teplota při Vilsmeierově reakci je obvykle v rozsahu od 20 do 150 °C (výhodně od 0 do 100 °C). Reakční doba závisí na reakční teplotě apod. a je v rozsahu od 15 minut do 12 hodin (výhodně od 30 minut do 5 hodin).

V kroku 2, ve kterém vzniká sloučenina obecného vzorce V, reaguje sloučenina obecného vzorce 15 IV s hydrazinem nebo s jeho hydráty v inertním rozpouštědle.

Typ inertního rozpouštědla použitého v kroku 2 není omezen z předpokladu, že nemá nežádoucí účinek na reakci a rozpouští výchozí látky v dostatečném množství. Mezi takovéto rozpouštědlo patří například ether jako je diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxy20 ethan nebo diethylenglykoldimethylether, dále alkohol jako je methanol, ethanol, propanol nebo isopropanol, dále aromatický uhlovodík jako je benzen, toluen nebo xylen, dále kyselina karboxylová jako je kyselina octová nebo kyselina propionmová, dále amid jako je formamid, dimethylformamid, dimethylacetamid, N-methyl-2-pyrrolidon nebo triamid kyseliny hexamethylfosforečné, dále amin jako je triethylamin nebo pyridin, dále voda, nebo dále jejich směsi, 25 a výhodně alkohol (především ethanol) nebo karboxylová (především kyselina octová).

Reakční teplota kroku 2 je obvykle v rozsahu od -50 do 150 °C (výhodně od -10 do 120 °C). Reakční doba kroku 2 závisí na reakční teplotě apod. a je v rozsahu od 10 minut do 12 hodin (výhodně od 30 minut do 5 hodin).

V kroku 3, ve kterém vzniká sloučenina obecného vzorce VI, reaguje sloučenina obecného vzorce V s halogenačním činidlem v přítomnosti nebo nepřítomnosti inertního rozpouštědla.

Mezi halogenační činidlo použité v tomto kroku je například oxychlorid fosforu, oxybromid 35 fosforu, dichlor thionylu, dibromid thionylu, oxalylchlorid, pentachlorid fosforu nebo pentabromid fosforu, výhodně oxychlorid fosforu nebo dichlorid thionylu. Velký přebytek halogenačního činidla lze v tomto kroku použít jako rozpouštědlo.

Typ inertního rozpouštědla použitého v kroku 3 není omezen za předpokladu, že nemá nežádoucí 40 účinek na reakci a rozpouští výchozí látky v dostatečném množství. Mezi takovéto rozpouštědlo patří například aromatický uhlovodík jako je benzen, toluen nebo xylen, díle halogenovaný uhlovodík jako je methylchlorid, chloroform, tetrachlormethan, dichlorethan, chlorbenzen nebo dichlorbenzen, dále ether jako je diethylether, diisopropylether, tetrahydrofuran, dioxan, dimethoxyethen nebo diethylenglykoldimethylether, dále amid jako je dimethylformamid, di45 methylacetamid nebo N-methyl-2-pyrrolidon, nebo dále sulfoxid jako je dimethylsulfoxid, a výhodně halogenovaný uhlovodík (především methylchlorid nebo dichlorethen).

Reakční teplota kroku 3 je obvykle v rozsahu od 0 do 150 °C (výhodně od teploty místnosti do 120 °C). Reakční doba kroku 3 závisí na reakční teplotě apod. a je v rozsahu od 30 minut do 50 12 hodin (výhodně od 1 hodiny do 5 hodin).

Do reakční směsi lze pro účinné provedení reakce přidat organický aminoderivát jako je triethylamin, tributylamin, diisopropylethylamin, N-ethylmorfolin, pyridin, pikolin nebo 4-(N,N-dimethylamino)pyridin.

-9CZ 290935 B6

V kroku 4, ve kterém vzniká požadovaná sloučenina obecného vzorce I podle tohoto vynálezu, reaguje sloučenina obecného vzorce VI se sloučeninou obecného vzorce VII za přítomnosti zásady v inertním rozpouštědle stejným postupem jako je popsán v kroku 1.

Každý z požadovaných produktů kroků 1, 2, 3 a 4 lze izolovat z reakční směsi pomocí tradičních postupů. Například je lze získat 1) filtrací reakční směsi, jsou-li v reakční směsi přítomny nerozpustné látky, následovanou odpařováním rozpouštědla z filtrátu, nebo 1) zakoncentrováním reakční směsi, 2) rozdělením zbytku mezi vodu a příslušné organické rozpouštědlo nemísitelné s vodou, 3) sušením extraktu bezvodým síranem hořečnatým apod., a dále 4) zakoncentrováním extraktu. Požadovaná sloučenina se, pokud je to nutné, dále čistí pomocí tradičních postupů jako je rekrystalizace, sloupcová chromatografie apod.

Požadovanou opticky aktivní sloučeninu (1S a 2S konfigurace) lze také připravit pomocí optického rozkladu racemického produktu (racemická forma sloučeniny podle kteréhokoliv obecného vzorce I, IV, V nebo VI), který se získá stejným postupem za použití racemické sloučeniny obecného vzorce lila (směs 1S,2S a 1R,2R konfigurace) v kroku 1 namísto opticky aktivní sloučeniny obecného vzorce III.

(lila)

Metodu optického rozkladu lze vhodně vybrat z tradičních postupů, mezi které například patří sloupcová chromatografie pro optický rozklad, preferenční krystalizace nebo rozklad diastereoizomemích solí.

Sloučeninu obecného vzorce I lze upravit pomocí kyseliny na její farmaceuticky přijatelnou sůl. Tuto sůl lze například získat reakcí sloučeniny obecného vzorce I s kyselinou v inertním rozpouštědle (mezi výhodné rozpouštědlo patří ether jako je diethylether, tetrahydrofuran nebo dioxan, dále alkohol jako je methanol ethanol nebo propanol, nebo dále halogenovaný uhlovodík jako je methylchlorid nebo chloroform) s reakční dobou od 5 minut do 1 hodiny, s následným zakoncentrován ím.

Výchozí látky obecného vzorce II, III a lila jsou známé nebo se připravují metodami známými mezi odbornou veřejností (například, Japanese patent Application Publication Hei 7 - 247 285, Monatschefte fur Chemie 104, 925 (1973), J. Chem. Soc. Perkin, Trans. II 287 (1979) apod.).

Přednost vynálezu

Sloučeniny obecného vzorce I podle tohoto vynálezu vykazují účinnou inhibici vylučování žaludeční kyseliny, poskytují vynikající ochranu žaludeční sliznice a vykazují silný antibakteriální účinek vůči Helicobacter pyroli a mají vynikající vlastnosti jako léky. Sloučeniny obecného vzorce I se používají jako léky, především jako účinné činidlo pro prevenci nebo léčbu (výhodně léčbu) vředovitých onemocnění jako je peptický vřed, akutní a chronický žaludeční vřed, gastritida, refluxní azofagitis, gastroezofegeální refluxní porucha, dyspepsie, překyselení žaludku nebo Zollingerův-Ellisonův syndrom, a jeko činidlo pro prevenci nebo léčbu (výhodně léčbu) bakteriální infekcí způsobených Helicobacterpyroli.

Když se užívá sloučenina vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl (aktivní složka) jako lék, především jako činidlo pro prevenci nebo léčbu onemocnění popsaných výše, lze jí podat samostatně nebo jako součást farmaceutického preparátu. Farmaceutický preparát se připravuje smícháním aktivní složky s vhodnými farmaceuticky přijatelnými excipienty, ředidly apod.,

-10CZ 290935 B6 a následným převedením směsi do formy tablet, kapslí, granulí, prášků nebo sirupů apod. pro orální podání nebo do formy injekcí apod. pro parenterální podání (výhodně orální podání).

Výroba takových farmaceutických preparátů se provádí podle obecných technik známých 5 odborné veřejnosti, za použití přísad jako je excipient, pojivo, disintegrant, lubrikant, stabilizátor, korigent, a pro injekce ředidlo a rozpouštědlo.

Mezi excipienty například patří derivát cukru jako je laktóza, sacharóza, glukóza, manit nebo sorbit, dále derivát škrobu jako je kukuřičný škrob, bramborový škrob, α-škrob, dextrin nebo io karboxymethylový škrob, dále derivát celulózy jako je krystalická celulóza, málo substituovaná hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, karboxymethylcelulóza, karboxymethylcelulóza vápníku nebo vnitřně přemostěná karboxymethylcelulóza sodíku, arabská guma, dextran, pullulan, dále derivát křemičitanu jako je lehký anhydrid kyseliny křemičité, syntetický hlinitokřemičitan nebo hlinitometa-křemičitan hořečnatý, dále derivát fosforečnanu jako je 15 fosforečnan vápenatý, dále derivát uhličitanu jako je uhličitan vápenatý’, nebo dále derivát síranu jako je síran vápenatý apod.

Mezi pojivá například patří jeden z excipientů popsaných výše, dále želatina, dále polyvinylpyrrolidon, dále macrogol (ochranná známka) apod.

Mezi disintegranty například patří jeden z excipientů popsaných výše, chemicky upravený škrob nebo derivát celulózy jako je kroskarmelóza sodná, karboxymethylškrob sodíku nebo přemostěný polyvinylpyrrolidon apod.

Mezi lubrikanty například patří mastek, dále kyselina stearová, dále kovová sůl kyseliny stearové jako je stearát vápenatý nebo stearát hořečnatý, dále koloidní oxid křemičitý, dále vosk jako je včelí vosk a vorvaňovina, dále kyselina boritá, dále glykol, dále kyselina karboxylová jako je kyselina fumarová nebo kyselina adipová, dále karboxylát sodný jako je benzoan sodný, dále síran jako je síran sodný, dále leucin, dále laurylsíran jako je laurylsíran sodný nebo laurylsíran 30 hořečnatý, dále derivát kyseliny křemičité jako je anhydrid kyseliny křemičité nebo hydrát kyseliny křemičité, dále jeden z derivátů škrobu popsaný výše v popisu excipientů apod.

Mezi stabilizátory například patří derivát p-hydroxybenzoátu jako je methylparaben a propylparaben, dále alkohol jako je chlorbutanol, benzylalkohol nebo fenylethylalkohol, dále benz35 alkonium chlorid, dále derivát fenolu jako je fenol nebo krezol, dále thimerosal, dále kyselina dehydrooctová, dále kyselina sorbová apod.

Mezi korigenty například patří tradičně používaná činidla dodávající sladkost, kyselost nebo vůni, apod.

Mezi rozpouštědla pro injekce například patří voda, ethanol, glycerin apod.

Vhodná dávka závisí na stavu onemocnění, věku pacienta apod., ale typicky se jednotková dávka aktivní složky tohoto vynálezu pohybuje v rozmezí od 1 mg (výhodně 5 mg) do 1 000 mg 45 (výhodně 500 mg) pro orální podání a od 0,1 mg (výhodně 1 mg) do 500 mg (výhodně 300 mg) pro intravenózní podání na den na jednoho dospělého člověka. Dávky popsané výše se výhodně podávají jedenkrát až šestkrát denně, v závislosti na stavu onemocnění.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady, příklady testů a příklady příprav jsou určené k další ilustraci tohoto vynálezu a nemají omezit rámec tohoto vynálezu.

- 11 CZ 290935 B6

Příklad 1

7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazin (a) Methyl-3-formyl-4,5-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2-karboxylát

K roztoku methyl-3-formyl-4,5-dimethylpyrrol-2-karboxylátu (5.79 g, 31,9 mmol) a 18-crown-6 etheru (0,41 g, 1,55 mmol) v tetrahydrofuranu (130 ml) se přidá terč, butoxid draselný (3,94 g, 35,1 mmol) a při teplotě místnosti se směs míchá po dobu 1 hodiny. Poté se po dobu 30 minut po kapkách při teplotě 50 °C přidává do reakční směsi (IS,2S)-2-methylcyklopropylmethylbromid (5,71 g, 38,3 mmol) a směs se zahřívá po dobu 3 hodin pod zpětným chladičem. Dále se ke směsi přidá terč, butoxid draselný (0.36 g, 3.22 mmol) a (lS.2S)-2-methylcyklopropylmethylbromid (0,48 g, 3,21 mmol) a tato směs se zahřívá po dobu 1 hodiny. Reakční směs se nalije do ledové vody a extrahuje se ethylacetátem. Extrakt se promyje vodou a nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (8.26 g, 100 %) ve formě světle hnědého oleje.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 250 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDClj, δ ppm): 0,25 (dt, J = 8 Hz, 1 H), 0,48 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,71 - 0,80 (m, 1 H), 0,82 - 0,89 (m, 1 H), 1,00 (d, J = 6 Hz. 3 Hz). 2,20 (s. 3 H), 2.26 (s. 3 H), 3,89 (s, 3 H), 4,25 (d, J = 7 Hz, 2 H), 10,43 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = +17,6° (c = 1,02, EtOH).

(b) 2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]-6,7-dihydropyrrolo[2,3-d]pyridazin-7-on

K roztoku methyl-3-formyl-4,5-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo-2karboxylátu (7,96 g, 31,9 mmol) v kyselině octové (38 ml) se přidá hydrát hydrazinu (1,92 g, 38,4 mmol) a směs se zahřívá při teplotě 90 °C po dobu 1 hodiny. Po uplynutí této doby se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, nalije se do ledové vody a přefiltruje se. Surové krystaly se promyjí vodou a rozpustí se ve směsi chloroformu a methanolu (9:1). Organická vrstva se oddělí a promývá se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a do zbytku se přidá směs toluenu a hexanu. Vzniklá sraženina se odfiltruje, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (7,02 g, 95,0 %) ve formě světle nažloutlého bílého prášku.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 232 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,22 (dt, J = 8 Hz, 1 H), 0,64 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,86 - 0,95 (m, 2 H), 0,98 (d, J = 5 Hz, 3 Hz), 2,21 (s, 3 H), 2,35 (s. 3 H), 4,44 (d, J = 7 Hz, 2 H), 8,05 (s, 1 H), 9,97 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = +11,2° (c= 0,50, EtOH).

(c) 7-chlor-2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcykIopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazin

K 2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]-6,7-dihydropynolo[2,3-d]pyridazin7-onu (6,95 g, 30,1 mmol) se přidá oxychlorid fosforu (55 ml, 590 mmol) a směs se míchá při teplotě 90 °C po dobu 3,5 hodiny. Po uplynutí této doby se reakční směs ochladí na teplotu

-12CZ 290935 B6 místnosti a nalije se po kapkách do ledové vody. Vodný roztok se neutralizuje vodným roztokem hydroxidu sodného a koncentraci 5 mol/1 (5 N) a extrahuje se methylchloridem. Extrakt se promyje vodou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a zakoncentruje se ve vakuu. Do zbytku se přidá hexan a vzniklá sraženina se odfiltruje, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (6,90 g, 92,0 %) ve formě světle žlutého prášku.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 250 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,29 (dt, J - 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,54 (dt. J = 8 Hz, 5 Hz. 1 H), 0,73 - 1,02 (m, 5 H), 2,30 (s, 3 H), 2,43 (s, 3 H), 4,44 (d, J = 6 Hz, 2 H), 9,15 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = +12,3° (c = 1,01, EtOH).

(d) 7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3djpyridazin

K roztoku hydridu sodného (0,26 g, 10,8 mmol) v tetrahydrofuranu (6 ml) se po kapkách přidá roztok p-fluorbenzylalkoholu (1,45 g, 11,5 mmol) v tetrahydrofuranu (2 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Do reakční směsi se po kapkách přidá roztok 7-chlor-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazinu (2,50g, 10,0mmol) v tetrahydrofuranu (13 ml) a směs se zahřívá po dobu 3 hodin pod zpětným chladičem. Po uplynutí této doby se reakční směs nalije do ledové vody a extrahuje se ethvlacetátem. Extrakt se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a zakoncentruje se ve vakuu. Do zbytku se přidá hexan a vzniklá sraženina se odfiltruje a rekrystalizuje se ze směsi ethylacetátu a hexanu, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (2,25 g, 66,4 %) ve formě světle hnědých krystalů.

Teplota tání: 114 až 115 °C.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 340 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,14 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,39 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,59 - 0,65 (m, 1 H), 0,76 - 0,85 (m, 1 H), 0,89 (d, J = 6 Hz, 3 H), 2,26 (s, 3 H), 2,36 (s, 3 H),

4,13 (dd, J=15Hz, 7 Hz, 1 H), 4,27 (dd, J=15Hz, 6 Hz, 1 H), 5,63 (d, J = 12Hz, 1 H),

5,68 (d, J = 12 Hz, 1 H), 7,05 - 7,12 (m, 2 H), 7,47 - 7,52 (m, 2 H), 8,96 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = +17,9° (c = 0,50, EtOH).

Příklad 2

Methyl-3-formyl-4,5-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo-2-karboxylát (a) MethyM,5-dimethyl-l-[(E)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2-karboxylát

K. roztoku methyl-4,5-dimethylpyrrol-2-karboxylátu (25,02 g, 163 mmol) a 18-crown-6 etheru (3,19 g, 12,1 mmol) v tetrahydrofuranu (150 ml) se přidá terč, butoxid draselný (18,33 g, 164 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Poté se ke směsi přidá (E)-2-methylcyklopropylmethylbromid (racemát, 12,70 g, 85,2 mmol) a směs se zahřívá po dobu 7 hodin pod zpětným chladičem. Pro uplynutí této doby se reakční směs nalije do ledové vody a extrahuje se ethylacetátem. Extrakt se promyje nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a zakoncentruje se ve vakuu. Zbytek se podrobí sloupcové chromatografií s použitím toluenu jako eluentu, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (racemát, 13,50 g, 71,6 %) ve formě hnědého oleje.

-13CZ 290935 B6

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 222 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,20 (dt, J % 8 Hz, 5 Hz. 1 H), 0,48 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,67-0,93 (m, 2 H), 0,98 (d, J = 6Hz, 3 Hz), 2,01 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H), 3,76 (s. 3 H).

4,21 (d, J = 7 Hz, 2 H), 6,76 (s, 1 H).

(b) Methyl-4,5-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2-karboxylát

Methyl-(E)-4,5-dimethyl-l-[2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2-karboxylát (10 g) se čistí ío pomocí HPLC v koloně (CHIRALCEL OJ 50 0 x 500 mm, výrobek firmy Daicel Chemical

Industries, Ltd.) použitím směsi hexan/2-propanol = 1000/1 jako eluentu při průtoku 25 ml za minutu, což vede ke vzniku požadované [(S,S) formy] sloučeniny (3,33 g) a [(R,R) formy] sloučeniny (3,97 g), která je enantiomerem [(S,S) formy] sloučeniny.

[(S,S) formy] sloučeniny:

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 222 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,20 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,48 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 20 0,66 - 0,80 (m, 1 H), 0,82 - 0,91 (m, 1 H), 0,98 (d, J = 6 Hz, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H),

3.76 (s, 3 H), 4,21 (d, J = 7 Hz, 2 H), 6,76 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = +17,6° (c = 1,00, EtOH).

[(R,R) forma] sloučeniny:

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 222 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,20 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,48 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 30 0,66 - 0,80 (m, 1 H), 0,82 - 0,91 (m, 1 H), 0,98 (d, J = 6 Hz, 3 H), 2,01 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H),

3.77 (s, 3 H), 4,21 (d, J = 7 Hz, 2 H), 6,76 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = -17,0° (c = 1,01, EtOH).

(c) Methyl-3-formyl-4,5-dimethyl-l-[(l S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2karboxylát

K roztoku dimethylformamidu (1,10 g, 15 mmol) v toluenu (2 ml) se přidá oxychlorid fosforu (2,15 g, 14 mmol) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Do této směsi se přidá 40 roztok methyl—4,5-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrol-2-karboxylátu (2,21 g, 10 mmol) v toluenu (6 ml) a směs se zahřívá při teplotě 80 °C po dobu 10 hodin. Po uplynutí této doby se reakční směs nalije do vody a neutralizuje se nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se oddělí a promyje se nasyceným vodným roztokem chloridu sodného, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a potom se zakoncentruje 45 ve vakuu. Zbytek se podrobí sloupcové chromatografií s použitím směsi ethylacetátu/hexanu= 10/1 jako eluentu, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (1,95 g, 78,2%) ve formě světle žlutého oleje.

-14CZ 290935 B6

Příklad 3

7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pynOlo[2,3-d]pyridazin (a) 7-(4-fluorbenzyloxy)I-l-[(E)-2-methylcyklopropylmethyl]-2,3-dimethylpynolo[2,3-d]pyridazin (racemát)

Reakce se provede stejným způsobem jako byl popsán v příkladě 1 za použití (E)-2-methylcyklopropylmethylbromidu (racemát) namísto (lS,2S)-2-methylcyklopropylmethylbromidu, což vede ke vzniku požadované sloučeniny (56 %).

Teplota tání: 120 až 122 °C.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 340 (M⁺+l).

(b) 7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[( 1 S,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3djpyridazin

7-(4-fluorbenzyloxy)-l-[(E)-2-methylcyklopropylmethyl]-2,3-dimethylpyrrolo[2,3-d]pyridazin (racemát, 25 g) se čistí pomocí HPLC v koloně (CHIRALCEL OJ 50 0 x 500 mm, výrobek firmy Daicel Chemical Industries, Ltd.) použitím směsi hexan/ethanol = 90/10 jako eluentu při průtoku 25 ml za minutu a rekrystalizuje se z ethylacetátu, což vede ke vzniku požadované [(1 S,2S) forma] sloučeniny (8,54 g) a [(R,R) forma] sloučeniny (7,60 g), která je enantiomerem [(S,S) forma] sloučeniny.

[(S,S) forma] sloučeniny:

Teplota tání: 114 až 115 °C.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 340 (M⁺+l).

4,13 (dd, J = 15 Hz, 7 Hz, 1 H), 4,27 (dd, J = 15Hz, 6 Hz, 1 H), 5,63 (d, J=12Hz, 1 H),

5,68 (d, J = 12,2 Hz, 1 H), 7,05 - 7,12 (m, 2 H), 7,47 - 7,52 (m, 2 H), 8,96 (s, 1 H).

Optická rotace: [a]_D ²⁰ - +19,0° (c = 0,99, MeOH).

[(R,R) forma] sloučeniny:

Teplota tání: 114 až 115 °C.

Hmotnostní spektrum (Cl, m/z): 340 (M⁺+l).

NMR spektrum (CDC1₃, δ ppm): 0,15 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,39 (dt, J = 8 Hz, 5 Hz, 1 H), 0,58 - 0,66 (m, 1 H), 0,78 - 0,85 (m, 1 H), 0,89 (d, J = 6 Hz, 3 H), 2,26 (s, 3 H), 2,37 (s, 3 H),

4,13 (dd, J = 15Hz, 7 Hz, 1 H), 4,27 (dd, J=15Hz, 6 Hz, 1 H), 5,63 (d, J=12Hz, 1 H),

5,68 (d, J = 12 Hz, 1 H), 7,06 - 7,11 (m, 2 H), 7,49 - 7,52 (m, 2 H), 8,97 (s, 1 H).

- 15CZ 290935 B6

Optická rotace: [a]_D ²⁰ = -18,8° (c = 0,98, MeOH).

Příklad testu 1

Test aktivity protonu adenosintrifosfatázy draselné (Ff Kf -ATPase)

Mikrosomatické frakce, připravené metodou popsanou v Sachs, etal. [J. Bio., Chem., 251, 10 7 690 (1976)]. tj. pomocí homogenizace čerstvé žaludeční slizniční vrstvy z vepře a následným podrobením homogenátu ultracentrifugaci s hustotním gradientem, se použije jako preparát obsahující proton adenosintrifosfatázu draselnou. Roztok (10 μΐ) testované sloučeniny rozpuštěné v dimethylsulfoxidu se přidá k 0,75 ml tlumiče kyseliny tris-chlorovodíkové o kondenzaci 70 mmol/1 (70 mM) (chlorid hořečnatý o koncentraci 5 mmol/1 (5 mM). chlorid draselný 15 o koncentraci 20 mmol/1 (20 mM), pH = 6,85) obsahující 30 až 80 pg ml enzy mového preparátu, v jednotkách proteinové koncentrace. Směs se inkubuje při teplotě 37 °C po dobu 45 minut za protřepávání s rychlostí 200krát za minutu. Enzymatická reakce se nastartuje přidáním 0,25 ml roztoku disodné soli adenosintrifosfátu o koncentraci 8 mmol'1 (8 mM). Poté tato enzymatická reakce pokračuje po dobu 20 minut a pro dokončení reakce se přidá 1 ml 10 % roztoku kyselina 20 trichloroctová - aktivní uhlí (100 mg). Reakční směs se odstřeďuje (při teplotě 4 °C a

000 otáčkách za minutu) po dobu 15 minut. Anorganická kyselina fosforečná vytvořená při hydrolýze adenosintrifosfátu v supernatantu se podrobí kolorimetrii podle metody Yoda, et al. [Biochem, Biophys, Res. Commun., 40, 880 (1970)]. Stanoví se také množství anorganické kyseliny fosforečné v reakční směsi zbavené chloridu draselného. Odečtením tohoto množství od 25 množství anorganické kyseliny fosforečné v přítomnosti chloridu draselného se stanoví aktivita protonu adenosintrifosfatázy draselné. Z aktivní hodnoty kontroly a aktivní hodnoty testované sloučeniny se při všech koncentracích stanoví inhibiční poměr (%). pomocí něhož se stanoví koncentrace způsobující 50 % inhibici (IC50 pg/ml) protonu Adenosintrifosfatázy draselné. Výsledkem toho je, že sloučenina z příkladu 1 vykazuje koncentraci způsobující 50% inhibici 30 (IC50) menší než 0,1 pg/ml a vy kazuje vynikající účinnost.

Příklad testu 2

Antibakteriální účinek vůči Helicobacter pyroli

Antibakteriální účinek sloučeniny tohoto vynálezu se vyhodnotí použitím kmenů Helicobacter pyroli 9 470, 9 472 a 9 474 a stanovením MIC (minimální inhibiční koncentrace) sloučeniny tohoto vynálezu vůči Helicobacterpyroli.

Helicobacter pyroli se kultivuje na plotně po dobu 4 dnů. Médium se připraví rozpuštěním Brain Heart Infusion Agaru (výrobek firmy Difco Laboratories) v předepsaném množství destilované vody, sterilizací v autoklávu, přidáním koňské krve (výrobek firmy Nippon Seibutsu Zairyo), což dává koncentraci 7 % a ztuhnutím směsi.

V mikroaerofilních podmínkách se Helicobacter pyroli, která se kultivovala při teplotě 37 °C po dobu 4 dní, suspenduje do fyziologického roztoku, což dává koncentraci životaschopných baterií v množství 10⁸ CFU/ml (počet buněk schopných na živné půdě vytvořit kolonie). Suspenze se poté lOOkrát naředí a částí (10 μΐ) naředěné suspenze se inokuluje médiem pro měření MIC. 50 Médium použité na měření MIC má to samé složení jako předkultivační médium. Sloučenina podle tohoto vynálezu se rozpustí v dimethylsulfoxidu (DMSO) a dvojnásobně se za sebou ředí sterilizovanou vodou. Po smíchání roztoku a média v poměru 1:99 se ztuhlý produkt v Petriho misce použije jako médium pro měření MIC. Stejným způsobem, který se používá pro předkultivaci, se Helicobacter pyroli kultivuje při teplotě 37 °C po dobu 3 dní v mikroaerofilních

-16CZ 290935 B6 podmínkách. Po dokončení kultivace se v inokulované části vizuálně pozoruje růst bakterií. Minimální koncentrace sloučeniny podle tohoto vynálezu, při které není pozorován žádny růst bakterií, se označí jako MIC (pg/ml). Sloučenina z přikladu 1 vykazuje vy nikající antibakteriální účinek, tj. MIC není větší než 12,5 pg/ml.

Příklad testu 3

Účinná inhibice vylučování žaludeční kyseliny

Skupiny krys, kde každá skupina obsahuje 3 až 5 kiys, hladovějících přes noc, se podrobí středně vedenému chirurgickému otevření dutiny břišní a jejich vrátník (pylorus) se pod etherovou anestézií podváže. Žaludek a dvanáctemík se vrátí do původní pozice v těle, následuje uzavření dutiny břišní. Předem stanovené množství testované sloučeniny se suspenduje do vodného roztoku obsahujícího 0,5 % karboxymethylcelulózy sodné a 0,4 % Tween 80 (Polysorbát 80). Získaná suspenze se orálně podá krysám. Pro kontrolu se jiným krysám orálně podá vodná suspenze (suspendované rozpouštědlo) obsahující 0,5 % karboxymethylcelulózu sodnou a 0,4 % Tween 80 (Polysorbát 80). Čtyři hodiny po podání testované sloučeniny nebo suspendovaného rozpouštědla se krysy usmrtí inhalací plynu CO2. Podrobí se chirurgickému otevření dutiny břišní, při kterém se odstraní jejich žaludek. Obsah žaludku se převede do ze skla vyrobené odstřeďovací zkumavky opatřené stupnicí. Po odstředění se změří množství (ml) supematantu a množství (ml) sraženiny. Sraženina v množství převyšujícím 0,5 ml se považuje za koprofága a odstraní se z údajů. Supematant (100 pl) se nalije do zkumavky. K roztoku se přidá destilovaná voda a tento roztok se titruje do pH 7,0 hydroxidem sodným o koncentraci 0,01 mol/1 (0.01 N). Koncentrace standardního roztoku kyseliny se stanoví přidáním 4 ml destilované vody ke 100 pl kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 0,1 mol/1 (0,1 N) a titrací stejným způsobem, Koncentrace kyseliny v žaludeční šťávě (mmol/1 (mEq/1)), výtěžek žaludeční kyseliny (AO, pmol/h (pEq/hr)) a inhibiční poměr (%) se vypočítají podle následujících rovnic:

Koncentrace kyseliny v žaludeční šťávě (mmol/1 (mEq/1)) = A/B x 100, kde,

A je množství (ml) hydroxidu sodného potřebné na titraci 100 pl supematantu,

B je množství (ml) hydroxidu sodného potřebné na titraci 100 pl kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 0,1 mol/1 (0,1 N).

Výtěžek žaludeční kyseliny (AO, pmol/h (pEq/hr)) = množství (ml) supematantu žaludeční šťávy x koncentrace kyseliny v žaludeční šťávě (mmol/1 (mEq/1)) / 4.

Inhibiční poměr (%) = (C - D)/C x 100, kde,

C je AO (pmol/h (pEq/hr)) pro krysy, kterým bylo podáno suspendované rozpouštědlo,

D je AO (pmol/h (pEq/hr) pro krysy, kterým byla podána testovací sloučenina.

% inhibiční dávka (ID₅₀ mg/kg) se stanoví metodou nejmenších čtverců z dávkové křivky inhibičních poměrů, která se vytvoří vynesením inhibičních poměrů pro každou dávku (0,3 mg/kg, 3 mg/kg a 10 mg/kg) v závislosti na logaritmu dávky. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 2.

-17CZ 290935 B6

Tabulka 2: Inhibiční účinek na vylučování žaludeční kyseliny.

Testovaná sloučenina	50 % inhibiční dávka (ID₅₀ mg/kg) vůči vylučování žaludeční kyseliny
sloučenina z příkladu 1	0,52
sloučenina A	1,64

Sloučenina A: směs sloučeniny z příkladu 1 a jejího enantiomerů (racemát: sloučenina z příkladu 57 Japanese Patent Application Laid-Open No. Ί - 247 285) v poměru 1:1.

Z výsledků uvedených v tabulce 2 vyplývá, že sloučenina z příkladu 1 vykazuje účinky 3krát silnější než její racemát.

Příklad přípravy 1

Tablety

Sloučenina z příkladu 1

Laktóza

Kukuřičný škrob

Stearát hořečnatý

30,0 mg

144,0 mg

25,0 mg

1.0 mg 200,0 mg

Tableta se připraví použitím výše uvedených přísad. Složky se smíchají a lisují se na tabletovacím stroji do tablet vážících 200 mg. Je-li to nutné lze tabletu opatřit povlakem, například za vzniku cukrem potažené tablety.

Průmyslová využitelnost

Opticky aktivní pyrrolopyridazinové deriváty se používají jako léky, především jako účinné činidlo pro prevenci nebo léčbu (výhodně léčbu) vředovitých onemocnění jako je peptický vřed, akutní a chronický žaludeční vřed, gastritida, refluxní ezofagitis, gastroezofageální refluxní porucha, dyspepsie, překyselení žaludku nebo Zollingerův-Ellisonův syndrom, a jako činidlo pro prevenci nebo léčbu (výhodně léčbu) bakteriální infekcí způsobených Helicobacter pyroli.

Claims

1. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát obecného vzorce I, kde

R¹ je Ci-C₆ alkylová skupina,

R² a R³ jsou navzájem nezávislé Ci-Ce alkylové skupiny,

R⁴ je C₆-Cio arylová skupina, která je případně substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující Ci-C₆ alkyl, halogenovaný C|-C₆ alkyl, Ci-C₆ alkoxy skupinu, halogenovanou C\-C₆ alkoxy skupinu a halogen, a

A je imino skupina, atom kyslíku nebo atom síry nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

2. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, kde R¹ je C1-C4 alkylová skupina, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

3. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, kde R¹ je methylová skupina, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

4. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, obecného vzorce I, kde R² a R³ jsou navzájem nezávislé C1-C4 alkylové skupiny, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

5. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, obecného vzorce I, kde R² a R³ jsou methylové skupiny, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

6. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, obecného vzorce I, kde R⁴ je fenylová skupina, která je substituována 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující C]-C₄ alkyl, halogenovaný C]-C₄ alkyl, C_t-C₄ alkoxy skupinu, halogenovanou C]-C₄ alkoxy skupinu, fluor, chlor a brom, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

7. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, obecného vzorce I, kde R⁴ je fenylová skupina, která je substituována 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny obsahující methyl, trifluormethyl, methoxy skupinu, trifluormethoxy skupinu, difluormethoxy skupinu, fluor, chlor a brom, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

-19CZ 290935 B6

8. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků l až 5, obecného vzorce I, kde R⁴ je fenylová skupina, která je substituována 1 nebo 2 substituenty vybranými ze skupiny obsahující fluor a chlor na pozici nebo na pozicích vybraných ze skupiny obsahující pozice 2-, 4- a 6- na fenylové skupině, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

9. Opticky’ aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5, obecného vzorce I, kde R⁴ je fenylová skupina, která je substituována 1 nebo 2 substituenty vybranými ze skupiny obsahující fluor a chlor na pozici 4- nebo na pozicích 2- a 4- na fenylové skupině, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

10. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, obecného vzorce I, kde A je atom kyslíku nebo atom síry, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

11. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový’ derivát podle kteréhokoliv z nároků 1 až 9, obecného vzorce I, kde A je atom kyslíku, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

12. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát podle nároku 1, kterým je

7-(4-fluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazin,

7-(2,4-difluorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S}-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3djpyridazin, a

7-(4-chlorbenzyloxy)-2,3-dimethyl-l-[(lS,2S)-2-methylcyklopropylmethyl]pyrrolo[2,3-d]pyridazin, nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl.

13. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako aktivní složku obsahuje opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.

14. Opticky aktivní pyrrolopyridazinový derivát obecného vzorce I podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli jako léčivo.

15. Použití opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12 pro výrobu prostředku pro léčbu nebo prevenci vředovitého onemocnění.

16. Způsob přípravy opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I, (l), kde R¹, R², R³, R⁴ a A jsou definovány níže,

-20CZ 290935 B6 nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že se nechá reagovat opticky aktivní halogenopyrrolopyridazinový derivát obecného vzorce VI, (VI), kde R¹ je Cj-Cň alkylová skupina, R² a R³ jsou navzájem nezávisle Ci-C₆ alkylové skupiny a Y je atom halogenu, se sloučeninou obecného vzorce VII,

R⁴CH₂------A------Η (VII), kde R⁴ je C₆-Ci₀ arylová skupina, která je případně substituována jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny obsahující C]-C₆ alkyl, halogenovaný Ci-Cň alkyl, Ci~C₆ alkoxy skupinu, halogenovanou Ci-Cň alkoxy skupinu a halogen, a A je imino skupina, atom kyslíku nebo atom síry.

17. Způsob přípravy opticky aktivního pyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce I, (l), kde R¹, R², R³, R⁴ a A jsou definovány níže, nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že se nechá reagovat racemát halogenopyrrolopyridazinového derivátu obecného vzorce Via,

-21 CZ 290935 B6 (Via) , kde R’ je C]-C₆ alkylová skupina, R² a R³ jsou navzájem nezávislé Ci-Cé alkylové skupiny a Y je atom halogenu,

5 se sloučeninou obecného vzorce VII,

R⁴CH₂----A-----Η (VII), kde R⁴ je C6-C₁₀ arylová skupina, která je případně substituovaná jedním nebo více substituenty 10 vybranými ze skupiny obsahující C]-C₆ alkyl, halogebnovaný C]-C₆ alkyl, C]-C₆ alkoxy skupinu, halogenovanou C]-C₆ alkoxy skupinu a halogen, a A je imino skupina, atom kyslíku nebo atom síry, a následně se provede optický rozklad racemického produktu.