CZ283482B6 - Trisubstituované bifenyly - Google Patents

Abstract

Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I, kde R.sup.1 .n.je skupina karboxylová nebo alkoxykarbonylová, R.sup.2 .n.je alkyl, R.sup.3 .n.je atom halogenu nebo skupina hydroxylová, alkoxylová, alkylová, trifluormethylová, trifluormethoxylová, karboxamidová, karboxylová, alkoxykarbozylová nebo nitro a R.sup.4 .n.je skupina karboxylová nebo tetrazolylová a jejich soli, způsob jejich výroby reakcí odpovídajícím pyridonů s bifenylmethylhalogenovými sloučeninami a jejich použití v léčivech, obzvláště jako prostředků snižujících krevní tlak a jako antiatherosklerotických prostředků.ŕ

Description

Trisubstituované bifenyly, způsob jejich výroby, jejich použití a farmaceutický prostředek tyto látky obsahující

Oblast techniky

Vynález se týká trisubstituovaných bifenylů, způsobu jejich výroby, jakož i jejich použití v léčivech, obzvláště jako prostředků, snižujících krevní tlak, a jako antiaterosklerotických prostředků.

Dosavadní stav techniky

Je známé, že renin, proteolytický enzym, odštěpuje in vivo z angiotensinogenu dekapeptid angiotensin I, který se opět v plicích, ledvinách nebo jiných tkáních odbourává na krevní tlak zvyšující oktapeptid angiotensin II. Různé efekty angiotensinu II, jako je například vasokonstrikce, retence sodných iontů v ledvinách, uvolňování aldosteronu v nadledvinkách a zvyšování tonusu sympatického nervového systému, působí synergicky ve smyslu zvyšování krevního tlaku.

Kromě toho má angiotensin II tu vlastnost, že podporuje růst a rozmnožování buněk, jako jsou například buňky srdečního svalu a buňky hladkého svalstva, přičemž tyto při různých stavech nemocnosti (například hypertonie, ateroskleróza a srdeční insufficience) zmnoženě rostou a proliferují.

Možným zásahem do renin-angiotensinového systému (RAS) je vedle inhibice reninové aktivity inhibice aktivity angiotensin-konverzního enzymu (ACE), jakož i blokáda angiotensin IIreceptorů.

V evropské patentové přihlášce EP 487 745 a 500 297 jsou popsané bifenyly, substituované pyridonem, které vykazují vlastnosti snižování krevního tlaku.

Podstata vynálezu

Předmětem předloženého vynálezu jsou trisubstituované bifenyly obecného vzorce I

(I), ve kterém

R^l značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

- 1 CZ 283482 B6

R³ značí atom halogenu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí karboxylovou skupinu nebo tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu obecného vzorce I se mohou vyskytovat také ve formě svých solí. Všeobecně je zde možno uvést jejich soli s organickými nebo anorganickými bázemi.

V rámci předloženého vynálezu jsou výhodné fyziologicky neškodné soli.

Fyziologicky neškodné soli trisubstituovaných bifenylů jsou kovové nebo amoniové soli sloučenin podle předloženého vynálezu. Obzvláště výhodné jsou například lithné soli, sodné soli, draselné soli, hořečnaté soli nebo vápenaté soli, jakož i amonné soli, odvozené od amoniaku nebo organických aminů, jako je například ethylamin, diethylamin, triethylamin, diethanolamin, triethanolamin, dicyklohexylamin, dimethylaminoethanol, arginin, lysin, nebo také ethylendiamin.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou existovat ve stereoisomemích formách, buď jako enantiomery, nebo jako diastereomery. Předložený vynález se týká jak enantiomerů nebo diastereomerů, tak také jejich příslušných směsí. Racemátové formy se dají stejně jako diastereomery známými způsoby rozdělit na stereoisomemě jednotné součásti (viz E. L. Eliel. Stereochemistry of Carbon Compounds. McGraw Hill, 1962). Kromě toho je možná také tvorba atropních isomerů.

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom fluoru, chloru nebo bromu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

Obzvláště výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 5 uhlíkovými atomy,

-2CZ 283482 B6

R³ značí atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 3 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

Zcela obzvláště výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu, methoxykarbonylovou skupinu nebo ethoxykarbonylovou skupinu,

R² značí propylovou skupinu, butylovou skupinu nebo pentylovou skupinu,

R³ značí atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, methoxyskupinu, ethoxyskupinu, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, methoxykarbonylovou skupinu, ethoxykarbonylovou skupinu nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I se vyrobí tak, že se nechá reagovat [A] pyridon obecného vzorce II

H (Π), ve kterém mají R¹ a R² výše uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III

-3CZ 283482 B6

(ΠΙ), ve kterém má R³ výše uvedený význam,

R⁴' značí alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo zbytek vzorce

E značí atom chloru nebo bromu, v inertních rozpouštědlech, za přítomnosti báze a popřípadě za přídavku katalyzátoru, nebo [B] v případě, že R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, sloučenina obecného vzorce IV

( IV), 20 ve kterém mají R¹, R² a R³ výše uvedený význam, a

L značí typickou odštěpitelnou skupinu, jako je například atom bromu nebo jodu, methansulfonyloxyskupinu, toluensulfonyloxyskupinu, fluorsulfonyloxyskupinu nebo trifluormethansulfonyloxyskupinu, výhodně atom bromu, se sloučeninou obecného vzorce V

-4CZ 283482 B6

(V), ve kterém

T značí vodíkový atom nebo trifenylmethylovou skupinu, v inertním rozpouštědle, za přítomnosti báze a kovového katalyzátoru, potom se v případě volného tetrazolu (R⁴/T) trifenylmethylová skupina odštěpí pomocí kyseliny v organickém rozpouštědle a/nebo vody, v případě karboxylové kyseliny (R⁴/ R¹) se odpovídající ester zmýdelní a sloučenina se popřípadě převede na svoji sůl.

Způsob podle předloženého vynálezu je možno příkladně znázornit pomocí následujícího 15 reakčního schéma:

-5CZ 283482 B6

CO-CH,

CO-CH-

-6CZ 283482 B6

NagCOa, DME, EIOH, Η,,Ο

TetraMe(triphenytpho«pMn^^

Jako rozpouštědla jsou pro uvedený způsob [A] vhodná běžná organická rozpouštědla, která se za daných reakčních podmínek nemění. K těmto patří výhodně ethery, jako je například diethylether, dioxan, tetrahydrofuran nebo dimethoxyethan, uhlovodíky, jako je například benzen, toluen, xylen, hexan, cyklohexan nebo ropné frakce, halogenuhlovodíky, jako je například dichlormethan, trichlormethan, tetrachlormethan, dichlorethylen, trichlorethylen nebo chlorbenzen, a dále ethylester kyseliny octové, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, triamid kyseliny hexamethylfosforečné, acetonitril, aceton nebo nitromethan. Rovněž tak je možné použít směsí uvedených rozpouštědel. Výhodný je tetrahydrofuran, aceton, dimethylformamid a dimethoxyethan.

Jako báze jsou pro způsob podle předloženého vynálezu vhodné všeobecně anorganické nebo organické báze. K těmto patří výhodně hydroxidy alkalických kovů, jako je například hydroxid lithný, hydroxid sodný nebo hydroxid draselný, hydroxidy kovů alkalických zemin, jako je například hydroxid bamatý, uhličitany alkalických kovů, jako je například uhličitan sodný, uhličitan draselný nebo uhličitan česný, uhličitany kovů alkalických zemin, jako je například uhličitan vápenatý, alkoholáty nebo amidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin, jako je například ethanolát sodný nebo draselný, methanolát sodný nebo draselný nebo terc.-butylát draselný nebo lithiumdiisopropylamid (LDA), organické aminy (trialkyl/Ci-C6/-aminy), jako je například triethylamin, nebo heterocykly, jako je například l,4~diazabicyklo[2.2.2]oktan (DABCO), l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU), pyridin, diaminopyridin, methylpiperidin nebo morfolin. Jako báze je možno také použít alkalické kovy, jako je například sodík, nebo jejich hydridy, jako je například hydrid sodný. Jako výhodný je možno uvést uhličitan draselný, hydrid sodný, terc.-butylát draselný nebo uhličitan česný.

-7CZ 283482 B6

Všeobecně se báze v případě [A] používají v množství 0,05 mol až 10 mol, výhodně 1 mol až 2 mol, vztaženo najeden mol sloučeniny obecného vzorce III.

Způsob podle předloženého vynálezu se provádí všeobecně při teplotě v rozmezí -100 °C až 100 °C, výhodně 0 °C až 80 °C.

Způsob podle předloženého vynálezu se všeobecně provádí za normálního tlaku, je však ale také možné pracovat za zvýšeného nebo sníženého tlaku, například v rozmezí 0,05 až 0,5 MPa.

Jako rozpouštědla pro způsob [B] jsou vhodná obvyklá organická rozpouštědla, která se za daných reakčních podmínek nemění. K těmto patří výhodně ethery, jako je například diethylether, dioxan, tetrahydrofuran nebo dimethoxyethan, uhlovodíky, jako je například benzen, toluen, xylen, hexan, cyklohexan nebo ropné frakce, halogenuhlovodíky, jako je například dichlormethan, trichlormethan, tetrachlormethan, dichlorethylen, trichlorethylen nebo chlorbenzen, a dále ethylester kyseliny octové, triethylamin, pyridin, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, triamid kyseliny hexamethylfosforečné, acetonitril, aceton nebo nitromethan. Rovněž tak je možné použít směsí uvedených rozpouštědel. Výhodný je tetrahydrofuran, aceton, dimethylformamid a dimethoxyethan. Rovněž tak je možno pracovat ve směsích uvedených rozpouštědel s vodou.

Způsob [B] podle předloženého vynálezu se všeobecně provádí při teplotě v rozmezí -20 °C až 150 °C, výhodně v rozmezí 40 °C až 100 °C.

Jako katalyzátory jsou vhodné všeobecně kovové komplexy niklu, palladia nebo platiny, výhodně palladium(O) komplexy, jako je například tetrakistrifenylfosfinpalladium. Rovněž tak je možné použít katalyzátory fázového přenosu, jako je například tetra-n-butylamoníumbromid nebo kronenether.

Katalyzátor se používá v množství 0,005 mol až 0,2 mol, výhodně 0,01 mol až 0,05 mol, vztaženo najeden mol sloučeniny obecného vzorce IV.

Jako báze jsou vhodné všeobecně organické terciární nenukleofilní báze, jako je například triethylamin nebo diisopropylethylamin, nebo anorganické báze, jako jsou například uhličitany alkalických kovů nebo hydroxidy alkalických kovů, výhodně uhličitan sodný, draselný nebo thalný, nebo hydroxid draselný, sodný nebo thalný. Rovněž jsou vhodné alkoxidy uvedených alkalických kovů. Obzvláště výhodný je uhličitan sodný nebo draselný.

Všeobecně se báze používá v množství 1 mol až 10 mol, výhodně 1 mol až 5 mol, vždy vztaženo najeden mol sloučeniny obecného vzorce IV.

Anorganické báze se popřípadě používají ve vodném roztoku.

Odštěpování trifenylmethylové skupiny se provádí pomocí kyseliny octové nebo kyseliny trifluoroctové a vody, nebo pomocí některého z výše uvedených alkoholů, nebo pomocí vodné kyseliny chlorovodíkové za přítomnosti acetonu nebo rovněž s alkoholy, nebo s roztokem chlorovodíku v dioxanu.

Odštěpování se provádí všeobecně při teplotě v rozmezí 0 °C až 150 °C, výhodně v rozmezí 20 °C až 100 °C a za normálního tlaku.

Jako katalyzátory jsou vhodné jodid draselný a jodid sodný, obzvláště jodid draselný.

-8CZ 283482 B6

Jako báze pro zmýdelnění esterů jsou vhodné obvyklé anorganické báze. K. těmto patří výhodně hydroxidy alkalických kovů, jako je například hydroxid sodný nebo hydroxid draselný, hydroxidy kovů alkalických zemin, jako je například hydroxid bamatý, uhličitany alkalických kovů, jako je například uhličitan sodný, hydrogenuhličitan sodný nebo uhličitan draselný, nebo alkoholáty alkalických kovů, jako je například ethanolát sodný nebo draselný, methanolát sodný nebo draselný, nebo terc.-butylát draselný. Obzvláště výhodný je hydroxid sodný nebo hydroxid draselný.

Jako rozpouštědlo je pro zmýdelnění vhodná voda, nebo organická rozpouštědla, obvyklá pro zmýdelnění. K těmto patří výhodně alkoholy, jako je například methylalkohol, ethylalkohol, propylalkohol, isopropylalkohol nebo butylalkohol, nebo ethery, jako je například tetrahydrofuran nebo dioxan, nebo také dimethylformamid a dimethylsulfoxid. Obzvláště výhodně se používají alkoholy, jako například methylalkohol, ethylalkohol, propylalkohol nebo isopropylalkohol. Rovněž tak je možno používat směsí uvedených rozpouštědel.

Zmýdelnění se může výhodně provádět také pomocí kyselin, jako je například kyselina trifluoroctová, kyselina octová, kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina methansulfonová, kyselina sírová nebo kyselina chloristá. Obzvláště výhodná je kyselina trifluoroctová.

Zmýdelnění se všeobecně provádí při teplotě v rozmezí 0 °C až 100 °C, výhodně 20 °C až 80 °C.

Všeobecně se zmýdelnění provádí za normálního tlaku, je však ale také možné pracovat za sníženého nebo zvýšeného tlaku, například v rozmezí 0,05 až 0,5 MPa.

Při provádění zmýdelňování se báze používá všeobecně v množství 1 až 3 mol, výhodně 1 až 1,5 mol, vztaženo najeden mol esteru. Obzvláště výhodně se používají molámí množství reaktantů.

Zmýdelňování terc.-butylesterů se provádí všeobecně pomocí kyselin, jako je například kyselina chlorovodíková nebo kyselina trifluoroctová, za přítomnosti některého zvýše uvedených rozpouštědel a/nebo vody, nebo jejich směsí, výhodně s dioxanem nebo tetrahydrofuranem.

Sloučeniny obecného vzorce II jsou částečně známé a mohou se vyrobit pomocí známých metod.

Sloučeniny obecného vzorce III jsou částečně známé a mohou se vyrobit pomocí známých metod.

Sloučeniny obecného vzorce V jsou v případě, kdy T = vodíkový atom, nové a mohou se vyrobit tak, že se nechá zreagovat fenyltetrazol nejprve pod ochrannou atmosférou v inertním rozpouštědle a za přítomnosti báze, a potom se přivede trimethylester kyseliny borité a v posledním stupni se hydrolyzuje pomocí kyselin.

Jako rozpouštědla jsou pro tento způsob vhodná aprotická rozpouštědla, jako jsou ethery, například tetrahydrofuran a diethylether, toluen, hexan nebo benzen. Jako výhodný je možno uvést tetrahydrofuran.

Jako báze je vhodné n-butyllithium, sek.-butyllithium a terc.-butyllithium a fenyllithium. Jako výhodné je možno uvést n-butyllithium.

Báze se používá v množství 2 mol až 5 mol, výhodně 2 mol až 3 mol, vztaženo na jeden mol fenyltetrazolu.

-9CZ 283482 B6

Jako kyseliny jsou vhodné všeobecně minerální kyseliny, jako je například kyselina chlorovodíková nebo kyseliny fosforu, nebo karboxylové kyseliny s 1 až 4 uhlíkovými atomy, jako je například kyselina octová. Výhodná je kyselina chlorovodíková.

Kyseliny se všeobecně používají v množství 1 mol až 10 mol, výhodně 1 mol až 3 mol.

Uvedený způsob se všeobecně provádí při teplotě v rozmezí -70 °C až 25 °C, výhodně v rozmezí -10°Caž0°C.

Způsob se všeobecně provádí za normálního tlaku, je však ale také možné pracovat za sníženého nebo zvýšeného tlaku, například v rozmezí 0,05 až 0,5 MPa.

Sloučeniny obecného vzorce IV jsou z větší části nové a mohou se například vyrobit tak, že se nechají reagovat sloučeniny obecného vzorce VI

(VI), ve kterém mají R¹ a R² výše uvedený význam, se sloučeninami obecného vzorce VII

(VII), ve kterém mají R³ a L výše uvedený význam a

V značí atom halogenu, výhodně bromu, v inertních rozpouštědlech a za přítomnosti báze a/nebo katalyzátoru.

Jako rozpouštědla pro uvedený způsob jsou vhodná obvyklá organická rozpouštědla, která se za daných reakčních podmínek nemění. K těmto patří výhodně ethery, jako je například diethylether, dioxan, tetrahydrofuran nebo glykoldimethylether, uhlovodíky, jako je například benzen, toluen, xylen, hexan, cyklohexan nebo ropné frakce, halogenuhlovodíky, jako je například dichlormethan, trichlormethan, tetrachlormethan, dichlorethylen, trichlorethylen nebo chlorbenzen, a dále ethylester kyseliny octové, dimethylsulfoxid, dimethylformamid, dimethoxyethan, triamid kyseliny hexamethylfosforečné, acetonitril, aceton nebo nitromethan. Rovněž tak je možné použít směsí uvedených rozpouštědel. Výhodný je tetrahydrofuran, aceton, dimethyl

- 10CZ 283482 B6 formamid a dimethoxyethan, alkoholy, jako je methylalkohol, ethylalkohol nebo propylalkohol a/nebo voda, toluen a methylalkohol/voda, a směsi rozpouštědel s vodou.

Jako báze jsou pro způsob podle předloženého vynálezu vhodné všeobecně anorganické nebo organické báze. K těmto patří výhodně hydroxidy alkalických kovů, jako je například hydroxid nebo hydroxid draselný, hydroxidy kovů alkalických zemin, jako je například hydroxid bamatý, uhličitany alkalických kovů, jako je například uhličitan sodný, uhličitan česný nebo uhličitan draselný, uhličitany kovů alkalických zemin, jako je například uhličitan vápenatý, alkoholáty nebo amidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin, jako je například ethanolát sodný nebo draselný, methanolát sodný nebo draselný, terc.-butylát draselný nebo lithiumdiisopropylamid (LDA), hydroxid nebo uhličitan thalia, organické aminy (trialkyl/Ci-C6/-aminy), jako je například triethylamin, nebo heterocykly, jako je například 1,4—diazabicyklo[2.2.2]oktan (DABCO), l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU), pyridin, diaminopyridin, methylpiperidin nebo morfolin. Jako báze je možno také použít alkalické kovy, jako je například sodík, nebo jejich hydridy, jako je například hydrid sodný. Jako výhodný je možno uvést uhličitan draselný, hydrid sodný, terc.-butylát draselný a uhličitan sodný.

Všeobecně se báze používají v množství 0,05 mol až 10 mol, výhodně 1 mol až 2 mol, vztaženo najeden mol sloučeniny obecného vzorce VII.

Způsob podle předloženého vynálezu se provádí všeobecně při teplotě v rozmezí -100 °C až 100 °C, výhodně 0 °C až 80 °C.

Způsob podle předloženého vynálezu se všeobecně provádí za normálního tlaku, je však ale také možné pracovat za zvýšeného nebo sníženého tlaku, například v rozmezí 0,05 až 0,5 MPa.

Jako katalyzátory jsou pro tento způsob vhodné jodid draselný a jodid sodný, výhodně jodid sodný. Rovněž tak je možné použít katalyzátory fázového přenosu, jako je například tetra-nbutylamoniumbromid nebo kronenether.

Katalyzátor se používá v množství 0,1 mol až 10 mol, výhodně 1 mol až 2 mol, vztaženo na jeden mol sloučeniny obecného vzorce VII.

Výše popisované způsoby výroby jsou uvedené pouze pro ozřejmění. Výroba sloučenin podle předloženého vynálezu obecného vzorce I není omezena pouze na popsané způsoby, každá modifikace těchto postupů je stejně použitelná pro výrobu.

Trisubstituované bifenyly podle předloženého vynálezu obecného vzorce I se vyznačují nepředpokládatelným cenným farmakologickým spektrem účinku.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mají specifický A II-antagonistický účinek, neboť kompetitivně inhibují vazbu angiotensinu II na A II-receptory. Potlačují vasokonstriktorické a sekreci aldosteronu stimulující efekty angiotensinu II. Kromě toho inhibují proliferaci buněk hladkých svalů.

Uvedené sloučeniny se tedy mohou použít pro ošetření arterielní hypertonie a aterosklerózy. Kromě toho se mohou použít pro ošetření koronárních onemocnění srdce, srdeční insufficience, poruch napětí mozku, ischemických onemocnění mozku, poruch periferního prokrvení, poruch funkce ledvin a nadledvinek, bronchospasticky a vaskulámě způsobených onemocnění dýchacích cest, retence sodíku a otoků.

Zkoušky blokády kontrakcí, způsobených agonisty

-11 CZ 283482 B6

Králíci obojího pohlaví byli usmrceni ranou do vazu a vykrváceni, nebo případně usmrceni po narkóze Nembutalem (cca 60 - 80 mg/kg i, v.) otevřením thoraxu. Aorta thoraxu byla vyjmuta a zbavena přilnutých vazebních tkání, rozřezána na prstencové segmenty o šířce 1,5 mm a jednotlivě byly zpracovávány za počátečního zatížení asi 3,5 g v 10 ml orgánové lázni s živným roztokem Krebs-Henseleit, syceným oxidem uhličitým a temperovaným na 37 °C, o následujícím složení.

119 mmol/1 2,5 mmol/1 1,2 mmol/1 10 mmol/1 4,8 mmol/1 1,4 mmol/1 25 mmol/1

NaCl CaCl2 x 2 H2O kh2po4 glukóza KC1 MgSO4 x 7 H2O a NaHCO3.

Kontrakce byly evidovány isometricky na Satham UC2-Zellen přes můstkový zesilovač (ifd Můlheim, popřípadě DSM Aalen) a digitalizovány a vyhodnocovány pomocí přístroje A/DWandler (Systém 570, Keithley, Miinchen). Provádění vyhodnocení křivek účinku agostinů (DWK) probíhá hodinově. Pro každou DWK byly do lázně aplikovány 3, eventuelně 4 jednotlivé koncentrace ve čtyřminutových intervalech. Po konci DWK a po následujících vymývacích cyklech (šestnáctkrát vždy 5 s/min výše uváděným živným roztokem) se končí 28-minutová klidová, popřípadě inkubační fáze, během které zpravidla dosahují kontrakce opět výchozích hodnot.

Ty hodnoty, které v normálním případě patřily 3. DWK, byly použity jako srovnávací hodnoty pro hodnocení substancí, testovaných v dalším průběhu, které byly u následujících DWK aplikovány do lázní ve stoupajících dávkách od začátku inkubace. Každý prstenec aorty byl přitom stimulován po celý den vždy stejným agonistem.

Agonisty a jejich standardní koncentrace (aplikační objem pro jednotlivou dávku = 100 μΐ)

KC1	22,7; 32,7; 42,7; 52,7	mmol/1
1-noradrenalin	3xl0'9; 3xl0‘8; 3xl0‘7; 3x1ο·6;	g/ml
serotonin	10’8; ΙΟ7; ΙΟ·6; 10'5	g/ml
B-HT 920	10‘7; 1θΛ 10‘5	g/ml
methoxamin	10'7; ΙΟ·6; 10'5	g/ml
angiotensin II	3xl0‘9; ΙΟ'8; 3xl0’8; 10’7	g/ml.

Pro výpočet IC₅₀ (koncentrace, při které zkoumaná látka způsobuje 50 % inhibici) se bere za základ efekt vždy 3. = submaximálních koncentrací agonista.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu inhibují v závislosti na dávce kontrakce izolované králičí aorty, indukované angiotensinem II. Tyto kontrakce, indukované depolarizací draslíkem nebo jinými agonisty, nebyly inhibovány vůbec nebo pouze slabě ve vysokých koncentracích.

Měření krevního tlaku u krys, infundovaných angiotensinem II

Samci krys Wistar (Moellegaard. Kopenhagen. Dánsko) o tělesné hmotnosti 200 - 350 g, byli anesteziováni thiopentalem (100 mg/kg i, p.). Po tracheotomii byl do femorální arterie zaveden katetr na měření tlaku krve a do femorální vény jeden katetr pro infuzi angiotensinu II a jeden katetr na aplikaci substancí. Po dávce ganglioblokátoru pentolinia (5 mg/kg i, v.) byla odstartovaná infuze angiotensinu II (0,3 pg/kg/min). Jakmile hodnoty krevního tlaku dosáhly

- 12CZ 283482 B6 stabilní hladiny, byla aplikována testovaná látka buď intravenózně, nebo orálně jako suspenze, popřípadě roztok v 0,5 % tylóze.

Stanovení antihypertenzivního účinku na neuspaných hypertenzivních krysách

Orální antihypertenzivní působení sloučenin podle předloženého vynálezu bylo zkoušeno na neuspaných krysách, u kterých byla chirurgicky vyvolaná jednostraná stenóza ledvinové arterie. K tomu byla zúžena pravá ledvinová arterie stříbrnou tlačkou o světlosti 0,18 mm. Při této formě hypertonie je plazmová reninová aktivita zvýšena v prvních šesti týdnech po zásahu.

Arteriální krevní tlak těchto zvířat byl měřen v definovaných časových intervalech po podání látky nekrvavou cestou manžetou na ocasní žíle. Zkoušené látky byly aplikovány v různých dávkách pomocí jícnové sondy intragastrálně (orálně), rozptýlené do suspenze tylózy. Sloučeniny podle předloženého vynálezu snižují arteriální krevní tlak hypertenzních krys v klinicky relevantním dávkování.

Kromě toho sloučeniny podle předloženého vynálezu inhibují v závislosti na dávce specifickou vazbu radioaktivního angiotensinu II.

Interakce sloučenin podle vynálezu s receptorem angiotensinu II na membránových frakcích kůry nadledvinek (skot)

Kůra nadledvinek skotu, která byla čerstvě vyjmuta a opatrně zbavena dřeně, byla dále rozmělněna v roztoku glukózy (0,32 M) za pomoci Ultra-Turraxu (Janke & Kunkel. Staufen i. B.) na hrubý membránový homogenát a ve dvou centrifugačních stupních parciálně vyčištěna na membránové frakce.

Pokusy na vazbu receptorů byly prováděny na částečně vyčištěných membránových frakcích kůry hovězích nadledvinek s radioaktivním angiotensinem II v testovacích komůrkách o obsahu 0,25 ml tak, že jednotlivě obsahovaly parciálně vyčištěné membrány (50 - 80 pg), ³H-angiotensin II (3 - 5 nM) a testovací pufrový roztok (50 mM Tris, pH 7,2, 5 mM MgCl₂ 0,25 % BSA) zkoušené substance. Po inkubační době 60 minut při teplotě místnosti byla nenavázaná radioaktivita vzorků separována pomocí navlhčeného skleněného filtru (Whatman GF/C) a navázaná radioaktivita byla změřena po promytí bílkoviny ledovým pufrem (50 mM Tris/HCl pH 7, 4,5 % PEG 6000) spektrofotometricky ve scintilačním kokteilu. Analýza hrubých dat se prováděla pomocí počítačového programu na hodnoty Kj, popřípadě IC50 (K: hodnoty IC50, korigované pro použitou radioaktivitu; IC50: koncentrace, při které zkoušená substance vykazuje 50 % inhibici specifické vazby radioligandů).

V následující tabulce jsou uvedeny výsledky zkoušek vazby některých sloučenin na receptory angiotensinu II

- 13 CZ 283482 B6

Tabulka

Vazba sloučenin podle předloženého vynálezu na receptory angiotensinu II

Příklad č.

Ki [mol/1]

1,0 x 10'⁸ 2,0 x 10’⁸ 4,0 x 10'⁷ 2,0 x 10’⁸ 6,0 x 10‘⁸ 2,0 x 10’⁹ 2,0 x 10'⁹ 3,0 x 10'⁸ 3,0 x 10’⁸ 7,0x10'⁹ 2,0 x 10'⁸ 3,0 x 10'⁸ 3,0 x 10'⁸ 2,0 x 10'⁸ 5,0 x 10'⁹

Zkoumání inhibice proliferace buněk hladkých svalů sloučeninami podle vynálezu

Pro zjištění antiproliferačního působení sloučenin byly použity buňky hladkých svalů, získaných zaort krys a prasat technikou Media-Explantat (R. Ross, J. Cell. Biol. 50, 172, 1971). Buňky byly nasáty do vhodných kultivačních misek, zpravidla do misek s 96 otvory, a kultivovány po dobu 2-3 dnů v médiu 199 se 7,5 % FCS a 7,5 % NCS, 2 mM L-glutaminu a 15 mM HEPES apH 7,4 v5 % CO₂ při teplotě 37 °C. Potom byly buňky pomocí sérového výtažku 2 až 3 dny synchronizovány a potom pomocí angiotensinu II, séra nebo jiných faktorů povzbuzeny k růstu. Zároveň se přidávají testované sloučeniny. Po 16 až 20 hodinách se přidá 1 pCi ³H-thymidinu a po dalších 4 hodinách se zjišťuje zabudování těchto látek do TCA-precipitovatelných DNA buněk.

Pro stanovení hodnoty IC50 se počítá koncentrace účinné látky, která při sekvenčním ředění účinné látky způsobuje polomaximální inhibicí inkorporace thymidinu, způsobené 10 % FCS.

Nové účinné látky se mohou pomocí známých metod převést na obvyklé přípravky, jako jsou například tablety, dražé, pilulky, granuláty, aerosoly, sirupy, emulze, suspenze a roztoky, za použití inertních, netoxických a farmaceuticky vhodných nosičů nebo rozpouštědel. Terapeuticky účinné sloučeniny zde mají být přítomné v koncentraci asi 0,5 až 90 % hmotnostních celkové směsi, tedy v množství, které je dostatečné k tomu, aby se dosáhlo uváděného dávkovacího rozmezí.

Přípravky se například vyrobí rozmícháním účinné látky s rozpouštědly a/nebo nosnými látkami, popřípadě za použití emulgačních činidel a/nebo dispergačních činidel, přičemž například v případě použití vody jako zřeďovacího činidla se mohou popřípadě použít organická rozpouštědla jako pomocná rozpouštědla.

Aplikace se provádí obvyklými způsoby, výhodně orálně nebo parenterálně, obzvláště perlinguálně nebo intravenózně.

- 14CZ 283482 B6

Pro případ parenterální aplikace se mohou použít roztoky účinné látky za využití vhodných kapalných nosných materiálů.

Všeobecně se ukázalo jako výhodné podávat při intravenózní aplikaci pro docílení účinných výsledků množství asi 0,001 až 1 mg/kg, výhodně asi 0,01 až 0,5 mg/kg tělesné hmotnosti. Při orální aplikaci činí dávkování asi 0,01 až 20 mg/kg, výhodně 0,1 až 10 mg/kg tělesné hmotnosti.

Přesto může být případně potřebné od výše uváděných množství upustit, a sice v závislosti na tělesné hmotnosti, popřípadě na typu aplikace, ale také na individuální snášenlivosti vůči medikamentu, popřípadě na druhu a typu přípravku a na okamžiku, popřípadě intervalu, při kterém aplikace probíhá. Tak může být v jednotlivých případech postačující, když se bude vycházet z menších množství, než jsou výše uvedené minimální dávky, zatímco v jiných případech se budou muset uvedené horní hranice překročit. V případě aplikace většího množství je možno doporučit tuto dávku rozdělit na větší počet jednotlivých dávek během dne.

Příklady provedení vynálezu

Výchozí sloučeniny

Příklad I

Amid kyseliny N-(l-hydroxy-2-methyl-prop-2-yl)-2-methoxy-benzoové

15,2 g (100 mmol) kyseliny 2-methoxybenzoové se rozpustí ve 300 mi dichlormethanu a při teplotě 0 °C se smíchá se 14,2 g (105 mmol) 1-hydroxy-benzotriazolu x 1 H₂O a 21,66 g (105 mmol) Ν,Ν-dicyklohexylkarbodiimidu. Takto získaná suspenze se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti, opět se ochladí na teplotu 0 °C a smísí se s roztokem 9,89 g (111 mmol) 1hydroxy-2-methyl-2-propylaminu a 12,65 g (125 mmol) triethylaminu ve 300 ml dichlormethanu. Po jedné hodině je reakce ukončena. Reakční směs se promyje 1M kyselinou chlorovodíkovou a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a ve vakuu se zahustí. Surový produkt se rozmíchá s petroletherem, odsaje se, ještě se promyje rozpouštědlem a za vysokého vakua se vysuší.

Příklad II

4,5-dihydro-5,5-dimethyl-2-(2-methoxyfenyl)-oxazol

- 15CZ 283482 B6

16,0 g (71,7 mmol) sloučeniny z příkladu 1 se při teplotě místnosti smísí se 17,1 ml (283,4 mmol) thionylchloridu a reakční směs se míchá po dobu 3 hodin. Potom se přebytečné reagencie odpaří, získaný zbytek se rozmíchá s 500 ml diethyletheru a odsaje se. Pevná látka se rozpustí ve vodě, převrství se diethyletherem a korespondující báze se uvolní pomocí 2M hydroxidu sodného. Po trojnásobné extrakci vodné fáze ethylesterem kyseliny octové se spojené organické fáze vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, odpaří se a za vysokého vakua se zbaví zbytkového rozpouštědla.

Příklad III

4,5-dihydro-5,5-dimethyl-2-(3'-fluor-4'-methyl-bifenyl-2-yl)oxazol

14,7 g (605,7 mmol) hořčíkových pilin se pod argonovou atmosférou předloží v 50 ml tetrahydrofuranu p.a. a za míchání se smísí se 117,7 g (623 mmol) 4—brom-2-fluor-toluenu v 500 ml tetrahydrofuranu p.a.. Při teplotě v rozmezí 35 až 40 °C vznikne během dvou hodin čirý roztok. K tomuto roztoku se přikape při teplotě místnosti roztok 74,0 g (360,5 mmol) sloučeniny z příkladu 11 v 500 ml tetrahydrofuranu p, a. a míchá se zprvu za mírného chlazení při teplotě asi 25 °C po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo se potom odpaří a surový produkt se při teplotě 10 °C promyje v 600 ml ethylesteru kyseliny octové a 800 ml nasyceného roztoku chloridu amonného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a ve vakuu se odpaří. Pro čištění se vyjme do 600 ml diethyletheru, případná pevná látka se odsaje a surový produkt se převede několikanásobnou extrakcí 2M kyselinou chlorovodíkovou do vodné fáze. Tato se převrství diethyletherem a zalkalizuje se pomocí hydroxidu sodného na pH 13. Po trojnásobné extrakci diethyletherem se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, odpaří se a zbytkové rozpouštědlo se za vysokého vakua odstraní.

- 16CZ 283482 B6

Příklad IV

2-(3-fluor-4-methylfenyl)-benzonitril

Předloží se 97,0 g (343 mmol) sloučeniny z příkladu III v 500 ml pyridinu a při teplotě 0 °C se za míchání smísí se 31,3 ml (343 mmol) fosforylchloridu. Reakční směs se pomalu zahřívá a nakonec se vaří po dobu jedné hodiny pod zpětným chladičem. Po ochlazení na teplotu místnosti se přidá diethylether a tolik 1M kyseliny chlorovodíkové, dokud hodnota pH vodné fáze není 1,5. Organická fáze se třikrát promyje 1M kyselinou sírovou, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se na rotační odparce a za vysokého vakua se zbaví zbytkového rozpouštědla.

Příklad V

5-(3 -fluor-4 -methyl-bifen-2-yl)-1 H-tetrazol

2,26 g (10,7 mmol) sloučeniny z příkladu IV se vaří se 3,48 g (53,6 mmol) azidu sodného a 7,37 g (53,6 mmol) triethylamoniumchloridu ve 30 ml dimethylformamidu p.a. po dobu 24 hodin pod zpětným chladičem. Po ochlazení se směs rozdělí mezi diethylether a 1M kyselinu sírovou, organická fáze se promyje vodou, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a rozpouštědlo se odpaří. Surový produkt se rozmíchá s toluenem a po odsátí se ve vakuu usuší (1,89 g). Matečný louh se odpaří na rotační odparce a znovu se čistí výše uvedeným způsobem (0,43 g, 1,7 mmol).

Příklad VI

5-(3-fluor-4-methyl-bifen-2-yl)-N-trifenylmethyl-lH-tetrazol

- 17CZ 283482 B6

50,55 g (199,2 mmol) sloučeniny z příkladu V se míchá s 58,58 g (210,0 mmol) trifenylchlormethanu a 33,2 ml (239,0 mmol) triethylaminu v 700 ml dichlormethanu po dobu 17 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se jednou promyje vodou ajednou 1M vodným roztokem kyseliny citrónové, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného, odpaří se na rotační odparce a za vysokého vakua se zbaví zbytků rozpouštědla.

Příklad VII

5-(4'-brommethyl-3'-fluor-bifen-2-yl)-N-trifenylmethyl-lH-tetrazol

C(C₆H5)₃

82,90 g (173,2 mmol) sloučeniny z příkladu VI se vaří po dobu 6 hodin v jednom litru tetrachlormethanu pod zpětným chladičem se 30,84 g (173,2 mmol) N-bromsukcinimidu a 0,87 g (5,3 mmol) azoisobutyronitrilu jako s radikálovým startérem. Po ochlazení reakční směsi se vysrážený sukcinimid odsaje a promyje se tetrachlormethanem. Získaný filtrát se zahustí a potom se za vysokého vakua usuší.

Příklad VIII

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l,2-dihydropyridin

CO₂CH₃

-18CZ 283482 B6

K suspenzi 29,25 g (0,15 mol) kyseliny 6-butyl-2-oxo-l,2-dihydro-isonikotinové ve 200 ml methylalkoholu se za chlazení ledem přikape 12,5 mi (0,17 mol) thionylchloridu a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Potom se zahustí do sucha a získaný zbytek se chromatografuje na 450 g silikagelu (230 až 400 mesh) za použití soustavy dichlormethan -> dichlormethan/methylalkohol 10:1. Z dichlormethanu, diethyletheru a petroletheru krystalizují bezbarvé krystaly o teplotě tání 106 °C.

Příklad IX

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-fluor-2’-(N-trifenylmethyl-tetrazol-5-yl)-bifenyl-

4-yl]methyl}-l ,2-dihydropyridin

CO₂-CH₃

K roztoku 31,4 g (0,15 mol) sloučeniny z příkladu VIII v 600 ml dimethoxyethanu se přidá 61,1 g (0,188 mol) uhličitanu česného, reakční směs se míchá po dobu 15 minut při teplotě místnosti, potom se přidá 104g (0,18 mol) sloučeniny z příkladu VII a míchá se přes noc při teplotě místnosti a potom se vaří po dobu 3 hodin pod zpětným chladičem. Potom se reakční směs rozdělí mezi vodu a ethylester kyseliny octové (vždy 800 ml), organická fáze se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Získaný zbytek se filtruje přes 2 kg silikagelu (230 až 400 mesh) za použití systému petrolether/ethylester kyseliny octové (5:1) -> (1:1).

Příklad X

Kysel ina 2-(tetrazol-5-y l)feny Iboronová

Roztok 2,9 g (20 mmol) 5-fenyltetrazolu v 50 ml tetrahydrofuranu se při teplotě -5 °C pod argonovou atmosférou smísí se 17,6 ml (44 mmol) 2,5 M roztoku n—butyllithia v n-Hexanu.

- 19CZ 283482 B6

Reakční směs se nechá míchat po dobu 30 minut při teplotě -5 °C až 0 °C a pri této teplotě se potom přidá 10 ml (88 mmol)trimethylesteru kyseliny borité. Potom se chladicí lázeň odstraní a roztok se smísí pri teplotě místnosti slOml polokoncentrované kyseliny chlorovodíkové. Po jedné hodině se extrahuje 100 ml ethylesteru kyseliny octové, organická fáze se oddělí a vodná fáze se dvakrát extrahuje vždy 20 ml ethylesteru kyseliny octové. Spojené organické fáze se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a získaný zbytek se čistí na silikagelu za použití směsi toluen/ledová kyselina octová/ /methylalkohol (38:0,1:2).

Výtěžek: 2,65 g (70 % teorie)

R_f = 0,26 (toluen/methylalkohol/ledová kyselina octová = 32:8: 1) ¹³C-NMR: δ = 156,7;137,9;133,5;129,8;128,9;127,7; 126,9 ppm.

Příklad XI

4-brom-3-methylbenzylalkohol

K roztoku 10 g (46,5 mmol) kyseliny 4-brom-3-methyl-benzoové ve 100 ml tetrahydrofuranu se pod argonovou atmosférou přikape při teplotě 0 °C 93 ml 1 M roztoku boran-tetrahydrofuranového komplexu v tetrahydrofuranu. Po zahřátí na teplotu 20 °C se reakční směs míchá při této teplotě po dobu 16 hodin. Potom se přebytečný boranový komplex rozruší opatrným přídavkem vody (konec vývinu vodíku), dvakrát se extrahuje vždy 250 ml ethylesteru kyseliny octové, spojené organické fáze se promyjí dvakrát vždy 100 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Sloučenina se bez čištění může nechat dále reagovat.

Výtěžek: 8 g (surová sloučenina, 86 % teorie). R_f = 0,5 (petrolether/ethylacetát = 2:1).

Příklad XII

4-brom-2-methylbenzylalkohol

Analogicky jako je popsáno v příkladě XI se získá v názvu uvedená sloučenina z 10 g (46,5 mmol) kyseliny 4-brom-2-methylbenzoové.

-20CZ 283482 B6

Výtěžek: 10 g (surová sloučenina, 107 % teorie).

Rf = 0,73 (petrolether/ethylacetát = 2:1).

Příklad XIII

4-brom-3-methylbenzylbromid

Analogicky jako je popsáno v příkladě XLIX se získá v názvu uvedená sloučenina z 8 g (39,8 mmol) sloučeniny z příkladu XI.

Výtěžek: 6,4 g (61 % teorie).

Rf = 0,75 (petrolether/ethylacetát = 10:1).

Příklad XIV

4-brom-2-methylbenzylbromid

Analogicky jako je popsáno v příkladě XLIX se získá v názvu uvedená sloučenina zlOg (49,7 mmol) sloučeniny z příkladu XII.

Výtěžek: 10,9 g (83 % teorie).

Rf = 0,8 (petrolether/ethylacetát = 10:1).

Příklad XV

3-amino-6-methylbenzonitril

-21 CZ 283482 B6

Suspenze 8,11 g (50 mmol) 6-methylbenzonitrilu a 0,81 g 10 % palladia na uhlí v 50 ml ethylalkoholu a 50 ml ethylesteru kyseliny octové se hydrogenuje po dobu jedné hodiny za tlaku 0,29 MPa. Katalyzátor se potom odfiltruje, filtrát se zahustí a krystalizuje se ze směsi diethyletheru a petroletheru.

Výtěžek: 59,6 % teorie.

Teplota tání: 88 °C.

Příklad XVI

3-brom-6-methyl-benzonitril

Ve 160 ml koncentrované kyseliny sírové se zahřívá 15,2 g (0,22 mol) dusitanu sodného a vzniklý roztok se při teplotě v rozmezí 20 °C až 40 °C přikape do roztoku 26,4 g (0,2 mol) sloučeniny z příkladu XV ve 40 ml ledové kyseliny octové. K tomuto získanému roztoku se přikape při teplotě 10 °C až 20 °C roztok 63,1 g (0,44 mol) bromidu měďného a reakční směs se míchá po dobu 30 minut. Tato reakční směs se potom přenese do jednoho litru vody, vypadlá sraženina se odsaje, promyje se vodou, suspenduje se v dichlormethanu a nerozpustné součásti se odsají. Filtrát se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahuštěním se získá 19,2 g v názvu uvedené sloučeniny.

Výtěžek: 44,5 % teorie.

Rf=0,31 (petrolether/dichlormethan = 1:2).

Příklad XVII

3-brom-6-brommethy 1-benzonitri 1

Suspenze 19,1 g (97,4 mmol) sloučeniny z příkladu XVI, 17,3 g (97,4 mmol) Nbromsukcinimidu a0,2g nitrilu kyseliny azobisisomáselné ve 100 ml tetrachlormethanu se míchá po dobu jedné hodiny pod zpětným chladičem. Potom se přefiltruje, filtrát se zahustí do sucha a získaný zbytek se krystalizuje z methylalkoholu.

-22CZ 283482 B6

Výtěžek: 7,7 g (28,7 % teorie). Teplota tání: 81 °C.

Příklad XVIII

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-(2-fluor-4-jod-fenylmethyl)-l,2-dihydropyridin

Roztok 2,09 g (10 mmol) sloučeniny z příkladu VIII, 3,14 g (10 mmol) 2-fluor-4-jodbenzylbromidu a2,llg (11 mmol) uhličitanu vápenatého ve 40 ml dimethyletheru se míchá pod argonovou atmosférou po dobu 16 hodin při teplotě 20 °C. Potom se kapalina ve vakuu odpaří, získaný zbytek se vyjme do směsi dichlormethanu a vody, vodná fáze se jednou extrahuje dichlormethanem, spojené organické fáze se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Získaný zbytek se čistí na silikagelu za použití směsi petroletheru aethylesteru kyseliny octové (5:1 a 3:1).

Výtěžek: 1,1 g (25 % teorie).

Rf = 0,44 (petrolether/ethylacetát = 3:1).

Analogicky jako je popsáno v příkladě XVIII se získají sloučeniny, uvedené v následující tabulce I.

-23CZ 283482 B6

Tabulka I

Příklad	R2	Rí	R7	R8	Rr(*)
XIX	CH3-(CH2)3-	-F	H	-Br	0,34(A)
XX	CH3-(CH2)3-	-ch3	H	Br	0,44 (B)
XXI	CH3-(CH2)3-	H	-ch3	-Br	0,40 (A)
XXII	CH3-CH2)4—	-F	-H	-Br	0,ll(C)
XXIII	CH3-(CH2)3-	-Cl	-H	-J	0,67 (D)
XXIV	CH3-(CH2)3-	H	F	Br	0,27(F)
XXV	chhch2)3-	CN	H	Br	0,36(F)
XXVI	CH3-(CH2)3-	H	Cl	Br	0,38 (G)
XXVII	CH3(CH2)3-	H	Cl	J	0,41 (G)
XXVIII	CH3(CH2)3-	no2	H	Br	0,22 (A)
XXIX	CH3(CH2)3-	H	no2	Br	0,46 (H)
XXX	CH3(CH2)3-	CN	H	Br	0,40 (D)

* Pohyblivé fáze:

A	petrolether/ethylacetát	3:1
B	petrolether/ethylacetát	2:1
C	petrolether/ethylacetát	5:1
D	petrolether/ethylacetát	1:1
E	petrolether/ethylacetát	1:2
F	petrolether/ethylacetát	2:1
G	hexan/ethylacetát	1:1
H	dichlormethan: methanol	20:1

Příklad XXXI

3-chlor-4-jod-toluen

Na 166 g ledu se dá 250 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové a 75 g 4-amino-3-chlortoluenu (0,53 mol) a potom se při teplotě 0 °C přikape roztok 40,3 g dusitanu sodného (0,583 mol) ve 170 ml vody. Po patnáctiminutovém míchání se roztok přefiltruje přes skelnou vatu a společně se vsázkou, získanou analogicky s 0,30 mol 4-amino-3-chlor-toluenem se tento roztok, ochlazený na teplotu -2 °C, přikape k roztoku 455 g jodidu draselného (2,74 mol) v jednom litru vody, který má teplotu místnosti. Po míchání přes noc se reakční směs třikrát extrahuje diethyletherem a spojené organické fáze se promyjí dvakrát zředěným hydroxidem sodným, dvakrát zředěným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou. Vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného, přefiltruje se a zahustí a získaný zbytek se destiluje na koloně Vigreux při 133 Pa. Frakce mezi 70 °C a 85 °C dávají 149 g žluté olejovité látky (7 % teorie).

-24CZ 283482 B6

Rf= 0,57 (hexan/ethylacetát = 9:1).

Příklad XXXII

3-chlor-4-jod-benzylbromid

Suspenze 40,4 g (160 mmol) sloučeniny z příkladu XXXI ve 400 ml tetrachlormethanu, 31,3 g.N-bromsukcinimidu (176 mmol) a 2,63 g AIBN (16 mmol) se zahřívá přes noc k varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení se vytvořená sraženina odsaje a promyje se tetrachlormethanem. Spojené filtráty se zahustí a v surovém stavu se mohou nechat dále reagovat.

Příklad XXXIII

Methylester kyseliny 3-chlor-^l—trifluormethylsulfonyloxy-benzoové

K roztoku 5,49 g methylesteru kyseliny 3-chlor-4-hydroxy-benzoové (29,4 mmol) v 15 ml pyridinu se při teplotě 0 °C pomalu přikape 5,5 ml anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové (33 mmol). Po pětiminutovém míchání při teplotě 0 °C a čtyřhodinovém při teplotě místnosti se reakční směs rozdělí mezi vodu a diethylether. Organická fáze se postupně promyje vodou, zředěnou kyselinou chlorovodíkovou, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, vy suší se pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a chromatografuje se na silikagelu za použití methylenchloridu. Získá se takto 8,93 g světle žluté vazké olejovité kapaliny (95,2 % teorie).

Rf = 0,63 (hexan: ethylacetát = 3:1).

Příklad XXXIV

5-(2'-chlor-4'-methoxykarbonyl-bifen-2-yl)-2-trifenylmethyl-lH-tetrazol

-25CZ 283482 B6 θ(θ6^δ)3

N-N

HgCOgC

Roztokem 1,00 g (3,14 mmol) sloučeniny z příkladu XXXIII v 50 ml toluenu se probublává argon. Po přídavku 168 mg Pd((C₆H₅)3)4 (0,146 mmol), 6 ml methylalkoholu, 1,63 g (3,77 mmol) kyseliny 2-(N-trifenylmethyl-tetrazol-5-yl)-fenylboronové a roztoku 333 mg (3,14 mmol) uhličitanu sodného ve 4 ml odplyněné vody se tato emulze míchá přes noc při teplotě 100 °C. Po přídavku stejného množství katalyzátoru následuje míchání po dobu 2,5 hodin při teplotě 100 °C, načež je reakce ukončena. Reakční směs se rozdělí mezi vodu aethylester kyseliny octové, organická fáze se promyje zředěným roztokem uhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a chromatografuje se na silikagelu za použití směsi hexan: ethylester kyseliny octové = 10:1. Získá se takto 10,1 g produktu ve formě světle žluté pevné látky (57,9 % teorie).

Rf = 0,46 (hexan: ethylacetát = 3:1).

Příklad XXXV

5-(2'-chlor-A'-hydroxymethyl-bifen-yl)-trifenylmethyl-lH-tetrazol

Roztok 22,0 g (39,6 mmol) sloučeniny z příkladu XXXIV ve 180 ml tetrahydrofuranu se smísí s 1,27 g methylalkoholu (39,6 mmol) a 1,29 g lithiumborhydridu (59,4 mmol) a potom se reakční směs míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti a po dobu jedné hodiny za varu pod zpětným chladičem. Reakce je ukončena po přídavku dalších 0,63 g methylalkoholu (0,20 mmol) ajednohodinovém míchání za varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se potom zahustí, získaný zbytek se vyjme do 200 ml methylenchloridu a pod silným proudem argonu se na ledové lázni pomalu smísí se 100 ml 1 N roztoku hydrogenuhličitanu draselného. Po rozdělení fází se vodná fáze extrahuje methylenchloridem. Spojené organické fáze se promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Takto se získá 20,5 g produktu ve formě bílých krystalů (98,19 % teorie).

-26CZ 283482 B6

Teplota tání: 186 - 187 °C (rozklad). Rf = 0,15 (hexan/ethylacetát = 3:1).

Příklad XXXVI

5-(4'-brommethyl-2'-chIor-bifen-2-yl)-2-trifenylmethyl-lH-tetrazol

K. roztoku 11,2 g trifenylfosfinu (42,5 mmol) ve 100 ml methylenchloridu se v ledové lázni pod argonovou atmosférou nejprve přikape 6,79 g bromu (42,5 mmol) a potom 20,4 g sloučeniny z příkladu XXXV ve 300 ml methylenchloridu. Po jednohodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs přefiltruje přes silikagel a eluuje se methylenchloridem. Po zahuštění filtrátu a dispergaci získaného zbytku pomocí hexanu se získá 15,8 g produktu ve formě bílých krystalů (68,9 % teorie).

Teplota tání: 15-60 °C.

Rf = 0,40 (hexan/ethylacetát = 3:1).

Příklad XXXVII

2-hydroxy-5-methoxykarbonyl-benzaídehydoxim

K roztoku 80,5 g (0,45 mol) 2-hydroxy-5-methoxykarbonylbenzaldehydu ve 300 ml methylalkoholu se přikape roztok 68,0 g (0,83 mol) octanu sodného a 68,0 g (0,98 mol) hydroxylaminhydrochloridu ve 300 ml vody a reakční směs se míchá po dobu 2 hodin při teplotě 25 °C. Vysrážený produkt se odsaje, promyje se vodou a usuší se ve vakuu nad chloridem fosforečným.

Výtěžek: 70,4 g (80,7 % teorie).

Teplota tání: 155 °C.

-27CZ 283482 B6

Příklad XXXVIII

2-acetoxy-5-methoxykarbonyl-benzonitril

70,3 g (0,36 mol) sloučeniny z příkladu XXXVII se míchá v 500 ml acetanhydridu po dobu 90 minut za varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se potom odpaří do sucha, získaný zbytek se rozpustí v dichlormethanu a v názvu uvedená sloučenina se nechá vykrystalizovat přídavkem petroletheru.

Výtěžek: 89,7 % teorie.

Teplota tání: 98 °C.

Příklad XXXIX

2-hydroxy-5-methoxykarbonyl-benzonitril

COOCHg

OH

Suspenze 70,6 g (0,32 mol) sloučeniny z příkladu XXXVIII a 3,48 g (0,06 mol) ethylátu sodného v 0,5 I methylalkoholu se zahřívá po dobu 3 hodin k varu pod zpětným chladičem, potom se reakční směs zchladí na teplotu 25 °C a okyselí se 1 N kyselinou chlorovodíkovou na pH = 6,5, ve vakuu se zahustí a získaný zbytek se vyjme do dichlormethanu. Tento roztok se promyje nasyceným roztokem chloridu sodného, organická fáze se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a krystalizuje se ze směsi diethyletheru a petroletheru.

Výtěžek: 98 % teorie.

Teplota tání: 193 °C.

Příklad XL

Methylester kyseliny 3-kyano-4-trifluormethylsulfonyloxy-benzoové

-28CZ 283482 B6

OSO₂CF₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIX, se získá z 55,8 g (0,32 mol) sloučeniny z příkladu 98,2 g sloučeniny, uvedené v názvu.

Výtěžek: 100 % teorie.

R_f = 0,63 (petrolether/ethylacetát = 2:1).

Příklad XLI

5-(2'-kyano-4'-methoxykarbonyl-bifen-2-yl)-2-trifenyl-lH-tetrazol

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIV, se získá ze 3,0 g (10 mmol) sloučeniny z příkladu XL 1,4 g sloučeniny, uvedené v názvu.

Výtěžek: 26,0 % teorie.

Teplota tání: 220 - 240 °C (rozklad).

Příklad XLII

5-(2'-kyano—4'-hydroxymethyl-bifen-2-yl)-2-trifenylmethyl-lH-tetrazol

-29CZ 283482 B6

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXV, se získá ze 410 mg sloučeniny z příkladu XLI 254 mg sloučeniny, uvedené v názvu.

Výtěžek: 64,4 % teorie.

Teplota tání: 208 °C.

Příklad XLIII i o 5-(2'-kyano-4'-brommethyl-bifen-2-yl)-2-trifenylmethyl-l H-tetrazol

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXVI, se získá z 577 mg (2,2 mmol) sloučeniny z příkladu XLII 588 mg sloučeniny, uvedené v názvu.

Výtěžek: 50,5 % teorie.

Teplota tání: 194 °C.

Příklad XLIV (4-formyl-3-methoxyfenyl)ester kyseliny trifluormethansulfonové

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIII, se v názvu uvedená sloučenina získá z 15,2 g 25 (0,1 mol) 2-methoxy-4-hydroxy-benzaldehydu a 31 g (0,11 mol) anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové.

Výtěžek: 15,8 g (59 % teorie).

Rf = 0,38 (petrolether/ethylacetát = 20:1).

Příklad XLV (2-methoxy-4-methylfenyl)ester kyseliny trifluormethansulfonové

-30CZ 283482 B6

O-SOgCFg

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIII, se v názvu uvedená sloučenina získá ze 13,8 g (0,1 mol) 2-methoxy-4-methylfenolu a31g (0,11 mol) anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové.

Výtěžek: 26,5 g (98 % teorie).

Rf = 0,76 (petrolether/ethylacetát = 3:1).

Příklad XLVI

N-trifenylmethyl-5-[2-(4'-fonnyl-3'-methoxybifenyl) Jtetrazol

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIV, se získá ze 2,46 g (10 mmol) sloučeniny z příkladu XLIV sloučenina, uvedená v názvu.

Výtěžek: 3,1 g (56 % teorie).

Rf = 0,44 (petrolether/ethylacetát = 5:1).

Příklad XLVII

N-trifenylmethyí-5-[2-(2'-methoxy-4'-methoxybifenyl) Jtetrazol

Analogicky, jako je popsáno v příkladě XXXIV, se získá ze 2,0 g (7,4 mmol) sloučeniny z příkladu XLV sloučenina, uvedená v názvu.

Výtěžek: 1,75 g (47 % teorie).

Rf = 0,48 (petrolether/ethylacetát = 5:1).

-31 CZ 283482 B6

Příklad XLVIII

N-trifenylmethyl-5-[2-(4'-methoxy-3'-methoxybifenyl) Jtetrazol h₃c

Roztok 15,9 g (30,5 mmol) sloučeniny z příkladu XLVI ve 450 ml vysušeného tetrahydrofuranu se pod argonovou atmosférou přikape při teplotě 0 °C k 9,14 ml (9,14 mmol) 1 M roztoku lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Potom se chladicí lázeň odstraní, reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě 20 °C, přidá se 50 ml vody a 30 ml 15 % hydroxidu sodného a rozpouštědlo se ve vakuu odstraní. Získaný zbytek se vyjme do směsi dichlormethanu a vody, načež se vodná fáze dvakrát extrahuje dichlormethanem. Spojené organické fáze se dvakrát promyjí nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Získaný zbytek se čistí na silikagelu za použití směsi petroletheru aethylesteru kyseliny octové (10:1,5:1,3:1,1:1).

Výtěžek: 11,5 g (72 % teorie).

Rf = 0,2 (petrolether/ethylacetát = 3:1).

Příklad XLIX

N-trifenylmethyl-5-[2-(4-brommethyl-3'-methoxybifenyl) jtetrazol

Br

H₃CO

CN4*C(CgH5)3

K roztoku 11,5 g (21,8 mmol) sloučeniny z příkladu XLVIII ve 42 ml diethyletheru se při teplotě 0 °C přikape 6,2 g (23 mmol) fosfortribromidu a reakční směs se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 0 °C. Potom se vlije do ledové vody, třikrát se extrahuje ethylesterem kyseliny octové, spojené organické fáze se dvakrát promyjí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Získaný zbytek se používá k dalším reakcím bez čištění.

Výtěžek: 8 g (surový, 62 % teorie).

Rf = 0,56 (petrolether/ethylacetát = 5:1).

-32CZ 283482 B6

Příklad L

N-trifenylmethyl-5-[2-(4'-brommethyl-2'-methoxybifenyl) Jtetrazol

Analogicky, jako je popsáno v příkladě VII, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 7,73 g (15,2 mmol) sloučeniny z příkladu XLVII.

Výtěžek: 6,57 g (74 % teorie).

R_f = 0,41 (petrolether/ethylacetát = 10:1).

Příklad LI

6-butyI-A-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-chlor-2'-(N-trifenylmethyl-tetrazol-5-yl)-bifenyl4-y l]-methy 1} -1,2-d ihydropyridin

CO0CH3

Analogicky, jako je popsáno v příkladě IX, se v názvu uvedená sloučenina získá ze 6,11 g (29,2 mmol) sloučeniny z příkladu VIII a 15,7 g (26,5 mmol) sloučeniny z příkladu XXXVI.

Výtěžek: 6,60 g (34,6 % teorie).

Rf = 0,35 (hexan/ethylacetát = 3:1).

Analogicky, jako je popsáno v příkladě IX, se vyrobí sloučeniny, uvedené v následující tabulce II.

-33CZ 283482 B6

Tabulka II

Příklad	R3	R3'	Rr
LII	H	CN	0,3 5 (cyklohexan/ethylac. 10:1)
LIII	och3	H	0,46 (petroleth./ethylac. 1:1)
LIV	H	och3	0,39 (petroleth./ethylac. 1:1)

Příklad LV

6-butyl—4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-chlor-2'-(N-trifenylmethyl-tetrazol-5-yl}-bifenyl4~-y l]-methy 1} -1,2-dihydropyridin

Suspenzí 5,3 g (12 mmol) sloučeniny z příkladu XXIII, 5,0 g (12 mmol) kyseliny 2-(Ntrifenylmethyl-tetrazol-5-yl)-fenylboronové a 1,22 g (11,5 mmol) uhličitanu sodného ve 14 ml vody, 14 ml methylalkoholu a 110 ml toluenu se probublává argon a potom se k ní přidá 0,70 g (0,61 mmol) tetrakistrifenyl-fosfin-palladia(O). Reakční směs se přes noc zahřívá na teplotu 90 °C, při teplotě místnosti se zředí vodou a extrahuje se ethylesterem kyseliny octové. Promytí organické fáze se provede nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného a zahustí se. Získaný zbytek se čistí pomocí chromatografíe na silikagelu (ethylester kyseliny octové/petrolether = 1:3).

Výtěžek: 3,44 g (41 % teorie).

Rf=0,23 (ethylacetát/petrolether = 1:3).

-34CZ 283482 B6

Analogicky, jako je popsáno v příkladě LV, se vyrobí sloučeniny, uvedené v následující tabulce III.

Tabulka III

Příklad

LVI NO2

LVU H

LVIII H

Η 0,12 (hexan/ethylacetát = 3:1)

NO₂ 0,27 (hexan/ethylacetát = 2:1)

CH3 0,63(toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 20:20:1)

Výrobní příklady

Příklad 1

6-butyl—4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-[(3-fluor-2'-tetrazol—5-yl-bifenyl-4-yl)-methyl]-l,220 dihydropyridin

Roztok 3,0 g (4,2 mmol) sloučeniny z příkladu IX ve 40 ml acetonu se míchá s 0,4 ml 37 % kyseliny chlorovodíkové po dobu 30 minut při teplotě místnosti a potom se po dobu asi jedné minuty zahřeje na vodní lázni. Po přídavku dalších 0,4 ml 37 % kyseliny chlorovodíkové se tento 25 proces opakuje. Potom se směs zahustí do sucha a získaný zbytek se chromatografuje na 90 g

-35CZ 283482 B6 silikagelu (230-400 mesh, dichlormethan/methylalkohol - 50:1 -> 20:1).

Výtěžek: 1,6 g (81 % teorie).

Rf = 0,49 (toluen/ethylacetát/ledová kys. octová = 10:30:1).

Příklad 2

6-butyM—methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-methoxy-2'-(tetrazol-5-yI)-bifenyl—4-yl]methyl}-l ,2-dihydropyridin

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 435 mg (0,61 mmol) sloučeniny z příkladu Lili.

Výtěžek: 162 mg (56 % teorie).

R_f = 0,33 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 20:20:1).

Příklad 3

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-methoxy-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yI]methyl}-! ,2-dihydropyridin

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 740 mg (1,03 mmol) sloučeniny z příkladu LIV.

-36CZ 283482 B6

Výtěžek: 455 mg (93 % teorie),

R_f = 0,28 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 20:20:1).

Příklad 4

6-butyl-4~methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-methyl-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin co₂ch₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá z 1,0 g (1,42 mmol) sloučeniny z příkladu LVIII.

Výtěžek: 513 mg (79 % teorie).

Rf = 0,11 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 30:20:1).

Příklad 5

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-kyano-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin co₂ch₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá zl,0g (1,13 mmol) sloučeniny z příkladu Lil.

Výtěžek: 679 mg (91,1 % teorie).

Teplota tání: 210 - 215 °C (rozklad).

-37CZ 283482 B6

Příklad 6

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-chlor-2'-(tetrazoI-5-yl}-bifenyM-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin

COOCH₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 3,4 g (4,7 mmol) sloučeniny z příkladu LV.

Výtěžek: 1,7 g(75 % teorie).

Rf = 0,25 (dichlormethan/methylalkohol = 10:1).

Příklad 7

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-chlor-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin cooch₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 394 mg (0,55 mmol) sloučeniny z příkladu LI.

Výtěžek: 115 mg (44 % teorie).

R_f = 0,29 (dichlormethan/methylalkohol = 20:1).

-38CZ 283482 B6

Příklad 8

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-nitro-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin cooch₃

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 390 mg (0,53 mmol) sloučeniny z příkladu LVI.

Výtěžek: 135 mg (52 % teorie).

Rf= 0,28 (dichlormethan/methylalkohol =10:1).

Příklad 9

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[2-nitro-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-

1,2-dihydropyridin

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 1, se sloučenina, uvedená v názvu, získá ze 790 mg (1,1 mmol) sloučeniny z příkladu LVU.

Výtěžek: 296 mg (56 % teorie).

R_f = 0,28 (dichlormethan/methylalkohol = 10:1).

Sloučeniny, uvedené v následující tabulce 1, se vyrobí analogicky, jako je popsáno v příkladě 1.

-39CZ 283482 B6

Tabulka 1

Příklad	R1	R2	R3	sůl/kyselina
10	CO2H	C4H9	3-F	kyselina
11	co2h	c4h9	2-C1	kyselina
12	co2h	c4h9	3-C1	kyselina
13	co2c2h5	c4h9	2-Me	kyselina
14	co2ch3	c3h7	3-Me	mono-Li
15	co2h	c4h9	2—OH	kyselina
16	co2c2h5	c4h9	3-OH	kyselina
17	co2h	c4h9	2-CF3	di-Na
18	co2h	c3h7	3-CF3	kyselina
19	co2ch3	c3h7	2-OCF3	kyselina
20	co2h	c4h9	3-OCF3	di-Na
21	co2ch3	c4h9	2-F	kyselina
22	co2ch3	c4h9	2-F	mono-K
23	co2h	c4h9	2-F	kyselina
24	co2ch3	c4h9	2-C1	mono-K
25	co2ch3	c4h9	3-F	mono-K
26	co2ch3	c4h9	3—Cl	mono-K
27	co2ch3	c5hu	3-F	kyselina

Příklad 28

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-[(3^,-fluor-2-tetrazol-5-yl-bifenyl-4-yl)-methyl]-l,2dihydropyridin

-40CZ 283482 B6

CO₂H

Roztok 1 g (2,25 mmol) sloučeniny z příkladu XVIII ve 20 ml dimethyletheru se postupně smísí se 260 mg (10% mol) tetrakistrifenylfosfinpalladia(O), 6,75 ml (13,5 mmol) 2 M roztoku uhličitanu sodného, 513 mg (2,7 mmol) sloučeniny z příkladu X a 1,5 ml ethylalkoholu, a reakční směs se míchá po dobu 16 hodin pod zpětným chladičem. Po ochlazení se reakční směs přefiltruje přes křemelinu, tato se promyje methylalkoholem, rozpouštědlo se odstraní a získaný zbytek se čistí na silikagelu za použití směsi toluenu, ethylesteru kyseliny octové a ledové kyseliny octové (35:5: 1 a 30:10,1).

Výtěžek: 219 mg (22 % teorie).

Rf = 0,0, 16 (toluen/ethylacetát/ledová k. octová = 10:30:1).

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 28, se vyrobí sloučeniny, uvedené v následující tabulce 2.

Tabulka 2

Příklad	R2	Ré	R7	[M+H]+	Rf
29	CH3-CH2)3-	-CN	H
30	CH3-(CH2)3-	-ch3	H		0,24 (A)
31	CH3-(CH2)3-	H	F		0,22 (B)
32	chhch2)4-	F	H	462	0,66 (A)

A : toluen/ethylacetát/ledová k, octová =10:30:1

B : dichlormethan/methanol/ledová k. octová =10:1:0,3.

-41 CZ 283482 B6

Příklad 33

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-[(2-methoxykarbonyl-2'-tetrazol-5-yl-bifenyl^l-yl)-

K roztoku 166 mg (0,35 mmol) sloučeniny z příkladu 50 v 5 ml methylalkoholu se přidá 204 ml thionylchloridu a směs se zahřívá po dobu 3 hodin k varu pod zpětným chladičem. Potom se zahustí do sucha a chromatografuje se na silikagelu za použití směsi dichlormethanu a methylalkoholu (20:1).

Výtěžek: 131 mg (74,6 % teorie).

Rf= 0,54 (dichlormethan/methylalkohol = 5:1).

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 33, se vyrobí sloučeniny, uvedené v následující tabulce 3.

Tabulka 3

-42CZ 283482 B6

Příklad	R3	R3'		Rf
34	H	F	0,40	(dichlormethan/methanol 10:1)
35	COOCHj	H	0,50	(dichlormethan/methanol/ledová kyselina octová 100:10:3)
36	CN	H	0,38	(dichlormethan/methanol 5:1)
37	F	H	0,49	(toluen/ethylacetát/ledová kyselina octová 10:30:1
38	ch3	H	0,49	(toluen/ethylacetát/ledová kyselina octová 10:30:1

Příklad 39

6-butyl—4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-[(2-aminokarbonyl-2'-tetrazol-5-yl-bifenyl—4—yl)— methyl]-1,2-dihydropyridin draselná sůl

Roztok 400 mg (0,82 mmol) sloučeniny z příkladu 48 v tetrahydrofůranu se míchá se 1644 ml 10 (0,82 mmol) 0,5 N roztoku hydrogenuhličitanu draselného. Potom se směs zředí 10 ml vody, tetrahydrofuran se ve vakuu oddestiluje a produkt se z vodného roztoku získá lyofilizací.

Výtěžek: 399 mg (92,5 % teorie).

MS (FAB) 487 (M+H) 525 (M+K+H).

Analogicky, jako je popsáno v příkladě 39, se vyrobí sloučeniny, uvedené v následující tabulce 4.

-43CZ 283482 B6

Tabulka 4

Příklad	R3	R3'	R
40	H	CN	ch3
41	H	CN	K
42	H	F	K
43	H	F	ch3
44	CN	H	ch3
45	CN	H	K
46	F	H	ch3
47	F	H	K

Příklad 48

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-[(2-aminokarbonyl-2'-tetrazoI-5-yl-bifenyl-4-yl)methyl]-1,2-dihydropyridin

Suspenze 708 mg (1,5 mmol) sloučeniny z příkladu 5 ve 20 ml methylalkoholu se nasytí plynným chlorovodíkem a vzniklý čirý roztok se míchá po dobu 48 hodin při teplotě 20 °C. Potom se reakční směs odpaří do sucha a získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi ethylesteru kyseliny octové, methylalkoholu a vody (20:1: 0 -> 100:15:5).

Výtěžek: 586 mg (79,7 % teorie).

R_f = 0,2 (ethylacetát/methylalkohol/voda = 100:15:5).

-44CZ 283482 B6

Příklad 49

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-[(2-aminokarbonyl-2'-tetrazol-5-yl-bifenyl-4-yl)-methyl]-l,2dihydropyridin

Roztok 100 mg (0,2 mmol) sloučeniny z příkladu 48 v 7 ml tetrahydrofuranu a 421 ml (0,421 mmol) 1 N roztoku hydroxidu draselného se míchá po dobu 4 hodin při teplotě 20 °C, potom se zředí 10 ml vody, tetrahydrofuran se oddestiluje a produkt se z vodného roztoku získá pomocí lyofilizace.

Výtěžek: 103 mg (91,1 % teorie).

Rf= 0,0, 15 (dichlormethan/methanol/kys. octová = 100:10:3).

Příklad 50

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-[(2-karboxy-2'-tetrazol-5-yl-bifenyl-4-yl)-methyl]-l,2dihydropyridin

Roztok 708 mg (1,5 mmol) sloučeniny z příkladu 40 ve 3 ml 5 N hydroxidu sodného se míchá po dobu 2 hodin pod zpětným chladičem, potom se zředí 200 ml vody a 10 ml ethylesteru kyseliny octové při teplotě 20 °C a okyselí se kyselinou chlorovodíkovou na pH = 1. Organická fáze se oddělí, vysuší se pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methylalkoholu a kyseliny octové (100:5: 0,5 -> 100:15:5).

-45CZ 283482 B6

Výtěžek: 204 mg (37,4 % teorie).

R_f= 0,10 (dichlormethan/methanol/kys. octová = 100:10:5).

Příklad 51

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-[(2-aminokarbonyl-2'-tetrazol-5-yl-bifenyl-4_yl)-methyl]-l,2dihydropyridin

Eluuje se.

Příklad 52

6-buty l-4-karboxy-2-oxo-1 - {[3-methoxy-2'-(tetrazol-5-y l)-bifeny M-y l]-methy 1} -1,2dihydropyridin

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, ze 135 mg (0,28 mmol) sloučeniny z příkladu 2.

Výtěžek: 59 mg (45 % teorie).

R_f = 0,17 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 20:20:1).

-46CZ 283482 B6

Příklad 53

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-{[2-methoxy-2’-(tetrazol-5-yl}-bifenyl-4-yl]-methyl}-l,2dihydropyridin

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, ze 393 mg (0,83 mmol) sloučeniny z příkladu 3.

Výtěžek: 363 mg (95 % teorie).

R_f = 0,11 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 10:30:1).

Příklad 54

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-([3-methyl-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl^l-yl]-methyl}-l,2dihydropyridin

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, ze 475 mg (1,04 mmol) sloučeniny z příkladu 4.

Výtěžek: 386 mg (84 % teorie).

R_f=0,17 (toluen/ethylacetát/led. kys. octová = 10:30:1).

Příklad 55

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-{[2-kyano-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-l,2dihydropyridin

-47CZ 283482 B6

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, ze 234 mg (0,5 mmol) sloučeniny z příkladu 5.

Výtěžek: 221 mg (97,2 % teorie).

R_f= 0,22 (dichlormethan/methanol/led. kys. octová = 100:10:3).

Příklad 56

6-butyl-4~karboxy-2-oxo-l-{[3-karboxymethyl-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}1,2-dihydropyridin

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, z 89 mg (0,18 mmol) sloučeniny z příkladu 35.

Výtěžek: 57 mg (66 % teorie).

R_f= 0,26 (dichlormethan/methanol/led. kys. octová = 100:10:3).

Příklad 57

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-{[3-kyano-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyM-yl]-methyl}-l,2dihydropyridin

-48CZ 283482 B6

COOH

V názvu uvedená sloučenina se získá analogicky, jako je popsáno v příkladě 50, z 1,5 mg (3,2 mmol) sloučeniny z příkladu 36.

Výtěžek: 1,4 mg (100 % teorie).

R_f = 0,23 (dichlormethan/methanol/led. kys. octová = 100:10:3).

Příklad 58

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-{[3-aminokarbonyl-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}1,2-dihydropyridin

Roztok 134 mg (0,28 mmol) sloučeniny z příkladu 59 a 541 μΐ (0,54 mmol) 1 N hydroxidu sodného se ve 4 ml tetrahydrofuranu míchá po dobu jedné hodiny při teplotě 20 °C, potom se zředí vodou, zahustí a získaný vodný roztok se lyofilizuje.

Výtěžek: 142 mg (99,6 % teorie).

MS (FAB) 495 (M+Na), 517 (M+2Na-H), 539 (M+3Na-2H).

Příklad 59

6-butyl-4-methoxykarbonyl-2-oxo-l-{[3-aminokarbonyl-2’-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]methyl}-! ,2-dihydropyridin

-49CZ 283482 B6

Roztok 937 mg (2 mmol) sloučeniny z příkladu 36 ve 20 ml methylalkoholu se nasytí plynným chlorovodíkem a míchá se po dobu 48 hodin při teplotě 20 °C. Potom se zahustí do sucha, získaný zbytek se vyjme do 100 ml vody a třikrát se extrahuje vždy 30 ml ethylesteru kyseliny octové. Spojené organické fáze se promyjí třikrát vždy 30 ml roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vodné fáze se okyselí na pH = 1, třikrát se promyjí vždy 30 ml ethylesteru kyseliny octové, spojené organické fáze se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi ethylesteru kyseliny octové, methylalkoholu a vody (20:1: 0 -> 100:20:8).

Výtěžek: 472 mg (47 % teorie).

Rf= 0,55 (dichlormethan/methanol/led. k. octová = 100:10:3).

Příklad 60

6-butyl-4-karboxy-2-oxo-l-{[3-karboxy-2'-(tetrazol-5-yl)-bifenyl-4-yl]-methyl}-l,2dihydropyridin

Roztok 937 mg (2 mmol) sloučeniny z příkladu 36 ve 4 ml 5 N roztoku hydroxidu sodného se zahřívá po dobu 3 hodin k varu pod zpětným chladičem, reakční směs se potom zředí 30 ml vody a 10 ml ethylesteru kyseliny octové, okyselí se na pH = I, třikrát se promyje vždy 10 ml ethylesteru kyseliny octové, spojené organické fáze se vysuší pomocí bezvodého síranu sodného, zahustí se a získaný zbytek se chromatografuje na silikagelu za použití směsi dichlormethanu, methylalkoholu a ledové kyseliny octové (100:6: 1 -> 100:15:5).

Výtěžek: 425 mg (44,9 % teorie).

R_f = 0,11 (dichlormethan/methanol/led. k. octová = 100:10:3).

Claims (5)

1. Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I (I), ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

15 R³ značí atom halogenu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy nebo nitroskupinu, a

20 R⁴ značí karboxylovou skupinu nebo tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

25

2. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom halogenu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 8 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou 35 skupinu nebo trifluormethoxyskupinu, a

R⁴ značí karboxylovou skupinu nebo tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

-51 CZ 283482 B6

3. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom fluoru, chloru nebo bromu, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

4. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom fluoru, chloru nebo bromu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu nebo trifluormethoxyskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

5. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 5 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 3 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

-52CZ 283482 B6

6. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu nebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy,

R² značí přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 5 uhlíkovými atomy,

R³ značí atom fluoru, chloru nebo bromu, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 3 uhlíkovými atomy, přímou nebo rozvětvenou alkylovou skupinu s 1 až 4 uhlíkovými atomy, trifluormethylovou skupinu nebo trifluormethoxyskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

7. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu, methoxykarbonylovou skupinu nebo ethoxykarbonylovou skupinu,

R² značí propylovou skupinu, butylovou skupinu nebo pentylovou skupinu,

R³ značí atom fluoru nebo chloru, kyanoskupinu, hydroxyskupinu, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, methoxyskupinu, ethoxyskupinu, trifluormethylovou skupinu, trifluormethoxyskupinu, karboxamidoskupinu, karboxyskupinu, methoxykarbonylovou skupinu, ethoxykarbonylovou skupinu nebo nitroskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

8. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém

R¹ značí karboxylovou skupinu, methoxykarbonylovou skupinu nebo ethoxykarbonylovou skupinu,

R² značí propylovou skupinu, butylovou skupinu nebo pentylovou skupinu,

R³ značí atom fluoru nebo chloru, hydroxyskupinu, methylovou skupinu, ethylovou skupinu, methoxyskupinu, ethoxyskupinu, trifluormethylovou skupinu nebo trifluormethoxyskupinu, a

R⁴ značí tetrazolylovou skupinu, a jejich soli.

-53 CZ 283482 B6

9. Trisubstituované bifenyly podle nároku 1 obecného vzorce I pro terapeutické použití.

10. Trisubstituované bifenyly podle nároku 2 obecného vzorce I pro terapeutické použití.

11. Způsob výroby trisubstituovaných bifenylů podle nároku 1 obecného vzorce I, vyznačující se t í m , že se nechá reagovat [A] pyridon obecného vzorce II ve kterém mají R¹ a R² výše uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III (ii), r₃ ve kterém má R³ výše uvedený význam, (III),

R⁴' značí alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy nebo zbytek vzorce nC^T^C<C6^Hs)3

E značí atom chloru nebo bromu, v inertních rozpouštědlech, za přítomnosti báze a popřípadě za přídavku katalyzátoru, nebo [B] v případě, že R⁴ značí tetrazolylovou skupinu,

-54CZ 283482 B6 sloučenina obecného vzorce IV ve kterém mají R¹, R² a R³ výše uvedený význam, a (IV),

L značí typickou odštěpitelnou skupinu, jako je například atom bromu nebo jodu, methansulfonyloxyskupinu, toluensulfonyloxyskupinu, fluorsulfonyloxyskupinu nebo trifluormethansulfonyloxyskupinu, výhodně atom bromu, se sloučeninou obecného vzorce V (V), ve kterém

T značí vodíkový atom nebo trifenylmethylovou skupinu, v inertním rozpouštědle, za přítomnosti báze a kovového katalyzátoru, potom se v případě volného tetrazolu trifenylmethylová skupina odštěpí pomocí kyseliny v organickém rozpouštědle a/nebo vody, v případě karboxylové kyseliny se odpovídající ester zmýdelní a sloučenina se popřípadě převede na svoji sůl.

12. Způsob výroby trisubstituovaných bifenylů podle nároku 2 obecného vzorce I, vyznačující se tím, že se nechá reagovat [A] pyridon obecného vzorce II

-55CZ 283482 B6 ve kterém mají R¹ a R² výše uvedený význam, (Π ),

5 se sloučeninou obecného vzorce III r₃ ve kterém má R³ výše uvedený význam, (III),

10 R⁴' značí alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 6 uhlíkovými atomy, nebo zbytek vzorce

E značí atom chloru nebo bromu, v inertních rozpouštědlech, za přítomnosti báze a popřípadě za přídavku katalyzátoru.

13. Farmaceutický prostředek pro ošetření vysokého krevního tlaku a aterosklerózy, vyzná-

20 čující se tím, že obsahuje jako účinnou látku alespoň jeden trisubstituovaný bifenyl obecného vzorce I podle nároku 1.

14. Farmaceutický prostředek pro ošetření vysokého krevního tlaku a aterosklerózy, vyzná-

25 čující se tím, že obsahuje jako účinnou látku alespoň jeden trisubstituovaný bifenyl obecného vzorce I podle nároku 2.

15. Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I podle nároku 1 pro výrobu léčiv.

16. Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I podle nároku 2 pro výrobu léčiv.

-56CZ 283482 B6

17. Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I podle nároku 1 pro výrobu antihypertenzivních a antiaterosklerotických prostředků.

5 18. Trisubstituované bifenyly obecného vzorce I podle nároku 2 pro výrobu antihypertenzivních a antiaterosklerotických prostředků.