CZ280297B6 - Komplex obsahující srážecí faktor IX - Google Patents
Komplex obsahující srážecí faktor IX Download PDFInfo
- Publication number
- CZ280297B6 CZ280297B6 CS92211A CS21192A CZ280297B6 CZ 280297 B6 CZ280297 B6 CZ 280297B6 CS 92211 A CS92211 A CS 92211A CS 21192 A CS21192 A CS 21192A CZ 280297 B6 CZ280297 B6 CZ 280297B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- factor
- complex
- protein
- complex according
- vitamin
- Prior art date
Links
- 229960004222 factor ix Drugs 0.000 title claims abstract description 62
- 102100022641 Coagulation factor IX Human genes 0.000 title claims abstract description 54
- 108010076282 Factor IX Proteins 0.000 title claims abstract description 54
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 11
- 108091005605 Vitamin K-dependent proteins Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 claims description 14
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 claims description 13
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 claims description 13
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 claims description 12
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 claims description 11
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 claims description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 10
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 8
- 208000009429 hemophilia B Diseases 0.000 claims description 4
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 claims description 4
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 claims description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 claims description 3
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 claims description 3
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 claims description 3
- 206010016077 Factor IX deficiency Diseases 0.000 claims description 2
- 101800004937 Protein C Proteins 0.000 claims description 2
- 102000017975 Protein C Human genes 0.000 claims description 2
- 102000029301 Protein S Human genes 0.000 claims description 2
- 108010066124 Protein S Proteins 0.000 claims description 2
- 229940096437 Protein S Drugs 0.000 claims description 2
- 101800001700 Saposin-D Proteins 0.000 claims description 2
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 2
- 229960000856 protein c Drugs 0.000 claims description 2
- 208000031220 Hemophilia Diseases 0.000 claims 1
- 208000009292 Hemophilia A Diseases 0.000 claims 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 claims 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 claims 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 abstract description 8
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 4
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 4
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 108010014173 Factor X Proteins 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 125000002347 octyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 3-octoxypropane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCCOCC(O)CO GUPXYSSGJWIURR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037815 Fas apoptotic inhibitory molecule 3 Human genes 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 101000878510 Homo sapiens Fas apoptotic inhibitory molecule 3 Proteins 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003686 blood clotting factor concentrate Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- -1 butyl vinyl Chemical group 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000018706 hematopoietic system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001470 plasma protein fractionation Methods 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229940024790 prothrombin complex concentrate Drugs 0.000 description 1
- 108010012557 prothrombin complex concentrates Proteins 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N tributyl phosphate Chemical compound CCCCOP(=O)(OCCCC)OCCCC STCOOQWBFONSKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
- C12N9/64—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue
- C12N9/6421—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from animal tissue from mammals
- C12N9/6424—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12N9/644—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
- C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
- C12Y304/21022—Coagulation factor IXa (3.4.21.22)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Measurement Of Velocity Or Position Using Acoustic Or Ultrasonic Waves (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Separation Of Suspended Particles By Flocculating Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Faktor IX se selektivně adsorbuje z vodné směsi pomocí hydrofobní chromatografie, přičemž tato směs obsahuje vedle faktoru IX ještě alespoň jeden plasmazymogen nebo na vitaminu K závislý protein. Tato metoda umožňuje vysoce produktivní získání faktoru IX pro výrobu farmaceutických preparátů.ŕ
Description
Oblast vynálezu
Vynález se týká komplexu, který obsahuje srážecí faktor IX, jakož i způsobu výroby farmaceutického preparátu, který obsahuje faktor IX.
Dosavadní stav techniky
Srážecí faktor IX se používá při substituční léčbě pacientů, trpících hemofilií B. Tato krevní choroba je výsledkem nedostatku faktoru IX.
K substituční léčbě se užívají koncentráty faktoru IX, které navíc obsahují srážecí faktory II, VII, IX a X /prothrombinový komplex/. Takové koncentráty, obsahující srážecí faktory patří k faktorům závislým na vitaminu K a jsou sdruženy na základě jejich podobné stavby. Pro osoby, trpící krvácením, které jsou postiženy hemofilií B, však znamená každé zavedení jiných koagulačních faktorů, než je faktor IX, zátěž. Proto je snaha použít v terapii koncentrátu faktoru IX s jeho vysokým obsahem, alternativně ke kombinovaným preparátům.
Výchozím materiálem pro výrobu preparátů, obsahujících faktor IX je lidská plasma, která však obsahuje faktor IX jen v malých množstvích /4^g/ml/. Pro získání faktoru IX musí být proto nejen zpracováno velké množství plasmy, musí se ale také oddělit rušící doprovodné proteiny tak, jak jen to je možné. Toto je ztíženo tím, že tyto doprovodné proteiny mají podobné fyzikálně-chemické vlastnosti.
Další obtíž spočívá v tom, že konečný produkt v průběhu zpracování musí být zbaven infekčních agens, protože výchozí materiál může obsahovat například viry hepatidy nebo HIV. Každý stupeň výroby a každá inaktivace viru se musí provádět tak, aby se co nejvíce zachovala biologická aktivita faktoru IX. Již léta jsou činěny pokusy nalézt způsob, který by optinálně splňoval uvedené požadavky.
Získání faktoru IX při současném snížení obsahu jiných faktorů chromatografickými způsoby se daří přirozené tím lépe, čím je výměna srážecího faktoru IX se stacionární fází specifičtější.
Pro výrobu frakcí, obsahujících faktor IX z vodných směsí, obsahujících faktory II, VII, IX a X, jsou známy způsoby iontovýměnné a afinitní chromatografie. Podle způsobů popsaných v pat. spisu DE-C 3914869 se získá frakce, obsahující faktor IX na adsorbentu, obsahujícím α-hydroxylaminoskupinu. Eluce absorbovaného faktoru IX se provádí zvýšením koncentrace aminu nebo soli, což svědčí o iontové vazebné síle mezi faktorem IX a adsorbentem. Na závěr tohoto prvního stupně se provede chromatografie na matrici, nesoucí sulfatovaný uhlohydrát.
-1CZ 280297 B6
Způsoby afinitní chromatografie vykazují vysokou specifitu. Faktor IX se adsorbuje na nosný materiál protilátkou nebo jinými skupinami s vysokou afinitou k faktoru IX, například heparin, promyje se a eluuje. Například se podle způsobu v pat. spisu EP-A 317376 adsorbuje faktor IX na imobilizovaný heparin. Eluce faktoru IX se provádí zvýšením koncentrace soli v pufru. Podobné platí pro protilátku proti faktoru IX jako afinitní nosič.
V pat. spisu EP-A 229026 se adsorbuje faktor IX na imobilizovanou protilátku a eluuje se gradientem soli. Problémem je, že použité eluční podmínky disociují nejen faktor IX, ale také heparin, popřípadě protilátku, které se proto vyskytují v konečném produktu jako nečistoty.
Dále je známo, že koncentrát srážecích faktorů, obsahující faktory II, VII, IX a X, může být chromatografií na hydrofobní matrici zbaven virových antigenů, přičemž se antigen hydrofobně váže na matrici, zatímco srážecí faktory procházejí matricí při zachování jejich biologických aktivit /J.vir.Meth.,3, 213 až 228/1981//.
Úloha vynálezu spočívá v nalezení chromatografického způsobu, který nemá uvedené nevýhody a umožňuje snadné dosažení faktoru IX z vodné směsi, která obsahuje ještě další proteiny, zejména plasmozymogen nebo na vitaminu K závislé proteiny.
Podstata vynálezu
Podle vynálezu je k dispozici komplex srážecího faktoru IX, který je tvořen nosičem na bázi polymeru s hydrofobními skupinami, na které je selektivně navázán faktor IX z vodné, vedle faktoru IX ještě alespoň jeden plasmozymogen obsahující směsi. Faktor IX může být selektivně navázán v komplexu podle vynálezu také z vodné, vedle faktoru IX ještě alespoň jeden na vitaminu K závislý protein jako protein C, protein S nebo faktory II, VII a X, obsahující směsi nebo z vodné směsi, která obsahuje prothrombinový komplex.
Vynález je založen na poznání, že srážecí faktor IX se selektivně adsorbuje z vodného roztoku, který má vysokou vodivost, na matrici, mající hydrofobní vedlejší řetězce, tj. za přítomnosti plazmazymogenu nebo na vitaminu K závislého proteinu. Toto je překvapující, protože uvedené proteiny mají podobné fyzikálné-chemické vlastnosti. Tato selektivní adsorpční schopnost faktoru IX může být použita k získání tohoto faktoru.
Výhodná forma provedení komplexu podle vynálezu se vyznačuje tím, že faktor IX se získá nejméně v pětinásobné aktivitě vůči jinému přítomnému, na vitaminu K závislému proteinu.
Komplex podle vynálezu je výhodné podroben zpracování pro inaktivaci popřípadě přítomných infekčních agens.
Komplex podle vynálezu může být vyroben tak, že se pro komplexaci faktoru IX uvede jedna ze shora uvedených, faktor IX obsahujících vodných směsí, které mají vodivost alespoň 30 mS, výhodně v rozmezí 60 až 120 mS, do kontaktu s nosičem na bázi polymeru s hydrofobními skupinami, vzniklý komplex se popřípadě
-2CZ 280297 B6 promyje a popřípadě se inaktivují popřípadě přítomné infekční složky. Podle vynálezu se tedy faktor IX obohacuje technikou hydrofobní chromatografie. Výhodně se tvorba komplexu provádí za přítomnosti detergentů.
Dále se vynález týká farmaceutických preparátů, obsahujících srážecí faktor IX.
Komplex podle vynálezu může být dále použit pro získávání monoklonálních nebo polyklonálních protilátek, které jsou směrovány proti faktoru IX.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Z 10 litrů lidské krevní plasmy se získá metodou podle Brummelhuise (Methods ob Plasma Protein Fractionation, ed. JM Curling, str. 117, Acad. Press. 1980) prothrombinový komplex (krevní srážecí faktory II, VII, IX a X) adsorpcí na DEAE-Sephadexu. 50 ml prothrombinového komplexu (3 669 m.j. faktoru II, 2 858 m.j. faktoru IX a 2 734 m.j. faktoru X) se diafiltruje aby se dosáhlo složení pufru A (1 000 mM Naci, 15 mM citrát sodný, pH = 7), přičemž vodivost je v rozmezí 60 až 120 mS.
Sloupec 30 ml hydrofilního polymeru s butyl-skupinami /Fractogel TSK-Butyl/Merck, Darmstadt// se ekvilibruje 100 ml pufru A a prothrombinový komplex se nanese průtokovou rychlostí 360 ml/h. Po promytí impregnovaného gelu 350 ml pifru A se eluuje frakce, obsahující faktor IX 180 ml pufru B/400 mM NaCl/.
Výtěžek faktoru IX činí asi 76 % výchozí aktivity. Specifická aktivita faktoru IX činí 19,7 m.j. faktoru IX/mg proteinu. Faktory II a X vykazovaly aktivitu nižší než 20 % výchozí aktivity.
Příklad 2 ml prothrombinového komplexu se chromatografuje analogicky příkladu 1. Jako materiál sloupce se však použije 45 ml methakrylátového polymeru s fenylskupinami /Toyopearl Phenyl 650 M /TOSO HAAS, Stuttgart//, který byl ekvilibrován s 1,4 M síranem amonným. Eluce faktoru IX se provádí 0,2M síranem amonným.
Výtěžek faktoru IX činí 48 % výchozí aktivity a specifická aktivita činí 27,2 m.j. faktoru IX/mg proteinu.
Příklad 3
150 ml prothrombinového komplexu se,předčistí pomocí dextransulfátu /Miletich a spol., Analytióal Biochemistry 105,
304/1980//. 20 ml eluátu /912 m.j. faktoru IX, 160 m.j. faktoru
X/ se analogicky příkladu 1 nanese na sloupec 20 ml agarosového polymeru s oktylskupinami /Octyl-Sepharose-CL-4B/PHARMACIA,
Švédsko//. Sloupec se předtím ekvilibruje 80 ml pufru A. Po pro-3CZ 280297 B6 mytí impregnovaného gelu 120 ml pufru A se eluuje faktor IX obsahující frakce 80 ml 250 molárního roztoku NaCl.
Výtěžek faktoru IX činí asi 54 % výchozí aktivity. Specifická aktivita je 186 m.j. faktoru IX/mg proteinu. Faktor X byl stopový.
Příklad 4 ml prothrombinového komplexu se dělí analogicky příkladu 1 pomocí hydrofobní chromatografie. Bezprostředně před nanesením na 35 ml hydrofilního vinylpolymeru s butylskupinami /Fractogel TSK-Butyl/ se prothrombinový komplex navíc zpracuje se 2 % polyoxyethylen-20-sorbitanmonooleátem Tween 80 a 0,01 % tri-/n-butyl/fosfátu podle v pat. spise US-A 4820805 popsaného způsobu.
Výtěžek faktoru IX činí asi 83 % výchozí aktivity a specifická aktivita činí 24,1 m.j. faktoru IX/mg proteinu.
Příklad 5
Pro inaktivaci eventuálních původců chorob se 2 g lyofilizovaného prothrombinového komplexu zahřívají způsobem podle pat. spisu EP-A-0159311 10 hodin dlouho na 60 ’C za zvýšení parciálního tlaku vodní páry. Nakonec se provede hydrofobní chromatografie na 20 ml agarozového polymeru s oktylskupinami /Octlyl-SepharoseCL-4B/.
Výtěžek faktoru IX činí asi 63 % výchozí aktivity. Specifická aktivita činí 32 m.j. faktoru IX/mg proteinu.
Claims (10)
1. Komplex srážecího faktoru IX a nosiče, vyznačuj ící se tím, že je tvořený nosičem na bázi polymeru s hydrofobními skupinami, na který je selektivně navázán faktor IX z vodné směsi, obsahující vedle faktoru IX ještě alespoň jeden plasmozymogen a/nebo na vitaminu K závislý protein.
2. Komplex podle nároku 1, vyznačující se tím, že na vitamínu K závislý protřen je zvolený ze skupiny zahrnující protein C, protein S nebo faktory II, VII a X.
3. Komplex podle nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že faktor IX je navázán z vodné směsi, která obsahuje prothrombinový komplex.
4. Komplex podle nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že obsahuje faktor IX v alespoň pětinásobné aktivitě vzhledem k jinému, na vitaminu K závislému proteinu.
-4CZ 280297 B6
5. Komplex podle nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že se použije pro výrobu farmaceutických preparátů, obsahujících srážecí faktor IX.
6. Způsob výroby komplexu podle nároků laž 4, vyznačující se tím, že se vodná směs podle nároků 1 až 4, která má vodivost nejméně 30 mS, výhodně 60 až 120 mS, uvede pro komplexaci faktoru IX do kontaktu s nosičem na bázi polymeru s hydrofobními skupinami a vytvořený komplex se promyje.
7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že se vytvořený komplex ve vlhkém stavu tepelně zpracuje k inaktivaci popřípadě přítomných infekčních agens.
8. Způsob podle nároků 6 a 7, vyznačující se tím, že se tvorba komplexu provádí za přítomnosti anionických, kationických nebo neionických povrchově aktivních látek, obsahujících alespoň jednu hydrofilní a jednu hydrofobní skupinu.
9. Farmaceutický preparát pro aplikaci při nedostatku faktoru IX, popřípadě při hemofilii, vyznačující se tím, že obsahuje srážecí faktor IX, eluovaný z komplexu podle nároků 1 až 4.
10. Použití komplexu podle nároků 1 až 4 pro získání monoklonálních nebo polyklonálních protilátek, které jsou směrovány proti faktoru IX.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0016391A AT402261B (de) | 1991-01-25 | 1991-01-25 | Komplex enthaltend den gerinnungsfaktor ix |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS21192A3 CS21192A3 (en) | 1992-08-12 |
| CZ280297B6 true CZ280297B6 (cs) | 1995-12-13 |
Family
ID=3483232
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941547A CZ154794A3 (en) | 1991-01-25 | 1992-01-24 | Isolation method of a precipitation factor ix for preparing a pharmaceutical preparation |
| CS92211A CZ280297B6 (cs) | 1991-01-25 | 1992-01-24 | Komplex obsahující srážecí faktor IX |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941547A CZ154794A3 (en) | 1991-01-25 | 1992-01-24 | Isolation method of a precipitation factor ix for preparing a pharmaceutical preparation |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5281661A (cs) |
| EP (1) | EP0496725B1 (cs) |
| JP (2) | JP2651307B2 (cs) |
| AT (2) | AT402261B (cs) |
| CA (1) | CA2059979C (cs) |
| CZ (2) | CZ154794A3 (cs) |
| DE (1) | DE59207638D1 (cs) |
| DK (1) | DK0496725T3 (cs) |
| ES (1) | ES2098485T3 (cs) |
| FI (1) | FI100111B (cs) |
| HU (1) | HU212362B (cs) |
| SK (2) | SK280130B6 (cs) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0573605B1 (en) * | 1991-03-01 | 2000-08-30 | Rhone-Poulenc Rorer International (Holdings) Inc. | Preparation of factor ix |
| DE4342132C1 (de) * | 1993-12-10 | 1994-11-03 | Octapharma Ag | Verfahren zur Herstellung virusinaktivierte Vitamin K abhängige Plasmakomponenten sowie Protein C und Protein S enthaltender Mittel durch Membran-Chromatographie |
| US5888826A (en) * | 1994-06-30 | 1999-03-30 | Dade Behring Inc. | Combination reagent holding and test device |
| WO1996000899A1 (en) | 1994-06-30 | 1996-01-11 | Dade International Inc. | Bioactive porous partition members |
| US5602037A (en) * | 1994-06-30 | 1997-02-11 | Dade International, Inc. | Combination reagent holding and test device |
| DE19506633A1 (de) * | 1995-02-25 | 1996-08-29 | Octapharma Ag | Verfahren zur Herstellung von Faktor IX aus biologischen Quellen |
| US5714583A (en) * | 1995-06-07 | 1998-02-03 | Genetics Institute, Inc. | Factor IX purification methods |
| US5958716A (en) * | 1996-06-06 | 1999-09-28 | Dade Behring Inc. | Blood factor assay |
| WO1999022753A1 (fr) * | 1997-11-05 | 1999-05-14 | Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. | Preparations a base du cofacteur ii de l'heparine et procede de preparation |
| WO2005033140A1 (ja) * | 2003-09-30 | 2005-04-14 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | 高純度血液凝固ｉｘ因子調製物およびその精製方法 |
| KR101146160B1 (ko) * | 2004-06-30 | 2012-07-16 | 넥타르 테라퓨틱스 | 중합체인자 ｉｘ 부분의 접합체 |
| MX2007007356A (es) * | 2004-12-23 | 2007-08-14 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Reduccion del contenido de contaminantes proteinicos en composiciones que comprenden una proteina dependiente de la vitamina k de interes. |
| AU2010253830B2 (en) | 2009-05-27 | 2016-03-03 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | A method to produce a highly concentrated immunoglobulin preparation for subcutaneous use |
| CN102655853B (zh) | 2009-09-17 | 2015-07-29 | 巴克斯特卫生保健有限公司 | 透明质酸酶和免疫球蛋白的稳定的复合制剂及其使用方法 |
| JP2013544762A (ja) | 2010-09-17 | 2013-12-19 | バクスター、インターナショナル、インコーポレイテッド | 弱酸性〜中性のｐＨにおける、塩化ナトリウムを有する水性製剤を介した免疫グロブリンおよび他のタンパク質の安定化 |
| AU2011343813B2 (en) | 2010-12-15 | 2015-05-21 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Eluate collection using conductivity gradient |
| US9244073B2 (en) | 2011-02-25 | 2016-01-26 | Wellstat Diagnostics, Llc | Assays for detecting enzymatic activity |
| WO2025068923A2 (en) | 2023-09-26 | 2025-04-03 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | IMMUNOGLOBULIN FORMULATIONS DEPLETED IN IgA |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2543448A1 (fr) * | 1983-04-01 | 1984-10-05 | Rhone Poulenc Spec Chim | Procede de fractionnement du plasma |
| US4820805A (en) * | 1983-07-14 | 1989-04-11 | New York Blood Center, Inc. | Undenatured virus-free trialkyl phosphate treated biologically active protein derivatives |
| AT389815B (de) * | 1984-03-09 | 1990-02-12 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten |
| US4721572A (en) * | 1985-07-12 | 1988-01-26 | Miles Laboratories, Inc. | Purfication of blood clotting factors and other blood proteins on non-carbohydrate sulfated matrices |
| EP0229026B1 (en) * | 1986-01-06 | 1995-11-22 | Blood Systems Inc, an Arizona not-for-profit corporation | Therapeutic blood product, means and methods of preparing same |
| JPS63108000A (ja) * | 1986-05-15 | 1988-05-12 | Green Cross Corp:The | 第８因子の精製方法 |
| US4725673A (en) * | 1986-08-29 | 1988-02-16 | Alpha Therapeutic Corporation | Plasma fraction purification using silica resin bound to a ligand |
| DE3877529T2 (de) * | 1987-10-23 | 1996-11-07 | Centre Regional De Transfusion | Herstellung von hoch-gereingtem menschlichen Faktor IX sowie anderem Plasmaproteinkonzentrat und dessen therapeutische Verwendung. |
| DE3914869C1 (cs) * | 1989-05-05 | 1990-08-09 | Biotest Pharma Gmbh, 6072 Dreieich, De |
-
1991
- 1991-01-25 AT AT0016391A patent/AT402261B/de not_active IP Right Cessation
-
1992
- 1992-01-21 US US07/822,996 patent/US5281661A/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-23 ES ES92890018T patent/ES2098485T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-23 DK DK92890018.2T patent/DK0496725T3/da not_active Application Discontinuation
- 1992-01-23 AT AT92890018T patent/ATE146220T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-01-23 EP EP92890018A patent/EP0496725B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-23 DE DE59207638T patent/DE59207638D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-24 CZ CZ941547A patent/CZ154794A3/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-01-24 SK SK211-92A patent/SK280130B6/sk unknown
- 1992-01-24 CA CA002059979A patent/CA2059979C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-01-24 JP JP4010797A patent/JP2651307B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1992-01-24 FI FI920342A patent/FI100111B/fi active
- 1992-01-24 HU HU9200225A patent/HU212362B/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-01-24 SK SK1633-98A patent/SK280989B6/sk unknown
- 1992-01-24 CZ CS92211A patent/CZ280297B6/cs not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-11-03 US US08/146,921 patent/US5409990A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-03-01 JP JP8044995A patent/JP2866047B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2098485T3 (es) | 1997-05-01 |
| EP0496725A2 (de) | 1992-07-29 |
| HUT63863A (en) | 1993-10-28 |
| US5281661A (en) | 1994-01-25 |
| SK280130B6 (sk) | 1999-08-06 |
| HU212362B (en) | 1996-06-28 |
| EP0496725A3 (en) | 1993-05-05 |
| US5409990A (en) | 1995-04-25 |
| ATA16391A (de) | 1996-08-15 |
| CA2059979C (en) | 2003-04-15 |
| FI920342L (fi) | 1992-07-26 |
| AT402261B (de) | 1997-03-25 |
| CS21192A3 (en) | 1992-08-12 |
| HU9200225D0 (en) | 1992-04-28 |
| JP2651307B2 (ja) | 1997-09-10 |
| CA2059979A1 (en) | 1992-07-26 |
| FI920342A0 (fi) | 1992-01-24 |
| JPH04295432A (ja) | 1992-10-20 |
| ATE146220T1 (de) | 1996-12-15 |
| SK280989B6 (sk) | 2000-10-09 |
| CZ280725B6 (cs) | 1996-04-17 |
| DE59207638D1 (de) | 1997-01-23 |
| CZ154794A3 (en) | 1996-04-17 |
| DK0496725T3 (da) | 1997-06-09 |
| JP2866047B2 (ja) | 1999-03-08 |
| FI100111B (fi) | 1997-09-30 |
| JPH08259449A (ja) | 1996-10-08 |
| EP0496725B1 (de) | 1996-12-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ280297B6 (cs) | Komplex obsahující srážecí faktor IX | |
| US6005082A (en) | Process for purification of factor VIII | |
| CZ328795A3 (en) | Concentrate of immunoglobulins g for therapeutical use and process for preparing thereof | |
| EP0131142A2 (en) | Process for recovering a cell wall protein | |
| JPH02218699A (ja) | 精製されたプロテインａ組成物及びそれらの調製方法 | |
| EP0140386A2 (en) | Method for the purification of LPF-HA | |
| SK22695A3 (en) | Isolation and purification method of proteins dependent from vitamin k | |
| JPS62501006A (ja) | 血友病ａ抑制患者の治療のための製剤及び該製剤の製造方法 | |
| EP0391974B1 (en) | Process for the purification of vitamin k-dependent blood clotting factors | |
| US5919909A (en) | Process for the preparation of factor IX from biological sources | |
| Josić et al. | Size-exclusion chromatography of plasma proteins with high molecular masses | |
| JP3043558B2 (ja) | ヒト活性化プロテインｃ調製物及びその製法 | |
| JPH1075778A (ja) | プロトロンビンおよびトロンビンに結合するペプチド | |
| US5445958A (en) | Process for purifying blood clotting factors | |
| JPS6034916A (ja) | 第１ｘ因子および他のビタミンｋ依存性タンパク質の高純度精製 | |
| JP2926728B2 (ja) | 蛋白質含有組成物の製造方法 | |
| EP0813597B1 (en) | A process for the purification of vitamin k dependent coagulation factors by chromatography | |
| AU627446C (en) | Chemical process | |
| Kizuki et al. | Porcine pancreatic prokallikrein. II. Purification and some properties of prokallikrein A | |
| JPH01148185A (ja) | 逆相液体クロマトグラフィーによるｔ−ＰＡ精製方法 | |
| CZ2000983A3 (cs) | Způsob čištění antithrombinu III | |
| CZ419391A3 (cs) | ) Způsob izolace plasminogenových aktivátorů použit elných jako terapeutická a diagnostická činidla |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20020124 |