CZ279299B6 - Nové sloučeniny pojmenované "LEUSTRODUCSINY", jejich příprava a terapeutické užití - Google Patents
Nové sloučeniny pojmenované "LEUSTRODUCSINY", jejich příprava a terapeutické užití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ279299B6 CZ279299B6 CS92915A CS91592A CZ279299B6 CZ 279299 B6 CZ279299 B6 CZ 279299B6 CS 92915 A CS92915 A CS 92915A CS 91592 A CS91592 A CS 91592A CZ 279299 B6 CZ279299 B6 CZ 279299B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- doublet
- leustroducsin
- leustroducsins
- triplet
- strain
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 33
- 239000000126 substance Substances 0.000 title description 22
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 241000593945 Streptomyces platensis Species 0.000 claims abstract description 16
- -1 5-methylhexanoyloxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 15
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims abstract description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 5
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 13
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 230000005978 brain dysfunction Effects 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 9
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 abstract description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 abstract 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 54
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 37
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 25
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 25
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 23
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 21
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 17
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 17
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 17
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 17
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 16
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 16
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 14
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 13
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 10
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WZBZEINGTVLIIY-VGHZCNFRSA-N [(1s,3r)-3-[(1z,3z,5r,7r,8r,9e)-8-(2-aminoethyl)-10-[(2s)-3-ethyl-6-oxo-2,3-dihydropyran-2-yl]-5,8-dihydroxy-7-phosphonooxydeca-1,3,9-trienyl]cyclohexyl] 7-methyloctanoate Chemical compound CCC1C=CC(=O)O[C@H]1\C=C\[C@](O)(CCN)[C@H](OP(O)(O)=O)C[C@@H](O)\C=C/C=C\[C@H]1C[C@@H](OC(=O)CCCCCC(C)C)CCC1 WZBZEINGTVLIIY-VGHZCNFRSA-N 0.000 description 8
- SNWWAFHAEURECF-OFOCFSLPSA-N [3-[(1z,3z,9e)-8-(2-aminoethyl)-10-(3-ethyl-6-oxo-2,3-dihydropyran-2-yl)-5,8-dihydroxy-7-phosphonooxydeca-1,3,9-trienyl]cyclohexyl] 5-methylhexanoate Chemical compound CCC1C=CC(=O)OC1\C=C\C(O)(CCN)C(OP(O)(O)=O)CC(O)\C=C/C=C\C1CC(OC(=O)CCCC(C)C)CCC1 SNWWAFHAEURECF-OFOCFSLPSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- ZYSAHMPRXHPPAK-QNIAGQLOSA-N leustroducsin b Chemical compound C1[C@@H](OC(=O)CCCC[C@@H](C)CC)CCC[C@H]1\C=C/C=C\[C@H](O)C[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@](O)(CCN)\C=C\[C@H]1[C@@H](CC)C=CC(=O)O1 ZYSAHMPRXHPPAK-QNIAGQLOSA-N 0.000 description 8
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 6
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 6
- 230000007085 granulocyte colony-stimulating factor production Effects 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 6
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical compound C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 5
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 5
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 5
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 5
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 4
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 4
- 230000014537 nerve growth factor production Effects 0.000 description 4
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 3
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- APUPEJJSWDHEBO-UHFFFAOYSA-P ammonium molybdate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O APUPEJJSWDHEBO-UHFFFAOYSA-P 0.000 description 3
- 239000011609 ammonium molybdate Substances 0.000 description 3
- 235000018660 ammonium molybdate Nutrition 0.000 description 3
- 229940010552 ammonium molybdate Drugs 0.000 description 3
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 3
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical compound C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 101710128742 Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 2 Proteins 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 229960002017 echothiophate Drugs 0.000 description 2
- BJOLKYGKSZKIGU-UHFFFAOYSA-N ecothiopate Chemical compound CCOP(=O)(OCC)SCC[N+](C)(C)C BJOLKYGKSZKIGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 2
- 210000003918 fraction a Anatomy 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 210000002536 stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical compound ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPSJGADGUYYRKE-UHFFFAOYSA-N 2H-pyran-2-one Chemical class O=C1C=CC=CO1 ZPSJGADGUYYRKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 1
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 101000775660 Anarhichas lupus Type-3 ice-structuring protein 1.5 Proteins 0.000 description 1
- 101000775628 Anarhichas lupus Type-3 ice-structuring protein 1.9 Proteins 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 235000007558 Avena sp Nutrition 0.000 description 1
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 206010008531 Chills Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710128746 Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 102100021243 G-protein coupled receptor 182 Human genes 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001040797 Homo sapiens G-protein coupled receptor 182 Proteins 0.000 description 1
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N Nitrous acid Chemical compound ON=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000643905 Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 3 Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000775697 Pseudopleuronectes americanus Ice-structuring protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000775692 Pseudopleuronectes americanus Ice-structuring protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 235000007238 Secale cereale Nutrition 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- GKHOLUJNLGYFHA-UHFFFAOYSA-N [Na].CC(C)=O Chemical compound [Na].CC(C)=O GKHOLUJNLGYFHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000001857 anti-mycotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000002543 antimycotic Substances 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000003139 biocide Substances 0.000 description 1
- 230000003925 brain function Effects 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003710 calcium ionophore Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 229940008396 carrot extract Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical group NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000011748 cell maturation Effects 0.000 description 1
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N dioxouranium;nitric acid Chemical compound O=[U]=O.O[N+]([O-])=O.O[N+]([O-])=O MKYNHKOAYQRSBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229910052571 earthenware Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical class CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CJAONIOAQZUHPN-KKLWWLSJSA-N ethyl 12-[[2-[(2r,3r)-3-[2-[(12-ethoxy-12-oxododecyl)-methylamino]-2-oxoethoxy]butan-2-yl]oxyacetyl]-methylamino]dodecanoate Chemical compound CCOC(=O)CCCCCCCCCCCN(C)C(=O)CO[C@H](C)[C@@H](C)OCC(=O)N(C)CCCCCCCCCCCC(=O)OCC CJAONIOAQZUHPN-KKLWWLSJSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 210000002196 fr. b Anatomy 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 102000046157 human CSF2 Human genes 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- HCWCAKKEBCNQJP-UHFFFAOYSA-N magnesium orthosilicate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] HCWCAKKEBCNQJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000391 magnesium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052919 magnesium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019792 magnesium silicate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N n-[4-(1,3-benzoxazol-2-yl)phenyl]-4-nitrobenzenesulfonamide Chemical class C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1S(=O)(=O)NC1=CC=C(C=2OC3=CC=CC=C3N=2)C=C1 SYSQUGFVNFXIIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 239000006877 oatmeal agar Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 150000004633 phorbol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002644 phorbol ester Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 229940080313 sodium starch Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N talc Chemical compound [Mg+2].[O-][Si]([O-])=O FKHIFSZMMVMEQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 229940100445 wheat starch Drugs 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
- C07F9/6552—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a six-membered ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/74—Synthetic polymeric materials
- A61K31/80—Polymers containing hetero atoms not provided for in groups A61K31/755 - A61K31/795
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/886—Streptomyces
- Y10S435/903—Streptomyces platensis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Nové sloučeniny vzorce I, kde R představuje 5-methylhexanoyloxyskupinu, 6-methyloktanoyloxy- skupinu nebo 7-methyloktanoyloxyskupinu a od nich odvozené soli. Tyto látky mohou být připraveny fermentací za použití mikroorganismu z rodu Streptomyces, obzvláště kmene čeledi Streptomyces platensis, jako je kmen SANK 60191 (FERM BP-3288). Tyto látky mohou být použity pro léčbu a prevenci vedlejších účinků při chemotherapii a radiotherapii rakoviny, infekcí, rakoviny, mozkové dysfunkci a mykotické infekci.ŕ
Description
(57) Anotace:
Leustroducsiny vzorce I, kde R představuje 5methylhexanoyloxyskupinu, 6-methyloktanoyloxyskupinu nebo 7-methyloktanoyloxyskupinu a od nich odvozené soli. Tyto látky mohou být připraveny fermentací za použití mikroorganismu z rodu Streptomyces, obzvláště kmene čeledi Streptomyces platensis, jako je kmen SANK 60191 (FERM BP-3288). Tyto látky mohou být použity pro léčbu a prevenci vedlejších účinků při chemotherapil a radlotherapil rakoviny, infekcí, rakoviny, mozkové dysfunkci a mykotické infekci.
Leustroducsiny A, B, C, způsob výroby těchto látek, produkční mikroorganismus a farmaceutický prostředek s obsahem leustroducsinů
Oblast techniky
Tento vynález zahrnuje sérii nových látek, nazvaných Leustroducsin A, Leustroducsin B a Leustroducsin C. Tyto látky mají vzorec I, jak ukázáno dále. Vynález se také týká způsobu výroby těchto látek fermentací při použití mikroorganismu z rodu Streptomyces a obzvláště kmen čeledi Streptomyces platensis, který je také nový a je také součástí vynálezu. Vynalezené přípravky mají množství terapeutických účinků a vynález se týká také jejich sloučenin a metod léčby a prevence při použití těchto sloučenin.
Leustroducsiny tohoto vynálezu jsou nové látky, které simulují produkci hernatopoetických faktorů, jako je koloniestimulující faktor (dále zkráceno jako G-CSF), granulocyty a makrofágy koloniestimulující faktor (dále zkráceno jako GM-CSF), také stimulují tvorbu nervového růstového faktoru (dále zkráceno jako HGF), a co více , prokazují antimykolický účinek, tj. účinek proti Tricophyton mentagrophytes.
Dosavadní stav techniky
Různé druhy cytokinů s hematopoetickou aktivitou, jako kolonie stimulující faktory (dále zkráceno jako CSF) a několik druhů glykoproteinů (obecně zvané interleukiny) musí být připraveny technikami genové manipulace. Klinicky se tyto látky používají k různým způsobům snížení vedlejších účinků obvykle způsobených protirakovinnou chemoterapii a radioterapii a k léčbě infekcí. V poslední době se ukázala účinnost těchto látek /Br. J. Cancen, 59., 2 až 5, 1989/.
Bylo zjištěno, že podání těchto faktorů samotných, lidem různými cestami má jasné farmakologické účinky, což vede k možnému použití těchto faktorů v terapii. Nicméně se soudí, že tyto faktory jsou vytvářeny hlavně in vivo určitým druhem buněk (tj. lymfocyty, monocyty, fibroblasty, endoteliálními buňkami v cévách a buňkami dřeně) jako součást komplikovaného regulačního systému a že mají homeostatickou úlohu při tvorbě různých druhů krevních buněk. Z toho plyne, že jestliže jsou tyto faktory podány bez zřetele na jemnou rovnováhu tohoto regulačního systému, mohou se projevit vedlejší účinky, které mohou být způsobeny nerovnováhou v tomto regulačním mechanismu; příklady takovýchto vedlejších účinků zahrnují zánět v místě infekce, bolesti v kostech, rigor a horečku.
Na druhou stranu místo podávání hematopoetických faktorů samotných by mohlo být možné podat určité látky, o kterých je známo, že stimulují produkci těchto hematopoetických faktorů v těle. Například je známo, že interleukin 1 (dále jen IL-1) a nádor nekrotizující faktor (dále jen TNF) mohou indukovat produkci CSF atd. v různých druzích buněk. Nicméně tyto faktory nemohou vždy působit jako specifické induktory hematopoetických faktorů, protože také mají různé jiné biologické účinky.
-1CZ 279299 B6
Je také známo, že různé druhy nízkomolekulárních imunoaktivátorů jako jsou lipopolysacharidy (dále jen LPS) a muramyldipeptidy (dále jen HDP) mohou produkovat různé druhy CSF aktivací monocytů a makrofágů. Nicméně je známo, že další fyziologické účinky způsobené aktivací makrofágů, například produktu monokinů jako je IL-1 a TNF, se objeví současně, což může vést k různým vedlejším účinkům jako je horečka (Nippon Acta Radiologica 4_8, 4, 514, 1988).
O forbolesterech a kalcium ionofořech je známo, že synergicky indukují tvorbu CSF (Kohama a další, Experimental Hematology 16, 603 až 608, 1988), nicméně je také známo, že stimulují nejen produkci hematopoetických faktorů, ale i produkci a sekreci všech vylučovaných proteinů, včetně hormonů jako je inzulín (Y. Nishizuka, Science 225, 1365, 1984).
Ačkoliv přesný mechanismus zatím ještě nebyl objasněn, soudí se že ve formaci krvinek různé druhy zralých krvinek mohou být vytvořeny ze společného buněčného prekursoru, nazývaného hematopoetická kmenová buňka, pod vlivem různých hematopoetických faktorů a buněčných interakcí. Je prokázáno, že místem zrání krevních buněk u normálního dospělého je pouze kostní dřeň, že buňky stromatu nacházející se v kostní dřeni hrají významnou roli v procesu zrání krevních buněk (Dexter a další, J. Cell. Physiol. 91, 335, 1977), a že buňky stromatu v kostní dřeni produkují různé hematopoetické faktory (Harigaya a další, Proč. Nati. Acad. Sci., USA 82., 3477, 1985; Kohama a další, Experimental Hematology 16, 603 až 608, 1988).
Z toho důvodu jestliže látka, která stimuluje produkci hematopoetických faktorů buňkami stromatu může být nalezena, tato látka by nejenom hrála důležitou roli při analýze hematopoetických mechanismů za fyziologických podmínek a v patologii hematologických onemocnění, ale může mít také rozsáhlé klinické užití.
V EP č. 329 361 je uveřejněno nove 2-pyranon deriváty, které zahrnují přípravky tohoto vynálezu s výjimkou toho, že se liší v povaze skupiny R, definované dále. 0 těchto dříve zmíněných přípravcích je pouze známo, že jsou zemědělskými biocidy a není publikováno, že by měly cenné a neočekávané léčebné a preventivní účinky přípravků současného vynálezu. Ačkoliv dříve zmíněné látky jsou produkovány, jako i přípravky současného vynálezu, mikroorganismem z druhu Streptomyces platensis, poddruh popsaný v předešlém dokumentu je zřejmě jasně odlišný od poddruhu popisovaného zde.
Velmi podobné látky a mikroorganismy, mající v podstatě stejný objevený užitek, jsou popsány v japonském patentu Kokai Hei 2-186, a o těchto se opět soudí, že jsou jasně odlišné od přípravků a mikroorganismů popsanému zde.
Journal of Antibiotics, svazek XLII, č. 9, str. 1331, uveřejňuje nový protinádorový přípravek, který autoři nazývají Phospholine a který je produkován mikroorganismem rodu Streptomyces, který byl tehdy nově izolován. Nicméně je jasně řečeno, že je to Streptomyces hydroscopicus a je odlišný od Streptomyces platensis, který je užit v současném vynálezu. Navíc ačkoliv dříve zmíněný phospholine, jako i přípravky současného vynálezu,
-2CZ 279299 B6 >má aminoskupinu i fosforečnou skupinu, má odlišný molekulární vzorec a proto je jasně odlišen.
Podstata vynálezu
Úkolem tohoto vynálezu je poskytnout skupinu nových sloučenin fosforických kyselin, které mají řadu farmakologických účinků.
Soudí se především, že přípravky vynálezu mají následující účinky: redukují nepříznivé reakce plynoucí z chemoterapie nebo radioterapie rakoviny, chrání před infekcemi, aktivůjí makrofágy a proto mají protirakovinný účinek, zlepšují mozkovou funkci a navíc působí jako antimykotičtí činitelé.
Podstatu vynálezu tvoří leustroducsiny A, vzorce I
B, C, obecného
kde
R znamená 5-methylhexanoyloxyskupinu, 6-methyloktanoyloxyskupinu nebo 7-methyloktanoyloxyskupinú a soli od nich odvozené. Tyto látky byly nazvány Leustroducsin A, Leustroducsin B a Leustroducsin C.
Vynález se také týká způsobu výroby leustroducsinů, který zahrnuje kultivaci leustroducsin produkujícího mikroorganismu z rodu Streptomyces a izolaci alespoň jednoho leustroducsinu z kultury.
Vynález se také týká farmaceutického prostředku obsahujícího nejméně jeden leustroducsin nebo od něj odvozenou sůl ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo rozpouštědlem.
Vynález umožňuje léčbu nebo prevenci: nežádoucích účinků plynoucích z chemotherapie nebo radiotherapie rakoviny, infekcí, rakoviny mozkových dysfunkcí a mykotických infekcí, kde jde o podání efektivního množství nejméně jednoho leustroducsinu nebo soli od něj odvozené savci, což může být člověk trpící takovými reakcemi, infekcemi, rakovinou nebo dysfunkcí nebo s podezřením na shora zmíněné stavy.
χ
CZ 279299 Β6
Tři leustroducsiny podle vynálezu jsou:
Leustroducsin A:
Leustroducsin B:
Leustroducsin C:
-4CZ 279299 B6
Je jasné ze shora uvedených vzorců, že leustroducsiny podle vynálezu obsahují množství asymetrických atomů uhlíků a několik dvojných vazeb. Proto mohou tvořit různé optické a geometrické isomery. Ačkoliv jsou zde representovány jedním molekulovým vzorcem, vynález zahrnuje jak jednotlivé izolované isomery, tak směsi obsahující racemáty z nich vytvořené. Kde jsou použity stereospecifické syntetické postupy nebo kde jsou opticky aktivní látky jako výchozí materiál, tam mohou být jednotlivé isomery připraveny přímo, na druhou stranu, jestliže je připravena směs isomerů, jednotlivé isomery mohou být získány konvenčními izolačními metodami .
Leustroducsiny podle vynálezu mohou být připraveny kultivací leustroducsin produkujícího mikroorganismu z rodu Streptomyces a potom izolací jednoho nebo více leustroducsinů z kultivačního média.
Co se mikroorganismu týče, je nutno dát přednost zejména nově izolovanému kmeni rodu Streptomyces, který patří k čeledi Streptomyces platensis a byl označen SANK 60191 (FERM BP-3288).
Tento mikroorganismus byl uložen podle podmínek Budapešťské dohody ve Fermentation Research Institute, Agency of Industrial Science and Technology, 20. února 1991 s přírůstkovým číslem FERM BP-3288.
Podrobnosti o mikrobiologických vlastnostech Streptomyces platensis SANK 60191 (FERM BP-3288) jsou popsány níže:
1. Morfologické charakteristiky
Streptomyces platensis SANK 60191 byl kultivován 14 dní při teplotě 28 °C na agarovém médiu definovaném ISP (International Streptomyces Project). Při mikroskopickém pozorování po 15 denní kultivaci bylo shledáno, že mycelium substrátu tohoto kmene se prodloužilo a dobře větvilo a bylo zbarveno žlutošedě nebo světle žlutooranžově. Nicméně ani fragmentace ani zig-zag elongace, které jsou pozorovatelné u Nocedioformních aktinomycet nebyly pozorovány. Větvení aeriálního mycelia bylo jednoduché. Řetězce spor byly ve tvaru volné spirály, řetězec byl tvořen 10 až 50 sporami. Povrchová struktura spor pozorovaná skanovacím elektronovým mikroskopem byla hladká. Spory byly avoidní nebo oválné s rozměrem 0,5 až 0,6 x 0,6 až 1,3 μιη. Shluky vzdušného mycelia, sklerotia, fragmentace hyf a specifické orgány jako jsou sporangia nebyly nalezeny.
2. Vlastnosti na různých druzích kultivačního prostředí
Tabulka 1 ukazuje vlastnosti mikroorganismu po 14 denní kultivaci při 28 ‘C na různých druzích kultivačních médií. Barvy jsou udány typovým číslem pro barvy podle Guide to Color Standard vydaného Nippon Shikisai Kenkuysho, rmen produkuje kapalinu a jeho barva se mění do černé v průběhu času.
V tabulce jsou užity následující zkratky:
G: růst, AM: aeriální mycelium, R: zadní strana kultury, SP: rozpustný pigment, SC: specifický charakter.
-5CZ 279299 B6 médium položka vlastnosti SANK 60191
Tabulka 1
| sacharozonitrátový agar | G AM R SP | dobrý, hladký, bledě žlutooranžový (2-9-9) dobré, sametové, světle hnědošedivé (2-7-8) bledě hnědá (2-8-9) žádné formace |
| gluko.soasparaginový | G | dobrý, hladký, bledě žluto- |
| agar | AM | oranžový (2-9-9) střední, sametové, bílé |
| R | bledě hnědé (2-8-9) | |
| SP | žádné formace | |
| glycerolasparaginový | G | velmi dobrý, hladký, bledě |
| agar (ISP 5) | AM | žlutooranžový (2-9-9) střední, sametové, hnědošedé (2-6-8) |
| R | světle žlutavěhnědá (4-8-9) | |
| SP | žádné formace | |
| anorganický | G | dobrý, hladký, bledě žluto- |
| solnoškrobový agar | oranžový (2-9-9) | |
| (ISP 4) | AM | dobré, sametové, hnědobílé (1-6-6) |
| R | hnědošedé (2-5-9) | |
| SP | žádné formace | |
| SC | vzdušné hyfy jsou vlhké a mění barvu do černá | |
| tyrosinový agar | G | velmi dobrý, hladký, bledě |
| (ISP 7) | AM | žlutooranžový (2-9-9) dobré, sametové, bílé, světlehnědošedé |
| R | skvrny (2-7-8) bledě žlutohnědá (4-8-9) | |
| SP | žádné formace | |
| výživný agar | G | dobrý, hladký, bledě žluto- |
| (DIFCO) | AM | oranžový (2-9-9) střední, sametové, bílé |
| R | bledě žlutohnědá (4-8-9) | |
| SP | žádné formace |
| agar s kvasinkovým | G | velmi dobrý, hladký, bledě |
| a sladovým extraktem | žlutooranžový (2-9-9) | |
| (ISP 2) | AM | hojné formace, sametové, světle hnědobílé (1-7-6) |
| R | bledě žlutohnědá (6-7-9) | |
| SP | žádné formace | |
| SC | vzdušné hyfy jsou vlhké a mění barvu do černá |
-6CZ 279299 B6
Tabulka 1 - pokračování
| agar s ovesnou moukou (ISP 3) | G | dobrý, hladký, bledě žlutooranžový (2-9-9) |
| AM | dobré, sametové, tmavě hnědošedé (1-4-6) | |
| R | žlutavěhnědá (4-6-9) | |
| SP | žádné formace | |
| vodný agar | G | střední, hladký, žlutavě šedý (1-9-10) |
| AM | střední, sametové, hnědavěšedé (2-5-8) | |
| R | světle hnědošedá (2-7-8) | |
| SP | žádné formace | |
| agar s bramborovým a | G | střední, hladký, žlutavě- |
| mrkvovým extraktem | AM | šedý (1-9-10) střední, sametové, hnědavě šedé (2-5-8) |
| R | světle hnědavěšedá (2-7-8) | |
| SP | žádné formace |
3. Fyziologické vlastnosti
Fyziologické vlastnosti poddruhu SANK 60191 pozorované v období od 2. do 21. dne po začátku kultivace při 28 °C ukazuje tabulka 2.
Tabulka
Hydrolýza škrobu zkapalnění želatiny redukce nitrátu koagulace mléka peptonizace mléka produkce melanoidního pigmentu (médium l)x (médium 2) (médium 3)
Rozklad substrátu kasein tyrosin xanthin
Růstové teplotní rozmezí (médium 4)
Optimální růstová teplota (médium 4)
Tolerance chloridu sodného positivní negativní negativní negativní negativní negativní negativní negativní negativní positivní positivní až 35 °C až 26 °C %
-7CZ 279299 B6 x Médium 1,
2,
3,
4,
Tryptonovokvasinkový extrakt bujónu (ISP 1) Peptonovokvasinkový extrakt železitého agaru (ISP 6) Tyrosinový agar (ISP 7)
Agar s kvasinkovým a sladovým extraktem (ISP 2)
Kmen SANK 60191 byl také kultivován při 28 °C na Pridham-Gottliebově agaru (ISP 9) jako kultivačním médiu. Tabulka 3 ukazuje vzorec utilizace zdrojů uhlíku pozorovaný po 14 denní kultivaci.
Tabulka 3
| D-glukóza | + | D-fruktóza | + |
| L-arabinóza | - | L-ramnóza | - |
| D-xylóza | - | sacharóza | + |
| inositol | + | rafinosa | + |
| D-mannitol | + | kontrola | - |
| + = utilizace | positivní | ||
| - = utilizace | negativní | ||
| 4. Buněčné komponenty |
Buněčné stěny kmene SANK 60191 byly analyzovány metodou B. Bechera a dalších, Apolied Microbiology, 12., 421 až 423 , 1984. Jelikož byla detekována LL-diaminopimelová kyselina, bylo potvrzeno, že buněčné stěny jsou typu I. Celkové buněčné cukerné složky kmene SANK 60191 byly analyzovány metodou Μ. P. Lechevalier, Journal of Laboratory and Clinical Medicine, 71, 934, 1968. Žádné zvláštní složení nebylo pozorováno.
Podle těchto mikrobiologických vlastností bylo potvrzeno, že kmen náleží k rodu Stréptomyces patřícímu mezi Aktinomycety. Ve srovnání s kmeny popsanými v TSP E. B. Shirlingen a D. Gottliebem, Internationál Journal of Systematic Bacteriology 18., 68 až 189, 1968, 18, 279 až 392, 1968, 19, 391 až 512, 1969, 22 , 265 až 394, 1972, a kmeny popsanými jinde jako v The Aclinomycetes, sv. 2 od S. A. Waksmana, Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 8. edice (1974) editované R. E. Buchananem a N. E. Gibbonsem, Bergey's Manual of Systematic Bacteriology, sv. 4 (1989) a v další současné literatuře o aktinomycetách, se soudí, že tento kmen je velmi blízký Streptomyces platensis.
Navíc, po kultivaci v kapalném médiu při použití kvasinkovodextrozového média, kmen SANK 60191 vyprodukoval rozpustný pigment s jasnou červenavěhnědou barvou. Po přidání roztoku 0,05N vodné chlorovodíkové kyseliny se barva změnila na žlutou a po přidání 0/05N vodného hydroxidu sodného nebyla pozorována žádná změna.
Streptomyces platensis vytváří červenavý nebo žlutavý pigment při kultivaci na agaru s kvasinkovým a sladovým extraktem, agaru s ovesnou moukou, anorganickém sodnoškrobovém agaru, glycerolasparaginovém agaru. Na druhou stranu kmen SANK 60191 skoro neprodukoval žádný z těchto pigmentů, což poukazuje na rozdíl mezi tímto kmenem a známými kmeny Streptomyces platensis. Nicméně protože kmeny, a známé kmeny mohou být rozlišeny pouze podle rozdílu v produkci rozpustných pigmentů, SANK 60191 byl identifikován jako nový kmen Streptomyces platensis.
-8CZ 279299 B6
Bylo zjištěno, že kmen SANK 60191 vytváří leustroducsiny. Nicméně je dobře známo o vlastnostech hub obecně a o aktinomykolických mikroorganismech obzvláště, že se značně mění a tyto houby mohou snadno mutovat, jak přírodní cestou, tak jako výsledek umělé indukce (například ultrafialového záření, radioaktivního záření, chemickou cestou, atd.). Proto vynález zahrnuje použití jakéhokoliv mikroorganismu patřícího do rodu Streptomyces a sdílejícího s kmenem SANK 60191 charakteristickou schopnost vytvářet leustroducsiny. Neočekává se, že by nový mikroorganismus, kmen SANK 60191, byl výjimečný, a označení SANK 60191 je proto užito k zahrnutí všech mutant tohoto kmene, které sdílí s kmenem SANK 60191 charakteristickou schopnost tvorby leustroducsinů. Navíc tyto mutanty zahrnují takové, které byly získány technikami genového inženýrství, například: rekombinací, transdukcí, transformací nebo podobně. Je to věc prostého experimentu určit, na základě zde dané informace týkající se vlastností leustroducsinů, jestli daný kmen produkuje tyto látky vůbec nebo je produkuje v dostatečném množství pro potenciální komerční zájem.
Kromě nového kmene Streptomyces platensis popsaného shora, bylo také zjištěno, že již známý Streptomyces platensis SAM-0654 (uložený ve Fermentation Research Institute, Japonsko pod přírůstkovým číslem FERM BP-1668 22. ledna 1988) také produkuje leustroducsiny vynálezu. Tento již známý kmen je plně popsán v evropském patentu č. 329 361, protože uveřejněni je zde zahrnuto.
Leustroducsiny podle vynálezu mohou být připraveny kultivováním těchto kmenů hub v kultivačním médiu běžně užívaném pro výrobu ostatních fermentačních produktů podobných mikroorganismů. Tato média nezbytně obsahují mikrobiologicky využitelné zdroje uhlíku a dusíku, jakož i anorganické soli, jak je dobře známo odborníkům.
Preferované zdroje uhlíku zahrnují: glukózu, fruktózu, maltosu, sacharosu, mannitol, glycerol, dextrin, ovesný, žitný, pšeničný škrob, bramborový škrob, kukuřičnou mouku, mouku ze sójových bobů, mouku z bavlníkových semen, olej ze semen bavlny, melasu, kyselinu citrónovou, kyselinu vinnou a podobné. Tyto přípravky mohou být užity samotné nebo v jakékoliv vhodné kombinaci. Obecně může určité množství kolísat v rozmezí od 1 do 10 % hmot, kultivačního média.
Preferovanými zdroji dusíku jsou obvykle takové bílkovinu obsahující látky, jaké jsou obecně používané při fermentačním procesu. Příklady těchto zdrojů dusíku zahrnují: mouku ze sojových bobů, pšeničné otruby, mouku z burských oříšků, mouku ze semen bavlny, olej ze semen bavlny a pokrutiny ze semen bavlny, kaseionový hydrolyzát, femamin, rybí moučku, kukuřičný výluh, pepton, extrakt z masa, droždí, extrakt z kvasnic, sladový extrakt, dusičnan sodný nebo amonný, síran amonný a podobně. Tyto zdroje dusíku mohou byt užity samotné nebo v jakékoliv vhodné kombinaci. Obecně se dává přednost jejich použití v koncentracích od 0,2 do 6 % hmot, kultivačního média.
Živné anorganické soli, které mohou být včleněny do kultivačního média jsou běžné soli schopné pokrýt různé ionty nezbytné pro růst mikroorganismů, jako je sodík, amonný ion, kalcium, fosfát, sulfát, chlorid a uhličité ionty. Navíc by mělo médium obsahovat menší množství esenciálních stopových prvků, jako je draslík, vápník, kobalt, magnesium, železo a mangan.
Jestliže způsob podle vynálezu je proveden v tekutém prostředí, měla by být přidána protipěnivá látka jako silikonový olej, rostlinný olej nebo povrchově aktivní látka. pH kultivačního média pro produkci leustroducsinů kultivací mikroorganismů rodu Streptomyces, obzvláště kmene SANK 60191 se přednostně pohybuje v rozmezí od 5,0 do 8,0 a ještě lépe od 5,0 do 7,0.
Kultivace může probíhat za jakékoliv teploty v rozmezí od 9 do 37 °C. Nicméně růst probíhá dobře při teplotním rozmezí od 20 “C do 35 ’C a proto se dává přednost této teplotě. Teploty 22 až 30 °C se přednostně používá za účelem optimalizace produkce leustroducsinů.
Látky jsou produkovány za aerobních podmínek a za použití běžných aerobních kultivačních metod, jako je pevná kultura, třepací kultura a submersní kultura. V případě kultivování v malém měřítku je typicky užívána třepací kultivace po několik dní·při 28 °C. V takovém malém měřítku, kultura může být iniciována 1 nebo 2 proliferačnimi stupni a produkovat očkovací kultury pro například Erlenmeyerovy lahve vybavené přepážkami, které slouží jako regulátor průtoku tekutiny. Prostředí očkovacích kultur s výhodou obsahují jak uhlíkové, tak dusíkové zdroje. Obvyklý postup operací pro tyto kultivace v malém měřítku je: lahve s očkovací kulturou jsou třepány v inkubátoru za konstantní teploty 28 °C po tři dny nebo pokud není dosažen dostatečný růst. Vzrostlá očkovací kultura je potom přenesena do druhého očkovacího média nebo do produkčního média. Když je použita střední růstová fáze, tak se užívá naprosto stejná metoda pro růst a zbytek výsledného intermediálního produktu je inokulována na produkční médium. Inokulovaná láhev může být inkubována po několik dní za neustálého třepání a po zakončení inkubace, obsah lahve může být centrifugován nebo filtrován.
V případě inkubace ve velkém měřítku se dává přednost použití příslušného fermentačního zařízení s mícháním a provzdušňováním. V tomto případě živné médium může být připraveno uvnitř fermentoru. Dává se přednost sterilizaci média zvýšením teploty na vhodnou teplotu, například 120 až 125 °C, po ochlazení může být médium inokulováno dříve připravenou očkovací kulturou. Kultivace potom pokračuje za míchání a provzdušňování při vhodné teplotě, například 28 C. Tato metoda je vhodná pro získání látek podle vynálezu ve velkém množství.
Změna v množství leustroducsinů produkovaných v průběhu kultivační doby může být monitorována vhodnými způsoby jako například vysoce výkonnou kapalinnou chromatografií. Nejčastěji množství produkovaných leustroducsinů dosahuje maxima po době od 48 do 96 hodin.
Po zakončení kultivace leustroducsiny zbývající v tekuté části kultivačního média a v bakteriálních buňkách mohou být extrahovány a čištěny běžnými způsoby, za použití fyzikálních a chemických vlastností leustroducsinů. Například leustroducsiny přítomné ve filtrátu nebo supernatantu mohou být extrahovány
-10CZ 279299 B6 organickým rozpouštědlem ve vodě rozpustným, jako je ethylacetát, chloroform, ethylenchlorid, methylenchlorid nebo butanol (nebo směsí jakýchkoli dvou nebo více těchto rozpouštědel) v kyselém prostředí; potom mohou být čištěny běžnými metodami. Je také možné odstranit jakékoliv nečistoty extrakcí jedním nebo více dříve zmíněných rozpouštědel za běžných podmínek. Alternativně mohou být nečistoty odstraněny adsorbcí při průtoku kapaliny obsahující leustroducsiny přes vrstvu vhodného adsorbentu a nebo leustroducsiny mohou být adsorbovány na vhodném adsorbentu a potom vymyty za použití vhodného eluentu jako je vodný roztok methanolu, acetonu nebo butanolu. Příklady vhodných adsorbentů, které mohou být užity v těchto postupech zahrnují aktivní uhlík a adsorbční pryskyřice jako je Amberlit XAD-4 (Rohm and Haas) nebo Diaion HP-10, HP-20, CHP-20, HP-50 (Mitsubishi Chemical Industries Co.). Leustroducsiny obsažené v buňkách mohou být získány extrakcí vhodným rozpouštědlem jako je 50 až 90 % objemové koncentrace vodného roztoku acetonu nebo methanolu následovaná odstraněním organického rozpouštědla a potom může být produkt podroben podobné extrakci a čištění jako bylo popsáno shora pro filtrát.
Leustroducsiny takto získané mohou být dále čištěny dobře známými technikami, například absorpční chromatografii na sloupci za použití nosiče, jako je silikagel nebo hořečnatokřemičitý gel, například prodávaný pod obchodní značkou Florisil, dělicí chromatografii na sloupci za použití adsorbentu jako je Sephadex LH-20 (Pharmacia) nebo HPLC, používající normální fázi nebo sloupce s reversní fází. Jak je dobře známo, tyto izolační a čisticí postupy se mohou užívat samotné nebo v jakékoliv vhodné kombinaci a je-li třeba opakovaně, aby se izolovaly a vyčistily požadované leustroducsiny.
Leustroducsiny podle vynálezu jsou nové přípravky, které nebyly v literatuře dosud popsány. Stimulují produkci hematopoetických faktorů, jako je G-CSF a GM-CSF, u živočichů, jako jsou lidé, psi , kočky a králíci a jsou proto užitečnými terapeutickými látkami pro snížení vedlejších účinků způsobených chemotherapií a radiotherapií při léčbě rakoviny, také brání infekci a vykazují protirakovinný efekt aktivací makrofágů. Navíc se očekává, že leustroducsiny budou užitečné pro zlepšení mozkového metabolismu stimulací produkce HGF. Dále jsou užitečné jako antimykotické látky a prokázaly antimykotický účinek proti Tricophyton metagrophytes.
Schopnost leustroducsinů stimulovat produkci hematopoetických faktorů v souladu s vynálezem může být v podstatě vyzkoušena metodou podle Kohama a dalších, Experimental Hematology 16, 603 až 608 (1988). Tato metoda kombinuje produkční systém různých hematopoetických faktorů a zkušební systém různých hematopoetických faktorů. Například KM-102 buňky, které jsou odvozeny ze stromálních buněk lidské kostní dřeně, mohou být užity k produkci různých hematopoetických faktorů. Nicméně jakákoliv buňka schopná produkce různých hematopoetických faktorů může být užita místo nich, například primárně kultivované stromální buňky kostní dřeně, cévní endoteliální buňky, lymfocyty nebo makrofágy, které existuji v kostní dřeni. Testovací vzorek látky, jejíž aktivita má být zhodnocena, je naředěn na vhodnou koncentraci a přidán do kultivačního systému obsahujícího buňky, které produkují různé
-11CZ 279299 B6 hernatopoetické faktory (HF- produkující buňky). Po vhodné době, obvykle 24 hodinách, je část supernatantu kultivačního prostředí odebrána a přidána do kultivačního systému buněk, které jsou závislé na různých hematopoetických faktorech, například TF-1 buňky a NFS-60 buňky (HF-dependentní buňky), ve vhodné koncentraci. Po jisté době, může být množství hematopoetických faktorů měřeno změřením růstu HF-dependentních buněk, a tak může být otestována schopnost látky stimulovat produkci různých hematopoetických faktorů. Růst HF-dependentních buněk může být určován jakoukoliv běžnou metodou, jako je inkorporace tritiumthymidinu do buněk nebo užití MTT, 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-difenyltetrazolium bromidu (Chemicon International lne., USA). Testování různých hematopoetických faktorů může být provedeno libovolnou běžnou metodou, jako je tvorba kolonií nebo ELISA.
Leustroducsiny podle vynálezu obsahují jak kyselou skupinu (kyselinu fosforečnou), tak zásaditou skupinu (aminoskupinu) a proto mohou tvořit soli. Není žádné výslovné omezení týkající se povahy těchto solí za předpokladu, že jsou-li zamýšleny pro terapeutické užití, tak jsou farmaceuticky přijatelné. Kde jsou zamýšleny pro netherapeutické užití., tj. jako meziprodukty pro přípravu dalších, možná více aktivních látek, toto omezení neplatí. Sloučeniny podle vynálezu mohou tvořit soli se zásadami. Příklady těchto solí zahrnují soli s alkalickým kovem, jako je sodík, draslík nebo lithium, soli s kovem alkalických zemin, jako je baryum nebo vápník, soli s jiným kovem, jako je hořčík nebo hliník, soli s organickými zásadami, jako je sůl s dicyklohexylaminem a soli s bazickou aminokyselinou, jako je lysin nebo arginin. Sloučeniny podle vynálezu mohou také tvořit od kyselin odvozené soli. Příklady takovýchto od kyselin odvozených solí zahrnují: soli s minerálními kyselinami, především s halogenovými kyselinami, jako je fluorovodíková kyselina, bromovodíková kyselina, jodovodíková kyselina nebo chlorovodíková kyselina, s kyselinou dusitou, kyselinou chloristou, kyselinou uhličitou, kyselinou siřičitou nebo kyselinou fosforečnou, soli s nižšími alkylsulfonovými kyselinami nebo ethansulfonovými kyselinami, soli s arylsulf onovými kyselinami, jako je benzensulfonová kyselina nebo p-toluensulfonová kyselina, soli s organickými karboxylovými kyselinami, jako je kyselina octová, kyselina fumarová, kyselina vinná, kyselina šťavelová, kyselina maleinová, kyselina jablečná, kyselina jantarová, kyselina citrónová a soli s aminokyselinami, jako je kyselina glutamová nebo kyselina asparagová.
Jsou-li tyto látky zamýšleny k terapeutickému užití, mohou být podány samotné nebo ve vhodném farmaceutickém prostředku, obsahujícím kromě aktivní látky jedno nebo více aktivních rozpouštědel, nosičů, nosných prostředí nebo pomocných látek. Povaha přípravku bude samozřejmě záviset na zamýšlené cestě podání. Pro perorální podání jsou sloučeniny především upraveny jako prášky, granule, tablety, kapsle nebo sirupy. Pro parenterální podání jsou především upraveny jako injekce, které mohou být intravenosní, intramuskulární nebo subkutánní nebo jako kapky nebo čípky. Tyto lékové formy mohou být připraveny známými způsoby přidáním dalších látek, jako jsou nosič, pojivá, desintegrátory, kluzné látky, stabilizátory, korigencia, pomocná rozpouštědla,. suspendující látky nebo povlaky. Ačkoliv je dávka různá v závislosti na symptomech a věku pacienta, povahy a závažnosti onemocnění nebo poškození a na cestě a způsobu podání v případě
-12CZ 279299 B6 perorálního podání dospělému člověku nebo má být sloučenina podle vynálezu obvykle podána v denní dávce od 1 mg do 1 000 mg. Přípravek může být podán v jediné dávce nebo v rozdělených dávkách, například dvakrát nebo třikrát denně.
Příprava sloučenin podle vynálezu je dále ilustrována následujícími neomezujícími příklady.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Kultivace a izolace leustroducsinů
1(A) Kultivace
Jedna plná platinová smyčka spor Stréptomyces platensis SANK 60191 byla naočkována do 500 ml Erlenmeyerovy baňky vybavené přepážkami a obsahující 100 ml předem sterilovaného kultivačního prostředí (viz složení popsané níže), a mikroorganismus byl kultivován tři dny při 28 °C a 200 rpm (rotační poloměr 7 cm) při použití rotační třepačky.
Kultivační prostředí:
rozpustný škrob 30g syrové droždí 10g sojový prášek ( z bobů) 7g rybí moučka 5g kukuřičný výluh 2g masový extrakt 1g uhličitan vápenatý 1g voda do 1 000 ml pH 7 (před sterilizací).
litrů stejného kultivačního média jako bylo užito pro očkovací kulturu bylo nalito do každého ze čtyř třicetilitrových kameninových fermentačních nádob a bylo sterilováno zahřátím na 120 °C po dobu 30 minut, potom bylo přidáno 150 ml tekuté kultury připravené jak popsáno shora. Směs byla kultivována tři dny při 28 °C při provzdušňování 15 litrů vzduchu za minutu a za současného míchání. Aby byla udržena koncentrace kyslíku v kapalině na 5 ppm, byla rychlost míchání automaticky řízena v rozmezí 100 až 300 rpm.
1(B) Izolace
2,4 kg Celitu 545 (Johns Manville Project Corporation, USA), bylo přidáno jako filtrační pomůcka do 60 litrů kultivační tekutiny získané jak je popsáno v 1(A) shora a směs byla filtrována. Po filtraci kultivační tekutiny, bylo získáno 7,2 kg bakteriálních buněk. Buňky byly jednou extrahovány 30 litry 50% vodného roztoku acetonu a dvakrát, pokaždé 20 litry 80% sodného roztoku acetonu. Tyto extrakty byly slity dohromady a organické rozpouštědlo bylo oddestilováno za použití rotačního odpařovače. Další podíl vodného roztoku chlorovodíkové kyseliny byl přidán ke
-13CZ 279299 B6 zbytku k úpravě pH na 2,0 a potom byla směs dvakrát extrahována, pokaždé 10 litry ethylacetátu. Extrakty byly spojeny a bylo přidáno 10 litrů 1% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Aktivní frakce byly přeneseny do vodné kyseliny a ethylacetátová vrstva byla odstraněna. Tato ethylacetátová vrstva byla opět extrahována s 5 litry 1% vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Roztoky hydrogenuhličitanu sodného byly slity a jejich pH upraveno na 2,0 přidáním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Roztok byl extrahován dvakrát, pokaždé 10 litry ethylacetátu. Organické extrakty byly spojeny, promyty vodou a potom nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a potom vysušeny nad bezvodým sulfátem sodným. V průběhu nepřetržitého přidávání methanolu byl roztok kondenzován odpařením při sníženém tlaku za použití rotačního odpařovače a bylo získáno 10 ml olejovité substance. Tato olejovítá substance byla rozpuštěna ve 100 ml 60% vodného roztoku methanolu a výsledný roztok byl adsorbován na Sep-Pak Vač 20 cc C18 Cartridges (Waters Co., USA). Nečistoty byly eluovány 30 ml 60% vodným roztokem methanolu. Leustroducsiny byly potom eluovány 15 ml 100% methanolu a podrobeny HPLC. Frakce vykazují vrcholy kolem 13 minuty a 24 minuty byly odděleny a nazvány surová frakce A a surová frakce B. Podmínky, za kterých byla provedena chromatografie jsou popsány níže.
Preparativní kapalinová chromatografie: sloupec: Radial-Pak 25 x 10 (Waters, USA) eluční tekutina: 50% vodný acetonitril, obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr, pH 3,0 rychlost průtoku: 9 ml/min vlnová délka: 230 nm
Po kondenzaci všech těchto vrcholů výsledné frakce byla podrobena preparativní HPLC. Surová frakce A byla podrobena preparativní chromatografii za následujících podmínek a byl získán vrchol, po přibližně 56 minutách. Materiál potom zbaven solí a kondenzován za užití Sep-Pak, bylo získáno 11,66 mg leustroducsinu A.
Preparativní podmínky pro surovou frakci A: sloupec: Cosmosil 5C 18-AR 20 x 250 mm (Nakaraitesque lne.), eluční tekutina: 42% vodný acetonitril, obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr, pH 3,0, rychlost průtoku: 9 ml/min, vlnová délka: 230 nm.
Surová frakce B byla podrobena preparativní chromatografii za následujících podmínek a byly získány vrcholy v blízkosti 47 a 51 minut. Materiál byl zbaven solí a kondenzován za užití Sep-Pak k získání 9,83 mg leustroducsinu B a 5,22 mg leustroducsinu C.
Preparativní podmínky pro surovou frakci B: sloupec: Cosmosil 5C 18-AR 20 x 250 mm (Nakaraitesque lne.), eluční tekutina: 47% vodný acetonitril, obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr, pH 3,0, rychlost průtoku: 9 ml/min, vlnová délka: 230 nm.
-14CZ 279299 B6
Leustroducsiny takto získané měly následující vlastnosti:
Leustroducsin A:
1) Chemická struktura: vzorec la, viz shora.
2) Vlastnosti: kyselý a rozpustný v tucích.
3) Barva: bledě žlutý olej.
4) Molekulový vzorec: c32H52°10NP·
5) Molekulová hmotnost: 641, určená FAB-MS metodou (FAB-MS je Fast Atom Bombardment Mass Spectrometry).
6) UV absorpční spektrum: 234 nm (maximální absorpce v methanolu) .
7) IR absorpční spektrum: infračervené spektrum vykázalo následující absorpční maxima (tekutý film, vmax cm1):
933, 2 867, 1 728, 1 464, 1 383, 1 248, 1 176, 1 056, 969.
8) ^H-NMR-spektrum:
Spektrum v nukleární magnetické resonanci (270 MHz) v těžkém (1H, dublet dubletů, J = 9,8 a 4,9 Hz), až 6,35 (2H, multiplet), (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, až 3,15 (2H, multiplet), až 2,71 (2H, multiplet), (2H, triplet, J = 7,6 Hz), (1H, multiplet), dublet dubletů, J =15,6 a 6,1 Hz), dublet dubletů, J = 9,8 a 1,4 Hz), dublet, J = 15,6 Hz), multiplet), multiplet), dublet dubletů, J =6,1 a 4,4 Hz), multiplet), multiplet), triplet dubletů, J = 10,1, 10,1 a 2,4 Hz),
9) methanolu, za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
7,08
6,21
6,06
6,02
5.94
5,46
5,31
5,10
4.94
4,72
4,29
2,93
2,50
2,25
2,16
0,99 až 2,01 (18H, multiplet),
0,95 (3H, triplet, J = 7,6 Hz),
0,89 (6H, dublet, J =6,8 Hz).
13C NMR-spektrum (δ: ppm): Spektrum při nukleární magnetické resonanci (270 MHz) v těžkém methanolu za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
11,4 (kvartet), 22,7 (triplet), 22,9 /kvartet), 24,0 (triplet), 24,7 (triplet), 28,9 (dublet), 32,4 (triplet), 33,1 (triplet), 34,3 (triplet), 35,7 (triplet, 36,1 (dublet), 37,1 (triplet), 39,4 (triplet), 39,5 (triplet), 40,6 (dublet), 40,6 (triplet), 64,7 (dublet), 73,9 (dublet), 77,8 (singlet), 78,5 (dublet), 82,3 (dublet), : 123,7 (dublet), 124,3 (dublet), 127,7 let), 137,3 (dublet), 138,2 (dublet), (singlet), 175,0 (singlet).
Rozpustnost:
Rozpustný v alkoholech, jako je methanol, ethanol nebo nol, rozpustný v acetonu, chloroformu, ethylacetátu a thylsulfoxidu, omezená rozpustnost ve vodě, v hexanu.
121,1 (dublet), (dub166,3 (dublet), 135,3
152,7 (dublet), butadimenerozpustný
-15CZ 279299 B6
11) Barevné reakce:
Pozitivní reakce s kyselinou sírovou, jodem, ninhydrinem, komplexem molybdenanu amonného s kyselinou chloristou.
12) HPLC:
Separační sloupec: Cosmosíl 5C 18-AR (velikost sloupce 4,6 x 250 mm, výrobek Nakaraitesque lne.) Rozpouštědlo: 45% vodný acetonitril obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr (pH 3),
Rychlost průtoku: 1 ml/min.
Vlnová délka: 2 380 nm.
doba retence: 9,06 min a 9,16 min.
Leustroducsin B:
1) Chemická struktura: vzorce Ib, viz shora.
2) Vlastnosti: kyselý, rozpustný v tucích.
3) Barva: bledě žlutý olej.
4) Molekulový vzorec: C34H56O10NO.
5) Molekulová hmotnost: 669, určená FAB-MS metodou.
6) UV absorpční spektrum: 234 nm (maximální absorpce v methanolu).
7) IR absorpční spektrum: infračervené spektrum vykázalo následující absorpční maxima (tekutý film, 'ý cm”1).
8)
927, 2 855, 1 729, 1 463, 1 380, 1 250, 1 172, 1 056, 968. 3H-NMR spektrum (270 MHz) v těžkém methanolu, za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
7,09
6,21
6,07
6,02
5.94
5,46
5,31
5,10
4.94
4,72
4,29
2,93
2,50
2,27
2,17.
1,00
0,95 (3H, triplet, J = 7,5 Hz)
0,85 (3H, triplet, J = 6,8 Hz)
0,86 (3H, dublet, J = 6,6 Hz).
13C-NMR spektrum (δ: ppm):(270 MHz) v těžkém methanolu za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
11.4 (kvartet), 11,7 (kvartet), 19,6 (kvartet), 22,7 (triplet), 24,7 (triplet), 26,4 (triplet), 27,6 (triplet), 30,6 (triplet), 32,4 (triplet), 33,1 (triplet), 34,1 (triplet),
35.5 (triplet), 35,5 (dublet), 36,1 (dublet), 37,1 (triplet), 37,3 (triplet), 39,4 (triplet), 40,6 (dublet), 40,6 (triplet), 64,7 (dublet), 73,9 (dublet), 77,8 (singlet), 78,5 (dublet), 82,3 (dublet), 121,0 (dublet), 123,7 (dublet), (1H, dublet dubletů, J = 9,8 a 4,9 Hz), až 6,35 (2H, multiplet), (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, (1H, až 3,15 (2H, multiplet), až 2,71 (2H, multiplet), (2H, triplet, J = 7,3 Hz) (1H, multiplet), až 2,01 (22H, multiplet), dublet dubletů, J = 15,6 a 6,1 Hz), dublet dubletů, J = 9,8 a dublet, J = 15,6 Hz), multiplet), multiplet), dublet dubletů, J = 6,1 a multiplet), multiplet), triplet dubletů, J = 9,9,
1,5
4,4
9,9
Hz) ,
Hz) , a 2,6 Hz),
9)
-16CZ 279299 B6
124,3 (dublet), 127,7 (dublet), 135,2 (dublet), 137,4 (dublet), 138,2 (dublet), 152,7 (dublet), 166,4 (singlet), 175,1 (singlet).
10) Rozpustnost:
Rozpustný v alkoholech, jako je methanol, ethanol nebo butanol, rozpustný v acetonu, chloroformu, ethylacetátu a dimethylsulf oxidu, omezená rozpustnost ve vodě, nerozpustný v hexanu.
11) Barevné reakce:
Positivní reakce s kyselinou sírovou, jodem, ninhydrinem a směsí molybdenanu amonného a kyseliny chloristé.
12) HPLC:
Separační sloupec: Cosmosil 5C 18-AR (velikost sloupce 4,6 x 250 mm, výrobek Nakaraitesque lne.).
Rozpouštědlo: 45% vodný acetonitril, obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr (pH 3).
Rychlost průtoku: 1 ml/min.
Vlnová délka: 230 nm.
Doba retence: 20,62 min a 20,87 min.
Leustroducsin C:
1) Chemická struktura: vzorec Ic, viz shora.
2) Vlastnosti: kyselý, rozpustný v tucích.
3) Barva: bledě žlutý olej.
4) Molekulový vzorec: C34H56°10NP·
5) Molekulová hmotnost: 669, určená FAB-MS metodou.
6) UV spektrum: 234 nm (maximální absorpce v methanolu).
7) IR-spektrum: infračervené spektrum vykázalo následující absorpční maxima (tekutý film, max cm-1):
930, 2 856, 1 728, 1 464, 1 382, 1 252, 1 172, 1 056, 968.
8) 1H-NMR: Spektrum při nukleární magnetické resonanci (270 MHz) v těžkém methanolu, za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
7,08
6,21
6,07
6,02
5.94
5,46
5,31
5,10
4.94
4,72
4,28
2,93
2,50
2,27
2,16
1,00
0,95
0,88 (1H, dublet dubletů, J = 9,8 a 4,9 Hz), až 6,35 (2H, multiplet), (1H, dublet dubletů, J = 15,6 a 6,1 Hz), (1H, dublet dubletů, J - 9,8 a 1,5 Hz), (1H, dublet, J = 15,6 Hz), (1H, multiplet), (1H, multiplet), (1H, dublet dubletů, J = 6,1 a 4,9 Hz), (1H, multiplet), (1H, multiplet), (1H, triplet dubletů, J = 10,1, 10,1 a 2,4 až 3,15 (2H, multiplet), až 2,71 (2H, multiplet), (2H, triplet, J =7,3 Hz), (1H, multiplet), až 2,01 (22H, multiplet), (3H, triplet, J =7,3 Hz), (6H, dublet, J = 6,3 Hz).
Hz) ,
Ί o
C-NMR (δ, ppm): spektrum při nukleární magnetické resonanci (370 MHz) v těžkém methanolu za použití trimethylsilanu jako vnitřního standardu:
-17CZ 279299 B6
11.4 (kvartet), 22,7 (triplet), 23,1 (kvartet), 23,1 (kvar- tet), 24,7 (triplet), 26,2 (triplet), 28,2 (triplet), 29,1 (dublet), 30,4 (triplet), 32,4 (triplet), 33,1 (triplet), 34,2 (triplet), 35,4 (triplet), 36,1 (dublet), 37,1 (triplet), 39,4 (triplet), 40,0 (triplet), 40,6 (dublet), 40,6 (triplet), 64,6 (dublet), 73,9 (dublet), 77,8 (singlet),
78.4 (dublet), 82,3 (dublet), 121,1 (dublet), 123,4 (dublet), 124,3 (dublet), 127,7 (dublet), 135,2 (dublet), 137,3 (dublet), 138,2 (dublet), 152,7 (dublet), 166,4 (singlet), 175,0 (singlet).
10) Rozpustnost:
Rozpustný v alkoholech, jako je methanol, ethanol nebo butanol, rozpustný v acetonu, chloroformu, ethylacetátu a dimethylsulfoxidu, omezená rozpustnost ve vodě, nerozpustný v hexanu.
11) Barevné reakce:
Positivní reakce s kyselinou sírovou, jodem, ninhydrinem a směsí molybdenanu amonného a kyseliny chloristé.
12) HPLC:
Separační sloupec: Cosmosil 5C 18-AR (velikost sloupce 4,6 x 250 mm, výrobek Nakaraitesque lne.). Rozpouštědlo: 45% vodný acetonitril obsahující 0,5% triethylamin-fosfátový pufr (pH 3).
Rychlost průtoku: 1 ml/min.
Vlnová délka: 230 nm.
Doba retence: 21,90 min a 22,19 min.
Biologická aktivita
Následující testové příklady objasní mnohem detailněji efekt přípravku vynálezu.
Biologický příklad 1
Stimulace produkce GM-CSF:
Podmínění stimulace produkce GM-CSF sloučeninami vynálezu bylo v principu provedeno použitím kombinace metod Kohama a dalších, Experimental Hematology 16., 603 až 608 (1988) a Kitamura a další, Journal of Cellular Physioloqy 140, 323 až 334 (1989).
Podrobněji popsáno: KM-102 buňky odvozené ze stromálních buněk lidské kostní dřeně, které sloužily k produkci GM-CSF, byly smíchány s testovacím vzorkem roztoku naředěného na vhodnou koncentraci GM-CSF produkující systém. Po 24 hodinové inkubaci byla část supernatantu z kultury odebrána a přidána do kultivačního systému lidských GM-CSF-dependentních TF-1 buněk. Po 48 až 72 hodinách bylo množství GM-CSF měřeno podle vzrůstu TF-1 buněk LGM-CSF testovací systém, aby se získala měřitelná míra stimulace produkce GM-CSF. Vzrůst TF-1 buněk byl určen čtyřhodinovým tritium-thymidinovým pulsním značením. Podobné výsledky byly také získány za použití MTT soupravy (Chemicon International lne. , USA) k otestování růstu TF-1 buněk a použití postupu ELISA (Genzyme lne., USA) k otestování GM-CSF. Zda GM-CSF produkci indukující systém fungoval normálně nebo nebylo zhodnoceno za použití interleukinu lbeta (IL-lbeta: Genzyme lne., USA). IL-lbeta indukovaná produkce GM-CSF způsobem závislým na dávce v rozmezí od 1 do 100 jednotek/ml, které v maximu indukovala produkci GM-CSF 10 až 20-krát větší než IL-lbeta, což prokázalo normální funkci experimentálního systému.
-18CZ 279299 B6
Po každém přidání leustroducsinu A, B nebo C ke KM-102 buňkám v určité koncentraci, bylo zjištěno, že produkce GM-CSF je indukována v závislosti na dávce. V maximech bylo množství produkovaného GM-CSF 10 až 20-krát vyšší než béz přidání leustroducsinu. Hodnoty ED50 byly zjištěny 180 + 50, 50 + 15 a 50 + 15 ng/ml pro leustroducsin A, B a C.
Biologický příklad 2
Stimulace produkce G-CSF:
Stimulace produkce G-CSF byla zkoušena systémem, ve kterém GM-CSF testovací systém (viz biologický příklad 1) byl nahrazen G-CSF testovacím systémem /popsáno Shirafujim a další: Experimental Hematology 17, 116 až 119, 1989/. Podrobněji: KM-102 buňky odvozené od stromálních buněk lidské kostní dřeně, které sloužily k produkci G-CSF, byly smíchány s testovacím vzorkem roztoku naředěného na vhodnou koncentraci G-CSF produkující systém. Po 24 hodinové inkubaci, byla část supernatantu z kultury odebrána a přidána do kultivačního systému G-CSF dependentnich NFS-60 buněk. Po 48 až 72 hodinách bylo množství GM-CSF měřeno podle vzrůstu NFS-60 buněk G-CSF testovací systém, aby se získala míra stimulace produkce G-CSF. Vzrůst NFS-60 buněk byl určen čtyřhodinovým tritium-thymidinovým pulsním značením. Podobné výsledky byly také získány za použití MTT soupravy k otestování růstu. NFS-60 buněk a za použití ELISA k otestování G-CSF (Motojima a další, Journal of Immunological Methods, 118, 187 až 192, 1989). Zda funkce G-CSF produkci indukujícího systému byla normální nebo ne, bylo zhodnoceno pomocí rekombinantního interleukinu lbeta (IL-lbeta: Genzyme lne., USA). IL-lbeta indukovaná produkce GM-CSF na dávce závislým způsobem v rozmezí od 1 do 100 jednotek/ml, při maximální produkci G-CSF byla 10 až 20-krát vyšší než produkce bez IL-lbeta a prokázala normální funkci experimentálního systému.
Po každém přidání leustroducsinu A, B nebo C ke KM-102 buňkám v určité koncentraci, bylo zjištěno, že je produkce G-CSF indukována v závislosti na dávce. V maximech bylo množství produkovaného G-CSF 10 až 20-krát vyšší než bez přidání leustroducsinu. Hodnoty ED50 byly 200 +50, 50 + 15 a 50+15 ng/ml pro leustroducsiny A, B a C.
Biologický příklad 3
Stimulace produkce NGF
Furukawa a další, popsali, že fibroblasty formující L-M buňky, odvozené od myší pojivové tkáně produkují a vylučují relativně velké množství NGF a že katecholaminy stimulují tuto produkci a sekreci (J. Biol. Chem., 261, 6039 až 6047, 1986).
Bylo zjišťováno, zda leustroducsiny stimulují produkci NGF nebo ne.
-19CZ 279299 B6
L-M buňky byly kultivovány za použití prostředí 199 obsahujícího 0,5 % peptonu. Do každého vyhloubení v kultivační destičce s dvacetičtyřmi vyhloubeními bylo naočkováno 5 x 104 L-M buněk a kultivováno v C02 inkubátoru (37 °C, 5 % C02) až do vytvoření souvislé vrstvy buněk. Kultivační tekutina byla odstraněna a buňky byly vymyty prostředím 199 obsahujícím 0,5 % sírového albuminu skotu (Sigma). Jeden z leustroducsinů byl přidán v určité koncentraci do prostředí 199 obsahujícího 0,5 % sírový albumin skotu a potom byly L-M buňky vystaveny působení této směsi. L-M buňky potom byly kultivovány v C02 inkubátorem po 24 hodin. Po oddělení kultivační tekutiny byl zjištěn NGF v tekutině.
NGF byl zkoušen enzymatickou imunologickou zkouškou (Proč. Nati. Acad. Sci., USA 80, 3513 až 3516, 1983). Do každého vyhloubení v polystyrénové destičce s 96 vyhloubeními bylo nalito 75 mikrolitrů protilátky proti betaNGF myši,(Boehringer) roztoku (0,3 tig/ml, pH 9,6) a bylo ponecháno jednu hodinu při teplotě místnosti. Po odstranění protilátek byla všechna vyhloubení třikrát promyta promývacím roztokem. 50 mikrolitrů betaNGF standardu (Wako Pure Chem. Ind.) nebo standardního roztoku bylo nalito do každého vyhloubení a směs byla ponechána 6 až 8 hodin při teplotě místnosti. Na konci této doby byl odstraněn betaNGF standard nebo standardní tekutina a všechna vyhloubení byla třikrát promyta 50 mikrolitry označených monoklonálních anti-bětaNGF protilátek (Boehringer) roztoku (100 mU/ml, pH 7,0) bylo nalito do každého vyhloubení. Když se vyvinula zbarvení (po 2 až 3 hodinách při teplotě místnosti), byla určena absorbance při 570 nm. Množství NGF bylo vypočítáno ze standardní křivky, a bylo vztaženo k procentu množství NGF produkovaného a vylučovaného buňkami nevystavenými působení leustroducsinů.
O všech leustroducsinech bylo zjištěno, že stimulují produkci HGF v závislosti na dávce. Při 5 μ/ml každého leustroducsinů byla indukována dvakrát nebo vícekrát vyšší produkce NGF ve srovnání s produkcí buněk nepodrobených působení leustroducsinů.
Biologický příklad 4
Antimykotická účinnost
Za účelem vyzkoumání antimykotické účinnosti leustroducsinů proti houbám pologenním pro zvířata, byla testována účinnost proti Tricophylon mentagrophytes. U každého z leustroducsinů byl pozorován inhibiční kruh při koncentraci 1 μg/diΞk.
Biologický příklad 5
Akutní toxicita
Podle běžného postupu byla akutní toxicita testována na pěti ddY myších (samcích). Po intraperitoneálnim podání leustroducsinů A v dávce 0,2 mg/kg nebyla po pět dnů pozorována žádná toxicita. Podobně nebyla žádná toxicita pozorována po podání leustroducsinů B, leustroducsinů C a jejich derivátů.
-20CZ 279299 B6
Z výsledků popsaných shora je zřejmé, že leustroducsiny A, Ba C stimulují produkci hematopoetických faktorů, jako je kolonie granulocytů stimulující faktor a kolonie granulocytomakrofágů stimulující faktor. Vzhledem k tomu jsou leustroducsiny užitečné jako terapeutické látky k redukci vedlejších účinků způsobených chemotherapií a radiotherapií při rakovině. Chrání také před infekcemi a mají protirakovinný účinek aktivací makrofágů. Navíc jsou leustroducsiny užitečné k vylepšení mozkového metabolismu stimulací produkce NGF. Dále jsou leustroducsiny užitečné jako antimykotické látky, jak bylo ukázáno jejich antimykotickým účinkem proti Tricophyton mentagrophytes.
-21CZ 279299 B6
PATENTOVÉ
NÁROKY
Claims (9)
1. Leustroducsiny A, B, C obecného vzorce I kde
R znamená 5-methylhexanoyloxyskupinu, 6-methyloktanoyloxyskupinu nebo 7-methyloktanoyloxyskupinu a soli od nich odvozené, přijatelné z farmaceutického hlediska.
2. Leustroducsin podle nároku 1, vzorce Ia a soli od něj odvozené, přijatelné z farmaceutického hlediska.
3. Leustroducsin podle nároku 1, vzorce lb a soli od něj odvozené, přijatelné z farmaceutického hlediska.
4. Leustroducsiny podle nároku 1, vzorce lc a soli od něj odvozené, přijatelné z farmaceutického hlediska.
5. Způsob výroby alespoň jednoho leustroducsinu podle nároků 1 až
4 nebo soli od něj odvozené, vyznačuj i c i s e tím, že se pěstuje leustroducsin produkující mikroorganismus rodu Streptomyces a alespoň jeden leustroducsin se z kultury izoluje.
6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se jako mikroorganismus produkující leustroducsin užije kmen čeledi Streptomyces plaťensis.
7. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se jako mikroorganismus užije kmen Streptomyces platensis SANK 60191 ( FERM BP-3288).
8. Mikroorganismus Streptomyces platensis kmen SANK 60191 (FERM BP-3288), produkující leustroducsin.
9. Farmaceutický prostředek pro léčbu nebo prevenci vedlejších účinků při chemotherapii nebo radiotherapii rakoviny, infekcí, rakoviny, mozkové dysfunkce a mykotických infekcí, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden leustroducsin nebo od něj odvozenou sůl podle nároků 1 až 4 ve směsi s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6308791 | 1991-03-27 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ91592A3 CZ91592A3 (en) | 1993-04-14 |
| CZ279299B6 true CZ279299B6 (cs) | 1995-04-12 |
Family
ID=13219198
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS92915A CZ279299B6 (cs) | 1991-03-27 | 1992-03-26 | Nové sloučeniny pojmenované "LEUSTRODUCSINY", jejich příprava a terapeutické užití |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5334587A (cs) |
| EP (1) | EP0506463B1 (cs) |
| JP (1) | JPH05123179A (cs) |
| KR (1) | KR0145680B1 (cs) |
| CN (1) | CN1058294C (cs) |
| AT (1) | ATE134640T1 (cs) |
| AU (1) | AU649116B2 (cs) |
| CA (1) | CA2064126A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ279299B6 (cs) |
| DE (1) | DE69208494T2 (cs) |
| DK (1) | DK0506463T3 (cs) |
| ES (1) | ES2086651T3 (cs) |
| FI (1) | FI101978B1 (cs) |
| GR (1) | GR3019996T3 (cs) |
| HK (1) | HK117696A (cs) |
| HU (1) | HU216875B (cs) |
| IE (1) | IE74389B1 (cs) |
| IL (1) | IL101394A (cs) |
| IS (1) | IS1604B (cs) |
| NO (1) | NO304600B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ242155A (cs) |
| RU (1) | RU2082760C1 (cs) |
| TW (1) | TW212182B (cs) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU649116B2 (en) * | 1991-03-27 | 1994-05-12 | Sankyo Company Limited | New compounds, named the "Leustroducins", their preparation and their therapeutic uses |
| ATE166058T1 (de) * | 1993-04-23 | 1998-05-15 | Sankyo Co | Neue verbindung, leustroducsin h, ihre herstellung und therapeutische verwendung |
| KR980700316A (ko) * | 1995-10-17 | 1998-03-30 | 도리이 신이찌로 | 혈소판 감소증 치료제(remedies for thrombocytopenia) |
| US9861346B2 (en) | 2003-07-14 | 2018-01-09 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Patent foramen ovale (PFO) closure device with linearly elongating petals |
| CA2539320A1 (en) * | 2003-09-17 | 2005-03-31 | Icos Corporation | Use of chk1 inhibitors to control cell proliferation |
| US9005242B2 (en) | 2007-04-05 | 2015-04-14 | W.L. Gore & Associates, Inc. | Septal closure device with centering mechanism |
| US20130165967A1 (en) | 2008-03-07 | 2013-06-27 | W.L. Gore & Associates, Inc. | Heart occlusion devices |
| US20120029556A1 (en) | 2009-06-22 | 2012-02-02 | Masters Steven J | Sealing device and delivery system |
| US9636094B2 (en) | 2009-06-22 | 2017-05-02 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Sealing device and delivery system |
| US10828019B2 (en) | 2013-01-18 | 2020-11-10 | W.L. Gore & Associates, Inc. | Sealing device and delivery system |
| US9808230B2 (en) | 2014-06-06 | 2017-11-07 | W. L. Gore & Associates, Inc. | Sealing device and delivery system |
| CN116396359A (zh) * | 2020-02-17 | 2023-07-07 | 中国医学科学院医药生物技术研究所 | 一组具有抗病毒活性的肽类化合物奥米克欣a族化合物及其应用 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3592925A (en) * | 1969-04-21 | 1971-07-13 | American Cyanamid Co | Antibiotics ah272alpha2 and ah272beta2 and process for producing same |
| US3907779A (en) * | 1974-05-20 | 1975-09-23 | Upjohn Co | 5,6 Dihydro-5-azathymidine and derivatives |
| AU574713B2 (en) * | 1983-09-12 | 1988-07-14 | Warner-Lambert Company | Cl-1957a antibiotic compound and its production |
| US4575500A (en) * | 1984-03-26 | 1986-03-11 | Merck & Co., Inc. | Antifungal substances and process for their production |
| JPH02186A (ja) * | 1987-05-07 | 1990-01-05 | Sumitomo Chem Co Ltd | 新規化合物およびそれを有効成分とする農工業用殺菌剤 |
| CA1335365C (en) * | 1988-02-13 | 1995-04-25 | Hidekazu Hosono | 2-pyranone derivative and process for production thereof |
| JP2865302B2 (ja) * | 1988-02-13 | 1999-03-08 | サントリー株式会社 | ２―ピラノン誘導体及びその製造法並びにそれを含む抗菌剤 |
| AU649116B2 (en) * | 1991-03-27 | 1994-05-12 | Sankyo Company Limited | New compounds, named the "Leustroducins", their preparation and their therapeutic uses |
-
1992
- 1992-03-24 AU AU13123/92A patent/AU649116B2/en not_active Ceased
- 1992-03-25 US US07/857,162 patent/US5334587A/en not_active Expired - Fee Related
- 1992-03-25 NO NO921158A patent/NO304600B1/no not_active IP Right Cessation
- 1992-03-25 HU HU9201005A patent/HU216875B/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-03-25 JP JP4066630A patent/JPH05123179A/ja active Pending
- 1992-03-26 IS IS3829A patent/IS1604B/is unknown
- 1992-03-26 FI FI921339A patent/FI101978B1/fi active
- 1992-03-26 CA CA002064126A patent/CA2064126A1/en not_active Abandoned
- 1992-03-26 CZ CS92915A patent/CZ279299B6/cs unknown
- 1992-03-26 RU SU925011385A patent/RU2082760C1/ru active
- 1992-03-26 IE IE920965A patent/IE74389B1/en not_active IP Right Cessation
- 1992-03-27 NZ NZ242155A patent/NZ242155A/xx unknown
- 1992-03-27 ES ES92302718T patent/ES2086651T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-03-27 CN CN92103126A patent/CN1058294C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1992-03-27 EP EP92302718A patent/EP0506463B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-03-27 DK DK92302718.9T patent/DK0506463T3/da active
- 1992-03-27 IL IL10139492A patent/IL101394A/en not_active IP Right Cessation
- 1992-03-27 KR KR1019920005088A patent/KR0145680B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1992-03-27 TW TW081102373A patent/TW212182B/zh active
- 1992-03-27 DE DE69208494T patent/DE69208494T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-03-27 AT AT92302718T patent/ATE134640T1/de not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-05-06 US US08/239,284 patent/US5443972A/en not_active Expired - Fee Related
-
1996
- 1996-05-20 GR GR960401371T patent/GR3019996T3/el unknown
- 1996-07-04 HK HK117696A patent/HK117696A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ279299B6 (cs) | Nové sloučeniny pojmenované "LEUSTRODUCSINY", jejich příprava a terapeutické užití | |
| JPH06506202A (ja) | 医薬用キサントン誘導体 | |
| KR910005631B1 (ko) | Bu-3420t 항종양 항생제 | |
| EP0274873A2 (en) | Antibiotic A10255 complex and factors, process, microorganisms for its production | |
| EP0499489B1 (en) | Polyhydroxycyclopentane derivatives, their preparation and their therapeutic use | |
| RU2221870C2 (ru) | Мумбайстатин, способ его получения и его применение в качестве фармацевтического препарата | |
| EP0156193B1 (en) | Compounds and compositions for treating protozoal infections with a novel antibiotic | |
| US6756402B2 (en) | Cyclipostins, process for their preparation and use thereof | |
| AU665488B2 (en) | New compound, leustroducsin H, its preparation and its therapeutic use | |
| US6245734B1 (en) | Physiologically active polyoxypeptin and deoxypolyoxypeptin and anticancer drugs containing the same | |
| EP0385594B1 (en) | Acidic polycyclic ether antibiotic | |
| FI106026B (fi) | Menetelmä lääkeaineena käyttökelpoisen 2-amino-4-(hydroksimetyyli)-3a,5,6,6a-tetrahydro-4H-syklopent[d]oksatsoli-4,5,6-triolin valmistamiseksi | |
| JP2001286292A (ja) | 新規化合物ｆ−９０５５８及びその製造法 | |
| EP0581652A1 (en) | Pradimicins T1 and T2 and 11-0-dexylosylpradimicin T1, new members of the pradimicin family of antibiotics | |
| JPH0585998A (ja) | 新規化合物ｃａ３９‐ａおよびｃａ３９‐ｂ、ならびにその使用および製造 | |
| NO301488B1 (no) | Polyhydroksycyklopentanderivat, fremgangsmåte til fremstilling derav, samt biologisk rene stammer av mikroorganismer som er anvendelige i fremgangsmåten | |
| JP2002034589A (ja) | 新規生理活性物質１１００−５０ |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic |