CZ20032685A3 - Středně dlouhé mastné kyseliny, glyceridy a analogy jako faktory přežití a aktivace neutrofilů - Google Patents

Středně dlouhé mastné kyseliny, glyceridy a analogy jako faktory přežití a aktivace neutrofilů Download PDF

Info

Publication number
CZ20032685A3
CZ20032685A3 CZ20032685A CZ20032685A CZ20032685A3 CZ 20032685 A3 CZ20032685 A3 CZ 20032685A3 CZ 20032685 A CZ20032685 A CZ 20032685A CZ 20032685 A CZ20032685 A CZ 20032685A CZ 20032685 A3 CZ20032685 A3 CZ 20032685A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
patient
neutropenia
hematopoietic stimulation
mct
compounds
Prior art date
Application number
CZ20032685A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ305273B6 (cs
Inventor
Lyne Gagnon
Jean Barabe
Pierre Laurin
Christopher Penney
Boulos Zacharie
Original Assignee
Prometic Biosciences Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Prometic Biosciences Inc. filed Critical Prometic Biosciences Inc.
Publication of CZ20032685A3 publication Critical patent/CZ20032685A3/cs
Publication of CZ305273B6 publication Critical patent/CZ305273B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/194—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more carboxyl groups, e.g. succinic, maleic or phthalic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/255—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of sulfoxy acids or sulfur analogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024—Esters of saccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2013—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2086—IL-13 to IL-16
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/18—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/46—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/47—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C235/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C235/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/003—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/02—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with glycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/11—Compounds covalently bound to a solid support
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Oblast techniky
Vynález se týká prevence a/nebo léčby neutropenie. Tato prevence a léčba zahrnuje léčbu neutropenie, jež je spojena s použitím chemoterapie a radioterapie, dále léčbu neutropenie, jejíž původ je v infekcích, hematologických onemocněních a podvýživě. Vynález se dále obecně týká snižování toxicity léčiv a zvyšování jejich účinnosti. Vynález se zejména týká použití středně dlouhých mastných kyselin, jako například kyselina kaprinová, kyselina kapiylová nebo jejich solí nebo triglyceridů nebo jejich mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů jako neutrafilních faktorů přežití a aktivačních faktorů nebo faktorů proliferace kmenových buněk kostní dřeně.
Dosavadní stav techniky
Chemoterapie používá cytotoxická činidla jako například, ale není omezeno na, cyklofosfamid, doxorubicin, daunorubicin, vinblastin, vinkristin, bleomycin, etoposid, topotekan, irinotekan, taxoter, taxol, 5-fluorouracil, metotrexát, gemcitabin, karboplatin nebo chlorambucil, pro ničení karcinogenních buněk a tumorů. Tato činidla jsou však nespecifická a zejména ve vysokých dávkách toxická pro normální a rychle se dělící buňky. To vede často k různým vedlejším účinkům u pacientů, kteří podstupují chemoterapii a radioterapii. Jedním z vedlejších účinků je myelosuprese, závažné snížení tvorby krevních buněk v kostní dřeni. Je pro něj charakteristická leukopenie, neutropenie a trombocytopenie. Závažná chronická neutropenie (idiopatická, cyklická a kongenitální) je také charakterizována selektivním úbytkem cirkulujících neutrofilů a zvýšením vnímavosti k bakteriální infekci.
Základem léčby rakoviny chemoterapeutickými léčivy je kombinace mechanismu cytotoxicity a mechanismu selekce rychle proliferuj ících tumorových buněk. Chemoterapeutická léčiva jsou však zřídka selektivní. Cytotoxicita chemoterapeutických činidel limituje podávané dávky, ovlivňuje léčebné cykly a vážně ohrožuje kvalitu života onkologického pacienta.
Ačkoli ostatní normální tkáně mohou být také nepříznivě ovlivněny, kostní dřeň je obzvláště citlivá k proliferačně specifické léčbě, jako například chemoterapie nebo radioterapie. Akutní a chronická intoxikace kostní dřeně je častým vedlejším účinkem terapií rakoviny a vede ke snížení počtu krevních tělísek v krvi a anémii, leukopenii, neutropenii, agranulocytóze a trombocytopenii. Jednou z příčin takového účinku je snížení množství hematopoetických « · · · • · · · · · buněk (například pluripotentních kmenových buněk a dalších progenitorových buněk) způsobené jak letálním účinkem cytotoxických činidel, tak ozařováním těchto buněk a diferenciací kmenových buněk, která je vyvolána zpětnovazebným mechanizmem, který je nastartován ztrátou zralejších částí kostní dřeně. Dalším důvodem je snížení schopnosti kmenových buněk obnovovat se, která je také spojena jak s přímými (mutace) tak nepřímými (stárnutí populace kmenových buněk) účinky. (Tubiana, M., a kol., Radiotherapy a Oncology 29:1-17, 1993). Léčení rakoviny tak často vede ke snížení počtu polymorfonukleámích neutrofilů (PMN) nebo neutropenii. PMN jsou prvním obranným mechanismem organismu proti invazním patogenům a hrají podstatnou roli při akutní infekci, jejich primární funkcí je fagocytóza a likvidace infekčních činidel. Aby mohly splnit tuto úlohu, opouštějí PMN v odpověď na chemotaktické faktory krevní oběh a vstupují do napadené oblasti, kde se uplatní jejich biologická funkce. V organismu, který vykazuje normální množství krevních buněk, tvoří neutrofily přibližně 60 % celkového množství leukocytů. (SI Units Conversion Guide, 66-67 (1992), New England Journal of Medicine Books). Ovšem až třetina pacientů, kteří jsou léčeni na rakovinu chemoterapií, může trpět neutropenii. Normální průměrné množství neutrofilů u zdravého dospělého lidského jedince je řádově 4400 buněk/μΐ, s rozsahem 1800-7700 buněk/μΐ. Množství 1000 buněk/μΐ až 500buněk/pl znamená mírnou neutropenii a množství 500 buněk/μΐ nebo menší znamená závažnou neutropenii. Pacienti v myelosupresivním stavu jsou náchylní k infekci a často trpí poruchami srážlivosti krve, což vyžaduje hospitalizaci. Nedostatek neutrofilů a krevních destiček je hlavní příčinou chorob a úmrtnosti, které provázejí léčení rakoviny a přispívá k vysoké ceně léčby rakoviny. Za výše zmíněných podmínek může být použití jakýchkoli činidel, která umožňují zastavit apoptózu neutrofilů nebo stimulují aktivaci a mobilizaci neutrofilů, terapeuticky cenné. Snaha obnovit pacientův imunitní systém po chemoterapii zahrnuje použití růstových faktorů krvetvorby pro stimulaci zbývajících kmenových buněk k proliferaci a diferenciaci, což vede k vytvoření zralých buněk bojujících s infekcí.
Při transplantaci kostní dřeně byl také využit jev, známý jako mobilizace pro získání většího množství kmenových/progenitorových buněk z periferní krve. Tato metoda se dnes používá pro autologní nebo alogenní transplantace kostní dřeně. Růstové faktory se používají pro zvýšení množství periferních progenitorových kmenových buněk, které mají být získány před myeloablační terapií a infuzí progenitorových kmenových buněk.
Terapie následující po transplantaci kostní dřeně může také zahrnovat léčbu neutropenie. Takové terapie však vyžadují 10 až 15 dní léčby, kdy jsou pacienti citliví k
I*··
infekci. Činidla schopná stimulovat kmenové buňky kostní dřeně mohou usnadnit a urychlit začlenění kmenových buněk a tak zkrátit neutropenické období, které následuje po transplantaci kostní dřeně.
Ačkoli růstové faktory krvetvorby, jako například granulocyt-makrofág kolonie stimulující faktor (GM-CSF) a granulocyt kolonie stimulující faktor (G-CSF), se mohou v takových případech uplatnit, jejich použití je nákladné, protože musí být vyrobeny rekombinantní technologií. Taková post-terapeutická podpůrná léčba není nezbytná v případě, že je pacient „chemicky chráněn“ proti snížení imunity.
Je proto zapotřebí získat nové kompozice a způsoby snižování nežádoucích vedlejších účinků myelosupresivních stavů způsobených chemoterapií a radioterapií.
Podstata vynálezu
Vynález se týká nových způsobů stimulace systému krvetvorby u savců včetně člověka. Vynález také poskytuje nové způsoby léčby myelosupresivních účinků chemoterapie a radioterapie v jakékoli jiné situaci, kdy může mít stimulace systému krvetvorby terapeutickou hodnotu, jako například, ale není omezeno na, transplantaci kostní dřeně a chronické neutropenie, stejně jako neutropenie, která vznikla v důsledku infekce, hematologického onemocnění nebo podvýživy. U pacienta, který podstupuje takovou léčbu napomáhá tento způsob systému krvetvorby čelit myelosupresi, zvyšovat přežití neutrofilů a podporovat jejich aktivaci.
Podle tohoto způsobu, kompozice obsahující jednu nebo více středně dlouhých mastných kyselin, jako například kyselina kaprinová, kyselina kaprylová nebo jejich soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné analogy, ve farmaceuticky přijatelném nosiči, je podávána savci, zejména člověku, v dávkách účinných pro prevenci nebo léčbu neutropenie, například pro snižování nepříznivých účinků chemoterapie a radioterapie a pro léčbu neutropenie vznikající v důsledku infekce, hematologického onemocnění a podvýživy.
Předmětem vynálezu je tedy poskytnout kompozice užívající kyselinu kaprinovou, kyselinu kaprylovou, kyselinu laurovou, jejich soli kovů (sodík, draslík, vápník, magnesium) nebo jejich triglyceridy, nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy pro výrobu chemoprotektivních farmaceutických kompozicí jako samostatného činidla nebo jako kombinace dvou nebo více činidel s a/nebo bez jiných chemoterapeutických činidel nebo takových léčiv, která indukují stav myelosuprese.
• · « · · ·
9 9 »
9 9 » 9
9 · ι» 9
9 9 9 » 9 9 9
Vynález se dále týká použití kyseliny kaprinové, kyseliny kaprylové nebo jejich sodných solí nebo triglyceridů nebo jejich mono- nebo diglyceridů nebo příbuzných sloučenin jako stimulačního faktoru krvetvorby.
Vynález dále zahrnuje kompozice obsahující kyselinu kapronovou, kyselinu kaprylovou nebo jejich sodné soli nebo triglyderidy nebo jejich mono- nebo diglyceridy nebo jiné analogy a použití takových sloučenin pro léčbu myelosuprese a následné imunosuprese.
Vynález se dále týká použití kyseliny kaprinové a kyseliny kaprylové nebo jejich sodných solí nebo triglyceridů nebo jejich mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů pro léčbu pacientů se závažnou chronickou neutropenií.
Předmětem vynálezu je dále použití kyseliny kaprinové a kyseliny kaprylové nebo jejich sodných solí nebo triglyceridů nebo mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů jako faktorů přežití a aktivace neutrofilů.
Vynález se také týká použití kyseliny kaprinové a kyseliny kaprylové nebo jejich sodných solí nebo triglyceridů nebo mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů v podmínkách, kdy může mít mobilizace neutrofilů terapeutickou hodnotu, což je například případ autologní nebo alogenní transplantace kostní dřeně.
Vynález také poskytuje způsob účinný pro poskytování chemické ochrany savcům, včetně člověka.
Předmětem vynálezu je dále poskytnutí způsobu zvýšeného účinnku chemoterapie a radioterapie u savců včetně člověka.
Předmětem vynálezu je dále poskytnutí způsoby použití obvyklejších dávek nebo dokonce zvyšujících se dávek chemoterapeutické kompozice nezbytné pro dosažení lepšího terapeutického výsledku, přičemž by nemělo docházet ke zvýšení vedlejších účinků.
Vynález se také týká způsobu účinného pro snížení nebo vyloučení neutropenie způsobené chemoterapií u savců včetně člověka.
Vynález dále poskytuje způsob léčby neutropenie, která má původ v hematologickém onemocnění, jako například chronické idiopatické neutropeniázy, cyklické neutropenie, syndromu pomalých leukocytů, Chédiac-Higashiho syndromu leukémie a aplastické anémie.
Vynález dále poskytuje způsob léčby neutropenie způsobené infekcí virovou (například HIV, spalničky, hepatitida, žlutá zimnice, mononukleóza) a bakteriální (například břišní tyfus, paratyfus, brucelóza).
Předmětem vynálezu je dále poskytnutí způsobu, který má minimální nebo žádné nežádoucí vedlejší účinky u příjemce.
• ♦·· · · ·· ·« a · · · • · · · · a · a · · • fc · fc « fc · fc··· fcfcfcfc · c ·· · ♦ » · a « υ fcfc* fc ··· a··· ·· «·
Tyto a další předměty, rysy a výhody vynálezu budou zřejmé z následujících příkladů provedení a přiložených nároků.
Stručný popis obrázků
Obrázek 1 ukazuje účinek MCT na PMN apoptózu.
Obrázek 2 ukazuje účinek MCT na PMN fagocytózu.
Obrázky 3A a 3B ukazují účinek doxorubicinu na PMN apoptózu.
Obrázek 4A znázorňuje odpověď MCT na doxorubicinem ošetřené neutrofily v závislosti na čase.
Obrázek 4B znázorňuje odpověď doxorubicinu na MCT ošetřené neutrofily.
Obrázek 5 ukazuje účinek MCT a trikaprinu na proliferaci kostní dřeně.
Obrázek 6 ukazuje účinek MCT na počet buněk kostní dřeně u zvířat se sníženou imunitou. Obrázek 7 ukazuje vliv MCT na počet buněk sleziny u zvířat se sníženou imunitou.
Obrázek 8 ukazuje účinek MCT a GM-CSF na váhu brzlíku u normálních myší.
Obrázek 9 ukazuje účinek MCT, kaprylátu sodného na počet buněk kostní dřeně u zvířat s oslabenou imunitou.
Obrázek 10 ilustruje chemoprotektivní účinek MCF a jeho účinek proti tumoru v kombinaci s doxorubicinem v koncentraci nižší než terapeutické u B16F10 modelu melanomu.
Obrázek 11 ukazuje chemoprotektivní účinek MCT a jeho účinek proti tumoru v kombinaci s cyklofosfamidem nebo taxoterem v koncentraci nižší než terapeutické u DA-3 modelu karcinomu prsu.
Obrázek 12 ukazuje chemoprotektivní účinek MCT a jeho účinek proti tumoru v kombinaci s cyklofosfamidem nebo taxoterem v terapeutické koncentraci u DA-3 modelu.
Vysoké dávky chemoterapie a radioterapie ničí hematopoetické buňky v kostní dřeni, což způsobí pacientovi závažný pokles množství neutrofilů a krevních destiček. Po takové léčbě musí pacient strávit několik týdnů na jednotce intenzivní péče, aby byl ochráněn před infekcí a horečkou, jež může být způsobena neutropenií. Trombocytopenie vede k pomalejšímu srážení krve a krvácivým poruchám, což vyžaduje transfuzi krevních destiček. Myelosuprese je faktor, který limituje dávkování při léčbě rakoviny a nedostatek neutrofilů a krevních destiček je hlavní příčinou morbidity a mortality po takové léčbě rakoviny.
Při transplantaci kostní dřeně mohou být použity dva přístupy. Před transplantací může stimulace kostní dřeně zvýšit množství periferních progenitorových kmenových buněk. Čerstvě • ·♦♦· * ·· ·»««·« »· · ΦΦΦΦ φ · ·
1 · · · » « • · Φ · · * φ φ φ · · » · Φ Φ « Φ ν ΦΦΦΦ ΦΦφφφφφ φφ «· transplantovaná kostní dřeň však neobsahuje dostatek dospělých neutrofílů nebo intermediálních neutrofílů pro obnovení pacientova imunitního systému. Pacient se tedy ocitá na určité období ve stavu snížené obranyschopnosti proti infekci a pomalejšího srážení krve. Terapie zahrnující stimulaci a aktivaci neutrofílů urychluje zotavování po transplantaci kostní dřeně snižováním neutropenie a trombocytopenie.
Vynález se týká způsobu podpory přežití a aktivace neutrofílů v subjektu. Současné metody jsou zaměřeny na znovuobnovení systému krvetvorby subjektu. Růstové faktory krvetvorby v současnosti používané k takové léčbě jsou: kolonie granulocytů stimulující faktor (G-CSF), faktor pro kmenové buňky (SCF) a kolonie granulocytů-makrofágů stimulující faktor (GM-CSF). G-CSF může zkrátit celkovou délku neutropenie a trombocytofenie, ovšem zůstává zde stále významný čas, po který má pacient sníženou srážlivost krve a je velmi vnímavý k infekci.
Při transplantacích kostní dřeně se také používala „mobilizace“ pro získání většího množství kmenových/progenitorových buněk z periferní krve. Hematopoetické kmenové buňky kostní dřeně jsou mobilizovány v krvi a podrobeny léčbě růstovými faktory. Růstové faktory používané pro takovou léčbu zahrnující interleukin-3 (IL3), G-CSF, GM-CSF, SCF a rekombinantní fúzní proteiny, které mají aktivní části jak IL-3 tak i GM-CSF. Mobilizované kmenové buňky jsou po léčbě růstovým faktorem vytěženy a dodány infuzí zpět pacientovi po další vysoké dávce chemoterapie nebo radioterapie pro obnovu neutrofílů a krevních destiček.
Středně dlouhé triglyceridy (jež jsou zde také zmiňovány jako „MCT“) sestávají z glycerolu esterifíkovaného mastnými kyselinami o délce uhlíkového řetězce 8 (C8, kyselina oktanová nebo kyselina kaprylová) a 10 (CIO, dekankyselina nebo kyselina kaprinová). MCT jsou obvykle tvořeny směsí esterů glycerolu C8 a CIO mastných kyselin. MCT mohou však také obsahovat malá množství (2 ±1 % každý) esterů glycerolu C6 (hexakyselina nebo kyselina kapronová) a 02 (dodekankyselina nebo kyselina laurová). CRODAMOL™ jsou běžně dostupné, MCT jsou dostupné u Croda Ltd., Toronto (Kanada). Jak je zřejmé z příkladu 1, CRODAMOL™ je MCT, který obsahuje triestery glycerolu C8 a CIO mastných kyselin přítomné v proměnlivých množstvích. CRODAMOL™ však neobsahuje estery C6 ani 02 mastných kyselin. Ovšem triglyceridy s dlouhým řetězcem (zde zmiňované jako „LCT“) obsahují glycerol esterifikovaný mastnými kyselinami s délkou uhlíkového řetězce větší než 12, Typické mastné kyseliny přítomné v LCT zahrnují kyselinu palmitovou (06) a stearovou (08). Na rozdíl od MCT jsou LCT primární složkou tuků potravy. MCT a LCT mají samozřejmě významně rozdílné biologické vlastnosti. Některé z fyziologických rozdílů mezi * · · • · « · · · • · · 9 9 9 · 9 * · • · Λ 9 9 9 9 ···« · ♦ · · Φ
MCT a LCT jsou popsány v Harrisonových principech v Intemal Medicín, osmé vydání, 1520-1521 (1977), McGraw Hill Book Company, patnácté vydání, 1668-1669 (2001). MCT například nevyžadují na rozdíl od LCT hydrolýzu pankreatickou lipázou vzhledem k tomu, že mohou být absorbovány epitelámími buňkami tenkého střeva.
MCT a středně dlouhé mastné kyseliny, jež jsou jejich součástí, nejsou toxické materiály a jsou využívány v potravinářském a farmaceutickém průmyslu. Například, K. A.Traul a kol. v Food and Chemical Toxicology 38: 79-98 (2000) uvádí, že MCT byly využity ve vzrůstajícím počtu potravin a nutričních doplňků, protože poskytují oproti LCT mnoho výhod. MCT jsou také používány zejména jako emulgátory v různých humánních a veterinárních farmaceutických přípravcích a v kosmetice. Autoři odkazují na mnoho toxikologických studií, které potvrzují bezpečnost MCT. Zmiňují například, že bezpečnost konzumace MCT v potravě lidmi až do množství lg/kg bylo potvrzeno v klinických testech. C8 a CIO mastné kyseliny jsou stejně tak bezpečné a mají podobné použití. Například v The Merck Index, jedenácté vydání, 266 (1989) je uvedeno, že kyselina kaprylová má LD50 (orální, krysy) = 10,08 g/kg, což znamená, že je absolutně netoxická. Podle sekce 148 Code of Federal Regulations (CFR), the U. S. Federal Drug Agency (FDA) má kyselina kaprylová status „uznána za obecně neškodnou“ GRAS (Generally Recognized As Safe). Stejně tak jsou podle sekce 172 (CFR) uznány volné mastné kyseliny (např. kaprinová, kaprylová) za neškodné přísady pro použití v potravinách. Jak bylo uvedeno vD. Dimitrievic a kol., Journal of Pharmacy a Pharmacology 53: 149-154 (2001), kyselina kaprinová (sodná sůl) je povolena pro humánní použití v Japonsku a Švédsku, jako součást léčiv podávaných rektálně, pro zvýšení jejich absorpce. U. S. patent 4,602,040 (1986) popisuje použití MCT jako farmaceutické pomocné látky. Publikace PCT WO 01/97799 popisuje použití středně dlouhých mastných kyselin, zejména kyseliny kaprylové a kyseliny kaprinové, jako antimikrobiálních činidel.
Účinnost středně dlouhých mastných kyselin, jako například kyselina kaprinová a kyselina kaprylová nebo jejich kovové soli nebo mono-, di- nebo triglyceridy (MCT), v roli faktorů pro přežití a aktivaci neutrofílů, však před uveřejněním tohoto vynálezu nebyla známa. Jak je zde popsáno, MCT obsahují triglyceridy C8 (kaprylová) a CIO (kaprinová) mastných kyselin, které tvoří základ nejméně 98 % aktivity příslušející stimulaci krvetvorby a dozrávání neutrofílů. D Waitzberg a kol. v Nutrition 13: 128-132 (1997) uvádí, že emulze lipidů (LCT a MCT) pouze mírně snižuje baktericidní účinek neutrofílů a nemá žádný účinek na monocyty. Ovšem jediná publikace, která obsahuje neurčitou informaci o tom, že MCT by mohly ovlivňovat neutropenii, popisuje klinické studie, ve kterých jsou MCT podávány společně • · · · • · · 4 4 4 »· 4 4» * 4 · « 4
4 4 4 4 4 ·
4 4 4444 ·
44 4 4 »4·· •44 4 444 4444 44 <4 s LCT a srovnávány se samotnými LCT. Nebyly provedeny žádné studie s MCT samotnými a jejich účinek na imunitní funkce není tudíž jasný. Ovšem výsledky uvedené v S. Demirer a kol., Clinical Nutrition 19: 253-258 (2000) ukazují, že MCT exacerbují neutrofenii, pokud jsou MCT kombinovány s LCT a ve srovnání s LCT samotnými. Z toho důvodu se mělo zato, že MCT inhibují funkci neutrofilů a/nebo jejich přežití. Víceméně v souladu s tímto tvrzením PCT publikace WO 95/30413 uvádí, že nenasycené mastné kyseliny s dlouhým řetězcem, jako například kyselina linolová, stejně jako nasycené mastné kyseliny s dlouhým řetězcem (Cl6 nebo delší) mohou zvyšovat proliferaci hematopoetických kmenových buněk.
Vynález se týká použití středně dlouhých mastných kyselin nebo jejich kovových solí nebo triglyceridů nebo mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů nebo MCT jako stimulačních a růstových faktorů krvetvorby a jako faktorů přežití a aktivace neutrofilů. Při aplikaci chemoterapie nebo radioterapie je kompozice obsahující středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo jejich mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT aplikována před, v průběhu a/nebo po skončení léčby, aby se zkrátilo období neutropenie a urychlilo obnovení systému krvetvorby. Kromě toho je možné použít kombinaci středně dlouhých mastných kyselin spolu s jejich kovovými solemi nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jinými jejich analogy a/nebo MCT v mnoha směrech pokud se týče léčby chemoterapií nebo radioterapií (např. mastné kyseliny před léčbou a MCT po jejím skončení). Nebo je také možné podávat kombinaci současně: před, v průběhu a/nebo po skončení léčby chemoterapií a radioterapií. Při závažné neutropenii lze použít kompozici obsahující středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT jako léčebné činidlo. Při transplantaci kostní dřeně lze použít středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT pro zvýšení množství periferních kmenových buněk dostupných pro transplantaci po ablativní radioterapii nebo chemoterapii. Středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT mohou být také použity po transplantaci kostní dřeně pro stimulaci kmenových buněk kostní dřeně, čímž zkrátí období zotavování z neutropenie.
Tento způsob je proto vhodný pro stimulaci krvetvorby, a tudíž léčení myelosuprese vznikající z důvodu chemoterapie nebo radioterapie; chronické nebo přechodné neutropenie, léčivy vyvolané neutropenie a neutropenie vznikající z hematologických onemocnění, podvýživy, infekce nebo radioterapie. Přechodná neutropenie může vzniknout ze stresu, «0 0«
0 0 0 0 * 0 0« 0
0 0 0 0 0 0 • 0 Λ 0 0000 0
00 00 000« •00 0 0000000 00 0» způsobeného přepravou zvířat na lodi nebo cestováním u člověka nebo zvířete. Způsob je také vhodný pro stimulaci krvetvorby, která je zapotřebí při léčení zranění u pacienta a k indukci mobilizace neutrofilů, pro usnadnění transplantace kostní dřeně u pacienta.
Zde používaný pojem „středně dlouhé mastné kyseliny, jako například kyselina kaprinová nebo kyselina kaprylová nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo jejich mononebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT kompozice“ znamená kompozice obsahující uvedené aktivní složky a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů.
Zde používaný pojem “farmaceuticky přijatelný nosič“ znamená složku, která nenarušuje fyziologický účinek středně dlouhých mastných kyselin, jako například kyselina kaprinová nebo kyselina kaprylová, nebo jejich kovových solí nebo triglyceridů nebo jejich mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů nebo MCT, a který je netoxický pro savce včetně člověka.
Kyselina kaprinová nebo kyselina kaprylová nebo jejich soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT kompozice podle vynálezu jsou formulovány s použitím kyseliny kaprinové nebo kyseliny kaprylové nebo jejich solí nebo triglyceridů nebo jejich mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů nebo MCT a farmaceuticky přijatelných nosičů postupem známým odborníkům vdané oblasti (MERCK INDEX, Merck&Co., Rahway, NJ). Tyto kompozice zahrnují, ale nejsou omezeny na kapaliny, oleje, emulze, aerosoly, inhalační látky, kapsle, tablety, náplasti a čípky.
Všechny postupy zahrnují krok spojení aktivní složky (složek) s nosičem, který má jednu nebo více přídavných složek.
Zde používaný pojem „chemoterapie“ znamená proces zabíjení proliferujících buněk s použitím toxických činidel. Slovní spojení „v průběhu chemoterapie“ znamená v období, po které trvá účinek podávaného cytotoxického činidla. Naopak slovním spojením „po skončení chemoterapie“ jsou míněny všechny situace, kdy je kompozice podávána po podání cytotoxického činidla bez ohledu na jakékoli předchozí podávání stejného činidla a dále bez ohledu na přetrvávání účinku podaného cytotoxického činidla.
Je-li způsob podle vynálezu aplikován na chemoterapii, kyselina kaprinová nebo kyselina kaprylová nebo jejich soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT kompozice mohou být podávány před, v průběhu a po skončení chemoterapie, (tj. před, v průběhu nebo po skončení podávání cytotoxického činidla).
• · · · ·« ····
• · • · · ·
9 · ♦ · • · « « ·
99 * · 9 9 „Cytotoxickým činidlem“ je míněno činidlo, které zabíjí vysoce proliferující buňky, jako jsou například tumorové buňky nebo hematopoetické buňky. Příklady cytotoxických činidel, která mohou být použita v provedení vynálezu, zahrnují, ale nejsou omezeny na: cyklofosfamid, doxorubicin, daunorubicin, vinblastin, vinkristin, bleomycin, etoposid, topotekan, irinotekan, taxoter, taxol, 5-fluorouracil, metotrexát, gemcitabin, cisplatina, karboplatina nebo chlorambucil a agonista kterékoli z dříve uvedených sloučenin. Cytotoxická činidla mohou také být antivirová činidla, jako například AZT (tj., 3'-azido-3'-deoxytymidin) nebo 3TC/lamivudin (tj., 3-tiacytidin).
Zde používaný pojem „leukopenie“ znamená abnormální snížení množství leukocytů v krvi.
Zde používaný pojem „neutropenie“ znamená přítomnost abnormálně malého množství neutrofilů v krvi.
V jednom způsobu provedení je farmaceutická kompozice s výhodou ve formě jakékoli kompozice pro orální, podjazykové podávání nebo inhalaci (nosní sprej), intravenózní, intramuskulární, podkožní podávání, vhodné pro použití v léčbě neutropenie, trombocytopenie nebo jako faktoru přežití a aktivace neutrofilů.
Množství kompozice podle vynálezu, které je zapotřebí pro použití v léčbě, se mění v závislosti na způsobu podávání, povahou onemocnění, které má být léčeno, věkem a kondicí pacienta a závisí na posouzení ošetřujícího lékaře. Potřebná dávka může být podána najednou nebo rozdělena do dávek podávaných ve vhodných intervalech, například dvakrát, třikrát čtyřikrát nebo vícekrát denně.
I když je možné, pro použití v léčbě, podávat středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich kovové soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT ve formě surové chemikálie, je výhodné podávat aktivní složku ve formě farmaceutické formulace.
Ve výhodném příkladu provedení vynálezu je množství podávané aktivní složky takové, že koncentrace v krvi (volné a/nebo vázané na albumin séra) je větší než 1 μΜ. V určitém výhodném příkladu provedení je koncentrace v krvi větší než 1 mM.
V dalším příkladu provedení vynálezu je farmaceutická kompozice ve formě, která je vhodná pro podávání orální (včetně podjazykového) nebo parentální (včetně intramuskulámího, podkožního, rektálního a intravenózní ho). Formulace může být, tam, kde je to vhodné, rozdělena do malých dávkových jednotek a může být připravena kterýmkoli postupem známým
9 9 99 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 ^9
999 9 999 9999 99 99 ·· ··9 · t· ·· ve farmacii. Všechny postupy zahrnují krok spojení aktivní sloučeniny s kapalným nosičem nebo jemně rozmělněným pevným nosičem nebo oběma a poté, je-li to zapotřebí, tvarování produktu do požadované formulace. Je-li to zapotřebí, může dříve zmíněná formulace upravena tak, aby se aktivní složka uvolňovala postupně.
Středně dlouhé mastné kyseliny nebo jejich soli nebo triglyceridy nebo mono- nebo diglyceridy nebo jiné jejich analogy nebo MCT mohou také být použity v kombinaci s jinými terapeuticky aktivními činidly, jako jsou například cytotoxická protirakovinná činidla nebo jiná protirakovinná činidla (imunitu upravující nebo regulující léčiva nebo terapeutické vakcíny nebo antiangiogeneticá léčiva, apod.) imunosupresiva (včetně antiflogistik), růstový faktor, jako například kolonie stimulující faktor (s výhodou GM-CSF nebo G-CSF), cytokiny, jako jsou například interleukin 2 nebo interleukin 15, nebo jejich kombinace. Jednotlivé složky takových kombinací mohou být podávány buďto postupně (před nebo po) nebo současně v oddělených nebo složených farmaceutických formulacích. Dříve uvedená kombinace může být pro použití přítomna ve farmaceutické formulaci a farmaceutická formulace tedy obsahuje kombinaci, jak byla definována dříve, spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem a tvoří tedy další aspekt vynálezu.
Ve výhodném provedení způsobu stimulace krvetvorby v pacientovi, který takovou léčbu potřebuje, je podáváno farmaceuticky účinné množství kompozice obsahující jednu nebo více z následujících složek obecných vzorců I, Π a ΙΠ nebo jejich kombinace:
ff (I), (Π), ^COAYBO*
I Y~O,NH ff
RjC—X Π (III), ff
R^-X
O m Z = O, NH, CHjO “zero kde
R1 je nasycená nebo nenasycená C7-C11 alkylová skupina s přímým nebo rozvětveným
O
II řetězcem; A a B jsou hydrogen nebo , nezávisle; a
X je hydroxylová skupina, oxy anion s kovovým mono-nebo dikationovým protiionem nebo alkoxy skupina s přímou nebo větvenou C1-C4 alkylovou částí.
*·· ·» ♦·♦· • 9
99 9
Odborníkův v dané oblasti bude zřejmé, že v obecném vzorci ΠΙ pojem „Z = nula“ znamená, že jsou možná různá Z a mohou být eliminována nebo zaměněna vodíkem.
V jiném výhodném příkladu provedení vynálezu obsahuje kompozice směs alespoň dvou sloučenin popsaných obecným vzorcem I, které jsou středně dlouhé triglyceridy (MCT), kde A,B a Rj jsou stejné a jsou přímé nebo větvené, nasycené nebo nenasycené C7 a C9 alkylové skupiny, v tomto pořadí. Případně může kompozice obsahovat směs dvou triglyceridů, kde první MCT je popsán obecným vzorcem I, kde A, B a Ri jsou CH3(CH2)6 a druhý MCT je popsán obecným vzorcem I, kde A, B a R, jsou CH3(CH2)8, Kompozice může dále obsahovat od 0,1 % do 3 % každé ze tří sloučenin popsaných obecným vzorcem I, kde A, B a Ri jsou CH3(CH2)4 a čtvrtá sloučenina popsaná obecným vzorcem I, kde A, B a Ri jsou CH3(CH2)io. Kompozice také může být směsí obsahující čtyři geometrické izomery C8 a CIO triglyceridů mastných kyselin popsaných následujícím obecným vzorcem:
/'Uo12 3 4 n = 6 6 6 8 m=6 6 8 8 p = 6 8 8 8
V jiném výhodném příkladu provedení vynálezu obsahuje kompozice jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem Π nebo obecným vzorcem ΠΙ, kde X je OH nebo X je oxy anion s kovovým protiionem, jako například vápník, hořčík, draslík a sodík.
V dalším příkladu provedení vynálezu je kompozicí kyselina kaprylová, kyselina kaprinová, kaprylát sodný, kaprinan sodný, kaprylát vápenatý, kaprinan vápenatý, triglycerid kyseliny kaprylové nebo triglycerid kyseliny kaprinové.
Zde popsané kompozice a způsoby zahrnují následující analogy a sloučeniny:
aza analogy triglyceridů kyseliny kaprylové nebo triglyceridů kyseliny kaprinové, kde je aza analog s výhodou l,2,3-O,N,O-trioktanoylserinol nebo l,2,3-O,N,O-tridekanoylserinol; sloučeninu popsanou obecným vzorcem IV ·· ·· ···«
9 9 9 9
9 9 9 « ·
9 9 ·· 9 9 .COOH a í^^CNH^COOH
IV n-6,8 m= 1,2
(IV), (V), sloučeninu popsanou obecným vzorcem VI, která poskytuje farmaceutickou formulaci degradací in vivo, při Čemž se uvolňuje dále popsaná aktivní složka.
OCTL-C—
W
VI = 6,8 m-l,2 ft X-H.OH.C-NHj (VI),
Následující obrázky ještě dále popisují způsoby vynálezu, ale vynález jimi není omezen. Je třeba si uvědomit, že výběr dávkovači jednotky středně dlouhých mastných kyselin nebo jejich solí nebo triglyceridů nebo mono- nebo diglyceridů nebo jiných jejich analogů nebo MCT a příslušné farmaceutické formulace, která má být podávána kterémukoli jednotlivému pacientovi (člověku nebo zvířeti) je v kompetenci ošetřujícího lékaře, bude předepsána ve vhodném dávkování a bude záviset na stavu nemoci a podobných faktorech v souladu s náhledem ošetřujícího lékaře.
• *999 • 9· 99 999 9
• 9 9 9 9 9 9 • 9 9
• · • · 9 9 •
• · • 9· · 9 9 999 9999 • 9 9 9 • 9 99
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: Analýza CRODAMOL™ (MCT: triglycerid kyseliny kaprylové/kaprinové)
CRODAMOL™ GTCC část #T1033-1299 zCroda Ltd. (Toronto, Kanada) byl analyzován acetylenovou chemoterapií. GC FID-analýza, podmínky gradientu: 100 až 250 °C v průběhu 10 minut, pak 250 °C po dobu 25 minut; FID 250 °C. Byly zjištěny čtyři maximální hodnoty: 22,04 minut (26 %) 25,07 minut (43 %), 29,16 minut (25 %) a 34,75 minut (5 %).
Vzorek triglyceridu kyseliny kaprylové (trikapryl), získaný od Sigma-Aldrich šarže #079H1212, byl analyzován plynovou chromatografn. CG FID-analýza, podmínky gradientu: 100 až 250 °C v průběhu 10 minut, pak 250 °C po dobu 25 minut; FID 250 °C. Převážně jedna maximální hodnota při 22,31 minut (98 %).
Příklad 2: Acylace alkoholu s použitím chloridu kyseliny a pyridinové báze χΟΗ —OH +
Cl Způsob A o~c^^ c
—o—c n-6-10
Způsob B
Způsob a: Pyridin, CH,Cl, Způsobe: DMAP,CH,O,
Obecný způsob A (Pyridin)
Roztok alkoholu (přibližně 0,1 M) v suchém CH2CI2 a pyridinu (4 : 1) se zchladil na 0°C pod dusíkem a přidal se chlorid kyseliny (1,2 ekvivalent). Reakční směs se zvolna ohřála na teplotu místnosti a byla míchána přes noc. TLC analýza (SÍO2, EtOAc 1 : 9 hexan) nevykázala žádný zbytkový alkohol. Reakční směs se zředila CH2CI2 a promyta nasyceným vodným roztokem NH4CI. Vodná fáze se extrahovala CH2CI2 (lx) a hexanem (lx) a sloučené organické fáze se promyly nasyceným vodným roztokem NaCl, vysušily nad Na2SO4, přefiltrovaly a vysušily ve vakuu, čímž se získal surový produkt.
Obecný způsob B (DMAP)
Roztok alkoholu (přibližně 0,1 M) v suchém CH2CI2 se zchladil na 0°C pod dusíkem a přidal se DMAP (1,3 ekvivalent) a chlorid kyseliny (1,2 ekvivalent). Reakční směs se zvolna ohřála na teplotu místnosti a míchala přes noc. TLC analýza (S1O2, EtOAc 1 : 9 hexan) nevykázala žádný zbytkový alkohol. Reakční směs se zředila CH2CI2 a promyla nasyceným vodným roztokem NH4CI. Vodná fáze se extrahovala CH2CI2 (lx) a hexanem (lx) a sloučené organické fáze se promyly nasyceným vodným roztokem NaCl, vysušily nad Na2SO4, přefiltrovaly a vysušily ve vakuu, čímž se získal surový produkt.
Příklad 3: Triglycerid kyseliny pelargonové
Glycerol (120mg, 1,30 mmol) se acyloval chloridem kyseliny pelargonové (751 μΐ, 4,16 mmol) podle obecného způsobu A, příklad 2, Přečištěním sloupcovou chromatografií (Isolute™ SÍO2, eluce s 0% až 5% EtOAc v hexanu) se získaly dva produkty obsahující frakce, které se vysušily ve vakuu, čímž vznikl požadovaný produkt ve formě bezbarvé kapaliny, v 89% (127 mg, 19 %) a 93% (475 mg, 71 %) čistotě (GC/FID). Rf 0,46 (SiO2, 10% etylacetát v hexanu; Ή NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ = 5,27 (m,lH), 4,29 (dd, 2H), 4,14 (dd, 2H), 2,31 (m, 6H), 1,61 (m,6H), 1,27 (m, 30H), 0,88 (t, 9H); MS (FAB+) m/z = 510 (M-H+); GC FIDanalýza, podmínky: gradient 100 až 250 °C v průběhu 10 minut, pak 250 °C po dobu 25 minut; FED 250 °C; 27,25 minut.
Příklad 4: Diglycerid a monoglycerid kyseliny pelargonové
») Pyridin, CHjClj.
O
Glycerol (100 mg, 1,09 mmol) se acyloval jedním ekvivalentem chloridu kyseliny pelargonové (205 μΐ, 1,09 mmol) podle obecného způsobu A, příklad 2. Přečištěním pomocí Biotage™ (40S, SiO2, eluce 10% etylacetátem v hexan- 100% etylacetát) se získal bezbarvý olej. Získaly se dvě různé sloučeniny:
diglycerid kyseliny pelargonové (73 mg, 18%) ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 24 až 26 °C; Rf 0,52 (S1O2 ošetřené Et3N, 30% etylacetát v hexanu); 1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δΗ= 4,17 (m, 2H), 2,35 (t, 4H), 1,63 (m, 4H), 1,27 (m, 20H), 0,88 (t, 6H); MS (FAB+) m/z = 373 (M+H+).
Monoglycerid kyseliny pelargonové (85 mg, 34%) se získal ve formě bílé pevné látky. Teplota tání 37 až 38,5°C; Rf 0,08 (S1O2 připraveno s Et3N, 30% etylacetát v hexanu); !H NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ = 4,18 (m, 2H), 3,94 (m 1H), 3,69 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 2,36 (t, 2H), 1,62 (m, 2H), 1,28 (m, 10H), 0,88 (t, 3H); MS (FAB) m/z = 233 (M+H+).
Příklad 5: l,2,3-O,77,O-tridekanoyl serinol
Serinol (51 mg, 0,56 mmol) se acyloval sebakoylchloridem (372 μΐ, 1,76 mmol) podle obecného způsobu B, příkladu 2. Přečištěním pomocí MPLC (S1O2, eluce 0% a následně 10% EtOAc v hexanu) se získal požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky. (301 mg, 97%). Teplota tání 54°C; TLC, Rf 0,85 (SiO2, EtOAc 2 : 3 hexan); ’H NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ 0,84 (9H, t), 1,20 až 1,27 (36H, m), 1,52 až 1,60 (6H, m), 2,13 (2H, t), 2,28 (4H, t); 4,03 (2H; 2 x A 2 x ABX), 4,19 (2H, 2 x B 2 x ABX), 4,41 až 4,46 (1H, m), 5,70 (1H, d); HRMS m/e vypočteno pro C33H63 NO5 553,4706, nalezeno 553,4713, GC-FID analýza, podmínky gradientu: 100 až 250°C v průběhu 10 minut, pak 250°C po dobu 25 minut; FID 250°C. Převážně jedno maximum při 14,80 minut (98%).
9999 • ·9 99 ··· · • 9 · · · 9 · • · 9 · · • 9 9 9 9 ·
999 ·999 99 99
Příklad 6:1,3-0,0-didekanoylserinol
a) BOC-ON, EtjNjblDMAP.CHjClj; c)HCL
Do roztoku serinolu (1,57 gm, 17,2 mmol) v acetonu (17 ml) a vodě (17 ml) se přidal triethylamin (3,60 ml, 25,9 mmol) a BOC-ON (4,67 gm, 19,0 mmol) a reakční směs se míchala pod dusíkem přes noc. Aceton se vysušil ve vakuu a surová směs se rozdělila mezi EtOAc a vodu. Vodná fáze se extrahovala EtOAc (3x) a sloučené organické fáze se vysušily nad Na2SO4, přefiltrovaly a vysušily ve vakuu, čímž vznikla žlutá pevná látka. Přečištěním MPLC (SiO2, eluce 40% až 80% EtOAc v hexanu) vznikl TV-BOc-diol meziprodukt ve formě bílé krystalické pevné látky (2,10 gm. -64%). TLC, Rf 0,15 (SiO2, EtOAc 4 : 1 hexan); ’H NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ 1,40 (9H, s), 3,54 až 3,56 (5H, m).
yV-BOC-diol meziprodukt (50 mg, 0,26 mmol) se acyloval dekanoylchloridem (173 μΐ, 0,83 mmol) podle obecného způsobu B. Přečištěním MPLC (SiO2, eluce 0% a pak 10% EtOAc v hexanu) se získal V-BOC-diacyl meziprodukt ve formě bezbarvého oleje (115 mg, 88%). TLC, Rf 0,80 (SiO2, EtOAc 2 : 3 hexan); Ή NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ 0,87 (6H, t), 1,23 až 1,30 (24H, m), 1,44 (9H, s), 1,56 až 1,70 (4H, m), 2,31 (4H, t), 4,04 až 4,21 (4H, m), 4,77 až 4,80 (IH, m), 6, 73 (IH, d).
Roztok yV-BOC-diacyl meziprodukt (76 mg, 0,15 mmol) v suchém CH2C12 (1,5 ml) se zchladil na 0°C a přidal se roztok 4,0 M bezvodého HC1 v 1,4-dioxanu (375 μΐ, 1,50 mmol; konečná koncentrace 0,8 M). Reakční směs se postupně zahřála na teplotu místnosti a míchána po dobu 3 hodin při stálé teplotě. Přidala se další část 4,0 M bezvodého HC1 v 1,4-dioxanu (375 μΐ, 1,50 mmol) a reakčí směs se míchala po dobu dalších dvou hodin. Odpařením rozpouštědel se získal požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky (69 mg, 100%). teplota tání 101 °C;
• ··«· • ·· ·· ··· ·
• · • · * · • •
• · • · • • •
• · • · • • • *
·* · *·· ···· ·· »·
TLC, Rf 0,40 (SiO2, EtOAc 2 : 3 hexan); Ή NMR (CDC13, 300 MHz) δΗ 0,88 (6H, t), 1,20 až 1,29 (24H, m), 1,55 až 1,65 (4H, m), 2,45 až 2,52 (4H, m), 3,72 až 3,80 (1H, m), 4,30 až 4,51 (2H, m), 8,6 až 9,0 (3H, br m); HRMS m/e vypočteno pro (M- HCl), C23H45NO4 339,3348, nalezeno 339,3340; GC-FID analýza, podmínky gradientu: 100 až 250°C v průběhu 10 minut, pak 250°C po dobu 25 minut; FID 250°C. Převážně jedno maximu v 17,14 minut (94%).
Příklad 7: a- a P-l-O-metyl-2,3,4,-O,<9,<9-tridekanoyl-L-fukopyranóza
1-O-metyl-L- fukopyranóza (593 mg, 3,33 mmol) se syntetizovala podle způsobu Levene & Muškát (J. Biol. Chem. 105:431-441, 1934) a acylovala se dekanoylchloridem (2,90 ml, 14,0 mmol) podle obecného způsobu B, příklad 2, Přečištěním MPLC (SiO2, eluce 0% až 5% EtOAc v hexanu) se získal α (1,18 gm, 55%) a β (0,52 gm, 24%) anomer požadovaného produktu ve formě bezbarvého oleje.
Údaje pro ct anomer: TLC, Rf 0,45 (SiO2, EtOAc 1 : 9 hexan); *H NMR (CDCI3, 300 MHz) δΗ 0,87 (9H, t), 1,14 (3H, d), 1,20 až 1,35 (36H, m), 1,52 až 1,68 (4H, m), 2,18 (2H, t), 2,29 (1H, A ABX2), 2,32 (1H, B ABXv, 2,41 (2H, t), 3,38 (3H, s), 4,13 (1H, qd, /6,5), 4,93 (1H, d), 5,15 (1H, dd, 5,30 (1H, dd), 5,36 (1H, dd); HRMS m/e vypočteno pro (M-CH3O) C36H65O7 609,4730, nalezeno 609,4720.
Údaje pro β anomer: TLC, Rf 0,40 (SiO2, EtOAc 1 : 9 hexan); *H NMR (CDCI3, 300 MHz) δΗ 0,87 (9H, t, /6,5 Hz), 1,22 (3H, d), 1,20 až 1,35 (36H, m), 1,49 až 1,67 (4H, m), 2,18 (2H, t), 2,25 (1H, A ABX2), 2,29 (1H, B ABX2), 2,34 (2H, t), 3,50 (3H, s), 3,81 (1H, qd), 4,35 (1H, d), 5,03 (1H, dd), 5,19 (1H, dd), 5,24 (1H, dd).
Příklad 8: L-glutamát kapramid
a) EDCI, DMAP, íPr2EtN, 0¾¾ b) HCVl,4-Dioxane, (¾¾.
K roztoku kyseliny kaprinové (7,30 mmol, l,26g) v suchém CH2CI2 (60 ml) se přidal pod dusíkem di-t-butylester kyseliny L-glutamové HCl sůl (6,09 mmol, 1,80 gm), DMAP (1,8 mmol, 0,22g), diizopropyletylamin (18 mmol, 3 ml) a l-(3-dimetylaminopropyl)-3etylkarbodiimid HCl sůl (EDCI) (7,30 mmol, 1,40 gm). Výsledný bezbarvý roztok se míchal při pokojové teplotě po dobu 24 hodin. Rozpouštědlo se poté odstranilo za sníženého tlaku, čímž vznikl bílý olejovitý zbytek. Přečištěním Biotage™ (40S SiO2, eluce 5% etylacetát v hexanu -30% etylacetát v hexanu) vznikl bezbarvý olej, což byl L-glutamát di-/-butylester kapramid (2,47 gm, 98%). Rf 0,56 (SiO2 30% etylacetát v hexanu); LH NMR. (CDCI3, 300MHz) δΗ = 6,05 (d, 1H), 4,45 (m, 1H), 2,30 (m, 2H), 2,27 (m, 2H), 2,16 (t, 2H), 2,07 (m, 1H), 1,87 (m, 1H), 1,58 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,41 (s, 9H), 123 (m, 12H), 0,84 (t, 3H).
Odstranění chránící skupiny BOC bylo dosaženo pomalým přidáváním roztoku 4,0 M HCl v 1,4-dioxanu (23 ml) k roztoku derivátu di-Z-butylesteru (5, 75 mmol, 2,38 gm) v CH2CI2 (35 ml) při teplotě 0°C. Bezbarvý roztok se pomalu ohřál na teplotu místnosti a míchal se po dobu dalších 20 hodin. Rozpouštědlo se poté odstranilo za sníženého tlaku a výsledná bílá pevná látka se vysušil, čímž se získal L-glutamát kapramid (1,71 gm, 99%). Teplota tání 95°C až 96,5°C; !H NMR (CD3OD, 300 MHz) δΗ = 4,39 (m, 1H), 3,27 (d, 1H), 2,36 (t, 2H), 2,20 (t, 2H), 2,13 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 1,58 (m, 2H), 1,27 (m 12H), 0,86 (t, 3H); MS (ES+ m/z = 324 (M+Na+, 302 (M+H+); MS (ES') m/z = 300 (M-H+); HPLC analýza, podmínky: gradient 0,01%TFA v 10% až 70% acetonitrilu podobu 10 minut; proudění 1,0 ml/min; 210 nm; 8,93 minut.
Příklad 9: Ν,Ν-dimetylacetamidester kyseliny kaprinové
K roztoku kyseliny kaprinové (8,7 mmol, 1,5g) v bezvodém DMF (80 ml) pod dusíkem se přidal jodid sodný (0,87 mmol, 130 mg) a následně dimetylchloroacetamid (9,6 mmol, 985 μΐ). Poté se přidal uhličitan draselný (9,6 mmol, 1,3 g) a výsledná suspenze se míchala při • · · ·
• · · • ♦ · 9 • · » · • · · · teplotě 90°C po dobu 5 dní. Reakční směs se pomalu ochladila na teplotu místnosti a poté smíchána s destilovanou vodou. Produkt se extrahoval ethylacetátem (3x). Sloučená organická fáze se promyla vodným roztokem NaHCO3, vysušila Na2SO4, přefiltrovala, a zakoncentrovala za sníženého tlaku. Získaná žlutá kapalina se přečistila Biotage™ (4OM, SO2 eluce 25% etylacetát v hexanu-50% etylacetát v hexanu). Ν,Ν-dimetylacetamidester kyseliny kaprinové (2,03 gm, 92%) se získal ve formě bílého prášku. Teplota tání 42 až 42,5 °C; Rf 0,55 (SiO2, etylacetát); *H NMR (CDC13, 300 MHz) OH = 4,64 (s, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,38 (t, 2H), 1,62 (qt, 2H), 1,22 (m, 12H), 0,83 (t, 3H); MS (ES+) m/z = 537 (2M+Na+), 280 (M+Na+), 258 (M+H+).
Příklad 10: In vitro testy apoptózy a přežití neutrofilů
Přežití neutrofilů se měřilo podle popisu Lagraoui a Gagnon (Cell. Mol. Biol. 43:313318, 1997). Neutrofily se získaly z periferní krve zdravých dobrovolníků. S krví byla provedena gradientová centrifugace s Lymfolyt-poly (Cedarlane, Homby, Kanada) a následovala hypotonická lyže obsažených erytrocytů. Buňky byly suspendovány v RPMI (Gibco, Burlington, Kanada) doplněny 10% FBS (Hyclone, Logan USA). Výsledné buněčné preparáty sestávaly z >95% neutrofilů, jak se stanovilo Wright Giemsa barvením. Životaschopnost byla vyšší než 97%, jak se stanovilo pomocí vylučovací metody s trypanovou modří. Polymorfonukleámí leukocyty (PMN) mají krátký poločas přežití a rychle podléhají charakteristickým změnám příznačným pro apoptózu. Apoptóza se stanovila podle postupu, který popisuje Nicoletti a kol., J. Immunol. Meth. 139:271-279, (1991). Ve stručnosti: čerstvě izolované neutrofily se inkubovaly po dobu 24 hodin při teplotě 37°C s rozdílnými koncentracemi MCT. Po inkubaci se buňky barvily propidiumjodidem (PI, Sigma) a analyzovaly na apoptózu pomocí XL proudového cytometru (Coulter). Data se vyjádřila jako procento apoptotických buněk. Obrázek 1 představuje shrnutí několika experimentů, při kterých byla měřena apoptóza neutrofilů v nepřítomnosti (kontrola) nebo v přítomnosti různých koncentrací MCT. Výsledky ukázaly, že v přítomnosti MCT in vitro je apoptóza neutrofilů inhibována až na 90 %, a že inhibice je závislá na dávce. MCT tedy mohou zvýšit přežití neutrofilů a mohou být použity jako faktor přežití neutrofilů.
Příklad 11: In vitro testy PMN fagocytózy
Neutrafily (2 x 106/ml) se inkubovaly po dobu 24 hodin, při teplotě 37°C v 5% CO2 a 95% vlhkosti s různými koncentracemi MCT. Po 24 hodinách se určila životaschopnost pomocí vylučovací metody s trypanovou modří a buňky se promyly třikrát PBS s obsahem 2 mM glukózy, 1 mM MgCl2 a 1 mM CaCl2. Poté se zvolila buněčná koncentrace na 1 x 106 buněk/ml a buňky se inkubovaly s fluorescentními karboxylátovými mikročásticemi (1/10 ředění). Po 30 minutách inkubace se neutrofily promyly a fixovaly v 2% paraformaldehydu. Fixované neutrofily se analyzovaly na pohlcení mikročástic pomocí XL proudového cytometru (Coulter).Údaje se pak vyjádřily jako procento fagocytujících buněk.
Obrázek 2 představuje shrnutí několika experimentů, při kterých se měřila PMN fagocytotická aktivita v nepřítomnosti (kontrola) nebo v přítomnosti různých koncentrací MCT. Výsledky ukazují, že MCT zvyšují fagocytotickou aktivitu lidských PMN. Fagocytotická aktivita je zvýšena dva až třikrát oproti kontrolním hodnotám a velikost stimulace závisí na stavu imunity dárce.
Příklad 12: Účinek doxorubicinu na apoptózu neutrofilů
PMN se izolovaly podle popisu v příklad 10, buňky (2 x 106/ml) byly inkubovány po dobu 4 hodin, při teplotě 37°C v 5% CO2 a při 95% vlhkosti, v přítomnosti různých koncentrací chemoterapeutického činidla doxorobicinu. Apoptotické buňky se vyhodnotily jak je popsáno v příkladu 10. Údaje jsou vyjádřeny v procentech apoptoticých buněk. Obrázky 3A a 3B ukazují, že doxorubicin indukuje PMN apoptózu.
Příklad 13: MCT brání doxorubicinem indukované apoptóze neutrofilů.
PMN byly izolovány jak je popsáno v příkladu 10. Buňky (2 x 106/ml) byly inkubovány po dobu 4 hodin, při teplotě 37°C v 5% CO2 a při 95% vlhkosti v přítomnosti různých koncentrací doxorubicinu snebo bez MCT (2,5% a 5,0%). Buňky po apoptóze byly vyhodnoceny jak je popsáno v příkladu 10. Údaje jsou vyjádřeny v procentech apoptotických buněk.
Tabulka 1 přestavuje dva experimenty měření ochranného chemického účinku MCT na PMN. Výsledky jsou vyjádřeny v procentech apoptotických buněk po 4 hodinách inkubace v přítomnosti nebo nepřítomnosti doxorubicinu s nebo bez MCT. Jak je uvedeno v příkladu 12, • · · · · ·
• · · · · • · · · • · · · · • · · · · ···· ·» β· doxorubicin indukuje PMN apoptózu in vitro. Ovšem v přítomnosti MCT, při koncentraci 2,5 % a 5 % (objemových), je apoptotický účinek doxorubicinu inhibován. MCT má tedy antiapoptotický účinek na PMN. Apoptóza byla také studována pomocí annexinu V-FITC/PI (propidiumjodid) postupem uvedeným v návodu výrobce Biosources (Apotarget Annex.vVFITC Apoptosis Kit #PHN 1018). Annexin V se váže na fosfatidylserin, který je přenesen z vnitřní na vnější membránu v době od časné do pozdní fáze apoptózy. Ve stručnosti: neutrofily se inkubovaly v přítomnosti nebo nepřítomnosti různých koncentrací doxorubicinu a MCT. Po 24 hodinách se neutrofily promyly PBS a barvily 2 μΐ Annexinu V-FITC a 10 μΐ PI (Sigma, 1 mg/ml) po dobu 20 minut. Po inkubaci se barvené buňky fixovaly v paraformaldehydu (1 %) a analyzovaly na apoptózu s použitím XL proudového cytometru (Coulter). Údaje se pak vyjádřily v procentech apoptotických buněk.
Obrázek 4A ukazuje účinek MCT na doxorubicinem indukované neutrofily v závislosti na čase. MCT brání apoptóze indukované doxorubicinem u lidských neutrofilů v závislosti na čase a koncentraci.
Obrázek 4B představuje účinek doxorobicinu na neutrofily ošetřené MCT v závislosti na čase. MCT chrání, v závislosti na koncentraci, neutrofily proti doxorubicinem indukované apoptóze až 4 hodiny před vložením toxického činidla, (doxorubicin).
Tabulka 1
Ochranný účinek MCT na doxorubicnem indukovanou apoptózu neutrofilů
koncentrace doxorubicinu % apoptózy neutrofilů (PMN)
pokus 1 pokus 2
kontrola MCT 2,5 (obj.%) MCT 5 (obj.%) kontrola MCT 2,5 (obj.%) MCT (obj.%) 5
0 12,4 9,5 12,3 49,6 23,6 4,6
10'1θΜ 9,3 11,7 7,4 60,6 14,7 23,9
108M 18,7 14,2 8,3 59,2 32,5 14,8
10’6M 23,2 12,7 3,5 55,0 21,6 16,9
10'5M 23,8 12,3 8,3 66,2 74,7 12,1
10'4M 27,5 35,2 17,1 53,2 58,6 55,7
Příklad 14: MCT brání doxorubicinem indukované apoptóze neutrofilů: Srovnání s GM-CSF Tabulka 2 představuje účinek GM-CSF, MCT a trikaprylinu na doxorubicinem indukovanou apoptózu lidských neutrofilů. GM-CSF a MCT jsou schopny zabránit nebo předcházet doxorubicinem indukované apoptóze lidských neutrofilů. Trikaprylin brání doxoruhinem indukované apoptóze a dále zvyšuje životnost lidských neutrofilů, a to více než bylo pozorováno u neošetřených neutrofilů (kontrola, nepřítomnost doxorubicinu).
Tabulka 2
Ochranný účinek MCT a GM-CSF na doxorubicinem indukovanou apoptózu neutrofilů
% životaschopnosti PMN
kontrola 35,9 ± 0,71
doxorubicin (DOX) (10sM) 6,82 ± 0,5
GM-CSF (10'7M) + DOX 16,75 ±2,05
GM-CSF (10'8 M) + DOX 6,99 ± 0,23
MCT (24 mM) + DOX 14,20 ± 1,98
MCT (12 mM) + DOX 12,37 ±1,72
trikaprylin (24 mM) + DOX 12,13 ± 1,25
trikaprylin (12 mM) + DOX 42,95 ±6,15
·· ·· *♦·· • » · · · • · · · • · · · · • · · · · • ···· ·· ··
Příklad 15: MCT a trikaprin zvyšují in vitro proliferaci kostní dřeně myší
Buňky kostní dřeně se získaly z femuru C57BL/6 myších samic (6 až 8 týdnů starých).
Buňky se propláchly a promyly PBS. Získané buňky se centrifugo vály a resuspendovaly při 2 x 106 buněk/ml. 100 μΐ buněk (2 x 105 buněk) se inkubovalo v 96-buňkových mikrotitrových deskách po dobu 48 hodin v přítomnosti nebo nepřítomnosti MCT nebo trikaprinu. Poté se buňky vystavily působení 1 pCi [3H]-tymidin po dobu 6 hodin. Desky byly vytěženy na Tomteck a sečteny na Microbeta β-čítači. Začlenění [ H]-tymidinu do DNA je přímým ukazatelem proliferace buněk.
Obrázek 5 představuje typický pokus týkající se účinku MCT a trikaprinu na proliferaci kostní dřeně. MCT a trikaprin zvyšují proliferaci kostní dřeně 3 až 5 krát vzhledem ke kontrole.
Příklad 16: Studie chemické ochrany: in vivo indukce proliferace imunitních buněk nebo jejich ochrana pomocí MCT
U C57BL6 myších samic, 6 až 8 týdnů starých byla navozena snížená imunita pomocí 80 mg 5-fluorouracilu (5-FU) nebo 100 až 200 mg cyklofosfamidu (CY) nebo 12 mg taxoteru (TX), podaného intravenózně dne 0. Pro zjištění ochranného chemického účinku MCT nebo jiných sloučenin, byly myši předem ošetřeny orálním podáním dne -3, -2 a -1 nebo intravenózním dne 0 testované sloučeniny. Myši byly usmrceny dne +5 vpichem do srdce a dislokací krční páteře. Poté se připravil buněčné suspenze z thymu, sleziny a kostní dřeně, jak je uvedeno dále.
Tkáně se roznarušily v PBS pufru a kontaminované erytrocyty se lyžovaly v AKC pufru (155 mM NH4C1, 12 mM NaHCO3, 0,1 mM EDTA, pH 7,3) po dobu 5 minut. Buňky se získaly centrifugací a promytím třikrát v PBS a resuspendovány v mediu tkáňové kultury. Buňky se sečetly na hemacytometru.
Výsledky ukazují, že MCT významně zvyšuje množství buněk v imunitních tkáních normálních zvířat a zvířat se sníženou imunitou ve srovnání se samotným nosičem, jak dokumentují následující tabulky a obrázky. V závislosti na pokusu a stavu imunity myši, mohou MCT zvýšit počet buněk kostní dřeně a/nebo sleziny a/nebo thymu.
Obrázek 6 ukazuje účinek MCT na počet buněk kostní dřeně u zvířete se sníženou imunitou. Pouze CY a 5-FU snížily počet buněk kostní dřeně ve srovnání s kontrolou (ne cytotoxická léčba). Ošetření taxoterem nemělo u myší žádný významný účinek na množství buněk kostní dřeně. V kostní dřeni zvířat se sníženou imunitou, zvýšilo podávání MCT (6,25 μΜ na myš) dne -3, -2 a -1 významně počet buněk kostní dřeně.
• · · · • · ·· · ··· .
Obrázek 7 představuje účinek MCT na množství buněk sleziny u myší se sníženou imunitou, které byly ošetřeny předběžnou léčbou MCT per os. Všechna cytotoxická léčiva (CY, 5-FU a TX) významně snižují množství buněk sleziny ve srovnání s kontrolou. Podávání MCT (6,25 μΜ na myš) dne -3, -2 a -1 významně zvýšilo množství buněk sleziny s „P“ méně než 0,0017; 0,009 a 0,0036 pro CY, 5-FU a TX v tomto pořadí.
Kromě toho MCT také významně zvyšuje počet buněk kostní dřeně u normálních myší, je-li podán intravenózně dne 0 (tabulka 3). Avšak jedna intravenózní injekce nepostačuje ke zvýšení počtu buněk sleziny ani u normálních myší ani u myší se sníženou imunitou.
• · · ·
Tabulka 3
Účinek cyklofosfamidu (CY) a CY + MCT na buňky kostní dřeně a sleziny (normální myši)
kostní dřeň Slezina
#buněk (xlO6) P #buněk (xlO6) P
kontrola 16 ±3,94 94 ±11
CY 13 ±3,92 0,17 60 ±12 0,0014
CY + MCT (50μΜ) 17 ±4,28 0,87 53 ± 10 0,0003
CY + MCT (12,5μΜ) 17 ±6,15 0,95 51 ± 10 0,0002
MCT (50μΜ) 41 ±6,11 >0,0001 103 ±7 0,19
MCT (12,5μΜ) 27 ±4,19 0,0018 101 ±11 0,31
Příklad 17: Studie účinku chemické ochrany: in vivo indukce proliferace imunitních buněk při podávání MCT dne -3, -2 a -1 normálním myším v závislosti na dávce.
in vivo indukce proliferace imunitních buněk při podávání MCT normálním myším v závislosti na dávce je vyhodnocena v postupu popsaném v příkladu 16.
Tabulka 4 představuje odpověď na orální podávání MCT dne -3, -2 a -1 u normálních myší. MCT významně zvyšuje množství buněk kostní dřeně a sleziny.
Tabulka 4
Účinek MCT na normální myši
kostní dřeň slezina
#buněk (xlO6) P #buněk (xlO6) P
Kontrola 45 ± 7,3 120 ± 12,9
MCT (3,15μΜ) 52 ± 4,3 0,10 144 ± 15,8 0,018
MCT (6,25μΜ) 59 ± 11,3 0,05 134 ±13,9 0,129
MCT (12,5μΜ) 54 ±6 0,04 144 ±19,8 0,04
MCT (25μΜ) 56 ±3,9 0,01 127 ±17,0 0,48
9999 • 9 · · • · · ·
9999 99 99
Příklad 18: Studie účinku chemické ochrany: in vivo indukce proliferace imunitních buněk nebo jejich ochrany: srovnání účinku MCT a GM-CSF
In vivo srovnání indukce proliferace/regenerace imunitních buněk nebo jejich ochrany bylo provedeno podle postupu, který je uveden v příkladu 16. Srovnávací studie MCT a GMCSF se provedly na normálních zvířatech a na zvířatech se sníženou imunitou. Ve srovnání s MCT nemělo GM-CSF žádný významný účinek na množství buněk kostní dřeně a sleziny u zvířat se sníženou imunitou. Významný účinek GM-CSF byl pozorován pouze v souvislosti s váhou thymu u normálních myší (obrázek 8). V tomto případě má MCT podobný účinek jako GM-CSF.
Příklad 19: Studie účinku chemické ochrany
Účinek kyseliny kaprylové a kyseliny kaprinové na indukci proliferace imunitních buněk in vivo nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Jak je vidět z tabulky 5, pouze kyselina kaprinová významně zvyšuje počet buněk kostní dřeně. V počtu buněk sleziny nebyl zaznamenán žádný významný účinek ve srovnání se zvířaty, kterým byl podáván cyklofosfamid.
Tabulka 5
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + kyselina kaprylová a CY + kyselina kaprinová na buňky kostní dřeně a sleziny
kostní dřeň slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (XlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 54 ± 5,9 66 ± 7,3
CY 22 ± 5,7 >0,0001 23 ±4,0 >0,0001
CY + kyselina kaprylová 26 ±3,58 0,001 0,21 28 ± 6,4 >0,0001 0,17
CY + kyselina kaprinová 32 ±2,71 0,0004 0,006 27 ± 8,4 >0,0001 0,27
Příklad 20: Studie účinku chemické ochrany
Účinek trikaprylinu a trikaprinu na in vivo indukci proliferace imunitních buněk nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Trikaprylin a trikaprin jsou oba účinné na proliferaci a ochranu buněk kostní dřeně u CY ošetřených myší (tabulka 6).
Nebyl však pozorován žádný významný účinek na množství buněk sleziny ve srovnání s myšmi ošetřenými cyklofosfamidem.
Tabulka 6
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + trikaprylin a CY + trikaprin na buňky kostní dřeně a sleziny
kostní dřeň Slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
Kontrola 55 ± 9,3 113 ±15,9
CY 22 ± 5,8 0,0001 36 ± 13,6 >0,0001
CY+ rikaprylin 34 ± 7,8 0,0033 0,022 37 ±12,6 >0,0001 0,8
CY + trikaprin 31 ±3,8 0,0008 0,012 38 ±6,8 >0,0001 0,7
Přiklad 21: Studie účinku chemické ochrany
Účinek kyseliny pelargonové a kyseliny laurové na in vivo indukci proliferace imunitních buněk nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Významné zvýšení proliferace a ochrany buněk kostní dřeně a sleziny bylo pozorováno při předběžné léčbě kyselinou laurovou u CY ošetřených myší. Kyselina pelargonová však vykazuje slabé (nevýznamné) účinky na množství imunitních buněk (tabulka 7) ve srovnání s myšmi ošetřenými cyklofosfamidem.
Tabulka 7
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + kyseliny pelargonové a CY + kyseliny laurové na buňky kostní dřeně a sleziny.
kostní dřeň Slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 58 ± 11,8 99 ±22
CY 32 ± 6,3 0,0016 1,0 24 ±6 0,0002
• · · ·
CY+ kyselina pelargonová (6,25 μΜ) 36 ± 5,6 0,0044 0,26 28 ±4 0,0004 0,27
CY ± kyselina laurová (6,25 μΜ) 42 ± 7,8 0,0185 0,04 32 + 5 0,0005 0,03
Příklad 22 : Studie účinku chemické ochrany
Účinek trilaurinu a trimyristinu na in vivo indukci proliferace imunitních buněk nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Trilaurin a trimyristin mají slabý (nevýznamný) účinek na množství buněk kostní dřeně a sleziny u myší s oslabenou imunitou pomocí CY (tabulka 8).
Tabulka 8
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + trilaurin a CY + trimyristin na buňky kostní dřeně a sleziny.
kostní dřeň slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xl0‘) P/kontrola P/CY
kontrola 49 ± 7,3 105 ±23
CY 27 ± 2,8 0,0014 1,0 19 ±6,5 0,0007
CY+ trilaurin (6,25 μΜ) 31 ±6,8 0,0028 0,219 28 ± 19,5 0,0004 0,302
CY + trimyristin (6,25μΜ) 31 ±9,9 0,0067 0,402 15 ±4,6 0,0007 0,314
Příklad 23 : Studie účinku chemické ochrany
Účinek trikaproinu a kapronanu sodného na in vivo indukci proliferace imunitních buněk nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Trikaproin a kapronant sodný mají slabý (nevýznamný) účinek na množství buněk kostní dřeně a sleziny u myší s oslabenou imunitou pomocí CY (tabulka 9).
·· ···· .
·· · · • · · 4 ··
Tabulka 9
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + trikaproinu a CY + kapronanu sodného na buňky kostní dřeně a sleziny.
kostní dřeň Slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 48 ± 4,9 98 + 24,2
CY 25 ± 4,9 >0,0001 33 ± 13,2 0,0018
CY+ trikaproin (6,25 μΜ) 29 ±4,1 0,0001 0,17 37 ± 8,7 0,0035 0,51
CY + kapronan sodný (6,25μΜ) 39 ± 17,9 0,2403 0,09 35 ± 10,6 0,0026 0,77
Příklad 24 : Studie účinku chemické ochrany
Účinek kaprylátu sodného a kaprinanu sodného na in vivo indukci proliferace imunitních buněk nebo jejich ochranu se stanovil podle postupu uvedeného v příkladu 16. Významné zvýšení proliferace nebo ochrany buněk kostní dřeně bylo pozorováno pň preventivní léčbě kaprylátem sodným a kaprinanem sodným u myší ošetřených CY (obrázek 9)·
Příklad 25: Studie účinku chemické ochrany: režim po léčbě
Studie účinku chemické ochrany byly provedeny podle popisu v příkladu 16, ale myši se léčily MCT, kaprylátem sodným, kaprinanem sodným nebo kyselinou kaprinovou podávanými orálně až dne 1, 2, 3 nebo 4.
Významné zvýšení množství buněk kostní dřeně bylo pozorováno u léčby post MCT, kaprylátem sodným a kaprinanem sodným u myší ošetřených CY (tabulka 10). Při použití v léčbě post vykazuje kyselina kaprinová indukci významného zvýšení počtu buněk sleziny a slabé zvýšení počtu buněk kostní dřeně (tabulka 11).
·· · · t« ···» • · · • · · • · · • · · · *· ··
Tabulka 10
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + MCT, CY + kaprylátu sodného a CY + kaprinanu sodného na buňky kostní dřeně a sleziny po léčbě.
kostní dřeň slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
Kontrola 52 ±6,17 110 + 29,3
CY 19 ±4,99 >0,0001 30 ± 9,5 0,0007
CY + MCT (12,5μΜ) 26 ± 3,70 >0,0001 0,0187 38 + 7,2 0,0014 0,163
CY+ kaprylát sodný (12,5 μΜ) 26 ± 5,33 >0,0001 0,0455 36 ± 12,5 0,0009 0,394
CY + kaprinan sodný (12,5μΜ) 29 ± 4,45 0,0001 0,0140 28 ± 6,3 0,0007 0,696
Tabulka 11
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + kyseliny kaprinové po léčbě na buňky kostní dřeně a sleziny
kostní dřeň Slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (XlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 48 ± 7,9 88 ±15,9
CY 31 ±6,7 >0,0026 21 ± 4,3 0,0001
CY + kyselina kaprinová (3,125μΜ) 37 ± 7,8 0,0326 0,209 31 ±8,7 0,0001 0,035
CY + kyselina kaprinová (6,25 μΜ) 38 ± 4,6 0,0274 0,066 25 ± 6,3 0,0001 0,187
CY + kyselina kaprinová (12,5μΜ) 38 ± 7,4 0,0412 0,134 36 ± 7,8 0,0002 0,003
«··· ····
Příklad 26: Studie účinku chemické ochrany: imunofenotypový test
C57BL/6 myší samice 6 až 8 týdnů staré se předem léčily dne -3, -2 a -1 orálně, nebo dne 0 intravenózně, různými koncentracemi MCT. Imunofenotypový test se provedl také na zvířatech se sníženou imunitou. Imunosuprese bylo dosaženo 80 mg/kg 5-fluoruracilu (5-FU) nebo 100 až 200 mg/kg cyklofosfamidu (CY) nebo 12 mg/kg taxoteru (TX), naočkovaného intravenózně dne 0. Myši byly usmrceny pátého dne vpichem do srdce. Odebrala se krev a slezina, připravilan se buněčná suspenze a erytrocyty se lyžovaly vACK pufru (155 mM NH4CI, 12 mM NaHCO3, 0,1 mM EDTA, pH 7,3) po dobu 5 minut. Buňky se promyly třikrát PBS, pH 7,4 a resuspendovány v mediu tkáňové kultury. Buňky se poté inkubovaly po dobu 45 minut na ledu s fluoresceinizothiokyanátem (FITC) nebo fykoerytrinem (PE) konjugovaným markrem buněčného povrchu podle návodu výrobce (Gibco/BRL, Cedarlane, Boehrínger Mannheim). Buňky se poté promyly PBS, zafixovaly l%paraformaldehydem a analyzovaly Coulter XL průtokovým cytometrem. Analýza podskupin se provedla určením standardních markérů buněčného povrchu, které byly následující: TCR (T-buněčný receptor), CD4 (Thelper). CD8 (T cytotoxický/supresor), CDllb (makrofág), NK (NK buňky) a Ly5 (Bbuňky).
Buňky kostní dřeně se získaly podle popisu v příkladu 15. Buňky se obarvily 45 minutovou inkubací FITC nebo PE konjugovaným markérem buněčného povrchu podle návodu výrobce. Buňky se poté promyly PBS, zafixovaly 1 % paraformaldehydem a analyzovaly Coulter XL průtokovým cytometrem. Analýza buněčných podskupin se provedla určením standardních markérů buněčného povrchu, které byly následující: CD34 (hematopoetické ptogenitorové buňky), CD41 (destičky, megakaryocyty), CD 13 (myelomonocytické kmenové buňky, myelocyty, promonocyty) a CD38 (lymfoidní kmenové buňky, pro-B, pre-B). Tabulka 12 představuje účinek MCT na imunofenotypovou analýzu krve a sleziny u normálních myší. Při imunofenotypové analýze krve MCT zvyšuje CD8+ a LY5+ buněčné podskupinay. V některých pokusech zvyšuje MCT slabě LY5-TCR- podskupinu (údaje nejsou uvedeny). Při imunofenotypové analýze sleziny zvyšuje MCT významně relativní procento LY5+TCR+ a CD4+ buněk. LY5-TCR- jsou non B- non T- buňky, které mohou představovat neutrofily.
Při podávání myši se sníženou imunitou zvyšuje MCT relativní procento LY5-TCR(pravděpodobně neutrofily) a CD11+ (makrofágy) buněk při imunofenotypové analýze krve a sleziny ve srovnání s cyklofosfamidem samotným. Tyto buněčné podskupinay pocházejí z myeloidního buněčného prekurzoru (Tabulka 13).
• · · ·
Tabulka 12
Účinek MCT na imunofenotypovou analýzu krve a sleziny u normálních myší
buněčný podskupina kontrola 6,25 μΜ 12,5 μΜ 50 μΜ
imunofenotypová analýza krve
CD8+ 12,76 ±1,23 16,41 ± 1,16 p < 0,0004 — 13,18 ± 2,08 p = 0,68
LY5+ 15,57 ±6,91 24,0 ± 4,92 p < 0,037 — 26,75 ± 4,11 p < 0,01
imunofenotypová analýza sleziny
LYS5-TCR- 13,02 ±2,54 — 16,84 ± 0,83 p < 0,0257 —
CD4+ 19,9 ± 1,09 22,25 ± 1,64 p < 0,013 — 22 ± 0,47 p < 0,091
Tabulka 13
Účinek MCT na imunofenotypovou analýzu krve a sleziny u myší, kterým byla oslabena imunita pomocí cyklofosfamidu (CY, 200 mg/kg)
buněčná podskupina CY 6,25 μΜ 12,5 μΜ 50 μΜ
imunofenotypová analýza krve
LY5-TCR- 36,82 ± 9,93 — 51,67 ± 11,10 p < 0,05 46,32 ± 5,63 p= 0,1254
CD11+ 26,41 ± 4,54 42,12 ± 8,77 p< 0,0119 42,56 ± 8,62 p < 0,0098
imunofenotypová analýza sleziny
LYS5-TCR- 20,2 ± 4,05 23,92 ± 1,61 p < 0,07 (slabé) — —
CD11+ 16,31 ±4,85 27,47 ± 11,48 p < 0,06 (slabé) — —
• ···· · ·· ·· ···· • · 9 ······ · • · · « · · · • 00« φφ·· · · · · ··.· ··· · ··· ···· ·· ··
Příklad 27: Studie účinku chemické ochrany: imunofenotypový test
Imunofenotypové testování trimyristinu, trilaurinu, kyseliny kaprinové a kaprinanu sodného se provedlo podle postupu, který je uveden v příkladu 26. Tabulka 14 představuje účinek těchto MCT analogů na imunofenotypovou analýzu krve a sleziny. Pokud se jedná o krev, trimyristin a trilaurin nemají žádný významný účinek ve srovnání s cyklofosfamidem samotným. Ve slezině však trimyristin a trilaurin zvyšují relativní procento CD11+. Kromě toho trilaurin indukuje významný vzrůst LY5-TCR- a NK+ buněčných podskupinaů. Je zajímavé, že kyselina kaprinová a kapronan sodný významně zvyšují relativní procento LY5TCR- v krvi. Ve slezině nemá kyselina kaprinová žádný významný účinek ve srovnání s cyklofosfamidem samotným.
Tabulka 14
Účinek trimyristinu, trilaurinu, kyseliny kaprinové a kapronanu sodného na imunofenotypovou analýzu krve a sleziny u myší, kterým byla snížena imunita pomocí cyklofosfamidu (CY, 200 mg/kg).
sloučeniny buněčné podskupinay CY 6,25 μΜ 12,5 μΜ
imunofenotypová analýza krve
trimyristin žádný významný účinek
trilaurin žádný významný účinek
kyselina kaprinová LY5-TCR- 56,36 ± 7,26 61,52 ± 5,16 p = 0,187 70,79 ± 3,95 p < 0,0029
kapronan sodný LY5-TCR- 40,91 ±8,84 52,43 ±10,16 p = 0,063 (slabé)
imunofenotypová analýza sleziny
trimyristin CD11+ 16,31 ±4,85 42,94 ± 4,85 p < 0,0002
trilaurin CD11+ 16,31 ±4,85 43,94 ± 4,78 p < 0,0001
LY5-TCR- 73,17 ±1,41 77,86 ± 2,94
• · · · · · < · · • · · • · · «
p< 0,0097
NK+ 7,53 ± 2,52 17,46 ± 5,80 p < 0,0067
kyselina kaprinová žádný významný účinek
kapronan sodný neuvedeno
Příklad 28: Studie účinku chemické ochrany: imunofenotypový test kostní dřeně
Účinek MCT, kaprylátu sodného, kaprinanu sodného na imunofenotypovou analýzu kostní dřeně byl testován podle postupu uvedeného v příkladu 26. Při použití cyklofosfamidu je zaznamenáno významné zvýšení ve všech testovaných podskupinaech (CD34+; CD13+, CD41+ a CD38+). Přídavek MCT nebo kaprylátu sodného nebo kaprinanu sodného zvyšuje množství buněk v linii CD13+, což jsou myelomonocytické kmenové buňky, myelocyty a promonocyty. Toto zvýšení relativního procenta vCD13+ je významné ve srovnání s cyklofosfamidem samotným. Výsledky jasně ukazují na to, že MCT a další příbuzné sloučeniny indukují významné zvýšení množství buněk kostní dřeně (jak ukazují předcházející příklady) a dále zvyšují relativní procento prekurzoru fagocytujících buněk (PMN a monocyty). To může být příčinou lepšího zotavování z cytotoxické léčby nebo ochránit organismům proti infekčním činidlům (tabulka 15).
Tabulka 15
Účinek MCT, kaprylátu sodného, kaprinanu sodného na imunofenotypovou analýzu kostní dřeně u myší, kterým byla snížena imunita cyklofosfamidem (CY, 200 mg/kg).
% buněk CD34+ CD13+ CD41+ CD38+
Kontrola 1,1 ±0,3 0,8 ± 0,2 1,6 ±0,2 29,8 ± 6,5
cyklofosfamid (CY) 10 ± 1,0 3,2 ± 0,5 4,2 ± 0,6 39,6 ±13,6
CY + MCT 11,2 ±1,3 4,5 ± 0,5 p < 0,001 4,5 ± 0,4 42 ±15,7
CY + kaprylát sodný 11,2 ±1,3 4,9 ± 1,2 p< 0,017 4,6 ±1,3 36 + 9,7
CY + kaprinan sodný 9,1 ±3,1 4,7 ± 1,7 p< 0,06 3,7 ± 0,7 44,3 ± 22,8
• · · · • * « · · « • ♦ · ·
I· · * ······«
Příklad 29: Studie účinku chemické ochrany
Účinek tridekanoyl serinolu a didekanoyl serinolu na indukci proliferace imunitních buněk in vivo nebo jejich ochranu byl zjištěn pomocí postupu popsaného v příkladu 16. Jak ukazuje tabulka 16, tridekanoyl serinol významně zvyšuje množství buněk sleziny. Žádný významný účinek nebyl prokázán na množství buněk kostní dřeně.
Tabulka 16
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + tridekanoyl serinolu a CY + didekanoyl serinolu na buňky kostní dřeně a sleziny.
kostní dřeň slezina
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY #buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 53, ±4,8 113 ±15,5
CY 28 ± 3,4 >0,0001 29 ± 9,2 >0,0001
CY + tridekanoyl serinol 28 + 4,6 >0,0001 0,95 42 ± 8,4 >0,0001 0,035
CY + didekanoyl serinol 30 ±3,8 >0,0001 0,54 36 ± 9,9 >0,0001 0,27
Příklad 30: Studie účinku chemické ochrany
Účinek a-metyltridekanoyl-L-fukopyranózy a β-metyltridekanoyl-L-fukopyranózy na indukci proliferace imunitních buněk in vivo nebo jejich ochranu byl zjištěn pomocí postupu popsaného v příkladu 16.
Jak ukazuje tabulka 17, β-metyltridekanoyl-L-fukopyranóza vykazuje slabý (nevýznamný) účinek na množství buněk kostní dřeně ve srovnání s myšmi ošetřenými cyklofosfamidem. Nedostatek aktivity α-metylanomeru byl očekáván s ohledem na známou nestabilitu a-alkylpyranosidů.
·· · · • · · · · ·
Tabulka 17
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + α-metyltridekanoyl-L-fukopyranózy a CY + β-metyltridekanoyl-L-fukopyranózy na kostní dřeň.
kostní dřeň
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 53 ± 8,0
CY 26,2 ± 2,6 0,0058
CY + a-metyltridekanoyl-L-fukopyranóza 30,4 ± 9,3 0,0133 0,334
CY + β-metyltridekanoyl-L-fukopyranóza 34,6 ± 8,5 0,0068 0,061
Příklad 31: Studie účinku chemické ochrany
Účinek etylkaprinanu a Ν,Ν-dimetylacetamid esteru kyseliny kaprinové na indukci proliferace imunitních buněk in vivo nebo jejich ochranu se zjistil pomocí postupu popsaného v příkladu 16.
Jak ukazuje tabulka 18, pouze Ν,Ν-dimetylacetamid kyseliny kaprinové významně zvyšuje množství buněk kostní dřeně. Nebyl zaznamenán žádný významný účinek na množství buněk sleziny.
Tabulka 18
Účinek cyklofosfamidu (CY), CY + etylkaprinanu a CY + N,N-dimetyl-acetamidu kyseliny kaprinové na kostní dřeň.
kostní dřeň
#buněk (xlO6) P/kontrola P/CY
kontrola 50,2 ± 4,8
CY 27,5 ± 8,0 0,0031
CY + etylkaprinan 27,5 ± 4,4 0,0032 1,0
CY + N,N-dimetyl-acetamid kyseliny kaprinové 37,4 ± 5,9 0,042 0,036
• · 4 · • · 4 4 9 4 • 4 · 4 »4 4 4 ·· 4 • · 4 · · · 4
4 4 444« 4
44 4 4 ·· •44 4 444···· 44 «4
Příklad 32: Antitumorová aktivita
6-8 týdnů staré C57BL/6 myši byly injikovány intravenózně dne 0 buňkami 1 x 105 B16F10 melanomu z ATCC (zdroj buněčné kultury, Dr. I. J. Fidler). Zvířata pak byla inj ikována intravenózně s nebo bez MCT (25 μΜ/myš) dne 7,9,14al6al0 mg/kg Doxorubicinu dne 10 a 17. Myši byly usmrceny dne 22. Byla zaznamenána váha těla a objem tumoru. Objem tumoru byl získán mnohonásobným měřením dvourozměrného průměru tumoru posuvným měřítkem s použitím vzorce 0,4 (a x b2), kde „a“ je hlavní průměr tumoru a „b“ nejmenší kolmý průměr.
Tento pokus měl sloužit k ověření zda, MCT neexacerbuje nebo nechrání spíše rakovinné buňky než imunitní buňky.
Obrázek 10 popisuje ochranný chemický účinek a protinádorový účinek MCT v kombinaci s menší než terapeutickou koncentrací doxorubicinu v modelovém melanomu B16F10. MCT indukuje slabou redukci (T/C přibližně 20 %) objemu tumoru podobně jako menší než terapeutická koncentrace doxorubicinu (T/C přibližně 25% redukce), je-li použit samotný. Další účinek byl pozorován při použití MCT v kombinaci s doxorubicinem (T/C přibližně 45% až 50%). Tyto výsledky naznačují, že je možné dosáhnout terapeutické aktivity, pokud je MCT kombinován s menší než terapeutickou koncentrací cytotoxyckého léčiva.
Příklad 33: Protinádorová aktivita
Syntetický tumor DMBA3 (DA-3, model karcinomu prsu) se vyvinul z preneoplastické poruchy ošetřené 7,12-dimetylbenzantracenem v BALB/c myších samicích. DA-3 buňky se pěstovaly jako jednovrstevné kultury v plastových nádobkách v RPMI-1640, jež obsahovaly: 0,1 mM neesenciálních aminokyselin, 0,1 μΜ pyruvátu sodného, 2 mM Lglutaminu a 100 pg/ml gentamycinsulfátu. Směs se dále doplnila o 50 μΐ 2-merkaptoetanolu a 10% séra hovězího plodu. DA-3 tumory se několikrát pasážovaly in vivo subkutaneální inokulací 5 x 105 živými tumorovými buňkami tak, aby vznikl lokalizovatelný tumor v 6 až 8 týdnů starých BALB/c myších. Zvířata se poté několikrát vyšetřila manuální palpací pro zjištění tumoru. Objem tumoru se získal mnohonásobným měřením dvourozměrného průměru tumoru posuvným měřítkem s použitím vzorce 0,4 (a x b ), kde „a“ je hlavní průměr tumoru a „b“ nejmenší kolmý průměr. Tumory byly hmatné obvykle 7. až 10. den po inokulaci.
Použily se dvě metody léčby, pro ověření protinádorového účinku a vyhodnocení ochranné funkce MCT v kombinaci s cyklofosfamidem (CY, 100 mg/kg) a taxoterem (TX, 20 mg/kg) v DA-3 modelu tumoru. BABL/c myši se naočkovaly tumorovými buňkami dne 0.
« · · · · ·
Léčba MCT se provedla per os dne 6, 7 a 8; dne 13, 14 a 15; dne 20, 21 a 23 po intravenózním podání CY nebo TX, jež bylo podáno jako jedna dávka v injekci dne 9 a 16. Hmotnost těla a objem tumoru se sledoval ode dne 4 až do dne 23. Dne 23 byla všechna zvířata usmrcena. Vypočetlo se procento T/C (léčená skupina/kontrola) jako poměr objemu tumorů posledního dne v léčené skupině ku objemu v kontrolní skupině krát 100. Podle kriteria NCI je produkt považován za účinný, pokud je procento T/C < 40%.
Tento pokus se provedl z toho důvodu, aby se ověřilo, zda MCT neexacerbuje nebo nechrání rakovinné buňky spíše než imunitní buňky. Obrázek 11 ukazuje ochranný chemický účinek a protinádorový účinek MCT v kombinaci s menší než terapeutickou koncentrací CY a TX v DA-3 modelu karcinomu prsu. MCT indukuje slabou redukci (T/C přibližně 18 %) objemu tumoru ve srovnání s kontrolou. Je-li MCT použit v kombinaci sCY nebo TX, nepozoruje se žádná exacerbace objemu tumoru. Je-li ovšem použit v kombinaci s CY, lze pozorovat terapeutickou odpověď (T/C = 39,4 %). Z těchto výsledků je zřejmé, že terapeutická aktivita může být dosažena, je-li MCT v kombinaci s menší než terapeutickou koncentrací CY. Tento účinek může být způsoben celkovým zvýšením výkonnosti imunitních buněk u MCT ošetřených zvířat (obrázek 11a tabulkal9).
Tabulka 19
Účinek MCT na objem tumoru v kombinaci s menší než terapeutickou koncentrací cyklofosfamidu (CY, 100 mg/kg) a taxoteru (TX, 20 mg/kg).
objem tumoru léčené/kontrola (%)
kontrola 58,8 + 60,1
CY 27,5 ± 15,9 46,8
TX 37,9 + 41,5 64,5
CY + MCT 23,2 + 13,1 39,4
TX + MCT 38,8 + 31,0 66,1
MCT 48,5 ± 35,2 82,5
···
Příklad 34: Protinádorová aktivita
Protinádorový účinek a chemický ochranný účinek se stanovil postupem uvedeným v příkladu 30, s výjimkou použití terapeutické koncentrace cytotoxických léčiv (cyklofosfamid, 200 mg/kg; taxoter, 30 mg/kg).
Tento pokus se provedl z toho důvodu, aby se ověřilo, zda MCT neexacerbuje nebo nechrání rakovninné buňky spíše než imunitní buňky. Obrázek 12 ukazuje chemický ochranný účinek a protinádorový účinek MCT v kombinaci s terapeutickou koncentrací CY a TX v DA-3 modelu karcinomu prsu. MCT indukuje slabou redukci objemu tumoru ve srovnání s kontrolou. Je-li MCT použit v kombinaci s CY nebo TX, není pozorována žádná exacerbace objemu tumoru. Při ošetření CY nebo CY + MCT lze pozorovat významnou redukci objemu tumoru. Kromě toho lze získat významné snížení objemu tumoru ošetřením MCT v kombinaci sTX(p < 0,0327) ve srovnání s TX samotným, který se významně neliší od kontrolních myší (p = 0,1211) (tabulka 20). Tyto výsledky ukazují, že terapeutická aktivita může být dosažena v případě, že je MCT v kombinaci s terapeuticky nevýznamnou koncentrací TX. Tento účinek může být způsoben celkovým zvýšením výkonnosti imunitních buněk u MCT ošetřených zvířat.
Tabulka 20
Účinek MCT na objem tumoru v kombinaci s terapeutickou koncentrací cyklofosfamidu (CY, 200 mg/kg) a tyxoteru (TX, 30 mg/kg).
léčba T/C (%) P/kontrola P/CY P/TX
kontrola
MCT 0,4299
CY 18,8 0,0337
CY-MCT 22,1 0,0022 0,2928
TX 64,7 0,1211
TX-MCT 46,7 0,0327 0,5468
Všechny zde citované odkazy jsou zde celé zařazeny v dodatcích.
Obměny a odchylky kompozic a způsobů zde popsaných budou zřejmé odborníkům vdané oblasti z předchozího popisu. Takové obměny a odchylky jsou v rozsahu vynálezu a přiložených nároků.

Claims (55)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob stimulace krvetvorby u pacienta, který takovou léčbu potřebuje, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání farmaceuticky účinného množství kompozice, která obsahuje jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem I, jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem Π, jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem ΙΠ nebo jejich kombinaci, (I), (II), (III), fí
    RtCO^
    AY— ff
    BO^
    Y«O,NH
    RjC-X ff o
    m Z»O,NH,Cř^O = nula kde
    Ri je přímá nebo větvená, nasycená nebo nenasycená C7 až Cl 1 alkylová skupina; A a B jsou vodík neboRrC a A není nezbytně identické s B; a
    X je hydroxylová skupina, oxy anion s kovovým mono- nebo dikationovým protiionem nebo alkoxy skupina s přímým řetězcem nebo větvená Cl až C4 alkylová část.
  2. 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje směs alespoň dvou sloučenin popsaných obecným vzorcem I, které jsou středně dlouhé triglyceridy, kde A = B = Ri mají přímý nebo větvený řetězec, nasycené nebo nenasycené C7 a C9 alkylové skupiny, v tomto pořadí.
  3. 3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že směs sestává ze dvou triglyceridů, kde první středně dlouhé triglyceridy je popsán obecným vzorcem I a A = B = Ri=CH3(CH2)6-, a druhý středně dlouhý triglycerid je popsán obecným vzorcem I a A = B = Ri=CH3(CH2)8-.
  4. 4. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že kompozice dále obsahuje od 0,1 % do 3 % každé ze tří sloučenin popsaných obecným vzorcem I a A = B = Ri=CH3(CH2)4- a čtvrté sloučeniny popsané obecným vzorcem I a A = B = Ri=CH3(CH2)io-.
  5. 5. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že směs obsahuje čtyři optické izomery C8 a CIO triglyceridů mastných kyselin, popsané následujícím obecným vzorcem:
    ^co12 3 4 n = 6 6 6 8 m = 6 6 8 8 p = 6 8 8 8
  6. 6. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem Π a X je OH, kterou je masná kyselina středně dlouhého řetězce.
  7. 7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje jednu nebo více sloučenin popsaných obecným obecným vzorcem III a X je OH.
  8. 8. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje jednu nebo více sloučenin popsaných obecným vzorcem II a X je oxy anion s kovovým protiiontem vybraným ze skupiny sestávající z vápníku, hořčíku, draslíku a sodíku.
  9. 9. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kompozice obsahuje jednu nebo více sloučenin popsaných obecným obecným vzorcem ΠΙ a X je oxy anion s kovovým protiionem vybraným ze skupiny sestávající z vápníku, hořčíku, draslíku a sodíku.
  10. 10. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že jedna nebo více sloučenin je kyselina kaprylová nebo kyselina kaprinová.
  11. 11. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že jedna nebo více sloučenin je kaprylát sodný nebo kaprinan sodný.
  12. 12. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že jedna nebo více sloučenin je kaprylát vápenatý nebo kaprinan vápenatý.
    9···
    00 0000
    0 0 0 0 0 0 0
    00 0 0 0000 0
    00 00 0 0 · »
    45 ··· * ······· ·· ··
  13. 13. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že jedna nebo více sloučenin je triglycerid kyseliny kaprylové nebo triglycerid kyseliny kaprinové.
  14. 14. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že jedna nebo více sloučenin má koncentraci v krvi vyšší než 1 μΜ.
  15. 15. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem chemoterapie u pacienta.
  16. 16. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem radioterapie u pacienta.
  17. 17. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí chronickou neutropeniiu pacienta.
  18. 18. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí přechodnou neutropenii u pacienta.
  19. 19. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem hematologického onemocnění u pacienta.
  20. 20. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, vznikající následkem podávání léčiv u pacienta.
  21. 21. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, vznikající následkem podvýživy u pacienta.
  22. 22. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, vznikající následkem infekce u pacienta.
  23. 23. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, vznikající následkem radioterapie u pacienta.
    že stimulace krvetvorby léčí neutropenii že stimulace krvetvorby léčí neutropenii že stimulace krvetvorby léčí neutropenii že stimulace krvetvorby léčí neutropenii
  24. 24. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí zranění u pacienta.
  25. 25. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby indukuje mobilizaci neutrofilů pro zlepšení transplantace kostní dřeně u pacienta.
  26. 26. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále zahrnuje současné podávání farmaceuticky účinného množství lidského kolonie stimulujícího faktoru, kde farmaceuticky účinné množství je sníženo v přítomnosti jedné nebo více sloučenin.
  27. 27. Způsob podle nároku 26, vyznačující se tím, že kolonie stimulující faktor je G-CSF nebo GM-CSF.
  28. 28. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále zahrnuje oddělené podávání farmaceuticky účinného množství lidského kolonie stimulujícího faktoru před a/nebo po skončení podávání jedné nebo více sloučenin, ale ne současné podávání.
  29. 29. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, že kolonie stimulující faktor je G-CSF nebo GM-CSF.
  30. 30. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že dále zahrnuje současné podávání farmaceuticky účinného množství lidského cytokinu.
  31. 31. Způsob podle nároku 30, vyznačující se tím, že cytokin je interleukin 2 nebo interleukin 15.
  32. 32. Sloučenina obsahující aza analog triglyceridu kyseliny kyprylové nebo triglyceridu kyseliny kaprinové, kde aza analog je l,2,3-O,N,O-trioktanoylserinol nebo 1,2,3-0,N,O-tridekanoylserinol.
  33. 33. Sloučenina popsaná obecným vzorcem IV ve spojení s jedním nebo více volitelnými rozpouštědly, nosiči a/nebo pomocnými látkami a v množství nebo dávce vhodné pro vytvoření farmaceutické formulace.
    ·· ····
    -C0OH (IV).
    η·6,8 «>*1,2
  34. 34. Sloučenina popsaná obecným vzorcem V ve spojení s jedním nebo více volitelnými rozpouštědly, nosiči a/nebo pomocnými látkami a v množství nebo dávce vhodné pro vytvoření farmaceutické formulace.
    (V).
  35. 35. Sloučenina popsaná obecným vzorcem VI ve spojení s jedním nebo více volitelnými rozpouštědly, nosiči a/nebo pomocnými látkami a v množství nebo dávce vhodné pro vytvoření farmaceutické formulace degradací in vivo pro uvolnění léčiva popsaného v nároku 1
    n=6,8 iaal, 2 (VI).
  36. 36. Způsob stimulace krvetvorby u pacienta, který takovou léčbu potřebuje, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání farmaceuticky účinného množství jedné nebo více sloučenin podle kteréhokoli z nároků 32 až 35.
  37. 37. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem chemoterapie u pacienta.
  38. 38. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem radioterapie u pacienta.
    • · · fc · ·
  39. 39. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí chronickou neutropenií u pacienta.
  40. 40. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí přechodnou neutropenií u pacienta.
  41. 41. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenií vznikající následkem hematologického onemocnění u pacienta.
  42. 42. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenií vznikající následkem podávání léčiv u pacienta.
  43. 43. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenií vznikající následkem podvýživy u pacienta.
  44. 44. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenií vznikající následkem infekce u pacienta.
  45. 45. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí neutropenií vznikající následkem radioterapie u pacienta.
  46. 46. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí zranění u pacienta.
  47. 47. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby indukuje mobilizaci neutrofilů pro zlepšení transplantace kostní dřeně u pacienta.
  48. 48. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že dále zahrnuje současné podávání farmaceuticky účinného množství lidského kolonie stimulujícího faktoru, kde farmaceuticky účinné množství je sníženo v přítomnosti jedné nebo více sloučenin.
  49. 49. Způsob podle nároku 48, vyznačující se tím, že kolonie stimulující faktor je G-CSF nebo
    GM-CSF.
  50. 50. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že dále zahrnuje oddělené podávání farmaceuticky účinného množství lidského kolonie stimulujícího faktoru před a/nebo po skončení podávání jedné nebo více sloučenin, ale ne současné podávání.
  51. 51. Způsob podle nároku 50, vyznačující se tím, že kolonie stimulující faktor je G-CSF nebo GM-CSF.
  52. 52. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že dále zahrnuje současné podávání farmaceuticky účinného množství lidského cytokinu.
  53. 53. Způsob podle nároku 52, vyznačující se tím, že cytokin je interleukin 2 nebo interleukin 15.
  54. 54. Použití jedné nebo více sloučenin pro výrobu léků pro stimulaci krvetvorby, jedna nebo více sloučenin je vybrána ze skupiny sestávající ze sloučenin popsaných obecnými vzorci I, II, III a jejich kombinacemi (D, (II), (III),
    R,COAY—1
    BO^
    Y-O,NH
    RjC-X
    Z~O.NH.CH2O = nula kde
    Ri je přímá nebo větvená, nasycená nebo nenasycená C7 až Cl 1 alkylová skupina; A a B jsou
    O
    II vodík nebo a A není nezbytně identické s B; a
    X je hydroxylová skupina, oxy anion s kovovým mono- nebo dikationovým protiionem nebo alkoxy skupina s přímým řetězcem nebo větvená Cl až C4 alkylová část.
  55. 55. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí přechodnou neutropenii u zvířat způsobenou stresem z pobytu na lodi nebo cestování.
    • ·· ·· · · · · • · · · · · ·
    9 9 « 9 « • · · 9 · · • · · · · 9
    999 9999 99 99
    57,
    58,
    59,
    60,
    61.
    62.
    63.
    64.
    65.
    67.
    Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že stimulace krvetvorby léčí přechodnou neutropenii u zvířat způsobenou stresem z pobytu na lodi nebo cestování.
    Použití podle nároku 54, kde jedna nebo více sloučenin je sloučenina obecného vzorce Π.
    Použití podle nároku 57, kde X je HO.
    Použití podle nároku 57, kde X je oxy anion s kovovým protiionem vybraným ze skupiny sestávající z vápník, hořčík, draslík a sodík.
    Použití podle nároku 57, kde sloučenina je kyselina kaprylová.
    Použití podle nároku 57, kde sloučenina je kyselina kaprinová.
    Použití podle nároku 57, kde sloučenina je kaprylát sodný nebo kaprinan sodný.
    Použití podle nároku 57, kde sloučenina je kaprylát vápenatý nebo kaprinan vápenatý.
    Použití podle kteréhokoli z nároků 57 až 63, které poskytuje sloučeninu v koncentraci v krvi vyšší než 1 μΜ.
    Použití podle nároku 64, kde koncentrace je vyšší než 1 mM.
    Použití podle kteréhokoli z nároků 57 až 65, kde se krvetvorba týká lidského pacienta
    Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem chemoterapie u lidského pacienta.
    68. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí myelosupresi vznikající následkem radioterapie u lidského pacienta.
    69. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí chronickou neutropenii u lidského pacienta.
    0 0 ·· ····
    0 0 0 • 00
    0 0 0 0
    0 0 0 0
    00 0 0
    70. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí přechodnou neutropenii u lidského pacienta.
    71. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem hematologického onemocnění u lidského pacienta.
    72. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem podávání léčiv u pacienta.
    73. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem podvýživy u uvedeného pacienta.
    74. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem infekce u uvedeného pacienta.
    75. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí neutropenii vznikající následkem radioterapie u uvedeného pacienta.
    76. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby léčí zranění u uvedeného pacienta.
    77. Použití podle nároku 66, kde stimulace krvetvorby indukuje mobilizaci neutrofilů pro zlepšení transplantace kostní dřeně u uvedeného pacienta.
    78. Použití podle kteréhokoli z nároků 58 až 77 pro použití při současném nebo odděleném podávání lidského kolonie stimulujícího faktoru.
    79. Použití podle nároku 78, kde kolonie stimulující faktor je G-CSF nebo GM-CSF.
    80. Použití podle kteréhokoli z nároků 58 až 77, pro použití při současném podávání lidského cytokinu.
    81. Použití podle nároku 80, kde cytokin je interleukin 2 nebo interleukin 15.
CZ2003-2685A 2001-04-18 2002-04-18 Mastné kyseliny jako faktory aktivace a přežití neutrofilů CZ305273B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28445801P 2001-04-18 2001-04-18

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20032685A3 true CZ20032685A3 (cs) 2004-06-16
CZ305273B6 CZ305273B6 (cs) 2015-07-15

Family

ID=23090294

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2003-2685A CZ305273B6 (cs) 2001-04-18 2002-04-18 Mastné kyseliny jako faktory aktivace a přežití neutrofilů

Country Status (30)

Country Link
US (2) US7745488B2 (cs)
EP (2) EP1900364B1 (cs)
JP (3) JP5026655B2 (cs)
KR (1) KR20030096323A (cs)
CN (1) CN1633286A (cs)
AP (1) AP1740A (cs)
AU (2) AU2002308456B2 (cs)
BG (1) BG66418B1 (cs)
BR (1) BR0208984A (cs)
CA (2) CA2444463C (cs)
CY (1) CY1107081T1 (cs)
CZ (1) CZ305273B6 (cs)
DE (1) DE60223670T2 (cs)
DK (2) DK1900364T3 (cs)
EA (1) EA007322B1 (cs)
EE (1) EE200300510A (cs)
ES (2) ES2295397T3 (cs)
HU (1) HUP0303817A3 (cs)
IL (3) IL158322A0 (cs)
MX (1) MXPA03009436A (cs)
NO (1) NO335105B1 (cs)
NZ (2) NZ541140A (cs)
OA (1) OA12506A (cs)
PL (2) PL223348B1 (cs)
PT (2) PT1900364E (cs)
SI (1) SI1385498T1 (cs)
SK (1) SK12772003A3 (cs)
TN (1) TNSN03089A1 (cs)
WO (1) WO2002083120A2 (cs)
ZA (1) ZA200307778B (cs)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ305273B6 (cs) * 2001-04-18 2015-07-15 Prometic Biosciences Inc. Mastné kyseliny jako faktory aktivace a přežití neutrofilů
MXPA05008382A (es) * 2003-02-07 2005-11-04 Prometic Biosciences Inc Acidos grasos, gliceridos y analogos con longitud de cadena media como estimuladores de eritropoyesis.
CN1839111B (zh) 2003-07-25 2010-04-21 普罗米蒂克生物科学公司 中链脂肪酸金属盐的制备方法
EP1742663A2 (en) * 2004-04-15 2007-01-17 Chiasma, Ltd. Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
US20070219131A1 (en) * 2004-04-15 2007-09-20 Ben-Sasson Shmuel A Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
MX2007002727A (es) * 2004-09-03 2008-03-04 Prometic Biosciences Inc Derivados de purinilo sustituidos con actividad inmunomoduladora y quimioprotectora, y su uso solos o con acidos grasos de longitud de cadena media o gliceridos.
ES2376201T3 (es) * 2004-10-01 2012-03-09 Prometic Biosciences Inc. Alcoholes grasos de longitud de cadena media como estimuladores de la hematopoyesis.
US8071580B2 (en) * 2004-10-01 2011-12-06 Prometic Biosciences Inc. Medium-chain length fatty alcohols as stimulators of hematopoiesis
CA2599291C (en) * 2005-02-28 2013-12-31 Alphabeta Ab Compounds for reducing aggregation of amyloid beta-peptide
EP3001902A1 (en) * 2006-05-17 2016-04-06 Cognate Therapeutics, Inc. Isolation and purification of hematopoietic stem cells from post-liposuction lipoaspirates
EP2180787B1 (en) 2007-08-01 2013-10-30 University of Pittsburgh - Of the Commonwealth System of Higher Education Nitro oleic acid modulation of type ii diabetes
AU2008318196B2 (en) * 2007-11-02 2014-04-10 Prometic Pharma Smt Limited Medium-chain length fatty acids and glycerides as nephroprotection agents
PT2231166E (pt) * 2007-12-19 2013-06-17 Prometic Biosciences Inc Ácidos gordos com comprimento de cadeia média, sais e riglicéridos em combinação com gemcitabina para tratamento do cancro pancreático
WO2009134383A2 (en) 2008-05-01 2009-11-05 Complexa Inc. Vinyl substituted fatty acids
US20140024713A1 (en) 2008-06-19 2014-01-23 University Of Utah Research Foundation Use of nitrated lipids for treatment of side effects of toxic medical therapies
CN102099024B (zh) * 2008-06-19 2015-11-25 犹他大学研究基金会 硝化脂质在毒性医疗疗法的副作用的治疗上的用途
CA2963659C (en) 2008-09-17 2020-06-23 Chiasma Inc. Use of oral octreotride compositions
EP2165713B1 (en) * 2008-09-19 2012-11-14 Nestec S.A. Whey and thymus function
US9066902B2 (en) 2009-07-31 2015-06-30 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Fatty acids as anti-inflammatory agents
WO2011041639A2 (en) 2009-10-02 2011-04-07 Miller Raymond A Heteroatom containing substituted fatty acids
EP2394636B1 (en) * 2010-05-28 2014-03-19 Novagali Pharma S.A. Method for treating retinal conditions using an intraocular tamponade
EP2744491B1 (en) 2011-08-19 2020-07-29 The University of Utah Research Foundation Combination therapy with nitrated lipids and inhibitors of the renin-angiotensin-aldosterone system
TWI572352B (zh) * 2012-03-01 2017-03-01 波麥堤克藥學Ｓｍｔ有限公司 用於製備具中鏈長度之脂肪酸的三酸甘油酯之方法
MX370567B (es) * 2012-05-09 2019-12-17 Cantex Pharmaceuticals Inc Tratamiento de mielosupresion.
US20160199338A1 (en) 2013-08-19 2016-07-14 Enzychem Lifesciences Corporation Compositions containing monoacetyldiacylglycerol compound as an active ingredient for preventing or treating rheumatoid arthritis
ES2752179T3 (es) * 2014-05-15 2020-04-03 Enzychem Lifesciences Corp Métodos para tratar neutropenia
FI3253401T3 (fi) 2015-02-03 2025-07-09 Amryt Endo Inc Akromegallian hoitaminen suun kautta annettavalla oktreotidilla
EP3258941A4 (en) 2015-02-17 2018-09-26 Cantex Pharmaceuticals, Inc. Treatment of cancers and hematopoietic stem cell disorders privileged by cxcl12-cxcr4 interaction
HRP20210543T1 (hr) 2015-07-07 2021-05-14 H. Lundbeck A/S Inhibitori pde9 s imidazo triazinonskom okosnicom i imidazo pirazinonskom okosnicom za liječenje perifernih bolesti
SG10201913953UA (en) 2015-10-02 2020-03-30 Complexa Inc Prevention, treatment and reversal of disease using therapeutically effective amounts of activated fatty acids
US9808438B2 (en) * 2015-11-09 2017-11-07 Enzychem Lifesciences Corporation Method for treating mucositis
CA3021660A1 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Receptor Life Sciences, Inc. Fast-acting plant-based medicinal compounds and nutritional supplements
SG11201810580PA (en) 2016-06-08 2018-12-28 Sunregen Healthcare Ag Lipids with odd number of carbon atoms and their use as pharmaceutical composition or nutritional supplement
EA201892396A1 (ru) 2016-12-02 2019-04-30 Ресептор Лайф Сайенсиз, Инк. Быстродействующие растительные лекарственные соединения и биологически активные добавки
CN107382710B (zh) * 2017-08-19 2020-11-06 中国铁道科学研究院集团有限公司铁道建筑研究所 一种接枝抗氧剂分子的多元醇
EA202090566A1 (ru) * 2017-09-12 2020-07-14 Санреджен Хэлскэр Аг Липиды, содержащие нечетное количество атомов углерода, и их применение в качестве фармацевтической композиции или питательной добавки
AR113750A1 (es) * 2017-10-05 2020-06-10 Receptor Holdings Inc Composiciones de hierbas con mejor biodisponibilidad
EP3672610A4 (en) * 2017-10-05 2021-06-02 Receptor Holdings, Inc. FAST-ON AND EXTENDED EFFECTS OF HERBAL AND SYNTHETIC CANNABINOID FORMULATIONS
KR102054401B1 (ko) * 2018-03-26 2019-12-10 주식회사 엔지켐생명과학 1,2-디아실글리세롤 화합물, 그 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 면역조절제
EP3801526B1 (en) 2018-05-25 2023-12-27 Imara Inc. Monohydrate and crystalline forms of 6-[(3s,4s)-4-methyl-1- (pyrimidin-2-ylmethyl)pyrrolidin-3-yl]-3-tetrahydropyran-4-yl- 7h-imid azo [1,5- a] pyrazin-8-one
KR102831968B1 (ko) 2018-08-31 2025-07-08 카듀리온 파마슈티칼스, 인크. 겸상 세포 질환의 치료를 위한 pde9 억제제
MX2021003750A (es) 2018-10-11 2021-06-15 Basf As Compuestos aromaticos y usos farmaceuticos de los mismos.
WO2020106767A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Receptor Holdings, Inc. N-acylated fatty amino acids to reduce absorption variability in cannabinoid based compositions
JP7735864B2 (ja) * 2019-10-31 2025-09-09 日本ゼオン株式会社 電気化学素子用機能層およびその製造方法、電気化学素子用機能層付きセパレータおよびその製造方法、並びに電気化学素子およびその製造方法
US11141457B1 (en) 2020-12-28 2021-10-12 Amryt Endo, Inc. Oral octreotide therapy and contraceptive methods
WO2023067501A1 (en) * 2021-10-18 2023-04-27 Enzychem Lifesciences Corporation Compositions and methods for treating mucositis
EP4511349A1 (en) * 2022-04-21 2025-02-26 Merck Sharp & Dohme LLC Process for preparing agglomerated crystalline medium-chain fatty acid sodium salts

Family Cites Families (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2008A (en) * 1841-03-18 Gas-lamp eok conducting gas pkom ah elevated buhner to one below it
US2002A (en) * 1841-03-12 Tor and planter for plowing
US2006A (en) * 1841-03-16 Clamp for crimping leather
US2003A (en) * 1841-03-12 Improvement in horizontal windivhlls
US2004A (en) * 1841-03-12 Improvement in the manner of constructing and propelling steam-vessels
US4528197A (en) * 1983-01-26 1985-07-09 Kabivitrum Ab Controlled triglyceride nutrition for hypercatabolic mammals
US4703062A (en) * 1984-01-16 1987-10-27 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Parenteral nutrition with medium and long chain triglycerides
US4871768A (en) * 1984-07-12 1989-10-03 New England Deaconess Hospital Corporation Dietary supplement utilizing ω-3/medium chain trigylceride mixtures
US4816440A (en) * 1985-09-26 1989-03-28 Cetus Corporation Stable formulation of biologically active proteins for parenteral injection
US6060459A (en) * 1987-10-28 2000-05-09 Pro-Neuron, Inc. Enhancing blood cell count with oxypurine nucleosides
US5011852A (en) * 1988-07-25 1991-04-30 Applied Analytical Industries, Inc. Liquid oral pharmaceutical compositions of non-steroidal anti-inflammatory drugs
JPH02134326A (ja) * 1988-11-14 1990-05-23 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 高度侵襲用経腸栄養剤
JP3249147B2 (ja) * 1990-06-01 2002-01-21 キリン−アムジエン・インコーポレーテツド 生理活性蛋白含有経口製剤
EP0526630A4 (en) * 1991-02-22 1993-08-11 Amgen Inc. Use of gm-csf and g-csf to promote accelerated wound healing
JP3132085B2 (ja) * 1991-09-06 2001-02-05 ウェルファイド株式会社 脂肪乳剤
JPH05163160A (ja) * 1991-12-13 1993-06-29 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 免疫低下に伴う感染症の予防及び治療用栄養剤
US5214035A (en) * 1992-04-16 1993-05-25 Hoechst-Roussel Agri-Vet Company Thixotropic formulations
US5308832A (en) * 1992-07-27 1994-05-03 Abbott Laboratories Nutritional product for persons having a neurological injury
US5318781A (en) * 1993-04-06 1994-06-07 Hoffmann-La Roche Inc. Absorption enhancement of antibiotics
US20010003739A1 (en) * 1993-06-24 2001-06-14 Astrazeneca Ab Systemic administration of a therapeutic preparation
US5631219A (en) * 1994-03-08 1997-05-20 Somatogen, Inc. Method of stimulating hematopoiesis with hemoglobin
AU7082694A (en) 1994-05-10 1995-11-29 Kitasato Institute, The Hematopoietic stem cell proliferation accelerator
US5470861A (en) * 1994-08-04 1995-11-28 Hoffmann-La Roche Inc. Method of promoting hair growth
US5549905A (en) * 1994-10-18 1996-08-27 Clintec Nutrition Co. Enternal composition for pediatric patients
JPH08208510A (ja) 1994-11-03 1996-08-13 F Hoffmann La Roche Ag インターフェロン組成物
GB9516268D0 (en) * 1995-08-08 1995-10-11 Danbiosyst Uk Compositiion for enhanced uptake of polar drugs from the colon
US5733884A (en) * 1995-11-07 1998-03-31 Nestec Ltd. Enteral formulation designed for optimized wound healing
DE19648566A1 (de) * 1995-11-28 1997-06-05 Braun Melsungen Ag Hydrolyseoptimierte Lipidemulsionen und ihre Verwendung
AUPN933396A0 (en) * 1996-04-17 1996-05-09 Pfizer Pty Limited Non-aqueuos oral-drench compositions containing avermectin compounds
US5851534A (en) * 1996-05-03 1998-12-22 Dynagen, Inc. Methods for prevention and/or treatment of neutropenia
JPH10265380A (ja) 1997-03-17 1998-10-06 Bristol Myers Squibb Co 抗ガン剤
US6017531A (en) * 1997-06-02 2000-01-25 W. R. Grace & Co. Hydrophilic composition containing protease produced by Vibrio
AU9221698A (en) 1997-09-04 1999-03-22 Biozone Laboratories, Inc. Oral liposomal delivery system
BR9814693B1 (pt) * 1997-11-19 2011-04-19 suspensões de polìmero fluidificado de polissacarìdeos catiÈnicos em emolientes e processo para preparação de uma composição para cuidado pessoal.
DE69833333T2 (de) 1997-11-20 2006-10-19 Jhon, Gil Ja Pharmazeutische zusammensetzung enthaltend geweihextrakte von cervus nippon mit wachstumsstimulierender aktivität auf hematopoietische stammzellen und megakaryozyten
CN1160079C (zh) 1998-03-11 2004-08-04 格勒兰制药株式会社 发泡性肠溶制剂
US6267985B1 (en) * 1999-06-30 2001-07-31 Lipocine Inc. Clear oil-containing pharmaceutical compositions
JP2003513019A (ja) * 1999-09-27 2003-04-08 ソーナス ファーマシューティカルス，インコーポレイテッド トコール可溶性治療剤の組成物
US6835750B1 (en) * 2000-05-01 2004-12-28 Accera, Inc. Use of medium chain triglycerides for the treatment and prevention of alzheimer's disease and other diseases resulting from reduced neuronal metabolism II
EP1289530B1 (en) * 2000-06-14 2006-10-04 PORTER, William Leslie Lipids for modulating immune response
ATE284687T1 (de) * 2000-06-20 2005-01-15 Nutrition Sciences Mittelkettige fettsäuren und deren verwendung als antimikrobielles mittel
US6967028B2 (en) * 2000-07-31 2005-11-22 Mainelab Prolonged release microspheres for injectable administration
IL142535A0 (en) 2001-04-11 2002-03-10 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions for the treatment of inflammation
CZ305273B6 (cs) * 2001-04-18 2015-07-15 Prometic Biosciences Inc. Mastné kyseliny jako faktory aktivace a přežití neutrofilů
US20040052836A1 (en) 2002-09-13 2004-03-18 Li Luk Chiu Pharmaceutical compositions containing at least one stable liposphere having an improved shelf life
MXPA05008382A (es) * 2003-02-07 2005-11-04 Prometic Biosciences Inc Acidos grasos, gliceridos y analogos con longitud de cadena media como estimuladores de eritropoyesis.
US6725510B1 (en) * 2003-04-25 2004-04-27 Almetta Clyburn Inclining coffin
CN1839111B (zh) 2003-07-25 2010-04-21 普罗米蒂克生物科学公司 中链脂肪酸金属盐的制备方法
MX2007002727A (es) * 2004-09-03 2008-03-04 Prometic Biosciences Inc Derivados de purinilo sustituidos con actividad inmunomoduladora y quimioprotectora, y su uso solos o con acidos grasos de longitud de cadena media o gliceridos.
US8071580B2 (en) * 2004-10-01 2011-12-06 Prometic Biosciences Inc. Medium-chain length fatty alcohols as stimulators of hematopoiesis

Also Published As

Publication number Publication date
PL366435A1 (en) 2005-01-24
EA007322B1 (ru) 2006-08-25
CZ305273B6 (cs) 2015-07-15
US20040147599A1 (en) 2004-07-29
DE60223670D1 (de) 2008-01-03
NO20034644L (no) 2003-11-25
PT1900364E (pt) 2013-12-19
CA2763637C (en) 2016-08-23
CA2763637A1 (en) 2002-10-24
IL158322A (en) 2011-09-27
EE200300510A (et) 2004-02-16
CN1633286A (zh) 2005-06-29
ES2295397T3 (es) 2008-04-16
CA2444463A1 (en) 2002-10-24
EP1385498A2 (en) 2004-02-04
AU2006201163A1 (en) 2006-04-13
NZ541140A (en) 2006-11-30
EP1900364A2 (en) 2008-03-19
JP5026655B2 (ja) 2012-09-12
JP2010053135A (ja) 2010-03-11
JP6420089B2 (ja) 2018-11-07
KR20030096323A (ko) 2003-12-24
TNSN03089A1 (en) 2005-12-23
DK1900364T3 (da) 2014-01-13
ES2439738T3 (es) 2014-01-24
US8487001B2 (en) 2013-07-16
CY1107081T1 (el) 2012-10-24
AP1740A (en) 2007-05-10
OA12506A (en) 2006-05-29
PL222876B1 (pl) 2016-09-30
MXPA03009436A (es) 2004-12-06
PL402948A1 (pl) 2013-05-13
NO20034644D0 (no) 2003-10-17
NZ528690A (en) 2005-08-26
SK12772003A3 (sk) 2004-07-07
AU2002308456B2 (en) 2005-12-22
EP1900364A3 (en) 2009-09-23
AU2006201163B2 (en) 2006-10-05
ZA200307778B (en) 2004-04-21
BR0208984A (pt) 2004-06-29
DE60223670T2 (de) 2008-03-06
AP2003002888A0 (en) 2003-12-31
EP1385498B1 (en) 2007-11-21
JP2004525957A (ja) 2004-08-26
DK1385498T3 (da) 2008-03-25
HUP0303817A3 (en) 2009-10-28
EP1900364B1 (en) 2013-09-25
IL195200A (en) 2011-11-30
PT1385498E (pt) 2007-12-14
SI1385498T1 (sl) 2008-04-30
US7745488B2 (en) 2010-06-29
EA200301131A1 (ru) 2004-04-29
IL195200A0 (en) 2009-08-03
BG108280A (bg) 2004-09-30
PL223348B1 (pl) 2016-10-31
BG66418B1 (bg) 2014-03-31
CA2444463C (en) 2012-03-20
WO2002083120A2 (en) 2002-10-24
JP5657879B2 (ja) 2015-01-21
JP2014231519A (ja) 2014-12-11
WO2002083120A3 (en) 2003-05-22
US20100279959A1 (en) 2010-11-04
HUP0303817A2 (hu) 2004-03-01
IL158322A0 (en) 2004-05-12
NO335105B1 (no) 2014-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20032685A3 (cs) Středně dlouhé mastné kyseliny, glyceridy a analogy jako faktory přežití a aktivace neutrofilů
AU2002308456A1 (en) Medium-chain length fatty acids, glycerides and analogues as neutrophil survival and activation factors
EP1592416B1 (en) Medium-chain length fatty acids, glycerides and analogues as stimulators of erythropoiesis

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20220418