NO335105B1 - Fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike - Google Patents

Fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike Download PDF

Info

Publication number
NO335105B1
NO335105B1 NO20034644A NO20034644A NO335105B1 NO 335105 B1 NO335105 B1 NO 335105B1 NO 20034644 A NO20034644 A NO 20034644A NO 20034644 A NO20034644 A NO 20034644A NO 335105 B1 NO335105 B1 NO 335105B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
mct
cells
compound
treatment
bone marrow
Prior art date
Application number
NO20034644A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20034644L (no
NO20034644D0 (no
Inventor
Lyne Gagnon
Boulos Zacharie
Jean Barabe
Pierre Laurin
Christopher Penney
Original Assignee
Prometic Biosciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Prometic Biosciences Inc filed Critical Prometic Biosciences Inc
Publication of NO20034644D0 publication Critical patent/NO20034644D0/no
Publication of NO20034644L publication Critical patent/NO20034644L/no
Publication of NO335105B1 publication Critical patent/NO335105B1/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/18—Sulfonamides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/194—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more carboxyl groups, e.g. succinic, maleic or phthalic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/23—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin of acids having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/255—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of sulfoxy acids or sulfur analogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024—Esters of saccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/193—Colony stimulating factors [CSF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2013—IL-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/20—Interleukins [IL]
    • A61K38/2086—IL-13 to IL-16
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/16—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C07C233/17—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/18—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/45—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C07C233/46—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/47—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a hydrogen atom or to a carbon atom of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C235/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C235/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/003—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C3/00—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom
    • C11C3/02—Fats, oils, or fatty acids by chemical modification of fats, oils, or fatty acids obtained therefrom by esterification of fatty acids with glycerol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/11—Compounds covalently bound to a solid support
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C40—COMBINATORIAL TECHNOLOGY
    • C40B—COMBINATORIAL CHEMISTRY; LIBRARIES, e.g. CHEMICAL LIBRARIES
    • C40B40/00—Libraries per se, e.g. arrays, mixtures
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Den foreliggende oppfinnelse vedrører fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for fremstilling av medikamenter for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike, spesielt forebyggelse og/eller behandling av myelosuppresjon, sår, benmargtransplantasjon og neutropeni. Dette omfatter behandlingen av nøytropeni som henger sammen med bruk av kjemoterapi og radioterapi, samt behandling av nøytropeni som stammer fra infeksjoner, hematologiske sykdommer og mangelfull ernæring. Særlig vedrører foreliggende oppfinnelse bruk av fettsyrer med halvlange kjeder, så som kaprinsyre (capric acid), kaprylsyre (caprylic acid) eller salter eller triglycerider av disse eller mono-eller diglycerider eller andre analoger av disse som en neutrofil overlevelses- og aktiveringsfaktor eller proliferasjonsfaktor for benmargstamceller.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN
Kjemoterapi referer vanligvis til bruk av cytotoksiske midler så som, men ikke begrenset til syklofosfamid, doxorubicin, daunorubicin, vinblastin, vinkristin, bleomycin, etoposid, topotekan, irinotekan, taxoter, taxol, 5-fluoruracil, metotrexat, gemcitabin, cisplatin, carboplatin eller klorambucil for å utrydde cancerceller eller tumorer. Dog er disse midlene ikke spesifikke og særlig ved høye doser er de giftige for normale og rask delende celler. Dette fører ofte til forskjellige bivirkninger i pasienter som gjennomgår kjemoterapi eller strålingsterapi. Myelosuppresjon, en alvorlig reduksjon i blodcelleproduksjonen i benmarg, er en slik bivirkning. Den karakteriseres av levkopeni, nøytropeni og trombocytopeni. Alvorlig kronisk levkopeni (idiopatisk, syklisk og kogenial) er også kjennetegnet ved en selektiv senkning i antall sirkulerende neutrofile granulocytter (neutrophils) og en økert mottakelighet for bakterielle infeksjoner.
Essensen i behandling av cancer med kjemoterapeutiske legemidler er å kombinere en cytotoksisk mekanisme med en selektivitetsmekanisme for høyt prolifererende tumorceller i forhold til vertsceller. Det er dog sjeldent at de kjemoterapeutiske legemidlene har slik selektivitet. Cytotoksisiteten til de kjemoterapeutiske midlene begrenser de administrerbare dosene, påvirker behandlings-sykler og setter livskvaliteten til cancerpasienten alvorlig i fare.
Selv om andre normale vev også kan påvirkes negativt, er benmargen særlig sensitiv for proliferasjonspesifikke behandlinger så som kjemoterapi eller strålingsterapi. Akutt og kronisk benmargstoksisitet er en vanlig bivirkning ved cancerterapier som fører til senkning i blodcelletall og anemi, levkopeni, nøytropeni, aganulocytose og trombocytopeni. En årsak til slike effekter er en senkning i antall hematopoetiske celler (for eksempel pluripotente stamceller og andre progenitor celler) forårsaket av både en letal effekt av cytotoksiske midler eller stråling på disse celler og ved differensiering av stamceller provosert av en "feed-back"-mekanisme indusert av mangelen på mer modne margkomponenter. Den andre årsak er en senkning av den selvfornyende kapasiteten til stamceller som også henger sammen med både direkte (mutasjon) og indirekte (aldring av stamceller) effekter (Tubiana, M. m.fl., Radiotherapy and Oncology 29:1 - 17, 1993). Følgelig fører cancerbehandlinger ofte til en senkning i polymorfonukleære neutrofile granulocytter (PMN) eller nøytropeni. PMN er første forsvar mot invaderende patogenerog spilleren sentral rolle ved akutt inflammasjon, der deres primære funksjon er fagocytose og å drepe de infeksiøse agenter. For å fylle denne rolle, forlater PMN blodomløpet som svar på kjemotaktiske faktorer og trår inn i det syke området for å utøve sine biologiske funksjoner. I individer som har normale blodcelletall, utgjør de neutrofile granulocyttene omkring 60 % av de totale levkocyttene (Sl Units Conversion Guide, 66 - 67 (1992), New England Journal of Medicine Books). Dog er det så mange som en av tre pasienter som gjennomgår kjemoterapibehandling for cancer som lider av nøytropeni. Gjennom-snittlige normale tall på neutrofile granulocytter forfriske voksne er i størrelses-orden 4400 celler/Ml, med et område på 1800 - 7700 celler/Ml. Et tall på 1000 celler til 500 celler/ul er moderat nøytropeni og et tall på 500 celler/ul eller mindre er alvorlig nøytropeni. Pasienter i myelosuppresive tilstander er utsatt for infeksjoner og lider ofte av blodlevringsforstyrrelser, slik at de har behov for sykehusopphold. Mangel på neutrofile granulocytter og blodplater er hovedårsaken til morbiditet og mortalitet etter cancerbehandlinger og bidrar til de høye kostnadene for cancerterapi. I disse ovenfor nevnte tilstandene kan bruken av ethvert middel som er i stand til å hemme neutrofil apoptose eller stimulere neutrofil aktivering og mobilisering være av terapeutisk verdi. Forsøk på å gjenopprette pasientens immunsystem etter kjemoterapi omfatter bruken av hematopoetiske vekstfaktorer for å stimulere de resterende stamcellene til å proliferere og differensiere til modne infeksjonsbekjempende celler.
I benmargstransplantasjoner er også et fenomen, som er kjent som "mobilisering", blitt utnyttet for å høste store antall stam/progenitorceller fra perifert blod. Denne metoden brukes fortiden ved autologe og allogene benmargstransplantasjoner. Vekstfaktorer brukes for å øke antall perifere progenitor-stamceller som må høstes før myeloablativ terapi og infusjon av progenitor-stamceller.
Postterapeutisk benmargstransplantasjon kan også motvirke nøytropeni. Dog krever disse behandlingene 10-15 dagers behandling som gjør pasienten utsatt for infeksjoner. Midler som kan stimulere benmargsstamceller kan forenkle og akselerere stamcelleinnpoding (stem cell engraftment) og slik forkorte det nøytropene vinduet som følger en benmargstransplantasjon.
Selv om hematopoetiske vekstfaktorer så som granulocytt-makrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF) og granulocyttkolonistimulerende faktor (G-CSF) kan utøve slike virkninger, er bruken av dem kostbar ettersom de må produseres ved rekombinant teknologi. Slik postterapeutiske, ameliorative behandlinger er unødvendige hvis pasienten er "kjemobeskyttet" (chemoprotected) mot immunsuppresjon.
Det foreligger derfor et behov for nye blandinger og fremgangsmåter for å redusere uønskede bivirkninger av myelosuppresive tilstander indusert av kjemoterapi og strålingsterapi.
OPPSUMMERING AV OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse tilfredsstiller behovet for kjemoprotektive midler ved å frembringe en ny anvendelse ved stimulering av det hematopoetiske systemet i pattedyr, inkluderende et menneske. Den foreliggende oppfinnelse frembringer også en ny anvendelse for å behandle de myelosuppresive effektene av kjemoterapi og radioterapi, og enhver annen situasjon der stimulering av det hematopoetiske system kan være av terapeutisk verdi, så som, benmargstransplantasjoner og kronisk nøytropeni, samt nøytropeni som resulterer fra infeksjoner, hematologiske infeksjoner og mangelfull ernæring. Denne anvendelsen støtter det hematopoetiske systemet til å motvirke myelosuppresjon, øker neutrofil overlevelse og aktivering, hos pasienter som gjennomgår behandling.
Ifølge denne anvendelsen administreres en blanding som inneholder en eller flere fettsyrer med halvlange kjeder, så som kaprinsyre, kaprylsyre eller salter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger i en farmasøytisk akseptabel bærer til et pattedyr, særlig mennesker, i en mengde som er effektiv for å forhindre eller behandle nøytropeni så som for å redusere de negative effektene av kjemoterapi eller strålingsterapi og for å behandle nøytropeni som stammer fra infeksjoner, hematologiske sykdommer og mangelfull ernæring.
Følgelig er det en hensikt med foreliggende oppfinnelse å frembringe blandinger av kaprinsyre, kaprylsyre, laurinsyre eller metalliske salter (natrium, kalium, kalsium, magnesium) av disse eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse for fremstilling av kjemobeskyttende blandinger som et enkelt middel eller som en blanding av to eller flere midler med og/eller uten andre kjemoterapeutiske midler eller slike legemidler som induserer en tilstand av myelosuppresjon.
Kaprinsyre, kaprylsyre eller natriumsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller beslektede forbindelser fungerer som en hematopoesestimulerende faktor.
Videre, omfatter foreliggende oppfinnelse blandinger som inneholder kaprinsyre, kaprylsyre eller natriumsalter eller triglycerider av disse eller mono-eller diglycerider eller andre analoger av disse og bruk av slike forbindelser for fremstilling av medikamenter for behandling av myelosuppresjon og etterfølgende immunosuppresjon.
En hensikt med foreliggende oppfinnelse er også bruk av kaprinsyre, kaprylsyre eller natriumsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse ved fremstilling av medikamenter for behandling av pasienter med alvorlig kronisk nøytropeni.
Kaprinsyre, kaprylsyre eller natriumsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse er også anvendbare ved tilstander der neutrofil mobilisering kan være av terapeutisk verdi, så som autolog eller allogen benmargstransplantasjon.
En annen hensikt med foreliggende oppfinnelse er å frembringe en anvendelse som er effektiv for å øke effektiviteten av kjemoterapi og strålingsterapi i et pattedyr, inkluderende et menneske.
Det frembringes anvendelser for å bruke mer uvanlige doseringer, eller til og med øke doseringen av kjemoterapeutiske blandinger som er nødvendig for å oppnå en bedre terapeutisk effekt, mens man unngår bivirkningene.
En annen hensikt med foreliggende oppfinnelse er å frembringe en anvendelse som er effektiv for å redusere eller eliminere kjemoterapi-indusert nøytropeni i et pattedyr, inkluderende et menneske.
Nok en annen hensikt med foreliggende oppfinnelse er å frembringe en anvendelse for å behandle nøytropeni som stammer fra hematologiske sykdommer så som kronisk ideopatisk nøytropeni, syklisk nøytropeni, late-levkocytters syndrom (lazy-leukocyte syndrome), Chédiak-Higashi syndrom leukemi og aplastisk anemi.
Nok en annen hensikt med foreliggende oppfinnelse er å frembringe en anvendelse for å behandle nøytropeni som stammer fra infeksjoner så som virale infeksjoner (for eksempel HIV, meslinger, hepatitt, gulfeber, mononukleose) og bakterielle infeksjoner (for eksempel tyfus, paratyfus, brucellose).
Endelig er det en annen hensikt å frembringe en anvendelse som forårsaker minimale eller ingen bivirkninger i mottakeren.
Disse og andre hensikter, trekk og fordeler med foreliggende oppfinnelse vil bli klare etter en gjennomgang av den følgende detaljerte beskrivelse av de viste utførelsesformer og de vedlagte krav.
KORT BESKRIVELSE AV FIGURENE.
Figur 1 viser effekten av MCT på PMN-apoptose.
Figur 2 viser effekten av MCT på PMN-fagocytose.
Figur 3A og 3B viser effekten av doxorubicin på PMN-apoptose.
Figur 4A representerer en tidsforløp-respons for MCT på doxorubicin-behandlede neutrofile granulocytter. Figur 4B representerer en tidsforløp-respons for doxorubicin på MCT-behandlede neutrofile granulocytter.
Figur 5 viser effekten av MCT og trikaprin på benmargsproliferasjon.
Figur 6 viser effekten av MCT på benmargcelletall til immunsupprimerte dyr.
Figur 7 viser effekten av MCT på miltcelletall til immunsupprimerte dyr.
Figur 8 viser effekten av MCT og GM-CSF på vekten av tymus hos normale mus. Figur 9 viser effekten av MCT, natriumkaprylat og natriumkaprat på benmargcelletall til immunsupprimerte dyr. Figur 10 representerer den kjemoprotektive effekten og antitumor-effektiviteten av MCT i kombinasjon med en subterapeutisk konsentrasjon av doxorubicin i B18F10-melanomamodell. Figur 11 representerer den kjemoprotektive effekten og antitumor-effektiviteten av MCT i kombinasjon med en subterapeutisk konsentrasjon av syklofosfamid eller taxoter i DA-3-brystcarcinomamodell. Figur 12 viser den kjemoprotektive effekten og antitumor-effektiviteten av MCT i kombinasjon med en terapeutisk konsentrasjon av syklofosfamid eller taxoter i DA-3-brystcarcinomamodell.
DETALJERT BESKRIVELSE AV OPPFINNELSEN
Høydosert kjemoterapi og stråling ødelegger hematopoetiske celler i benmarg og etterlater pasienter med alvorlig fortynning av neutrofile granulocytter og blodplater. Etter slike behandlinger oppholder pasienter seg i flere uker i intensiv-avdelinger pga infeksjoner og feber som er et resultat av nøytropeni. Trombocytopeni fører til forlenget levringstid og blødningsforstyrrelser krever blodplate-infusjoner. Myelosuppresjon er en dosebegrensende faktor ved cancerbehandling og mangel på neutrofile granulocytter og blodplater er hovedårsaken til morbiditet og mortalitet etter disse cancerbehandlingene.
Ved benmargstransplantasjoner kan to tilnærmelser brukes. Før transplantasjonen kan stimulering av benmargen øke antall perifere progenitor-stamceller. Dog inneholder ikke ferskt transplantert benmarg tilstrekkelig med modne neutrofile granulocytter eller mellomliggende neutrofile granulocytter til å gjenopprette pasientens immunsystem. Dette etterlater pasienten i en periode med øket mottakelighet for infeksjoner og forlenget levringstid. Terapi som omfatter neutrofil stimulering og aktivering øker tilfriskning etter benmargs-transplantasjon, ved å redusere nøytropeni og trombocytopeni.
Den foreliggende oppfinnelse vedrører en anvendelse for å fremme neutrofil overlevelse og aktivering i et subjekt. Foreliggende anvendelser er rettet mot restaurering av subjektets hematopoetiske system. Hematopoetiske vekstfaktorer som for tiden brukes for slik behandling er granulocytkolonistimulerende faktor (G-CSF), stamcellefaktor (SCF) og granulocytt-makrofagkolonistimulerende faktor (GM-CSF). G-CSF og GM-CSF kan forkorte det totale tidsrom for nøytropeni og trombocytopeni, men det foreligger fremdeles et betraktelig vindu der pasienten har lav blodlevring og er mottakelig for infeksjoner.
I benmargstransplantasjoner er også "mobilisering" blitt brukt for å høste det høyere antall stam/progenitorceller fra perifert blod. Hematopoetiske stamceller i benmargen mobiliseres i blodet etter behandling med vekstfaktorer. Vekstfaktorer som anvendes for slik behandling omfatter interleukin-3 (IL-3), G-CSF, GM-CSF, SCF og et rekombinant fusjonsprotein som har de aktive gruppene til både IL-3 og GM-CSF. Mobiliserte stamceller høstes deretter etter behandlingen med vekstfaktor og reinfuseres i pasienten etter neste runde med høydosert kjemoterapi eller stråling for å gjenopprette pasientens neutrofile granulocytter og blodplater.
Triglycerider med halvlange kjeder (som også omtales som "MCT" her) består av glyserol som er forestret med fettsyrer som har en kjedelengde på 8 (C8, oktansyre eller kaprylsyre) og 10 (C10, dekansyre eller kaprinsyre). MCT inneholder vanligvis en blanding av glyserolestere av C8- og C10-fettsyrer. Dog kan MCT også inneholde små mengder (2 + 1 % hver) av glyserolestere av C6 (heksansyre eller kapronsyre (caproic acid)) og C12 (dodekansyre eller laurinsyre). CRODAMOL™ er et kommersielt tilgjengelig MCT som markedsføres av Croda Ltd., Toronta, (Canada). Som vist i eksempel 1 er CRODAMOL™ et MCT som inneholder glyseroltriestere av C8- og C10- fettsyrer, som foreligger i varierende andeler. Dog inneholder ikke CRODAMOL™ noen C6- eller C12-fettsyreestere. Langkjedede triglycerider (som også omtales her som "LCT"), på den annen side, består av glyserol forestret med fettsyrer som har karbonkjede-lengder som er større enn 12. Typiske fettsyrer som foreligger i LCT omfatter palmitinsyre (C16) og stearinsyre (C18). I motsetning til MCT er LCT den primære komponenten i matfett. Det er faktisk slik at MCT og LCT har vesentlig forskjellige egenskaper. Noen av forskjellene er beskrevet i Harrison's Principles of Internal Medicine, 8.utgave, 1520-1521 (1977), McGraw Hill Book Company, eller 15.utgave, 1668-1669 (2001). Foreksempel krever ikke MCT, i motsetning til LCT, hydrolyse ved pankreaslipaser, ettersom de kan absorberes av epitelcellene i tarmene.
MCT og deres bestanddeler av fettsyrer med halvlange kjeder er ugiftige materialer som finner anvendelser i næringsmiddel- og farmasøytiske industrier. For eksempel skriver K.A.Traul m.fl. i Food and Chemical Toxicology 38: 79 - 98
(2000) at MCT har vært anvendt i et stadig økende antall mat- og næringsmiddel- applikasjoner fordi de har en rekke fordeler i forhold til LCT. MCT brukes også primært som emulgeringsmidler i forskjellige human- og veterinærfarmasøytiske blandinger og i kosmetikk. De henviser til en rekke toksokologiske studier som underbygger sikkerheten til MCT. De bemerker for eksempel at sikkerheten for menneskelig kostmessig inntak av MCT opptil et nivå på 1 g/kg er blitt bekreftet i kliniske forsøk. C8- og C10-fettsyrer har tilsvarende sikkerhet og anvendelse. For eksempel i Merck Index, 11. utgave, 266 (1989) rapporteres det at kaprylsyre har en LD50(oralt, rotter) = 10,08 g/kg som er essensielt ugiftig. Faktisk er det slik at US Federal Drug Agency (FDA) i henhold til paragraf 184 i Code of Federal regulations (CFR), har tilkjent kaprylsyre et GRAS- (generelt anerkjent som trygt) sertifikat. Tilsvarende i henhold til paragraf 172 (CFR) er frie fettsyrer (for eksempel kaprinsyre, kaprylsyre) og deres metallsalter anerkjente som sikre tilsetningsstoffer for bruk i mat. Som bemerket av D. Dimitrijevic m.fl. i Journal of Pharmacy and Pharmacology 53; 149-154 (2001) er kaprinsyre (natriumsalt) godkjent for bruk i mennesker i Japan og Sverige som et absorpsjonsfremmende middel for medisinske rektalprodukter. US-patent4 602 040 (1986) beskriver anvendelsen av MCT som et farmasøytisk tilsetningsstoff. Mer nylig beskriver PCT-søknad WO 01/97799 bruken av fettsyrer med halvlange kjeder, særlig ka pryl- og kaprinsyrer som antimikrobielle midler.
Inntil de uventede funnene beskrevet her, var dog effektiviteten av fettsyrer med halvlange kjeder, så som kaprinsyrer, kaprylsyre og metallsalter eller mono-, di- eller triglycerider (MCT) av disse, som en neutrofil stimulerings- og aktiveringsfaktor, ikke kjent. Som beskrevet her, inneholder MCT triglycerider av C8 (kapryl) og C10 (kaprin) fettsyrer som utgjør minst 98 % av aktiviteten som vedrører stimulering av hematopoese og modning av neutrofile granulocytter. D. Waitzberg m.fl. i Nutrition 13: 128 - 132 (1997) skriver at lipidemulsjoner (LCT og MCT) kun i moderat grad senker neutrofil bakteriell funksjon og ikke har noen effekt på monocytter. Faktisk er det slik at den eneste publikasjonen som gir en vag indikasjon på at MCT kan influere nøytropeni beskriver kliniske studier der MCT administreres sammen med LCT og sammenlignes med LCT alene. Ingen studier ble utført med MCT alene og derfor er effekten på immunfunksjonen ikke åpenbar. Dog lærer resultatene rapportert av S. Demirer m. fl. i Clinical Nutrition 19: 253 - 258 (2000) at MCT forverrer nøytropeni når MCT kombineres med LCT og sammenlignet med LCT alene. Det vil si at det ble foreslått at MCT hemmer neutrofil funksjon og/eller overlevelse. PCT-søknad WO 95/30413 hevder, noe som delvis underbygger denne påstanden, at umettede langkjedede fettsyrer så som linolensyre, samt mettede langkjedede (C16 eller lenger) fettsyrer, kan fungere til å øke stamcelleproliferasjon.
Den foreliggende oppfinnelse vedrører bruken av fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT for behandling av myelosuppresjon, sår, benmargtransplantasjon og neutropeni. Når det anvendes i kjemoterapi og radioterapi, administreres en blanding som omfatter fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT, før, under og/eller etter behandlingen for å forkorte det nøytropene vinduet og for å akselerere gjenoppbyggingen av det hematopoetiske system. Videre er det mulig å anvende en kombinasjon av fettsyrer med halvlange kjeder samt deres metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse og/eller MCT på flere punkter i forhold til behandling med kjemoterapi og radioterapi (for eksempel fettsyrer før behandling og MCT etter). Alternativt er det mulig å administrere kombinasjonen samtidig; før, under og/eller etter behandlingen med kjemoterapi og radioterapi. Ved alvorlig nøytropeni brukes en blanding som inneholder fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT som det terapeutiske middel. Ved benmargstransplantasjoner brukes fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT for å øke antall perifere stamceller tilgjengelig for transplantasjon etter ablativ radioterapi eller kjemoterapi. Fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT kan også anvendes etter benmargstransplantasjon for å stimulere benmargsstamceller og slik forkorte tilfriskningsperioden ved nøytropeni.
Anvendelsen er derfor nyttig for å stimulere hematopoese for å behandle myelosuppresjon som stammer fra kjemoterapi eller radioterapi; kronisk eller transient nøytropeni nøytopeni, medikamentindusert nøytropeni; og nøytropeni som stammer fra hematologiske infeksjoner, mangelfull ernæring, infeksjon eller radioterapi. Transient nøytropeni kan oppstå i forbindelse med stress i forbindelse med frakt av et dyr eller reiser for et menneske eller dyr. Anvendelsen er også nyttig for å stimulere hematopoese for å lege et sår i en pasient og for å indusere neutrofil mobilisering for å forenkle benmargs-transplantasjon i en pasient.
Slik det brukes her kan uttrykket "en" eller "et" bety en eller flere, avhengig av den sammenhengen det brukes i.
Slik det brukes her, henviser "blanding av fettsyrer med halvlange kjeder, så som kaprinsyre eller kaprylsyre, eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT" til en blanding som omfatter slik aktiv ingrediens og en eller flere farmasøytisk akseptable bærere.
Slik det brukes her, henviser uttrykket "farmasøytisk akseptabel bærer" til en substans som ikke påvirker (interfers) med de fysiologiske effektene til fettsyrer med halvlange kjeder så som kaprin- eller kaprylsyrer eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT og som ikke er giftige for pattedyr inkluderende mennesker.
Blandinger ifølge foreliggende oppfinnelse av kaprin- eller kaprylsyrer eller salter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT formuleres ved å bruke kaprin- eller kaprylsyrer eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT og farmasøytisk akseptable bærere ved fremgangsmåter som er velkjente for fagfolk (MERCK INDEX, Merck & Co, Rahway, NJ). Disse blandinger omfatter væsker, oljer, emulsjoner, aerosoler, inhalasjonspreparater, kapsler, piller, plaster og suppositorier.
Alle anvendelser omfatter trinnet å bringe den/de aktive ingrediens(er) i kontakt med bæreren som omfatter en eller flere ytterligere ingredienser.
Slik det brukes her, henviser uttrykket "kjemoterapi" til en prosess for å drepe prolifererende celler ved bruk av et cytotoksisk middel. Uttrykket "i løpet av kjemoterapi" henviser til den perioden da effekten av det administrerte cytotoksiske midlet varer. På den annen side er uttrykket" etter kjemoterapi" ment å dekke alle situasjoner der en blanding er administrert etter administreringen av et cytotoksisk middel uavhengig av tidligere administrering av dette og også uavhengig av varigheten av effekten til det administrerte cytotoksiske midlet.
Når forbindelsene over anvendes på kjemoterapi, kan en blanding av en kaprin- eller kaprylsyre eller salter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT administreres forut for, i løpet av eller etter kjemoterapi (dvs. forut for, i løpet av eller etter administrering av et cytotoksisk middel).
Med "cytotoksisk middel" menes et middel som dreper sterkt prolifererende celler, for eksempel tumorceller, viralt infiserte celler eller hematopoetiske celler.
Eksempler på et cytotoksisk middel som kan brukes for å utøve oppfinnelsen omfatter syklofosfamid, doxorubicin, daunorubicin, vinblastin, vinkristin, bleomycin, etoposid, topotekan, irinotekan, taxoter, taxol, 5-fluoruracil, metotrexat, gemcitabin, cisplatin, carboplatin eller klorambucil og en agonist av en hver av de ovenfor nevnte forbindelsene. Et cytotoksisk middel kan også være et antiviralt middel, for eksempel AZT (dvs. 3'-azido-3'-deoksytymidin) eller 3TC/lamivudin (dvs. 3-tiacytidin).
Slik det brukes her henviser uttrykket "levkopeni" til en unormal reduksjon i antall levkocytter i blodet.
Slik det brukes her henviser uttrykket "nøytropeni" til nærvær av en unormalt lite antall neutrofile granulocytter i blodet.
I en foretrukken utførelsesform, er den farmasøytiske blandingen i form av enhver egnet blanding for oral, sublingual administrering, eller inhalasjon (nesespray), intravenøs, intramuskulær, subkutan administrering, for bruk ved fremstilling av medikamenter for behandling av myelosuppresjon, sår, benmargtransplantasjon og neutropeni.
Det vil være klart at mengden av en blanding ifølge oppfinnelsen som er nødvendig for bruk i behandling vil variere avhengig av administreringsrute, naturen til tilstanden som skal behandles, alder og tilstand til pasienten og vil til sist være opp til den behandlende leges vurdering. Den ønskede dose kan hensiktsmessig presenteres som en enkelt dose eller som oppdelte doser som tas i passende intervaller, for eksempel som to, tre, fire eller flere doser per dag.
Selv om det er mulig for bruk i terapi å administrere fettsyrer med halvlange kjeder eller metallsalter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT som råkjemikalien, er det foretrukket å presentere den aktive ingrediens som en farmasøytisk formulering.
I en foretrukken utførelsesform av denne oppfinnelse, er mengden av den aktive ingrediens som administreres slik at konsentrasjonen i blodet (fritt og/eller bundet til serum albumin) større enn 1 uM. I en særlig foretrukken utførelsesform er konsentrasjonen i blod større enn 1 mM.
I en annen utførelsesform er den farmasøytiske blandingen i formen for oral (inkluderende sublingual), eller parenteral (omfattende intramuskulær, subkutan, rektal eller intravenøs) administrering. Formuleringene kan, der det passer, hensiktsmessig presenteres i adskilte doseringsenheter og kan fremstilles på enhver fremgangsmåte som er velkjent i farmasifaget. Alle fremgangsmåtene omfatter trinnet å bringe den aktive komponent i kontakt med flytende bærere eller fint fordelte faste bærere eller begge deler, og deretter, hvis nødvendig, å utforme produktet i den ønskede formulering. Når ønskelig kan de ovenfor beskrevne formuleringer, tilpasset for å gi en vedvarende frigivelse (sustained release) av den aktive komponent, anvendes.
Fettsyrer med halvlange kjeder eller salter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT kan også anvendes i kombinasjon med andre terapeutisk aktive midler så som cytotoksiske anticancermidler eller andre anticancermidler (immunmodulerende eller regulerende legemidler eller terapeutiske vaksiner eller antiangiogenese legemidler, osv.), immunsuppresive midler (omfattende betennelseshemmende midler), en vekstfaktor så som en kolonistimulerende faktor (fortrinnsvis GM-CSF eller G-CSF), et cytokin så som interleukin-2 eller interleukin-15, eller kombinasjoner av disse. De individuelle komponentene av slike kombinasjoner kan administreres enten sekvensielt (før eller etter) eller simultant i separate eller kombinerte farmasøytiske formuleringer. Kombinasjonen omtalt ovenfor kan hensiktsmessig presenteres for bruk i form av en farmasøytisk formulering, og følgelig utgjør en farmasøytisk formulering som omfatter en kombinasjon som definert ovenfor sammen med en farmasøytisk akseptabel bærer et ytterligere aspekt av oppfinnelsen.
I en foretrukken utførelsesform av anvendelsen for å stimulere hematopoese i en pasient som trenger behandling, administreres en farmakologisk effektiv mengde av en blanding som omfatter en eller flere av de følgende forbindelser eller kombinasjoner av disse:
der
Ri er en rettkjedet eller forgrenet, mettet eller umettet C7-C11-alkylgruppe;
O
II
A og B er hydrogen eller RrC, uavhengig; og
X er en hydroksylgruppe; et oksyanion med et metallisk mono- eller dikationisk motion, eller en alkoksygruppe med en rettkjedet eller forgrenet C1-C4-alkylenhet.
Det vil være klart for fagfolk at i formel III betyr uttrykket "Z=null" at variabelen Z er valgfri og kan elimineres og erstattes med et hydrogen.
I en alternativ foretrukken utførelsesform inneholder blandingen en blanding av minst to forbindelser beskrevet av formel I, som er triglycerider med halvlange kjeder (Medium Chain Triglycerides, MCT) der A, B, og Ri er de samme og er henholdsvis rettkjedede eller forgrenede, mettede eller umettede C7- og C9-alkylgrupper. Alternativt inneholder blandingen en blanding av to triglycerider der en første MCT beskrives av formel I, der A, B, og Ri er CH3(CH2)6, og et andre MCT beskrives av formel I, der A, B, og Ri er CH3(CH2)8- Alternativt inneholder blandingen videre fra 0,1 % til 3 % hver av en tredje komponent beskrevet av formel I der A, B, og Ri er CH3(CH2)4, og en fjerde komponent beskrevet av formel I der A, B, og Ri er CH3(CH2)io- Alternativt er blandingen en blanding som inneholder fire geometriske isomere av C8- og C10-fettsyretriglycerider beskrevet av følgende formel:
I en alternativt foretrukken utførelsesform, inneholder blandingen en eller flere forbindelser beskrevet av formel II eller formel III, der X er OH eller X er et oksyanion med et metallisk motion så som kalsium, magnesium, kalium eller natrium.
I en mer foretrukken utførelsesform er blandingen kaprylsyre, kaprinsyre, natriumkaprylat, natriumkaprat, kalsiumkaprylat, kalsiumkaprat, kaprylsyretriglycerid eller kaprinsyretriglycerid.
Blandingene og anvendelsene beskrevet her omfatter de følgende analoger og forbindelser: aza-analoger av kaprylsyretriglycerid eller kaprinsyretriglycerid, fortrinnsvis der aza-analogen er 1,2,3-0,N.O-trioktanoyl-serinol eller 1,2,3-0,N,0-tridekanoylserinol:
forbindelsen beskrevet av formel IV
forbindelsen beskrevet av formel V forbindelsen beskrevet av formel VI; som frembringer en farmasøytisk formulering som ved nedbrytning in vivo sørger for frigivelse av aktive substanser beskrevet ovenfor
De følgende eksempler illustrerer ytterligere utøvelsen av denne oppfinnelsen. Det vil være klart at valg av dose av fettsyrer med halvlange kjeder eller salter eller triglycerider av disse eller mono- eller diglycerider eller andre analoger av disse eller MCT og tilhørende farmasøytiske formuleringer som skal administreres til enhver individuell pasient (menneske eller dyr), vil være opptil den behandlende leges vurdering, vil skrives ut på en måte som er forenlig med passende doser og vil avhenge av sydomstilstanden og liknende faktorer som er unikt innenfor området til den behandlende lege.
Eksempel 1: Analyse av CRODAMOL™ (MCT: kapryl/kaprintriglycerid) CRODAMOL™ GTCC parti#T1033-1299 fra Croda Ltd. (Toronta, Canada) ble analysert ved gasskromatografi. GC FID-analyse, betingelser for gradienten: 100°C - 250 °C i 10 minutter, deretter 250 °C i 25 minutter; FID 250 °C. Fire topper ble observert: 22,04 minutter (26 %), 25,07 minutter (43 %), 29,16 minutter (25 %) og 34,75 minutter (5 %).
En prøve av kapryltriglycerid (trikaprylin) erholdt fra Sigma-Aldrich parti #0791-11212 ble analysert ved gasskromatografi. GC FID-analyse, betingelser for gradienten: 100°C - 250 °C i 10 minutter, deretter 250 °C i 25 minutter; FID 250 °C. Hovedsakelig en topp ved 22,31 minutter (98%).
Eksempel 2: Acylering av alkohol ved bruk av syreklorid og pyridinbase.
Metode A: pyridin, CH2CI2; Metode B: DM AP, CH2CI2
Generell metode A (pyridin)
En oppløsning av alkoholen (-0,1 M] i tørr CH2CI2og pyridin (4:1) ble avkjølt til
0 °C under nitrogen og behandlet med syrekloridet (1,2 ekvivalenter). Reaksjonen fikk langsomt oppvarmes til romtemperatur og ble rørt over natt. TLC-analyse (SiC>2, EtOAc 1:9 heksan) viste ingen rester av alkohol. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CH2CI2og vasket med mettet vandig NhUCI-oppløsning. Den vandige fase ble ekstrahert med CH2CI2(x1) og heksan (x1), og de kombinerte organiske faser ble vasket med mettet vandig NaCI-oppløsning, tørket over Na2SC>4, filtrert og fordampet i vakuum for å gi råproduktet.
Generell metode B (DMPA)
En oppløsning av alkoholen (-0,1 M] i tørr CH2CI2ble avkjølt til 0 °C under nitrogen og behandlet med DMPA (1,3 ekvivalenter) og syrekloridet (1,2 ekvivalenter). Reaksjonen fikk langsomt oppvarmes til romtemperatur og ble rørt over natt. TLC-analyse (SiC>2, EtOAc 1:9 heksan) viste ingen rester av alkohol. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med CH2CI2og vasket med mettet vandig NH4CI-oppløsning. Den vandige fase ble ekstrahert med CH2CI2(x1) og heksan (x1) og de kombinerte organiske faser ble vasket med mettet vandig NaCI-oppløsning, tørket over Na2SC>4, filtrert og fordampet i vakuum for å gi råproduktet.
Eksempel 3: Nonansyretriglycerid.
Glyserol (120 mg, 1,30 mmol) ble acylert med nonanoylklorid (751 ul, 4,16 mmol) ifølge generell metode A, eksempel 2. Rensing ved kolonnekromatografi (Isolute™ SiC>2, eluering med 0-5 % EtOAc i heksan) ga to produktholdige fraksjoner, som ble fordampet i vakuum for å gi det ønskede produkt som en fargeløs væske, i renhet (GC/FID) på henholdsvis 89 % (127 mg, 19 %) og 93 %
(475 mg, 71 %). Rf 0,46 (Si02, 10 % etylacetat i heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H = 5,27 (m, 1H), 4,29 (dd, 2H), 4,14 (dd, 2H), 2,31 (m, 6H), 1,61 (m, 6H), 1,27 (m, 30H), 0,88 (t, 9H); MS (FAB<+>) m/ z = 510 (M-H<+>);GC FID-analyse, betingelser: 100°C - 250 °C i 10 minutter, deretter 250 °C i 25 minutter; FID 250 °C; 27,25 minutter.
Eksempel 4: Nonansyre-diglycerid og monoglycerid.
a) pyridin, CH2CI2
Glyserol (100 mg, 1,09 mmol) ble acylert med en ekvivalent nonanoylklorid (205
ul, 1,09 mmol) ifølge generell metode A, eksempel 2. Rensing med Biotage™
(40S, Si02, eluering med 10 % etylacetat i heksan-100% etylacetat) ga en fargeløs væske. To forskjellige produkter ble oppnådd:'
nonansyre-diglycerid ble oppnådd (73 mg, 18 %) som et hvitt faststoff, smp. 24 -26 °C; Rf 0,52 (SiO-2, forbehandlet med Et3N, 30 % etylacetat i heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H = 4,17 (m, 5H), 2,35 (t, 3H), 1,63 (m, 4H), 1,27 (m, 20H), 0,88 (t, 6H); MS (FAB<+>) m/ z = 373 (M+H<+>);
nonansyre-monoglycerid ble oppnådd (85 mg, 34 %) som et hvitt faststoff, smp. 37-38,5 °C; Rf 0,08 (Si02, forbehandlet med Et3N, 30 % etylacetat i heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H = 4,18 (m, 2H), 3,94 (m, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 2,36 (t, 2H), 1,62 (m, 2H), 1,28 (m, 10H), 0,88 (t, 3H); MS (FAB<+>) m/ z = 233
(M+H<+>).
Eksempel 5:1,2,3-0,N,0-tridekanoyl-serinol
Serinol (51 mg, 0,56 mmol) ble acylert med dekanoylklorid (372 ul, 1,76 mmol) ifølge generell metode B, eksempel 2. Rensing ved MPLC (Si02, eluering med 0 deretter 10% EtOAc i heksan) ga det ønskede sluttprodukt som et hvitt faststoff (301 mg, 97 %).); smp. 54 °C; TLC, Rf 0,85 (Si02, EtOAc 2:3 heksan)<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 0,84 (9H, t), 1,20-1,27 (36H, m), 1,52-1,60 (6H, m), 2,13 (2H, t), 2,28 (4H, t), 4,03 (2H, 2 x A av 2 x ABX), 4,19 (2H, 2 x B av 2 x ABX), 4,41-4,46 (1H, m), 5,70 (1H, d); HRMS m/e beregn, for C33H63NO5553,4706. Funnet 553.4713. GC FID-analyse, betingelser for gradienten: 100°C - 250 °C i 10 minutter, deretter 250 °C i 25 minutter; FID 250 °C. Hovedsakelig en topp ved 14,80 minutter (98%).
Eksempel 6:1,3-0,0-didekanoylserinol.
En oppløsning av serinol(1,57 g, 17,2 mmol) i aceton (17 ml) og vann (17 ml) ble behandlet med trietylamin (3,60 ml, 25,9 mmol) og BOC-ON (4,67 g, 19,0 mmol) og reaksjonen ble rørt under nitrogen over natt. Aceton ble fordampet i vakuum og råproduktet ble fordelt mellom EtOAc og vann. Den vandige fase ble ekstrahert med EtOAc (x3) og kombinerte organiske ekstrakter ble tørket over Na2S04, filtrert og fordampet i vakuum for å gi et gult faststoff. Rensing ved MPLC (Si02, eluering med 40 til 80% EtOAc i heksan) ga N-BOC-diol-mellomproduktet som et hvitt krystallint faststoff (2,10 g, 64 %). TLC, Rf 0,15 (Si02, EtOAc 4:1 heksan)<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 1,40 (9H, s), 3,54 - 3,56 (5H, m). N-BOC-diol-mellomproduktet (50 mg, 0,26 mmol) ble acylert med dekanoylklorid (173 ul, 0,83 mmol) ifølge generell metode B. Rensing ved MPLC (Si02, eluering med 0 deretter 10 % EtOAc i heksan) ga N-BOC-diacyl-mellomproduktet som en fargeløs olje (115 ml, 88 %). TLC, Rf 0,80 (Si02, EtOAc 2:3 heksan)<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 0,87(6H, t), 1,23-1,20 (24H, m), 1,44 (9H, s), 1,56-1,70 (4H, m), 2,31 (4H, t), 4,04-4,21 (4H, m), 4,77-4,80 (1H,m), 6,73 (1H,d).
En oppløsning av N-BOC-diacyl-mellomproduktet (0,76 mg, 0,15 mmol) i tørr CH2CI2(1,5 ml) ble avkjølt til 0 °C, og behandlet med en oppløsning av 4,OM vannfri HCI i 1,4-dioksan (375 ul, 1,50 mmol, sluttkonsentrasjon 0,8 M). Reaksjonen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble rørt i 3 timer ved samme temperatur. Nok en porsjon med 4,0 M vannfri HCI i 1,4-dioksan (375 ul, 1,50 mmol) ble tilsatt og reaksjonen ble rørt i ytterligere 2 timer. Fordampning av løsningsmidler ga det ønskede produktet som et hvitt faststoff (69 mg, 100 %), smp. 101 °C; TLC, Rf 0,40 (Si02, EtOAc 2:3 heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 0,88 (6H, t), 1,20-1,29 (24H, m), 1,55-1,65 (4H, m), 2,45-2,52 (4H, m), 3,72-3,80 (1H, m), 4,30 - 4,51 (2H, m), 8,6-9,0 (3H,br m); HRMS m/e beregn, for (M-HCI) C23H45NO4339,3348. Funnet 339,3340; GC FID-analyse, betingelser for gradienten: 100°C - 250 °C i 10 minutter, deretter 250 °C i 25 minutter; FID 250 °C. Hovedsakelig en topp ved 17,14 minutter (94%).
Eksempel 7: a- og p-1-0-metyl-2,3,4-0,0,0-tridekanoyl-L-fucopyranose. 1 -O-metyl-L-fucopyranose (593 mg, 3,33 mmol) ble syntetisert ifølge metoden til Levene & Muscat (J. Biol. Chem. 105: 431-441,1934) og ble acylert med dekanoylklorid (2,90 ml, 14,0 mmol) ifølge generell metode B, eksempel 2. Rensing ved MPLC (Si02, eluering med 0 til 5 % EtOAc i heksan) ga a (1,18 gm, 55 %) og P (0,52 gm, 24 %) av det ønskede produkt som en fargeløs olje.
Data for a-anomeren: TLC, Rf 0,45 (Si02, EtOAc 1:9 heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 0,87 (9H, t), 1,14 (3H, d), 1,20-1,35 (36H, m), 1,52-1,68 (4H, m), 2,18 (2H, t), 2,29 (1H, AavABX2), 2,32 (1H, B avABX2), 2,41 (2H, t), 3,38 (3H, s), 4,13 (1H, qd, J 6,5), 4,93 (1H, d), 5,15 (1H, dd), 5,30 (1H, dd), 5,36 (1H, dd). HRMS beregnet for (M-CH3O) CseHesO/609, 4730. Funnet 609, 4720.
Data for (3-anomeren: TLC, Rf 0,40 (Si02, EtOAc 1:9 heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H 0,87 (9H, t, J 6,5Hz), 1,22 (3H, d), 1,20-1,35 (36H, m), 1,49-1,67 (4H, m), 2,18 (2H, t), 2,25 (1H, A av ABX2), 2,29 (1H, B av ABX2), 2,34 (2H, t), 3,50 (3H, s), 3,81 (1H, qd), 4,35 (1H, d), 5,03 (1H, dd), 5,19 (1H, dd), 5,24 (1H, dd).
Eksempel 8: L-glutamat-kapramid
Til en oppløsning av kaprinsyre (7,30 mmol, 1,26 g) i tørr CH2CI2(60 ml) ble det under nitrogen tilsatt L-glutaminsyre-di-f-butylester-HCI-salt (6,09 mmol, 1,80 gm), DMAP (1,8 mmol, 0,22 g), diisopropyletylamin (18 mmol, 3 ml) og 1-(3-dimetyl-aminopropyl)-3-etylkarbodiimid-HCI-salt (EDCI) (7,30 mmol, 1,40 gm). Den resulterende fargeløse oppløsning ble rørt ved romtemperatur I 24 timer. Løsningsmidlet ble deretter fjernet under redusert trykk for å gi en hvit oljeaktig rest. Rensing ved Biotage™ (40S Si02, eluering med 5 % etylacetat i heksan - 30% etylacetat i heksan) ga en fargeløs olje som var L-glutamat-di-f-butylester-kaprimid (2,47 gm, 98 %). Rf 0,56 (Si02, 30 % etylacetat i heksan);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H = 6,05 (d, 1H), 4,45 (m,1H), 2,30 (m, 2H), 2,27 (m, 2H), 2,16 (t, 2H), 2,07 (m,1H), 1,87 (m,1H) 1,58 (m,2H), 1,43 (s, 9H), 1,41 (s,9H), 1,23 (m,12H), 0,84 (t, 3H).
Fjerning av beskyttelsesgruppen BOC ble oppnådd ved langsom tilsetning av en oppløsning av 4,0 M HCI i 1,4-dioksan (23 ml) til en oppløsning av di-f-butylesterderivatet (5,75 mmol, 2,38 gm) i CH2CI2(35 ml) ved 0 °C. Den fargeløse oppløsningen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble rørt i ytterligere 20 timer. Løsningsmidlet ble deretter fjernet under redusert trykk og det resulterende hvite faststoffet ble tørket for å gi L-glutamat-kaprimid (1,71 gm, 99 %), smp. 95 - 96,5°C;<1>H-NMR (CD3OD, 300MHz) 5H = 4,39 (m, 1H), 3,27 (d, 1H), 2,36 (t, 2H), 2,20 (t, 2H), 2,13 (m, 1H), 1,90 ( m, 1H), 1,58 (m, 2H), 1,27 (m, 12H), 0,86 (t, 3H), MS (ES<+>) m/ z = 324 (M+Na<+>), 302(M+H<+>), MS (ES") m/ z = 300 (M-H<+>); HPLC-analysebetingelser: gradient 0,01 % TFA i 10 %- 70 % acetonitril i 10 minutter; strømning 1,0 ml/min; 210 nm; 8,93 minutter.
Eksempel 9: Kaprinsyre-N,N-dimetylacetamidester
Til en oppløsning av kaprinsyre (8,7 mmol, 1,5 g) i vannfri DMF (80 ml) under nitrogen ble det tilsatt natriumiodid (0,87 mmol, 130 mg) etterfulgt av dimetylklor-acetamid (9,6 mmol, 985 ul). Kaliumkarbonat (9,6 mmol, 1,3 g) ble deretter tilsatt og den resulterende suspensjon ble rørt ved 90 °C i 5 dager. Reaksjonen fikk oppvarmes til romtemperatur og ble blandet med destillert vann. Produktet ble tørket med etylacetat (x3). De kombinerte organiske faser ble vasket med vandig oppløsning av NaHC03, tørket med Na2S04, filtrert og konsentrert under redusert trykk. Den gule væsken som ble erholdt ble renset med Biotage™ (40M, Si02, eluering med 25 % etylacetat i heksan - 50 % etylacetat i heksan). Kaprinsyre-N,N-dimetylacetamidester ble erholdt (2,03 g, 92 %) som et hvitt pulver, smp. 42 - 42,5 °C; Rf 0,55 (Si02, etylacetat);<1>H-NMR (CDCI3, 300MHz) 5H = 4,64 (s, 2H), 2,92 (s, 3H), 2, 91 (s, 3H), 2,38 (t, 2H), 1,62 (qt, 2H), 1,22 (m, 12H), 0,83 (t, 3H); MS (ES<+>) m/ z = 537 (2M+Na<+>), 280 (M+Na<+>), 258 (M+H<+>).
Eksempel 10: In wfro-assay for neutrofil apoptose og overlevelse.
Neutrofil overlevelse ble målt som beskrevet av Lagraoui og Gagnon (Cell. Mol. Biol. 43: 313 - 318, 1997). Neutrofile granulocytter ble erholdt fra perifert blod fra friske frivillige. Blodet ble utsatt for gradient sentrifugering med Lympholyte-poly (Cedarlane, Hornby, Canada) etterfulgt av hypoton lyse av forurensende erytrocytter. Celler ble suspendert i RPMI (Gibco, Burlington, Canada) supplementert med 10 % FBS (Hyclone, Logan, USA). Endelige cellepreparater besto av >95 % neutrofile granulocytter, som bestemt ved Wright Giemsa-farging. Levedyktighet var større enn 97 % som bestemt ved tryptanblå-eksklusjon. Polymorfnukleære levkocytter (PMN) har en kort halveringstid og gjennomgår raskt de karakteristiske endringene som indikerer apoptose. Apoptose ble vurdert i henhold til metoden beskrevet av Nicoletti m.fl., J. Immunol. Meth. 139: 271- 279
(1991). Kort beskrevet, ble ferskt isolerte neutrofile granulocytter inkubert i 24 timer ved 37 °C med forkjellige konsentrasjoner av MCT. Etter inkubering ble cellene farget med propidiumiodid (Pl, Sigma) og analysert for apoptose ved bruk av et XL Flow Cytometer (Coulter). Data ble deretter uttrykt som prosent av apoptotiske celler. Figur 1 representerer en sammenstilling av flere eksperimenter der neutrofil apoptose ble målt i fravær (kontroll) eller nærvær av forskjellige konsentrasjoner av MCT. Resultatene indikerer at i nærvær av MCT in vitro, hemmes neutrofil apoptose med opptil 90 % og at hemmingen er doseavhengig. Følgelig kan MCT øke neutrofil overlevelse og kan brukes som neutrofil overlevelsesfaktor.
Eksempel 11: In wfro-assay for PMN-fagocytose.
Neutrofile granulocytter (2 x 106/ml) ble inkubert i 24 timer, ved 37 °C i 5 % C02og 95 % fuktighet med forskjellige konsentrasjoner av MCT. Etter 24 timer ble levedyktigheten bestem ved tryptanblå-eksklusjon og cellene ble vasket tre ganger med PBS som inneholdt 2 mM glukose, 1 mM MgCI2og 1 mM CaCI2. Cellekonsentrasjonen ble deretter justert til 1 x 10<6>celler/ml og deretter inkubert med fluoresbrite-karboksylat-mikrosfærer (1/10 fortynning). Etter inkubering i 30 minutter ble de neutrofile granulocyttene vasket og fiksert i 2 % paraformaldehyd. Fikserte neutrofile granulocytter ble analysert for mikrosfære-fordøyelse ved bruk av XL Flow Cytometer (Coulter). Data ble deretter uttrykt som prosent av fagocytiske celler.
Figur 2 representerer en samlet oppstilling av flere eksperimenter som måler PMN fagocytisk aktivitet i fravær (kontroll) eller nærvær av forskjellige konsentrasjoner av MCT. Resultatene indikerer at MCT øker den fagocytiske aktiviteten til human PMN. Den fagocytiske aktiviteten økes to til tre ganger fra kontrollverdiene og graden av stimulering er avhengig av immunstatusen til donor.
Eksempel 12: Effekt av doxorubicin på neutrofil apoptose.
PMN ble isolert som beskrevet i eksempel 10. Celler (2 x 10<6>/ml) ble inkubert i 4 timer, ved 37 °C i 5 % C02og 95 % fuktighet med forskjellige konsentrasjoner av et kjemoterapeutisk middel, doxorubicin. Apoptotiske celler ble evaluert som beskrevet i eksempel 10. Data er uttrykt i prosent av apoptotiske celler. Figurene 3A og 3B indikerer at doxorubicin induserer PMN apoptose.
Eksempel 13: MCT redder neutrofile granulocytter fra den doxorubicin-induserte apoptosen.
PMN ble isolert som beskrevet i eksempel 10. Celler (2 x 10<6>/ml) ble inkubert i 4 timer, ved 37 °C i 5 % C02og 95 % fuktighet i nærvær av forskjellige konsentrasjoner av doxorubicin med eller uten MCT (2,5 % og 5,0 %). Apoptotiske celler ble evaluert som beskrevet i eksempel 10. Data er uttrykt i prosent av apoptotiske celler.
Tabell 1 representerer to eksperimenter som måler de kjemobeskyttende effektene av MCT på PMN. Resultatene er uttrykt i prosent av apoptotiske celler etter 4 timers inkubering i nærvær eller fravær av doxorubicin med eller uten MCT. Som i eksempel 12, induserer doxorubicin PMN-apoptose in vitro. Dog, i nærvær av MCT i en konsentrasjon på 2,5% og 5 % (volum/volum, v/v), hemmes de apoptotiske effektene til doxorubicin. Følgelig utøver MCT en anti-apoptotisk effekt på PMN. Apoptose ble også studert ved bruk av annexin V-FITC/PI (propidiumiodid)-metoden ifølge produsenten Biosources' anbefalinger (Apotarget Annexin-VFITC Apotosis Kit #PHN 1018). Annexin V binder seg til fosfatidylserin som overføres fra den interne til den eksterne membran i tidlig til sen fase av apoptose. Kort beskrevet, ble ferskt isolerte neutrofile granulocytter inkubert i 24 timer ved 37 °C med forkjellige konsentrasjoner av doxorubicin og MCT. Etter 24 timer ble neutrofile granulocytter vasket med PBS og farget med 2 ul annexin VFITC og 10ul Pl (Sigma, 1 mg/ml) i 20 minutter. Etter inkubering ble fargede celler fiksert i paraformaldehyd (1 %) og analysert for apoptose ved bruk av et XL Flow Cytometer (Coulter). Data ble deretter uttrykt i prosent av apoptotiske celler. Figur 4A representerer en tidsforløp-respons av MCT på doxorubicin-indusert apoptose på en tid- og dose-avhengig måte. Figur 4B representerer en tidsforløp-respons av doxorubicin på MCT-behandlede neutrofile granulocytter. MCT beskytter på en dose-avhengig måte neutrofile granulocytter mot doxorubicin-indusert apoptose opptil 4 timer før introduksjonen av det toksiske midlet (doxorubicin).
Eksempel 14: MCT redder neutrofile granulocytter fra den doxorubicin-induserte apoptosen: sammenlikning med GM-CSF.
Tabell 2 representerer effekten av GM-CSF, MCT og trikaprylin på doxorubicin-induserte human, neutrofil apoptose. GM-CSF og MCT er i stand til å redde eller beskytte humane neutrofile granulocytter mot doxorubicin-indusert apoptose. Trikaprylin redder doxorubicin-indusert apoptose og forbedrer dessuten levedyktigheten til humane neutrofile granulocytter i større grad enn det som var observert i ikke-behandlede neutrofile granulocytter i høyere grad enn det som var observert i de ikke-behandlede neutrofile granulocyttene (kontroll, fravær av doxorubicin).
Eksempel 15: MCT og trikaprin øker/n vitro, murin benmargsproliferasjon. Benmargsceller ble erholdt fra lårbenet til C57BL/6 hunnmus (6 til 8 uker gamle). Cellene ble spylt (flushed) og vasket med PBS. Samlede celler blir sentrifugert og reuspendert ved 2 x 10<6>celler/ml. 100 ul med celler (2x 10<5>celler) inkuberes i en 96-brønn-mikrotiterplate i 48 timer i nærvær eller fravær av MCT eller trikaprin. Etter inkubering pulseres cellene med 1 uCi med [<3>H]-tymidin i 6 timer. Platene høstes på en Tomteck og telles på en Microbeta B-teller. Inkorporering av [<3>H]-tymidin i DNA-et er en direkte indikasjon på celleproliferasjon.
Figur 5 representerer et typisk eksperiment på effekten av MCT og trikaprin på økning av benmargsproliferasjonen. MCT og trikaprin øker benmargsproliferasjon 3- til 5-ganger i forhold til kontroll.
Eksempel 16: Kjemobeskyttelsesstudier: In vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ved MCT.
C57BL/6-hunnmus, 6 til 8 uker gamle, ble utsatt for immunosuppresjon ved behandling med 80 mg 5-fluoruracil (5-FU) eller 100 - 200 mg syklofosfamid (CY) eller 12 mg taxoter (TX), som ble administrert på dag 0. For å undersøke den immunoprotektive effekten til MCT eller andre forbindelser, ble mus forbehandlet oralt på dag -3, -2 og -1 eller behandlet intravenøst på dag 0 med testforbindelsen. Musene ble slaktet på dag +5 ved hjertepunktur og servikal dislokasjon. Deretter ble det laget cellesuspensjoner fra tymus, milt og benmarg som følger.
Vev ble knust i PBS-buffer og forurensende erytrocytter ble lysert i ACK-buffer (155 ml NH4CI, 12 mM NaHC03, 0,1 mM EDTA, pH 7,3) i 5 minutter. Celler ble deretter samlet ved sentrifugering og vasket tre ganger i PBS og resuspendert i vevdyrkningsmedium. Cellene ble talt på et hemacytometer.
Resutatene viste at MCT signifikant øker antall celler i immunvev hos normale og immunsupprimerte (immunsuppressed) dyr sammenlignet med bæreren alene som vist i de følgende tabeller og figurer. Avhengig av eksperimentene og immuntilstanden til musene, kan MCT øke antall benmargsceller og/eller miltceller og/eller tymusceller. Figur 6 viser effekten av MCT på benmargscelletallet i immunsupprimerte dyr. Kun CY og 5-FU undertrykte benmargcelletallet sammenlignet med kontroll (ingen cytotoksisk behandling). I mus har taxoter ingen signifikant effekt på benmargcelletallet. I undertrykt benmarg økte administrering av MCT (6,5 umol per mus) på dag -3, -2 og -1 signifikant benmargcelletallet. Figur 7 representerer effekten av MCT på miltcelletall i immunsupprimerte dyr som mottok et forbehandlingsregime med MCT per os. Alle cytotoksiske legemidler (CY, 5-FU og TX) reduserte signifikant miltcelletallet sammenlignet med kontrollen. Administrering av MCT (6,5 umol per mus) på dag -3, -2 og -løker signifikant miltcelletallet med "P" mindre enn 0,0017, 0,009 og 0,0036 for henholdsvis CY, 5-FU og TX.
Videre øker MCT signifikant benmargcelletallet i normale mus når det administreres iv på dag 0 (tabell 3). Dog er ikke en iv injeksjon av MCT nok til å forbedre miltcelletallet i både normale og immunsupprimerte dyr.
Eksempel 17: Kjemobeskyttelsesstudier: In vivo dose-respons på MCT-induksjon av immuncelleproliferasjon når administrert på dag -3, -2 og -1 i normale mus.
In vivo dose-respons av MCT-induksjon på immuncelleproliferasjon i normale mus ble undersøkt ved protokollen beskrevet i eksempel 16.
Tabell 4 representerer dose-responsen ved behandling med MCT oralt administrert på dag -3, -2 og -1 i normale mus. MCT øker signifikant tallet på benmargceller og miltceller.
Eksempel 18: Kjemobeskyttelsesstudier: In vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse: sammenligning av effekten til MCT i forhold til effekten av GM-CSF.
In vivo sammenligning av induksjonen av immuncelleproliferasjon/regenerering eller beskyttelse ble gjennomført ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Sammenliknende studier av MCT og GM-CSF ble utført på normale og immunsupprimerte dyr. Sammenlignet med MCT, har GM-CSF ingen signifikant aktivitet på celletall i benmarg og milt i immunsupprimerte dyr. En signifikant effekt av GM-CSF ble kun observert på tymusvekt i normale dyr (figur 8). I dette tilfellet utviste MCT en tilsvarende effekt som GM-CSF.
Eksempel 19: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av kaprylsyre og kaprinsyre på in vivo induksjonen av immuncelleproliferasjon og beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Som vist i tabell 5, øker kun kaprinsyre signifikant benmargcelletallet. Ingen signifikant effekt ble vist på miltcelletall sammenlignet med mus behandlet med syklofosfamid.
Eksempel 20: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av trikaprylin og trikaprin på in vivo induksjonen av
immuncelleproliferasjon og beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Trikaprylin og trikaprin har begge effekt på proliferasjon eller beskyttelse av benmargscelletall i CY-behandlede mus (tabell 6). Ingen signifikant effekt ble observert på miltcelletallet, sammenlignet med syklofosfamid-behandlede mus.
Eksempel 21 kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av nonansyre og laurinsyre på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Signifikante økninger i proliferasjon og beskyttelse ble observert med forbehandlingen med laurinsyre i CY-behandlede mus. Dog utviser nonansyre en svak (ikke signifikant) aktivitet på immuncelletall (tabell 7) sammenlignet med syklofosfamid-behandlede mus.
Eksempel 22:Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av trilaurin og trimyristin på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Trilaurin og trimyristin har en svak (ikke signifikant) aktivitet på celletall i benmarg og milt i CY-immunsupprimerte mus (tabell 8).
Eksempel 23: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av trikaproin og natriumkaproat på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16. Trikaproin og natriumkaproat har en svak (ikke signifikant) aktivitet på celletall i benmarg og milt i CY-immunsupprimerte mus (tabell 9).
Eksempel 24: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av natriumkaprylat og natriumkaprat på In vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 16.
En signifikant økning i proliferasjon eller beskyttelse av celletall i benmarg og milt ble observert med forbehandling med natriumkaprylat og natriumkaprat i CY-behandlede mus (figur 9).
Eksempel 25: Kjemobeskyttelsesstudier: Etter-behandlingsregimer. Kjemobeskyttelsesstudier ble utført som beskrevet i eksempel 16 bortsett fra at mus ble (etter)behandlet med MCT, natriumkaprylat, natriumkaprat eller kaprinsyre per os på dag 1, 2, 3 og 4.
En signifikant økning i benmargscelletall ble observert med etterbehandlingen med MCT, natriumkaprylat og natriumkaprat i CY-behandlede mus (tabell 10). Når den brukes ved etterbehandling induserer kaprinsyre en signifikant økning i miltcelletall og en svak økning i benmargscelletall (tabell 11).
Eksempel 26:Kjemobeskyttelsesstudier: Immunfenotypings-assay. C57BL/6-hunnmus, 6- til 8-uker gamle, ble forbehandlet på dag -3, -2 og -1 per os eller intravenøst på dag 0 med forskjellige konsentrasjoner av MCT. Immunfenotyping ble også utført på immunsupprimerte dyr. Immunsuppresjon ble oppnådd med 80 mg/kg 5-fluoruracil (5-FU) eller 100 til 200 mg/kg med syklofosfamid (CY) eller 12 mg/kg taxoter (TX) injisert iv på dag 0. Mus ble slaktet på dag 5 ved hjertepunktur. Blod og milt ble samlet og cellesuspensjoner ble fremstilt og erytrocytter lysert i ACK-buffer (155mM NH4CI, 12 mM NaHC03, 0,1 mM EDTA, pH 7,3) i 5 minutter. Cellene ble vasket tre ganger i PBS, pH 7,4 og resuspendert i vevdyrkningsmedium. Cellene ble deretter inkubert i 45 minutter på is med fluorescein-isotiocyanat- (FITC) eller fykoerytin-(PE)-konjugert celleoverflatemarkør ifølge produsentens anbefalinger (Gibco/BRL, Cedarlane, Boehringer Mannheim). Cellene ble deretter vasket i PBS, fiksert med 1 % paraformaldehyd og analysert med et Coulter XL strømningscytometer. Analyse av undergrupperinger av celler ble utført ved bestemmelse av standard celleoverflatemarkører, som var som følger: TCR (T-cellereseptor), CD4 (T-hjelper), CD8 (T-cytotoksisk/suppressor), CD11b (makrofag, NK (NK-celler) og Ly5 (B-celler). Benmargceller ble erholdt som beskrevet i eksempel 15. Cellene ble farget ved en 15 minutters inkubering av FITC- eller PE-konjugerte celleoverflatemarkører ifølge produsentens anbefaling. Cellene ble deretter vasket i PBS , fiksert med 1 % paraformaldehyd og analysert med et Coulter XL strømningscytometer. Analyse av undergrupperinger av celler ble utført ved bestemmelse av standard celleoverflatemarkører, som var som følger: CD34 (hematopoetiske progenitorceller), CD41 (blodplater, megakaryocytter), CD13 (myelomonocytiske stamceller, myelocytter, promonocytter) og CD38 (lymfoide stamceller, pro-B, pre-B). Tabell 12 representerer effekten av MCT på immunfenotyping i blod og milt i normale mus. Ved immunfenotyping i blod øker MCT-undergrupperinger av celler av typene CD8+ og LY5+. I noen eksperimenter øker MCT svakt LY5-TCR-undergruppen (data ikke vist). Ved immunfenotyping i milt, øker MCT signifikant den relative prosent av LY5+TCR+- og CD4+-celler. LY5-TCR- er ikke-B-ikke-T-celler som kan representere neutrofile granulocytter. Når administrert til immunsupprimerte dyr øker MCT den relative prosent av LY5-TCR- (sannsynligvis neutrofile granulocytter) og CD11+- (makrofager)celler ved immunfenotyping i blod og milt sammenlignet med syklofosfamid alene. Disse undergrupperinger stammer fra den myeloide celleforløperen (tabell 13). Eksempel 27: Kjemobeskyttelsesstudier: Immunfenotypings-assay. Immunfenotyping av trimyristin, trilaurin, kaprinsyre og natrium-kaproat ble gjennomført ved å følge protokollen beskrevet i eksempel 26.
Tabell 14 viser effekten av disse MCT-analoger på blod- og milt-immunfenotyping. På blod har trimyristin og trilaurin ingen signifikant effekt sammenlignet med syklofosfamid alene. Dog økerr trimyristin og trilaurin den relative prosent av CD11+ i milt. Videre induserer trilaurin en signifikant økning i LY5-TCR- og NK+-celleundergrupper.
Det interessante er at kaprinsyre og natriumkaproat signifikant øker den relative prosenten av LY5-TCR- i blod. I milt har ikke kaprinsyre noen signifikant effekt sammenlignet med syklofosfamid alene.
Eksempel 28: Kjemobeskyttelsesstudier: Benmargimmunfenotyping. Effekten av MCT, natriumkaprylat, natriumkaprat på benmargimmunfenotyping ble gjennomført ved protokollen beskrevet i eksempel 26. Behandling med syklofosfamid induserer en signifikant økning i alle undersøkte undergrupper (CD34+, CD13+, CD41+ og CD38+). Tilsetning av MCT eller natriumkaprylat eller natriumkaprat forsterker antall fra CD13+-linjen som er myelomonocytiske stamceller, myelocytter og promonocytter. Denne økning av den relative prosenten av CD13+ er signifikant sammenlignet med syklofosfamid alene. Resultatene viser klart at MCT og andre beslektede forbindelser induserer en signifikant økning i antall benmargsceller (som eksemplifisert i foregående eksempel) og videre øker den relative prosenten av forløpere til fagocyttiske celler (PMN og monocytter). Dette kan resultere i bedre tilfriskning etter cytotoksisk behandling eller beskyttelse mot infeksiøse agenter (tabell 15).
Eksempel 29: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av tridekanoylserinol og didekanoylserinol på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved protokollen beskrevet i eksempel 16.
Som vist i tabell 16, øker tridekanoyl signifikant miltcelletallet. Ingen signifikant effekt ble vist for benmargscelletallet.
Eksempel 30: Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av a-metyl-tridekanoyl-L-fucopyranose og B-metyl-tridekanoyl-didekanoyl L-fucopyranose på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved protokollen beskrevet i eksempel 16.
Som vist i tabell 17, utviser a-metyl-tridekanoyl-L-fucopyranose en svak (ikke signifikant) aktivitet på benmargscelletallet sammenlignet med syklofosfamid-behandlede dyr. Mangel på aktivitet til a-metylanomeren er forventet i lys av den kjente instabiliteten til a-alkylpyranosider.
Eksempel 31:Kjemobeskyttelsesstudier
Effekten av etylkaprat og kaprinsyre-N,N-dimetylacetamidester på in vivo induksjon av immuncelleproliferasjon eller beskyttelse ble undersøkt ved protokollen beskrevet i eksempel 16.
Som vist i tabell 18, økerr kun kaprinsyre-N,N-dimetylacetamidester signifikant benmargscelletallet. Ingen signifikant effekt ble vist for miltcelletallet.
Eksempel 32: Antitumoraktivitet.
C57BL/6 hunnmus, 6- til 8-uker gamle, ble injisert intravenøst på dag 0 med 1 x 10<5>B16F10-melanomacellerfra ATCC (cellekulturens kilde, Dr. I.J. Fidler). Dyrene ble deretter injisert iv med eller uten MCT (25 umol/mus) på dag 7, 9, 14 og 16 og 10 mg/kg doxorubicin på dag 10 og 17. Mus ble slaktet på dag 22. Kroppsvekt og tumorvolum ble notert. Serietumorvolum (serial tumor volume) ble bestemt ved todimensjonale målinger med krumpassere (calipers), under anvendelse av formelen 0,4 (a x b<2>) der "a" var hovedtumordiameter og "b" den mindre vinkelrette diameter.
Eksperimentet ble utført for å verifisere at MCT ikke forverrer eller beskytter cancerceller heller enn immunceller.
Figur 10 representerer den kjemoprotektive effekt og antitumor-effektivitet til MCT i kombinasjon med en subterapeutisk konsentrasjon av doxorubicin i B16F10-melanomamodellen. MCT induserer en svak reduksjon (T/C rundt 20 %) av tumorvolum så nær som den subterapeutiske konsentrasjonen av doxorubicin
(T/C rundt 25 % reduksjon) når den brukes alene. En tilleggseffekt observeres når MCT brukes i kombinasjon med doxorubicin (T/C rundt 45 til 50 % reduksjon). Disse resultater indikerer at det er mulig å oppnå terapeutisk aktivitet når MCT kombineres med en subterapeutisk konsentrasjon av cytotoksiske legemidler.
Eksempel 33: Antitumoraktivitet
Den syngeneiske tumor DMBA3 (DA-3, brystcarcinomamodell) stammet fra en preneoplastisk lesjon behandlet med 7,12-dimetylbenzantracen i BALB/c-hunnmus. DA-3-celler ble dyrket som monolagskulturer i plastflasker i RPMI-1640 som inneholdt 0,1 mM ikke-essensielle aminosyrer, 0,1 uM natrium-puruvat, 2 mM L-glutamin og 100 ug/ml gentamycin-sulfat. Dette ble videre supplementert med 50 um 2-merkaptoetanol og 10 % føtalt kalveserum. DA-3-tumorene ble seriemessig overført (serially passage) in vivo ved subkutan inokulering av 5 x 10<5>levedyktige tumorceller i 6- til 8-uker gamle BALB/c-mus. Dyrene ble deretter seriemessig overvåket ved manuell palpaptering for tegn på tumor. Serietumorvolum ble deretter ble bestemt ved todimensjonale målinger med krumpassere (calipers), under anvendelse av formelen 0,4 (a x b<2>) der "a" var hovedtumordiameter og "b" den mindre vinkelrette diameter. Tumorer var palpapterbare generelt 7 til 10 dager etter inokulering.
To behandlingsregimer ble brukt for evaluering av antitumorvirksomhet og beskyttelse av MCT i kombinasjon med syklofosfamid (CY, 100 mg/kg) og taxoter (TX, 20 mg/kg) i DA-3-tumormodellen. BALB/c-mus ble injisert med tumorceller på dag 0. Behandling med MCT ble utført per os på dag 6,7 og 8; dag 13,14 og 15; dag 20, 21 og 22 etterfulgt av behandling med CY eller TX administrert iv som en enkeltdose bolusinjeksjon på dag 9 og 16. Kroppsvekt og tumorvolum ble overvåket fra dag 4 til dag 23. På dag 23 ble alle dyrene slaktet. %T/C (behandling i forhold til kontroll) ble beregnet som forholdet av tumorvolumene ved termineringsdato i behandlingsgruppen delt på de respektive volumene i kontrollgruppen delt på 100. Ifølge NCI-kriteriene er produktet å anse som effektivt hvis % T/C er < 40 %.
Eksperimentet ble utført for å verifisere at MCT ikke forverrer eller beskytter cancerceller heller enn immunceller. Figur 11 representerer den kjemoprotektive effekt og antitumorvirksomheten til MCT i kombinasjon med subterapeutisk konsentrasjon av CY og TX i DA-3-brystcarcinomamodell. MCT induserer en svak reduksjon (T/C rundt 18 %) av tumorvolumet sammenlignet med kontrollen. Når MCT brukes i kombinasjon med CY eller TX observeres ingen forverring av tumorvolumet. Når dog brukt i kombinasjon med CY observeres en terapeutisk respons (T/C = 39,4 %). Disse resultater indikerer at terapeutisk aktivitet kan oppnås når MCT kombineres med en subterapeutisk konsentrasjon av CY. Denne effekten kan være et resultat av en generell økning av immuncellevirksomhet i MCT-behandlede dyr (figur 11 og tabell 19).
Eksempel 34: Antitumoraktivitet
Antitumor- og kjemoprotektiv virksomhet ble vurdert ved protokollen beskrevet i eksempel 30, med unntak av bruk av en terapeutisk konsentrasjon av cytotoksiske legemidler (syklofosfamid, 200 mg/kg; taxoter, 30 mg/kg).
Eksperimentet ble utført for å verifisere at MCT ikke forverrer eller beskytter cancerceller heller enn immunceller. Figur 12 viser den kjemoprotektive effekt og antitumorvirksomheten til MCT i kombinasjon med terapeutisk konsentrasjon av CY og TX i DA-3-brystcarcinomamodell. MCT induserer en svak reduksjon av tumorvolumet sammenlignet med kontrollen. Når MCT brukes i kombinasjon med CY eller TX observeres ingen forverring av tumorvolumet. Når behandlet med CY eller CY + MCT observeres en signifikant reduksjon av tumorvolumet. Videre oppnås en signifikant reduksjon av tumorvolumet ved behandling med MCT kombinert med TX (p<0,0327) sammenlignet med TX alene, som ikke er signifikant sammenlignet med kontrollmus (p = 0,1211) (tabell 20). Disse resultater indikerer at en terapeutisk aktivitet kan oppnås når MCT kombineres med en ikke-signifikant terapeutisk konsentrasjon av TX. Denne effekten kan være et resultat av en generell økning av immuncellevirksomhet i MCT-behandlede dyr.
Alle referanser det henvises til i dette dokument inkorporeres herved ved henvisning i deres helhet.
Modifikasjoner og variasjoner av blandingen og fremgangsmåtene beskrevet her vil være opplagt for fagfolk fra den foregående beskrivelse. Slike modifikasjoner og variasjoner er ment å være innenfor omfanget av de vedlagt krav.

Claims (10)

1. Anvendelse av en forbindelse for fremstilling av et medikament for behandling av en tilstand valgt fra myelosuppresjon, sår, benmargtransplantasjon og neutropeni, hvor forbindelsen haren hvilken som helst av formlene I, II, eller III:
hvor Ri er en rettkjedet eller forgrenet, mettet eller umettet Cz-nalkylgruppe; A og B er uavhengig H eller RrCO; og X er en hydroksylgruppe, et oksyanion med et metallisk mono- eller dikationisk motion eller en alkoksygruppe med en rettkjedet eller forgrenet Ci^alkylenhet.
2. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen er en fettsyre med halvlang kjede av formel II, hvor X er OH.
3. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen er et salt av formel II, hvor X er et oksyanion med et metallisk motion valgt blant kalsium, magnesium, kalium og natrium.
4. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen er kaprylsyre, kaprinsyre, kaprylsyre-triglycerid eller kaprinsyre-triglycerid.
5. Anvendelse ifølge krav 1, hvor forbindelsen er natriumkaprylat, natriumkaprat, kalsiumkaprylat eller kalsiumkaprat.
6. Anvendelse ifølge et hvilket som helst av foregående krav, hvor tilstanden er legemiddel-indusert nøytropeni eller nøytropeni fra en hematologisk sykdom som stammer fra en mangelfull ernæring, fra infeksjon eller fra radioterapi.
7. Produkt som omfatter en forbindelse som definert i et hvilket som helst av kravene 1 til 5 og en human-kolonistimulerende faktor, for simultan eller separat anvendelse i behandling av en tilstand som definert i krav 1 eller krav 6.
8. Produkt ifølge krav 7,karakterisert vedden human-kolonistimulerende faktor er G-CSF eller GM-CSF.
9. Produkt som omfatter en forbindelse som definert i et hvilket som helst av kravene 1 til 5 og et human cytokin for simultan eller separat anvendelse i behandling av en tilstand som definert i krav 1 eller krav 6.
10. Produkt ifølge krav 9,karakterisert vedat cytokinet er interleukin-2 eller interleukin-15.
NO20034644A 2001-04-18 2003-10-17 Fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike NO335105B1 (no)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US28445801P 2001-04-18 2001-04-18
PCT/CA2002/000535 WO2002083120A2 (en) 2001-04-18 2002-04-18 Medium-chain length fatty acids, glycerides and analogues as neutrophil survival and activation factors

Publications (3)

Publication Number Publication Date
NO20034644D0 NO20034644D0 (no) 2003-10-17
NO20034644L NO20034644L (no) 2003-11-25
NO335105B1 true NO335105B1 (no) 2014-09-15

Family

ID=23090294

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20034644A NO335105B1 (no) 2001-04-18 2003-10-17 Fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike

Country Status (30)

Country Link
US (2) US7745488B2 (no)
EP (2) EP1385498B1 (no)
JP (3) JP5026655B2 (no)
KR (1) KR20030096323A (no)
CN (1) CN1633286A (no)
AP (1) AP1740A (no)
AU (2) AU2002308456B2 (no)
BG (1) BG66418B1 (no)
BR (1) BR0208984A (no)
CA (2) CA2444463C (no)
CY (1) CY1107081T1 (no)
CZ (1) CZ305273B6 (no)
DE (1) DE60223670T2 (no)
DK (2) DK1385498T3 (no)
EA (1) EA007322B1 (no)
EE (1) EE200300510A (no)
ES (2) ES2295397T3 (no)
HU (1) HUP0303817A3 (no)
IL (3) IL158322A0 (no)
MX (1) MXPA03009436A (no)
NO (1) NO335105B1 (no)
NZ (2) NZ528690A (no)
OA (1) OA12506A (no)
PL (2) PL222876B1 (no)
PT (2) PT1385498E (no)
SI (1) SI1385498T1 (no)
SK (1) SK12772003A3 (no)
TN (1) TNSN03089A1 (no)
WO (1) WO2002083120A2 (no)
ZA (1) ZA200307778B (no)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SK12772003A3 (sk) 2001-04-18 2004-07-07 Prometic Biosciences Inc. Stredne dlhé mastné kyseliny, glyceridy a analógy ako faktory prežitia a aktivácie neutrofilov
JP5390070B2 (ja) * 2003-02-07 2014-01-15 プロメティック、バイオサイエンシーズ、インコーポレーテッド 赤血球形成刺激薬としての中鎖脂肪酸、グリセリド、および類似体
ES2284029T5 (es) 2003-07-25 2012-02-17 Prometic Biosciences Inc. Preparación de sales metálicas de ácidos grasos de cadena media.
US20070219131A1 (en) * 2004-04-15 2007-09-20 Ben-Sasson Shmuel A Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
US8241670B2 (en) * 2004-04-15 2012-08-14 Chiasma Inc. Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
ZA200701781B (en) * 2004-09-03 2008-11-26 Prometic Biosciences Inc Substituted purinyl derivatives with immunomodulator and chemoprotective activity and use alone or with medium-chain length fatty acids or glycerides
US8071580B2 (en) * 2004-10-01 2011-12-06 Prometic Biosciences Inc. Medium-chain length fatty alcohols as stimulators of hematopoiesis
ZA200702532B (en) * 2004-10-01 2008-11-26 Prometic Biosciences Inc Medium-chain length fatty alcohols as stimulators of hematopoiesis
ATE553114T1 (de) * 2005-02-28 2012-04-15 Alphabeta Ab Verbindungen zur verminderung der aggregation von amyloid-beta-peptid
WO2007136424A2 (en) * 2006-05-17 2007-11-29 Cognate Therapeutics, Inc. Isolation and purification of hematopoietic stem cells from post-liposuction lipoaspirates
US8324277B2 (en) 2007-08-01 2012-12-04 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Nitrated-fatty acids modulation of type II diabetes
NZ584981A (en) 2007-11-02 2012-05-25 Prometic Biosciences Inc Medium-chain length fatty acids and glycerides as nephroprotection agents
CA2708679C (en) * 2007-12-19 2016-11-15 Prometic Biosciences Inc. Medium-chain length fatty acids, salts and triglycerides in combination with gemcitabine for treatment of pancreatic cancer
CA2729053A1 (en) 2008-05-01 2009-11-05 Bruce A. Freeman Vinyl substituted fatty acids
US20140024713A1 (en) 2008-06-19 2014-01-23 University Of Utah Research Foundation Use of nitrated lipids for treatment of side effects of toxic medical therapies
CN102099024B (zh) * 2008-06-19 2015-11-25 犹他大学研究基金会 硝化脂质在毒性医疗疗法的副作用的治疗上的用途
SI2343982T1 (sl) 2008-09-17 2017-08-31 Chiasma Inc. Farmacevtski sestavki in metode povezane z dostavo
EP2165713B1 (en) * 2008-09-19 2012-11-14 Nestec S.A. Whey and thymus function
JP2013500966A (ja) 2009-07-31 2013-01-10 ユニバーシティー オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケーション 抗炎症剤としての脂肪酸
EP2483233A4 (en) 2009-10-02 2013-08-14 Complexa Inc HETEROATOMA CONTAINING SUBSTITUTED FATTY ACIDS
EP2394636B1 (en) * 2010-05-28 2014-03-19 Novagali Pharma S.A. Method for treating retinal conditions using an intraocular tamponade
EP2744491B1 (en) 2011-08-19 2020-07-29 The University of Utah Research Foundation Combination therapy with nitrated lipids and inhibitors of the renin-angiotensin-aldosterone system
TWI572352B (zh) * 2012-03-01 2017-03-01 波麥堤克藥學Ｓｍｔ有限公司 用於製備具中鏈長度之脂肪酸的三酸甘油酯之方法
HUE053247T2 (hu) 2012-05-09 2021-06-28 Cantex Pharmaceuticals Inc Mieloszuppresszió kezelése
US20160199338A1 (en) 2013-08-19 2016-07-14 Enzychem Lifesciences Corporation Compositions containing monoacetyldiacylglycerol compound as an active ingredient for preventing or treating rheumatoid arthritis
WO2015176012A1 (en) 2014-05-15 2015-11-19 Enzychem Lifesciences Corporation Methods for treating leukopenia and thrombocytopenia
AU2016215350B2 (en) 2015-02-03 2021-11-25 Amryt Endo, Inc. Method of treating diseases
US10052346B2 (en) 2015-02-17 2018-08-21 Cantex Pharmaceuticals, Inc. Treatment of myelodysplastic syndromes with 2-O and,or 3-O desulfated heparinoids
DK3303339T3 (da) 2015-07-07 2021-04-12 H Lundbeck As Pde9-inhibitorer med imidazotriazinonskelet og imidazopyrazinonskelet til behandling af perifere sygdomme
EP3355879A4 (en) 2015-10-02 2019-05-22 Complexa, Inc. PREVENTION, TREATMENT AND INVERSION OF DISEASE USING THERAPEUTICALLY EFFECTIVE AMOUNTS OF ACTIVATED FATTY ACIDS
US9808438B2 (en) * 2015-11-09 2017-11-07 Enzychem Lifesciences Corporation Method for treating mucositis
US10588974B2 (en) 2016-04-22 2020-03-17 Receptor Holdings, Inc. Fast-acting plant-based medicinal compounds and nutritional supplements
WO2017211274A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Dong Yuhong Lipids with odd number of carbon atoms and their use as pharmaceutical composition or nutritional supplement
EA201892396A1 (ru) 2016-12-02 2019-04-30 Ресептор Лайф Сайенсиз, Инк. Быстродействующие растительные лекарственные соединения и биологически активные добавки
CN107382710B (zh) * 2017-08-19 2020-11-06 中国铁道科学研究院集团有限公司铁道建筑研究所 一种接枝抗氧剂分子的多元醇
EA202090566A1 (ru) * 2017-09-12 2020-07-14 Санреджен Хэлскэр Аг Липиды, содержащие нечетное количество атомов углерода, и их применение в качестве фармацевтической композиции или питательной добавки
JP2020536873A (ja) * 2017-10-05 2020-12-17 レセプター・ホールディングス・インコーポレイテッド 迅速発現作用延長型の植物系及び合成カンナビノイド製剤
EP3672608A4 (en) * 2017-10-05 2021-09-01 Receptor Holdings, Inc. HERBAL COMPOSITION WITH IMPROVED BIOAVAILABILITY
KR102054401B1 (ko) * 2018-03-26 2019-12-10 주식회사 엔지켐생명과학 1,2-디아실글리세롤 화합물, 그 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 면역조절제
JP2021526134A (ja) 2018-05-25 2021-09-30 イマラ インク． ６−［（３Ｓ，４Ｓ）−４−メチル−ｌ−（ピリミジン−２−イルメチル）ピロリジン−３−イル］−３−テトラヒドロピラン−４−イル−７Ｈ−イミダゾ［ｌ，５−Ａ］ピラジン−８−オンの一水和物および結晶形態
KR20220086574A (ko) * 2019-10-31 2022-06-23 니폰 제온 가부시키가이샤 전기 화학 소자용 기능층 및 그 제조 방법, 전기 화학 소자용 기능층 형성 세퍼레이터 및 그 제조 방법, 그리고 전기 화학 소자 및 그 제조 방법
US11141457B1 (en) 2020-12-28 2021-10-12 Amryt Endo, Inc. Oral octreotide therapy and contraceptive methods
WO2023067501A1 (en) * 2021-10-18 2023-04-27 Enzychem Lifesciences Corporation Compositions and methods for treating mucositis
WO2023205196A1 (en) * 2022-04-21 2023-10-26 Merck Sharp & Dohme Llc Process for preparing agglomerated crystalline medium-chain fatty acid sodium salts

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995030413A1 (fr) * 1994-05-10 1995-11-16 The Kitasato Institute Accelerateur de proliferation de cellules souches hematopoietiques
WO1999026640A1 (en) * 1997-11-20 1999-06-03 Bukwang Pharm. Ind. Co., Ltd. Pharmaceutical composition containing extracts of cervus nippon antlers having growth-stimulating activities of hematopoietic stem cells and megakaryocytes

Family Cites Families (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2003A (en) * 1841-03-12 Improvement in horizontal windivhlls
US2002A (en) * 1841-03-12 Tor and planter for plowing
US2006A (en) * 1841-03-16 Clamp for crimping leather
US2008A (en) * 1841-03-18 Gas-lamp eok conducting gas pkom ah elevated buhner to one below it
US2004A (en) * 1841-03-12 Improvement in the manner of constructing and propelling steam-vessels
US4528197A (en) * 1983-01-26 1985-07-09 Kabivitrum Ab Controlled triglyceride nutrition for hypercatabolic mammals
US4703062A (en) * 1984-01-16 1987-10-27 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Parenteral nutrition with medium and long chain triglycerides
US4871768A (en) 1984-07-12 1989-10-03 New England Deaconess Hospital Corporation Dietary supplement utilizing ω-3/medium chain trigylceride mixtures
US4816440A (en) * 1985-09-26 1989-03-28 Cetus Corporation Stable formulation of biologically active proteins for parenteral injection
US6054441A (en) * 1987-10-28 2000-04-25 Pro-Neuron, Inc. Oxypurine nucleosides and their congeners, and acyl derivatives thereof, for improvement of hematopoiesis
US5011852A (en) * 1988-07-25 1991-04-30 Applied Analytical Industries, Inc. Liquid oral pharmaceutical compositions of non-steroidal anti-inflammatory drugs
JPH02134326A (ja) * 1988-11-14 1990-05-23 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 高度侵襲用経腸栄養剤
JP3249147B2 (ja) * 1990-06-01 2002-01-21 キリン−アムジエン・インコーポレーテツド 生理活性蛋白含有経口製剤
EP0526630A4 (en) * 1991-02-22 1993-08-11 Amgen Inc. Use of gm-csf and g-csf to promote accelerated wound healing
JP3132085B2 (ja) * 1991-09-06 2001-02-05 ウェルファイド株式会社 脂肪乳剤
JPH05163160A (ja) * 1991-12-13 1993-06-29 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 免疫低下に伴う感染症の予防及び治療用栄養剤
US5214035A (en) * 1992-04-16 1993-05-25 Hoechst-Roussel Agri-Vet Company Thixotropic formulations
US5308832A (en) * 1992-07-27 1994-05-03 Abbott Laboratories Nutritional product for persons having a neurological injury
US5318781A (en) * 1993-04-06 1994-06-07 Hoffmann-La Roche Inc. Absorption enhancement of antibiotics
US20010003739A1 (en) 1993-06-24 2001-06-14 Astrazeneca Ab Systemic administration of a therapeutic preparation
US5631219A (en) * 1994-03-08 1997-05-20 Somatogen, Inc. Method of stimulating hematopoiesis with hemoglobin
US5470861A (en) * 1994-08-04 1995-11-28 Hoffmann-La Roche Inc. Method of promoting hair growth
US5549905A (en) * 1994-10-18 1996-08-27 Clintec Nutrition Co. Enternal composition for pediatric patients
IT1275802B1 (it) 1994-11-03 1997-10-17 Hoffmann La Roche Composizione di interferone
GB9516268D0 (en) * 1995-08-08 1995-10-11 Danbiosyst Uk Compositiion for enhanced uptake of polar drugs from the colon
US5733884A (en) * 1995-11-07 1998-03-31 Nestec Ltd. Enteral formulation designed for optimized wound healing
DE19648566A1 (de) * 1995-11-28 1997-06-05 Braun Melsungen Ag Hydrolyseoptimierte Lipidemulsionen und ihre Verwendung
AUPN933396A0 (en) * 1996-04-17 1996-05-09 Pfizer Pty Limited Non-aqueuos oral-drench compositions containing avermectin compounds
US5851534A (en) * 1996-05-03 1998-12-22 Dynagen, Inc. Methods for prevention and/or treatment of neutropenia
JPH10265380A (ja) 1997-03-17 1998-10-06 Bristol Myers Squibb Co 抗ガン剤
US6017531A (en) * 1997-06-02 2000-01-25 W. R. Grace & Co. Hydrophilic composition containing protease produced by Vibrio
AU9221698A (en) 1997-09-04 1999-03-22 Biozone Laboratories, Inc. Oral liposomal delivery system
WO1999025312A1 (en) * 1997-11-19 1999-05-27 Hercules Incorporated Fluidized polymer suspensions of cationic polysaccharides in emollients and use thereof in preparing personal care compositions
ATE246506T1 (de) 1998-03-11 2003-08-15 Grelan Pharmaceutical Co Darmlösliche sprudelnde zusammensetzungen
US6267985B1 (en) * 1999-06-30 2001-07-31 Lipocine Inc. Clear oil-containing pharmaceutical compositions
WO2001022937A1 (en) * 1999-09-27 2001-04-05 Sonus Pharmaceuticals, Inc. Compositions of tocol-soluble therapeutics
US6835750B1 (en) * 2000-05-01 2004-12-28 Accera, Inc. Use of medium chain triglycerides for the treatment and prevention of alzheimer's disease and other diseases resulting from reduced neuronal metabolism II
EP1289530B1 (en) * 2000-06-14 2006-10-04 PORTER, William Leslie Lipids for modulating immune response
KR20030025933A (ko) * 2000-06-20 2003-03-29 엔.브이. 세거스 뉴트리션 사이언시스 항균제로서의 중간 사슬 길이의 지방산
US6967028B2 (en) * 2000-07-31 2005-11-22 Mainelab Prolonged release microspheres for injectable administration
IL142535A0 (en) 2001-04-11 2002-03-10 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions for the treatment of inflammation
SK12772003A3 (sk) 2001-04-18 2004-07-07 Prometic Biosciences Inc. Stredne dlhé mastné kyseliny, glyceridy a analógy ako faktory prežitia a aktivácie neutrofilov
US20040052836A1 (en) 2002-09-13 2004-03-18 Li Luk Chiu Pharmaceutical compositions containing at least one stable liposphere having an improved shelf life
JP5390070B2 (ja) 2003-02-07 2014-01-15 プロメティック、バイオサイエンシーズ、インコーポレーテッド 赤血球形成刺激薬としての中鎖脂肪酸、グリセリド、および類似体
US6725510B1 (en) * 2003-04-25 2004-04-27 Almetta Clyburn Inclining coffin
ES2284029T5 (es) 2003-07-25 2012-02-17 Prometic Biosciences Inc. Preparación de sales metálicas de ácidos grasos de cadena media.
ZA200701781B (en) * 2004-09-03 2008-11-26 Prometic Biosciences Inc Substituted purinyl derivatives with immunomodulator and chemoprotective activity and use alone or with medium-chain length fatty acids or glycerides
US8071580B2 (en) 2004-10-01 2011-12-06 Prometic Biosciences Inc. Medium-chain length fatty alcohols as stimulators of hematopoiesis

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995030413A1 (fr) * 1994-05-10 1995-11-16 The Kitasato Institute Accelerateur de proliferation de cellules souches hematopoietiques
WO1999026640A1 (en) * 1997-11-20 1999-06-03 Bukwang Pharm. Ind. Co., Ltd. Pharmaceutical composition containing extracts of cervus nippon antlers having growth-stimulating activities of hematopoietic stem cells and megakaryocytes

Also Published As

Publication number Publication date
US20100279959A1 (en) 2010-11-04
WO2002083120A3 (en) 2003-05-22
NZ528690A (en) 2005-08-26
PL402948A1 (pl) 2013-05-13
CN1633286A (zh) 2005-06-29
CA2444463A1 (en) 2002-10-24
CA2444463C (en) 2012-03-20
IL195200A0 (en) 2009-08-03
SI1385498T1 (sl) 2008-04-30
DE60223670T2 (de) 2008-03-06
NO20034644L (no) 2003-11-25
WO2002083120A2 (en) 2002-10-24
BR0208984A (pt) 2004-06-29
EP1385498B1 (en) 2007-11-21
DK1900364T3 (da) 2014-01-13
JP2004525957A (ja) 2004-08-26
NO20034644D0 (no) 2003-10-17
AP2003002888A0 (en) 2003-12-31
JP2014231519A (ja) 2014-12-11
EP1900364A2 (en) 2008-03-19
EP1385498A2 (en) 2004-02-04
ZA200307778B (en) 2004-04-21
JP5026655B2 (ja) 2012-09-12
US7745488B2 (en) 2010-06-29
OA12506A (en) 2006-05-29
BG108280A (bg) 2004-09-30
KR20030096323A (ko) 2003-12-24
EA007322B1 (ru) 2006-08-25
CA2763637A1 (en) 2002-10-24
AU2006201163B2 (en) 2006-10-05
DK1385498T3 (da) 2008-03-25
AU2002308456B2 (en) 2005-12-22
PT1385498E (pt) 2007-12-14
ES2295397T3 (es) 2008-04-16
AU2006201163A1 (en) 2006-04-13
PL366435A1 (en) 2005-01-24
JP2010053135A (ja) 2010-03-11
PT1900364E (pt) 2013-12-19
IL195200A (en) 2011-11-30
SK12772003A3 (sk) 2004-07-07
EP1900364B1 (en) 2013-09-25
CZ20032685A3 (cs) 2004-06-16
CA2763637C (en) 2016-08-23
US20040147599A1 (en) 2004-07-29
JP5657879B2 (ja) 2015-01-21
CZ305273B6 (cs) 2015-07-15
PL223348B1 (pl) 2016-10-31
EE200300510A (et) 2004-02-16
AP1740A (en) 2007-05-10
HUP0303817A3 (en) 2009-10-28
TNSN03089A1 (en) 2005-12-23
EA200301131A1 (ru) 2004-04-29
IL158322A (en) 2011-09-27
PL222876B1 (pl) 2016-09-30
BG66418B1 (bg) 2014-03-31
EP1900364A3 (en) 2009-09-23
IL158322A0 (en) 2004-05-12
MXPA03009436A (es) 2004-12-06
US8487001B2 (en) 2013-07-16
ES2439738T3 (es) 2014-01-24
CY1107081T1 (el) 2012-10-24
DE60223670D1 (de) 2008-01-03
HUP0303817A2 (hu) 2004-03-01
NZ541140A (en) 2006-11-30
JP6420089B2 (ja) 2018-11-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO335105B1 (no) Fettsyrer med halvlange kjeder, glycerider og analoger for behandling av sykdom, samt produkt omfattende slike
AU2002308456A1 (en) Medium-chain length fatty acids, glycerides and analogues as neutrophil survival and activation factors
EP1592416B1 (en) Medium-chain length fatty acids, glycerides and analogues as stimulators of erythropoiesis

Legal Events

Date Code Title Description
CHAD Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften)

Owner name: PROMETIC PHARMA SMT LIMITED, GB

MK1K Patent expired