CZ2001331A3 - Pulmonální dodávání aktivních přípravků - Google Patents

Pulmonální dodávání aktivních přípravků Download PDF

Info

Publication number
CZ2001331A3
CZ2001331A3 CZ2001331A CZ2001331A CZ2001331A3 CZ 2001331 A3 CZ2001331 A3 CZ 2001331A3 CZ 2001331 A CZ2001331 A CZ 2001331A CZ 2001331 A CZ2001331 A CZ 2001331A CZ 2001331 A3 CZ2001331 A3 CZ 2001331A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
insulin
alkyl
igf
alkenyl
group
Prior art date
Application number
CZ2001331A
Other languages
English (en)
Inventor
Sam J. Milstein
John E. Smart
Donald J. Sarubbi
Monica Carozza
Elizabeth Flanders
Doris O´Toole
Andrea Leone-Bay
David Gschneidner
Original Assignee
Emisphere Technologies, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Emisphere Technologies, Inc. filed Critical Emisphere Technologies, Inc.
Publication of CZ2001331A3 publication Critical patent/CZ2001331A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/42—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C235/44—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/58—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms, bound in ortho-position to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C235/64—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with carbon atoms of carboxamide groups and singly-bound oxygen atoms, bound in ortho-position to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/727—Heparin; Heparan
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1816—Erythropoietin [EPO]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/27—Growth hormone [GH] (Somatotropin)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/29—Parathyroid hormone (parathormone); Parathyroid hormone-related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/30—Insulin-like growth factors (Somatomedins), e.g. IGF-1, IGF-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Description

Pulmonálni dodávání aktivních přípravků
Oblast techniky
Přítomný vynález se týká pulmonálního dodávání aktivních přípravků. Acylované nebo sulfonované aminokyseliny jsou použity jako nosiče pro usnadnění pulmonálního dodání aktivních přípravků do cílového orgánu.
Dosavadní stav techniky •
Běžné způsoby dodávání aktivních přípravků jsou často významně limitovány přítomností biologických, chemických a fyzikálních bariér. Obvykle jsou tyto bariéry vytvořeny prostředím, přes které k samotnému dodávání dochází, prostředím cílové tkáně dodání nebo cílovou tkání jako takovou. Biologicky nebo chemicky aktivní přípravky jsou na tyto bariéry obzvláště citlivé.
Například při dodávání biologicky nebo chemicky aktivních farmakologických a terapeutických přípravků zvířatům jsou bariéry vytvářeny tělem. Příklady fyzikálních bariér jsou kůže a rozličné orgánové membrány, které musí být před dosažením cílového orgánu překonány. Chemické bariéry zahrnují, avšak nejsou limitovány na, odlišné hodnoty pH, lipidové dvoj vrstvy a enzymatickou degradaci.
é
Pulmonálni dodávání do oběhového systému (systémové cirkulace) by mohlo představovat metodu volby pro mnoho biologicky aktivních přípravků pro dodávání zvířatům, jelikož dodávání přímo do krve je mnohem rychlejší než jiné způsoby dodání. Navíc dodání do plíce jako takové může být výhodné, například při léčení poruch pulmonálního systému. Nicméně pulmonálni dodávání může být nepraktické z hlediska existence fyzikálních bariér, jako jsou lipidové dvojvrstvy a membrány, které jsou relativně impermeabilní pro určité • · ···· biologicky aktivní přípravky, které však musí být překonány před tím, než může přípravek dosáhnout oběhového systému. V jiných případech lze pulmonálního dodávání dosáhnout, avšak ne dostatečně účinně pro praktické účely.
Nyní existuje potřeba jednoduchých a levných systémů pro pulmonální dodávání, jejichž příprava je snadná, a které mohou účinným způsobem dodat do cílové tkáně široké spektrum aktivních přípravků.
Stručný přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 je grafickou ilustrací časových profilů inzulínu v plazmě následujících intratracheální instilaci spreje obsahujícího inzulín jako takový v množství 0,05 mg/kg (0,13 U/kg) do plic (♦) a ve spojení s nosičem B v množství 5 mg/kg ()·
Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka, n = 5.
Obr. 2 je grafickou ilustrací časových profilů glukózy v plazmě následujících intratracheální pulmonální instilaci spreje obsahujícího inzulín jako takový v množství 0,05 mg/kg (0,13 U/kg) (♦) a ve spojení s nosičem B v množství 5 mg/kg ().
A Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka, n — 5.
Obr. 3 je grafickou ilustrací časových profilů w' glukózy v plazmě následujících intratracheální pulmonální instilaci spreje obsahujícího inzulín jako takový v množství 0,05 mg/kg (0,13 U/kg) (♦) a ve spojení s nosičem B v množství 16 mg/kg ().
Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka, n = 3.
Obr. 4 je grafickou ilustrací časových profilů glukózy v plazmě následujících intratracheální pulmonální • · instilaci spreje obsahujícího inzulín jako takový v množství 0,01 mg/kg (0,026 U/kg) (♦) a ve spojeni s nosičem B v množství 16 mg/kg ().
Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka, n = 4.
Obr. 5 je grafickou ilustrací průměrné koncentrace inzulínu v plasmě v průběhu časového intervalu následujícího intratracheální pulmonální instilaci spreje obsahujícího inzulín jako takový v množství 0,005 mg/kg (0,013 U/kg)(*), 0,05 (0,13 U/kg) (♦), 0,1 mg/kg (0,26 U/kg) (A), 0,5 mg/kg (1,3 U/kg) () a 1 mg/kg (2,6 U/kg) (·) vepřového inzulínu krysám.
Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka.
Obr. 6 je grafickou ilustrací časových profilů glukózy v plazmě následujících intratracheální pulmonální instilaci spreje obsahujícího vepřový inzulín v množtví 0,01 mg/kg (0,026 U/kg) (*) , 0,05 (0,13 U/kg) (x) , 0,1 mg/kg (0,26 U/kg) (♦), 0,5 mg/kg (1,3 U/kg) () a 1 mg/kg (2,6 U/kg) (A) vepřového (vepřového) inzulínu krysám. Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka.
Obr. 7 je grafickou ilustrací časových profilů koncentrace inzulínu v plasmě v průběhu časového intervalu po podání 0,05 mg/kg inzulínu s a bez nosiče B v množství 16 mg/kg.
Obr. 8 je grafickou ilustrací koncentrace inzulínu v plasmě v průběhu časového intervalu po podání měnících se dávek inzulínu.
Obr. 9 je grafickou ilustrací koncentrace inzulínu v plasmě v čase po podání 0,05 mg/kg inzulínu s a bez nosiče B v množství 5 mg/kg.
Obr. 10 je grafickou ilustrací koncentrace inzulínu v plasmě v čase po podání 0,01 mg/kg inzulínu s a bez nosiče B v množství 16 mg/kg.
Obr. 11 je grafickou ilustrací procentuální změny koncentrace glukózy v plasmě po pulmonálním podání 0,1 mg/kg inzulínu společně se sodnou solí nosiče B v množství 7,5 mg/kg (|), inzulínu jako takového v množství 0,1 mg/kg (·) a samotné sodné soli nosiče B v množství
7,5 mg/kg (A).
Obr. 12 je grafickou ilustrací procentuální změny koncentrace glukózy v plasmě po pulmonálním podání
0,5 mg/kg inzulínu společně se 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B (), inzulínu jako takového v množství 0,5 mg/kg (·) a samotné sodné soli nosiče B v množství 7,5 mg/kg (Á) .
Obr. 13 je grafickou ilustrací sérových hladin inzulínu v čase po podání 0,03 mg/kg inzulínu společně s nosičem B v množství 16 mg/kg (·) , nosičem C (Á) a nosičem D (▼) , a po podání inzulínu jako takového () .
Chybové úsečky jsou v rozsahu ± směrodatná odchylka.
Podstata vynálezu
Přítomný vynález poskytuje způsoby pulmonálního podávání aktivního přípravku zvířeti, které tento přípravek potřebuje. Tento způsob zahrnuje podání prostředku, který obsahuje
a)aktivní přípravek (*· b) i) acylovanou aminokyselinu, ií) sulfonovanou aminokyselinu nebo iii) kombinaci i) a ií) pulmonální cestou. Podávání prostředků podle přítomného vynálezu poskytuje zdokonalené pulmonální dodání a lepší biologickou dostupnost aktivního přípravku, než se docílí podáním aktivního přípravku jako takového. Výsledkem je možnost podání menších množství aktivního přípravku pro dosažení žádaného výsledku, a to pokud je tento přípravek obsažen v prostředku podle přítomného vynálezu, než pokud se podá jako takový.
Podrobný popis vynálezu
Prostředky použitelné v přítomném vynálezu obsahuji aktivní přípravek a nosič. Tyto prostředky mohou být použity pro dodávání různých aktivních přípravků přes různé biologické, chemické a fyzikální bariéry, a jsou obzvláště vhodné pro dodávání aktivních přípravků, které jsou předmětem degradace prostředím. Tyto způsoby podle přítomného vynálezu jsou obzvláště vhodné pro dodávání biologicky, farmakologicky nebo chemicky aktivních přípravků jakémukoliv (zvířeti) subjektu, včetně, avšak ne pouze, ptákům, například kuřatům, a savcům jako kravám, prasatům, psům, kočkám, primátům a zejména člověku.
Pulmonálni dodávání nosiče s aktivním přípravkem, například inzulínem, jak je popsáno v tomto spisu, vede k lepší biologické dostupnosti aktivního přípravku, v porovnání s podáním aktivního přípravku jako takového.
Aktivní přípravky
Aktivní přípravky vhodné pro použití v přítomném vynálezu zahrnují biologicky nebo chemicky aktivní přípravky.
Biologicky nebo chemicky aktivní přípravky zahrnují, avšak nejsou limitovány na, pesticidy, farmakologické přípravky a terapeutické přípravky. Biologicky nebo chemicky aktivní přípravky pro použití v přítomném vynálezu • φ φ · φφφφ například zahrnují, ale nejsou limitovány na, proteiny;
polypeptidy; peptidy; hormony a obzvláště hormony, samy o sobě neprochází plicními alveoly, nebo projde pouze malé procento podané dávky, a/nebo jsou susceptibilní k chemickému štěpení kyselinami a enzymy v plicích;
polysacharidy a obzvláště směsi mukopolysacharidů;
uhlohydráty; lipidy; jiné organické sloučeniny nebo jejich jakékoliv kombinace.
Další příklady zahrnují, ale nejsou limitovány na, sloučeniny, včetně jejich syntetických, přírodních a rekombinantních zdrojů, náležící do skupiny sestávající z růstových hormonů, včetně lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantních lidských růstových hormonů (rhGH), hovězích růstových hormonů a vepřových růstových hormonů; uvolňujících faktorů růstových hormonů; interferonů včetně α-interferonu, β-interferonu a γ-interferonu; interleukinu-1; interleukinu-2; inzulínu včetně jeho vepřové, hovězí a humánní rekombinanty, popřípadě obsahující opačně nabité ionty, jako ionty sodné, zinečnaté, vápenaté a amonné; inzulínu podobnému růstového faktoru (IGF), včetně IGF-1; heparinu, včetně nefrakcionovaného heparinu, heparinoidů, dermatanů, chondroitinů, heparinu s nízkou molekulární hmotností, heparinu s velmi nízkou molekulární hmotností, a heparinu s ultra-nízkou molekulární hmotností; kalcitoninu včetně lososího kalcitoninu, úhořího kalcitoninu a humánního kalcitoninu; erythropoetinu; atriálního natriuretického faktoru; antigenů; monoklonálních protilátek; somatostatinu; inhibitorů proteas; uvolňujících faktorů adrenokortikotropního a gonadotropního hormonu; oxytocinu; uvolňujícího faktor luteinizačního hormonu; folikuly stimulujícího hormonu; glukocerebrosidázy; trombopoetina; filgrastimu; prostaglandinů; cyklosporinu; vasopresinu; kromoglykatu sodného nebo disodného; vankomycinu;
desferrioxaminu (DFO); parathormonu (PTH) včetně fragmentů ··
PTH; antimikrobních přípravků včetně antimykotických přípravků; analog, fragmentů, mimetik a polyethylenglykolem (PEG) modifikovaných derivátů těchto sloučenin; a jejich jakékoliv kombinace.
Nosiče
Bylo nalezeno, že acylované a sulfonované aminokyseliny mohou fungovat jako nosiče pro pulmonálni dodávání biologicky nebo chemicky aktivních látek. Tyto nosičové sloučeniny nebo polyaminokyseliny a peptidy mohou být použity k dodávání aktivních přípravků včetně, avšak bez limitace na, biologicky nebo chemicky aktivních přípravků, například farmakologických nebo terapeutických přípravků.
Aminokyselina je jakákoliv karboxylová kyselina mající alespoň jednu volnou aminoskupinu a patří sem přírodně se vyskytující a syntetické aminokyseliny. Polyaminokyseliny jsou buď peptidy nebo dvě či více aminokyselin spojených vazbou vytvořenou jinými skupinami, které mohou být navzájem propojeny, například ester, anhydrid nebo anhydridové propojení. Peptidy jsou dvě či více aminokyselin spojených peptidovou vazbou. Peptidy se mohou lišit v délce od dipeptidů tvořených dvěma aminokyselinami k polypeptidům s několika sty aminokyselin. Viz Chambers Biological Dictionary, vyd. Peter Μ. B. Walker, Cambridge, England: Chambers Cambridge, 215 (1989). Speciální zmínka je zde učiněna o di-peptidech, tripeptidech, tetrapeptidech a pentapeptidech.
Aminokyseliny mohou být použity pro přípravu nosičů vhodných pro použití v přítomném vynálezu. Aminokyselina je jakákoliv karboxylová kyselina obsahující alespoň jednu volnou aminoskupinu a patří sem přírodně se vyskytující a syntetické aminokyseliny. Mnoho aminokyselin a esterů • · aminokyselin jsou snadno dostupné od různých výrobců, jako jsou například Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wis., USA); Sigma Chemical Co. (St. Louis Mo.a, USA) a Fluka Chemical Corp. (Ronkonkoma, New York, USA). Peptidy mohou být homonebo hetero-peptidy a mohou zahrnovat přírodní aminokyseliny, syntetické aminokyseliny nebo jejich jakoukoliv kombinaci.
Modifikované aminokyseliny, polyaminokyseliny nebo peptidy jsou buď acylované nebo sulfonované a zahrnují amidy a sulfonamidy aminokyselin.
Speciální poznámka je věnována acylovaným nebo sulfonovaným aminokyselinám obecného vzorce o
R1—y—n~4r3—c)~oh
R2 nosič A kde
R1 je alkylová skupina s 1 až 7 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina s 3 až 10 atomy uhlíku, cykloalkenylová skupina, arylová skupina, thienylová skupina, fenylová skupina, naftylová skupina, pyrroloskupina nebo pyridylová skupina;
R1 je popřípadě substituována jednou nebo více alkylovými skupinami s 1 až 7 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 7 atomy uhlíku, alkinylovou skupinou se 2 až 7 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinou se 6 až 10 atomy uhlíku, fenylovou skupinou, fenoxyskupinou, atomem fluoru, chloru, bromu, hydroxyskupinou, sulfonylovou skupinou, sulfinylovou skupinou, aminoskupinou, -SH, -PO3H, oxazolovou skupinou, isoxazolovou skupinou, alkoxyskupinou obecného vzorce OR6, -COOR7, -N(R5)2, -N+(R5)2, -N+(R5)3X, nebo jakoukoliv kombinaci výše uvedených, nebo jejich jakoukoliv či kombinaci
Y je || nebo S02 ;
X je atom halogenu, hydroxid, sulfát, tetrafluorboritan nebo fosfát;
R2 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo - (CH2) n-COOH, kde n je 1 až 10;
R3 je alkylová skupina s 1 až 24 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, alkinová skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina se 3 až 10 atomy uhlíku, cykloalkenylová skupina se 3 až 10 atomy uhlíku, fenylová skupina, naftylová skupina, alkylfenylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylfenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, alkylnaftylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylnaftylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, fenylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, naftylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, naftylalkenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části;
R3 může být popřípadě substituováno alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, -SH, atomem halogenu, -NH2, • · • 9 • 999· i ···
99 99
9· • 9··
R4
R5
R6
R7 až cykloalkylovou skupinou se cykloalkenylovou skupinou heterocyklickou skupinou se 3 až 10 atomy kde heteroatom je jeden či více z atomu kyslíku a síry či jejich jakákoliv arylovou skupinou, alkarylovou skupinou s aralkylovou skupinou s 1 až 10 výše se 3 až atomy atomy
-co2r4, uhlíku, uhlíku, v kruhu, dusíku, kombinace, až 10 atomy uhlíku, atomy uhlíku, nebo jakoukoliv kombinací uvedených;
je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 uhlíku;
atomy atomy je atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku;
alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina nebo cykloalkylová skupina; a je atom uhlíku, arylová vodíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy alkenylová skupina, alkinylová skupina, skupina nebo cykloalkylová skupina.
Zvláštní poznámka je také učiněna o acylovaných nebo sulfonovaných aminokyselinách mající obecný vzorec (nosič A') kde
Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná fenylová nebo naftylová skupina,
Ar je s výhodou substituovaná či nesubstituovaná 2-OH-fenylovou skupinou;
·♦ »
nebo -S02-;
R8 má obecný vzorec o .
—N(R10)-R9—C-R9 je alkylová skupina s 1 až 24 atomy uhlíku, alkenylové skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, fenylová skupina, naftylová skupina, alkylfenylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylfenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, alkylnaftylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylnaftylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, fenylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkenylová skupina 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, naftylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části a naftylalkenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části;
R9 může být popřípadě substituována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, -SH, CO2R11, cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou alkylovou skupinou, alkarylovou skupinou, heteroarylovou skupinou, heteroalkarylovou skupinou nebo jakoukoliv kombinací výše uvedených;
R9 může být popřípadě přerušena atomem kyslíku, dusíku, síry nebo jakoukoliv jejich kombinací;
R10
R11 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku; a je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku.
Zvláštní poznámka je dále učiněna o následujících sloučeninách, jejich solích včetně, avšak bez omezení na, jejich sodných solí
Nosič D
Některé výhodné dodávací přípravky zahrnují, avšak nejsou limitovány na přípravky, které jsou popsány v U.S.
• · patentech č. 4 925 673, 5 451 410, 5 541 155, 5 629 020,
643 957, 5 650 386, 5 709 861, 5 714 167, 5 766 633,
773 647, 5 792 451 a 5 863 944 a PCT publikacích
č. WO 96/12 474, WO 97/10 197, WO 97/36 480 a WO 98/50 341.
Acylované aminokyseliny mohou být připraveny reakcí jediné aminokyseliny, směsí dvou a více aminokyselin nebo esterů aminokyselin s aminovým modifikujícím činidlem, které reaguje s volnými aminoskupinami přítomnými v aminokyselinách, za vzniku amidů.
Vhodné, avšak ne limitující příklady acylačních činidel vhodných pro přípravu acylovaných aminokyselin zahrnuji kyselá chloridová acylačni činidla obecného vzorce
kde je vhodná skupina modifikované aminokyseliny, která se připravuje, například, avšak bez limitace, alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina nebo aromatická skupina, a obzvláště methylová skupina, ethylová skupina, cyklohexylová skupina, cyklofenyová skupina, fenylová skupina nebo benzylová skupina; a je odstupující skupina.
Typické příklady odstupujících skupin zahrnují, avšak bez limitace na, atomy halogenů, jako jsou atom chloru, bromu a jodu.
Příklady acylačních přípravků zahrnují, avšak bez limitace, acylované halogenidy včetně, ale ne pouze, acetylchlorid, propylchlorid, cyklohexanoylchlorid, cyklopentanoylchlorid a cykloheptanoylchlorid, benzoylchlorid, hippurylchlorid a sloučeniny těmto podobné; a anhydridy jako acetanhydrid, propylanhydrid, anhydrid kyseliny cyklohexanové, anhydrid kyseliny benzoové, anhydrid kyseliny hippurové a sloučeniny těmto podobné. Výhodná acylačni činidla zahrnuji benzoylchlorid, hippurylchlorid, acetylchlorid, cyklohexanoylchlorid, cyklopentanoylchlorid a cykloheptanoylchlorid.
Také aminoskupiny mohou být modifikovány reakcí karboxylové kyseliny s kondenzačními činidly jako jsou deriváty karbodiimidu a aminokyselin, obzvláště hydrofilní aminokyseliny, jako jsou fenylalanin, tryptofan a tyrosin. Další příklady zahrnují dicyklohexylkarbodiimid a sloučeniny těmto podobné.
Pokud je aminokyselina multifunkční, tedy má více než jednu ze skupin -OH, -NH nebo -SH, potom tato aminokyselina může být popřípadě acylována na jedné či více funkčních skupinách, čímž vznikne například esterová, amidová nebo thioesterová vazba.
Například při přípravě mnoha acylovaných aminokyselin se aminokyseliny rozpustí ve vodném alkalickém roztoku hydroxidu kovu, například hydroxidu sodného a hydroxidu draselného, a přidá se acylačni činidlo. Reakční čas se může pohybovat od asi 1 do přibližně 4 hodin, s výhodou bude přibližně 2 až přibližně 2,5 hodin. Teplota směsi se uchovává při teplotě obecně se pohybující mezi zhruba 5 °C až přibližně 70 °C, s výhodou mezi asi 10 °C a přibližně 50 °C. Množství použité alkalické látky na ekvivalent NH- skupin aminokyselin se obvykle pohybuje mezi asi 1,25 mol do přibližně 3 mol, a je s výhodou mezi přibližně 1,5 mol do přibližně 2,25 mol na ekvivalent NH2. pH reakčního roztoku se obecně pohybuje mezi přibližně δ až • · zhruba 13 a obvykle je zhruba pH = 10 až asi pH = 12.
Množství použitého amino-modifikujiciho činidla ve vztahu k množství aminokyselin je založeno na počtu mol celkového volného NH v aminokyselinách. Obecně se použije přibližně
0,5 až přibližně 2,5 molárních ekvivalentů amino modifikujiciho činidla, výhodně přibližně 0,75 až přibližně
1,25 ekvivalentů na 1 molární ekvivalent celkových NH skupin v aminokyselinách.
Reakce, při které vznikají modifikované aminokyseliny, je obvykle přerušena upravením pH směsi vhodnou kyselinou, například koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, až na hodnoty pH v rozmezí přibližně 2 až
3. Směs se během stání při teplotě místnosti rozdělí, čímž se vytvoří transparentní (čirá) horní vrstva a bílá či nezcela bílá sraženina. Horní vrstva se odstraní a modifikované aminokyseliny se seberou filtraci nebo dekantováním. Surové modifikované aminokyseliny se potom smísí s vodou. Nerozpustné látky se odstraní filtrací a filtrát se vysuší ve vakuu. Výtěžek modifikovaných aminokyselin se obvykle pohybuje od přibližně 30 % do zhruba 60 %, obvykle asi 45 %. Přítomný vynález také zahrnuje aminokyseliny, které byly modifikovány mnohočetnou acylací, například diacylací, triacylací atd.
Pokud jsou výchozími látkami estery nebo amidy aminokyselin, rozpustí se tyto výchozí sloučeniny ve vhodném organickém rozpouštědle, například dimethylformamidu nebo pyridinu, a nechají se reagovat s amino-modifikujícím činidlem při teplotě pohybující se v rozmezí mezi přibližně 5 °C a asi 70 °C, s výhodou je teplota přibližně 25 °C, po časový úsek přibližně 7 až přibližně 24 hodin. Množství použitých amino-modifikujícich činidel v relaci k esterům aminokyselin je shodná, jak je výše popsáno pro aminokyseliny.
Následně se reakční rozpouštědlo odpaří pod negativním tlakem, a popřípadě lze odstranit esterovou či amidovou funkční skupinu, a to hydrolýzou modifikovaného esteru aminokyseliny s vhodným alkalickým roztokem, například IN hydroxidem sodným, při teplotě pohybující se v rozmezí přibližně 50 °C až 80 °C, s výhodou přibližně 70 °C po dobu dostatečně dlouhou k tomu, aby proběhla hydrolýza esterové skupiny a vznikla modifikovaná aminokyselina obsahující volnou karboxylovou skupinu. Hydrolyzační směs se potom ochladí na teplotu místnosti a okyselí se, například vodným 25% roztokem kyseliny chlorovodíkové, na hodnotu. pH pohybující se mezi hodnotami přibližně 2 až přibližně 2,5. Modifikovaná aminokyselina se vysráží z roztoku a je obnovena běžnými způsoby, například filtrací nebo dekantováním.
Modifikované aminokyseliny mohou být čištěny kyselou precipitací, rekrystalisací nebo frakcionováním na solidních sloupcích. Frakcionace může být provedena na vhodných pevných sloupcových podpěrách, například ze silikagelu nebo aluminy, za použití směsi rozpouštědel, jako je směs kyseliny octové, butanolu a vody jako mobilní fáze; dále lze frakcionaci provést na sloupcových podpěrách pro reversní fázi za použití směsi kyseliny trifluoroctové a acetonitrilu jako mobilní fáze, a chromatografií s výměnou iontu za použití vody jako mobilní fáze. Modifikované aminokyseliny mohou být také čištěny extrakcí nižším alkoholem, například methanolem, butanolem nebo isopropanolem, za účelem odstranění nečistot, jako například anorganických solí.
Modifikované aminokyseliny jsou obecně rozpustné v alkalickém vodném roztoku (pH > 9,0); částečně rozpustné v ethanolu, n-butanolu a směsi toluenu a ethanolu v poměru 1 :1; tyto roztoky jsou nerozpustné v neutrální vodě. Soli alkalických kovů, například soli sodné, modifikovaných _ * β ♦ · · ··*.··· ·. ::. : : ·· • · ϊ ·· ··· aminokyselin jsou obecně rozpustné ve vodě při hodnotách pH přibližně 6 až 8.
V případě polyaminokyselin nebo peptidu může být jedna či více z aminokyselin modifikováno - acylováno nebo sulfonováno. Polyaminokyseliny a peptidy mohou obsahovat jednu nebo více acylovaných aminokyselin. Ačkoliv lineární modifikované polyaminokyseliny a peptidy budou obecně obsahovat pouze jednu acylovanou aminokyselinu, konfigurace ostatních polyaminokyselin a peptidu mohou zahrnovat více než jednu acylovanou aminokyselinu. Polyaminokyseliny a peptidy mohou být polymerovány s acylovanými aminokyselinami (aminokyselinou) nebo mohou být acylovány po polymeraci.
Sulfonované aminokyseliny, polyaminokyseliny a peptidy jsou modifikovány sulfonací alespoň jedné volné aminoskupiny se sulfonačním činidlem, které reaguje alespoň s jednou z přítomných volných aminoskupin.
Vhodné příklady sulfonačních činidel vhodných pro přípravu sulfonovaných aminokyselin zahrnují, avšak nejsou limitovány na, sulfonační činidla obecného vzorce
R13-SO2-X, kde
R13 je příslušná skupina připravované modifikované aminokyseliny, jako je, avšak bez limitace, alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina nebo aromatické skupiny, a
X je odstupující skupina, jak je popsáno výše.
Jedním příkladem sulfonačního činidla je benzensulfony1chlorid.
: : *..i . ϊ J ί·ί· · · · · • · · *.·β * *«····· • · · · · ·
Modifikované polyaminokyseliny a peptidy mohou obsahovat jednu či více sulfonovaných aminokyselin a/nebo acylovaných aminokyselin. Ačkoliv používané lineární modifikované polyaminokyseliny a peptidy obvykle obsahují pouze jednu sulfonovanou aminokyselinu, mohou jiné konfigurace polyaminokyselin a peptidů obsahovat více než jednu sulfonovanou aminokyselinu. Polyaminokyseliny a peptidy mohou být polymerovány se sulfonovou aminokyselinou/aminokyselinami nebo mohou být sulfonovány až po polymeraci.
Dodávací systémy
Prostředky zmiňované v tomto textu mohou obsahovat jeden či více aktivních přípravků.
V jednom provedení přítomného vynálezu, mohou být výše uvedené sloučeniny nebo jejich soli či polyaminokyseliny nebo peptidy obsahující alespoň jednu z těchto sloučenin či jejich solí, použity přímo jako dodávací nosič, a to jednoduše přímým smísením jedné či více sloučenin nebo soli, polyaminokyseliny nebo peptidů s aktivním přípravkem bezprostředně před podáním.
Směsi určené k podávání se připraví smísením vodného roztoku nosiče s vodným roztokem aktivního přípravku těsně před podáním. Alternativně mohou být nosič a biologicky nebo chemicky aktivní přípravek smíseny v průběhu procesu přípravy. Tyto roztoky mohou popřípadě obsahovat přídatné přípravky, jako například fosforečnanové pufrovací soli, kyselinu citrónovou, kyselinu octovou, želatinu a arabskou gumu.
Do roztoku nosiče mohou být zahrnuty stabilizační přípravky. V případě některých léčiv může přítomnost takovýchto přídatných přípravků zlepšovat stabilitu a dispergovatelnost přípravku v roztoku.
Stabilizační přídatné přípravky mohou být použity v koncentraci pohybující se od přibližně 0,1 do přibližně % (hmot./objem), s výhodou přibližně 0,5 % (hmot./objem). Vhodné, avšak ne limitující, příklady stabilizačních přípravků zahrnují arabskou gumu, želatinu, methylcelulózu, polyethylenglykol, karboxylové kyseliny a jejich soli a polylysin. Výhodné stabilizační přípravky jsou arabská guma, želatina a methylcelulóza.
Množství účinného přípravku je takové množství, které je dostatečně účinné pro splněni účelu konkrétního aktivního přípravku pro cílovou indikaci. Množství aktivního přípravku v prostředcích je obvykle takové množství, které je farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky účinné. Nicméně toto množství může být menší než je množství farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky účinné, a to v případě, pokud je prostředek používán ve formě jednotkové dávky, jako je prášek nebo kapalina, protože forma jednotkové dávky může obsahovat více nosičů nebo biologicky či chemicky aktivních prostředků, nebo může obsahovat dělené farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky účinné množství. Celkové účinné množství může být podáno v kumulativních jednotkách obsahujících celkově farmakologicky, biologicky, terapeuticky nebo chemicky účinná množství biologicky či farmakologicky aktivního přípravku.
Celkové množství aktivního přípravku a obzvláště biologicky či chemicky aktivního přípravku, který má být použit, může být stanoveno odborníkem v oboru. Nicméně bylo překvapivě nalezeno, že v případě některých biologicky nebo chemicky aktivních přípravků, poskytuje použití zde popisovaných nosičů v systémech pulmonálního dodávání
extrémně účinné dodání. Z toho vyplývá, že subjektu je možné podat nižší množství biologicky nebo chemicky aktivních přípravků, než ta, která jsou uvedena v dříve popsaných formách jednotkové dávky nebo dodávacích systémech, zatímco bude nadále dosaženo stejných hladin v krvi a stejných terapeutických efektů.
Množství nosiče v prostředcích podle přítomného vynálezu je takové množství, které zajisti efektivní dodání a lze ho stanovit pro každý individuální nosič nebo biologicky nebo chemicky aktivní přípravek, a to způsoby, které jsou odborníkovi v oboru známé. Efektivní množství aktivního přípravku a nosiče v prostředku se může značně lišit v rámci poměrně velkého rozmezí, a je závislé na věku, pohlaví, citlivosti, anamnéze a podobných údajích . každého jednotlivce. V úvahu by měla být zavzata povaha aktivního přípravku a nosiče, specifická aktivita příslušného aktivního přípravku (jednotky bioaktivity na hmotu) a rychlost jeho absorpce v plicích, jakože všechny tyto parametry přispívají stanovení terapeuticky efektivní dávky.
Po podání dochází k rychlé absorpci aktivního přípravku, který je přítomen v prostředku nebo ve formě jednotkové dávky, do cirkulace. Biologická dostupnost aktivního přípravku se snadno stanoví měřením známé farmakologické aktivity v krvi, například prostřednictvím prodloužení koagulačního času krve zapříčiněného heparinem, snížení hladin cirkulujícího vápníku kalcitoninem nebo změny hladiny krevní glukózy způsobené inzulínem. Alternativně mohou být hladiny cirkulujícího aktivního přípravku jako takového měřeny přímo.
Alternativně v případech, kde je cílovou tkání plíce, je dodání ovlivněno automaticky. Biologická dostupnost aktivního přípravku se stanoví měřením známého • · • · · · ··· farmakodynamického parametru aktivity.
Formy jednotkové dávky mohou také obsahovat jakékoliv excipienty, ředidla, látky podporující desintegraci (rozpadání), zvlhčujíci přípravky, plastikátory, barvidla a dávkovači vehikula včetně, avšak bez limitace na, vody, 1,2-propandiolu, ethanolu, olivového oleje nebo jakékoliv jejich kombinace.
Dodávací systémy mohou také obsahovat jeden či více inhibitorů enzymů. Tyto inhibitory enzymů zahrnují, avšak nejsou limitovány na, sloučeniny jako aktin, epiaktinonin a jejich deriváty. Deriváty těchto sloučenin jsou popsány v US patentu č. 5 206 384, a poznatky uvedené v tomto patentu jsou v tomto spisu zahrnuty do odkazů. Další inhibitory enzymů zahrnují, avšak nejsou limitovány na, aprotinin (Trasylol) a Bowman-Birkův inhibitor.
Popisovaný systém dodávání je obzvláště výhodný pro dodávání chemicky nebo biologicky aktivních přípravků, které by jinak byly rozloženy, nebo by se staly méně účinné, způsoby uvedenými dříve, ještě před tím, než by aktivní přípravek dosáhl své cílové zóny (tedy oblast, kde má dojít k uvolnění aktivního přípravku z dodávacího systému) a uvnitř tělesného prostředí zvířete (objektu), kterému jsou podávány. Přítomný vynález je obzvláště vhodný pro pulmonální podávání aktivních přípravků, například inhalátorem, zejména těch, které nelze běžně dodat touto cestou, nebo takových, kde je lepší (zdokonalené) dodávání žádoucí. Zdokonalené dodávání může být sledováno různými způsoby, včetně, avšak bez limitace na, zaznamenávání celkového vzestupu množství aktivního přípravku dodaného v čase, celkového vzestupu biologické odpovědi v čase a zvýšení dodávání nebo odpovědi v konkrétním čase, jako je například rychlejší dodávání aktivního přípravku nebo rychlejší odpověď.
Následující příklady ilustrují přítomný vynález bez limitace. Všechny části jsou udávány v částech hmotnostních, pokud není uvedeno jinak.
Příklad 1
Příprava nosičů
Příprava kyseliny 2-(4-(N-salicyloyl)aminofenyl)propionové (nosič B)
Suspenze 58,6 g (0,355 mol) kyseliny 2-(4-aminofenyl)propionové a 500 ml methylenchloridu se zpracuje s 90,11 ml (77,13 g, 0-710 mol) trimethylsilylchloridu a zahřívá se na teplotu zpětného toku po dobu 120 minut. Reakční směs se ochladí na teplotu 0 °C a zpracuje se s 184,44 ml (107,77 g, 1,065 mol) triethylaminu. Po míchání po dobu 5 minut se tato směs zpracuje s roztokem 70,45 g (0,355 mol) O-acetylsalicyloylchloridu a 150 ml methylenchloridu. Reakční směs se zahřeje na teplotu 25 °C a míchá se po dobu 64 hodin. Těkavé látky se odpaří ve vakuu. Odparek se míchá v 2N vodném hydroxidu sodném po dobu 1 hodiny a okyselí se 2M vodnou kyselinou sírovou. Pevná látka se nechá dvakrát rekrystalizovat ze směsi ethanolu a vody, čímž se dostane pevná látka nazlátlé barvy. Izolací filtrací se dostane 53,05 g (výtěžek 52%) kyseliny 2-(4-(N-salicyloyl)aminofenyl)propionové.
Vlastnosti:
Rozpustnost: 200 mg/ml: 200 mg + 350 μΐ 2N NaOH + 650 μΐ H2O - pH 7,67.
Analýza:
···
Spočítáno: C 67,36, H 5,3, N 4,91.
Nalezeno: C 67,05, H 5,25, N 4,72.
Příprava 2-(4-(N-salicyloyl)aminofenyl)propionatu sodného (sodná sůl nosiče B)
Roztok 53,05 g (0,186 mol) kyseliny 2-(4-(N-salicyloyl) aminofenyl) propionové a 300 ml ethanolu se zpracuje s 7,59 g (0,190 mol) NaOH rozpuštěného ve 22 ml vody. Reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě 25 °C a po dobu 30 minut při teplotě 0 °C. Výsledná pevná látka světle žluté barvy se izoluje filtrací, aby se dostalo 52,61 g 2-(4-(N-salicyloyl)aminofenyl)propionatu sodného
Vlastnosti:
Rozpustnost: 200 mg/ml čirého roztoku, pH = 6,85. Analýza:
Spočítáno: C 60,45, H 5,45, N 3,92, Na 6,43. Nalezeno: C 60,84, H 5,87, N 3,85, Na 6,43. Teplota, tání: 236 až 238 °C.
Příprava sodné soli nosiče C
Baňka s kulatým dnem o objemu 2 litry vybavená magnetickým míchadlem a kondenzorem pro zpětný tok se naplní suspenzí 15,0 g (0,084 mol, 1,0 ekvivalentu) kyseliny 3-(4-aminofenyl)propionové ve 250 ml dichlormethanu. Přidá se 18,19 g (0,856 mol, 2,0 ekvivalentu) chlortrimethylsilanu v jedné porci a směs se zahřívá na teplotu zpětného toku pod argonem po dobu 1,5 hodiny. Reakční směs se nechá ochladit na teplotu místnosti a umístí se do ledové lázně (vnitřní teplota je nižší než 10 °C). Kondenzor zpětného toku se vymění za přidávací nálevku obsahující 25,41 g (0,251 mol, 3,0 ekvivalentu) triethylaminu. Triethylamin se přidává po kapkách po dobu 15 minut a v průběhu přidávání se vytvoří pevná látka žluté • ··· • ·
barvy. Nálevka se nahradí další přidávací nálevkou obsahující roztok 18,31 g (0,091 mol, 1,09 ekvivalentu) 2,3-dimethoxybenzoylchloridu ve 100 ml dichlormethanu. Roztok se přidává po kapkách v průběhu 30 minut. Reakční směs se míchá v ledové lázni po dobu dalších 30 minut a pak při teplotě místnosti ?po dobu 3 hodin. Dichlormethan se odpaří ve vakuu, čímž se dostane olej hnědé barvy. Olej hnědé barvy se ochladí v ledové lázni a přidá se 250 ml ledově chladného roztoku nasyceného hydrogenuhličitanu sodného. Ledová lázeň se odstraní a reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny, aby se dostal čirý roztok hnědé barvy. Tento roztok se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou a skladuje se při teplotě zhruba 5 °C po dobu 1 hodiny. Směs se extrahuje třikrát 100 ml dichlormethanu, vysuší síranem sodným, soli se odfiltrují a dichlormethan se odpaří ve vakuu. Výsledná pevná látka rekrystaluje z 50% směsi ethylacetátu a vody (objem/objem) , čímž se dostane kyselina - nosič C jako jehličky nezcela bílé barvy, v množství 25,92 g (90%).
Analýza pro C19H21NO5 Spočítáno: C 66,46, H 6,16, N 4,08.
Nalezeno: C 66,14, H 6,15, N 3,98. Teplota tání = 99 až 102 °C.
gramů kyseliny nosiče C se rozpustí v 75 ml ethanolu, přičemž se směs zahřívá. K tomuto roztoku se přidá roztok 8,5 M hydroxidu sodného (1,02 molárních ekvivalentů, 1,426 gramů v 4,5 ml vody). Směs se míchá po dobu 15 minut. Přibližně tři čtvrtiny ethanolu se odpaří ve vakuu a k výslednému oleji se přidá 100 ml n-heptanu, čímž se vytvoří sraženina. Pevné látky se vysuší ve vakuu při teplotě 50 °C.
Analýza pro Ci9H20NO5Na · H2O:
Spočítáno: C 62,25, H 5,54, N 3,82, Na 6,27.
• ·
Nalezeno: C 62,37, H 5,77, N 3,80, Na 5,75.
Příprava kyseliny N-(4-methylsalicyloyl)-8-aminokaprylové (nosič D)
a)Příprava oligo-(4-methylsalicylatu) ml (34,5 g, 0,338 mol, 1,03 ekvivalentu) acetanhydridu, 50 g (0,329 mol, 1,00 ekvivalentu) kyseliny 4-methylsalicylové a 100 ml xylenů se vloží do baňky se čtyřmi hrdly o objemu 1 litru vybavené magnetickým míchadlem, teploměrem a kondenzorem. Baňka se umístí do písečné lázně a zahájí se míchání zakalené bílé směsi. Reakční směs se při teplotě asi 90 °C vyčistí na žlutý roztok. Většina těkavých organických látek (xyleny a kyselina octová) se v průběhu 3 hodin při teplotě 135 až 146 °C oddestiluje do Dean-Starkova lapače. Destilace pokračuje po dobu další hodiny (celkově se vydestiluje 110 ml), v průběhu které se teplota v destilačním přístroji pomalu zvedne na 204 °C a tok destilátu zpomalí na tenký pramínek. Zbytek se ještě horký vlije do hliníkové nádoby (misky). Během ochlazování se formuje pevná křehká sklovitá látka žluté barvy. Tato pevná látka se rozemele na jemný prášek. Tímto získaný oligo-(4-methylsalicylat) se použije bez dalšího čištění.
b)Příprava kyseliny N-(4-methylsalicyloyl)-8-aminokaprylové ml (43,2 g, 0,313 mol, 0,95 ekvivalentu) 7M roztoku uhličitanu draselného, 41,8 g (262 mol, 798 ekvivalentu) kyseliny 8-aminokaprylové a 20 ml vody se vloží do baňky s kulatý dnem o objemu 1 litru vybavené magnetickým míchadlem, kondenzorem a přidávací nálevkou. Bílá zakalená směs se zpracuje s roztokem 44,7 g (0,329 mol, 1,0 ekvivalentu) oligo-(4-methylsalicylatu) a 250 ml dioxanu, které se přidají v průběhu 30 minut. Reakční směs se zahřívá na teplotu 90 °C po dobu 3 hodin, po uplynutí této doby je reakce stanovena prostřednictvím HPLC za dokončenou. Čirá oranžová reakční směs se ochladí na teplotu 30 °C a okyselí se na pH = 2 prostřednictvím 50% vodné kyseliny sírové (64 g) . Výsledná pevná látka se izoluje filtrací. Bílá pevná látka rekrystaluje z 1170 ml 50% směsi ethanolu a vody. Pevná látka se obnoví filtrací a v průběhu 18 hodin se vysouší při teplotě 50 °C ve vakuové sušičce. Kyselina N-(4-methylsalicyloyl)-8-aminokaprylová se izoluje jako pevná látka bílé barvy v množství 30,88 g (52%).
Teplota tání: 113 až 114 °C.
1HNMR (DMSO-de) δ 12,80 (s, 1H), 12,00 (s, 1H) , 8,73 (bt,
1H) , 7,72 (d, 1H), 6,70 (s, 1H), 6, 69 (d, 1H) , 3,26 (q,
2H) , 2,26 (s, 3H), 2,19 (t, 2H), 1,49 (m, 4H) , 1,29 (m,
6H) .
Analýza pro Ci6H23NO4:
Spočítáno: C 65,51, H 7,90, N 4,77.
Nalezeno: C 65,48, H 7,84, N 4,69.
Příklad 2
Pulmonální dodání vepřového inzulínu
Materiál a postupy
Materiál:
• samičky krysy kmene Sprague - Dawley o hmotnosti 225 až 300 g (Charles River, Raleigh, NC) • laryngoskop s vláknovou optikou (Custom Manufactured, EPA, Research Triangle Park, NC) • vyhřívaná podložka s termostatickou kontrolou prostřed- nictvím rektální sondy (Harvard Apparatus, Cambridge, HA) • silikonované Eppendorf zkumavky • Helix Medical Silicon kanyly • sprejový instilátor (Penn Century, Philadelphia, PA) • ketamin (100 mg/ml) šarže č. 440 350 (Fořt Dodge
Laboratories lne. Fořt Dodge, Iowa) • xylazin (100 mg/ml) šarže č. 116ZZ01 (Vedco lne. St.
Joseph, MO) • acepromazin (10 mg/ml) šarže č. 3941077 (Fořt Dodge
Laboratories lne. Fořt Dodge, Iowa) • heparin 1000 jednotek/ml šarže č. 104 067 (Elkins-Sinn, lne. Cherry Hill, NJ)
0,9% chlorid sodný pro injekce USP sterilní roztok šarže
č. PS 059 113 (Baxter Healthcare Corporation, Deerfield,
IL) • lyofilizovaný vepřový inzulín 25,9 IU/mg (Emisphere Technologies) • nosič B 2-(4-(N-salicyloyl)aminofenyl)propionat (Emisphere Technologies)
Postupy
1. Roztoky • směs anestetických roztoků obsahující xylazin (100 mg/ml), ketamin (100 mg/ml) a acepromazin (10 mg/ml) v poměru 1:3:1 • 0,9% chlorid sodný pro injekce USP obsahující 20 jednotek/ml heparinu • inzulín se rozpustí při pH = 3 v destilované vodě titrované 0,01N HC1, v momentě, kdy je roztok čirý, přidá se destilovaná voda s pH = 7, poté se pH upraví na hodnotu
7,5 prostřednictvím 0,01 NaOH • nosič B se rozpustí v destilované vodě o pH = 7,4, sonikuje se po dobu 2 minut a pH roztoku se upraví na 7,4 použitím 0,lN NaOH.
2. Zvířata
Každá krysa se zváží, identifikuje se použitím nesmazatelné značky a podá se jí anestezie intraperitoneálni injekcí směsi anestetických roztoků obsahující xylazin, ketamin a acepromazin v množstvích 80 mg/kg, 10 mg/kg a 2,0 mg/kg, a vrátí se do klece. Poté, co je dosaženo hluboké celkové anestezie, se krysa přenese na chirurgický stůl a umístí se na vyhřívanou podložku termostaticky kontrolovanou cestou rektální sondy.
Pravá jugulární žíla každé krysy se katetrizuje silikonovou kanylou a její průchodnost se potvrdí pomalým promytím kanyly 200 μΐ heparinizovaného fyziologického roztoku a poté nabráním 100 μΐ krve. Kanyla se poté pročistí 200 μΐ heparinizovaného fyziologického roztoku.
Zavede se endotracheální kanyla za použití optického laryngoskopu. Stříkačka (Hamilton syringe) instilátoru se připojí k endotracheální kanyle a použije se k instilaci 100 μΐ roztoku do dýchacích cest. Po podání se endotracheální kanyla odstraní a v dalším průběhu pokusu se sleduje dechová frekvence.
V časech 0, 10, 30, 60, 90, 120 a 180 minut se odeberou vzorky krve (500 μΐ) a kanyla se promyje přibližně 200 μΐ heparinizovaného fyziologického roztoku. Krev se odebírá do tuberkulinových stříkaček o objemu 1 ml obsahujících 100 μΐ heparinu 20 μ/ml a umístí se přímo do mikrocentrifugačních zkumavek.
Krevní vzorky se ihned centrifugují při frekvenci otáček 10 000 za minutu, po dobu 4 minut. Alikvoty o objemu přibližně 30 μΐ se přenesou do označených silikonovaných Eppendorf zkumavek a udržují se na ledu až do ukončení pokusu pro následné stanovení glukózy. Zbývající vzorky se ·*··« · · ····· · · · j
·..· ..· ·..· : ·* ·:· zmrazí na teplotu - 70 °C pro stanoveni inzulínu (Ultrasensitivní RIA).
Analýza
1.Stanovení glukózy
Stanovení hladin plazmatické glukózy nalačno se provede za použití proužkové (papírkové) metody Ektachem DT Slide (GLU). Analýza je založena na enzymatické katalytické reakci glukózy s molekulárním kyslíkem následované druhou reakcí, při které vzniká syté červené zabarvení. Intensita zabarvení je úměrná množství glukózy ve vzorku.
2.Farmakokinetická analýza
Průměrné koncentrace plazmatického inzulínu v čase jsou podrobeny standardní kompartmentové a non- kompartmentové farmakokinetické analýze. Obvykle jsou kompartmentová a non-kompartmentová farmakokinetická analýza provedeny souběžně pro demonstraci validity kompartmentového modelu.
a)Kompartmentová analýza
Průměrné koncentrace inzulínu (Cins) versus časové profily při intratracheálním (IT) podání vepřového inzulínu sprejem se upraví na jedno-kompartmentový tělesný model, absorpce prvého řádu se stanoví použitím nonlineární regresní metody nejmenších čtverců (Pkanalyst, Micromath, Salt Lake City, UT). Průměrné koncentrace inzulínu se upraví prostřednictvím následující rovnice:
Cpins ~ A (e-ket + e'kat) (rovnice 1) kde A = D ka/Vd (ka - ke) je koncentrace léčiva v těle v čase nula, ka je konstanta absorpční rychlosti prvého řádu, ke je konstanta eliminační rychlosti prvého řádu.
Plocha pod křivkou koncentrace v plicích v čase (AUCo-t) se vypočítá podle pravidla pro různoběžník. Interpolace na nekonečno se provede dělením poslední naměřené hodnoty Cins rychlostní konstantou prvého řádu konečné (terminální) fáze. Celková plocha pod křivkou se stanoví součtem těchto dvou komponent.
Poločas eliminace se spočítá jako 0,693/ke, kde ke je směrnice terminální fáze logaritmu profilu koncentrace čas.
b) Non-kompartmentová analýza
Non-kompartmentová analýza plazmatických koncentraci inzulínu v čase se provede použitím běžných postupů. Čas do dosažení píku CPins (Tmax) a pík CPins (Cmax) se stanoví z neproložených průměrných plazmatických koncentrací CPins versus časové profily ošetření. AUC se spočítá s použitím pravidla pro různoběžník. MRT se nestanoví v důsledku nedostatku údajů po intravenosním podáni, ze kterých by se vypočítaly farmakokinetické parametry.
3. Farmakodynamická analýza
Procento minimální koncentrace glukózy v plazmě (% MPGC) a čas T k dosaženi každého % MPGC (T % MPGC) se stanoví z průměrných hladin plazmatické glukózy versus časové profily ošetřování.
Efekt plochy nad křivkou (AACE) se spočítá následujícím způsobem:
AACe - celková plocha - AUCE (rovnice 2)
9 9 • · 9« • 9 99 • · 9 9 99 9 · 9 9 9
• · 9 · 9 · 99 • 9 ··· 9 9 9 9 · • · · • · 99 9 · 9999 9 9 9 · 9 · · • · 9 9 9 9 ···
kde AUCe znamená efekt plochy pod křivkou vypočítaný podle pravidla pro různoběžník.
Procentuální celková redukce plazmatické glukózy v časovém intervalu 0-»t (% TRPG 0->t) se stanoví prostřednictvím následující rovnice:
% TRPG 0->t = 100 (AACE/celková plocha) (rovnice 3)
4. Statistická analýza
Rozdíly v hodnotách AUC mezi jednotlivými dávkami inzulínu se testují z hlediska signifikance za použití Sheffeho testu mnohočetného porovnání, s předpokladem, že alfa < 0,05. Rozdíly v hodnotách AACEo-*3 (hladiny plazmatické glukózy) po podání inzulínu jako takového a společně s nosičem B se testují na signifikanci za použití Turkeyho testu a analýzy odchylky s předpokladem, že alfa < 0,05.
Příklad 2a (i)Časové profily plazmatického inzulínu a plazmatické glukózy po intratracheální (IT) instilaci plicního spreje inzulínu v množství 0,05 mg/kg společně s nosičem B v množství 5 mg/kg jsou znázorněny na obrázcích 1 a 2.
(ii) a (iii) Obrázky 3 a 4 a tabulka 1 níže ukazují časové profily plazmatické glukózy a farmakodynamické parametry po intratracheální (IT) instilaci plicního spreje obsahujícího nosič B v množství 16 mg/kg společně s inzulínem v množství 0,05 a 0,01 mg/kg. Zaznamená se signifikantní odchylka (p < 0,05) v AACEpje v přítomnosti a nepřítomnosti nosiče pro obě sledované dávky inzulínu.
·· ·· • 4 • • ·
• · • · • · • · ·· • · • · ··· • • · • · • · • · · • · ·· • • · ···· • • • ♦ • ♦ · • · • ·
Hodnota % TRGP0-.3 stoupá z 10,5 ± 1,5 na 36 ± 9 % a z 47 ± na 65,7 ± 5 % pro dávky inzulínu 0,01 a 0,05 (společně se 16 mg/kg nosiče B). Nebyla zaznamenána žádná signifikantní odlišnost v hodnotách % TRGP0^3 mezi inzulínem podaným jako takovým v množství 0,05 mg/kg a společně s nosičem B v množství 5 mg/kg. Tato souvislost mezi dávkou a efektem nalezená pro nosič B je nejpravděpodobněji zapříčiněna jeho účinkem na farmakokinetiku inzulínu (tedy zlepšení biologické dostupnosti).
·»·· β
···
Tabulka 1
Dávka vepřového inzulinu (mg/kg) a nosiče B (mg/kg)
Inzulín Inzulín 0, 01 a nosič B 16 mg/kg Inzulín jako takový 0,05 Inzulín 0,05 a nosič B 5 mg/kg Inzulín 0,05 a nosič B 16 mg/kg
jako 0,01 takový
%MPGC 70,02 46, 4 35,7 38,6 14,9
T%MPGC (min) 180 90 120 90 60
%TRPGo_3hod 10,5 ± 1,5 36, 9 ± 9 47 ± 10 46 ± 8 65,7 ± 5
AACE0_t (mcU/ min/ ml) 1892 + 98 9 6395 ± 1609 8497 ± 1716 8218 ± 1430 11 834 ± 872
Tyto údaje indikují potenciál nosiče B signifikantně zvyšovat biologickou dostupnost inzulinu a jeho účinek na hladiny glukózy.
(iv) Průměrné plazmatické koncentrace inzulinu po intratracheální (IT) instilaci plicního spreje, jako funkce dávky inzulinu, jak je znázorněno na obrázku 5. Farmakokinetické parametry vyplývající z kompartmentové a non-kompartmentové analýzy jsou vyčteny v tabulce 2 níže. Non-lineární křivka proložená průměrnými plazmatickými hladinami indikuje, že pokles plazmatických koncentrací je nejlépe vyjádřen monoexponenciálním poklesem absorpce ·* « ·*. -í « · » · ··
prvého řádu ve všech třídách. Stanoveni dostatečnosti proložení se provede porovnáním s modelem selekčních kritérií (MSC). Toto modifikované Akaike informační kritérium umožňuje posouzení adekvátnosti modelu. Hodnoty MSC se pohybují v rozmezí 1,3 až 3,8, což značí, že model je adekvátní.
Průměrné píkové (vrcholové) plazmatické koncentrace dosažené v těchto studiích (pokusech) jsou 57,5 μϋ/ml (Tmax = 10 minut), 18,8 μϋ/ml (Tmax = 20 minut), 71,3 μϋ/ml (Tmax = 10 minut), 48,95 μϋ/ml (Tmax = 10,0 minut), 213,1 μϋ/ml (Tmax = 10 minut) , 354 μϋ/ml (Tmax - 20 minut) a 902 μϋ/ml (Tmax = 20 minut) pro 0,001 mg/kg (0,026 ϋ/kg), 0,005 mg/kg (0,13 ϋ/kg), 0,01 mg/kg (0,26 U/kg), 0,05 mg/kg (1,3 U/kg), 0,1 mg/kg (2,6 U/kg), 0,5 a 1 mg/kg vepřového inzulínu, a jsou v blízkém souladu s hodnotami získanými po proložení křivky.
Logaritmické křivky plazmatických koncentrací v čase jako funkce dávky inzulínu (obrázek 5) ukazují pokles plazmatických koncentrací s definovaným signifikantně delším poločasem (od 27,8 min do 142,4 min, viz tabulka 2), než bylo drive uváděno po intravenózním podání 0,1 μς/kg hovězího inzulínu králíkům (tx/2 = 30 min). Tento poznatek indikuje přítomnost fenoménu flip-flop (naruby), ke kterému dochází pokud je pokles plazmatické koncentrace určován spíše absorpcí než eliminací. Toto zvýšení absorpčního poločasu nicméně neznamená, že absorpce je sama o sobě rychlost - limitujícím krokem. Spíše může být tento fenomén výsledkem pomalého rozpuštění nebo transformace inzulínu z hexamerní na monomerní formu se zvyšující se koncentrací inzulínu v instilovaném objemu.
Plocha pod křivkou afinity (AUC0_~) vypočítaná použitím pravidla trapezoidu je 2930, 1334, 5050, 5260, 15 374, 67 676 a 200 230 μϋ min/ml pro 0,001 mg/kg (0,026 U/kg), 0,005 mg/kg (0,13 U/kg), 0,01 mg/kg (0,26 U/kg), 0,05 mg/kg (1,3 U/kg), 0,1 mg/kg (2,6 U/kg), 0,5 mg/kg a 1 mg/kg vepřového inzulínu.
Vicečetným porovnáním mezi dávkami s použitím Scheffeho testu se zjistí, mezi AUC hodnotami neexistuje žádná signifikantní odchylka (p > 0,05). Tento nedostatek signifikance je pravděpodobně zapříčiněn nedostatkem vysoké interindividuálni variability (viz SD pro AUC v tabulce 2). Používaná relativní biologická dostupnost inzulínu může být vypočítána za předpokladu, že rozsah absorpce vepřového inzulínu následující pulmonálni podání a humánního inzulínu následující subkutánní (SC) podáni jsou ekvivalentní. Vycházeje z tohoto předpokladu je relativní biologická dostupnost vepřového inzulínu 12,46 %.
Tabulka 2 36 • · · e • · · · i · · · • · ··· · • · · ·· • · · ♦ · · • * · · · · • · · « · · · • · a··· ♦ · · · ♦ · · · · · · · · ©
Dávka vepřového inzulínu (mg/kg)
0,001 0,00 0,01 0,05 0,1
5
Kompartmentová analýza
C-max 57,2 16,4 70,5 48,3 188,08
(pU/ml) 6
Tmax 10,8 12,4 11, 9 14 13,7
(min)
AUCo-a 2930 1334 5049 5260 15374
(pU.min/ml)
ke (min-1) 0,23 0,23 0,25 0,23 0,23
t1/2 (elim) (min-1) 3,0 3,0 3, 0 3,0 3,0
ka (min-1) 0,025 0,01 0,01 0,0105 0,012
6 8
Tx/2 (abs) (min) 27,8 42,6 38,3 65,9 59, 9
Non-kompartmentová analýza
Cmax (ng/ml) 57,5 18,8 71,3 48,95 213,1
tmax (hod) 10 20 10 10 10
AUCo-s 1695 1176 4995 5288 17907
(pU.min/ml)
• * φ·ϊ· · · · · · t · _ β ···· · · · .. .. .« ♦ ·· ···
Časové profily plazmatické glukózy a PD údaje pro různé instilované dávky inzulínu jsou znázorněny na obrázku 6 a v tabulce 3 níže. Výsledky ukazují, že zvýšení dávky (z 0,01 na 1 mg/kg) vede k signifikantnímu snížení procenta minimální plazmatické glukózy (%MPGC) ze 70,2 na 13,1, aniž by se signifikantně měnil čas T, během kterého je tohoto minima dosaženo (T%MPGC). Celkové snížení plazmatické glukózy během času 0 až 3 hodiny (% TRPG0_3hod) (viz tabulka 3) se signifikantně zvyšuje z 10,5 na 73,7 %, což značí, že bylo dosaženo větší biologické dostupnosti a se zvýšením rozsahu absorpce při zvýšení dávky inzulínu.
Tabulka 3
Dávka vepřového inzulínu (mg/kg)
0,01 0,05 0,1 0,5 1,0
%MPGC 70,2 35,69 35,3 30,6 13,1
T%MPGC 180 120 120 60 120
%TRPGo_3hod 10,5 47,2 50,5 54,5 73,7 ±
± 1,5 ± 9,5 ±12,7 ± 6,5 3,1
AACE0_t 1892 8497 9102 10205 13266 ±
(μϋ.min/ml) ± 98 9 + + ± 570
1716 2295 1173
Interindividuální variabilita v glukózové odpovědi (CV < 30 %) je menší než odpověď na inzulín. Z toho vyplývá, že je přítomno tlumení inzulínové variability v průběhu procesu od objevení hormonu v cirkulaci do jeho translace na bilogickou aktivitu.
Příklad 2b
Prostředek obsahující 0,05 mg/kg vepřového inzulínu a 16 mg/kg nosiče B se podá krysám intratracheální instilací spreje do plic. Iintratracheální instilací spreje do plic se také podá prostředek obsahující 0,05 mg/kg vepřového inzulínu jako takového. Výsledky jsou znázorněny na obrázku 7 a v tabulkách 4 a 5.
Tabulka 4
Čas (min) s nosičem B bez nosiče B
průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml ± směrodatná odchylka) AUC průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml± směrodatná odchylka) AUC
0 0 10347,35 0 4300,025
10 157,67 ± 32,86 87,28 ± 34,34
30 101,36 ± 35,14 43, 64 ± 17,96
60 70,48 ± 30,31 21,50 ± 3,80
90 44,17 ± 8,97 14,13 ± 4,49
120 37,28 ± 15,47 10,89 ± 3,31
180 11,04 ± 3,21 11,38 ± 9,54
9
Tabulka 5:
PK parametry po intratracheální instilaci plicního spreje obsahujícího inzulín společně s nosičem B, do plic krys
Dávka vepřového inzulinu (mg/kg) 0, 01 0, 05 0, 05
Dávka nosiče B (mg/kg) 16 5 16
Kompartmentová analýza (průměrné údaje'
Cmax (M-U /ml) 31 54 147
Tmax (min) 11 15 13
AUCo-oo (μϋΐϊΐίη/τηΐ) 1805 6189 10666
ke (min''1) 0,21 0,21 0,21
t72 (elim/min) 2,8 3,3 3,3
ka (min-1) 0, 022 0,010 0,017
t72 (abs/min) 31 69 40
Non) compertmentová analýza
Cmax (μϋ/ml) 31,41 60,7 158
tmax (min) 10 30 10
auc0_8 (pUmin/ml) 1705 ± 126 5256 ± 3271 10347 ± 3089
• · • · · · • · · · a 4 i: :
• · · ·· ·· ··
Komparativní příklad 2c
Prostředky obsahující vepřový inzulín ve stoupajících dávkách, jak je znázorněno v tabulce 6 níže, se podají krysám intratracheální instilací plicního spreje. Výsledky jsou ilustrovány na obrázku 8 a v tabulkách 6 a 7.
Tabulka 6:
PK parametry po intratracheální instilaci plicního spreje obsahujícího rostoucí dávky vepřového inzulínu do plic krys
Dávka vepřového inzulínu (mg/kg)
0,01 0,05 0,1 0,5 1,0
Kompartmentová analýza (průměrné úc laje)
Cmax (μυ /ml) 6, 5 74 141 566 1634
Tmax (min) 11,3 11, 6 12,4 16,3 25
AUCo-oo (μϋιηίη/ιηΐ) 440 3989 9111 83404 223595
ke (min-1) 0,25 0,21 0,20 0,21 0,21
t72 (elim/min) 2,8 3,3 3,3 3,3 3,3
ka (min-1) 0,018 0,024 0,02 0, 008 0,009
t72 (abs/min) 39 28 35 90 76
Nonkompertmentová analýza
Omax (μυ /ml) 6 87 152 581 1926
tmax (min) 10 10 10 30 30
AUCo-8 (pUmin/ml) 503 ± 93 4300 ± 1114 9517 ± 3255 60344 ± 16406 178177 ± 17152
CN
Tabulka
i—1 O 220, 6 <£> LT) kP 304 • 9 • «9 * · · • 9 9 9 • · ΟΛ 1 9 9 9 >·· K. co CN co • • 9 ř 9 9 • co <0 rH CN 9 9 9 9 9 9
0,5 L. o 214 1 220 219 136 CO 00 97,6
rd rd o o 8 '98 20, 5 21, 6 38,4 σ> o CN 5,38
ii odchyl: 0,0 5 o 34 18 σ> co LO ·», 3,3 LO 0Ί
1--------1 e o u Standardi 0,01 o 2,76 1,28 2,76 0,87 1,57 0,37
:ická koncentrace inzulínu (n 1—1 o 1198 1925 1056 í—1 oo kO co σ> i—1 σ> 618,3 178143,5
0,5 o 443, 7 580, 5 553, 3 275, 1 211 161 60345
1'0 o 152 91,2 50, 6 _________________________________________________________________________________1 r^ ·>» 00 i—1 ϊ—! co '19, 3 9517,5
Plazmat 0,05 o 87,3 <0 K co 21,5 14,13 10, 9 sr t—1 i—1 4300,9
Cn J| ó c Ή 1—| i—1 o o o rH LQ 4,12 3,87 2,27 1,87 1, 43 lO Γ o cn sr
Dávka inzi Čas (min) o 10 30 60 06 120 180 AUC
Příklad 2d
Prostředek obsahující 0,05 mg/kg vepřového inzulínu a 5 mg/kg nosiče B se-podá krysám intratracheální instilací do plic. Dále se podá intratracheální instilací do plic prostředek obsahující 0,05 mg/kg vepřového inzulínu jako takového. Hladiny plazmatického inzulínu jsou ilustrovány na obrázku 9 a v tabulkách 5 a 8.
Tabulka 8
Čas (min) s nosičem B bez nosiče B
průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml ± směrodatná odchylka) AUC průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml ± směrodatná odchylka) AUC
0 0 5256,463 0 4300,025
10 40,49 ± 23,30263 87,28 ± 34,34
30 60,70 ± 33 43,64 ± 17,96
60 41,22 ± 27,10568 21,50 ± 3,80
90 21,08 ± 14,46818 14,13 ± 4,49
120 15,25 ± 15,31622 10,89 ± 3,31
180 19,22 ± 16,82827 11,38 ± 9,54
..······ ♦ · . . ·«· ♦ · · ···» · * ·· * ·* i *·..
.· ·» ♦· · ·· ·
Přiklad 2e
Prostředek obsahující 0,01 mg/kg vepřového inzulínu a 16 mg/kg nosiče B se podá krysám intratracheální instilací do plic. Dále se krysám podá intratracheální instilací do plic prostředek obsahující 0,01 mg/kg vepřového inzulínu jako takového. Hladiny plazmatického inzulínu jsou ilustrovány na obrázku 10 a v tabulkách 5 a
9.
Tabulka 9
Čas (min) s nosičem B bez nosiče B
průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml ± směrodatná odchylka) AUC průměrná koncentrace inzulínu (mcU/ml ± směrodatná odchylka) AUC
0 0 1705,418 0 502,5
10 31,41 ± 8,31 5,89 ± 2,76
30 16,41 ± 4,29 4,12 ± 1,28
60 10,98 ± 6,09 3,87 ± 2,76
90 4,87 ± 1,19 2,27 ± 0,87
120 5,03 ± 1,74 1,87 ± 1,57
180 4,07 ± 2,73 1,43 ± 0,37
Příklad 3
Příklad 3a
Připraví se prostředek k pulmonálnímu dávkovému dodání obsahující 0,1 mg/kg vepřového inzulínu a 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B ve vodě. Dále se připraví kontrolní dávkové prostředky obsahující 0,1 mg/kg inzulínu jako takového a 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B jako takové. Pěti normálním nehladovějicim krysám se následujícím postupem podá dávka 0,3 ml/kg pulmonálního dávkového prostředku při pH = 7,3 až 7,6. Několik centimetrů do krku zvířat se zavedou l1/2 Popper and Sons gavážní jehly. Konec jehly se zavádí ventrálním směrem tak, aby mohly jehly zapadnout do kapsy a poté další manipulací do trachey. V momentě, kdy je jehla v trachee, se touto jehlou podá dávka roztoku.
V časových intervalech se z ocasní arterie odebírají vzorky krve a prostřednictvím Ektachem DT proužků (Johnson & Johnson Clinical Diagnostics, lne., Rochester N.Y.) se měří hladiny krevní glukózy.
Výsledky jsou znázorněny na obrázku 11 pro 0,1 mg inzulínu se 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B (), 0,1 mg/kg inzulínu jako takového (·) a 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B jako takové (A).
Příklad 3b
Zopakuje se postup popsaný v příkladu 3a, s tím, že se použije 0,5 mg/kg vepřového inzulínu a 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B ve vodě, pro dávkování prostředku při pH =
6,6 až 6,9. Dále se připraví dávkové prostředky obsahující 0,5 mg/kg inzulínu jako takového a 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B jako takové.
Výsledky jsou znázorněny na obrázku 12, kde () znamená 0,5 mg inzulínu se 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B; (·) znamená 0,5 mg/kg inzulínu jako takového a (A) znamená 7,5 mg/kg sodné soli nosiče B jako takové.
Příklad 4
Pulmonální dodávání inzulínu ♦ · ·
Nosičová sloučenina B, sodná sůl nosičové sloučeniny C a nosičová sloučenina D, jak je uvedeno v tabulce 10 se testují následujícím způsobem. Každá krysa se zváží a identifikuje se použitím nesmazatelné značky a uvede se do celkové anestezie intramuskulární injekcí thorazinu (3 mg/kg) a ketaminu (44 mg/kg).
Pomocí optického laryngoskopu se zavede endotracheální kanyla (se sprejovým instilátorem od výrobce Penn Century, Philadephia, PA) se stříkačkou (Hamilton syringe) napojenou na endotracheální kanylu. Stříkačka (Hamilton syringe) instilátoru se použije k instilaci 0,4 ml/kg roztoku obsahujícího 0,03 mg/kg inzulínu a 16 mg/kg nosičové sloučeniny do dolních cest dýchacích. Po podání se endotracheální kanyla extrahuje a po zbývající průběh studie se monitoruje dechová frekvence.
V časech 0, 5, 15, 30, 60 a 120 minut se cestou ocasní arterie odeberou vzorky krve a analyzují se prostřednictvím DSL inzulínového kitu # 10-1600, přičemž se postupuje podle pokynů na kitu.
Sérové hladiny inzulínu jsou ilustrovány na obrázku 13 a Cmax je uvedeno v tabulce 10 níže.
Tabulka 10
Nosič cmax (μυ/ml)
B 44,6 ± 10,0
Sodná sůl C 22,5 ± 4,0
D 58,8 ± 12,0
Bez nosiče 19,4 ± 4,3
Výše zmíněné patenty, přihlášky, testovací metody a publikace jsou v rámci tohoto spisu zahrnuty do odkazů v celém jejich rozsahu.
Odborníkovi v oboru budou z předchozího detailně popsaného popisu jasné četné variace přítomného, podrobně popsaného, vynálezu. Všechny tyto jasné variace spadají rámce přítomného vynálezu.

Claims (15)

1. Způsob podáni biologicky aktivního přípravku subjektu, který takovýto přípravek potřebuje, vyznačující se tím, že zmíněný způsob zahrnuje podání zmíněnému subjektu pulmonální cestou prostředek obsahující (A) aktivní přípravek a (B) nosič obsahující acylovanou aminokyselinu, sulfonovanou kyselinu, polyaminokyselinu, která obsahuje sulfonovanou aminokyselinu, nebo jakoukoliv kombinaci výše uvedených přípravků.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že aktivní přípravek se vybere ze skupiny sestávající z biologicky aktivního přípravku, chemicky aktivního přípravku nebo jejich kombinace.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačuj ící se t i m, že aktivní přípravek obsahuje alespoň jeden peptid, mukopolysacharidy, uhlohydrát nebo lipid.
4. Způsob podle nároku 3, vyznačující se t i m, že se zmíněný biologicky aktivní přípravek vybere ze skupiny sestávající z růstových hormonů, lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantních lidských růstových hormonů (rhGH), hovězích růstových hormonů a vepřových růstových hormonů, uvolňujících faktorů růstových hormonů; interferonů, cc-interferonu, β-interferonu a γ-interferonu, interleukinu-1, interleukinu-2, inzulínu, inzulínu podobnému růstového faktoru (IGF), včetně IGF-1, heparinu, nefrakcionovaného heparinu, heparinoidů, dermatanů, chondroitinů, heparinu s nízkou molekulární hmotností, heparinu s velmi nízkou molekulární hmotností, a heparinu s ultra-nizkou molekulární hmotností, kalcitoninu, lososího kalcitoninu, úhořího kalcitoninu a humánního kalcitoninu, erythropoetinu, atriálního natriuretického faktoru, antigenů, monoklonálních protilátek, somatostatinu, inhibitorů proteas, uvolňujících faktorů adrenokortikotropního a gonadotropního hormonu, oxytocinu, uvolňujícího faktor luteinizačního hormonu, folikuly stimulujícího hormonu, glukocerebrosidázy, trombopoetinu, filgrastimu, prostaglandinů, cyklosporinu, vasopresinu, kromoglykatu sodného nebo disodného, vankomycinu, desferrioxaminu (DFO), parathormonu (PTH), fragmentů PTH, antimikrobních přípravků, antimykotických přípravků, analog, fragmentů, mimetik a polyethylenglykolem(PEG)modifikovaných derivátů těchto sloučenin; a jejich jakékoliv kombinace.
5. Způsob podle nároku 3, vyznačující se t i m, že zmíněný biologicky aktivní přípravek se vybere ze skupiny sestávající z růstových hormonů, lidských růstových hormonů (hGH), rekombinantních lidských růstových hormonů (rhGH), hovězích růstových hormonů a vepřových růstových hormonů, uvolňujících faktorů růstových hormonů; interferonů, cc-interferonu, β-interferonu a γ-interferonu, interleukinu-1, interleukinu-2, inzulínu, inzulínu podobnému růstového faktoru (IGF), včetně IGF-1, heparinu, nefrakcionovaného heparinu, heparinoidů, dermatanů, chondroitinů, heparinu s nízkou molekulární hmotností, heparinu s velmi nízkou molekulární hmotností, a heparinu s ultra-nízkou molekulární hmotností, kalcitoninu, lososího kalcitoninu, úhořího kalcitoninu a humánního kalcitoninu, erythropoetinu, atriálního natriuretického faktoru, antigenů, monoklonálních protilátek, somatostatinu, inhibitorů proteas, uvolňujících faktorů adrenokortikotropního a gonadotropního hormonu, oxytocinu, uvolňujícího faktor luteinizačního hormonu, folikuly stimulujícího hormonu, glukocerebrosidázy, trombopoetinu, filgrastimu, prostaglandinů, cyklosporinu, vasopresinu, kromoglykatu sodného nebo disodného, vankomycinu, desferrioxaminu (DFO), parathormonu (PTH), fragmentů PTH, φ
• · ·Φ • · · ♦ φ φ · · • · φφφ • φ · ·· ·· antimikrobních přípravků, antimykotických přípravků, analog, fragmentů, mimetik a polyethylenglykolem(PEG)modifikovaných derivátů těchto sloučenin; a jejich jakékoliv kombinace.
6. Způsob podle nároku 3, vyznačuj ící se t i m, že zmíněný biologicky aktivní přípravek zahrnuje interferon, interleukin-2, inzulín, inzulínu podobný růstový faktor (IGF), IGF-1, heparin, nízkomolekulární heparin, ultra-nízkomolekulární heparin, kalcitonin, ocytocin, vasopresin, vankomycin, desferrioxamin, parathormon a jejich kombinace.
7. Způsob podle nároku 2, vyznačuj ící se t i m, že se zmíněný biologicky aktivní přípravek vybere ze skupiny sestávající z inzulínu, inzulínu podobného růstového faktoru (IGF), IGF-1 nebo jejich kombinací.
8. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící tím, že nosič obsahuje sloučeninu obecného vzorce
O R1—γ—n~(r3—Cj-OH
R?
je alkylová skupina s 1 až 7 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina s 3 až 10 atomy uhlíku, cykloalkenylová skupina, arylová skupina, thienylová skupina, fenylová skupina, naftylová skupina, pyrroloskupina nebo pyridylová skupina;
je popřípadě substituována jednou nebo více alkylovými skupinami s 1 až 7 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 7 atomy uhlíku, alkinylovou skupinou se 2 až 7 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinou se 6 až 10 atomy uhlíku, fenylovou skupinou, fenoxyskupinou, atomem fluoru, chloru, bromu, hydroxyskupinou, sulfonylovou skupinou, sulfinylovou skupinou, aminoskupinou, -SH, -PO3H, oxazolovou skupinou, isoxazolovou skupinou, alkoxyskupinou obecného vzorce OR6, -COOR7, -N(R5)2, -N+(R5)2ř -N+(R5)3X~, nebo jakoukoliv kombinací výše uvedených, nebo jejich jakoukoliv či kombinací je
O c— nebo SO2 ;
X je atom halogenu, hydroxid, sulfát, tetrafluorboritan nebo fosfát;
R2 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 4 atomy uhlíku nebo - (CH2)n-COOH, kde n je 1 až 10;
R3 je alkylová skupina s 1 až 24 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, alkinová skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina se 3 až 10 atomy uhlíku, cykloalkenylová skupina se 3 až 10 atomy uhlíku, fenylová skupina, naftylová skupina, alkylfenylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylfenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, alkylnaftylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylnaftylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, fenylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, naftylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, naftylalkenylová ·· ·· ··. : ·**· : i:,ÚU
R3 skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části; může být popřípadě substituováno alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, -SH, atomem halogenu, -NH2, -CO2R4, cykloalkylovou skupinou se 3 až 10 atomy uhlíku, cykloalkenylovou skupinou se 3 až 10 atomy uhlíku, heterocyklickou skupinou se 3 až 10 atomy v kruhu, kde heteroatom je jeden či více z atomu dusíku, kyslíku a síry či jejich jakákoliv kombinace, arylovou skupinou, alkarylovou skupinou s 1 až 10 atomy uhlíku, aralkylovou skupinou s 1 až 10 atomy uhlíku, nebo jakoukoliv kombinací výše uvedených; R4 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku; R5 je atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku; R6 alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina nebo cykloalkylová skupina; a R7 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku, alkenylová skupina, alkinylová skupina, arylová skupina nebo cykloalkylová skupina. s e 9. Způsob podle nároku 8, vyznačuj íc i tím, že se aktivní přípravek vybere ze skupiny
sestávající z inzulínu, inzulínu - podobnému růstovému faktoru (IGF), IGF - 1, nebo jejich kombinací.
: . · · · · · : : : :··:·: ' ·*Γ ’ 5 . í ·,. ·· ·· · ·· ··’
10. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ici se t i m, že koncentrace nosič obsahuje sloučeninu obecného vzorce
Ar-Y- (R8)n~OH kde
Ar je substituovaná nebo nesubstituovaná fenylová nebo naftylová skupina,
Ar je s výhodou substituovaná či nesubstituovaná 2-OH-fenylovou skupinou;
nebo -SO2-;
R8 má obecný vzorec
O —N(R10)-R9—C-R9 je alkylová skupina s 1 až 24 atomy uhlíku, alkenylová skupina se 2 až 24 atomy uhlíku, fenylová skupina, naftylová skupina, alkylfenylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylfenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, alkylnaftylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, alkenylnaftylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části, fenylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části, fenylalkenylová skupina 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové částí, naftylalkylová skupina s 1 až 10 atomy uhlíku v alkylové části a naftylalkenylová skupina se 2 až 10 atomy uhlíku v alkenylové části;
·· ·· J .**.
♦·· ··· · · «·· «·»· ·· • *·· · · · ···· · · · • · · · · · · «· ·· ·· · ··
R9 může být popřípadě substituována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylovou skupinou se 2 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupinou, -SH, CO2R11, cykloalkylovou skupinou, cykloalkenylovou skupinou, heterocyklickou alkylovou skupinou, alkarylovou skupinou, heteroarylovou skupinou, heteroalkarylovou skupinou nebo jakoukoliv kombinací výše uvedených;
R9 může být popřípadě přerušena atomem kyslíku, dusíku, síry nebo jakoukoliv jejich kombinací;
R10 je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku; a je atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkenylová skupina s 2 až 4 atomy uhlíku.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačuj Ιοί se t i m, že se aktivní přípravek vybere ze skupiny sestávající z inzulínu, inzulínu - podobnému růstovému faktoru (IGF), IGF - 1, nebo jejich kombinací.
12. Způsob podle nároku 10, vyznačuj i c í se t í m, že nosič obsahuje sloučeninu obecného vzorce
99 99 • 9 9 • · • · • 9 9 • 9 • 9 9 9 9 9 • · • 99 9 9 9 9999 9 • 4 • • · 9 ♦ · 99 • 9 •
nebo jeho soli.
13. Způsob podle nároku 12, vyznačuj Ιοί se t í m, že se aktivní přípravek vybere ze skupiny sestávající z inzulínu, inzulínu - podobnému růstovému faktoru (IGF), IGF - 1, nebo jejich kombinací.
14. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící se t i m, že nosič obsahuje sloučeninu obecného vzorce nebo jeho soli.
15. Způsob podle nároku 14, vyznačuj i c i se t í m, že se aktivní přípravek vybere ze skupiny sestávající z inzulínu, inzulínu - podobnému růstovému faktoru (IGF), IGF - 1, nebo jejich kombinací.
16. Způsob podle nároku 1, vyznačuj ící se t í m, že nosič obsahuje sloučeninu obecného vzorce
CZ2001331A 1998-07-27 1999-07-27 Pulmonální dodávání aktivních přípravků CZ2001331A3 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US9426798P 1998-07-27 1998-07-27
US10446698P 1998-10-16 1998-10-16

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2001331A3 true CZ2001331A3 (cs) 2001-08-15

Family

ID=26788685

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2001331A CZ2001331A3 (cs) 1998-07-27 1999-07-27 Pulmonální dodávání aktivních přípravků

Country Status (18)

Country Link
US (1) US6642411B1 (cs)
EP (2) EP1100771B1 (cs)
JP (2) JP5144861B2 (cs)
KR (1) KR20010074777A (cs)
CN (1) CN1205994C (cs)
AT (1) ATE295347T1 (cs)
AU (2) AU751612B2 (cs)
BR (1) BR9912694A (cs)
CA (2) CA2338358C (cs)
CZ (1) CZ2001331A3 (cs)
DE (1) DE69925276T2 (cs)
ES (1) ES2242412T3 (cs)
HK (1) HK1036970A1 (cs)
HU (1) HUP0103318A2 (cs)
IL (2) IL140710A0 (cs)
NZ (2) NZ509239A (cs)
TR (1) TR200100922T2 (cs)
WO (2) WO2000006534A1 (cs)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6221367B1 (en) * 1992-06-15 2001-04-24 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US6916489B2 (en) * 1992-06-15 2005-07-12 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US6461643B2 (en) 1993-04-22 2002-10-08 Emisphere Technologies, Inc. Oral drug delivery compositions and methods
US6001347A (en) 1995-03-31 1999-12-14 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
SI9720025A (sl) * 1996-03-29 1999-08-31 Emishphere Technologies, Inc. Spojine in sestavki za prenos aktivne snovi
US6358504B1 (en) 1997-02-07 2002-03-19 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US20040136914A1 (en) 1997-10-01 2004-07-15 Dugger Harry A. Buccal, polar and non-polar spray containing ondansetron
US20030077228A1 (en) * 1997-10-01 2003-04-24 Dugger Harry A. Buccal, polar and non-polar spray or capsule containing drugs for treating endocrine disorders
US6440929B1 (en) 1998-07-27 2002-08-27 Emisphere Technologies, Inc. Pulmonary delivery of active agents
NZ509239A (en) * 1998-07-27 2002-10-25 Emisphere Tech Inc 2-(4-(N-salicyloyl)aminophenyl)propionic acid useful as a carrier in compositions for delivering active agents
US6991798B1 (en) 1998-08-07 2006-01-31 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
HUP0103188A2 (hu) * 1998-08-07 2001-12-28 Emisphere Technologies, Inc. Vegyületek és készítmények hatóanyagok célbajuttatására
EP1175390B1 (en) 1999-04-05 2005-02-02 Emisphere Technologies, Inc. Disodium salts, monohydrates, and ethanol solvates
WO2001051454A1 (en) 2000-01-13 2001-07-19 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
CN100482637C (zh) * 2000-06-29 2009-04-29 艾米斯菲尔技术有限公司 用于投递活性剂的化合物和组合物
JP2004517127A (ja) 2000-12-21 2004-06-10 ネクター セラピューティックス ポリエン抗真菌剤の肺送達
NZ527157A (en) * 2001-03-01 2005-04-29 Emisphere Tech Inc Compositions for delivering bisphosphonates
IL158862A0 (en) 2001-05-21 2004-05-12 Nektar Therapeutics An insulin composition for pulmonary administration
ITMI20012434A1 (it) 2001-11-20 2003-05-20 Dompe Spa Acidi 2-aril-propionici e composizioni farmaceutiche che li contengono
CA2466863A1 (en) 2001-11-29 2003-06-05 Emisphere Technologies, Inc. Oral pharmaceutical compositions comprising cromolyn sodium and an acylated amino acid
US7247609B2 (en) 2001-12-18 2007-07-24 Universitat Zurich Growth factor modified protein matrices for tissue engineering
JPWO2003064462A1 (ja) * 2002-02-01 2005-05-26 中外製薬株式会社 Ｐｅｇ結合ｐｔｈ又はｐｅｇ結合ｐｔｈ誘導体
US7318925B2 (en) * 2003-08-08 2008-01-15 Amgen Fremont, Inc. Methods of use for antibodies against parathyroid hormone
AU2003282780A1 (en) 2003-08-08 2005-03-07 Abgenix, Inc. Antibodies directed to parathyroid hormone (pth) and uses thereof
US20060286129A1 (en) * 2003-12-19 2006-12-21 Emisphere Technologies, Inc. Oral GLP-1 formulations
JP2005209106A (ja) * 2004-01-26 2005-08-04 Nec Corp 携帯通信端末、受信メール管理方法、プログラムおよび記録媒体
CA2564866A1 (en) * 2004-05-06 2005-11-17 Emisphere Technologies, Inc. Solid dosage form of wetted heparin
AU2005244904B2 (en) * 2004-05-14 2011-10-13 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
EP1745004B8 (en) 2004-05-14 2016-07-27 Emisphere Technologies, Inc. Aryl ketone compounds and compositions for delivering active agents
EP1750721A4 (en) 2004-05-19 2012-10-31 Emisphere Tech Inc TOPICAL FORMULATIONS BASED ON CROMOGLYCIC ACID
MXPA06013295A (es) 2004-05-19 2007-02-22 Emisphere Tech Inc Formulaciones de aciclovir.
EP2248531A1 (en) 2004-08-03 2010-11-10 Emisphere Technologies, Inc. Antidiabetic oral insulin-biguanide combination
EP1830831B1 (en) 2004-12-29 2015-01-21 Emisphere Technologies, Inc. Pharmaceutical formulations of gallium salts
WO2006076692A1 (en) 2005-01-12 2006-07-20 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for buccal delivery of parathyroid hormone
WO2007011958A2 (en) 2005-07-15 2007-01-25 Emisphere Technologies, Inc. Intraoral dosage forms of glucagon
WO2007121318A2 (en) 2006-04-12 2007-10-25 Emisphere Technologies, Inc. Formulations for delivering insulin
WO2007133944A2 (en) 2006-05-09 2007-11-22 Emisphere Technologies, Inc. Topical administration of acyclovir
EP2040718B1 (en) 2006-06-28 2017-12-27 Emisphere Technologies, Inc. Gallium nitrate formulations
US8895777B2 (en) * 2006-08-31 2014-11-25 Emisphere Technologies Inc Compounds and compositions for delivering active agents
PL3050568T3 (pl) 2007-03-13 2021-06-14 Jds Therapeutics, Llc Sposoby i kompozycje do przedłużonego uwalniania chromu
WO2009002867A2 (en) 2007-06-26 2008-12-31 Nutrition 21, Inc. Multiple unit dosage form having a therapeutic agents in combination with a nutritional supplement
EP2227263A2 (en) 2007-12-28 2010-09-15 Kuros Biosurgery AG Pdgf fusion proteins incorporated into fibrin foams
WO2011017346A2 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Emisphere Technologies, Inc. Fast-acting naproxen composition with reduced gastrointestinal effects
SG10201600228QA (en) * 2010-05-04 2016-03-30 Nexmed Holdings Inc Therapeutic peptide composition and method
US8933022B2 (en) 2011-03-01 2015-01-13 Jds Therapeutics, Llc Methods and compositions for the treatment and prevention Hypoglycemia and related disorders
MX2015003643A (es) 2012-09-21 2016-04-06 Intensity Therapeutics Inc Metodo para tratar el cancer.
US11865121B2 (en) 2016-02-11 2024-01-09 Nutrition21, LLC Chromium containing compositions for improving health and fitness

Family Cites Families (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3748928A (en) 1971-09-20 1973-07-31 Borg Warner Control system for mutiple driving axle vehicle
DE2517229A1 (de) 1975-04-18 1976-10-28 Boehringer Mannheim Gmbh Phenylalkylcarbonsaeure-derivate und verfahren zu ihrer herstellung
CA1077842A (en) 1975-10-09 1980-05-20 Minnesota Mining And Manufacturing Company Albumin medicament carrier system
NZ196349A (en) 1980-03-07 1984-08-24 Interx Research Corp Enhancement of absorption rate of orally administered polar bioactive agents
JPS58140026A (ja) 1982-01-14 1983-08-19 Toyo Jozo Co Ltd 吸収性良好な製剤
FR2509175B1 (fr) 1981-03-06 1987-01-16 Toyo Jozo Kk Preparation therapeutique ayant d'excellentes proprietes d'absorption
US4692433A (en) 1983-10-12 1987-09-08 The Regents Of The University Of California Method and composition for regulating serum calcium levels of mammals
US4757066A (en) 1984-10-15 1988-07-12 Sankyo Company Limited Composition containing a penem or carbapenem antibiotic and the use of the same
US4689182A (en) 1985-12-20 1987-08-25 Warner-Lambert Company Benzoic acid and benzoic acid ester derivatives having anti-inflammatory and analgesic activity
USRE35862E (en) 1986-08-18 1998-07-28 Emisphere Technologies, Inc. Delivery systems for pharmacological agents encapsulated with proteinoids
EP0318512B1 (en) 1986-08-18 1998-06-17 Emisphere Technologies, Inc. Delivery systems for pharmacological agents
US4895725A (en) 1987-08-24 1990-01-23 Clinical Technologies Associates, Inc. Microencapsulation of fish oil
FR2636238B1 (fr) 1988-09-14 1994-01-21 Morelle Jean Nouvelles compositions antisudorales
US4983402A (en) 1989-02-24 1991-01-08 Clinical Technologies Associates, Inc. Orally administerable ANF
US4976968A (en) 1989-02-24 1990-12-11 Clinical Technologies Associates, Inc. Anhydrous delivery systems for pharmacological agents
JPH02239980A (ja) 1989-03-15 1990-09-21 Fuji Photo Film Co Ltd 感熱記録材料
US5578323A (en) 1992-06-15 1996-11-26 Emisphere Technologies, Inc. Proteinoid carriers and methods for preparation and use thereof
US6221367B1 (en) 1992-06-15 2001-04-24 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US5541155A (en) 1994-04-22 1996-07-30 Emisphere Technologies, Inc. Acids and acid salts and their use in delivery systems
US6099856A (en) 1992-06-15 2000-08-08 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US5451410A (en) 1993-04-22 1995-09-19 Emisphere Technologies, Inc. Modified amino acids for encapsulating active agents
US5443841A (en) 1992-06-15 1995-08-22 Emisphere Technologies, Inc. Proteinoid microspheres and methods for preparation and use thereof
US5447728A (en) 1992-06-15 1995-09-05 Emisphere Technologies, Inc. Desferrioxamine oral delivery system
US5693338A (en) 1994-09-29 1997-12-02 Emisphere Technologies, Inc. Diketopiperazine-based delivery systems
US5714167A (en) 1992-06-15 1998-02-03 Emisphere Technologies, Inc. Active agent transport systems
US5629020A (en) 1994-04-22 1997-05-13 Emisphere Technologies, Inc. Modified amino acids for drug delivery
CA2070061C (en) 1991-06-07 2004-02-10 Shigeyuki Takama Physiologically active polypeptide-containing pharmaceutical composition
US5338837A (en) 1991-12-13 1994-08-16 The Trustees Of Princeton University Glycosylated steroid derivatives for transport across biological membranes and process for making same
US5352461A (en) 1992-03-11 1994-10-04 Pharmaceutical Discovery Corporation Self assembling diketopiperazine drug delivery system
US5811127A (en) 1992-06-15 1998-09-22 Emisphere Technologies, Inc. Desferrioxamine oral delivery system
US5792451A (en) 1994-03-02 1998-08-11 Emisphere Technologies, Inc. Oral drug delivery compositions and methods
HU211995B (en) 1992-06-30 1996-01-29 Gyogyszerkutato Intezet Process to prepare novel benzoyl amino acid derivs. and pharmaceutical compns. contg.them
US5401516A (en) 1992-12-21 1995-03-28 Emisphere Technologies, Inc. Modified hydrolyzed vegetable protein microspheres and methods for preparation and use thereof
US5958457A (en) 1993-04-22 1999-09-28 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for the delivery of antigens
CA2160693C (en) 1993-04-22 2010-03-16 Sam J. Milstein Oral drug delivery compositions and methods
US5709861A (en) 1993-04-22 1998-01-20 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for the delivery of antigens
US5643957A (en) 1993-04-22 1997-07-01 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US6001347A (en) 1995-03-31 1999-12-14 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5965121A (en) 1995-03-31 1999-10-12 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5650386A (en) * 1995-03-31 1997-07-22 Emisphere Technologies, Inc. Compositions for oral delivery of active agents
BR9604880A (pt) 1995-03-31 1998-05-19 Emisphere Tech Inc Composto composição forma de unidade de dosagem métodos para administração de um agente biologicamente ativo para preparar uma composição para administração de um agente ativo e para preparar um composto e composição farmacológica
US6090958A (en) 1995-03-31 2000-07-18 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5989539A (en) 1995-03-31 1999-11-23 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5866536A (en) 1995-03-31 1999-02-02 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5820881A (en) 1995-04-28 1998-10-13 Emisphere Technologies, Inc. Microspheres of diamide-dicarboxylic acids
US5824345A (en) 1995-06-07 1998-10-20 Emisphere Technologies, Inc. Fragrances and flavorants
US6051258A (en) 1995-06-07 2000-04-18 Emisphere Technologies, Inc. Proteinoid emulsions and methods for preparation and use thereof
US5750147A (en) 1995-06-07 1998-05-12 Emisphere Technologies, Inc. Method of solubilizing and encapsulating itraconazole
US5667806A (en) 1995-06-07 1997-09-16 Emisphere Technologies, Inc. Spray drying method and apparatus
AU7072596A (en) 1995-09-11 1997-04-01 Emisphere Technologies, Inc. Method for preparing omega-aminoalkanoic acid derivatives from cycloalkanones
SI9720025A (sl) * 1996-03-29 1999-08-31 Emishphere Technologies, Inc. Spojine in sestavki za prenos aktivne snovi
US5804688A (en) 1997-02-07 1998-09-08 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5776888A (en) 1997-02-07 1998-07-07 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5990166A (en) 1997-02-07 1999-11-23 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US6051561A (en) 1997-02-07 2000-04-18 Emisphere Technologies Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5773647A (en) 1997-02-07 1998-06-30 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US6060513A (en) 1997-02-07 2000-05-09 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5879681A (en) 1997-02-07 1999-03-09 Emisphere Technolgies Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5876710A (en) 1997-02-07 1999-03-02 Emisphere Technologies Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5939381A (en) 1997-02-07 1999-08-17 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5863944A (en) * 1997-04-30 1999-01-26 Emisphere Technologies, Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5962710A (en) 1997-05-09 1999-10-05 Emisphere Technologies, Inc. Method of preparing salicyloylamino acids
WO1999029705A2 (en) 1997-12-08 1999-06-17 Glycomed Incorporated Sialyl lewis x and sialyl lewis a glycomimetics
NZ509239A (en) 1998-07-27 2002-10-25 Emisphere Tech Inc 2-(4-(N-salicyloyl)aminophenyl)propionic acid useful as a carrier in compositions for delivering active agents
HUP0103188A2 (hu) 1998-08-07 2001-12-28 Emisphere Technologies, Inc. Vegyületek és készítmények hatóanyagok célbajuttatására
AU3240900A (en) 1999-02-22 2000-09-04 Emisphere Holdings, Inc. Solid oral dosage form containing heparin or a heparinoid in combination with a carrier
EP1175390B1 (en) 1999-04-05 2005-02-02 Emisphere Technologies, Inc. Disodium salts, monohydrates, and ethanol solvates

Also Published As

Publication number Publication date
NZ509238A (en) 2003-07-25
JP2002521455A (ja) 2002-07-16
EP1100522A4 (en) 2003-01-08
ES2242412T3 (es) 2005-11-01
US6642411B1 (en) 2003-11-04
AU751612B2 (en) 2002-08-22
CA2338358A1 (en) 2000-02-10
JP2003517438A (ja) 2003-05-27
BR9912694A (pt) 2002-01-02
CA2338358C (en) 2009-04-21
EP1100771A1 (en) 2001-05-23
DE69925276D1 (de) 2005-06-16
CN1311686A (zh) 2001-09-05
HK1036970A1 (en) 2002-01-25
IL140710A (en) 2006-12-31
EP1100522A1 (en) 2001-05-23
HUP0103318A2 (hu) 2002-01-28
AU745290B2 (en) 2002-03-21
JP4675481B2 (ja) 2011-04-20
CN1205994C (zh) 2005-06-15
KR20010074777A (ko) 2001-08-09
EP1100771B1 (en) 2005-05-11
ATE295347T1 (de) 2005-05-15
WO2000006534A9 (en) 2000-07-13
WO2000006534A1 (en) 2000-02-10
TR200100922T2 (tr) 2001-09-21
AU5323799A (en) 2000-02-21
IL140710A0 (en) 2002-02-10
AU5321099A (en) 2000-02-21
NZ509239A (en) 2002-10-25
CA2338419C (en) 2011-06-14
CA2338419A1 (en) 2000-02-10
WO2000006184A1 (en) 2000-02-10
JP5144861B2 (ja) 2013-02-13
DE69925276T2 (de) 2005-10-06
EP1100522B1 (en) 2016-12-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2001331A3 (cs) Pulmonální dodávání aktivních přípravků
US6440929B1 (en) Pulmonary delivery of active agents
JP4637365B2 (ja) 活性剤デリバリーのための化合物及び組成物
EP1156787B1 (en) Oxadiazole compounds and compositions for delivering active agents
JP5089845B2 (ja) シアノフェノキシカルボン酸化合物および活性薬剤送達用組成物
AU2003223158B2 (en) Polymorphs of sodium 4-[(4-chloro-2-hydroxybenzoyl)amino]butanoate
JP2004506711A (ja) 活性剤デリバリー用化合物および組成物
MXPA06013251A (es) Compuestos y composiciones de aril-cetona para suministrar agentes activos.
US20030225300A1 (en) Compounds and compositions for delivering active agents
US7417061B2 (en) Oxadiazole compounds and compositions for delivering active agents
ZA200100227B (en) Pulmonary delivery of active agents.
MXPA01000925A (en) Pulmonary delivery of active agents
MXPA01000924A (en) Compounds and compositions for delivering active agents
MXPA99009632A (en) Compounds and compositions for delivering active agents