CZ20013264A3 - Kmeny Lactobacillus - Google Patents
Kmeny Lactobacillus Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20013264A3 CZ20013264A3 CZ20013264A CZ20013264A CZ20013264A3 CZ 20013264 A3 CZ20013264 A3 CZ 20013264A3 CZ 20013264 A CZ20013264 A CZ 20013264A CZ 20013264 A CZ20013264 A CZ 20013264A CZ 20013264 A3 CZ20013264 A3 CZ 20013264A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- strain
- cells
- lactobacillus
- lactobacilla
- milk
- Prior art date
Links
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 title claims abstract description 18
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 title claims abstract description 15
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 28
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 14
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 14
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 11
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims description 8
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims description 7
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 6
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 claims description 5
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 5
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 claims description 4
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000003304 gavage Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 4
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 4
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 claims description 2
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 claims 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 26
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 20
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 18
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 16
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 13
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 13
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 13
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 11
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 11
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 10
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 9
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 9
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 9
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 9
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 9
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 8
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 8
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 7
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 7
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 6
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 5
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 230000017307 interleukin-4 production Effects 0.000 description 4
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 3
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 3
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 2
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 2
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 210000000173 T-lymphoid precursor cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000008370 chocolate flavor Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 229920001903 high density polyethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000004700 high-density polyethylene Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000224432 Entamoeba histolytica Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 241000224466 Giardia Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102100037907 High mobility group protein B1 Human genes 0.000 description 1
- 101710168537 High mobility group protein B1 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241001625930 Luria Species 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 241000607000 Plesiomonas Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 240000003085 Quassia amara Species 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000005187 foaming Methods 0.000 description 1
- YMDXZJFXQJVXBF-STHAYSLISA-N fosfomycin Chemical compound C[C@@H]1O[C@@H]1P(O)(O)=O YMDXZJFXQJVXBF-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000004349 growth plate Anatomy 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000897 modulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 210000004915 pus Anatomy 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 description 1
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
- A23G9/32—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G9/36—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
- A23G9/363—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/175—Rhamnosus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Confectionery (AREA)
- Cereal-Derived Products (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález se týká nových, mikroorganismů rodu Lactobacillus, které jsou užitečné při prevenci průjmu, zprostředkovaného pravděpodobně patogenními bakteriemi. Zejména se předkládaný vynález týká užiti uvedených mikroorganismů pro přípravu poživatelného nosiče a prostředku obsahujícího tento nosič.
Dosavadní stav techniky
Organismy, které jako hlavní metabolickou složku produkují kyselinu mléčnou, jsou dlouho známy. Tyto bakterie se mohou nacházet v mléce nebo v továrnách, které zpracovávají mléko, zejména v živých nebo odumřelých rostlinách, ale také ve střevě lidí a zvířat. Tyto mikroorganismy, shrnuté pod výrazem „bakterie kyseliny mléčné, představují dosti nehomogenní skupinu a zahrnují, například, rody Lactococcus, Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium, Pediococcus apod..
Bakterie kyseliny mléčné byly využity jako fermentační činidla ke konzervaci potravy při nízkém pH a k působení fermentačních prostředků, vytvořených během jejich fermentační činnosti, k inhibici růstu ničících bakterií. Nakonec byly bakterie kyseliny mléčné užity pro přípravu různých druhů potravin jako je sýr, jogurt a další fermentované mléčné produkty.
Docela nedávno získaly bakterie kyseliny mléčné velký díl pozornosti, kdy bylo zjištěno, že některé kmeny mají po požití cenné vlastnosti pro člověka a zvířata. Zejména určité kmeny rodu Lactobacillus nebo Bifidobacterium vykazovaly schopnost kolonizovat střevní sliznici a pomáhat při udržování dobrého stavu člověka a zvířete.
S ohledem k tomu, EP 0 768 375 popisuje specifické kmeny Bifidobacteria, které jsou schopné implantace do střevní flóry a mohou ulpívat na střevních buňkách. Tyto Bifidobacteria jsou označována jako pomáhající při imunomodulaci tím, že jsou schopná kompetitivního vyloučení adhese patogenní bakterie k střevním buňkám, tedy pomáhají v udržování zdraví j ednotlivce.
Během posledních několika let byl výzkum na potenciální užití probiotických životaschopné také soustředěn činidel.
mikrobiální bakterií
Probiotika přípravky, kyseliny j sou které napomáhají mikroflóry ve střevě.
mléčné jako považována za zdraví jednotlivce
Mikrobiální udržováním probiotické přirozené přípravky mohou být v případě jejich účinných mikrobů a pokud způsoby běžně akceptovány jako jejich účinku jsou známy. Probiotika jsou míněny k připojení k střevní sliznici, kolonizaci střevního traktu a rovněž k předcházení připojení škodlivých mikroorganismů na střevní trakt. Rozhodující nezbytný předpoklad jejich účinku je v tom, že mohou dosahovat střevní sliznice ve vhodné a životaschopné formě a nejsou rozrušeny v horních částech trávicího traktu, zvláště účinkem nízkého pH, které převládá v žaludku.
V tomto ohledu, WO 97/00078 popisuje určitý kmen, který se nazývá Lactobacillus GG (ATCC 53103), jako probiotikum. Tento mikroorganismus je zejména obsažen ve způsobu prevence nebo léčení hypersenzitivních reakcí navozených potravou, kdy je podáván příjemci spolu s potravou, která podléhá hydrolýze působením pepsinu a/nebo trypsinu. Vybraný kmen Lactobacillus je popisován jako vykazující adhesivní a kolonizační schopnosti a mající systém enzymů proteáz, tak že bílkovinná látka obsažená v podávané potravě je dále hydrolyzována prostřednictvím proteáz, které jsou produkované určitým kmenem Lactobacilla. Tento způsob, který je popisovaný v této
přihlášce, bude mít eventuelně za následek vzestup bílkovinné látky střeva, která nevykazuje podstatné množství alergenní látky.
Dále, v EP 0 bakterií kyseliny Heliobacter pylori, v přípravě nosiče, spojený s účinkem
577 903, mléčné, je připraveno užití které mají schopnost uznanou příčinou vývoje takových náhrady který je který je určeného pro léčbu nebo profylaxi
Heliobacter pylori.
vředu, vředu,
Na základě znalosti cenných vlastností určitých kmenů bakterií bakterií zdravotní kyseliny mléčné, kyseliny mléčné, které jsou stav člověka a/nebo zvířete.
jsou v oboru požadovány další které jsou prospěšné pro kmeny dobrý
Podstata vynálezu
Otázkou předkládaného vynálezu je tedy poskytnout další bakteriální kmeny, které vykazují nové vlastnosti, které jsou prospěšné pro člověka a/nebo zvířata.
Výše uvedená otázka byla vyřešena novými mikroorganismy, jmenovitě bakteriemi kyseliny mléčné, příslušející k rodu Lactobacillus, které mají schopnost předcházet kolonizaci střeva patogenními bakteriemi, které způsobují průjem.
Podle výhodného provedení, je kmen Lactiobacillu schopný adhese ke střevní sliznici savců a může růst za přítomnosti více jak 4% žlučových solí.
Avšak, podle jiného výhodného provedení, je bakterie kyseliny mléčné vybrána ze skupiny, která sestává z Lactobacillus rhamnosus nebo Lactobacillus paracasei, výhodně Lactobacillus paracasei a výhodněji Lactobacillus paracasei CNCM 1-2116.
Mikroorganismy, podle vynálezu, vykazuji mimo jiné následující vlastnosti: jsou gram positivní, negativní na katalázu, negativní na tvorbu NH3 formy argininu a negativní na produkci C02, produkují L(+) kyselinu mléčnou, jsou schopné růstu za přítomnosti žlučových solí v koncentraci vyšší než 0,4% a mohou podstatně předcházet kolonizaci střevních buněk bakteriemi přivozujícími průjem, jako je patogenní E. coli, například enteropatogenní E. coli (EPEC) nebo salmonella, například salmonella typhimurium.
Nové mikroorganismy mohou být užity pro přípravu různých poživatelných nosičů, jako je mléko, jogurt, tvaroh, fermentovaná mléka, fermentované produkty na basi mléka, fermentované produkty na basi obilovin, prášková mléka, výživa pro kojence a v nosiči mohou být obsaženy v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 1011 cfu/g. Pro účel předkládaného vynálezu bude zkratka cfu označovat „jednotku tvořící kolonie, která je definována jako množství bakteriálních buněk, jak ukazují mikrobiální počty na agarových plotnách.
Předkládaný vynález také poskytuje potravinový nebo farmaceutický prostředek, který obsahuje nejméně jeden z kmenů Lactobacilla, majícího výše uvedené vlastnosti a/nebo který obsahuje kulturu supernatantu, ve které rostou mikroorganismy nebo jejich frakce.
Pro přípravu potravinového prostředku, podle vynálezu, je začleněn ve vhodném nosiči nejméně jeden z kmenů Lactobacilla, podle vynálezu, v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 1011 cfu/g, výhodně od kolem 106 cfu/g až kolem 1O10 cfu/g, výhodněji od kolem 107 cfu/g až kolem 109 cfu/g.
V případě farmaceutického prostředku může být produkt připraven ve formě tablet, kapalných bakteriálních suspensí, sušených orálních doplňků, vlhkých orálních doplňků, suchých ·
potravinových přípravků pro podáváni sondou a vlhkých potravinových přípravků pro podávání sondou s obsahem množství kmenů Lactobacilla v rozmezí vyšším než kolem 1012 cfu/g, výhodně od kolem 107 cfu/g až kolem 10u cfu/g, výhodněji od kolem 107 cfu/g až kolem 1O10 cfu/g.
Činnost nových mikroorganismů ve střevě jednotlivce je přirozeně závislá na dávce. Čím více nových mikroorganismů je začleněno prostřednictvím požití výše uvedeného potravinového nebo farmaceutického prostředku, tím vyšší je ochranná a/nebo léčebná účinnost mikroorganismů. Jelikož nové mikroorganismy nejsou škodlivé lidem a zvířatům a mohou být eventuelně izolovány ze stolic dětí, může být jejich vysoké množství začleněno tak, že podstatně velká část střeva jednotlivce bude kolonizována novými mikroorganismy.
Avšak, podle jiného výhodného provedení, může být pro přípravu jednoho z výše uvedených poživatelných nosičů použit supernatant kultury kmene Lactobacilla, podle vynálezu. Supernatant může být užit jako takový nebo může být sušen za podmínek, které neničí metabolické sloučeniny produkované mikroorganismy do kapalného prostředí, jako je například lyofílizace, a může být začleněn v nosiči. Za účelem snížit na minimum množství neznámých sloučenin v supernatantu, budou kmeny Lactobacilla výhodně růst v definovaném prostředí, prostředku, který je znám a neovlivní negativně hostitele, ve kterém je začleněn. Dále odborníci budou na základě svých obecných znalostí, popřípadě zbavovat supernatant nežádoucích produktů, například prostřednictvím chromatografie.
Během rozsáhlých studií, vedoucích k předkládanému vynálezu, zkoumali vynálezci stolice dětí a izolovali z nich různé bakteriální kmeny. Tyto kmeny byly následně zkoumány pro jejich schopnost předcházet kolonizaci epiteliálních buněk bakteriemi, které jsou známou příčinou průjmu.
······ · ·· 4·
9 9 · 4 · · · 4 4
4 4 *44 44 é ···· ··*·· ·· ·· ····· ·· ·
Některé bakteriální rody, zahrnující Lactobacillus, Lactococcus a Streptococcus, byly sledovány pro jejich schopnosti zamezovat průjmu. Tyto zkoušky inhibiční schopnosti byly provedeny hlavně s patogenní E. coli a salmonellou typhimurium jako representativními pro patogenní mikroorganismy, které způsobují průjem u jednotlivce.
Ve vhodném prostředí byly pěstovány různé bakterie kyseliny mléčné, v takovém jako je MRS, Hugo-Jago nebo M17 při teplotách od kolem 30° do 40°C, které odpovídají jejich optimální růstové teplotě. Po dosažení stacionárního růstu byly bakterie shromážděny centrifugací a znovu rozptýleny ve fysiologickém roztoku NaCl. Mezi jednotlivými zkouškami byly bakteriální buňky skladovány zmrazené(-20°C).
Pro stanovení antibakteriálních vlastností byly vybrány následující přístupy.
Podle jednoho zápisu, byly pěstované kmeny Lactobacilla, podle vynálezu,zkoušeny pro svoji schopnost zamezovat adhesi patogenních bakterií, způsobujících průjem, ke střevním buňkám nebo zamezovat jejich invasi do střevních buněk. Nakonec, byly střevní buňky přivedeny do styku s patogenními bakteriemi a pěstovanými kmeny Lactobacilla, podle vynálezu, a byla stanovena rychlost adhese nebo invase.
Podle druhého zápisu, byl supernatant buněčné kultury kmenů Lactobacilla, podle vynálezu, přidán spolu s patogenními mikroorganismy ke střevním buňkám a byla stanovena rychlost adhese nebo invase.
Může být zřejmé, že pěstované Lactobacilly a supernatant se prokázaly extrémně účinné při prevenci obojího, adhese a invase do střevních buněk, což prokazuje, že metabolické sloučeniny, produkované novými mikroorganismy, jsou nejspíše odpovědné za činnost proti průjmu.
Dále se k výše uvedenému objevu ukazuje, že kmeny, podle vynálezu, kupodivu vykazují antialergenní vlastnosti, kdy uvedené kmeny mají dopad na syntézu různých imunologických mediátorů.
Je obecně uznáváno, že humorální imunitní odpovědi a alergické reakce jsou zprostředkovány CD4+ T buňkami, které nesou fenotyp typu 2(Th2). Th2 buňky jsou charakterizovány tvorbou vysokých hladin interleukinu 4 (IL-4) a cytokinu, požadovaného pro sekreci IgE, který je hlavní skupinou protilátek, začleněnou v alergických reakcích.
Diferenciace Th2 buněk je poškozována IFN-γ, příslušným cytokinem, který je produkovaný vzájemně se vylučující Thl podskupinou CD4+T buněk. Uvedené Thl buňky jsou na druhé straně silně indukované interleukinem 12 (IL-12). Naproti tomu IL-10, další cytokin, má silně rušivý dopad na proliferaci Thl buněk a tudíž se uvažuje, že má úlohu v imunosupresivních reakcích.
Shrnuto, oba IL-12 a IL-10 mají silné modulační účinky na vývoj CD4+ T buněk ovlivněním vývoje podskupiny Thl. IL-12 je klíčový regulační cytokin pro indukci diferenciace Thl a tedy inhibuje tvorbu Th2 odpovědí. Hlavním způsobem inhibice Th2 buněk je tudíž spatřován ve stimulaci syntézy IL-12 pomocnými buňkami.
Je dobře známo, že některé složky gram negativních bakterií, jako je LPS, navozují vysoké hladiny IL-12 v adherentních buňkách, jako jsou makrofágy a dendritické buňky. Shodně se ukazuje, že gram negativní bakterie mohou silně ovlivnit diferenciaci CD4+ T buněk směrem k Thl fenotypu.
Mikroorganismy STU, jako například kmeny Lactobacilla, podle vynálezu, byly zkoušeny pro potenciální úlohu v indukci cytokinů, zahrnutých v regulaci diferenciace CD4+ T buněk. Zejména byl studován účinek STU na fenotyp CD4+ T buněk, podstupujících diferenciaci Th2.
V tomto ohledu byla schopnost STU indukovat syntézu mRNA, která kóduje tyto dva regulační cytokiny v myších adhrerentních buňkách získaných z kostní dřeně, srovnána se 4 dalšími kmeny Lactobacilla a s kontrolní gram negativní bakterií (E. coli K12). Po 6ti hodinové inkubaci buněk s různými ředěními v rozmezí od 107 až 109 cfu/ml byla mRNA měřena semikvantitativní RT-PCR.
Ačkoliv všechny kmeny Lactobacilla mohou indukovat transkripci IL-12 mRNA do určitého stupně, ST 11 se může ukazovat jako nejsilnější vyvolavatel, vzhledem k tomu, že může být detekován silný PCR signál dokonce při nejnižší bakteriální dávce. Ve skutečnosti byla schopnost ST11 indukovat transkripci IL-12 mRNA tak silná jako u E.coli. Indukce IL-10 mRNA byla obecně slabší než pro IL-12 mRNA, protože signál mohl být detekován pouze při vyšších bakteriálních dávkách. Nicméně, STU byl nejsilnějším vyvolavatelem IL-10 mRNA, jak srovnáno s jinými Lactobacilly a kontrolní E.coli.
STU se tedy zdá být schopný indukce imunoregulačních cyrtokinů, zahrnutých v diferenciaci CD4+ T buněk. Jeho silná schopnost indukovat IL-12 z něho dělá kandidáta inhibice Th2 odpovědí a jeho měřitelná indukce IL-10 může předcházet zánětlivým odpovědím.
Dále bylo k výše uvedenému objevu určeno, který STU měl inhibiční účinek na CD4+ T buňky, podléhající Th2 diferenciaci a který měl positivní účinek na funkce Thl. Byl užit dobře založený systém pro diferenciaci buněk v kultuře, kde prekursor
CD4+ T buněk byl polyklonálně aktivován a modulován, až došlo k diferenciaci Thl nebo Th2, v závislosti na typu společného stimulu v živném prostředí.Thl/Th2 diferenciace byla indukována během 7 denní primární kultury, poté byly buňky opět stimulovány po 2 dny v sekundární kultuře, obsahující samotné prostředí a přídavek specifického fenotypu (Thl nebo Th2) byl stanoven měřením typů cytokinů, produkovaných v supematantu (iFN-γ versus IL-4).
Je obecně známo, že prekursor CD4+ T buněk z myší BALB/c dosud především rozlišoval predominantní Th2 fenotyp ((vysoké IL-4, nízké IFN-γ V supernatantech dvoutýdenní kultury) po aktivaci za neutrálních podmínek (samotné prostředí v týdenní kultuře) . Tento fenotyp mohl být kompletně navrácen do původního stavu k původnímu Thl (vysoké IFN-γ, nízké IL-4) při přidání blokujících monoklonárních protilátek k IL-4 v týdenní kultuře.
Ke zkoumání potenciální úlohy STU na inhibici Th2, byly v týdenní kultuře aktivovány čištěné prekursory CD4+ T buněk z BALB/c myší za přítomnosti adherentních buněk z kostní dřeně jako pomocných buněk. Tyto buňky byly společně pěstovány buď v samotném prostředí nebo za přítomnosti lmg/ml LPS nebo 108 cfu/ml STU nebo 108 cfu/ml jiného Lactobacilla. Po čase byly buňky promyty a CD4+ T buňky byly opět jednou čištěny a znovu stimulovány ve dvoutýdenní kultuře v samotném prostředí.
Cytokiny, produkované diferencovanými CD4+ T buňkami, byly měřeny po dvou dnech. Jak očekáváno, buňky, které byly diferencované za přítomnosti samotného prostředí, se ukázaly dominantní fenotypu Th2. Přidání STU do týdenní kultury silně ovlivňovalo výsledek Th2 diferenciace, jak to vyplývá z 8násobného snížení produkce IL-4. Tato inhibice byla podobnou veličinou jako ta, která byla pozorována v kulturách, získaných z buněk, které byly diferencovány za přítomnosti LPS. Naproti
| • «4» | 99 | ||
| 4 | 4 | 4 | 4 |
| 4 | • | 4 | |
| 4 | 4 | 4 4 | |
| 4 4 | • | 4 | |
| 4» | 44 | 4 |
4*
4 4 4 4 t · · ♦ «4« 4
4 4 4 tomu, další kmen Lactobacilla měl neměřitelný dopad na hladiny il-4. Je zajímavé, že hladiny iFN-γ nebyly zvýšeny při přidání STU do týdenní kultury.
CD4+ T buňkami, zvyšuje produkci
IL-10 s
Shrnuto, STU specificky snižuje produkci IL-4 které podléhají diferenciaci Th2, ale nevýznamně sekreci iFN-γ. Tato skutečnost, že ST11 nezvyšuje může být vztažena k jeho schopnosti indukovat dopad
IFN-y, důsledkem, že to může mít nízký zánětlivý navzdory j eho činnosti proti Th2.
Následně
Lactobacilla, se může zdát, že STU je které mají profil proti Th2, j eden který je kmenů dělá výbornými kandidáty pro jejich užití s protialergickou a probiotickou činností.
jako bakterií
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 znázorňuje schéma, ilustrující pokusu na buněčné kultuře, ve které pěstované buňky zkoušce pro inhibici adhese patogenní k epiteliálním buňkám.
výsledky
STU jsou užity ve bakterie E.coli
Obr. 2 znázorňuje schéma, ilustrující výsledky pokusu na buněčné kultuře, ve které supernatant kultury STU je užit ve zkoušce pro inhibici adhese patogenní bakterie E.coli k epiteliálním buňkám.
Obr. 3 znázorňuje schéma, ilustrující výsledky pokusu na buněčné kultuře, ve které pěstované buňky ST11 jsou užity ve zkoušce pro inhibici invase salmonelly typhimurium k epiteliálním buňkám.
Obr. 4 znázorňuje schéma, ilustrující výsledky pokusu na buněčné kultuře, ve které supernatant kultury STU je užit ve
zkoušce pro inhibici invase salmonelly typhimurium k epiteliálním buňkám.
Obr. 5 znázorňuje acidifikaci kmene L.casei CNCM 1-2116 (označované STU) v různém růstovém prostředí.
Obr. 6 znázorňuje rychlost přežiti kmene L.casei STU při 10°C, měřenou během 30ti dnů.
Obr. 7 znázorňuje složení mRNA pro IL-12 a IL-10 v myších adherentních buňkách, získaných z kostní dřeně, po inkubaci buněk s různými ředěními STU.
Obr. 8 znázorňuje výsledek diferenciace Th2 jako důsledek snížení produkce IL-4.
Vynález bude nyní popsán následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahzu vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Prostředí a roztoky:
MRS(Difco)
Hugo-Jago(trypton 30g/l (Difco), extrakt z kvasinek 10 g/1 (Difco), laktóza 5 g/1 (Difco), KH2PO4 6 g/1, hovězí extrakt 2 g/1 (Difco) , agar 2 g /1 (Difco))
M17 (Difco)
DMEM (Eagle prostředí v Dulbeccově modifikaci)
CFA ( podle Ghosh a spol Journal of Clinical microbiology, 1993 31 2163-6)
Míiller Hinton agar (Oxoid) ······ · · · ·· • · · · · · · · ·4 • · · · · · ·· • · · · · · · · ·· y Λ ········· <2 ·· ·· ··· ·· ·· «
LB (Luria Bertami, Maniatis, A Laboratory Handbook, Cold Spring Harbor, 1992)
Antibiotika byla získána ze Sigma
C14 acetát (53,4 ci/mmol, Amersham International PLC)
PBS (NaCl 8 g/1, KC1 0.2 g/1, Na2HPO4 1.15 g/1, KH2PO4 0.2 g/D
Roztok Trypsin-EDTA (Seromed)
FCS fetálni telecí sérum (Gibco)
E.coli DAEC 1845 byla získána z( Washington University, Seattle) a E.coli JPN15 byla získána z (Center for Vaccine Development of the University of Maryland, USA). Kmen salmonella typhimurium SL 1344 byl získán z (Department of microbiology, Standford University, CA, USA) .
Příklad 1
Isolace bakterií kyseliny mléčné ze stolice dětí
Z plen 16ti zdravých dětí ve stáří 15 až 27 dní, byly sebrány čerstvé stolice. 1 g čerstvé stolice byl umístěn za anaerobních podmínek pro transport do laboratoře a během dvou hodin proběhly mikrobiální analýzy zkoumaných vzorků různými ředěními v Ringerově roztoku a očkováním na selektivní živné půdy. K izolaci bakterie kyseliny mléčné byl užit MRS agar plus antibiotika ( phosphomycin 80 pg/ml, sulfamethoxazol 93 pg/nfl, trirnethoprim 5 pg/ml), které byly inkubovány po dobu 48 hodin při 37C. Kolonie byly náhodně vybrány a čištěny. Fysiologické a genetické charakteristiky byl provedeny na izolátech.
• · · ·
Příklad 2
Kultivace buněk Caco-2
Pro inhibiční zkoušky byla buněčná linie Caco-2. Tato buněčná jako střevní model užita linie vlastnosti pro střevní buňky, polarizace, exprese střevních strukturálních polypeptidů apod..
takové enzymů, představuje význačné jako je například produkce určitých
Buňky byl pěstovány na jmenovitě na miskách z plastické a množení, na odmaštěných a sterilizovaných skleněných mm (Corning) pro zkoušky pro inhibiční zkoušky.
se šesti vyhloubeními 22 x 22 na plotnách s 24 vyhloubeními třech hmoty 25 různých cm2 (Corning) podložkách, pro růst plotnách adhese a bylo živné prostředí (DMEM)
Po druhém dni pěstování živné prostředí doplněno s 100 pg/ml amphoterinu a 20% po dobu 30ti minut. Pěstování v ovzduší, které obsahovalo 90% vzduchu a měněno. Před užitím bylo pěni ci Ί i nu/streptomyci nu, inaktivovánými provedeno při
Buňky vyhloubení
7.2.
10% CO2.
ze stěn při pH buněčné denně
U/ml
FCS, při
37°C
56°C bylo děleny každých šest dní. Buňky byly působením PBS s 0.25%
Pro neutralizační účinek byly sebrány trypsinu a trypsinu byl objem FCS, otáčkách za mM EDTA získané suspenzi přidán odpovídající centrifugována (10 minut při 1000 usazenina byla opět umístěna do kultury. Do nové lahve bylo přemístěno kolem 3.5 x 105 buněk, kultivovány až do vzniku splývající monovrstvy.
směs byla minutu) a kultivační které byly • « · ·
Přiklad 3
Kultivace bakterií
STU :
Bakteriální kmen E.coli byl skladován při teplotě -20°C v MRS prostředí, které obsahovalo 15% glycerolu. Kmen rostl za anaerobních podmínek v MRS a dvakrát byl během 24 hodin přenesen před užitím inhibičních zkoušek do nového prostředí. Pro zkoušku byla užita koncentrace 2xl09 cfu/ml.
Supernatant byl shromážděn centrifugací při 20.000 otáčkách za minutu po dobu jedné hodiny a následně byl získaný supernatant zkoumán na přítomnost bakterií.
E.coli:
Byly užity dva kmeny E.coli DAEC C 1845 (Enteroinvasivní E.coli) a E-coli JPN 15 (EPEC; enteropatogenní E.coli).
První pasáž po rozmražení byla provedena na CFA-Muller Hinton agaru, který je vhodný pro působení exprese adhesivních složek bakterií.
Bakteriální buňky byl před každou zkouškou inkubovány při 37 °C a přemístěny do nového prostředí, což bylo provedeno dvakrát po 24 hodinách. Jelikož JPN15 obsahuje geny pro ampicilin, bylo uvedené antibiotikum užito pro selekci během růstu.
Salmonella:
Pro zkoušky byl použit kmen SL 1344 salmonelly typhimurium, který rostl před použitím v LB prostředí.
Příklad 4
Inhibiční zkouška pro E.coli
Patogenní bakteriální kmeny byly po druhém přenosu do nového prostředí označeny radioizotopy za použití C14-acetátu při 10 pCi/ml V LB prostředí. Inkubace kmenů v tomto prostředí proběhla během 18ti hodin při teplotě 37°C.
Bakteriální suspenze byla následně podrobena centrifugaci (1041 g, 15 minut), tak že se eliminoval supernatant se zbývajícím C14-acetátem. Usazenina byla rozptýlena a promyta v PBS a buňky byly rozptýleny v 1% sterilní manose v koncentraci kolem 108 buněk/ml. Manosa je známá k inhibici nespecifické adhese.
Rozdílné bakteriální kmeny (E.coli) byly přivedeny do styku s monovrstvou buněk Caco-2 (37°C, 10% CO2, 90% vzduchu) po dobu 3 hodin. Byly provedeny ty samé zkoušky za použití supernatantu (získaného centrifugaci při 20.000 otáčkách za minutu po dobu 40ti minut).
Kontrolní patogenní bakterie byly přivedeny do styku s Caco- monovrstvou bez současného přidání ST11 nebo kultury supernatantu.
Prostředí bylo po 3 hodinové inkubaci změněno a monovrstva byla třikrát promyta v PBS. Každé promytí zahrnovalo 20x míchání roztoku PBS tak jako hlavně eliminaci veškeré nespecifické adhese. Buňky byly poté rozrušeny přidáním 1 ml uhličitanu sodného a inkubovány po dobu 40ti minut při 37°C. Pevný podíl (250 μΐ) byl po homogenizaci zředěn v 5 ml scintilační kapaliny (Hionic-fluor Packard) a spočítán (Packard 2000) . Procento adhese patogenních buněk k buňkám Caco-2 bylo
spočítáno proti kontrole, která byla nastavena na 100% (adhese nebo pro příklad 5 invase).
Přiklad 5
Inhibični zkouška pro salmonellu
Salmonelly jsou bakterie, které napadají epiteliální buňky a množí se tam. Pro určení inhibični činnosti ST11 kmenu salmonella typhimurium, byl inkubován SL 1344 v prostředí s obsahem C14-acetátu, jak popsáno výše, a byl podroben zkoušce popsané v příkladu 4.
Buňky Caco-2 byly po inkubaci promyty PBS k eliminaci všech neadherentních buněk. Následně bylo přidáno prostředí, které obsahovalo gentamycin (20 pg/ml) a inkubace trvala 1 hodinu při 37°C. Gentamycin je antibiotiku nepronikající střevními buňkami, tak že všechny extracellulární mikroorganismy byly usmrceny, kdežto salmonella, která již pronikla střevními buňkami, bude přežívat. Po promytí buněk dvakrát v PBS, byly buňky rozrušeny přidáním sterilní destilované vody a byla měřena radioaktivita, jak popsáno v příkladu 4.
Výsledky pokusů 4 a 5 jsou znázorněny na obr. 1 až 4. Může se zdát, že pěstované buňky STU a kultura supernatantu byly extrémně účinné v prevenci adhese a invase patogenními mikroorganismy, které způsobují průjem, do střevních buněk.
Přiklad 6
Vlastnosti STU
STU byl podroben inkubaci v napodobené žaludeční šťávě. Napodobená žaludeční šťáva byla připravena suspendováním pepsinu (3g/l) ve sterilním izotonickém roztoku chloridu
sodného (0.5% hmotnostních) a úpravou pH na 2.0, respektive na 3.0 koncentrovanou HC1. STU rostl v různých množstvích ve výše uvedeném prostředí a byla určována resistence mikroorganismů.
Výsledky jsou shrnuty v tabulce I níže.
Tabulka I
| pH | Cfu/ml v čase 0 | Cfu v čase 1 minuta | Cfu v čase 15 minut | Cfu v čase 30 minut | Cfu v čase 60 minut |
| 2.0 | 2. Οχ 109 | 1.8 x 109 | 1.2 x 109 | 3.7 x 108 | 7.0 x 103 |
| 3.0 | 2.Οχ 109 | 1.9 x 109 | 1.7 x 109 | 1.7 x 109 | 8.4 x 10® |
STU měl následující vlastnosti, jak určeno podle způsobů popsaných pro druhy bakterií kyseliny mléčné (Vydavatel, B.J.B. Wood a W.H.Holzapřel, Blackie A&P) .
-gram pozitivní
-negativní na katalázu
-negativní na tvorbu NH3 formy argininu
-negativní na tvorbu CO2
-negativní na produkci L(+) kyseliny mléčné
-rostou v přítomnosti koncentraci vyšší než 0,4% žlučových solí při jejich
Příklad 7
Růst ST11 za různých podmínek
STU byl inkubován při 37°C v prostředí na basi rajčat (4% rajčatový prášek rehydratovaný v destilované vodě) doplněném sacharózou (0, 0.5, 1 nebo 2%) nebo peptonem sóji (0.5%) nebo glukózou (0.5%) pro různá časová období. Výsledky jsou znázorněny na obr. 5.
ST11 byl dále přidán k prostředí,které sestávalo z rýžové mouky (3%), pšeničné mouky (2%) a sacharózy (3%), v množství 2.5% a bylo inkubováno při 37 °C až bylo dosaženo pH 4.4. Po zchlazení byl produkt zabalen s přidáním vitaminu C nebo bez přidání vitaminu C a skladován při 10°C.
Obr. 5 znázorňuje údaje přežití STU při 10°C v obilné tekutině, zabalené v různých materiálech z plastické hmoty (HDPE High density polyethylene, PS polystyrene).
Přiklad 8
Indukce syntézy IL-12 a IL 10 mRNA myších adherentnich buněk prostřednictvím STU
Buňky kostní dřeně byly izolovány z feiíiuru a tibie 8 týdnů starých specifických myších C57BL/6 patogenů prostých a byly inkubovány v koncentraci 2xl06 buněk/ml v RPMI prostředí (Gibco), které obsahovalo 10% fetálního hovězího séra, lmM LGlataminu, 12mM Hepes, 0.05 mM 2-merkaptoetanolu, 100 U/ml penicilinu a 100 pg/ml streptomycinu (všechna činidla z Gibco) po dobu 12ti hodin při 37°C v 5% CO2 ovzduší. Neadherentní buňky byly vyloučeny třemi postupnými promytími teplým živným prostředím a zbývající adherentní buňky byly sebrány a inkubovány v koncentraci 106 buněk /ml po dobu 6ti hodin v optimálním čase pro syntézu cytokinu mRNA myších adherentnich
J9 ···«·· e ·· ··· • · · · · · · ·v·· ··· «4««·« • · ·· · · « « « · · • · · · · · ···· • · ·· ··· ·· ·· ·♦ · buněk v odpovědi na LPS. Byly přidány bakterie v různých koncentracích v rozmezí od 109 až 107 cfu/ml. Bakterie byly pěstovány a skladovány jak udáno výše.
Nakonec 6ti hodinového kultivačního období byly buňky izolovány centrifugací a rozrušeny užitím reakčního balíčku TRIzol (GibcoBRL, Kat. č. 15596-018) podle výrobních instrukcí. Úplná RNA byla izolována precipitací izopropanolu a byla reversně transkribována do cDNA po dobu 90ti minut při 42°C za použití 200 U reversní trankriptázy (Superscript II, BRL) v reakčním objemu s obsahem 200 mM Tris pH 8.3, 25 mM KC1, 1 pg/ml oligo d(T)15 (Boehringer Mannheim), l· mM DTT (Boehringer Manheim) , 4 mM každé dNTP (Boehringer Mannheim) a 4 0 U/ml
Rnasin (Promega) . Byly užity PCR priméry a podmínky, jak již bylo popsáno (Kopf a spol., Journal of experimental Medicine 1. září 1996; 184(3):1127-36). Množství cDNA bylo normalizováno ve vzorcích užitím primérů specifických pro geny (β-2mikroglobulin). Produkty PCR byly odděleny na 2% agarovém gelu a pásy byly analyzovány pod UV zářením.
Jak znázorněno na obr. 7, ST11 vykazuje nejsilnější indukci IL-12 a IL-10 mRNA, která byla srovnatelná s hladinami, pozorovanými u pozitivní kontroly (E.coli). Rozdíly jsou nejlépe zřejmé při nejnižších bakteriálních koncentracích (107 cfu/ml).
Příklad 9
Suprese syntézy IL-4 prostřednictvím STU
CD4+ T buňky ze sleziny specifických myších BALB/c patogenů prostých byly čištěny užitím balíčku MiniMACS (Miltenyi Biotec, Kat. č. 492-01). CD4+ T buňky byly pěstovány při koncentraci 2xl05 buněk/ml v RPMI prostředí, které obsahovalo 10% fetálního hovězího séra, 1 mM L-glutaminu, 12 mM ···· ♦ · • · « ·♦ • ·*··»· • 9 9 9 9 9 9
99 999 ·9 9 9 999
Hepes, 0.05 mM 2-merkaptoetanolu, 100 U/ml penicilinu a 100 pg/ml streptomycinu a buňky byly aktivovány během jednoho týdne protilátkami vázanými příčnými vazbami k plotnám z CD3 (klon 2C11) a CD28 (klon 37.51, obojí protilátky z Pharmingen). Během tohoto týdenního pěstování, byly buňky společně pěstovány s adherentními buňkami kostní dřeně (izolovanými jak popsáno výše) jako pomocnými buňkami a s 108 cfu/ml ST11 nebo 108 cfu/ml Lal nebo 1 mg/ml LPS nebo samotným prostředím. Po této době byly buňky promyty a CD4+ T buňky byly jednou čištěny užitím MiniMACS balíčku a opět stimulovány ve dvoutýdenní kultuře, která obsahovala samotné prostředí. Cytokiny, produkované diferencovanými CD4+ T buňkami, byly měřeny po dvou dnech v supernatantech použitím sendvičové ELISA ( balíčky z Endogen a Pharmigen).
Výsledky jsou znázorněny na obr. 5. Buňky, diferencované za přítomnosti samotného prostředí, ukazují dominantní Th2 fenotyp, který je charakterizovaný vysokými hladinami IL-4. Přidání ST11 k týdenním kulturám silně modulovalo výsledek diferenciace Th2, jak vyplývá z osminásobného snížení produkce IL-4. Tato inhibice byla podobné velikosti jak bylo pozorováno v kulturách, získaných z buněk diferencovaných v přítomnosti LPS.Naproti tomu, jiný kmen Lactobacilla měl neměřitelný dopad na hladiny IL-4. Zajímavé je, že hladiny IFN-γ nebyly po přidání STU v týdenních kulturách zvýšeny.
Jak může být zřejmé, z výše uvedených kmenů, podle vynálezu, mohou být dobře připraveny potravinové a/nebo farmaceutické nosiče, které přinášejí výhodu cenných vlastností mikroorganismů.
Příklad 10
Kmen ST11 byl v klinické zkoušce zkoumán ve společnosti z okolí Guatemala City na svoji schopnost způsobit přenos akutního průjmu v období dešťů, což bylo zkoušeno většinou na dětech v této oblasti. Celkem bylo ve studii zahrnuto 203 dětí ve věku od 35 měsíců do 70ti měsíců, které přijaly cílovou dávku 1O10 životaschopných organismů (STU) nebo žádnou dávku (placebo) během 29ti denního příjmového období. Děti, vybrané pro obojí vzorek a respektive placebo, měly typické nedostatky v hmotnosti vzhledem k věku a výšce vzhledem k věku, které jsou charakteristické pro podvýživu.
Před započetím příjmového pokusu u předškolních dětí bylo bezpečné provedení založeno na studiích in vitro a in vivo. In vitro studie vykazovaly typickou resistenci pro antibiotika podobnou typu u jiných lactobacillů užitých pro potravinové účely a žádný potenciál pro tvorbu biogenních aminů, pro degradaci hlenu a pro dekonjugaci žlučových solí. V kontrolní klinické studii s placebem, která zahrnovala 42 dospělých dobrovolníků, byl STU dobře tolerován a nevyvolával žádné nežádoucí účinky. Mezi potenciálními projevy byly monitorovány plynatost, množství stolic za den a konzistence stolice. Hladiny proteinů akutní fáze nenasvědčovaly žádné potenciální zánětlivé reakci.
Vzorky a placeba byly zabaleny do sáčků v (Nestlé Product Technology Center manufacturing facility v Konolfingen, Švýcarsko) a odeslány zmrazené do Guatemaly. Každý lOg sáček obsahoval nosné prostředí s čokoládovým aroma a buď 0.2 g STU (1O10 cfu) nebo v případě placeba 0.2 g mléčného prášku. Nosné prostředí s čokoládovým aroma sestávalo z kakaového prášku, cukru, sojového lecitinu, vanilinu a skořice. Sáčky byly skladovány při 4° až 6°C až do dvou hodin před použitím. Před použitím byly sáčky rozpuštěny ve 100 ml vody, poskytnutou Nestlé. Tato voda byla prostá jakékoliv bakteriální kontaminace.
*444*4 · · * · · « • 4 · 4 4 · * 4 « · « •4« «44 · » 4 · · · · «4« 4 4 •444 4*4 44 4
44 444 * · 44 *44
Podle přiloženého zápisu byl průjem definován jako výskyt tři nebo více tekutých nebo neformovaných stolic během 24 hodinového období. Průjmová episoda byla definována jako událost, při které došlo k evidenci průjmu (tři průjmovité stolice během 24 hodin). Její celkové trváni v hodinách bylo vypočítáno z okamžiku první ze tří označených stolic do objeveni se první formované stolice nebo do období 24 hodin bez defekace. Pro dítě, které mělo „novou episodu, uplynulo od konce předchozího období 48 hodin. Jestliže ne, pak to bylo hodnoceno jako pokračování té samé episody a pro hodnocení byla užita celková doba trvání. Jeden z případů bylo dítě, které zakusilo jednu nebo více dokumentovaných episod průjmu během 29 denního sledovaného období. Intenzita průjmových episod byla založena na celkovém množství řídkých stolic. Složky vážnosti episody zahrnují přítomnost krve, hlenu nebo hnisu ve stolicích, společně se symptomy horečky a zvracení. Jako vážnou klasifikovala episodu také intenzita sedmi stolic během 24 hodin nebo potřeba zásahu zdravotnických odborníků na klinikách, ve zdravotnických střediscích nebo nemocnicích.
Pokud byly průjmová episoda diagnostikována ze sledovaného systému, byl sebrán vzorek průjmovité stolice pro mikroskopické vyšetření a pěstování k identifikaci potenciálního etiologického patogena pro danou episodu. Vzorek byl diagnostikován na antigen rotaviru, giardie a E. histolytica, v jednom případě na dysenterii, a na bakteriální patogeny, zahrnující Shigellu, Salmonellu, Aeromonas, Plesiomonas, shigelloides, E.coli a možná V. cholerae.
Během období zkoumání byly vzorky sebrány ke zkoušce schopnosti mikroorganismů, obsažených během období podávání. Ukazuje se, že mikroorganismy zůstali životaschopné v sáčcích během celé studie, tak že také na konci studie byly sáčky schopné dodat 1O10 životaschopných
• 9
9 mikroorganismů na rekonstituci s vodou.
Studie ukázaly, že vzorky, obsahující probiotické mikroorganismy, mohou snižovat výskyt průjmu na rozdíl od kontrolní skupiny (placebo), asi o 30%. Avšak, také kontrolní skupina již ukazovala snížené množství výskytu průjmu oproti běžné populaci, která nepřijala ani vzorek ani placebo. Tento novější objev může být zčásti objasňován na základě dětí, které přijímaly doplňkovou hodnotnou výživu a vodu prostou kontaminace. Nicméně, poněvadž studie byla provedena v terénu, může být snadno odvozeno, že STU může spolehlivě snižovat výskyt průjmu in vivo.
Zastupuje:
Claims (2)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Kmen Lactobacillus ze skupiny bakterií kyseliny mléčné, příslušejících k rodu Lactobacillus, vyznačující se tím, že má schopnost předcházet kolonizaci střeva patogenními bakteriemi, které způsobují průjem.
- 2.Kmen Lactobacilla, podle nároku 1, v y z n a čující se tím, zeje schopný adhese ke střevní sliznici hostitele.
3. Kmen Lactobacilla, podle některého z předcházejících nároků, v y z n a č u j ící s e t i m, ž e je schopný růstu za přítomnosti více než 0.4% žlučových solí • 4 . Kmen Lactobacilla, podle některého z předcházejících nároku, vyznačuj ící se tím, zeje vybrán ze skupiny, která sestává z Lactobacillus rhamnosus nebo Lactobacillus paracasei.5. Kmen Lactobacilla, podle nároku 4, vyzná- Lactobacillus č u j ící paracasei. se t í m, ž e je 6. Lactobacillus paracasei, podle nároku 5, vyznač ující se ti m, ž e jde o Lactobacillus paracasei CNCM 1-2116 (NCC 2461). 9 • 9 • 9 ♦ · • · » • 9 * 9 99 9 • 9 • « • • • 9 ♦ 9 9 9 * · * • 9 9 99 99 9*9 ♦ · Použiti kmene Lactobacillus, podle některého z předcházejících nároků, pro přípravu poživatelného nosiče.Použití, podle nároku 7, při němž kmenLactobacillus je obsažen v nosiči v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 1012 cfu/g nosiče.9. Použití supernatantu kultury kmenuLactobacillus podle některého z nároků 1 až 6, pro přípravu poživatelného nosiče.10. Použití podle některého z nároku 7 nebo 9, při němž nosičem je potravinový prostředek, vybraný z mléka, jogurtu, tvarohu, sýru, fermentovaných mlék, fermentovaných produktů na basi mléka, zmrzlin, fermentovaných produktů na basi obilovin, práškových mlék, kojenecké výživy.11. Použití, podle některého z nároku 7 až 10, při němž nosič je užit pro léčení a/nebo profylaxi poruch, spojených s průjmem.12. Potravinový nebo farmaceutický prostředek, vy- značující se tím, že obsahuje nejméně jeden kmen Lactobacilla, podle některého z nároků 1 až 6, nebo supernatant nebo jeho kulturu.13. Potravinový nebo farmaceutický prostředek, podle nároku 12, vyznačují -cl se t i m, že je vybrán z mléka, jogurtu, tvarohu, sýru, fermentovaných mlék, fermentovaných produktů na basi mléka, zmrzliny, fermentovaných produktů na basi obilovin, práškových mlék, dětské výživy, tablet, kapalných bakteriálních suspenzí, • · ··· · • · 4 ♦ ·»·· • 4 · · ·· ♦ ♦ · · · ·♦ • · · · ·· »»♦ ♦· ♦*4»* sušených orálních doplňků, vlhkých orálních doplňků, suchých potravinových přípravků pro podání sondou nebo vlhkých potravinových přípravků pro podání sondou.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99104922A EP1034787A1 (en) | 1999-03-11 | 1999-03-11 | Lactobacillus strains preventing diarrhea caused by pathogenic bacteria |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20013264A3 true CZ20013264A3 (cs) | 2002-01-16 |
Family
ID=8237746
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20013264A CZ20013264A3 (cs) | 1999-03-11 | 2000-03-02 | Kmeny Lactobacillus |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6835376B1 (cs) |
| EP (2) | EP1034787A1 (cs) |
| JP (1) | JP2002537865A (cs) |
| CN (1) | CN1350461A (cs) |
| AR (1) | AR022912A1 (cs) |
| AU (1) | AU779414B2 (cs) |
| BR (1) | BR0008911A (cs) |
| CA (1) | CA2364435A1 (cs) |
| CO (1) | CO5241327A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ20013264A3 (cs) |
| HK (1) | HK1042657A1 (cs) |
| HU (1) | HUP0200205A3 (cs) |
| ID (1) | ID30438A (cs) |
| IL (2) | IL145079A0 (cs) |
| MY (1) | MY125941A (cs) |
| NO (1) | NO20014299L (cs) |
| NZ (1) | NZ513806A (cs) |
| PE (1) | PE20001557A1 (cs) |
| PL (1) | PL355226A1 (cs) |
| RO (1) | RO121701B1 (cs) |
| RU (2) | RU2247569C2 (cs) |
| WO (1) | WO2000053200A1 (cs) |
| ZA (2) | ZA200107290B (cs) |
Families Citing this family (107)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7029702B2 (en) * | 1998-07-07 | 2006-04-18 | Ritter Natural Sciences Llc | Method for increasing lactose tolerance in mammals exhibiting lactose intolerance |
| SE523771C2 (sv) * | 1999-05-21 | 2004-05-18 | Probi Ab | Sportdryck innehållande mikronäringsämnen i kombination med levande laktobaciller |
| CN100396769C (zh) * | 2000-05-25 | 2008-06-25 | 雀巢制品公司 | 宠物食物使用的新益生菌 |
| SE0003100D0 (sv) * | 2000-09-01 | 2000-09-01 | Probi Ab | New strains |
| SE0003576D0 (sv) * | 2000-10-04 | 2000-10-04 | Probi Ab | New strain |
| KR100419132B1 (ko) * | 2000-12-29 | 2004-02-18 | 조성근 | 위·장 점막 부착성과 증식성, 내산성, 내담즙성 및헬리코박터 파일로리, 대장균 0157:ｈ7에 대한 항균성이우수한 락토바실러스 파라카제이 서브스패시즈 파라카제이ｃｓｋ 01 |
| SE0103695D0 (sv) | 2001-11-07 | 2001-11-07 | Thomas Boren | A novel non-antibiotic strategy against OGIP infections based on a cereal product |
| EP1485463B1 (en) | 2002-03-21 | 2008-09-24 | Bifodan A/S | Lactobacillus strains |
| JP4308481B2 (ja) * | 2002-06-18 | 2009-08-05 | 独立行政法人農業・食品産業技術総合研究機構 | 抗アレルギー剤 |
| NZ537706A (en) | 2002-06-28 | 2008-03-28 | Puleva Biotech Sa | Probiotic microbial strains, comprising non-pathogenic strains which are capable of surviving in and being transferred to breast milk and/or amniotic fluid after oral intake in healthy individuals without colonizing other internal organs except mucousas |
| EP1384483A1 (en) * | 2002-07-23 | 2004-01-28 | Nestec S.A. | Probiotics for treatment of irritable bowel disease (IBS) through improvement of gut neuromuscular function |
| JP2004189672A (ja) * | 2002-12-11 | 2004-07-08 | Gen Corp:Kk | 抗下痢症組成物 |
| US20060088513A1 (en) * | 2003-03-13 | 2006-04-27 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Antiallergic composition |
| MXPA05010696A (es) * | 2003-04-02 | 2006-04-18 | Axcan Pharma S A | Cepa de lactobacillus fermentum y usos de la misma. |
| US20050158294A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | The Procter & Gamble Company | Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum |
| US8877178B2 (en) | 2003-12-19 | 2014-11-04 | The Iams Company | Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals |
| MY143693A (en) | 2004-03-24 | 2011-06-30 | Nestec Sa | Shelf stable product wih living micro-organisms |
| ITRM20040166A1 (it) * | 2004-03-31 | 2004-06-30 | Alberto Cresci | Ceppi batterici lab con proprieta' probiotiche e composizioni che contengono gli stessi. |
| WO2006012536A2 (en) * | 2004-07-22 | 2006-02-02 | Ritter Andrew J | Methods and compositions for treating lactose intolerance |
| TW200637908A (en) * | 2005-01-04 | 2006-11-01 | Calpis Co Ltd | Method for preparation of lactic acid bacterium having anti-allergic activity |
| RU2428886C2 (ru) | 2005-04-13 | 2011-09-20 | Нестек С.А. | Смесь для грудных детей, содержащая пробиотики |
| US20060263311A1 (en) * | 2005-05-19 | 2006-11-23 | Scavone Timothy A | Consumer noticeable improvement in wetness protection using solid antiperspirant compositions |
| EP1885383B1 (en) | 2005-05-31 | 2016-09-21 | IAMS Europe B.V. | Feline probiotic bifidobacteria |
| DK1880001T3 (da) | 2005-05-31 | 2011-09-12 | Iams Company | Feline probiotiske lactobacilli |
| EP1986669B1 (en) | 2006-02-15 | 2012-03-28 | Nestec S.A. | Use of bifidobacterium longum for the prevention and treatment of inflammation |
| CN101432007A (zh) | 2006-03-07 | 2009-05-13 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 合益素混合物 |
| ATE478568T1 (de) * | 2007-02-02 | 2010-09-15 | May Amadeus Alexander | Produkt mit lebenden probiotischen mikroorganismen |
| EP1974735A1 (en) * | 2007-03-28 | 2008-10-01 | Nestec S.A. | Reduction of risk of diarrhoea |
| CN101273736B (zh) * | 2007-03-28 | 2012-08-08 | 北京弗蒙特生物技术有限公司 | 一种在常温下保持高活菌数的发酵乳的制备方法 |
| EP1974743A1 (en) | 2007-03-28 | 2008-10-01 | Nestec S.A. | Probiotics to Improve Gut Microbiota |
| ES2360573T3 (es) * | 2007-07-06 | 2011-06-07 | N.V. Nutricia | Uso de probióticos y fibras para la diarrea. |
| US20090110663A1 (en) * | 2007-10-24 | 2009-04-30 | Halow George M | Method for treatment of bowel disorders |
| EP2072052A1 (en) | 2007-12-17 | 2009-06-24 | Nestec S.A. | Prevention of opportunistic infections in immune-compromised subjects |
| CA2712207A1 (en) | 2008-01-24 | 2009-07-30 | Nestec S.A. | Capsule containing nutritional ingredients and method of delivery of a nutritional liquid from the capsule |
| EP2265135B1 (en) | 2008-03-14 | 2017-12-20 | Nestec S.A. | Synbiotic mixture |
| EP2127661A1 (en) | 2008-05-27 | 2009-12-02 | Nestec S.A. | Probiotics to improve gut microbiotica |
| US9771199B2 (en) | 2008-07-07 | 2017-09-26 | Mars, Incorporated | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
| EP2293802A4 (en) * | 2008-06-25 | 2011-11-09 | Ritter Pharmaceuticals Inc | LACTOSE COMPOSITIONS HAVING REDUCED LACTOSE CONTENT |
| EP2147678A1 (en) | 2008-07-21 | 2010-01-27 | Nestec S.A. | Probiotics to increase IgA secretion in infants born by caesarean section |
| DK2166083T3 (da) * | 2008-12-31 | 2011-03-28 | Syngen Biotech Co Ltd | Ny Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SG96, bakteriostatisk sammensætning indeholdende denne og anvendelse heraf |
| US20100196341A1 (en) * | 2009-02-05 | 2010-08-05 | Syngen Biotech Co., Ltd. | Novel Lactobacillus paracasei subsp. paracasei SG96, a Bacteriostatic Composition Containing the same and Use Thereof |
| US8785160B2 (en) | 2009-02-24 | 2014-07-22 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Prebiotic formulations and methods of use |
| KR20110124780A (ko) | 2009-02-24 | 2011-11-17 | 리터 파마슈티컬즈 인코오포레이티드 | 프리바이오틱 제제 및 사용 방법 |
| EP2429538B1 (en) * | 2009-05-11 | 2015-10-21 | Nestec S.A. | Non-replicating bifidobacterium longum ncc2705 and immune disorders |
| US10104903B2 (en) | 2009-07-31 | 2018-10-23 | Mars, Incorporated | Animal food and its appearance |
| WO2011069987A1 (en) | 2009-12-08 | 2011-06-16 | Nestec S.A. | Infant formula with probiotics and milk fat globule membrane components |
| EP2510932A1 (en) * | 2011-04-15 | 2012-10-17 | Nestec S.A. | Lactobacillus paracasei NCC2461 (ST11) for use by perinatal maternal administration in the reduction and prevention of allergies in progeny |
| JP2014516589A (ja) | 2011-06-20 | 2014-07-17 | エイチ．ジェイ．ハインツ カンパニー | プロバイオティック組成物及び方法（ｐｒｏｂｉｏｔｉｃｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｍｅｔｈｏｄｓ） |
| RU2654705C2 (ru) | 2012-06-18 | 2018-05-22 | Г.Дж. Хайнц Компани Брэндс ЛЛК | Глютенозависимые расстройства |
| EP3470074B1 (en) | 2013-05-10 | 2020-10-14 | H.J. Heinz Company Brands LLC | Probiotics |
| WO2016090343A1 (en) | 2014-12-05 | 2016-06-09 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with hyperammonemia |
| WO2016183531A1 (en) | 2015-05-13 | 2016-11-17 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to reduce hyperphenylalaninemia |
| US9688967B2 (en) | 2014-12-05 | 2017-06-27 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with hyperammonemia |
| WO2016183532A1 (en) | 2015-05-13 | 2016-11-17 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat a disease or disorder |
| EP3227440B1 (en) | 2014-12-05 | 2021-07-14 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with hyperammonemia |
| US20160206666A1 (en) | 2014-12-22 | 2016-07-21 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases that benefit from reduced gut inflammation and/or tighten gut mucosal barrier |
| CA2978315A1 (en) | 2015-03-02 | 2016-09-09 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to produce butyrate under low oxygen or anaerobic conditions and uses thereof |
| CA2988930A1 (en) | 2015-06-10 | 2016-12-15 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with hyperammonemia |
| WO2016210373A2 (en) | 2015-06-24 | 2016-12-29 | Synlogic, Inc. | Recombinant bacteria engineered for biosafety, pharmaceutical compositions, and methods of use thereof |
| WO2016210378A2 (en) | 2015-06-25 | 2016-12-29 | Synlogic, Inc. | Multi-layered control of gene expression in genetically engineered bacteria |
| US11291693B2 (en) | 2015-06-25 | 2022-04-05 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat metabolic diseases |
| EP3328988A1 (en) | 2015-07-31 | 2018-06-06 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat disorders involving propionate catabolism |
| US11273184B2 (en) | 2015-08-31 | 2022-03-15 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat disorders in which oxalate is detrimental |
| WO2017075485A1 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat disorders in which trimethylamine (tma) is detrimental |
| WO2017074566A1 (en) | 2015-10-30 | 2017-05-04 | Dean Falb | Bacteria engineered to treat diseases that benefit from reduced gut inflammation and/or tightened gut mucosal barrier |
| US11685925B2 (en) | 2015-10-30 | 2023-06-27 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases that benefit from reduced gut inflammation and/or tightened gut mucosal barrier |
| JP6993970B2 (ja) | 2015-11-16 | 2022-02-15 | シンロジック オペレーティング カンパニー インコーポレイテッド | 高フェニルアラニン血症を低減させるように操作された細菌 |
| WO2017123418A1 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat metabolic diseases |
| WO2017123676A1 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Synlogic, Inc. | Recombinant bacteria engineered to treat diseases and disorders associated with amino acid metabolism and methods of use thereof |
| WO2017123592A1 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat disorders associated with bile salts |
| US11723932B2 (en) | 2016-01-11 | 2023-08-15 | Synlogic Operating Company, Inc. | Microorganisms programmed to produce immune modulators and anti-cancer therapeutics in tumor cells |
| WO2017123610A2 (en) | 2016-01-11 | 2017-07-20 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to detoxify deleterious molecules |
| WO2017136795A1 (en) | 2016-02-04 | 2017-08-10 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with tryptophan metabolism |
| AU2017213646A1 (en) | 2016-02-04 | 2018-08-23 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases that benefit from reduced gut inflammation and/or tightened gut mucosal barrier |
| WO2017139697A1 (en) | 2016-02-10 | 2017-08-17 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with hyperammonemia |
| WO2017139708A1 (en) | 2016-02-10 | 2017-08-17 | Synlogic, Inc. | Bacteria engineered to treat nonalcoholic steatohepatitis (nash) |
| BR112018071271B1 (pt) * | 2016-05-11 | 2023-04-11 | Chr. Hansen A/S | Processo para a produção de um produto alimentício de armazenamento ambiente |
| CN110913875A (zh) | 2017-01-06 | 2020-03-24 | 同生运营公司 | 程序化以在肿瘤细胞中产生免疫调节子和抗癌治疗剂的微生物 |
| US10941433B2 (en) | 2017-06-15 | 2021-03-09 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Neurotransmitter transport in probiotics |
| IL271085B2 (en) | 2017-06-21 | 2024-07-01 | Synlogic Operating Co Inc | Bacteria to treat disorders |
| AU2018301668A1 (en) | 2017-07-12 | 2019-12-19 | Synlogic Operating Company, Inc. | Microorganisms programmed to produce immune modulators and anti-cancer therapeutics in tumor cells |
| US20210130806A1 (en) | 2017-11-03 | 2021-05-06 | Synlogic Operating Company, Inc. | Engineered bacteria expressing racemase for treating diseases associated with hyperammonemia |
| WO2020063531A1 (zh) | 2018-09-30 | 2020-04-02 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 副干酪乳杆菌et-22及其用途 |
| CN110960559B (zh) * | 2018-09-30 | 2021-02-26 | 内蒙古伊利实业集团股份有限公司 | 用于抑制口腔病原菌的乳酸菌菌株的食品、口腔清洁以及医药组合物 |
| WO2020223345A1 (en) | 2019-04-29 | 2020-11-05 | Antipov Eugene | Enumeration of genetically engineered microorganisms by live cell counting techniques |
| ES2983662T3 (es) | 2019-07-23 | 2024-10-24 | Frieslandcampina Nederland Bv | Composición nutricional que comprende grasa láctea e inmunoglobulina |
| AU2020354581A1 (en) | 2019-09-24 | 2022-03-03 | Prolacta Bioscience, Inc. | Compositions and methods for treatment of inflammatory and immune diseases |
| EP4081229A1 (en) | 2019-12-24 | 2022-11-02 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Control of histamine to promote health and control enterocolitis using probiotic compositions and/or histamine degrading enzymes |
| CN113355252A (zh) * | 2020-03-06 | 2021-09-07 | 南京卫岗乳业有限公司 | 一种副干酪乳杆菌及其应用 |
| CN115298308A (zh) | 2020-03-20 | 2022-11-04 | 同生运营公司 | 经工程化以减轻高苯丙氨酸血症的微生物 |
| BR112023002758A2 (pt) | 2020-08-14 | 2023-05-02 | Prolacta Bioscience Inc | Composições de oligossacarídeos de leite humano para uso com bacterioterapias |
| EP4256039A2 (en) | 2020-12-02 | 2023-10-11 | Synlogic Operating Company, Inc. | Engineered microorganisms |
| EP4271806A1 (en) | 2020-12-31 | 2023-11-08 | Synlogic Operating Company, Inc. | Microorganisms engineered to reduce hyperphenylalaninemia |
| WO2022155201A1 (en) | 2021-01-12 | 2022-07-21 | Prolacta Bioscience, Inc. | Synbiotic treatment regimens |
| CN112625983B (zh) * | 2021-03-05 | 2021-05-28 | 山东中科嘉亿生物工程有限公司 | 一种对腹泻有治疗效果的干酪乳杆菌L.Casei21及其应用 |
| CN112877260B (zh) * | 2021-03-30 | 2022-08-09 | 江南大学 | 一株缓解泻剂结肠的副干酪乳杆菌及其应用 |
| AU2022259522A1 (en) | 2021-04-13 | 2023-10-19 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to secrete active proteins |
| CN115671144A (zh) * | 2021-07-26 | 2023-02-03 | 锦乔生物科技有限公司 | 使用乳酸菌菌株的培养物来抑制肠道病原菌生长和预防和/或治疗与肠道病原菌有关的疾病 |
| WO2023044479A1 (en) | 2021-09-17 | 2023-03-23 | Synlogic Operating Company, Inc. | Methods for reducing hyperphenylalaninemia |
| WO2023245171A1 (en) | 2022-06-17 | 2023-12-21 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with bile acid metabolism and methods of use thereof |
| WO2023245168A1 (en) | 2022-06-17 | 2023-12-21 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to treat diseases associated with bile acid metabolism and methods of use thereof |
| WO2023250421A1 (en) | 2022-06-22 | 2023-12-28 | Iowa State University Research Foundation, Inc. | Control of histamine to promote health and control enterocolitis using probiotic compositions |
| WO2023250478A1 (en) | 2022-06-23 | 2023-12-28 | Synlogic Operating Company, Inc. | Recombinant bacteria engineered to treat diseases associated with methionine metabolism and methods of use thereof |
| WO2024081768A1 (en) | 2022-10-12 | 2024-04-18 | Synlogic Operating Company, Inc. | Bacteria engineered to produce active epidermal growth factor (egf) and their medical uses |
| WO2024086557A1 (en) | 2022-10-17 | 2024-04-25 | Synlogic Operating Company, Inc. | Recombinant bacteria expressing phenylalanine ammonia lyase, phenylalanine transporter and l- aminoacid deaminase for reducing hyperphenylalaninemia |
| WO2024129974A1 (en) | 2022-12-14 | 2024-06-20 | Synlogic Operating Company, Inc. | Recombinant bacteria for use in the treatment of disorders in which oxalate is detrimental |
| WO2024130119A2 (en) | 2022-12-16 | 2024-06-20 | Prolacta Bioscience, Inc. | Synbiotic compositions for short chain fatty acid production |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0577903B1 (fr) * | 1992-07-06 | 1997-12-17 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Agent antigastrite |
| EP0577904B1 (fr) * | 1992-07-06 | 1997-05-14 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Bactérie lactique |
| DE760848T1 (de) * | 1994-05-26 | 1997-08-28 | Bracco Spa | Lactobazillusstämme menschlichen ursprungs, ihre zusammensetzung und deren verwendung |
| JP3004890B2 (ja) * | 1995-03-28 | 2000-01-31 | 雪印乳業株式会社 | 病原体感染防御剤 |
| US5837238A (en) * | 1996-06-05 | 1998-11-17 | Biogaia Biologics Ab | Treatment of diarrhea |
| IT1284877B1 (it) * | 1996-08-09 | 1998-05-22 | Dicofarm Spa | Trattamento delle diarree acute del bambino e prevenzione della sensibilizzazione allergica verso alimenti introdotti nella fase |
| IT1289984B1 (it) * | 1997-02-27 | 1998-10-19 | Proge Farm Srl | Ceppi di lattobacilli utili nel trattamento di disfunzioni del sistema gastrointestinale |
| SE511524C2 (sv) * | 1997-06-02 | 1999-10-11 | Essum Ab | Lactobacillus casei rhamnosus-stam samt farmaceutisk beredning för bekämpning av patogena tarmbakterier |
| SE510813C2 (sv) * | 1997-12-08 | 1999-06-28 | Arla Ekonomisk Foerening | Bakteriestam av arten Lactobacillus Paracasei subsp. paracasei, sammansättning därav för användning i livsmedel, samt produkt innehållande stammen |
| HUP0200374A2 (en) * | 1999-03-11 | 2002-06-29 | Nestle Sa | Lactobacillus strains capable of preventing diarrhoea caused by pathogenic bacteria and rotaviruses |
-
1999
- 1999-03-11 EP EP99104922A patent/EP1034787A1/en not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-03-02 HU HU0200205A patent/HUP0200205A3/hu unknown
- 2000-03-02 RU RU2001127527/13A patent/RU2247569C2/ru active
- 2000-03-02 ID IDW00200101965A patent/ID30438A/id unknown
- 2000-03-02 RU RU2001127528/13A patent/RU2243779C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-03-02 RO ROA200101020A patent/RO121701B1/ro unknown
- 2000-03-02 BR BR0008911-7A patent/BR0008911A/pt not_active Application Discontinuation
- 2000-03-02 PL PL00355226A patent/PL355226A1/xx not_active Application Discontinuation
- 2000-03-02 US US09/936,489 patent/US6835376B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-02 CZ CZ20013264A patent/CZ20013264A3/cs unknown
- 2000-03-02 WO PCT/EP2000/001795 patent/WO2000053200A1/en active IP Right Grant
- 2000-03-02 AU AU31627/00A patent/AU779414B2/en not_active Ceased
- 2000-03-02 IL IL14507900A patent/IL145079A0/xx active IP Right Grant
- 2000-03-02 CA CA002364435A patent/CA2364435A1/en not_active Abandoned
- 2000-03-02 JP JP2000603689A patent/JP2002537865A/ja active Pending
- 2000-03-02 EP EP00909290A patent/EP1162986A1/en not_active Withdrawn
- 2000-03-02 NZ NZ513806A patent/NZ513806A/en unknown
- 2000-03-02 CN CN00807401A patent/CN1350461A/zh active Pending
- 2000-03-10 PE PE2000000213A patent/PE20001557A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-03-10 AR ARP000101088A patent/AR022912A1/es unknown
- 2000-03-10 CO CO00017678A patent/CO5241327A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-03-10 MY MYPI20000954A patent/MY125941A/en unknown
-
2001
- 2001-08-23 IL IL145079A patent/IL145079A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-09-03 ZA ZA200107290A patent/ZA200107290B/xx unknown
- 2001-09-03 ZA ZA200107293A patent/ZA200107293B/xx unknown
- 2001-09-04 NO NO20014299A patent/NO20014299L/no not_active Application Discontinuation
-
2002
- 2002-06-18 HK HK02104517.4A patent/HK1042657A1/zh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2000053200A1 (en) | 2000-09-14 |
| PE20001557A1 (es) | 2001-02-01 |
| ZA200107293B (en) | 2003-02-26 |
| CN1350461A (zh) | 2002-05-22 |
| ID30438A (id) | 2001-12-06 |
| HK1042657A1 (zh) | 2002-08-23 |
| BR0008911A (pt) | 2002-01-15 |
| EP1034787A1 (en) | 2000-09-13 |
| NZ513806A (en) | 2003-08-29 |
| US6835376B1 (en) | 2004-12-28 |
| JP2002537865A (ja) | 2002-11-12 |
| MY125941A (en) | 2006-09-29 |
| EP1162986A1 (en) | 2001-12-19 |
| AR022912A1 (es) | 2002-09-04 |
| IL145079A (en) | 2006-08-01 |
| RU2247569C2 (ru) | 2005-03-10 |
| AU3162700A (en) | 2000-09-28 |
| RU2243779C2 (ru) | 2005-01-10 |
| AU779414B2 (en) | 2005-01-20 |
| CA2364435A1 (en) | 2000-09-14 |
| CO5241327A1 (es) | 2003-01-31 |
| NO20014299D0 (no) | 2001-09-04 |
| IL145079A0 (en) | 2002-06-30 |
| HUP0200205A3 (en) | 2002-06-28 |
| RO121701B1 (ro) | 2008-02-28 |
| PL355226A1 (en) | 2004-04-05 |
| NO20014299L (no) | 2001-11-05 |
| HUP0200205A2 (hu) | 2002-05-29 |
| ZA200107290B (en) | 2003-02-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ20013264A3 (cs) | Kmeny Lactobacillus | |
| CZ20013265A3 (cs) | Kmeny bakterií kyseliny mléčné, schopné předcházet průjmu | |
| RU2748839C2 (ru) | Композиции, способы и наборы для стимулирования мукозальной иммунной системы | |
| ES2619185T3 (es) | Cepas de Lactobacillus termoestables | |
| US6887465B1 (en) | Lactobacillus strains capable of preventing diarrhoea caused by pathogenic bacteria and rotaviruses | |
| ES2553177T3 (es) | Cepas de Lactobacillus plantarum como probióticos con efecto inmunomodulador especifico | |
| EP2332557A1 (en) | Probiotic lactic acid bacteria | |
| MXPA01008976A (en) | Lactobacillus strains preventing diarrhoea pathogenic bacteria | |
| MXPA01008927A (en) | Lactic acid bacteria strains capable of preventing diarrhoea |