CZ20013265A3 - Kmeny bakterií kyseliny mléčné, schopné předcházet průjmu - Google Patents
Kmeny bakterií kyseliny mléčné, schopné předcházet průjmu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20013265A3 CZ20013265A3 CZ20013265A CZ20013265A CZ20013265A3 CZ 20013265 A3 CZ20013265 A3 CZ 20013265A3 CZ 20013265 A CZ20013265 A CZ 20013265A CZ 20013265 A CZ20013265 A CZ 20013265A CZ 20013265 A3 CZ20013265 A3 CZ 20013265A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- lactobacillus
- cells
- milk
- honor
- lactic acid
- Prior art date
Links
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 34
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims description 32
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims description 17
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims description 17
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 26
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 claims description 23
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 22
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 12
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 12
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 10
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims description 8
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 7
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 7
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 6
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 claims description 5
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 4
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 claims description 4
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 claims description 4
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000003304 gavage Methods 0.000 claims description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 4
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 claims description 3
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 claims description 3
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims description 2
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 claims description 2
- 235000013350 formula milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 2
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 2
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 claims description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 claims 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims 1
- 229920001903 high density polyethylene Polymers 0.000 claims 1
- 239000004700 high-density polyethylene Substances 0.000 claims 1
- 235000021542 oral nutrition Nutrition 0.000 claims 1
- 239000007935 oral tablet Substances 0.000 claims 1
- -1 polyethylene Polymers 0.000 claims 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 claims 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 24
- 241001468155 Lactobacillaceae Species 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 48
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 13
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 13
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 13
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 9
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 9
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 9
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 9
- 229940028885 interleukin-4 Drugs 0.000 description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 8
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 7
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 4
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 4
- 230000017307 interleukin-4 production Effects 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010048832 Colon adenoma Diseases 0.000 description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 3
- 210000000173 T-lymphoid precursor cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 241000617996 Human rotavirus Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 2
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000008370 chocolate flavor Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 108700010850 rotavirus proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 2
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 9-ethyl-3-carbazolamine Chemical compound NC1=CC=C2N(CC)C3=CC=CC=C3C2=C1 OXEUETBFKVCRNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000607534 Aeromonas Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000224432 Entamoeba histolytica Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 1
- 241000224466 Giardia Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241000607000 Plesiomonas Species 0.000 description 1
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 240000003085 Quassia amara Species 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- 241000702678 Simian rotavirus A/SA11 Species 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 206010051511 Viral diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 206010047700 Vomiting Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 201000009840 acute diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000013872 defecation Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical compound CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- YMDXZJFXQJVXBF-STHAYSLISA-N fosfomycin Chemical compound C[C@@H]1O[C@@H]1P(O)(O)=O YMDXZJFXQJVXBF-STHAYSLISA-N 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001071 malnutrition Effects 0.000 description 1
- 235000000824 malnutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 230000000897 modulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 208000015380 nutritional deficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 210000004915 pus Anatomy 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M sodium;phosphoric acid;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].OP(O)(O)=O IBUIVNCCBFLEJL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 229960005404 sulfamethoxazole Drugs 0.000 description 1
- JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N sulphamethoxazole Chemical compound O1C(C)=CC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=N1 JLKIGFTWXXRPMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N trimethoprim Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC(CC=2C(=NC(N)=NC=2)N)=C1 IEDVJHCEMCRBQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001082 trimethoprim Drugs 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008673 vomiting Effects 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23G—COCOA; COCOA PRODUCTS, e.g. CHOCOLATE; SUBSTITUTES FOR COCOA OR COCOA PRODUCTS; CONFECTIONERY; CHEWING GUM; ICE-CREAM; PREPARATION THEREOF
- A23G9/00—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor
- A23G9/32—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds
- A23G9/36—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins
- A23G9/363—Frozen sweets, e.g. ice confectionery, ice-cream; Mixtures therefor characterised by the composition containing organic or inorganic compounds containing microorganisms or enzymes; containing paramedical or dietetical agents, e.g. vitamins containing microorganisms, enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/061—Addition of, or treatment with, microorganisms
- A23C19/062—Addition of, or treatment with, microorganisms using only lactic acid bacteria, e.g. pediococcus, leconostoc or bifidus sp., or propionic acid bacteria; Treatment with non-specified acidifying bacterial cultures
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1232—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt in powdered, granulated or dried solid form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L7/00—Cereal-derived products; Malt products; Preparation or treatment thereof
- A23L7/10—Cereal-derived products
- A23L7/104—Fermentation of farinaceous cereal or cereal material; Addition of enzymes or microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/12—Antidiarrhoeals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/14—Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C2270/00—Aspects relating to packaging
- A23C2270/05—Gelled or liquid milk product, e.g. yoghurt, cottage cheese or pudding being one of the separate layers of a multilayered soft or liquid food product
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/175—Rhamnosus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/853—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká nových mikroorganismů čeledi Lactobacillacae, zejména mikroorganismů rodu Lactobacillus, které jsou užitečné při prevenci nebo léčení průjmu. Zejména se předkládaný vynález týká užití uvedených mikroorganismů pro přípravu poživatelného nosiče a prostředku obsahujícího tento nosič.
Dosavadní stav techniky
Organismy, které jako hlavní metabolickou složku produkují kyselinu mléčnou, jsou dlouho známy. Tyto bakterie se mohou nacházet v mléce nebo v továrnách, které zpracovávají mléko, zejména v živých nebo odumřelých rostlinách, ale také ve střevě lidí a zvířat. Tyto mikroorganismy, shrnuté pod výrazem „bakterie kyseliny mléčné, představují dosti nehomogenní skupinu a zahrnují, například, rody Lactococcus, Lactobacillus, Streptococcus, Bifidobacterium, Pediococcus apod..
Bakterie kyseliny mléčné byly využity jako fermentačni činidla ke konzervaci potravy při nízkém pH a k působení fermentačních prostředků, vytvořených během jejich fermentačni činnosti, k inhibici růstu ničících bakterií. Nakonec byly bakterie kyseliny mléčné užity pro přípravu různých druhů potravin jako je sýr, jogurt a další fermentované mléčné produkty.
Docela nedávno získaly bakterie kyseliny mléčné velký díl pozornosti, kdy bylo zjištěno, že některé kmeny mají po požití cenné vlastnosti pro člověka a zvířata. Zejména určité kmeny rodu Lactobacillus nebo Bifidobacterium vykazovaly schopnost kolonizovat střevní sliznici a pomáhat při udržování dobrého stavu člověka a zvířete.
S ohledem k tomu, EP 0 768 375 popisuje specifické kmeny Bifidobacteria, které jsou schopné implantace do střevní flóry a mohou ulpívat na střevních buňkách. Tyto Bifidobacteria jsou označována jako pomáhající při imunomodulaci tím, že jsou schopná kompetitivního vyloučení adhese patogenní bakterie k střevním buňkám, tedy pomáhají v udržování zdraví jednotlivce.
Během posledních několika let byl výzkum na potenciální užití probiotických bakterií činidel.
Probiotika j sou životaschopné mikrobiální přípravky, j ednotlivce udržováním přirozené
Mikrobiální probiotické také soustředěn mléčné jako považována za které napomáhají zdraví mikroflóry ve střevě.
běžně akceptovány jako přípravky mohou být v případě jejich účinných mikrobů a pokud způsoby jejich účinku jsou známy. Probiotika jsou míněny k připojení k střevní sliznici, kolonizaci střevního traktu a rovněž k předcházení připojení škodlivých mikroorganismů na střevní trakt. Rozhodující nezbytný předpoklad jejich účinku je v tom, že mohou dosahovat střevní sliznice ve vhodné a životaschopné formě a nejsou rozrušeny v horních částech trávicího traktu, zvláště účinkem nízkého pH, které převládá v žaludku.
V tomto ohledu, WO 97/00078 popisuje určitý kmen, který se nazývá Lactobacillus GG (ATCC 53103), jako probiotikum. Tento mikroorganismus je zejména obsažen ve způsobu prevence nebo léčení hypersenzitivních reakcí navozených potravou, kdy je podáván příjemci spolu s potravou, která podléhá hydrolýze působením pepsinu a/nebo trypsinu. Vybraný kmen Lactobacillus je popisován jako vykazující adhesivní a kolonizační schopnosti a mající systém enzymů proteáz, tak že bílkovinná látka obsažená v podávané potravě je dále hydrolyzována prostřednictvím proteáz, které jsou produkované určitým kmenem Lactobacilla. Tento způsob, který je popisovaný v této přihlášce, bude mít eventuelně za následek vzestup bílkovinné látky střeva, která nevykazuje podstatné množství alergenni látky.
Dále, v EP 0
577 903, je připraveno užití takových bakterií kyseliny které mají schopnost náhrady
Heliobacter pylori, který je uznanou příčinou vývoje v přípravě nosiče, určeného pro léčbu nebo profylaxi vředu, který je spojený s účinkem Heliobacter pylori.
Na základě znalosti cenných vlastností určitých kmenů bakterií kyseliny mléčné, jsou v oboru požadovány další kmeny bakterií kyseliny mléčné, které jsou prospěšné pro dobrý zdravotní stav člověka a/nebo zvířete.
Podstata vynálezu
Otázkou předkládaného vynálezu je tedy poskytnout další bakteriální kmeny, které vykazují nové vlastnosti, které jsou prospěšné pro člověka a/nebo zvířata.
Výše uvedená otázka byla vyřešena novými mikroorganismy, jmenovitě bakteriemi kyseliny mléčné, příslušejícími k rodu Lactobacillus, které mají schopnost adhese k střevní sliznici a zejména kolonizace střevní sliznice a schopnost předcházet infekci střevních epiteliálních buněk rotaviry.
Podle výhodného provedení, jsou kmeny Lactiobacillus schopné růstu za přítomnosti více jak 4% žlučových solí, tak že mohou snadno procházet trávicím traktem a zůstávají podstatně účinné.
Podle jiného výhodného provedení, je bakterie kyseliny mléčné vybrána ze skupiny, která sestává z Lactobacillus rhamnosus nebo Lactobacillus paracasei, výhodně Lactobacillus paracasei a výhodněji Lactobacillus paracasei CNCM 1-2116.
Mikroorganismy, podle vynálezu, vykazují mimo jiné následující vlastnosti: jsou gram positivní, negativní na katalázu, negativní na tvorbu NH3 formy argininu a negativní na produkci C02, produkují L(+) kyselinu mléčnou, jsou schopné růstu za přítomnosti žlučových solí v koncentraci vyšší než 0,4% a mohou podstatně předcházet kolonizaci epiteliálních buněk rotaviry.
Nové mikroorganismy mohou být užity pro přípravu různých poživatelných nosičů, jako je mléko, jogurt, tvaroh, fermentovaná mléka, fermentované produkty na basi mléka, fermentované produkty na basi obilovin, prášková mléka, výživa pro kojence a v nosiči mohou být obsaženy v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 10u cfu/g. Pro účel předkládaného vynálezu bude zkratka cfu označovat „jednotku tvořící kolonie, která je definována jako množství bakteriálních buněk, jak ukazují mikrobiální počty na agarových plotnách.
Předkládaný vynález také poskytuje potravinový nebo farmaceutický prostředek, který obsahuje nejméně jeden z kmenů Lactobacillus, majícího výše uvedené vlastnosti.
Pro přípravu potravinového prostředku, podle vynálezu, je začleněn ve vhodném nosiči nejméně jeden z kmenů Lactobacillus, podle vynálezu, v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 1011 cfu/g, výhodně od kolem 106 cfu/g až kolem 1O10 cfu/g, výhodněji od kolem 107 cfu/g až kolem 109 cfu/g.
V případě farmaceutického prostředku může být produkt připraven ve formě tablet, kapalných bakteriálních suspensí, sušených orálních doplňků, vlhkých orálních doplňků, suchých potravinových přípravků pro podávání sondou a vlhkých potravinových přípravků pro podávání sondou atd., s obsahem množství kmenů Lactobacillus v rozmezí vyšším než kolem 1012 cfu/g, výhodně od kolem 107 cfu/g až kolem 1011 cfu/g, výhodněji od kolem 107 cfu/g až kolem 1O10 cfu/g.
Činnost nových mikroorganismů ve střevě jednotlivce je přirozeně závislá na dávce. Čím více nových mikroorganismů je začleněno prostřednictvím požití výše uvedeného potravinového
9999
999
9 9 9
99 nebo farmaceutického prostředku, tím vyšší je ochranná a/nebo léčebná účinnost mikroorganismů. Jelikož nové mikroorganismy nejsou škodlivé lidem a zvířatům a mohou být eventuelně izolovány ze stolic dětí, může být jejich vysoké množství začleněno tak, že podstatně velká část střeva jednotlivce bude kolonizována novými mikroorganismy.
Během rozsáhlých studií, vedoucích k předkládanému vynálezu, zkoumali vynálezci stolice dětí a izolovali z nich různé bakteriální kmeny. Tyto kmeny byly následně zkoumány pro jejich schopnost předcházet infekci epiteliálních buněk rotaviry, které jsou známou příčinou průjmu.
Některé bakteriální rody, zahrnující Lactobacillus, Lactococcus a Streptococcus, byly sledovány pro jejich schopnosti zamezovat průjmu. Tyto zkoušky inhibiční schopnosti byly provedeny hlavně se třemi sérotypy rotaviru, které představují hlavní etiologické činitele virových průjmů u člověka (sérotypy Gl, G3 a G4).
Ve vhodném prostředí byly pěstovány různé bakterie kyseliny mléčné, v takovém jako je MRS, Hugo-Jago nebo M17 při teplotách od kolem . 30° do 40°C, které odpovídají jejich optimální růstové teplotě. Po dosažení stacionárního růstu byly bakterie shromážděny centrifugací a znovu rozptýleny ve fysiologickém roztoku NaCl. Mezi jednotlivými zkouškami byly bakteriální buňky skladovány zmrazené(-20°C).
Různé zásobní kultury rotaviru byly připraveny infekcí splývajících buněčných monovrstev. Rotaviry byly inkubovány před infekcí. Buňky byly infikovány 20ti infekčními dávkami tkáňových kultur.
Pro stanovení antivirových vlastností byly použity dva různé protokoly. Podle jednoho protokolu byly různé bakteriální kmeny zkoušeny pro jejich schopnost přímé interakce s rotavirem, zatímco v druhém protokolu byly bakterie zkoumány «
< ·· na ty kmeny, které vzájemně reagují s buněčnými receptory rotaviru.
První protokol zahrnuje uvádění do styku každé bakteriální suspenze s různými kmeny rotaviru a inkubaci ve vhodném prostředí. Následně byla směs virus-bakterie aplikována na monovrstu buněk lidského adenomu tračníku z nediferencovaných buněk HT-29 a pokračovala inkubace. Poté byla zkoumána replikace viru.
Druhý protokol zahrnuje inkubaci první bakteriální suspenze spolu s monovrstvou buněk lidského adenomu tračníku z nediferencovaných buněk HT-29 a následné přidání viru. Po pokračující inkubaci byla zkoumána replikace viru.
Replikace rotaviru může být snadno stanovena histoimunologickým barvením proteinů rotaviru v infikovaných buňkách.
Inhibiční účinek na rotavirus byl připisovaný daným bakteriím, kdy množství infikovaných buněk bylo, ve srovnání s buňkami naočkovanými pouze rotavirem, sníženo o 90% v buněčné kultuře naočkované rotavirem plus danými bakteriemi.
Prokázalo se, že z 260 různých původně izolovaných bakteriálních kmenů, v podstatě pouze 9 vyvolávalo inhibici replikace rotaviru. Bylo zjištěno, že různé bakterie náleží k subtypu rhamnosus nebo paracasei rodu Lactobacillus. Jeden kmen, označovaný Lactobacillus casei STU, který je uložený ve shodě s Budapešťskou úmluvou a má přírůstková čísla NCC 2461 (1-2116), vykazuje extrémní účinnost v prevenci infekce lidských buněk rotavirem. Kromě toho, příslušný kmen vykazuje vynikající růstové schopnosti, jak se ukazuje při acidifikaci v různém prostředí. Kmen také dobře přežívá během skladování při nízkých teplotách kolem 10°C, což z něho dělá vynikajícího kandidáta pro zahrnutí do potravinových látek nebo
| ·<· | ·· · | |||||
| • · | • | • · | • · | • | 9 | • · |
| • | • ·· | « | • | • | • | • |
| • ♦ · | • | • | • · | 9 | • | |
| • | • · | • | « | • | • | • |
| • · | ··· | ··· | ·· | • 9 9 |
farmaceutických prostředků ke skladování za podmínek chladícího zařízení.
Dále se k výše uvedenému objevu ukazuje, že kmeny kupodivu vykazují antialergenní vlastnosti, kdy uvedené kmeny mají dopad na syntézu různých imunologických mediátorů.
Je obecně uznáváno, že humorální imunitní odpovědi a alergické reakce jsou zprostředkovány CD4+ T buňkami, které nesou fenotyp typu 2(Th2). Th2 buňky jsou charakterizovány tvorbou vysokých hladin interleukinu 4 (IL-4) a cytokinu, požadovaného pro sekreci IgE, který je hlavní skupinou protilátek, začleněnou v alergických reakcích.
Diferenciace Th2 buněk je poškozována IFN-γ, příslušným cytokinem, který je produkovaný vzájemně se vylučující Thl podskupinou CD4+T buněk. Uvedené Thl buňky jsou na druhé straně silně indukované interleukinem 12 (IL-12). Naproti tomu IL-10, další cytokin, má silně rušivý dopad na proliferaci Thl buněk a tudíž se uvažuje, že má úlohu v imunosupresivních reakcích.
Shrnuto, oba IL-12 a IL-10 mají silné modulační účinky na vývoj CD4+ T buněk ovlivněním vývoje podskupiny Thl. IL-12 je klíčový regulační cytokin pro indukci diferenciace Thl a tedy inhibuje tvorbu Th2 odpovědí. Hlavním způsobem inhibice Th2 buněk je tudíž spatřován ve stimulaci syntézy IL-12 pomocnými buňkami.
Je dobře známo, že některé složky gram negativních bakterií, jako je LPS, navozují vysoké hladiny IL-12 v adherentních buňkách, jako jsou makrofágy a dendritické buňky. Shodně se ukazuje, že gram negativní bakterie mohou silně ovlivnit diferenciaci CD4+ T buněk směrem k Thl fenotypu.
Mikroorganismy ST11, jako například kmeny Lactobacillus, podle vynálezu, byly zkoušeny pro potenciální úlohu v indukci cytokinů, zahrnutých v regulaci diferenciace CD4+ T buněk.
§
| • 9 | 9· | a « ·· · | ||||
| 9 · | 9 | • 9 | 99 | • | 9 | 9 9 |
| • | ··· | 9 | • | 9 | 9 | 9 |
| 9 | 9 9 9 | • | 9 | • 9 | • | 9 |
| 9 | • » | 9 | 9 | • | • | 9 |
| 9999 | 99 | ti· | «99 | 99 | • 99 |
Zejména byl studován účinek ST11 na fenotyp CD4+ T buněk, podstupujících diferenciaci Th2.
V tomto ohledu byla schopnost ST11 indukovat syntézu mRNA, která kóduje tyto dva regulační cytokiny v myších adhrerentních buňkách získaných z kostní dřeně, srovnána se 4 dalšími kmeny Lactobacillus a s kontrolní gram negativní bakterií (E. coli K12). Po 6ti hodinové inkubaci buněk s různými ředěními v rozmezí od 109 až 107 cfu/ml byla mRNA měřena semikvantitativní RT-PCR.
Ačkoliv všechny kmeny Lactobacillus mohou indukovat transkripci IL-12 mRNA do určitého stupně, ST 11 se může ukazovat jako nejsilnější vyvolavatel, vzhledem k tomu, že může být detekován silný PCR signál dokonce při nejnižší bakteriální dávce. Ve skutečnosti byla schopnost STU indukovat transkripci IL-12 mRNA tak silná jako u E.coli. Indukce IL-10 mRNA byla obecně slabší než pro IL-12 mRNA, protože signál mohl být detekován pouze při vyšších bakteriálních dávkách. Nicméně, ST11 byl nejsilnějším vyvolavatelem IL-10 mRNA, jak srovnáno s jinými Lactobacilly a kontrolní E.coli.
ST11 se tedy zdá být schopný indukce imunoregulačních cyrtokinů, zahrnutých v diferenciaci CD4+ T buněk. Jeho silná schopnost indukovat IL-12 z něho dělá kandidáta inhibice Th2 odpovědí a jeho měřitelná indukce IL-10 může předcházet zánětlivým odpovědím.
Dále bylo k výše uvedenému objevu určeno, který STU měl inhibiční účinek na CD4+ T buňky, podléhající Th2 diferenciaci a který měl positivní účinek na funkce Thl. Byl užit dobře založený systém pro diferenciaci buněk v kultuře, kde prekursor CD4+ T buněk byl polyklonálně aktivován a modulován, až došlo k diferenciaci Thl nebo Th2, v závislosti na typu společného stimulu v živném prostředí.Thl/Th2 diferenciace byla indukována během 7 denní primární kultury, poté byly buňky opět ·· ·· • · ♦ • ·♦· • >· « • ·· ···· ··
9· ···· •· •·
4· ··· ··· »· · • ··· ♦· • · ·· • ·· • 4··· stimulovány po 2 dny v sekundární kultuře, obsahující samotné prostředí a přídavek specifického fenotypu (Thl nebo Th2) byl stanoven měřením typů cytokinů, produkovaných v supernatantu (IFN-γ versus IL-4).
Je známo, že prekursor CD4+ T buněk z myší BALB/c dosud především rozlišoval predominantní Th2 fenotyp ((vysoké IL-4, nízké IFN -Y v supernatantech dvoutýdenní kultury) po aktivaci za neutrálních podmínek (samotné prostředí v týdenní kultuře). Tento fenotyp mohl být kompletně navrácen do původního stavu k původnímu Thl (vysoké IFN-γ, nízké IL-4) při přidání blokujících monoklonárních protilátek k IL-4 v týdenní kultuře.
Ke zkoumání potenciální úlohy STU na inhibici Th2, byly v týdenní kultuře aktivovány čištěné prekursory CD4+ T buněk z BALB/c myší za přítomnosti adherentních buněk z kostní dřeně jako pomocných buněk. Tyto buňky byly společně pěstovány buď v samotném prostředí nebo za přítomnosti Img/ml LPS nebo 108 cfu/ml STU nebo 103 cfu/ml jiného kmene Lactobacillus. Po čase byly buňky promyty a CD4+ T buňky byly opět jednou čištěny a znovu stimulovány ve dvoutýdenní kultuře v samotném prostředí. Cytokiny, produkované diferencovanými CD4+ T buňkami, byly měřeny po dvou dnech. Jak očekáváno, buňky, které byly diferencované za přítomnosti samotného prostředí, se ukázaly dominantní fenotypu Th2. Přidání STU do týdenní kultury silně ovlivňovalo výsledek Th2 diferenciace, jak to vyplývá z 8násobného snížení produkce IL-4. Tato inhibice byla podobnou veličinou jako ta, která byla pozorována v kulturách, získaných z buněk, které byly diferencovány za přítomnosti LPS. Naproti tomu, další kmen Lactobacillus měl neměřitelný dopad na hladiny il-4. Je zajímavé, že hladiny IFN-γ nebyly zvýšeny při přidání STll do týdenní kultury.
Shrnuto, STll specificky snižuje produkci IL-4 CD4+ T buňkami, které podléhají diferenciaci Th2, ale nevýznamně zvyšuje sekreci IFN-γ. Tato skutečnost, že STll nezvyšuje
produkci IFN-γ, může být vztažena k jeho schopnosti indukovat IL-10 s důsledkem, že to může mít nízký zánětlivý dopad navzdory jeho činnosti proti Th2.
Následně se může zdát, že STU je kmen Lactobacillus, který má profil proti Th2, který ho dělá výborným kandidátem pro jeho užití jako bakterií s protialergickou a probiotickou činností.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 znázorňuje schéma, ilustrující zkoumání buněčné kultury pro stanovení obranných vlastností bakteriálních kmenů proti rotavirům.
Obr. 2 znázorňuje acidifikaci kmene L.casei CNCM 1-2116 (označované ST11) v různém růstovém prostředí.
Obr. 3 znázorňuje rychlost přežití kmene L.casei STU při 10°C, měřenou během 30ti dnů.
Obr. 4 znázorňuje složení mRNA pro IL-12 a IL-10 v myších adherentních buňkách, získaných z kostní dřeně, po inkubaci buněk s různými ředěními ST11.
Obr. 5 znázorňuje výsledek diferenciace Th2 jako důsledek snížení produkce IL-4.
Vynález bude nyní popsán cestou nelimitujících příkladů.
Příklady provedení vynálezu
Prostředí a roztoky:
MRS(Difco)
Hugo-Jago(trypton 30g/l (Difco), extrakt z kvasinek 10 g/1 (Difco), laktóza 5 g/1 (Difco) , KH2PO4 5 g/1, hovězí extrakt 2 g/1 (Difco), agar 2 g /1 (Difco)) • ·
M17 (Difco)
M199(Seromed)
Ringerův roztok (Oxoid)
PBS (NaCl 8 g/1, KC1 0.2 g/1, Na2HPO4 1.15 g/1, KH2PO4 0.2 g/1)
Bujón s tryptósou a fosfátem (Flow)
Roztok Trypsin-EDTA (Seromed)
Lidský rotavirus Wa (G1 sérotyp) a opičí rotavirus SA-11 (G3 sérotyp) byly získány z (P.A. Offit, Children's Hospital, Filadelfie, U.S.A.). DS-lxRRV virus byl získán z (A. Kapikian, NIH Bethesda, U.S.A). sérotyp 4 lidského rotaviru Hochi byl získán z ( P.Bachmann, University of Munich, Německo).
Příklad 1
Isolace bakterií kyseliny mléčné ze stolice dětí
Z plen 16ti zdravých dětí ve stáří 15 až 27 dní, byly sebrány čerstvé stolice. 1 g čerstvé stolice byl umístěn za anaerobních podmínek pro transport do laboratoře a během dvou hodin proběhly mikrobiální analýzy zkoumaných vzorků různými ředěními v Ringerově roztoku a očkováním na selektivní živné půdy. K izolaci bakterie kyseliny mléčné byl užit MRS agar plus antibiotika ( phosphomycin 80 pg/ml, sulfamethoxazol 93 pg/ml, trimethoprim 5 pg/ml), které byly inkubovány po dobu 48 hodin při 37C. Kolonie byly náhodně vybrány a čištěny. Fysiologické a genetické charakteristiky byl provedeny na izolátech.
Příklad 2
Zkoušeni kmenů v buněčné kultuře pro antivirovou účinnost
Byly vybrány různé bakteriální rody, zahrnující Lactobacillus, Lactococcus, Streptococcus, a byly zkoušeny v inhibiční zkoušce pro členy, které vykazují antivirovou účinnost v buněčné kultuře. Rod Lactococcus byl representován jediným typem (Lc.
·· · · · · · ···· ·· · · ···· ···«· • · · ·· · · ···· ·· ··· ··· ·· ·
Lactis), který sestává ze dvou podtypů (Lc. Lactis podtypy lactis a cremoris). Bylo zkoušeno celkem 30 kmenů. Rod Streptoccocus byl representován jediným typem (S. thermophilus) se 45 kmeny. Rody Leuconostoc a Propionibacterium byly representovány pouze jediným typem (6 kmenů), zatímco rody Enterococcus a Staphylococcus byly representovány každý dvěma typy a celkem 17ti kmeny.
Celkem bylo na inhibiční účinnost proti rotaviru zkoušeno 260 bakteriálních kmenů.
1. protokol:
Bylo mícháno 30 μΐ bakteriální suspenze (obsahující průměrně 3χ 106 bakterií) se 70 μΐ M199 prostředí, doplněného s 10% bujónu s tryptósou a fosfátem (Flow) a 5% roztoku trypsinEDTA (Seromed)(ředěného 1:4 v případě buněk HT-29) a 100 μΐ viru v doplněném M199 prostředí. Směs virus-bakterie byla inkubována po dobu jedné hodiny při 4°C a po dobu jedné hodiny při 37°C. Buňky lidského adenomu tračníku z nediferencovaných buněk HT-29, rostoucí jako splývající monovrstva v mikrotitračních plotnách s 96 vyhloubeními, byly promyty třikrát fysiologickým roztokem chloridu sodného s fosfátovým pufrem (PBS;pH 7.2). Směs virus-bakterie byla aplikována na buňky a mikrotitrační plotny byly inkubovány po dobu 18ti hodin v CO2 inkubátoru (Heraeus). Replikace viru byla stanovena jak popsáno níže.
2. protokol
Bylo mícháno 30 μΐ bakteriální suspenze (výše uvedené) se 70 μΐ M199 prostředí, doplněného s 10% bujónu s tryptósou a fosfátem (Flow) a 5% roztoku trypsin-EDTA (Seromed)(ředěného 1:4 v případě buněk HT-29) a aplikováno přímo na buňky v mikrotitračních plotnách. Po jednohodinové inkubaci při 37° C. bylo 100 μΐ viru V doplněném prostředí M199 přidáno k buňkám v mikrotitračních plotnách. Následovala inkubace po
dobu 18ti hodin v C02 inkubátoru (Heraeus) . Replikace viru byla stanovena, jak popsáno níže.
Replikace viru byla stanovena histo-imunologickým barvením proteinů rotaviru v infikovaných buňkách, jak je dále popsáno.
Buňky živného prostředí byly vyjmuty z mikrotitračních ploten jeden den po infekci a buňky byly fixovány čistým etanolem po dobu 10ti minut. Etanol byl odstraněn a plotny byly promyty třikrát v PBS pufru. Poté 50 μΐ antivirového séra (zejména zaměřeného proti proteinu VP6), vytvořeného u králíků (získaných z ISREC University of Lausanne) a ředěného 1:2000 v PBS, bylo přidáno do každého vyhloubení a inkubováno po dobu jedné hodiny při 37°C s krycím sklíčkem pro prevenci vysušení vyhloubení. Antiserum bylo potom odstraněno a plotny byly promyty třikrát s PBS. Poté bylo přidáno do každého vyhloubení 50 μΐ antisera imunoglobul i nu G (igG) proti králíkům, produkovaného u koz a vázaného na peroxidázu (GAR-IgG-PO; Nordic) v ředění 1:500 v PBS a plotny byly inkubovány po dobu jedné hodiny při 37°C. Sérum bylo odstraněno a plotny byly opět promyty třikrát s PBS. Poté bylo do každého vyhloubení přidáno 100 μΐ následující směsi substrátu: 10 ml 0.05 M Trishydrochloridu (pH 7.8), 1 ml H2O2 (30% suprapur, ředěno 1:600 v h2O; Měrek) a 200 μΐ 3 -amino-9-ethylkarbazolu (0.1 g/lOml etanolu, skladovaného po podílech s objemem 200 μΐ pří -80°C; A-5754; Sigma). Plotny byly inkubovány po nejméně 30 minut při teplotě místnosti. Substrát byl odstraněn a vyhloubení byla naplněna 200 μΐ H2O k ukončení reakce. Ohniska infikovaných buněk byla spočítána v invertovaném mikroskopu (Diavert; Leitz).
S rotaviry vzájemně reagovalo pouze velmi málo bakteriálních kmenů. Pouze 9 z 260 bakteriálních buněk, původně vybraných, inhibovalo replikaci viru v nejméně jednom protokolu. Lactobacillus paracasei NCC 2461 (ST11) vykazuje extrémně vysokou účinnost proti Sérotypu 1 rotaviru, Sérotypu 3 rotaviru SA-11 a Sérotypu 4 rotaviru Hochi.
Přiklad 3
Vlastnosti STU
STU byl podroben inkubaci v napodobené žaludeční šťávě. Napodobená žaludeční šťáva byla připravena suspendováním pepsinu (3g/l) ve sterilním izotonickém roztoku chloridu sodného (0.5% hmotnostních) a úpravou pH na 2.0, respektive na 3.0 koncentrovanou HC1. STU rostl v různých množstvích ve výše uvedeném prostředí a byla určována resistence mikroorganismů.
Výsledky jsou shrnuty v tabulce I níže.
Tabulka I
| pH | Cfu/ml v čase 0 | Cfu v čase 1 minuta | Cfu v čase 15 minut | Cfu v čase 30 minut | Cfu v čase 60 minut |
| 2.0 | 2.Οχ 109 | 1.8 x 109 | 1.2 x 109 | 3.7 x 108 | 7.0 x 103 |
| 3.0 | 2.Οχ 109 | 1.9 x 109 | 1.7 x 109 | 1.7 x 109 | 8.4 x 108 |
STU měl následující vlastnosti, jak určeno podle způsobů popsaných pro druhy bakterií kyseliny mléčné (Vydavatel, B.J.B. Wood a W.H.Holzapfel, Blackie A&P).
-gram pozitivní
-negativní na katalázu
-negativní na tvorbu NH3 formy argininu
-negativní na tvorbu CO2
-negativní na produkci L(+) kyseliny mléčné
-rostou v přítomnosti žlučových solí při jejich koncentraci vyšší než 0.4%
Příklad 4
Růst STU za různých podmínek
STU byl inkubován při 37°C v prostředí na basi rajčat (4% rajčatový prášek rehydratovaný v destilované vodě) doplněném sacharózou (0, 0.5, 1 nebo 2%) nebo peptonem sóji (0.5%) nebo glukózou (0.5%) pro různá časová období. Výsledky jsou znázorněny na obr. 5.
STU byl dále přidán k prostředí, které sestávalo z rýžové mouky (3%), pšeničné mouky (2%) a sacharózy (3%), v množství 2.5% a bylo inkubováno při 37°C až bylo dosaženo pH 4.4. Po zchlazení byl produkt zabalen s přidáním vitaminu C nebo bez přidání vitaminu C a skladován při 10°C.
Přiklad 5
Indukce syntézy IL-12 a IL 10 mRNA myších adherentních buněk prostřednictvím STU
Buňky kostní dřeně byly izolovány z femuru a tibie 8 týdnů starých specifických myších C57BL/6 patogenů prostých a byly inkubovány v koncentraci 2xl06 buněk/ml v RPMI prostředí (Gibco), které obsahovalo 10% fetálního hovězího séra, lmM LGlataminu, 12mM Hepes, 0.05 mM 2-merkaptoetanolu, 100 U/ml penicilinu a 100 pg/ml streptomycinu (všechna činidla z Gibco) po dobu 12ti hodin při 37°C v 5% CO2 ovzduší. Neadherentní buňky byly vyloučeny třemi postupnými promytími teplým živným prostředím a zbývající adherentní buňky byly sebrány a inkubovány v koncentraci 106 buněk /ml po dobu 6ti hodin v optimálním čase pro syntézu cytokinu mRNA myších adherentních buněk v odpovědi na LPS. Byly přidány bakterie v různých koncentracích v rozmezí od 109 až 107 cfu/ml. Bakterie byly pěstovány a skladovány jak udáno výše.
Nakonec 6ti hodinového kultivačního období byly buňky izolovány centrifugací a rozrušeny užitím reakčního balíčku TRIzol (GibcoBRL, Kat. č. 15596-018) podle výrobních instrukcí. Úplná RNA byla izolována precipitací izopropanolu a byla reversně transkribována do cDNA po dobu 90ti minut při 42°C za použití 200 U reversní trankriptázy (Superscript II, BRL) v reakčním objemu s obsahem 200 mM Tris pH 8.3, 25 mM KC1, 1 pg/ml oligo d(T)15 (Boehringer Mannheim), 1 mM DTT (Boehringer Manheim) , 4 mM každé dNTP (Boehringer Mannheim) a 40 U/ml Rnasin (Promega) . Byly užity PCR priméry a podmínky, jak již bylo popsáno (Kopf a spol., Journal of experimental Medicine 1. září 1996; 184(3):1127-36). Množství cDNA bylo normalizováno ve vzorcích užitím primérů specifických pro geny (β-2mikroglobulin). Produkty PCR byly odděleny na 2% agarovém gelu a pásy byly analyzovány pod UV zářením.
Jak znázorněno na obr. 7, STU vykazuje nejsilnější indukci IL-12 a IL-10 mRNA, která byla srovnatelná s hladinami, pozorovanými u pozitivní kontroly (E.coli). Rozdíly jsou nejlépe zřejmé při nejnižších bakteriálních koncentracích (107 cfu/ml).
Přiklad 6
Suprese syntézy IL-4 prostřednictvím STU
CD4+ T buňky ze sleziny specifických myších BALB/c patogenů prostých byly čištěny užitím balíčku MiniMACS (Miltenyi Biotec, Kat. č. 492-01). CD4+ T buňky byly pěstovány při koncentraci 2xl05 buněk/ml v RPMI prostředí, které obsahovalo 10% fetálního hovězího séra, 1 mM L-glutaminu, 12 mM Hepes, 0.05 mM 2-merkaptoetanolu, 100 U/ml penicilinu a 100 pg/ml streptomycinu a buňky byly aktivovány během jednoho týdne protilátkami vázanými příčnými vazbami k plotnám z CD3 (klon 2C11) a CD28 (klon 37.51, obojí protilátky z Pharmingen). Během tohoto týdenního pěstování, byly buňky společně pěstovány s adherentními buňkami kostní dřeně (izolovanými jak popsáno výše) jako pomocnými buňkami a s 108 cfu/ml ST11 nebo 108 cfu/ml Lal nebo 1 mg/ml LPS nebo samotným prostředím. Po této době byly buňky promyty a CD4+ T buňky byly jednou čištěny užitím MiniMACS balíčku a opět stimulovány ve dvoutýdenní kultuře, která obsahovala samotné prostředí. Cytokiny, produkované diferencovanými CD4+ T buňkami, byly měřeny po dvou dnech v supernatantech použitím sendvičové ELISA ( balíčky z Endogen a Pharmigen).
Výsledky jsou znázorněny na obr. 5. Buňky, diferencované za přítomnosti samotného prostředí, ukazují dominantní Th2 fenotyp, který je charakterizovaný vysokými hladinami IL-4. Přidání STU k týdenním kulturám silně modulovalo výsledek diferenciace Th2, jak vyplývá z osminásobného snížení produkce IL-4. Tato inhibice byla podobné velikosti jak bylo pozorováno v kulturách, získaných z buněk diferencovaných v přítomnosti LPS.Naproti tomu, jiný kmen Lactobacillus měl neměřitelný dopad na hladiny IL-4. Zajímavé je, že hladiny IFN-γ nebyly po přidání STU v týdenních kulturách zvýšeny.
Jak může být zřejmé, z výše uvedených kmenů, podle vynálezu, mohou být dobře připraveny potravinové a/nebo farmaceutické nosiče, které přinášejí výhodu cenných vlastností mikroorganismů.
Přiklad 7
Kmen STU byl v klinické zkoušce zkoumán ve společnosti z okolí Guatemala City na svoji schopnost způsobit přenos akutního průjmu v období dešťů, což bylo zkoušeno většinou na dětech v této oblasti. Celkem bylo ve studii zahrnuto 203 dětí ve věku od 35 měsíců do 70ti měsíců, které přijaly cílovou dávku 1O10 životaschopných organismů (ST11) nebo žádnou dávku (placebo) během 29ti denního příjmového období. Děti, vybrané pro obojí vzorek a respektive placebo, měly typické nedostatky v hmotnosti vzhledem k věku a výšce vzhledem k věku, které jsou charakteristické pro podvýživu.
Před započetím příjmového pokusu u předškolních dětí bylo bezpečné provedení založeno na studiích in vitro a in vivo. In vitro studie vykazovaly typickou resistencí pro antibiotika podobnou typu u jiných lactobacillů užitých pro potravinové účely a žádný potenciál pro tvorbu biogenních aminů, pro degradaci hlenu a pro dekonjugaci žlučových solí. V kontrolní klinické studii s placebem, která zahrnovala 42 dospělých dobrovolníků, byl ST11 dobře tolerován a nevyvolával žádné nežádoucí účinky. Mezi potenciálními projevy byly monitorovány plynatost, množství stolic za den a konzistence stolice. Hladiny proteinů akutní fáze nenasvědčovaly žádné potenciální zánětlivé reakci.
Vzorky a placeba byly zabaleny do sáčků v (Nestlé Product Technology Center manufacturing facility v Konolfingen, Švýcarsko) a odeslány zmrazené do Guatemaly. Každý lOg sáček obsahoval nosné prostředí s čokoládovým aroma a buď 0.2 g STU (1O10 cfu) nebo v případě placeba 0.2 g mléčného prášku. Nosné prostředí s čokoládovým aroma sestávalo z kakaového prášku, cukru, sojového lecitinu, vanilinu a skořice. Sáčky byly skladovány při 4° až 6°C až do dvou hodin před použitím. Před použitím byly sáčky rozpuštěny ve 100 ml vody, poskytnutou Nestlé. Tato voda byla prostá jakékoliv bakteriální kontaminace.
Podle přiloženého zápisu byl průjem definován jako výskyt tří nebo více tekutých nebo neformovaných stolic během 24 hodinového období. Průjmová episoda byla definována jako událost, při které došlo k evidenci průjmu (tři průjmovité stolice během 24 hodin). Její celkové trváni v hodinách bylo vypočítáno z okamžiku první ze tří označených stolic do objevení se první formované stolice nebo do období 24 hodin bez defekace. Pro dítě, které mělo „novou episodu, uplynulo od konce předchozího období 48 hodin. Jestliže ne, pak to bylo hodnoceno jako pokračování té samé episody a pro hodnocení byla užita celková doba trvání. Jeden z případů bylo dítě, které zakusilo jednu nebo více dokumentovaných episod průjmu během 29 denního sledovaného období. Intenzita průjmových episod byla založena na celkovém množství řídkých stolic. Složky vážnosti episody zahrnují přítomnost krve, hlenu nebo hnisu ve stolicích, společně se symptomy horečky a zvracení. Jako vážnou klasifikovala episodu také intenzita sedmi stolic během 24 hodin nebo potřeba zásahu zdravotnických odborníků na klinikách, ve zdravotnických střediscích nebo nemocnicích.
Pokud byly průjmová episoda diagnostikována ze sledovaného systému, byl sebrán vzorek průjmovité stolice pro mikroskopické vyšetření a pěstování k identifikaci potenciálního etiologického patogena pro danou episodu. Vzorek byl diagnostikován na antigen rotaviru, giardie a E. histolytica, v jednom případě na dysenterii, a na bakteriální patogeny, zahrnující Shigellu, Salmonellu, Aeromonas, Plesiomonas, shigelloides, E.coli a možná V. cholerae.
Během období zkoumání byly vzorky sebrány ke zkoušce schopnosti mikroorganismů, obsažených během období podávání. Ukazuje se, že mikroorganismy zůstali životaschopné v sáčcích během celé studie, tak že také na konci studie byly sáčky schopné dodat 1O10 životaschopných mikroorganismů na rekonstituci s vodou.
Studie ukázaly, že vzorky, obsahující probiotické mikroorganismy, mohou snižovat výskyt průjmu na rozdíl od kontrolní skupiny (placebo), asi o 30%. Avšak, také kontrolní skupina již ukazovala snížené množství výskytu průjmu oproti běžné populaci, která nepřijala ani vzorek ani placebo. Tento novější objev může být zčásti objasňován na základě dětí, které přijímaly doplňkovou hodnotnou výživu a vodu prostou kontaminace. Nicméně, poněvadž studie byla provedena v terénu, může být snadno odvozeno, že STU může spolehlivě snižovat výskyt průjmu in vivo.
Zastupuj e:
1.
• •9 9 • 99 •
• 9
Claims (5)
1/5 . „,issrf·..
2/5
Ol bb
Okyselení L. casei STU v různých růstových prostředích
2. Lactobacillus, podle nároku 1, vyznačující se tím, zeje vybrán ze skupiny, která sestává z Lactobacillus rhamnosus nebo Lactobacillus paracasei.
Lactobacillus, podle nároku 2, vyznačující tím, ž e je Lactobacillus paracasei.
Kmen Lactobacillus paracasei, podle nároku 3, vyznačující se tím, ž e je
Lactobacillus paracasei. CNCM 1-2116.
5. Užití bakterií kyseliny mléčné, podle některého z předcházejících nároků, pro přípravu poživatelného nosiče.
6. Užití, podle nároku 5, kdy kmen Lactobacillus je obsažen v nosiči v množství od kolem 105 cfu/g až kolem 1012 cfu/g nosiče.
7. Užití podle některého z nároku 5 nebo 6, kdy nosičem je potravinový prostředek, vybraný z mléka, jogurtu, tvarohu, sýru, fermentovaných mlék, fermentovaných produktů na basi mléka, zmrzlin, fermentovaných produktů na basi obilovin, práškových mlék, kojenecké výživy.
Užití, nosič poruch, podle některého z nároku 5 až 6, kde je užít pro léčení a/nebo profylaxi spojených s průjmem.
9.
Potravinový nebo farmaceutický prostředek, v y ž e obsahuje žnačující s nejméně jednu bakterii nároků 1 až některého z .
Prostředek, c i se t tvarohu, e tím, kyseliny mléčné, podle
3.
n a č u j i jogurtu, mlék, podle nároku 12, vy z i m, ž e je vybrán z mléka, sýru, fermentovaných fermentovaných produktů na basi mléka, fermentovaných produktů na basi práškových mlék, dětské bakteriálních zmrzliny, obilovin, kapalných orálních výživy, suspenzí, orálních tablet, doplňků, vlhkých potravinových přípravků pro sušených doplňků, podání suchých sondou nebo vlhkých potravinových přípravků pro podání sondou.
Zastupuj e:
.3P *£
4/5 • «· • · « « • · · ···· ··
Indukce mRNA cytokinu působením LAB u myších makrofágů
Ti·
TV
♦ »>4 •4 · • » ♦ » • . ·· · • ·4 · · 4· ·
I Μ Μ I K
O co
Ή £
>N V cu
(iui/np 6o|)
LQ CM
O CM m
í£ s ω o O δ
MH C >N O r-4 «I 43 O O qoÁudoqosBqoArz q.90Oj
HDPE:polyethylen s vysokou PS: polystyren Vit C. vitamin C hustotou
4 4 4 • ·
4 4« s
4 4
5/5
Uvolňování cytokinů v IVD 980916 (ELISA 981103 & 980925) |ui/6u
O CL ob
Έ
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP99104924A EP1034788A1 (en) | 1999-03-11 | 1999-03-11 | Lactic acid bacteria strains capable of preventing diarrhea |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20013265A3 true CZ20013265A3 (cs) | 2002-02-13 |
| CZ300862B6 CZ300862B6 (cs) | 2009-08-26 |
Family
ID=8237748
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20013265A CZ300862B6 (cs) | 1999-03-11 | 2000-03-02 | Kmen Lactobacillus paracasei a jeho použití |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7029669B1 (cs) |
| EP (3) | EP1034788A1 (cs) |
| JP (1) | JP2002537866A (cs) |
| CN (1) | CN1195530C (cs) |
| AR (1) | AR022913A1 (cs) |
| AT (1) | ATE267605T1 (cs) |
| AU (1) | AU779804B2 (cs) |
| BR (1) | BR0008912B1 (cs) |
| CA (1) | CA2364436C (cs) |
| CO (1) | CO5210969A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ300862B6 (cs) |
| DE (1) | DE60011061T2 (cs) |
| DK (1) | DK1165104T3 (cs) |
| ES (1) | ES2220420T3 (cs) |
| HU (1) | HUP0200206A3 (cs) |
| ID (1) | ID30510A (cs) |
| IL (1) | IL145078A0 (cs) |
| MY (1) | MY127895A (cs) |
| NO (1) | NO327205B1 (cs) |
| NZ (1) | NZ513805A (cs) |
| PE (1) | PE20001540A1 (cs) |
| PL (1) | PL198626B1 (cs) |
| PT (1) | PT1165104E (cs) |
| RO (1) | RO121699B1 (cs) |
| RU (1) | RU2246956C2 (cs) |
| WO (1) | WO2000053201A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA200107294B (cs) |
Families Citing this family (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1593382A1 (en) * | 2000-10-06 | 2005-11-09 | Société des Produits Nestlé S.A. | Use of probiotic lactic bacteria for balancing the skin's immune system |
| KR100419132B1 (ko) * | 2000-12-29 | 2004-02-18 | 조성근 | 위·장 점막 부착성과 증식성, 내산성, 내담즙성 및헬리코박터 파일로리, 대장균 0157:ｈ7에 대한 항균성이우수한 락토바실러스 파라카제이 서브스패시즈 파라카제이ｃｓｋ 01 |
| DK1485463T3 (da) | 2002-03-21 | 2008-11-10 | Bifodan As | Lactobacillus stamme |
| EP1384483A1 (en) * | 2002-07-23 | 2004-01-28 | Nestec S.A. | Probiotics for treatment of irritable bowel disease (IBS) through improvement of gut neuromuscular function |
| EP1634600A4 (en) * | 2003-03-13 | 2007-03-14 | Kirin Brewery | ANTIALLERGIC COMPOSITION |
| US8877178B2 (en) | 2003-12-19 | 2014-11-04 | The Iams Company | Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals |
| US20050158294A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | The Procter & Gamble Company | Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum |
| KR100686557B1 (ko) * | 2004-08-16 | 2007-02-23 | 씨제이 주식회사 | 체지방 저하 기능성 락토바실러스 람노서스와 이를 함유한 식품 |
| US7858073B2 (en) * | 2004-08-17 | 2010-12-28 | Hunter Technology Limited | Oral killed vaccines and method for providing same |
| EP1683425A1 (en) | 2005-01-21 | 2006-07-26 | Compagnie Gervais Danone | Use of a fermented milk containing L. Casei for the manufacture of a composition for the prevention or treatment of a delayed-type hypersensitivity reaction |
| JP4847038B2 (ja) * | 2005-04-11 | 2011-12-28 | ゲンモント バイオテック インコーポレイティド | ラクトバチルス・パラカゼイの新規微生物株ｇｍ−０８０及びアレルギー関連疾患を処置するためのその使用 |
| JP4938006B2 (ja) | 2005-05-31 | 2012-05-23 | ザ・アイムス・カンパニー | ネコ科動物プロバイオティク・ビフィドバクテリア |
| AU2006253006B8 (en) | 2005-05-31 | 2011-09-15 | Alimentary Health Ltd | Feline probiotic Lactobacilli |
| JP2007028920A (ja) * | 2005-07-22 | 2007-02-08 | Japan Research & Development Association For New Functional Foods | 発酵乳およびその製造方法 |
| US7374924B2 (en) | 2006-06-05 | 2008-05-20 | Biogaia Ab | Use of selected lactic acid bacteria for reducing infantile colic |
| CN101273736B (zh) * | 2007-03-28 | 2012-08-08 | 北京弗蒙特生物技术有限公司 | 一种在常温下保持高活菌数的发酵乳的制备方法 |
| US9771199B2 (en) | 2008-07-07 | 2017-09-26 | Mars, Incorporated | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
| BRPI0922296A2 (pt) * | 2008-12-05 | 2015-08-11 | Nestec Sa | Composições para o uso em recém-nascidos com baixo peso no nascimento. |
| WO2010103132A1 (es) * | 2009-03-10 | 2010-09-16 | Hero España, S.A. | Aislamiento, identificación y caracterización de cepas con actividad probiótica a partir de heces de lactantes alimentados exclusivamente con leche materna |
| ES2559008T3 (es) * | 2009-05-11 | 2016-02-10 | Nestec S.A. | Bifidobacterium longum NCC2705 no replicante y trastornos inmunitarios |
| US10104903B2 (en) | 2009-07-31 | 2018-10-23 | Mars, Incorporated | Animal food and its appearance |
| CA2774963A1 (en) * | 2009-10-09 | 2011-04-14 | Prothera, Inc. | Compositions and methods comprising pediococcus for reducing at least one symptom associated with autism spectrum disease in a person diagnosed with an autism spectrum disease |
| JP5261617B2 (ja) * | 2011-03-31 | 2013-08-14 | 森永乳業株式会社 | 新規乳酸菌、並びに新規乳酸菌を含有する医薬、飲食品、及び飼料 |
| US10039296B2 (en) | 2011-06-20 | 2018-08-07 | H.J. Heinz Company Brands Llc | Probiotic compositions and methods |
| AU2015334989B2 (en) * | 2014-10-21 | 2020-10-08 | Aquilon Cyl Sociedad Limitada | Probiotic and prebiotic compositions |
| CN107405321A (zh) | 2015-01-23 | 2017-11-28 | 坦普尔大学 | 短链脂肪酸在癌症预防中的应用 |
| KR101885863B1 (ko) * | 2015-11-18 | 2018-08-06 | 서울대학교산학협력단 | 항 노로바이러스 활성을 갖는 락토바실러스 속 균주 및 이를 포함하는 항바이러스 조성물 |
| JP7466166B2 (ja) * | 2018-08-08 | 2024-04-12 | 有限会社バイオ研 | 乳酸菌含有ウイルス感染防御剤及びその製造方法 |
| CN111034795A (zh) * | 2018-10-11 | 2020-04-21 | 杭州贝谷生物科技有限公司 | 高含谷胱甘肽和s-腺苷-l-蛋氨酸酸奶的生产方法 |
| WO2020148391A1 (en) | 2019-01-16 | 2020-07-23 | N.V. Nutricia | Fermented formula with non-digestible oligosaccharides for use in rotavirus induced infection |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE161181T1 (de) * | 1992-07-06 | 1998-01-15 | Nestle Sa | Lactobacillus acidophilus enthaltende antigastritis-mittel |
| WO1995033046A1 (en) * | 1994-05-26 | 1995-12-07 | Bracco S.P.A. | Lactobacillus strains of human origin, their compositions and uses thereof |
| US5837238A (en) * | 1996-06-05 | 1998-11-17 | Biogaia Biologics Ab | Treatment of diarrhea |
| IT1284877B1 (it) * | 1996-08-09 | 1998-05-22 | Dicofarm Spa | Trattamento delle diarree acute del bambino e prevenzione della sensibilizzazione allergica verso alimenti introdotti nella fase |
| IT1289984B1 (it) * | 1997-02-27 | 1998-10-19 | Proge Farm Srl | Ceppi di lattobacilli utili nel trattamento di disfunzioni del sistema gastrointestinale |
| DK2241616T3 (da) * | 1997-08-21 | 2013-02-18 | New Zealand Dairy Board | Immunitetsforbedrende mælkesyrebakterier |
| SE510813C2 (sv) * | 1997-12-08 | 1999-06-28 | Arla Ekonomisk Foerening | Bakteriestam av arten Lactobacillus Paracasei subsp. paracasei, sammansättning därav för användning i livsmedel, samt produkt innehållande stammen |
| CZ20013269A3 (cs) * | 1999-03-11 | 2002-04-17 | Société des Produits Nestlé S. A. | Bakterie mléčného kvaąení |
-
1999
- 1999-03-11 EP EP99104924A patent/EP1034788A1/en not_active Withdrawn
-
2000
- 2000-03-02 PT PT00909291T patent/PT1165104E/pt unknown
- 2000-03-02 EP EP00909291A patent/EP1165104B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-02 ES ES00909291T patent/ES2220420T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-02 ID IDW00200101964A patent/ID30510A/id unknown
- 2000-03-02 HU HU0200206A patent/HUP0200206A3/hu unknown
- 2000-03-02 US US09/936,543 patent/US7029669B1/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-03-02 RO ROA200101018A patent/RO121699B1/ro unknown
- 2000-03-02 DK DK00909291T patent/DK1165104T3/da active
- 2000-03-02 AT AT00909291T patent/ATE267605T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-03-02 CN CNB00807397XA patent/CN1195530C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-03-02 CA CA2364436A patent/CA2364436C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-03-02 PL PL350768A patent/PL198626B1/pl unknown
- 2000-03-02 DE DE60011061T patent/DE60011061T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-02 IL IL14507800A patent/IL145078A0/xx unknown
- 2000-03-02 WO PCT/EP2000/001797 patent/WO2000053201A1/en active IP Right Grant
- 2000-03-02 RU RU2001127529/13A patent/RU2246956C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-03-02 NZ NZ513805A patent/NZ513805A/xx not_active Application Discontinuation
- 2000-03-02 JP JP2000603690A patent/JP2002537866A/ja active Pending
- 2000-03-02 CZ CZ20013265A patent/CZ300862B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-03-02 BR BRPI0008912-5A patent/BR0008912B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2000-03-02 EP EP20040000555 patent/EP1415656A1/en not_active Ceased
- 2000-03-02 AU AU31628/00A patent/AU779804B2/en not_active Ceased
- 2000-03-10 PE PE2000000214A patent/PE20001540A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-03-10 MY MYPI20000953A patent/MY127895A/en unknown
- 2000-03-10 AR ARP000101089A patent/AR022913A1/es not_active Application Discontinuation
- 2000-03-10 CO CO00017676A patent/CO5210969A1/es not_active Application Discontinuation
-
2001
- 2001-09-03 ZA ZA200107294A patent/ZA200107294B/xx unknown
- 2001-09-04 NO NO20014296A patent/NO327205B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1165104B1 (en) | Lactobacillus parcasei strain capable of preventing diarrhoea | |
| US6835376B1 (en) | Lactobacillus paracasei strain for preventing diarrhea caused by pathogenic bacteria | |
| RU2748839C2 (ru) | Композиции, способы и наборы для стимулирования мукозальной иммунной системы | |
| US6887465B1 (en) | Lactobacillus strains capable of preventing diarrhoea caused by pathogenic bacteria and rotaviruses | |
| US20100158882A1 (en) | Immunomodulating probiotic lactic acid bacteria | |
| EP2332557A1 (en) | Probiotic lactic acid bacteria | |
| MXPA01008927A (en) | Lactic acid bacteria strains capable of preventing diarrhoea | |
| MXPA01008976A (en) | Lactobacillus strains preventing diarrhoea pathogenic bacteria |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20170302 |