CZ20001983A3 - Kmen Lactobacillus paracasei, potravinový prostředek a výrobek - Google Patents

Kmen Lactobacillus paracasei, potravinový prostředek a výrobek Download PDF

Info

Publication number
CZ20001983A3
CZ20001983A3 CZ20001983A CZ20001983A CZ20001983A3 CZ 20001983 A3 CZ20001983 A3 CZ 20001983A3 CZ 20001983 A CZ20001983 A CZ 20001983A CZ 20001983 A CZ20001983 A CZ 20001983A CZ 20001983 A3 CZ20001983 A3 CZ 20001983A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
strain
product
paracasei
lmg
bacteria
Prior art date
Application number
CZ20001983A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ300143B6 (cs
Inventor
Torkel Wadström
Per Aleljung
Ulla Svensson
Rangne Fonden
Original Assignee
Arla Foods Amba
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Arla Foods Amba filed Critical Arla Foods Amba
Publication of CZ20001983A3 publication Critical patent/CZ20001983A3/cs
Publication of CZ300143B6 publication Critical patent/CZ300143B6/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23CDAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11Lactobacillus
    • A23V2400/165Paracasei
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Jellies, Jams, And Syrups (AREA)

Description

Oblast techniky
Předložený vynález se týká kmene Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, z něho připravených prostředků vhodných pro použití jako potrava a rovněž výrobků, obsahujících tento kmen.
Dosavadní stav techniky
Kmen Lactobacillus paracasei je gram-pozitivní, homofermentativní, tyčinkovitá bakterie, vyskytující se mimo jiné v lidském zažívacím traktu.
Podstata vynálezu
Nový kmen (který bude dále pro jednoduchost označován LMG P-17806), je variantou druhu Lactobacillus paracasei subsp. paracasei. Má charakteristické rysy druhu s obsahem GC 44%. LMG P-17806 byl izolován ze vzorků mikroflory lidského zažívacího traktu. LMG P-17806 je gram-pozitivní, homofermentativní, tyčinkovitá bakterie. Vytváří kyselinu L-mléčnou (levotočivý stereoizomer kyseliny mléčné) a roste optimálně při teplotě 37 °C. Kmen je charakteristický tím, že je in vitro tolerantní ke kyselině chlorovodíkové a žaludeční šťávě, toleruje žlučové soli bez toho, že by je rozkládal a má vyšší schopnost vstřebávat cholesterol. Kmen je také charakteristický tím, že obsahuje tři plazmidy o velikosti 2,2, 4,36 a 9,1 kb (kilobází). Dalšími charakteristickými vlastnostmi je, že kmen fermentuje ribózu, adonitol, galaktózu, glukózu, fruktózu, manózu, sorbózu, manitol, sorbitol, N-acetyi-glukozamin, eskulin, celobiózu, maltózu, laktózu, sacharózu, trehalózu, inulin, meiezitózu, D-turanózu a Dtagatózu. Na druhé straně nefermentuje glycerol, erythritol, D- a L-arabinózu, D- a Lxylózu, β-methyl-D-xylozid, rhamnózu, dulcitol, inozitol, α-methyl-D-manozid, a-methylD-glykozid, amygdalin, arbutin, salicin, melibiózu, rafinózu, škrob, glykogen, xylitol, gentiobiózu, D-lyxózu, D- a L-fukózu, D- a L-arabitoi a 2- a 5-ketoglukonát.
Kmen byl charakterizován SDS gelovou elektroforézou, při níž byl porovnáván se šesti jinými kmeny Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, viz přiložený obrázek.
• ft ftft • ftft « • ftft « • ftft * • ftft 1 • ft ftft • ft ftft·· ♦ ft ftftftft • · · ftft · • ftft · ftft ftft
Při tomto porovnání se ukázalo, že je odlišný od všech ostatních popisovaných kmenů a současně, když je porovnán s jinými laktobacily, zdá se patřit k označenému druhu. Byl také charakterizován pokud se týká ribozomální RNA pomocí metody nazvané Riboprinter®. Pomocí této metody bylo ukázáno, že kmen vykazuje 76% podobnost s typovým kmenem pro Lactobacillus paracasei subsp. paracasei a 72% podobnost s typovým kmenem pro Lactobacillus casei, který byl analyzován při téže příležitosti.
Kmen byl uložen v Belgické uspořádané sbírce mikroorganizmů (Belgian Coordinated Collections of Microorganisms - BCCM), sbírka LMG a bylo mu přiděleno přístupové číslo LMG P-17806.
Výhody kmene
Kmen LMG P-17806 má, ve srovnání se známými kmeny Lactobacillus, zásadní výhody při použití jako probiotický přípravek v potravě a jako přírodní léky tím, že obsahuje jedinečnou kombinaci vhodných vlastností;
kmen má dobrou odolnost proti žaludečním šťávám a žlučovým kyselinám, ale na rozdíl od mnoha jiných kmenů nerozkládá žlučové soli;
- má velkou schopnost asimilovat cholesterol; kmen dobře prochází žaludkem;
kmen má vliv na podmínky v modelu tlustého střeva tím, že v něm zvyšuje tvorbu kyseliny L-mléčné;
kmen není více zánětlivý než jsou běžné jogurtové bakterie;
kmen chrání střevní buňky před napadením patogenními organizmy, jako je
Salmonella typhimurium;
kmen působí antagonisticky proti bakterii způsobující žaludeční vřed Helicobacter pylori;
kmen vytváří baktericiny aktivní proti klostridiím;
kmen dobře přežívá ve mléku a rovněž ve zmrazeném a vysušeném stavu; kmen na rozdíl od většiny jiných laktobacilů má příznivý vliv na chuť fermentovaných mléčných výrobků (nezpůsobuje žádnou příchuť).
Uváděný kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei může být použit jako přísada do potravin nebo jako přírodní lék, jako tzv. „Léčebná strava“ nebo jako přísada k přírodnímu léku.
Takové léky mohou být použity pro děti za účelem zmírnění atopických problémů; pro starší osoby aby se upravila pozměněná mikroflóra, způsobená buď φφ φφφφ φφ φφφφ
φφ φφ φ φ φ φ φ φ · * φ φ φ · φ φ · · φφ ·· normálními změnami v průběhu stárnutí nebo změnou vylučování kyseliny chlorovodíkové; a pro lidi obecně, aby se normalizovala střevní flóra, vzhledem k tomu, že obsah klostridiových bakterií je snižován, obsah laktobacilů a bufidobakterií je zvyšován a vysoký obsah koliformních bakterií je snižován.
Těmito svými vlastnostmi se kmen LMG P-17806 liší od dříve známých kmenů, což bude ukázáno na příkladech dále.
Příprava kmene
Kmen je připraven způsobem běžným pro laktobacily. Je použit substrát vhodný pro laktobacily. Tento substrát by měl například obsahovat alespoň jeden z cukrů, které je kmen schopen fermentovat, podle toho co bylo řečeno výše, v kombinaci s proteiny, vitamíny, minerály a jinými živinami, které jsou normálně laktobacily vyžadovány. Příklady běžných komerčně dostupných substrátů jsou bujón obsahující kvasničný extrakt a glukózu, MRS (de Man-Rogosa-Sharp bujón), Rogosa, mléko s přidaným malým množstvím kvasničného extraktu atd. Kmen je kultivován s minimálním množstvím kyslíku nebo při úplné nepřítomnosti kyslíku, vhodně při teplotě mezi +15 až +42 °C. Jestliže je substrát naočkován 0,1 až 1,0 % očkovací kultury, je vhodná kultivační doba mezi 10 a 40 hodinami. Kmen může být, pokud je to požadováno, koncentrován centrifugaci nebo filtrací a po tom je koncentrát promyt, aby se odstranilo kultivační médium. Koncentrát může být potom běžným postupem zmrazen nebo lyofilizován. Tímto způsobem lze připravit přípravky se 100 miliony až 100 000 miliony živých bakterií LMG P-17806 na gram. Přípravky mohou být potom použity jako takové nebo je lze použít jako přídavky do potravy, například do mléka nebo jiných výrobků, které dávají LMG P-17806 možnost přežívat a pokud je to žádoucí i růst.
A. Výzkum týkající se průchodu kmene zažívacím traktem
LMG P-17806 byl kultivován výše popsaným způsobem a přidán spolu s jogurtem do mléka. Fermentovaný produkt byl vytvořen inkubací mléka po dobu 5 hodin při 42 °C. Byl získán chutný výrobek, obsahující 100 milionů živých bakterií LMG P-17806 v 1 gramu výrobku. Zdravé osoby dostávaly 3 x 200 g tohoto výrobku denně po dobu 1 týdne. Celkový příjem LMG P-17806 byl mezi 40 až 200 miliardami.
Vzorky stolice byly testovány před příjmem, po jednom týdnu přijímání a jeden týden potom, co byl příjem ukončen. Jak je vidět dále z tabulek 1 a 2, u testovaných osob bylo zjištěno silné zvýšení počtu laktobacilů. U každé testované osoby byla při každé příležitosti u dvou izolátů určena druhová příslušnost, tj. celkem u 20 izolátů.
·· ·· • · · « • · · « • · · · * «· ·· »· ·*·· ř * · ·· ···· • · * • · · • · · • · · · ·· ··
Osmnáct izolátů z období příjmu se podle fenotypové klasifikace skládalo z LMG P17806. Tento bakteriální kmen se ve vzorcích neobjevoval ani před, ani po příjmu LMG P-17806 v potravě.
V průměru byl obsah ve vzorcích stolice v období příjmu v potravě velmi vysoký a pouze slabě se měnil od 63 milionů do 320 milionů na gram, tj. v rámci pětinásobku. Pozoruhodné bylo, že obsah byl do značné míry stejný nezávisle na tom, jaký obsah byl měřen před počátkem pokusu. Po ukončení příjmu v potravě se obsah vrátil k tomu, co se zdálo být přirozené pro testovaného jedince.
V Tabulkách 1 a 2, uvedených dále, byl zjišťován obsah laktobacilů ve stolici, vyjádřeno v milionech na gram, testováno vysetím na substrátu Rogosa.
Tabulka 1
Pět testovaných jedinců s původně nízkým obsahem laktobacilů
Testovaný jedinec Před pokusem Během pokusu Po pokusu
1 0,05 120 0,07
2 0,15 320 0,12
3 0,08 97 0,14
4 0,009 63 0,02
5 <0,001 278 0,002
Tabulka 2
Pět testovaných jedinců s vysokým obsahem laktobacilů
Testovaný jedinec Před pokusem Během pokusu Po pokusu
6 1,2 297 1,3
7 0,7 83 0,6
8 0,2 136 0,18
9 4,3 74 3,5
10 0,6 212 0,8
Testování ukázalo, že kmen dobře přežívá při průchodu zažívacím traktem.
B. Výzkum týkající se tvorby kyseliny L-mléčné tímto kmenem na modelu tlustého střeva
Výše uvedený fermentovaný produkt byl přidán do tzv. SHIME-reaktoru, který je in vitro modelem střeva. Vzorky byly odebírány z těch částí reaktoru, které odpovídají ·· ···· ·· ·«· · ·· ·· • · · · • · · ;
• · · Ϊ • * · ♦ ·♦ ·* • · · · ·· ·· nejdůležitějším částem tlustého střeva. Podobné srovnávací testy byly provedeny s některými jinými kmeny Lactobacillus, mimo jiné těsně příbuznými s kmenem L. paracasei subsp. paracasei. Jak je zřejmé z dále následující tabulky 3, LMG P-17806 způsobuje silné zvýšení produkce kyseliny L-mléčné, která je jediným izomerem kyseliny mléčné, který je vytvářen kmenem LMG P-17806. Tvorba kyseliny mléčné je považována za výhodnou z několika důvodů, mimo jiné pro antibakteriální účinek kyseliny mléčné a rovněž kvůli tomu, že o nižším pH se předpokládá, že snižuje dostupnost a tvorbu dusíkatých sloučenin.
Tabulka 3
Tvorba kyseliny L- a D-mléčné v SHIME-reaktoru po přidání různých laktobacilů (v mg na litr obsahu reaktoru)
Kmen laktobacilů Reaktor 4 Reaktor 5 Reaktor 6
L D L D L D
LMG P-17806 300 80 500 100 280 90
L. paracasei 40 80 200 70 130 40
L. rhamnosus 90 10 10 70 80 10
L. plantarum 60 50 60 70 40 50
V tabulce „L“ označuje levotočivý izomer kyseliny mléčné a „D“ její pravotočivý izomer.
Reaktor 4 odpovídá horní části tlustého střeva, reaktor 5 střední části a reaktor 6 dolní části tlustého střeva. Zkoumání ukazuje, že kmen v modelu tlustého střeva vytváří kyselinu L-mléčnou.
C. Výzkum jak kmen chrání střevní epiteliální buňky před napadením Salmonella typhimurium
Střevní epiteliální buňky typu CaCo-2 byly pěstovány in vitro. Potom k nim byla přidána kombinace laktobacilů a Salmonella typhimurium v poměru 100:1 a s 1 milionem salmonel na 1 mililitr. Účinek byl studován po inkubaci 120 minut při 37 °C. Množství napadajících salmonel bylo určeno po trojnásobném promytí ploten s narostlými buňkami CaCo-2. Narostlé buňky byly ošetřeny antibiotikem gentamycinem o koncentraci 100 mg/l po dobu 1 h, aby byly usmrceny všechny • · • * • · ·· ·· ···· « · · • · · • · · · • 9 ·· bakterie, které nevnikly do buněk. Potom byly plotny omyty pomocí PBS, aby se odstranil všechen gentamycin a nakonec byly zachycené bakterie uvolněny působením 0,1% Tritonu-X na buňky CaCo-2 za třepání. Počet salmonel byl potom určován běžným postupem vysévání na plotny. LMG P-17806 měl zřetelný vliv tím, že snižoval počet napadených buněk. Na druhé straně blízce příbuzná varianta paracasei 506 se zdála spíše stimulovat napadání salmonelovými bakteriemi. Také co se týká této vlastnosti, ukázal LMG P-17806 kladný účinek. Výsledky jsou ukázány dále v tabulce 4.
Tabulka 4
Napadení salmonelami
Laktobacily % napadajících salmonel
bez laktobacilů s laktobacily
LMG P-17806 2,5 0,75
L. paracasei K 506 2,5 7
L. plantarium 2 2
L. rhamnosus 2,5 0,75
Tabulka ukazuje, že kmen LMG P-17806 poskytuje zřetelnou ochranu proti napadení salmonelovými bakteriemi.
D. Výzkum ochrany proti Helicobacterpylori
Byl měřen účinek podávání fermentovaného mléčného výrobku na jedné straně s kmenem LMG P-17806, na druhé straně bez něho, na obsah Helicobacter pylori ve výkalech za použití myšího modelu, přičemž myši byly infikovány H. pylori.
Myši byly 3krát v jednodenních intervalech infikovány vždy 100 miliony bakterií kmene H. pylori 17874 ve šroubovicové formě. Potom byly myším podávány pokusné výrobky a obsah H. pylori ve výkalech byl měřen pomocí heparinizovaných magnetických kuliček a enzymatickým imunologickým testem. Byly testovány tři druhy výrobků. Ukázalo se, že všechny fermentované mléčné výrobky snižují podíl H. pylori, ale účinek nastával ve srovnání s běžným jogurtem a ve srovnání s kmenem L. fermentum KLD zřetelně rychleji v případech, když výrobek obsahoval LMG P-17806.
Tabulka 5 ·* ···· *· 4 44 4
Obsah H. pylori ve výkalech měřený pomocí heparinizovaných magnetických kuliček a enzymatickým imunologickým testem
Výrobek před užíváním po dvoudenním užívání PO sedmidenním užívání sedm dní po skončení užívání
běžný jogurt 1,48 1,86 0,63 2,25
jogurt s L. fermentum 1,65 1,62 0,94 1,61
jogurt s LMG P- 17806 1,80 0,68 0,61 1,71
Čísla v tabulce vyjadřují absorbanci při 405 nm a jsou úměrná obsahu.
E. Testování vlivu kmene LMG P-17806 na imunologickou obranu
Imunologický obranný systém je kontrolován řadou signálních sloučenin, tzv. cytokinů. Některé z nich mohou vyvolávat zánět. Vliv LMG P-17806 na tvorbu cytokinů TNF-alfa a IL-6 byl porovnáván s vlivem dvou druhů, obsažených v jogurtové kultuře, L. delbruckei subsp. bulgaricus a Streptococcus thermophilus. Leukocyty byly odděleny z lidské krve a přidány v množství 10 milionů k živým bakteriím nebo k bakteriím zabitým pomocí glutaraldehydu. Jako kontrola byly použity lipopolysacharidy (LPS) z E. coli. Výsledky jsou uvedeny dále v tabulce 6. Výsledky ukazují, že LMG P-17806 má v použitém modelu stejné zánětlivé vlastnosti jako běžný jogurt.
Tabulka 6
Vliv kmene LMG P-17806 na imunologickou obranu
Laktobacily TNF-alfa mg/l IL-6 mg/l
živé mrtvé živé mrtvé
S. thermophilus, E584 12 1 0,4 <0,1
L. bulgaricus, E585 2 3 0,5 0,1
LMG P-17806 4 1 0,7 <0,1
F. Testování odolnosti kmene LMG P-17806 proti antibiotikům
Probiotické přípravky mohou být užitečné v souvislosti s poruchami rovnováhy střevní flóry v průběhu léčení antibiotiky. Současně je důležité, že probiotické přípravky
4« ··*·
4» ·«·· ·· ·· • · · · • 4 · · • · · · · · ·
44 nepřispívají k šíření odolnosti proti antibiotika, to je zvláště důležité při současném použití probiotických přípravků a antibiotik. Z tohoto důvodu byla stanovena odolnost kmene LMG P-17806 proti různým antibiotikům. Citlivost kmene LMG P-17806 k různým antibiotikům byla určována stanovením jejich koncentrace, při které bylo dosaženo 50% snížení růstu tohoto kmene, měřeno pomocí optické hustoty.
Ukázalo se, že kmen LMG P-17806 byl odolný proti vankomycinu a nebyl inhibován ani při jeho koncentraci 256 mg/l. Kmen vykazoval nějakou odolnost proti trimethoprimu a cefotaximu, přičemž 50% optické hustoty (OD) bylo dosaženo při 12 mg/l, resp. 4 mg/l. Kmen LMG P-17806 byl na druhé straně citlivý k chloramfenikolu, erythromycinu, rifampicinu a tetracyklinu, kde již hladiny pod 1 mg/l měly za následek 50% inhibici růstu.
Účinek antibiotik byl také zkoumán pomocí tzv. Sensi terčíků od firmy Oxoid. Podle takto získaných výsledků je kmen LMG P-17806 odolný proti aztreonamu, ceftaximidu, cefoxitinu, síranu kolistinu, kanamycinu, polymyxinu B, streptomycinu a vankomycinu.
Kmen LMG P-17806 může být podle těchto výsledků zvláště zajímavý pro použití při současné terapii antibiotiky jako je vankomycin, trimethoprim a rovněž několik cefloxacinů, což jsou všechno antibiotika se známými místními účinky na střevní flóru a střevní funkce.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: Příprava bakteriálního koncentrátu
Zmrazený bakteriální koncentrát o koncentraci 10 miliard LMG P-17806 na gram byl připraven výše uvedeným způsobem pěstováním laktobacilů na syrovátkovém substrátu, ke kterému byl přidán 1 gram kvasničného extraktu na litr, při konstantním pH 5,5 po dobu 14 hodin při teplotě 36 °C. Bakterie byly odděleny pomocí centrifugace s průběžným promýváním centrifugátu. Koncentrát byl zmražen v tekutém dusíku a potom do doby použití uložen při -80 °C.
Příklad 2: Příprava fermentovaného mléčného výrobku
Mléčný výrobek byl připraven z mléka postupem, který sestává z homogenizace mléka, tepelného opracování mléka po dobu 5 minut při teplotě +95 °C a ochlazení na ♦ 0 »
4 0 >
44 ·· ·0»* «
♦ 0 0 0 4 *
0 0 4 t« +37 °C. Mléčný výrobek byl naočkován s 0,01 % komerčně dostupné, zmrazené jogurtové kultury a 0,5 % koncentrátu LMG P-17806. Kultury byly ponechány růst po dobu 6 hodin při uvedené teplotě. Mléko pak bylo sraženo a jeho pH sníženo na 4,55. Koagulovaná forma byla rozmělněna a výrobek ochlazen na +12 °C, po čemž byl balen do běžných plastikových pohárů, které jsou normálně používány pro jogurt a nato ochlazen v chlazené komoře s teplotou +5 °C po dobu jednoho dne a noci. Jeho pH se snížilo na 4,4. Výrobek byl pak skladován při +8 °C po dobu až tří týdnů. Obsah kmene LMG P-17806 byl sledován a jak je vidět z výsledků uvedených dále v tabulce 7, nastával omezený růst kmene LMG P-17806 v kultuře a LMG P-17806 přežíval velmi dobře uskladnění po dobu tří týdnů při pH nižším než 4,4.
Tabulka 7
Skladovatelnost kmene LMG P-17806 v mléčném výrobku
Očkováno Obsah v mléčném výrobku Obsah po kultivaci Po uložení 1 týden Po uložení 2 týdny Po uložení 3 týdny
9900 49 97 132 118 121
Obsahy jsou udány v milionech na gram.
Výrobek měl normální vzhled a sotva 1 % se oddělila ve formě syrovátky po čtrnáctidenním uskladnění. Výrobek měl výbornou chuť, stejnoměrnou konzistenci a čerstvou, jemnou vůní. Testovaný výrobek získal ohodnocení než normální jogurt v nezávislém spotřebitelském průzkumu, provedeném výzkumným ústavem. Výrobek byl srovnáván ve spotřebitelském průzkumu s odpovídajícím výrobkem bez kmene LMG P-17806, přičemž hodnotící osoby nevěděly jaký výrobek byl ochutnáván. Výrobku s kmenem LMG P-17806 dávalo přednost 74 % testujících osob a získal průměrnou hodnotu 7,6 na devítibodové škále, což je významně vyšší než výsledky běžného jogurtu. Hodnocení bylo o něco více než o 1 bod vyšší než u dříve známé probiotické kultury s Lactobacillus acidophilus. Výsledky se také liší od výsledků, které byly dříve získány při porovnání mezi čistým jogurtem a výrobky, vzniklými smísením jogurtu a probiotické bakterie Lactobacillus acidophilus popřípadě Bifidobacterium longum. V těchto porovnáních nebyly zjištěny žádné významné rozdíly mezi čistým jogurtem a uvedenými směsnými výrobky.
*· »·*· »# *·*·
Příklad 3. Vhodné množství přidaného kmene LMG P-17806
Také byly provedeny pokusy o nalezení vhodného kvantitativního rozmezí pro přidávání kmene LMG P-17806. Mléko bylo zpracováno a přidána k němu jogurtová kultura tak, jak bylo popsáno výše, zatímco přidávání koncentrátu kmene LMG P-17806 bylo měněno v rozsahu 5 % do 0,01 %. Při tak vysokém obsahu, jako bylo očkování 5 % LMG P-17806 byla získána příchuť, která pravděpodobně pocházela ze složek samotné očkovací kultury. Avšak změna pH a vzhled výrobku byly normální. Obsah LMG P-17806 v čerstvém výrobku byl 504 milionů na gram a zůstal na této úrovni i v průběhu skladování. Při přidání 0,01 % koncentrátu LMG P-17806 nebyl výrobek senzoricky odlišitelný od běžného jogurtu a obsah LMG P-17806 byl již po jednotýdenním skladování nižší než jeden milion na mililitr, což je nejnižší obsah, jaký musí výrobek obsahovat, aby mohl podle návrhu mezinárodní legislativy zůstat výrobkem, který obsahuje specifické probiotický přípravek.
Příklad 4. Příprava speciálního fermentovaného výrobku
Pokus byl proveden tak, jak bylo popsáno výše, s tou výjimkou, že k mléku bylo přidáno 0,4 g kvasničného extraktu na litr. Bylo očkováno s 0,01 % téže jogurtové kultury, jak bylo uvedeno výše, ale bylo přidáno pouze 0.1 % koncentrátu LMG P17806. Inkubace byla provedena po dobu 8 hodin při teplotě +34 °C, po níž byl proces přerušen a výrobek zchlazen, zabalen a uložen, jak je uvedeno výše v příkladu 3. LMG P-17806 se za těchto podmínek namnožil 10křát a podobně jako výše bakterie v průběhu skladování dobře přežívaly. Výsledky jsou uvedeny dále v tabulce.
Tabulka 8
Skladovatelnost specifického mléčného produktu kmene LMG P-17806
Očkováno Obsah v mléčném výrobku Obsah po kultivaci Po uložení 1 týden Po uložení 2 týdny Po uložení 3 týdny
9900 10 103 114 109 107
Obsahy v tabulce jsou udány v milionech na gram výrobku.
Výrobek měl normální vzhled a asi 1,5 % se oddělilo ve formě syrovátky po čtrnáctidenním uskladnění. Výrobek měl dobré, ostré aroma a stejnoměrnou konzistenci.
·<
·♦ • · • · • · • · • · «··· • · · • · · • · · • · · · ·· ·· <♦ ···· • · · • · · ·«
Příklad 5. Příprava rostlinné šťávy obsahující kmen LMG P-17806
Rostlinná šťáva byla připravena smícháním mrkvového koncentrátu a koncentrátu pomerančové šťávy ve stejném poměru tak, že pH výsledné směsi bylo 3,9. Smíchaný nápoj byl tepelně opracován a bylo k němu přidáno 1 %, popřípadě 0,1 % koncentrátu LMG P-17806. Obsah LMG P-17806 tak byl 100 milionů na mililitr, popřípadě 10 milionů na mililitr. Nápoje byly uloženy při +7 °C po dobu 4 týdnů. Aroma výrobku nebylo ovlivněno a nebyl pozorován žádný vliv uložení nebo přidání LMG P17806. Avšak přidání LMG P-17806 do koncentrace převyšující 50 milionů se však zdálo potlačovat snižování obsahu vitaminu C. Ve výrobku bez LMG P-17806, stejně jako ve výrobku s obsahem 10 milionů bakterií na mililitr, se obsah vitaminu C snížil z 25 mg/100 g před uložením na 18 mg/100 g po čtyřech týdnech. Při přidání 100 milionů LMG P-17806 na mililitr se obsah vitaminu C snížil pouze na 22 mg/100 g, tj. více než o 50 % nižší pokles obsahu vitaminu C. LMG P-17806 dobře přežívá a obsah LMG P17806 po čtyřech týdnech byl o 40 % nižší než v čerstvém výrobku, bez ohledu na přidané množství.
V jiném pokuse bylo k témuž nápoji přidán LMG P-17806 v množství 5 %. To dodalo výrobku příchuť, která se v průběhu doby uskladnění zhoršovala.
Příklad 6. Příprava prášku pro přípravu kaše
Prášek pro přípravu kaše je připraven běžným postupem. Koncentrát LMG P17806, připravený jak je uvedeno výše, je lyofilizován po smíchání s kukuřičným škrobem a po zabalení, které zamezuje přístupu kyslíku, byl uložen při teplotě -20 °C. Lyofilizovaný přípravek obsahoval 61 miliard LMG P-17806 na gram. Prášek pro přípravu kaše byl za sucha smíchán s 0,03 % LMG P-17806 a zabalen v dusíkové atmosféře do obalu, který zamezuje přístupu kyslíku. Prášek byl uložen zpočátku 3 měsíce při teplotě +12 °C a potom další 4 měsíce při teplotě místnosti. Obsah LMG P17806 je zřejmý z tabulky 9 uvedené dále. Prášek pro přípravu kaše poskytoval dobré možnosti pro přežití LMG P-17806 a proto je možné připravit například dětské potravinové výrobky s vysokým obsahem LMG P-17806.
Tabulka 9
Lyofilizovaný přípravek Prášek před přidáním Prášek po přidání Po třech měsících Po sedmi měsících
61 000 <0,0001 20 18 6,5
• ·
Obsahy ve výše uvedené tabulce jsou udány v milionech na gram prášku.
Prášek pro přípravu kaše byl rozpuštěn v 9 dílech vody o teplotě +50 °C a byl určen obsah LMG P-17806. Obsah byl 1 milion LMG P-17806 na mililitr nápoje v případě, že byl použit prášek starý 6 měsíců. Kaši nebylo možno rozlišit od běžného výrobku. Po uložení v průběhu jedné noci při teplotě místnosti však kaše s přidaným LMG P-17806 chutnala slabě kysele a měla pH 5,7.
V druhém pokusu byl zkoušen vliv přidání 1 % popřípadě 0,001 % lyofilizovaného přípravku LMG P-17806. Jeho obsahy v prášku po přidání byly 570 popřípadě 0,8 milionu na gram.
Prášky byly uloženy odpovídajícím způsobem a testovány po pětiměsíčním uložení. Po rozpuštění, jak bylo uvedeno výše, byl obsah v připravené kaši 800 milionů, popřípadě pro nízký přídavek méně než 10 000 na mililitr. Při vyšší koncentraci přídavku byla pozorována slabě kyselé aroma již po čtyřhodinovém uložení kaše při teplotě těla.
Příklad 7. Příprava suchého prášku pro použití jako „Zdravá výživa“
Lyofilizovaný koncentrát LMG P-17806 byl smíchán s různými množstvími kukuřičného škrobu v poměrech 1:1, 1:9, 1:99 a 1:999. Smíchané prášky byly uloženy v malých pytlíčcích v množství 1 až 100 gramů na pytlíček. Materiál pytlíčků byl nepropustný pro kyslík a vodní páru. Pytlíčky byly uloženy v mrazničce, ledničce nebo při teplotě místnosti. Obsah byl pak použit jako přísada do nápoje tak, že prášek byl smíchán s nápojem před jeho konzumací. Bylo zjištěno přežívání, které odpovídalo příkladu 6. Prášek připravený v poměru 1:1 by, také zabalen do želatinových apslí v množství 0,4 gramu na kapsli. Počet bakterií v kapsli byl 10 miliard. Kapsle byly obaleny materiálem, který měl dobré izolační vlastnosti proti kyslíku a vodní páře. Kapsle byly uloženy stejným způsobem, jak bylo uvedeno výše a byly získány výsledky, které odpovídají dobrému přežívání bakterií.
Příklad 8. Příprava a použití bakteriálních směsí
Kmen LMG P-17806 je možno míchat s jinými laktobacily, bez toho, že by docházelo kinhibici jejich růstu. Nezdá se, že by LMG P-17806 vytvářel jakékoli sloučeniny, které by inhibovaly jiné laktobacily nebo laktokoky, když je LMG P-17806 • · • · • · *’ kultivován společně s jogurtovými kulturami, kulturami které kysnou mléko, obsahující laktokoky nebo jiné druhy laktobacilů, jako jsou L. acidophilus, L. fermentum nebo L. rhamnosus. Z výsledků pokusů se směsmi lyofilizovaných přípravků, obsahujících všechny tyto bakterie, vyplývaly nezměněné skladovací podmínky, ať bylo provedeno smíchání s kukuřičným škrobem nebo s práškem pro přípravu kaše. Po rozpuštění prášku a uložení po dobu 12 hodin při teplotě těla a 12 hodin při teplotě místnosti nebyl zjištěn žádný záporný vliv LMG P-17806 na celkový obsah laktobacilů nebo na obsah kterýchkoli bakterií.
V pokusu s přípravou probiotického kyselého mléka bylo k normálně zpracovanému mléčnému výrobku přidáno 0,5 % kultury která kysne mléko a 0,6 % lyofilizovaného koncentrátu jednotlivě každého z L. acidophilus NCFB 1748, L. fermentum KLD a LMG P-17806. Bylo však přidáno pouze 0,1 % KLD, protože vyšší přídavky měly za následek vznik příchutě a nechtěné sraženiny. Mléko bylo uloženo po dobu 19 hodin při teplotě místnosti. Pak bylo jeho pH 4,50. Mléko bylo ochlazeno na +10 °C, zabaleno a uloženo při teplotě +6 °C až 14 dní. Výsledky jsou zřejmé z následující tabulky 10.
Tabulka 10
Mléčné bakterie Před zchlazením Po 5 dnech Po 14 dnech
Laktokoky 730 810 580
L. acidophilus 135 142 131
L. fermentum 12 14 9
LMG P-17806 112 126 109
Obsahy jsou udány v milionech bakterií na mililitr.
Osmdesát zdravých pokusných osob dostalo k jídlu výrobky u příležitosti cesty na konferenci do Istanbulu v Turecku. Skupina byla rozdělena na dvě, jedna jedla kyselé mléko popsané výše pouze s LMG P-17806, zatímco druhá jedla probiotické kyselé mléko se třemi různými probiotickými kmeny. Testované osoby byly v místě konference 8 dní. Výrobky začaly jíst dva dny před odletem do místa konference a pokračovaly s jídlem ještě čtyři dny po návratu. Výrobky byly jedeny ve formě tří svačin rozložených rovnoměrně v průběhu dne, v množství 150 g/jídlo. Všechny pokusné • · · ·
.........
osoby s výjimkou dvou osob ve skupině s kyselým mlékem uváděly, že jedly výrobek podle doporučeného schématu. V dotazníku byly žádány aby uvedly pomocí třístupňové stupnice potíže gastrointestinálního traktu, pokud jde o formy bolesti žaludku, tlaky, průjem nebo zácpu. Pokud se týká průjmu byl rozdíl vtom, že 5 % pokusných osob, které jedly pouze LMG P-17806 uváděly, že měly vážný nebo velmi vážný průjem v průběhu alespoň dvou dnů, zatímco tento výskyt byl 22 % ve skupině, která jedla probiotické kyselé mléko.
Zdá se tedy, že směs několika různých laktobacilů může být ještě účinnější, než pouze jeden kmen bakterií. To může být způsobeno skutečností, že podávané laktobacily měly různé vlastnosti.

Claims (12)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Kmen Lactobacillus vhodný jako probiotický přípravek v potravě a jako přírodní léky, který je odolný in vitro ke kyselině chlorovodíkové a žaludečním šťávám, snáší žlučové soli a přitom je nerozkládá, zatímco probíhá jejich silné vstřebávání, má velkou schopnost vstřebávat cholesterol, a který dobře přežívá průchod žaludkem a zažívacím traktem a který roste optimálně při 37 °C, vyznačující se t í m, že kmenem je Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, LMG P-17806, uložený v Belgických uspořádaných sbírkách (Belgian Coordinated Coilections), podle Budapešťské smlouvy, který je gram-pozitivní, homofermentativní, tyčinko vitá bakterie schopná produkovat kyselinu L-mléčnou a tím, že obsahuje tři plazmidy o velikosti 2,2, 4,36 a 9,1 tisíce bází.
  2. 2. Kmen podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje 44 % GC.
  3. 3. Kmen podle nároků 1 nebo 2, v y z n a č u j í c í se t í m, že byl izolován ze vzorků mikroflóry lidského zažívacího traktu.
  4. 4. Kmen podle nároků 1, 2 nebo 3, vyznačující se tím, že kmen fermentuje ribózu, adonitol, galaktózu, glukózu, fruktózu, manózu, sorbózu, manitol, sorbitol, N-acetyl-glukozamin, eskulin, celobiózu, maltózu, laktózu, sacharózu, trehalózu, inulin, melezitózu, D-turanózu a D-tagatózu.
  5. 5. Kmen podle nároků 1,2,3 nebo 4, v y z n a č u j í c í se t í m, že je dodáván jako koncentrát ve formě zmrazeného nebo lyofilizovaného prášku.
  6. 6. Kmen podle kteréhokoli z předchozích nároků pro použití jako potrava anebo přírodní léky, vyznačující se tím, že kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, je přidán k mléčnému výrobku, fermentovanému mléčnému výrobku, ovocnému nebo zeleninovému nápoji, jako je rostlinná šťáva, šťáva z citrusového ovoce nebo šťáva z jiného ovoce nebo zeleniny, v objemu mezi 0,001 % a 5 %, s výhodou 0,01 % a 1 %.
    • · 0 0 0 0
    0 · 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0000 000 0000
    -|g ·· *· ·· · ·· ··
  7. 7. Kmen podle kteréhokoli z předchozích nároků 1 až 4 pro použití jako probiotický přípravek v potravě anebo přírodních lécích, vyznačující se tím, že kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, který je předmětem tohoto vynálezu, je kultivován společně s jogurtovými kulturami a kulturami, které kysnou mléko, s laktokoky nebo jinými druhy rodu Lactobacillus, jako jsou L. acidophilus, L. fermentum nebo L. rhamnosus.
  8. 8. Kmen podle nároků 6 nebo 7, vyznačující se tím, že kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, který je předmětem tohoto vynálezu, je přítomen v množství mezi 1 milionem až 10 000 miliony živých bakterií na gram smíšeného výrobku.
  9. 9. Výrobek obsahující kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei podle kteréhokoli z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že výrobek sestává z mléčného výrobku, fermentovaného mléčného výrobku, zeleninového nebo ovocného nápoje nebo prášku pro přípravu kaše, všechny obsahující kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, v množství 5x105 až 5x109, obvykle 1x105 až 109 živých bakterií, což odpovídá 0,0005 až 0,5 % výrobku;
    nebo koncentrovaného přírodního léku („Zdravá výživa“), kde kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei je obsažen v množství 1000 až 100 000 milionů živých bakterií, což odpovídá 0,001 až 100 % výrobku.
  10. 10. Výrobek podle nároku 8, obsahující stanovený počet bakterií, vyznačující se t í m, že v případě potravinových výrobků dále obsahuje malý podíl, např. 0,001 až 0,1 %, kvasničného extraktu nebo jiné látky, která přispívá k růstu nebo přežívání Lactobacillus paracasei subsp. paracasei ve výrobku a že v případě přírodních léků obsahuje látky důležité pro přežití bakterií anebo zbytky kultivačního substrátu.
  11. 11. Výrobek podle nároků 9 nebo 10, v y z n a č u j í c í se t í m, že kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei je poskytován jako koncentrát ve zmrzlém nebo lyofilizovaném stavu pro přímou spotřebu a to přimícháním k mléčnému výrobku, fermentovanému mléčnému výrobku, zeleninovému nebo •9 9999
    99 9999 ovocnému nápoji, k prášku pro přípravu kaše nebo do koncentrovaného přírodního léku (tak zvaná „Léčebná strava“).
  12. 12. Výrobek obsahující kmen Lactobacillus paracasei subsp. paracasei podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, v y z n a č u j í c í se t í m, že je používán pro děti za účelem zmírnění atopických problémů;
    pro starší lidi za účelem opravy změněné mikroflóry, způsobené normálními změnami vlivem věku nebo změněným vylučováním kyseliny chlorovodíkové; a pro lidi všeobecně za účelem normalizace střevní flóry, v tom případě se obsah klostridiových bakterií snižuje, počet bifidobakterií se zvyšuje a vysoké počty koliformních bakterií se snižují.
CZ20001983A 1997-12-08 1998-12-08 Kmen Lactobacillus, jeho použití a výrobek jej obsahující CZ300143B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9704577A SE510813C2 (sv) 1997-12-08 1997-12-08 Bakteriestam av arten Lactobacillus Paracasei subsp. paracasei, sammansättning därav för användning i livsmedel, samt produkt innehållande stammen

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20001983A3 true CZ20001983A3 (cs) 2001-04-11
CZ300143B6 CZ300143B6 (cs) 2009-02-25

Family

ID=20409312

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20001983A CZ300143B6 (cs) 1997-12-08 1998-12-08 Kmen Lactobacillus, jeho použití a výrobek jej obsahující

Country Status (18)

Country Link
US (1) US6599504B1 (cs)
EP (1) EP1036160B1 (cs)
JP (1) JP4247458B2 (cs)
AT (1) ATE318889T1 (cs)
AU (1) AU751284B2 (cs)
CA (1) CA2313245C (cs)
CZ (1) CZ300143B6 (cs)
DE (1) DE69833691T2 (cs)
DK (1) DK1036160T3 (cs)
EE (1) EE04724B1 (cs)
ES (1) ES2255195T3 (cs)
HU (1) HU228050B1 (cs)
NO (1) NO326833B1 (cs)
PL (1) PL192924B1 (cs)
PT (1) PT1036160E (cs)
RU (1) RU2205871C2 (cs)
SE (1) SE510813C2 (cs)
WO (1) WO1999029833A1 (cs)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1034788A1 (en) 1999-03-11 2000-09-13 Société des Produits Nestlé S.A. Lactic acid bacteria strains capable of preventing diarrhea
EP1034787A1 (en) * 1999-03-11 2000-09-13 Société des Produits Nestlé S.A. Lactobacillus strains preventing diarrhea caused by pathogenic bacteria
HK1046864B (zh) * 1999-03-11 2006-10-27 雀巢制品公司 能够预防病原细菌和轮状病毒引起的腹泻的乳杆菌菌株
SE523771C2 (sv) * 1999-05-21 2004-05-18 Probi Ab Sportdryck innehållande mikronäringsämnen i kombination med levande laktobaciller
EP1148064A1 (en) * 2000-04-17 2001-10-24 Vrije Universiteit Brussel Lactobacillus johnsonii bacteriocin, active against Helicobacter pylori
CN1273838A (zh) * 2000-04-26 2000-11-22 济南三株药业有限公司 含有死的益生菌共生发酵培养物的营养组合物
FR2811333B1 (fr) * 2000-07-04 2003-01-10 Gervais Danone Sa Microorganismes ayant une action modulatrice de la glycosylation de surface des cellules intestinales et methode de selection desdits microorganismes
SE0003100D0 (sv) * 2000-09-01 2000-09-01 Probi Ab New strains
SE0003576D0 (sv) * 2000-10-04 2000-10-04 Probi Ab New strain
WO2002038103A2 (en) * 2000-11-13 2002-05-16 Iowa State University Research Foundation, Inc. Probiotic compositions and methods against bacterial infection in livestock animals
KR100419132B1 (ko) * 2000-12-29 2004-02-18 조성근 위·장 점막 부착성과 증식성, 내산성, 내담즙성 및헬리코박터 파일로리, 대장균 0157:h7에 대한 항균성이우수한 락토바실러스 파라카제이 서브스패시즈 파라카제이csk 01
US20030017192A1 (en) * 2001-06-19 2003-01-23 Hanny Kanafani Process for producing extended shelf-life ready-to-use milk compositions containing probiotics
US20040115177A1 (en) * 2001-10-12 2004-06-17 Harris Delbert L. Probiotic compositions and methods against bacterial infection in livestock animals
KR100356672B1 (ko) 2001-12-27 2002-10-19 주식회사 바이로박트 신규한 락토바실러스 속 미생물 및 그 용도
WO2003080813A2 (en) 2002-03-21 2003-10-02 Bifodan A/S Lactobacillus strains
EP1364586A1 (en) * 2002-05-24 2003-11-26 Nestec S.A. Probiotics and oral tolerance
KR100908254B1 (ko) * 2003-03-13 2009-07-20 기린 홀딩스 가부시키가이샤 항알레르기용 조성물
JP2007502858A (ja) * 2003-05-22 2007-02-15 シンバイオティクス アクティエボラーグ ヒト及び動物の胃腸管にコロニーを形成することができ、併せて、腸内生存性、腸内結合性、感染保護性及び繊維発酵性から選ばれる少なくとも2種の利点を有する少なくとも2種の乳酸菌株を含むプロバイオティック組成物
RU2253449C1 (ru) * 2003-11-13 2005-06-10 Морозов Игорь Александрович Способ эрадикации инфекции helicobacter pylori в желудке
KR100517065B1 (ko) 2003-12-11 2005-09-26 씨제이 주식회사 고농도 고수율의 젖산을 생산하는 젖산균과 이를 이용한 젖산 생산방법
ITRM20040166A1 (it) 2004-03-31 2004-06-30 Alberto Cresci Ceppi batterici lab con proprieta' probiotiche e composizioni che contengono gli stessi.
US7935334B2 (en) * 2005-07-07 2011-05-03 Imagilin Technologies, LLC Probiotics as alternative medicines against infectious diseases
JP5112069B2 (ja) * 2004-10-04 2013-01-09 ロレアル 敏感肌のための化粧品及び/または皮膚科組成物
RU2282995C2 (ru) * 2004-12-17 2006-09-10 Открытое акционерное общество "Лианозовский молочный комбинат" Пищевой продукт
KR20050039791A (ko) * 2005-03-28 2005-04-29 코바이오텍 (주) 락토바실러스 파라카제이
FR2889057B1 (fr) * 2005-08-01 2008-07-18 Oreal Composition cosmetique et/ou dermatologique pour la prevention et/ou le traitement des peaux sensibles ou seches
SE529185C2 (sv) * 2005-10-07 2007-05-22 Arla Foods Amba Användning av probiotiska bakterier för tillverkning av livsmedel eller läkemedel för förhindrande av övervikt
JP5314421B2 (ja) * 2006-05-31 2013-10-16 株式会社明治 免疫調節活性の高い乳酸菌の培養法
KR100786364B1 (ko) * 2006-06-23 2007-12-14 한국식품연구원 신규한 면역활성능이 있는 락토바실러스 파라카제이bfi46과 락토바실러스 파라카제이 afj88 균주
WO2008047391A1 (en) * 2006-10-17 2008-04-24 S.I.F.Fr.A. Farmaceutici Srl Nutriceutic composition comprising lactoferrin and proteasic probiotics
GB0624879D0 (en) * 2006-12-14 2007-01-24 Shs Int Ltd Treatment of pervasive development disorders
EP1972208A1 (en) * 2007-03-16 2008-09-24 Kirin Holdings Kabushiki Kaisha Composition for improving intestinal microflora
FR2919501B1 (fr) * 2007-08-02 2010-12-31 Oreal Utilisation d'hesperidine ou de l'un de ses derives pour la prevention et/ou le traitement des peaux relachees
ES2461791T3 (es) * 2007-09-04 2014-05-21 L'oréal Utilización de una combinación de hesperidina y de un microorganismo para actuar sobre la función de barrera de la piel
FR2920304B1 (fr) * 2007-09-04 2010-06-25 Oreal Utilisation cosmetique de lysat bifidobacterium species pour le traitement de la secheresse.
FR2920305B1 (fr) * 2007-09-04 2010-07-30 Oreal Utilisation d'un lysat de bifidobacterium species pour le traitement de peaux sensibles.
WO2009071086A2 (en) 2007-12-06 2009-06-11 Arla Foods Amba Probiotic bacteria and regulation of fat storage
FR2930264B1 (fr) * 2008-04-18 2013-02-22 Gervais Danone Sa Nouvelle souche de lactobacillus paracasei subsp. paracasei dotee de proprietes antimicrobiennes et immunomodulatrices.
FR2942719B1 (fr) 2009-03-04 2011-08-19 Oreal Utilisation de microorganismes probiotiques pour limiter les irritations cutanees
WO2011000879A2 (en) * 2009-06-30 2011-01-06 Chr. Hansen A/S A method for producing a fermented milk product
GB2484126A (en) * 2010-09-30 2012-04-04 Univ Plymouth Foodstuff fermented with lactic acid producing bacteria
US20120122189A1 (en) * 2010-11-15 2012-05-17 Hsia-Ching Hsiao Lactobacillus Mutant
RU2465322C2 (ru) * 2010-12-09 2012-10-27 Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство образования и науки Российской Федерации (Минобрнауки России) ШТАММ БАКТЕРИЙ Lactobacillus casei/paracasei - ВГНКИ 10.02.62 ДЕП, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ ДОБАВКИ
EE05750B1 (et) 2011-02-25 2015-06-15 OÜ Tervisliku Piima Biotehnoloogiate Arenduskeskus Isoleeritud mikroorganismi tüvi Lactobacillus gasseri MCC2 DSM 23882 ning selle kasutamine
AU2015275280B9 (en) * 2011-06-20 2018-07-19 H.J. Heinz Company Brands Llc Probiotic compositions and methods
CA2839524C (en) 2011-06-20 2016-05-17 H.J. Heinz Company Probiotic compositions and methods
KR101381794B1 (ko) * 2012-04-10 2014-04-07 씨제이제일제당 (주) 타가토스 및 프로바이오틱 유산균을 함유하는 신바이오틱 식품 조성물
PL3901164T3 (pl) * 2012-06-18 2025-04-14 H.J. Heinz Company Brands Llc Zaburzenia związane z glutenem
FR2992524B1 (fr) * 2012-06-28 2014-07-25 Diana Naturals Concentre de jus de carotte fermente avec un gout fruite
CZ304725B6 (cs) * 2013-01-15 2014-09-10 Výzkumný ústav pivovarský a sladařský, a.s. Kmen bakterií Lactobacillus paracasei RIBM 2-107 a jeho použití při výrobě nealkoholických a nízkoalkoholických nápojů z ovocných a/nebo obilných substrátů
CZ306974B6 (cs) * 2013-01-15 2017-10-25 Výzkumný ústav pivovarský a sladařský, a.s. Kmen bakterií Lactobacillus sp. RIBM 2-108 a jeho použití při výrobě nealkoholických a nízkoalkoholických nápojů z ovocných a/nebo obilných substrátů
PT2994150T (pt) 2013-05-10 2019-06-14 Heinz Co Brands H J Llc Probióticos e métodos de utilização
CN104381440B (zh) * 2014-07-17 2017-07-11 西南民族大学 发酵乳杆菌Lactobacillus fermentum strain Lee工作发酵剂制品及其预防便秘保健用途
CN104450562A (zh) * 2014-11-14 2015-03-25 北京农学院 一种产胆盐水解酶副干酪乳杆菌大枣益生菌片的制备方法
EP3040070A1 (en) 2014-12-29 2016-07-06 Farmagens Health Care Srl Dietary methods using lactobacillus paracasei subsp. paracasei f19 as nape-pld gene carrier for producing on demand pea or oea and relative biological dietary compositions thereof
EP3067058A1 (en) 2015-03-13 2016-09-14 Farmagens Health Care Srl Biological composition based on engineered lactobacillus paracasei subsp. paracasei f19 for the biosynthesis of cannabinoids
IL265109B2 (en) 2016-09-13 2024-05-01 Allergan Inc Stabilized non-protein clostridial toxin compositions
CN114032193B (zh) 2020-08-24 2022-06-07 汤臣倍健股份有限公司 一种副干酪乳杆菌207-27及其应用
CN116096856A (zh) 2020-08-28 2023-05-09 科·汉森有限公司 利用辛烯基琥珀酸酐淀粉-壳聚糖复合团聚体微囊化微生物培养物
CN112662791B (zh) * 2020-12-23 2022-10-11 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) 具有降胆固醇功能的乳酸菌及其应用
CN119679831B (zh) * 2025-02-27 2025-06-24 浙江百菲乳业有限公司 可协同治疗功能性便秘的副干酪乳酪杆菌、塔格糖组合物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716615A (en) * 1992-02-10 1998-02-10 Renata Maria Anna Cavaliere Vesely Dietary and pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria, their preparation and use
FI102298B (fi) * 1995-09-07 1998-11-13 Oulutech Oy Menetelmä maitohappobakteerilajien määrittämiseksi ja menetelmään sove ltuvia oligonukleotideja

Also Published As

Publication number Publication date
RU2205871C2 (ru) 2003-06-10
ATE318889T1 (de) 2006-03-15
SE9704577L (sv) 1999-06-09
EE200000339A (et) 2001-08-15
JP4247458B2 (ja) 2009-04-02
NO20002919D0 (no) 2000-06-07
DK1036160T3 (da) 2006-05-08
PL341010A1 (en) 2001-03-12
CA2313245C (en) 2012-04-24
PT1036160E (pt) 2006-07-31
HU228050B1 (en) 2012-09-28
SE510813C2 (sv) 1999-06-28
NO326833B1 (no) 2009-02-23
AU1896899A (en) 1999-06-28
EE04724B1 (et) 2006-10-16
CZ300143B6 (cs) 2009-02-25
ES2255195T3 (es) 2006-06-16
SE9704577D0 (sv) 1997-12-08
NO20002919L (no) 2000-08-08
PL192924B1 (pl) 2006-12-29
US6599504B1 (en) 2003-07-29
AU751284B2 (en) 2002-08-08
WO1999029833A1 (en) 1999-06-17
CA2313245A1 (en) 1999-06-17
EP1036160B1 (en) 2006-03-01
DE69833691T2 (de) 2006-08-31
EP1036160A1 (en) 2000-09-20
HUP0100428A3 (en) 2005-10-28
JP2001526024A (ja) 2001-12-18
DE69833691D1 (de) 2006-04-27
HUP0100428A2 (hu) 2001-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6599504B1 (en) Strain of bacteria of the species Lactobacillus paracasei subsp. paracasei, composition thereof for use in food and product containing said strain
Kalantzopoulos Fermented products with probiotic qualities
US20250161379A1 (en) Bifidobacterium animalis subsp. lactis i797, method for separation and purification thereof, and use thereof
FI109357B (fi) Menetelmä Lactobacillus-kannan eristämiseksi
EP1112692B1 (en) Drinks and foods capable of eliminating helicobacter pylori
ES2231908T3 (es) Cepas novedosas de lactobacilos utiles en el tratamiento de trastornos del aparato digestivo.
US7244425B2 (en) Acid- and bile salt-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol
CA2893822C (en) Strain of bifidobacterium animalis ssp. animalis
JP6923883B2 (ja) 栄養状態改善に使用するための組成物
KR20090024175A (ko) 면역조절 활성이 높은 유산균의 배양법
CN111685255B (zh) 一种增强免疫功能的益生菌固体饮料及其制备方法
EP1997880A1 (en) Breast milk bifidobacteria, compositions thereof, their use and a novel culture media to obtain them
JP2003252770A (ja) 糖尿病合併症予防・改善・治療剤
EP1424075B1 (en) Acid and bile-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol
KR102642548B1 (ko) 페디오코커스 에시디락티시 WiKim0170을 포함하는 숙취 해소 및 간 기능 개선용 조성물
JP4023791B2 (ja) 抗菌物質産生乳酸菌およびそれを用いた機能性食品
KR102642547B1 (ko) 레비락토바실러스 브레비스 WiKim0168을 포함하는 숙취 해소 및 간 기능 개선용 조성물
KR20240119902A (ko) 락티카제이바실러스 파라카제이 WiKim0171을 포함하는 숙취 해소 및 간 기능 개선용 조성물
KR20240119903A (ko) 류코노스톡 메센테로이데스 WiKim0172을 포함하는 숙취 해소 및 간 기능 개선용 조성물
KR20250087741A (ko) 항비만 활성을 갖는 레비락토바실러스 브레비스 WiKim0114 및 이의 용도
RU2290436C2 (ru) Штамм bifidobacterium lactis 676, используемый для приготовления кисломолочных лечебно-профилактических продуктов, ферментированных и неферментированных пищевых продуктов, биологически активных добавок, пробиотика и косметических средств

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20181208