Patents

Search tools Text Classification Chemistry Measure Numbers Full documents Title Abstract Claims All Any Exact Not Add AND condition These CPCs and their children These exact CPCs Add AND condition
Exact Exact Batch Similar Substructure Substructure (SMARTS) Full documents Claims only Add AND condition
Add AND condition
Application Numbers Publication Numbers Either Add AND condition

Method of producing anthracycline glycosides

Classifications

C07H15/04 Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
View 3 more classifications

Landscapes

Show more

CS198280B2

Czechoslovakia

Other languages
English
Inventor
Giuseppe Cassinelli
Federico Arcamone
Marco Aurelio Di

Worldwide applications
1976 GB 1977 NL US YU NO FI DK IL IE AU GR FR AT SE CS ZA NZ BE CH CA DE JP HU 1979 SU

Application CS778604A events

Description

Předložený vynález se týká způsobu výroby antracyklinových glykosidů s antitumorovými účinky.
Výrazy daunomycin a adriamycin se používají zde к označení daunorubicinu, resp. doxorubicinu.
Předmětné sloučeniny odpovídají strukturou obecnému vzorci I
kde Rj znamená 3-amino-4-0-metyl-2,3,6-trideoxy-L-hexopyranosylovou skupinu nebo 3-trifluor acetamido-2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-L-hexopyranosylovou skupinu, a R znamená atom vodíku nebo hydroxylovou skupinu.
Předmětem vynálezu je způsob výroby takových antracyklinových glykosidů. Ty látky, kde Rj znamená 3-trifluoracetamido-2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-L-hexopyranosylovou skupinu a R znamená atom vodíku, se mohou podle postupu podle tohoto vynálezu připravovat kondensací látky ze skupiny antracyklinů obecného vzorce I, kde Rj i R znamenají v obou případech vodík, s 3-trifluoracetamido-2,3,6-trideoxy-4-0-mety1-L-heхоруránosylhalogenidem, Ty látky, kde Rj znamená 3-amino-2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-L-hexopyranosylovou skupinu a R Znamená vodíkový atom, se mohou připravovat odštěpením N-trifluoracetylové skupiny z antracyklinových glykosidů, připravených výše uvedenou kondensací, přičemž se zmíněné odštěpování provádí hydrolýzou v mírně alkalickém prostředí.
Ty látky, kde R znamená hydroxylovou skupinu, se mohou připravovat z antracyklinových
198280' glykosidů, připravených výše uvedenou kondensací, a to působením bromu a hydrolýzou připraveného 14-bromderivátu působením mravenčenu sodného.
KonSeiis ační reakce se provádí s výhodou v prostředí organického · rozpouštědla, jako je chloroform nebo oeeyy e n ch. 1 o ríd za přítoonooti rozpustné stříbrné soli jako katalyzátoru a mdekdového síta jako enhydeatačsíhn činSela, přičemž ze střbbnných solí se může použít například stříbrná sůl kyseliny trflšnormetansufnonové /CF3SO3Ag/ ve shodě s britským patenoovým spisem 18 098/75.
Za výhodné 3 oacee aaoi do^^^ — tredenxy-4 —0-meny1—L-hnxnpyrasosyLhalogesiey k po^j^í.tí při kondensací podle tohoto vynálezu je možno označit 3-trflšnoaccetamien-2,3,6-tredeoxy-4-O-Inenyl-L-lyxnhexonyrmsntlch1orid a 3-tri fluoracet:amido-2,3,6-trereoxy-’4-0-menyl-L-araЬЛ!“-1 e x ο Pyranosy 1 c^l^<^rid. Tyto chráněné halogmosy, odvozené od aoinodeoxyhhxos, je možno připravit z menyl-Ззttifluoracrtamíeo — 2,3,6-tíennoyyX--L-lyxo-hexnpyrasnsi.eš a <^^33^1 — f 1 uo r acet amb do^^^d r ideoxy—X-L-ara_binp —hexop yr anos i du, jak je to popsáno v briskéém patentovém spise 1 457 559. Reakce zmíněných hnxopyrannsídů s roztokem diazooetanu a floridu boritého v eteru, zředěném oerylenchlorideo, jak · to popisuje J. 0. Deeferari a spol,, Míthods in Carbohyddate Chem. 365 / 1 972^/, Acad. Press, New York a Londýn, poskytuje dosud neznámé ndpPoVdející 400-meyyleryry v dobrém výtěžku. A ze získaných sloučenin se připraví hydrolýzou v kyselém prostředí ndppoVdející derivát s volnou 1yeroxdlovou skupinou v poloze -1-. Ze získané sloučeniny se reakcí s ρ-nitooЬenznylc1lnrdneo v pyridinu připraví ndppnídející 14O-ppnStrnbenzzndlerrvát, a z této látky působením suchého chlorovodíku v bezvodém chloridu ndppoídející 1-chloreeniváá.
Vynález je blíže doložen formou ná^led^ijící.ch řřbkladů; tamže p^i^2^i,té hll.ognnnsy chráněných amno(^ι^ox]^ϊ^onnntcC^hrídů se přípravu jí takto:
Př íprava 3-trifluoracneamido4/)3,6-trddeoxy-4-0-oredl-L-dyxr-hexrρyrannsylc1lrríeu /mezipro1dukt /
K roztoku· 2,57 h /10 mimO/ menyl-4з4trflšnracetamiec-/,3,6-tríenoxyoX-L-lyχo-hexnpyranoo sidu v 45 ml suchého meeydrschlnrieu se za chlazení na 0 °C přidá 0,1 ml roztoku fluoridu boritého v eteru, a za udržování teploty na 0 °C se přidává roztok diaznmrtasu v metrlenchloridu, až trvale se udrží bledě · žluté- zbarvení reakiní směs.. Stáním 90 minut při 0 °C se vyloučí pevná bílá látka /polymetylen/, jež se odfiltruje, a filtrát se promývá postupně 10% vodným roztokem hydroggesh1lčitanš sodného, dále vodou, načež se vysuší bezvodým síranem hořečnatýo. Krysalisací zbytku po odc^des dování rozpouštědel ze směsi dietdleenru a hexanu se získá čistý met^y-434t:i d^ncet amido-/,3,6-4tr íennχ^-4404ш^tyl-ťZ-LLlyxoohexopyráno si d ve výtěžku 2,3 g /85 %/; t. t. 137 až 138 °C, [íZ]d = -150° /c ~ 1, chloroform/.
Hradové spektrum rn/e 271 /R+/.
NMR spektrum v eeuenrovaném chloroformu má píky při 1,23 /du^lí^tt, CH34^“4/, 3,23 a 3,40 /2 dn^et^ oOCh3, a 4,70 e^/široký single^ ^Ι^Λ
Roztok 2,17 g /8 omoO'/ uvedeného 4-0-oeeyyderivátu v 40 ml octové kyseliny se přidá do 160 ml vody, a ^akční směs se zahřívá hodinu na 100 °C. Krdtelΐtlcí zbytku po nddeetilování rozpouštědel ze směsi acetonu a hexanu se isoluje 3·erί.ljn)accťtlmier4/,316otl^ίdenxyo4404 ooetyl-cí-L-ldxoohnxrpyrlnosl ve v^^ku 2 g /97 %/, d j. 193194 °C, [,xJd -· 4130° /c = 0,97, c1loroforo/. ^ο^^ηί sρekeruo: m/e = 257 /r+/.
NMR-sspktrum v de^emaném chloirol^omu má píky při 1,23 /duHet, 0Hн_4c4/, 3,50 /singlet, CH^O/ a 5,40 · /široký singlet, C-1-H/.
Roztek 1,68 g ' /6^3 rnnd/ ziskané tky v 40 ml ^ridnu se mícU za c1laznní na 0 °C za přidávání 2,52 g p-níerrbrnzoy УсП1 1oridu. Reakční směs se ponechá 14 hodin za teploty místnosti, načež se vlije do ledové vody, vyloučená sraženina se odd^^uje a pr-omývá se vodou až do neuurální reakce. Získaný 14p4nitrobnnzrylderivát /směs 0~ a /^-anomeru/ se rozpoutí v chloroformu a roztok se vysuší bezvodým síranem hořečnatým. Odeersilovánío roztoku se získá 2,4 g /92 %/ 3-eriljnoacnelaoido-/,3,6-trddeoxy4440-oetdl-1404P4nirobbenzodl4L-lyχr-hnχrpyrl4 nosy, t. t. 168 až 170 °C, Qo] D = - 39° /c = 0,45, chlororooIl/. Hmooové spektrum: o/e = 240 /M - p-nítrobenzodlrxyy.
Roztok 1,05 g /2,5 °md/ p-nitrobenzoylderivátu v suc1^0 i^yknchloň^ se nasytí při.
°C ^chý0 plynným chlrrrvreíkro, vysdžmá kyselka p-^ttobenzo^ se odHkr^ za d°drže- ní bezvndéhn prostředí a nepřístupu vllbosi, filtrát se zahnutí do sucha, a získaný 3-trid^^^t aoier-/,3,6-trddeoχy-4-0-oetyl-L~yχn-1exrpy r ano oy ychl° rid /0,69 g/ se použij o bez jakéhokoli čištění pro další reakci.
Př íprava 3-tr if luoračetami do-2,3,6-t rideoxy-4-^0mety l-ct-L-arabino-hexopyr ano syl chloridu /meziprodukt/
Působením roztoku díazometauu v metylénchloridu na 2,57 g /10 mmol/ metyl-3-triofluoracetamido-2,3,6-trideoxy-Á-L-arabixuq- hexopyranosidu za příooonoosi roztoku fluoridu boritého v éteru, jak to bylo zde dříve popsáno, se získá odppoíddjící 4-0-meeylderivát ve výtěžku 1,7 g /63 Z/, t. t, 185 °C, 1O1° / c = 1, chloroform/ . HπюOyooSnd spektrum pe 271 /M+/.
NMR spektrum v deuterovaném chloiroí^omu má píky při 1,31 /dubbet, CH3--C35, 3,30 -a 3,43 /dva singlety, -OCH^/ a 4,70 * /oiroký singlet, C-1-H/. .
Hyldolýzou 1,63 g /6 mmmo/ tohoto 4з0-meylderiíátu v kyselém prostředí se získá 1,51 g /98 7<! 3-Уrflloojceejaojdo-2·3,6зtrddeoxyз-4-0-metyl.-L-arabino-hexopyranosy> t. t. 201 °C,
- “12,7° / c = 0,48 chloroform^. HmoonnoSní spektrum m/e 257 /m+ / .
Z 1,41 g /5,5 mmoo/ této sloučeniny se reakcí s p-nitoobeuzoylchlordem v pyridinu získá od ppoiídaicí 1-03p-nit:n^bezoy1 derivát ve výtěžku 1,78 g - /80 Z*, t. t. 159 až 160 °C, MMd3 = -33,5° /c = 0,47, chloroforp. ^oostnosní. speUrum m/e = 240 /M3“-ntrobenzoyyoxyy.
Rpztok 1,6 g /4 mmoo/ získaného p-ujtrobeuzoylderjvátu v such.é^m oeeylenchloridu se na sytí za chlazení na 0 °C suchým chlorovodíkem, vyloučená p-nitoobenzoová kyselina se oddiltruje, roztok se zahussí do sucha a isoluje se tím 1,1 g /-trilSoraaeyjrmddo-2,3,6-tideooxy~ -4-^C^-^oety1-X-L“arab.ino-hexopyrano sy1 chloridu. NMR-see;trum v deuterovaném chloroi^oímu má píky při 1,34 /dublet, ΟΗβ-Ο-—/, 3,44 /singlet, CHhO-3-Н/, a 6,17 íT/širokO singlet, C-1-II/,
Příklad 1
Roztok 1 g /2,5 mmoo/ daunomycinonu v -100 ml.suchého oeeyyenchloridu se přidá k 0,69 g 3-trifSoojacejaoido-2·3,6-yrddeoxyз4-0-oetyl-L-lyxo-heoopyranosyychloridu a 7 g oooekulového síta /4Á Meěrek, a za energického míchání se přidává roztok 0,78 g stříbrné soli kyseliny triiuorrnietansuioonové v bezvodém dietyleteru. Reakční směs se ponechá 2 hodiny za teploty [mítrinosi, neu Uralizuje se nasyceným vodným roztokem hydro ggeuULlc itanu sodného, - organická fáze se odddld. Po oddeesi/ování rozpouštědla ve vakuu se získá surový zbytek, který se chro- maacogafuje na koloně kyseliny křemi^té za eluování smOsí chloroformu a acetonu /99 : 1/, a isoluje se tím 0,9 g 4 3зCзoeeyl-3-trii].uorjcetl-1dauuomyyinu, t.t. 151 až 152 °C, = +25'0° /c = 0,06, chloroform/. NMR spektrum v deuterovaném chloirofomu má píky při 1,33 /duHet, CH/----'-, 2,40 /singLet, CH/gC0/, 3,53 /singlet, 0-4--0-0/3/, 4,03 /singlet, C-4-O-CH/3, 5,20 /Široký singlet, C-J-//, 5,50 /š^ocký singlet, C-Γ-Η/, 6,43 /NH/, 7,16-8 /muiiplet, jromjjcké proton^/, 16,26 a 17,.74 ó* / 2 single-ty, fenolické hydroxylové skup inyy. .
Roztok 0,5 g získané chráněné sloučeniny v 30 ml acetonu se smíchá s 30 ml 0,1 N vodného roztoku hydroxidu sodného, a reakční sm^.s se míchá hodinu za teploty místnosti pod dusíkem. Potom se hodnota pH reakční sořsi upraví na 3,5 přidí^nm N vodného roztoku chlorovodíku, a nečistoty se odstraní extrakcí do chloroformu. Vodný podél po úpravě pH na 8,5 se extrahuje chlorcfoomei^m /50 a 30 ol/, organický extrakt se vysuší bezvodým síauneo sodným, po filtrací se filtrát zahnusí na malý objem, a ten se okyyeeí přidáním 0,5 N roztoku chlorovodíku v metanolu na pH 4,5. Přidáním nadbytku diety/eteru se vyloučí 0,4 g /90 ^/ hydro chloridu 4 -0·зmetyL.easlnooyciuu s t. t· 173 °C /za rozkladu/, - +210° /c = 0,04 meanno/. Při chromao g gafování na tenké vrstvě tilrkjlgelu Merek F254 za po и uití směsí chloroformu, metanolu a vody v poměru 150:42:6 k vyvolávání má isolovaná látka hodnotu R- 0,40 /dauuomycin má Rf = 0,25/.
Příklad 2
-0-Meeyladri^oycío
K roztoku hydrochloridu 4-0-metyldaunooyydnu, jak byl připraven v příkladu 1, ve smřsí meanolu a dioxanu se přidává boom za vzniku odppoíddaíčího- 14-bromderi vátu. Na tuto látku se působí vodným roztokem mravenčanu sodného 4 dny za teploty olísnossi, a isoluje se
4-O-°eey1 athúao^no ve foroě , odp poJd d j^^o hydrochloojdu o у« 177 °l /za oozklaeus , = +259° /c = 0,046 , oeeanoo/.
Příklad 3
4'-epí-4e-0-Metyldaunomycin /1М1-74/
Syntéza sloučeniny, uvedené v nadpise, za použití daunomycininu a 3-trifluoracetamido-2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-oí-L-arabÁbP^hexopyranoey1chloridu se provádí za použití postupu, popsaného v příkladu 1. 4'-epi-4’-0-Меtyldaunomycin se získá ve formě hydrochloridu, tvořícího oranžovočervené krystaly o t. t. 192 °C /za rozkladu/, Wjp = +270° /с = 0,047 , metanol/. Příklad 4
4'-epi-4*-0-Metyladriamycin /1М1-79/
4-epi-4-O-Metyldaunomycin, připravený postupem, popsaným v příkladu 3, se hydroxyluje v poloze -14- přes odpovídající 14-bromderivát poále postupu, který je popsán v britském patentovém spise 1 217 133. Získá se tak hydrochlorid 4”-epi-4-0-metyladríamycínu ve formě oranžovočervených krystalů, t. t. 170 °C /za rozkladu/, _ +252О /с = 0,052/, metanol /.
Sloučeniny 4'-0-metyldaunomycin, 4-0-metyladriamycin, 4'-epi-4-0-metyldaunomycin a 4'-epi-4’-0-metyladriamycín se vyznačují antimitotickou účinností a jsou vhodnými therapeutickýmí látkami pří léčbě experimentálních tumorů na zvířatech.
Sloučeniny byly testovány na myších BDFj /C57BL/6, DBA/za intraperitoneálního injikování 10^ buněk na myš L1210 ascítícké leukemíe, nebo 106 buněk na myš P388 ascítické leukemíe. Léčba byla provedena intraperitoneálně za 1 den po očkování tumorem, přičemž účinné látky ve formě hydro chloridů byly rozpuštěny v deštilované vodě. Daunomycin a jeho deriváty byly testovány proti leukémií P388, jež se vyznačuje značnou citlivostí vůči antitumorové účinnosti antracyklinů. Z údajů v tabulce 1 je patrné, že 4'-0-metyldaunomycin v dávce 4,4 mg/kg je účinnější než daunomycin; 4'-epi-4'-0-metyldaunomycin má velký rozsah účinných dávek /od 4,4 až do 20 mg/kg/ a je méně toxický ve srovnání 8 daunomyčinem. V optimálních netoxických dávkách 2,9 mg/kg daunomycinu a 20 mg/kg 4'-epi-4'-0-metyldaunomyčinu mají tyto 2 sloučeniny stejnou antítumorovou účinnost.
Odpovídající deriváty adriamycinu byly testovány proti leukémii L1210, protože leukemíe P388 je příliš citlivá na adriamycin a je proto velmi nesnadné vyhodnotit lepší účinky nových derivátů.
Z údajů, uvedených v tabulce 2, je patrné, že ve dvou odděleně provedených pokusech byl 4'-0-metyladriamycin účinnější než adriamycin. V dávce 4,4 a 6,6 mg/kg způsobil tento, nový derivát vzestup přežití z 130 na ‘212 Z, zatím co adriamycin v optimální /netoxické/ dávce 6,6 mg/kg způsobil vzestup přežití o 75 Z.
Vyšší účinnost 4‘-0-metyladríamycinu ve srovnání s adriamycinem proti leukémií L1210 má velký význam. V případě 4'-epí-4'-O-metyladriamycínu je řádově antitumorové účinnost stejné výše jako u adriamycinu za snížené toxicity.
Výsledky lze shrnout tak, že náhradou hydroxylové skupiny v poloze -4'- aminocukru metoxylovou skupinou se docílí zvýšení antitumorové účinnosti, což je velmi výrazné v případě adriamycinu. Epímerováním substituentu v poloze -4 - se způsobí pokles toxicity obecně, jak to bylo dokázáno na myších s tumory.
Tabulka 1
Účinnost proti P388 leukémii
Sloučenina Dávka T/C Počet tox. úmrtí
/mg/kg/ Z na celkový počet
daunomycin 2,9 169
4,4 169 2/10
6,6 160 7/10
98280 pokračování tabulky 1
Sloučenina Dávka T/C1 Počet tox. úmrtí
/mg/kg/ Z na celkový počet
hydrochlorld 4'-0-metyl-
daunomycinu /V/ 2,9 156
4,4 1 91 3/10
6,6 139 7/10
hydrochlorid 4-epi~4*-O~
-metyldaunomycinu /VII/ 4,4 150
10,0 143
20,0 174
40,0 34 9/9
1/ Střední čas přežití léčené myši proti střednímu času přežití kontrolních zvířat násobeno stem
Tabulka 2
Účinnost proti 1eukemi i LI 210
Sloučenina Dávka T/C Z Počet toxických úmrtí
/mg/kg/ 1 2 na celkový počet
adriamycin 4,4 169
6,6 175 1 75
10,0 187 187 3/20
hydrochlorid 4’~0~metyl~
adriamycinu /VIII/ 4,4 287 312
6,6 231 275 1/20
10,0 75 62 17/18
hydrochlorid 4'~epi~4'-0-
-metyladríamycinu /IX/ 5,6 169
10,0 187
1 5 ,0 181 2/10
22,5 87 9/10
PŘEDMĚT V Y N Á L E Z U
1. Způsob výroby antracyklinových glykosidů obecného vzorce I

Claims (2)
Hide Dependent

1. Způsob výroby antracyklinových glykosidů obecného vzorce I kde R znamená vodík nebo hydroxylovou skupinu а X znamená zbytek aminocukru struktury nebo jakož i odpovídajících hydrochloridu,vyznačený tím, že se kondensuje daunomycinon s 2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-3--trifluoracetamido-L-lyxo-hexopyranosylchloridem nebo 2,3,6-trideoxy-4-0-metyl-3-trirlueuace0amiddз0L-arobindL0yuonvsyldhldridem za vzniku odpovidajíčího glyo kosidu s chráněnou N-Lriflueracetyeovou skupinou, a tato chráněná skupina se odstraní hydrolýzou v mírně alkal-ck^i^m prostředí, .
2. Způsob podle bodu 1 vyznačený tím, že se působí na sloučeninu připravenou podle bodu
1 bromem za vzniku 14зbrvmdhU\^^;ítu) a připravený 14LbrvmddhUvát se hydrolyzuje působením mravenčenu sodného. .