SU1227117A3 - Способ получени антрациклических гликозидов или их гидрохлоридов - Google Patents

Description

(21)3444074/23-04 ( 22)25.05,82 ( 31)125949 ( 32)22.08.81 ( 33)GB ( 46) 23.04.86. Вюл. } 15 Карло Ерба С,п ( 71)Фармитали  (IT) (72)Франческо Анджелини,.Серджи кр и Федерико Аркамоне (IT) (53)547.917.07(088.8) (56)Merch Index 10-th Edition, p. 2810. Патент США № 4107423, кл. 536-4, 1978. Патент CDIA № 3803124, кл. 260-210, 1974. (54)СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТРАЦ11КЛИ , КИХ ГЛИКОЗВДОВ ИЛИ ИХ ГИДРОХЛОРВД ( 57)Способ получени  антрацикли киу гликозидов общей формулы . Них где одна из групп R, и R - атом дорода, а друга  группаиз R R соответственно - гидрокси на  группа; кажда  из групп R, R и R независимо атом водорода или роксильна  группа, при услов что Rjj и Rg одновременно не ютс  гидроксильной группой; X - атом водорода. или их гидрохлоридов, отличающийс  тем, что подвергают взаи- модействию рацемические агликоны общей формулы сосн он (II) где R и R, имеют указанные значени  с защищенными хлорсахарами общей формулы СШ Ci . -to Rii Ъ1НСОСРз где кажда  из групп R и Rj - независимо атом водорода или трифторацетоксильна  группа, при условии, что R и RJ одновременно не  вл ютс  трифторацетоксильной группой, в безводном хлористом метилене в присутствии симметричного коллидина, трифторметансульфоната серебра, растворенного в безводном диэт1у1овом эфире, и молекул рного сита 4 А в качестве дегидратирующего агента с целью получени  N,0- или N-трифторадетилзамещенных гликозидов, которые подвергают предварительной обработке метанолом при комнатной температуре, получа  при этом два диастереоизомерных N-трифторацетилзамвщенных гликозида , целевые N-трифторацетилгликози ды общей формулы (I), где X - CFjCOO, отдел ют от их 7,9-диэпипроизводных, одновременно образующихс  на стадии конденсации, хроматографией на колонке с силикагелем, при использоваНИИ в качестве элюента системы растворителей хлороформа и ацетона (6si по объему), после чего N-трифторацетильные производные общей формулы (I) подвергают м гкому щелочному гидролизу при обработке 0,1 и. водным раствором гидроокиси натри , получа  гликозиды общей формулы (I), где R.J- Н, X - Н, в виде свободных оснований, которые, обрабатыва  ме-

17

1227

танольным раствором хлористого водорода , выдел ют в виде соответствующих гидрохлоридов, которые при необходимости подвергают взаимодействию с бромом в хлороформе с последующим гидролизом водным раствором формиата натри  дл  получени  гликозидов общей формулы (I), где RJ- ОН, которые вьщел ют в виде соответствующих гидрохлоридов .

Изобретение касаетс  способа получени  новых антрациклических гликозидов общей формулы

О Ц „ 13 ш

.СОСНгЯз он

(О

где одна из групп R, и R,j - атом водорода , а друга  группа R или Rj соответственно - гидроксильна  группа;

кажда  из групп R3, R и R - независимо атом водородаiили гидроксильна  группа,при условии, что R и Rg не  вл ютс  одновременно гидроксильной группой;

X - атом водорода,

или их гидрохлоридов, обладающих противораковой активностью.

Цель изобретени  - синтез новых антрациклических гликозидов, обладающих более высокой противораковой активностью по сравнению с извест .ным, даунорубицином.

Пример I. Получение 4-деметокси-6-деоксидаунорубицина (ХОО-0170 ) и 7,9 диэпи-4-деметокси-6-деоксидаунорубинина .

К раствору 0,065 г рацемата 4-деметокси-6-деоксидауномицинона (общей формулы II, где R - ОН, R - Н) в 45 МП безводного дихлорметана добавл ют 1 г молекул рного сита 4 А, 0,079 г 2,3,б5-тридеокси-3-трифторацетамидо-4-о-трифторацетил-о -L-ликсопиранозилхлорида (общей формулы ГЦ, где Y - С1, Rg - CFjCOO, Н), мл сим-коллидинаI и 0,057 г трифторметансульфоната серебра, растворенного в 2 мл безводного диэтиловогоэфира . Реакцию провод т в течение 2 ч при комнатной температуре. Затем реакционную смесь отфильтровывают и промывают водным раствором 0,1 Н, сол ной кислоты, водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натри  и водой. Остаток, полученный после упаривани  растворител , раст .5 вор ют в метаноле и после вьщерживани  Е течение 30 мин при комнатной температуре полностью провод т гидролиз С-4 -О-трифторацетильных групп. При этом получают смесь диа0 стереоизомаров Ы-трифторацетил-4-деметокси-6-деоксидаунорубицин .

Тонкослойна  хроматографи  на силикагелевых пластинках при использовании системы растворителей хлоро форм: ацетон 4:1 дает Rf 0,16 и 0,13.

Чистые диастереоизомеры получают хроматографией на колонке с сили кагелем с использованием в качестве элюента смеси хлороформа с ацетоном (6:1).

Ы-трифторацетил-4-деметокси-6-деоксидаунорубицин , т.пл. 155-160 С.

1Н-ЯМР (270 МГц, CDC),& : 1,34 (d, J 7 Гц, CHj5); 2,42 (S, COCHj); 3,09 (d, J 15 Гц, H,,-10); 3,17 (d, J 15 Гц, Hp-10); 5,01 (m, W 7 Гц, H-7); 5,20 (m, 3 К-трифторацетил-7,9-диэпи-4-дeмeтoкcи-6-деоксидаунорубйцин . . Т.пл. 135-140 С. Н-ЯМР (270 МГц, CDC1 ),(5 : 1,45 (d, J 7 Гц, CIlj-5 }; 2,41 (S, COCHj); 3,00 (d, J 15 Гц, Н,,-10 3,30 (d, J 15 Гц, Hg-lO): 5,07 (m, W 7 Гц, H-7); 5,26 (m, W 5 Гц, H-1); 6,73 (brd, :Г 8 Гц, NH); 7,75 (S, H-6). Гидролиз К-эащищенной группы диа стереоизомера 75 : §S осуществл ют .путем растворени  производной N-три фторацетила в растворе едкого натра 0,1 н. После выдерживани  в течение 30 мин при О С рН раствора довод т до 8 и экстрагируют хлороформом, Растворитель упаривают до малого объ ема, после чего добавл ют 0,1 н. метанольный раствор хлористого водорода дл  увеличени  рН от 4,5 до 5, При этом получают 4-деметокси-6дезоксидеуиорубицин в виде хлоргидрата . Хроматографи  тонкого сло  на силикагелевых пластинках ( ) с помощью смеси хлороформа, метанола, уксусной кислоты и воды (80:20:7:3) дает Rf 0,26. Масс-спектр (ЦЦ-MS): т/1 482 (МН) Пример 2. Получение рацемического 4-деметокси-4-эпи-11-дезоксидаунорубицина (ХОО-0161). К раствору 0,7 г рацемического 4-деметокси-11-дезоксидауномицинона (общей формулы II, где R, - Н, R ОН ) в 100 мл безводного дихлорметана добавл ют 6 г молекул рного сита 4 А, 0,705 г хлорида 2,3,6-тридезокси-З-трифторацетамидо-4-О-трифтор ацетил-Ы-Ь-арабинопиранозила (общей формулы III, где Л - С1, Kg Н , R - CFj COO) , 0,26 МП сйм-коллидина и 0,515 г трифторметансулъфона та серебра в растворе 25 мл безводн го диэтилового эфира. После выдержи вани  в течение 20 мин при комнатно температуре смесь отфильтровывают и промывают 0,1 н. водным раствором хлористоводородной кислоты, водой, водным насыщенным раствором бикарбо ната натри  и снова водой. Полученный после упаривани  растворител  остаток помещают в метанол на одну ночь. Испарение метанола дает смесь .диастереомеров N-тpифтopaцeтил-4-дe метокси-4 -эпи-11-дезоксидаунорубиц на и К-трифторацетил-4-деметокси-4 -7,9-триэпидаунорубицина. 17 Хроматографи  тонкого сло  на пластинках из кизельгел  (F ) с ПОМОЩЬЮ смеси хлороформа с метанолом (4:1) дает Rf 0,13 и 0,16 соответственно . Чистые диастереоизомеры получают путем хроматографического разделени  на колонке силикагел  с использованием в качестве элюента смеси хлороформа с ацетоном (97:3). Дл  К-трифторацетил-4-деметокси-4 -эпи-П-дезоксидаунорубицина (0,34 г) Т.пл. 208-210°С, а дл  N-тpифтopaцeтил-5-дeмeтoкcи-4 ,7, 9 -триэпи-11-дезоксидаунорубицина Т.пл. 98-200°С. Б 25 мл ацетона и 25 мл водной гидроокиси натри  (0,2 н.) раствор ют 3 г трифторацетил-4-деметокси-4 -эпи-11-дезоксидаунорубицина. После выдержки в течение 30 мин при комнатной температуре рН смеси довод т до 3,5 сол ной кислой и экстрагируют хлороформом дл  удалени  примесей . Затем рН водного раствора довод т до 8 и раствор экстрагируют хлороформом. После упаривани  растворител  до малого объема добавл ют метанольный раствор хпористоводородной кислоты и осаждают в диэтиловом эфире 4-деметокси-4 -эпи-11-дезоксидаунорубицин в виде хлоргидрата (0,23 г) с Т.пл. 175-176 С. Хроматографи  тонкого сло  на пластинках из казельгел  ( ) с помощью смеси хлороформа с метанолом и уксусной кислотой (40:10:1) дает Rf 0,22. Масс-спектр (ПД-MS): га/1 482 (МН+); 481 (М ) . ffl-IP (60 МГц, ): 1,35 (d,Cn,j-5); 2,42 (S, ); 2,90 (S,); 3,2-3,6 (m, Н-З , Н-4 ); 4,05 (m, Н-5); 5,25 (широка  S, Н-Г , W 6 Гц); 6,96 (S, H-ll); 7,76 (широка  S, 4 ароматических протона). Пример 3. Получение 4-деметокси- 1 1-дезоксидаунорубицина (ХОО0164 ). Реакцию 0,100 г рацемического 4-деметокси-11-дезоксидауномицинона (общей формулы II, где R - Н, R - ОН) и 0,11 г хлорида 2,3,6-тридезокси-З-трифторацетамидо-4-р-трифторацетил-1 -Ь-ликсопиранозилита (общей формулы III, где Y - С1, Rg , R-, - Н) провод т аналогично примеру 2. При этом получают 4-деметокси-11-дезокси-К-трифторацетилдауноруби1дин (Rf 0,24) и соответствующую производную 7,9-диэпи. Слабощелочна  обработка диастереоизомера 7S : 9S приводит к гидролизу группь:, N-трифторацетила, в результате чего получают 4-деметокси-11-дезоксидаунорубицин в форме хлоргидрата с т.пл. 194-195°С.

+80° (,05 МеОН); ССМ Rf 0,17 (хлороформ : метанол : уксусна  кислота - 40:10:1).

Масс-спектр (ПД-MS)s m/| 482 (МН); 481 (М ).

Пример 4. Получение 4-деметокси-4 ,11-дидезоксидаунорубицина.

Реакцию между 0,35 г рацемического 5-деметоксй-11-дезоксидауномицинона (общей формулы II, где R, Н, R - ОН) в 50 мл безводного дихлорметана и 0,245 г хлорида 2,3,4,6-те тр аде з ок си-3 -трифтор аце тамидо-oi-треопиранозила (общей формулы , где J - С1, Rg R провод т аналогично примеру 2.

После хроматографического разделени  на колонке силикагел  с помощью смеси толуола с ацетоном (96:4) в качестве злюента получают 4-деметокси-4-11-дидёзокси-К-трифторацетилдаунорубицин (0,170 г, тех на пластинках кизельгел  ( - помощью смеси толуола и ацетона (4:1), дает Rf 0,53) и 4-деметокси-4 ,11-ди- дезокси-7,9-дизпи-К-трифторацетилдаунорубицин (0,2 г; ТСХ на пластинках кизельгел  ( ) с помощью смеси толуола и ацетона (4:1) дает Rf 0,53).

Подвергают диастереомер слабощелочной обработке, что приводит к гидролизу группы N-трифторацетилао При этом получают 4-деметокси-4 ,11-дидезоксидаунорубицин , который выдел ют в форме хлоргидрата с т.пл. 55-156°С, СММ: RF 0,40 хлороформ : метанол : уксусна  кислота t ,: вода - 80: 20: 7:3 ,

Lol.° +120 (С 0,05 МеОН). Масс-спектр (ПД-MS); т/1 466 (МИ); 465 (М).

5 Пример 5. Получение 4-деметокси-11-дезокси-4 -зпидоксорубицина (ХОО-0168).

Согласно способу с использованием в качестве исходного вещества 4-деO метокси-1 }-дезокси-4 -эпидаунорубицина , полученного согласно примеру 2, в форме хлоргидрата вьщел ют целевой продукт с т.пл. 181-184 С.

+300(,08 МеОН). 5 Пример 6. Получение 4-деметокси-11-дезоксидоксорубицина .

Согласно способу с использованием в качестве исходного вещества 4-деметокси-11-дезоксидаунорубицина , 0 полученного согласно примеру 3, в форме хлоргидрата выдел ют целевой продукт с т.пл. 195 С.

oif +60,8° (С 0,055-МеОН). Пример 7. Получение 4-демет5 окси-4 ,1 -дидезоксидоксорубицина.

Согласно способу с использованием в качестве исходного вещества 4-деметокси-4 ,11-дидезоксидунорубицина , полученного согласно примеру 4, 0 в форме хлоргидрата получают целевой продукт с т.пл. 188-189 С.

((.° +105 (С 0,04 МеОН). Исследуют биологическую активность соединений ХОО-0161, ОХХ5 0164, ХО-0168 и ХОО-0170.

Действие этих соединений на клетки штамма Ие1 а провод т в лабораторном сосуде.

Из данных, сведенных в табл., видно, что, все новые производные про вл ют в лабораторном сосуде исключительную цитотоксичес. кую активность. Соединени  ХОО-0161

и ХОО-0164 провер ют также против лейкемии Р388 на мьшах.

Из данных, сведенных в табл.25 видно, что эти соединени  обладают противоопухолевой активностью.

1 .12271178

Действие на кленовую активность (размножение)

Даунорубицин 100 13,10

ХОО-0164 (4-деметокси-11-де3оксидаунорубицин ) 100

Таблица I клеток НеР а

21,42,50,8,16

15

65,83,80,77,79

86,150,104,93,101

104,115

40

25 56,82 6,2 60, 105 1,5 78, 109

25

122711710

Действие против Р388 лейкемии (лейкемическиё клетки ввод т мьшам внутрибрюшиино (10 клеток))

Внутрибрюшинна  обработка на первый день после тнокулировани  рака.

Средн   продолжительность жизни обработанных мьшей/средн   продолжительностьжизни контрольных мьшей у 100.

Уцелевшие в течение долгого времени.

Токсическа  смерть, оцененна  по zooptic обнаружени м .

Таблица