SU963471A3 - Способ получени гликозидов - Google Patents

Description

(5) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГЛИКОЗИДОВ

1

Изобретение относитс  к способу получени  новых гликозидов - производных доксорубицина, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель изобретени  - получение но- s вых соединений, расшир ющих арсенал средств воздействи  на живой организм с улучшенными фармакологическими свойствами.

Поставленна  цель достигаетс  toсинтезом целевых соединений, основанным на известных реакци х переведени  производных 4 -эпидаунорубицина в доксорубициновый аналог через 1 -бромпроизводное р 1.15

Согласно способу получени  гликозидов общей формулы

о

(0-с Нг-ОК

он -нсЛу)

где X представл ет группу формулы

НО .но 110

,н°)

ter)

-О . -Н. М

w /

Нг

а б

R - водород или метоксирадикал, (когда X - группа формулы а или б, R - метоксирадикал, когда X - группа формулы B,.R - водород), гликозид общей формулы О ОН .

do-ciHs

. Н11)

где R и X имеют приведенные значени , растворенный в смеси диоксан - безводный метанол в объемном соотношении :, взаимодействует с раствором брома в хлороформе в присутствии этилортоформиата при комнатной тем-. 3ЭбЗ пературе дл  получени  Й-бромпроизводного , которое затем подвергают кон тролируемому гидролизу водным раствором формиата натри  при комнатной температуре в течение 2-k сут с последующим выделением целевоговпродукта в виде гидрохлорида. Пример 1.3, -Эпи-б-оксидоксорубицин гидрохлорид (1а). Раствор 0,3 г З, эпи-6 -оксидауномицин гидрохлорида в смеси k,2 мл безводного метанола и 12 мл диоксана смешивают с 0,3 мл этилортоформиата и 1,1 мл раствора брома в хлороформе (0,93 г в 10 мл). Спуст  1 ч реакционную смесь при комнатной температуре выливают в 60 мл диэтилового эфира и 30 мл петролейного эфи ра (т. кип. i)) . Образовавшийс  красный осадок отфильтровывают, промывают несколько раз диэтиловым эфиром до полного удалени  кислотности и раствор ют в смеси 6 мл ацетона и 6 м 0,25 н.водного раствора бромистого всэдорода. Через. 15 ч смесь сме- шивают при комнатной температуре с 6 мл воды и экстрагируют (неоднократно ) хлороформом дл  удалени  агликонов .-Водную фазу экстрагируют н-бутанолом пока экстракты не обесцвечивают с . Органический растворитель отгон ют под вакуумом до небольшого объема (около 5 мл) и получают 0,2б г производного в виде красного кристаллического продукта. Полученные 0-,2б г 1 -бромпроизводного раствор ют в 6 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и смешивают с 0,5 г формиата натри  в воде (4,5 мл). Реакционную смесь перемешивают 100 ч при комнатной температуре и. упаривают досуха под вакуумом. Остаток раствор ют в 120 мл смеси хлороформ - метанол (2: по объему), промывают 2,5%-ным раство ром бикарбоната натри  (дважды 50 мл Водную фазу экстрагируют хлороформом пока экстракты не обесцвечиваетс . Органическую фазу объедин ют с хлороформными экстрактами, сушат над безводным карбонатом натри  и упаривают под вакуумом до небольшого объема (30 мл). Красный раствор довод т до рН 3,5 (на конго-рот) при помощи безводного метанольного раствора хло ристого водорода, смешивают с избытком диэтилового эфира и получают 0,12 г З, эпи-6 -оксидоксорубицина (1а)в вире гидрохлорида. Т, пл. 158-,1бО°С (разл.-), + ( С 0,01 в МеОН). Тонкослойна  хроматограмма на силикагеле Мерк, буферированном до рН 7/М/15 фосфатом, с применением системы хлороформ - метанол - вода (13:6-1) по объему, Rf 0,32. Пример 2. З ,4-ЭпиадриамиЦин (16 . 3 - -Эпидаунорубицин гидрохлорид (0,5 г) перевод т аналогично примеру 1 в его доксорубициновый аналог (соединение формулы 16) (0,28 г); т. пл. 1б8-170°С, (с) +28А С (С 0,0itit МеОН), Rf 0,3, в системе хлороформ-метанол-вода (14:6:1) по объему. Пример 3. 4-Деметокси-4 -эпидоксорубицин гидрохлорид. Раствор 0,35 г А-деметокси- -эпидаунорубицин гидрохлорида формулы (IB) в смеси из 5 мл безводного метанола , мл диоксана и 0,35 мл этилортоформиата обрабатывают 1 ,i мл раствора брома в хлороформе (0,93 г брома в 10 мл хлороформа). Через 0,5 ч реакционную смесь при комнатной температуре выливают в смесь 70 мл этилового эфира и 35 мл петролейного эфира. Выпавший осадок красного цвете отфильтровывают и промывают несколько раз этиловым эфиром до полного удалени  кислотности, затем его раствор ют в смеси из 7 мл ацетона и 6 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода. Через 15 ч при комнатной температуре в смесь приливают 6 мл воды и несколько раз экстрагируют хлороформом дл  удалени  агликонов. Затем водную фазу экстрагируют н-бутанолом до получени  бесцветных экстрактов . Органический растворитель отгон ют под вакуумом до небольшого объема (около 6 мл) и получают 0,26 г lt-бромпроизводного, который раствор ют в 6,7 мл 0,25 н. водного раствора бромистого водорода и обрабатывают раствором .0,5 г формиата натри  в 5 мл воды. Реакционную смесь перемешивают kQ ч при комнатной температуре, затем упаривают досуха под вакуумом. Остаток раствор ют в 120 мл смеси хлороформ-метанол 2:1 по объему, промывают 2,5%ным водным раствором бикарбоната натри  (2 X 50 мл). Водную фазу экстрагируют хлороформом до получени  бесцветных экстрактов, сушат над сульфатом натри , упаривают до небольшого объема (30 мл) под вакуумом . Довод т рН красного раствора

до 3,5 (на конго-рот) при помощи безводного метанольного хлористого водорода , приливают избыток этилового эфира и получают 0,17 г 4-деметокси-4-эпидоксорубицина (формула IB) в виде гидрохлорида,.который очищают хроматографией в колонне с порошкообразной целлюлозой, примен   в качестве элюента хлороформ-метанол-воду ( ;20:2 по объему). Чистый продукт плавитс  при (разл.). Тонкослойна  хроматограмма на силикагеле Мерк 25/, буферированном до рН 7 при помощи М/15 фосфатного буфера, с применением системы хлороформ-метанол-вода (130:60:10 по объему), Rf 0,5.

З, -Эпи-6 -оксидоксорубицин гидрохлорида активен при экспериментальных опухол х. В табл. 1 приведены сведени  об активности при асцитной саркоме L80 у мышей. Тест проводили на группах по 10 мышей (Swiss COI). Соединение вводили внутрибрюшинно в различной дозировке испытуемым животным через день после внутрибрюшинной инокул ции 1-10 клетками опухоли мышей .

Средн   продолжительность выживани  дана в процентах от продолжительности выживани  необработанных животных , котора  ( условно;прин та за 100.

-Деметокси- -эпидоксорубицин испытывали , сравнива  сдоксорубицином не

нескольких системах in vitro, при экспериментальных опухол х у мышей. Результаты опытов in vitro приведены в табл. 2. Это соединение активнее, чем доксорубицин. Результаты, полученные при экспериментальных опухол х у мышей, представлены в табл. . Во всех испытанных системах -деметокси-4-эпидоксорубицин про вил противоопухолевое действие при дозе в 10 раз меньшей, чем доза доксорубицина.

При лейкеми х L1210 и Р 388 протич воопухолевое действие при оптимальной (не токсической) дозе сравнимо с действием доксорубицина. При распространенной саркоме L 80 ингибирующее действие на рост опухоли на 11 день несколько слабее, чем у доксорубицина, при эквитоксических дозах. При лейкемии Гросса (системна  опухоль, прививаема  внутривенно), увеличение продолжительности жизни у мышей, обработанных двум  соединени ми в эквитоксических дозах, одинаково.

Таким образом, (-деметокси- -эпидоксорубицин про вл ет сильное противоопухолевое действие на мышах, аналогичное доксорубицину, но доза его в дес ть раз меньше.

Действие 4-метокси-4 -эпидоксорубицина на асцитную лейкемию. Лечение внутрибрюшинно. в 1 день. Данные приведены в табл. 3. Действие in vitro -деметокси- -эпиадриамицина в сравнении с адриамицином, LD (мкг/мл) ,Таблица2

рида

-Деметокси-4 -эпидоксорубицин гидрохлорида

0,35 0,1 0,03 0,003 0,003 Примечание.

Примечание. Средн   продолжительность выживани ,

% против необработанных контрольных. Продолжительность выживани  до 60 дн. (см. табл. и).

Таблица 3 Клонова  эффективность клеток HeLa. Ингибирование образовани  очагов у MSV. Ингибирование пролиферации фибропластов у эмбрионов мышей.

Действие t-AeMeroKCM-f -эпидоксорубицина на распространенную саркому L80 при лечении внутривенно в 1-5 день (среднее от двух экспериментов)

Действие «-деметокси- -эпидоксорубицина на лейкемию Гросса при лечении внутривенно на 1-3 день (среднее от двух экспериментов)

Доксорубицин гидрохлорида

-Деметокси-/ -эпидоксорубици

гидрохлорида

См. примечание к табл. 3Т а б л и. ц а

необработанных контрольныхЧсм. табл- 5).

Таблица

0/20

0/20 0/20 0/20 1/10 1/10 3/10 0/10

2/20

Claims (1)

1. 0/10 0/20 0/20 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 0/10 Формула изобретени  Способ получени  гликозидов общей формулы I йо-бНг-он: ОН HCJl R - водород или мeтoкcиpaдикaл ( когда X - группа формулы а или б, R - метоксирадикал, а когда X - груп па формулы в, .R - водород), отличающийс  тем, что гл козид общей формулы I I О он (iH3 -ОН о он о 3с где R и X имеют приведенные значени , растворенный в смеси диоксан-безводный метанол в объемном соотношении , подвергают взаимодействию с раствором брома в хлороформе в присутствии этилортоформиата при комнатной температуре, полученное 1 -бромпроизводное подвергают контролируемому гидролизу водным раствором фррмиата натри  при комнатной температуре в течение 2-k сут с последующим выделением целевого продукта в виде гидрохлорида, Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1. Патент США № 3803124, кл. 260-210, опублик. 1У74.