FI70414C - Foerfarande foer framstaellning av nya 4'-jodderivater av antracyklinglykosider - Google Patents

Description

7041 4

MENETELMÄ UUSIEN ANTRASYKLIINIGLYKGbiDi EN 4'-JODIjOmUANHAISTEN VALMISTAMISEKSI - FÖRFARANDE FÖR FRAMSTÄLLNING AV NYA 4 '-JODODERIVATER AV ANTRACYKLINGLYKOSIDER

Tämän keksinnön kohteena on analogiamenetelmä yleisen kaavan I mukaisen lääkeaineena käytettävän antrasyk 1iinig 1ykosidiyh-disteen valmistamiseksi

Λ O

O OH [I

1 o f f oT

X .V. . .-k X J (I) T Ύ r r

OCH^ O OH f J O

CH3 _7--o -/·' l-r-y I NH2 jossa R on vety tai hydroksiryhmä-

Kummallakin uudella glykosidi11 a, nimittäin 4'-deoksi-4'-jo-didaunorubisiini11 a ja 41-deoksi-4'-jodidoksorubisiini 11 a, on havaittu olevan erinomainen kasvainten kasvua hillitsevä vaikutus.

Yhdisteiden valmistuksen lähtöaine on kaavan II mukainen 4 1 -deoksi-4'-jodi-N-1rif1uoriasetyy1idaunorubisiini, joka on välituoteyhdiste, jota on kuvattu eurooppalaisessa patenttijulkaisussa n:o 81107618.1 (24.9.81).

O OH II

^ ^ **0H (II) 0CH3 O OH ^

ch3-i--°W

| NH-COCF3 2 70414

Keksinnön mukaan mainittu kaavan (II) mukainen yhdiste saatetaan asetoniin liuotettuna lievän alkalisen hydrolyysin kohteeksi. käsittelemällä sitä 3 tunnin ajan 0 °C : n lämpötilassa natriumhydroksidin 0,1 N vesiliuoksella, jolloin saadaan vapaata glykosidiemästä (I; R=CH^ ) , joka lopuksi eristetään hydrokloridina ja saatetaan haluttaessa reagoimaan bromin kanssa niin, että muodostuu vastaava 14-bromojohdannainen, joka käsiteltäessä natriumformiaatin vesiliuoksella muuttuu 4'-deoksi-4’-jododoksorubisiiniksi (I; R=0H), joka niinikään eristetään hydrokloridina.

Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla uusilla antrasyk-1iiniglykosidei11 a on kasvainten kasvua hillitsevä vaikutus. Varsinkin 4'-deoksi-4'-jodidoksorubisiini11 a (I; R=0H) on huomattava aktiivisuus hiirillä tehdyissä kasvainkokeissa.

Keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisissa seoksissa, jotka sisältävät hoidollisesti tehokkaan määrän kaavan I mukaista antrasyk 1iiniglykosidia sekä farmaseuttisesti hyväksyttävää laimenninta tai kantaja-ainetta. Edelleen voidaan keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden avulla hoitaa tiettyjä nisäkkäillä esiintyviä kasvaimia siten, että kasvainta sairastaville annetaan hoidollisesti tehokkaat määrät mainittuja yhdisteitä.

Seuraavaksi keksintöä valaistaan tarkemmin va 1mistusesimer-keillä ja biologisilla koetuloksilla.

Esimerkki 1 4 '-deoksi-4'-jodidaunorubisiini (I; R = H) (X00-0138)

Liuokseen, jossa oli 2,0 g 4'-jodi-N-trif1uoriasetyy1idauno-rubisiinia 10 ml:ssa asetonia, lisättiin 80 ml natriumhydroksidin 0,1 N vesiliuosta. Kun oli inkuboitu 3 tuntia 0°C:ssa, liuoksen pH säädettiin kloorivedyn 0,1 N vesiliuoksella arvoon 4,5 ja sen jälkeen uutettiin kloroformilla aglykonien eliminoimiseksi .

3 70414

Sitten vesiliuoksen pH säädettiin arvoon 8,6 ja uutettiin kloroformi11a.

Kun yhdistetyt uutteet kuivattiin vedettömällä natriumsu1faa-tiliä, väkevöitiin pieneen tilavuuteen, tehtiin happamaksi (pH 4,5) kloorivädyn 0,1 N metano1i1iuokse11 a ja annettiin kiteytyä, saatiin otsikon yhdiste hydrokloridina . Saanto 1,5 g, sp. 157°C (haj.); FD-MS:637 (M+).

Ohutkerroskromatografinen analyysi si 1ikagee1ilevyi 1 lä ^254 (Merck) käyttämällä seosta CHC1 MeOH^^O:AcOH (80:20:7:3 t i 1 a v /1 i 1 a v ) , 8^=0,72.

Esimerkki 2 4'-deoksi-41 -jodidoksorubisiini (I; R = 0H) (X00-0163)

Liuokseen, jossa on 4'-deoksi-4'-jodidaunorubisiinia metano-lin ja dioksaanin seoksessa U.S.A:n patenttijulkaisussa n:o 3 803 124 kuvatun menetelmän mukaisesti, lisättiin bromia niin, että muodostui 14-bromijohdannainen, josta natriumfor-miaatin vesiliuoksella käsittelemällä saatiin 4’-deoksi-4 '-jodidoksorubisiini , joka erotettiin hydrokloridina. sp. 2 300 C (haj.); FD-MS : 653 (M+).

Ohutkerroskromatografinen analyysi silikageelilevyillä ^254 (Merck) käyttämällä seosta CHCl^MeOHiH^OiAcOH (80:20:7:3 tilav/tilav)R^=0,5.

Yhdisteiden X00-O138 ja X00-0163 biologinen aktiivisuus

Yhdisteet on tutkittu HeLa-solujen suhteen in vitro vertaamalla daunorubisiini in (DNR) ja doksorubisiiniin (DX). Taulukossa 1 esitetyt tulokset osoittavat, että X00-0163 oli sy-totoksisempi kuin DX. Kasvainten kasvua hillitsevä vaikutus todettiin in vivo hiirillä, joilla oli P388 askiittinen leukemia. Saadut tulokset on esitetty taulukossa 2. Kumpikin uusi johdannainen on aktiivinen P388-1eukemian suhteen.

4 70414

Erityisen mielenkiintoinen on tulos, joka saatiin käsittelemällä kasvainhiiriä yhdistellä X00-0L63. Optimaalinen, myrkky v akutukseton annos 15 mg/kg yhdistettä X00-0163 paransi yli 50 % hiiristä (6/10) ja annoksella 10 mg/kg parantui 3/10 hiiristä ja elinaika lisääntyi huomattavasti verrokkei-hin verrattuna (205 %). Näin ollen yhdisteen X00-0163 kasvainten kasvua hillitsevä vaikutus on merkittävästi parempi kuin yhdisteen DX vaikutus, joka optimaalisella, myrkkyvaikutuksettomalla annoksella 10 mg/kg parantaa kasvainhiiriä vain silloin tällöin.

Yhdiste X00-138 testattiin myös Gross-1 eukemian suhteen (käsittely vuorokauden kuluttua kasvaimen siirrostamisesta) .

Taulukossa 3 esitetyt tulokset osoittavat, että optimaalinen, myrkkyvaikutukseton annos 11,8 mg/kg yhdistettä X00-0138 on kasvainten kasvua hillitsevältä vaikutukseltaan parempi kuin DNR ja samanlainen kuin DX.

Taulukko 1. Vaikutus HeLa-solujen kloonauturnis tehoon

Yhdiste Annos % ID_ 5o (ng/ml) (ng/ml)

Daunorubisiini .12,5 7 7 6,25 53 3.1 110 XOO-0138 100 0 15 4’-deoksi-41-jodidauno- rubisiini 25 5 6.2 109

Doksorubisiini 25 08 12,5 16 6.2 70 X00-0163 25 0 5,5 4'-deoksi-4'-jodidokso- 6,2 16 rubisiini 1,5 91 0,39 104 a Käsittelyaika 24 tuntia 5 7041 4

Taulukko 2. Vaikutus P 3 88 askiittista leikemiaa vastaan a vhdiste Annos*3 T/Cc LTSd Toksisuus e (mgA-g) % kuolleet

Daunorubisiini 2,9 160, 165 0/10,0/10 0/10,0/10 4,4 160, 185 0/10,0/10 1/10,0/10 6.6 175, 135 0/10,0/10 7/10,7/10 X0 0-0138 4,4 140 0/10 0/10 6.6 155 1/10 0/10 10 185, 75 0/10,0/10 0/10,6/10 15 70 0/10 8/10 22.5 60 0/10 10/10

Doksorubisiini 4,4 210 0/10 0/10 6.6 260 0/10 0/10 10 265 1/10 0/10 X00-0163 6,6 240 0/10 0/10 10 305 3/10 0/10 15 >620 6/10 0/10 22.5 390 3/10 1/10 a Kokeet suoritettiin BDFl-tai CDF 1-hiirillä, joihin oli siirrosteltu 10^ leukemiasolua i.p. k Käsittely i.p. vuorokauden kuluttua kasvaimen siirrosta-misesta

Q

Käsiteltyjen hiirten keskimääräinen elossapysymisaika/ verrokkien keskimääräinen elossapysymisaika x 100 ' d Pitkän aikaa elossa pysynyt ( > 60 vrk) 6

Arvioitu autoptisten havaintojen perusteella 6 70414

Taulukko 3. Vaikutus Gross-leukemiaa vastaan a

Yhdiste Annos b T/Cc LTSd Toksisuuse (ragAg) % kuollut

Daunorubisi ini 15 191 0/8 0/8 22,5 158 0/8 . 4/8

Doksorubisiini 7,7 150 0/10 0/10 10 175 0/10 0/10 13 200 0/10 0/10 16,9 233 0/10 0/10 22 266 0A0 1/10 X00-0138 11,8 208 0/10 0/10 15,4 208 0/10 2/10 41-jodidaunoru- 20 175,117 0/8,0/10 4/8,6/10 bisiini 30 100 0/8 8/8 40 92 0/8 8/8 a C3H-hiiriin injektoitiin i.v. 2 x 106 leukemiasolua b Käsittely i.v. vuorokauden kuluttua kasvaimen siirros-tamisesta c,d,e vrt. taulukko 2

Claims (2)

1. 7 7041 4 PATENTTIVAATIMUS Analogiamenetelmö yleisen kaavan I mukaisen lääkeaineena käytettävän antrasykliiniglykosidiyhdisteen valmistamiseksi 0 9H ff il t U /C-CH F ‘C'l ''Of '"'OH I I OCH O OH ;
2. 3. U> CH3 ·,--o (· ^2 ' jossa R on vety tai hydroksiryhmä, tunnettu siitä, että kaavan II mukainen 4 *-deoksi-4'-jodo-N-trifluoroasetyylidaunorubisiini g r ? - , C-CH0 O O TY^ OCH O OH 6 .--1 (II) CH 3—.- O'· ' "1 ^ NK-C0CF3 saatetaan asetonin liuotettuna lievän alkalisen hydrolyysin kohteeksi käsittelemällä sitä 3 tunnin ajan 0 C:n lämpötilassa natriumhyd-roksidin 0,1 N vesiliuoksella, jolloin saadaan vapaata glykosidie-mästä (I; R= H ), joka lopuksi eristetään hydrokloridina ja saatetaan haluttaessa reagoimaan bromin kanssa niin, että muodostuu vastaava 14-bromojohdannainen, joka käsiteltäessä natriumformiaatin vesiliuoksella muuttuu 4’-deoksi-41-jododoksorubisiiniksi (1; R=0H), joka niinikään eristetään hydrokloridina.