CN1939346A - 蛞蝓多糖及其生产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种抗肺癌新药,它公开了该抗肺癌新药,是应用生物技术(运用分段盐析法提取蛞蝓糖蛋白;用Sevag法除去蛋白质),从危害农作物的软体动物蛞蝓全虫身上提取的一种抗肺癌的天然药物——蛞蝓多糖,而制成:胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂、滴丸剂、散剂、糖浆剂、气雾剂、水针剂、冻干粉针剂。这些蛞蝓多糖制剂,具有如下功能:①能直接有效的杀抑肺癌细胞;②没有化疗和放疗的剧烈毒性作用;③同时具有减轻肺癌病人的的主要症状:咳、痰、喘作用。不论从治疗肺癌的确切疗效到药理、药性;从研究的技术路线到生产的工艺流程,都处于国内国际先进水平。
Description
[技术领域]
本发明涉及一种抗肺癌新药,特别是拟应用生物技术从危害农作物的软体动物蛞蝓全虫身上,提取的一种抗肺癌的天然药物—“蛞蝓多糖”,及其所制成的胶囊制剂、颗粒剂、片剂、丸剂、滴丸剂、散剂、糖浆剂、气雾剂、水针剂、冻干粉针剂。
[背景技术]
1、肺癌这种恶性肿瘤已成为威胁人类健康的头号杀手
肺癌的发病率随着环境污染的加剧,近10年以来以11.90 %的速度上升。2000年全球恶性肿瘤新发病已超过1000万以上,死亡620万例,其中肺癌新发病例123.9万例,占癌症总发病例12.32%,肺癌死亡110.3万例,占总死亡人数的17.77%,均居首位。目前全球每年有150万-180万人死于肺癌,我国肺癌危害形势更为严重,按每10万人的83.43发病率计算。我国每年新发肺癌病人不下100万,每年死于肺癌者已达60万之多!上海市每年新发肺癌病例不下3500人。肺癌这种恶性肿瘤已成为威胁人类健康的头号杀手。因此,研制有效的防治肺癌的新特药,已成为国内外医药界的当务之急,重点和热点。
2、当前治疗肺癌的方法与相关药品很多,但都存在一定的局限性
如治疗肺癌传统的方法有手术切除、放射治疗和化疗(药物治疗)。但一旦经临床确诊为肺癌,80%的病人就失去了手术切除的机会:而放射治疗存在局部的限制性和射线对正常组织的损伤性;化学(药物)治疗存在普遍性细胞毒性作用及其剂量的限制性;特别对肝、肾、骨髓和消化系统毒副作用严重,大大制约了肺癌的治疗效果。新兴的介入治疗对原发灶有一定的作用,但难以对付不断散发的转移灶;现代分子靶向性(基因)治疗给肺癌患者带来曙光,但其载体构建、载体与弹头的交链及其在机体分布、代谢过程中的变化等诸多问题还在探讨之中。
3、中医中药历史悠久,但对肺癌疗效不确,尚无突破性进展
由于西医治疗手段,特别是放化疗所具有的毒副作用及适应范围的限制,中医中药在肺癌的治疗中占有了愈来愈重要的位置。随着中医药及中西医结合防治肿瘤的研究机构日益增多,投资开发或研究治疗癌症或癌症辅助治疗的中药新药也逐年增加。近20多来抗肺癌中药的临床及实验研究取得很大进展,这从中药新药申报治疗肺癌品种居多也得到证明。根据对《中文科技资料目录、中草药》1978年以来所录的抗肺癌中草药条目的分析,抗肺癌中草药的研究涉及到单体、单味药提取物、单味药和复方。既有治疗药也有辅助药。剂型包括注射液、口服剂和穴位贴敷等外用药。口服剂型涉及到冲剂、散剂、丸剂、膏剂、汤剂、口服液等多个品种。研究内容既有临床试验、动物试验,也有深入到细胞和分子水平的药物作用机理研究。
总体来说,抗肺癌中草药对单体、单味药提取物、单味药的研究比较深入,作用机理也比较透彻,复方的研究水平有待进一步提高。口服药研究较多,注射剂和外用药研究较少。所研究的单味药的提取物包括有活血作用的赤勺801、川芎嗪、丹参酮IIA、水蛭素、莪术油(榄香烯)等;具有扶正抗肿瘤作用的多糖类药物有猪苓多糖、香菇多糖、枸杞多糖、芸芝多糖、地黄多糖等;皂甙类药物有人参总皂甙、绞股蓝总皂甙、人参皂甙Rb1、Rg1、Re、Rh1、Rg3和和淫阳藿甙等;其它药物尚包括汉防己甲素、茶色素、薏苡仁酯、β-胡萝卜素、大蒜素、二去水卫茅醇、半边莲中的二萜类化合物bF及鸦胆子提取物等。由于此类药物的研究做的比较深入,机理研究也比较透彻,从中得到了一个一类新药一参胶囊和一些二类新药注射剂,如榄香烯、康莱特、鸦胆子乳、华蟾素等。这些注射剂不仅可以静脉给药,有的还可以动脉介入给药,开拓了中药治疗肺癌给药的新途径。但是,尽管现有治疗肺癌的中药层出不穷,剂型既有单味,又有单体和复方,然而包括像“康莱特注射液”这样的经美国和俄罗斯参与临床研究的现代中药,对肺癌疗效是否确切,尚无公认。本项目申请人和发明人研发的蛞蝓PE-40糖蛋白不仅对小细胞肺癌和非小细胞肺癌细胞均有直接抑制作用和对化疗药物如DDP和5-FU以及细胞因子TNF-a有增效作用,而且无任何毒副作用;总体效应优于其他中药,但由于含有蛋白质成份,存在致敏和稳定性难以质控的问题,可能在一定程度上限制了适应范围。申请该项专利,正是为了解快这一问题,就是在对肺癌有效的蛞蝓糖蛋白基础上,除去蛋白质,提取多糖,并保持药效不减,因此,此项专利是前一专利的深入和提高。其意义重大。
4、本发明前期研究工作扎实,提供了可靠的实验依据,展现了光明的市场前景
[1]汇集了“蛞蝓多糖”的药材—足襞蛞蝓生态、习性和外部形态、内部结构的研究资料;
[2]运用分段盐析法结合冷冻真空干燥法,提取了足襞蛞蝓有效成份(部位)—蛞蝓糖蛋白—再用Sevag法除去蛋白质—并初步形成了工业化生产的技术路线,为该药未来规模化生产打下了基础;
[3]制订了蛞蝓多糖提取工艺和放大生产的生产工艺流程;
[4]药效学研究成果喜人:
(1)、体外实验:运用MTT比色法和软琼脂细胞培养克隆形成法、阳性对照、重复实验,证实对肺癌细胞A549株系和NCI-H446细胞株系有确切的抑制作用。
①蛞蝓干粉浸出液对离体肺癌细胞A549的生长有明显的抑制作用;
②对人肺鳞癌传代细胞双层琼脂克隆细胞集落抑制率93.08%,与顺铂的对照组93.33%相当;对人肺腺癌细胞集落抑制率65.24%,明显优于对照组顺铂的34.77%;
③MTT法:对A549细胞的增殖具有抑制作用,且呈剂量依赖性,其IC50值为44.8μg/ml。
④软琼脂细胞培养克隆形成法显示:对A549细胞集落形成能力具有显著抑制作用,且呈剂量依赖性,其IC50值为22.5μg/ml。
⑤MTT法,对人小细胞肺癌NCI-H446细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量依赖性,其IC50值为27.3μg/ml
⑥软琼脂细胞培养克隆形成法显示:对人小细胞肺癌NCI-H446细胞集落形成能力具有明显抑制作用,且呈剂量依赖性,其IC50值为18.0μg/ml。
(2)、裸鼠实验
⑦腹腔注射给药:对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用,且呈剂量依赖性,并与5-Fu合用有协同作用。
⑧腹腔注射给药:对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用,并能增强常规化疗药DDP和细胞因子TNF-α的治疗效果。
⑨尾静脉注射给药:对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用,并能增强常规化疗药DDP和细胞因子TNF-α的治疗效果。
⑩口服给药:对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长单独使用无明显抑制作用,但中剂量的与细胞因子TNF-α中剂量合用对非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用。
(11)腹腔注射给药对人非小细胞肺癌A549细胞裸鼠移植瘤生长具有明显抑制作用,且可增强化疗药物DDP的治疗效果并减轻DDP的化疗毒性。
(3)、临床资料
用蛞蝓全虫干粉胶囊剂给肺癌自愿者治疗:3组中晚期非小细胞肺癌94例,近期疗效:有效(CR+PR)67.7%(57/94);稳定31.91%(30/94);无效6.39%(6/94),且对肺癌病人的咳嗽、咯痰、气喘和呼吸困难等症状有明显的缓解作用,并能大幅度地提高病人的生活质量,未发现毒副作用。
总之:本发明的上述实验研究成果,为实现该计划项目目标,提供了一定的科学依据和研究经验。
[发明内容]
蛞蝓抗人肺癌有效成份—蛞蝓多糖及其生产工艺。
[具体实施方案]
蛞蝓加入蒸镏水中—匀浆—离心—取上清液—加盐—调整饱合度—运用分段盐析法提取蛞蝓糖蛋白(Slug glycoprotein),低温静置过夜—离心—收集糖蛋白和多糖溶液—透析除去盐离子—离心—留上清液—继用Sevag法除去蛋白质,得到蛞蝓多糖水溶液—真空冷冻干燥—得综色蛞蝓多糖冻干粉剂—除菌保存。然后按药典规范,将蛞蝓多糖分别制成胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、散剂、气雾剂、水针剂、冻干粉针剂。
Claims (4)
1、本发明涉及的一种抗肺癌新药。是从鲜蛞蝓(或急冻保鲜蛞蝓)匀浆上清液中,运用分段盐析法提取蛞蝓糖蛋白(Slug glycoprotein),继用Sevag法除去蛋白,得到蛞蝓多糖水溶液。再经真空冷冻干燥而制成蛞蝓多糖干燥粉末。
2、本发明涉及的药材是蛞蝓。目的药物是蛞蝓多糖,及其所制成的胶囊剂;颗粒剂;片剂;丸剂、滴丸剂、散剂、糖浆剂、合剂、气雾剂、水针剂、冻干粉针剂。
3、蛞蝓多糖的作用是能有效的治疗肺癌。并能扩展本发明人不久前申请的发明专利“蛞蝓PE4糖蛋白”(申请号200510101458.7)的应用范围。
4、本发明涉及的加工工艺是:蛞蝓匀浆、抽滤、分段盐析蛋白组份,用Sevag法除去蛋白,冷冻真空干燥,制成蛞蝓多糖干粉的技术。
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