TWI741190B - 用以改善呼吸道疾病之蛹蟲草組合物 - Google Patents
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Abstract
本發明提供一種用以改善呼吸道疾病之蛹蟲草組合物,其包含有以重量百分比計為60%~95%之蛹蟲草、2%~25%之西洋蔘、及2%~25%之刺五加。其中,蟲草素佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.5%~2.0%。蟲草多醣佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於2.0%~9.0%。腺苷佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.02%~0.4%。蛹蟲草組合物係用於製作一保健食品或一藥劑。本發明藉抑制發炎細胞因子IL-1β和TNF-α的含量及減少白血球細胞的聚集,減緩了呼吸道的發炎症狀。並且本發明相較於蛹蟲草單方具有更佳的消炎能力。
Description
本發明提供一種蛹蟲草組合物,特別是一種包含有蛹蟲草、西洋蔘和刺五加,且用以改善呼吸道疾病的組合物。
蛹蟲草菌(Cordyceps militaris)為冬蟲夏草屬的模式種,是鱗翅目昆蟲蛹和幼蟲的寄生真菌。蛹蟲草菌亦可簡稱為蛹蟲草,具有與冬蟲夏草相似的化學特性。相較於冬蟲夏草,蛹蟲草之子實體較容易以人工栽培方式培養,因此經常作為冬蟲夏草之保健替代品。
近年來,空氣污染日益嚴重,人們的呼吸道系統也因此受到嚴重威脅,進而造成支氣管絨毛膜活動不正常,致使肺部痰量增加、喉嚨不適等狀況。而“中醫本草從新”一書中提到蛹蟲草具有保肺益腎之功效,因此可以推測蛹蟲草對呼吸道保護具有極大的潛力。
蛹蟲草其主要功能性成份包括蟲草多醣、蟲草素、腺苷、甘露醇、麥角固醇等。在中國專利公告號CN105410916中揭露了一種保健食品,包含有27%的蛹蟲草和其他材料,可以達到增強免疫力、調節體質的功效。然而,該案並無提到蛹蟲草對於呼吸道的保護效果。在中國專利公告號CN104257697中則揭露一種蠶蟲草組合物,具有抑制支氣管炎的效果,然而,該組合物又需額外添加精氨酸,難以稱為天然的組合物。
有鑑於此,本發明提出了一種僅使用天然中草藥成分即具有改善呼吸道疾病之效果的蛹蟲草組合物。
本發明之用以改善呼吸道疾病之蛹蟲草組合物,係包含:以重量百分比計為60%~95%之蛹蟲草、2%~25%之西洋蔘、及2%~25%之刺五加。
其中,蛹蟲草係一蛹蟲草子實體、一蛹蟲草萃取物或兩者之組合。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有蟲草素,於一具體實施例中,蟲草素佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.5%~2.0%。於不同實施應用中,蟲草素佔蛹蟲草組合物之重量百分比可分別為0.7%、1.0%和1.6%。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有蟲草多醣,於一具體實施例中,蟲草多醣佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於2.0%~9.0%。於不同實施應用中,蟲草多醣佔蛹蟲草組合物之重量百分比可分別為4.0%和6.0%。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有腺苷,於一具體實施例中,腺苷佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.02%~0.4%。於不同實施應用中,腺苷佔蛹蟲草組合物之重量百分比可分別為0.05%、0.1%、0.15%和0.2%。
於一具體實施例中,該蛹蟲草組合物係一口服劑型。其中,口服劑型係包含溶液劑、懸浮劑、滴劑、膠囊劑、錠劑、丸劑或粉劑。
於一具體實施例中,蛹蟲草組合物進一步係包含有以重量百分比計為60%~80%之蛹蟲草、10%~20%之西洋蔘、及10%~20%之刺五加。
其中,蛹蟲草組合物係用於製作一保健食品或一藥劑。
於一具體實施例中,蛹蟲草組合物進一步係一種用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物。
綜上所述,本發明之蛹蟲草組合物皆係為天然成分,但具有比單獨的蛹蟲草更佳的消炎能力,可以更有效地保護與改善呼吸道疾病,進而達到提升患者生活品質之功效。
圖1係繪示各處理組中之小鼠檢體內白血球數量之柱狀圖。
圖2係繪示各處理組中之小鼠檢體內IL-1β含量之柱狀圖。
圖3係繪示各處理組中之小鼠檢體內TNF-α含量之柱狀圖。
為了讓本發明的優點,精神與特徵可以更容易且明確地了解,後續將以實施例並參照所附圖式進行詳述與討論。值得注意的是,這些實施例僅為本發明代表性的實施例,其中所舉例的特定方法,裝置,條件,材質等並非用以限定本發明或對應的實施例。
在本說明書的描述中,參考術語“一具體實施例”的描述意指結合該實施例描述的具體特徵,結構,材料或者特點包含於本發明的至少一個實施例中。在本說明書中,對上述術語的示意性表述不一定指的是相同的實施例。而且,描述的具體特徵,結構,材料或者特點可以在任何的一個或多個實施例中以合適的方式結合。
此外,本發明裝置或元件前的不定冠詞“一”、“一種”和“一個”對裝置或元件的數量要求(即出現次數)無限制性。因此“一”應被解讀為 包括一或至少一,並且單數形式的裝置或元件也包括複數形式,除非所述數量明顯指單數形式。
本發明之用以改善呼吸道疾病之蛹蟲草組合物,係包含:以重量百分比計為60%~95%之蛹蟲草(Cordyceps militaris)、2%~25%之西洋蔘(Panax quinquefolius)、及2%~25%之刺五加(Eleutherococcus senticosus)。所述之蛹蟲草、西洋蔘及刺五加,可以為植株體之整體或部分,或為植株體乾燥壓碎後之粉末,亦可以為植株體之萃取物。於古籍中已知蛹蟲草具有潤肺之功效,現代醫學中亦確認其抗腫瘤、抗病毒、抗菌之功效。然而,僅以蛹蟲草作為單方藥劑其效果有限,而本發明提出之蛹蟲草組合物複方具有更佳之功效。本蛹蟲草組合物對呼吸道疾病之功效數據於後續實驗中敘明。
此處所述之蛹蟲草係藉由下列方式獲得:蛹蟲草生物體係來自自行篩選並經食品工業研究所菌種鑑定確認之純正蛹蟲草菌。蛹蟲草為經篩選之DL-130菌株、DL-130之分離株(包含其繼代培養之後代),或DL-130之突變株但仍具有與上述菌種相同的特性或基因體。
本發明較佳實施例之蛹蟲草萃取組合物之製備方式係先以平板方式在YMA培養基上進行培養,再進行液態種菌培養。接著,將已培養完成之蛹蟲草液態種菌接種於含有糙米或白米的瓶裝固態培養基以進行子實體培育。之後,將子實體收成保存。
再之,由於各批次蛹蟲草子實體的成分皆會存在些許差異,容易造成產品良莠不齊。本發明中之蛹蟲草組合物之製備方式,係經由萃 取、濃縮、分離、乾燥、粉碎製程獲得。其中,蛹蟲草萃取物是蛹蟲草子實體以90~105℃熱水進行萃取,再進行真空濃縮,直到水分含量低於50%的浸膏,再加入95%酒精進行分離純化,取上清液以真空方式去除酒精,並進行乾燥而獲得。另一方面,蛹蟲草子實體也進行乾燥並粉碎,而得到蛹蟲草子實體乾燥粉末。接著,依據蛹蟲草萃取物與蛹蟲草子實體乾燥粉末中蟲草素、蟲草多醣、腺苷之含量,計算達到各化合物需求之重量百分比所需的組合比例。依據此組合比例混合蛹蟲草萃取物與蛹蟲草子實體乾燥粉末即可獲得所述之蛹蟲草。因此在本說明書中所述之蛹蟲草組合物之蛹蟲草,可以係一蛹蟲草子實體、一蛹蟲草萃取物或包含有兩者之組合。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有蟲草素,於某些實施例中,蟲草素佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.5%~2.0%。於不同實施應用中,蟲草素佔蛹蟲草組合物之重量百分比係分別為0.7、1.0%、1.3%和1.6%。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有蟲草多醣,於某些實施例中,蟲草多醣佔蛹蟲草組合物之重量百分比係介於2.0%~9.0%。於不同實施應用中,蟲草多醣佔蛹蟲草組合物之重量百分比係分別為4.0%、6.0%。
蛹蟲草組合物中之蛹蟲草包含有腺苷,於某些實施例中,腺苷佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.02%~0.4%。於不同實施應用中,腺苷佔蛹蟲草組合物之重量百分比係分別為0.05、0.1%、0.15%及0.2%。
於一具體實施例中,該蛹蟲草組合物係一口服藥劑。其中,口服藥劑之劑型係包含溶液劑、懸浮劑、滴劑、膠囊劑、錠劑、丸劑或粉劑以及其他類似或適用本發明之劑型。
所述的蛹蟲草組合物中,亦可視需要酌量使用溶劑、乳化 劑、黏結劑、賦形劑、安定劑、潤滑劑、保存劑、著色劑、風味劑、香料等。
於一具體實施例中,蛹蟲草組合物進一步係包含有以重量百分比計為60%~80%之蛹蟲草、10%~20%之西洋蔘、及10%~20%之刺五加。於不同的具體實施例中,蛹蟲草組合物進一步係分別包含有以重量百分比計為65%、68%、70%、72%和75%之蛹蟲草、12%、15%和18%之西洋蔘、及12%、15%和18%之刺五加。
其中,蛹蟲草組合物係用於製作一保健食品或一藥劑。
於一具體實施例中,蛹蟲草組合物進一步係一種用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物。
本發明所提供之蛹蟲草萃取組合物及其投藥路徑,可視需求事宜調整,並未特別限定,較佳者為經口投藥方式。
為證明本發明對呼吸道疾病之功效,以下列實驗說明。
實驗方法說明:實驗中分為蛹蟲草單方膠囊處理組與蛹蟲草複方膠囊處理組。蛹蟲草單方膠囊之主要成分為重量百分比100%之蛹蟲草,蛹蟲草內含有一定比例之蛹蟲草子實體與蛹蟲草萃取物以達到有效成分之需求標準。蛹蟲草複方膠囊之主要成分為重量百分比70%之蛹蟲草(含蛹蟲草子實體及蛹蟲草萃取物)、15%之西洋參萃取物及15%之刺五加萃取物,即為依據本發明之蛹蟲草組合物而製備成的一種劑型。藉由蛹蟲草單方膠囊與蛹蟲草複方膠囊內含中草藥萃取物之不同,證明本發明之蛹蟲草、西洋蔘及刺五加組合物優於僅有蛹蟲草時的功效。
檢體製備方法:實驗中所使用之實驗動物為雄性5週大BALB/c純品系小鼠。小鼠係購自國家動物實驗中心。45隻小鼠總共分成九個處理組,分別為控制組、脂多醣(LPS)吸入組、藥物對照組、單方高劑量組、單方中劑量組、單方低劑量組、複方高劑量組、複方中劑量組和複方低劑量組。
每一組別處理差異如下表一。在控制組中,除了生理鹽水(PBS),不餵以任何藥劑。在脂多醣吸入組及後續組別中,係以針筒施以50uL的脂多醣(LPS)至小鼠氣管中。在藥物對照組中,除了脂多醣,額外再餵以抗發炎類固醇藥物Methylprednisolone 2mg/kg,亦即每公斤之小鼠餵以2mg之抗發炎藥物。此藥物及劑量為已知可有效降低發炎症狀之化合物。在單方三個組別中,除了施打脂多醣,額外再餵以不同劑量之蛹蟲草單方膠囊。在複方三個組別中,除了施打脂多醣,額外再餵以不同劑量之蛹蟲草複方膠囊。
在施以LPS及藥劑18小時後,九個處理組小鼠氣管被切開,以PBS灌洗肺部並且回收約1.2mL之肺部灌洗液。回收之肺部灌洗液收於離心管內。在4℃下以400rpm離心5min後成為下述之檢體。將檢體分別進行下述三個實驗。
實驗一、蛹蟲草單方與複方膠囊對內毒素導致小鼠肺部白血球數量的影響。
脂多醣是革蘭氏陰性細菌外膜的主要組成部分,係為一種內毒素,可引起強烈免疫反應。施以脂多醣至小鼠氣管之實驗,可以被視為生物體氣管受到細菌感染的發炎模式。此時生物體為了抵抗外來抗原,會在感染處聚集大量白血球。因此,感染處之白血球數量係為正在發生發炎症狀的重要指標之一。
在本實驗一中,首先移除檢體之上清液。以100uL之PBS將檢體沉澱物重新打散,使沉澱物均勻懸浮於離心管內。以台盼蘭(trypan blue)染色細胞後進行白血球細胞計數。結果如下表二及圖1所示。圖1係繪示各處理組中之小鼠檢體內白血球數量之柱狀圖。
從表二及圖1中可以發現,對小鼠氣管施以脂多醣後,小鼠肺部之白血球顯著的高於控制組。蛹蟲草單方膠囊雖能降低白血球數量,但其中的中劑量組並未達到顯著差異(信心水準99%),表示單方膠囊的效果並非十分穩定。蛹蟲草複方膠囊能降低白血球數量,且相較於單方膠囊有更劇烈地降低白血球平均數量的功效。蛹蟲草複方膠囊的三種劑量都達到顯著差異,也表現出更穩定的白血球降低能力。因此可以得知,本發明之蛹蟲草複方膠囊相較於單方膠囊,更能減緩生物體呼吸道受到細菌感染時發生的發炎症狀。
實驗二、蛹蟲草單方與複方膠囊對內毒素導致小鼠內白介素-1β(IL-1β)含量的影響。
IL-1β不僅可以影響細胞存活,還是在發炎反應中扮演重要的角色。當細胞受到脂多醣刺激時,會提升IL-1β含量,進而促進下游的發炎相關基因大量表現,加重發炎症狀。因此,IL-1β可做為發炎症狀的指標之一。
首先於此實驗二中,檢體之上清液被提取出來後,加至IL-1β ELISA試劑組之抗體盤(antibody coated 96-well),經過ELISA assay之標準流程後以ELISA reader分析各處理組檢體上清液之吸光值,換算出IL-1β的含
量。結果如下表三及圖2所示。圖2係繪示各處理組中之小鼠檢體內IL-1β含量之柱狀圖。
從表三及圖2中可以看到,對小鼠施以脂多醣後,檢體內IL-1β含量會顯著的上升。雖然小鼠經過蛹蟲草單方膠囊的處理均可以降低其IL-1β數值,但是在低劑量時並無達到顯著差異。蛹蟲草複方膠囊能降低IL-1β數值,且相較於單方低劑量膠囊,複方低劑量更能明顯地降低平均IL-1β含量。複方三種劑量都達到顯著差異,也表現出更穩定的降低IL-1β能力。因此可以得知,本發明之蛹蟲草複方膠囊相較於單方膠囊,更能減緩生物體呼吸道受到細菌感染時發生的發炎症狀。
實驗三、蛹蟲草單方與複方膠囊對內毒素導致小鼠內腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量的影響。
TNF-α與IL-1β同樣為細胞因子的一種。TNF-α的主要作用是調節免疫細胞的功能。作為一種內源性致熱源,它能夠促使發熱,引起細胞凋亡並導致發炎症狀。因此TNF-α也是發炎症狀的指標之一。
首先,檢體之上清液被提取出來後,加至TNF-α ELISA試劑組之antibody coated 96-well,經過ELISA assay之標準流程後以ELISA reader分析各處理組檢體上清液之吸光值,換算出TNF-α的含量。結果如下表四及圖3所示。圖3係繪示各處理組中之小鼠檢體內TNF-α含量之柱狀圖。
從表四及圖3中可以看到,對小鼠施以脂多醣後,檢體內TNF-α含量會顯著的上升。蛹蟲草單方膠囊的處理可以降低TNF-α數值,但是在低劑量時並無達到顯著差異。蛹蟲草複方膠囊能降低TNF-α數值,且相較於單方低劑量膠囊,複方低劑量具有更劇烈的平均數值變化,甚至遠低於藥物對照組。且複方之三種劑量處理都達到顯著差異,也表現出更穩定的降低TNF-α能力。因此可以得知,本發明之蛹蟲草複方膠囊相較於單方膠 囊,更能減緩生物體呼吸道受到細菌感染時發生的發炎症狀。
實驗四、蛹蟲草單方與複方膠囊對小鼠肝臟之毒性測驗。
為了解兩種蛹蟲草膠囊大劑量服用是否具有顯著急毒性,因而加做小鼠餵食急毒性測試。
在本實驗中將蛹蟲草單方及蛹蟲草複方以1g藥物/kg小鼠之劑量餵食小鼠。48小時後,從小鼠心臟採血進行ALT和AST酵素活性分析。一般而言,小鼠的血液生化門檻數值為ALT:53.30±3.57(IU/L)及AST:104.94±20.14(IU/L)(國家實驗動物中心,2008)。ALT指數和AST指數超過此門檻值時,表示小鼠肝功能異常,可能為藥物中毒。
實驗結果如下表五所示。
從表五中可以看出,以1g/kg之蛹蟲草單方及複方劑量餵食小鼠後,其AST及ALT活性指數皆低於標準指數。可以推知,先前實驗中使用之低劑量(0.17g/kg)、中劑量(0.34g/kg)和高劑量(0.52g/kg)其對小鼠肝臟毒性更低。
在古籍中並未記載刺五加具有保護肺部之功效。甚至,在“得 配本草”一書中提到,肺氣虛者禁用刺五加。肺氣虛通常為慢性肺部疾病造成,因此中醫對於呼吸道疾病,通常不用刺五加作為處方。在本發明之研究中曾進行了蛹蟲草與多種中藥材之搭配調和,結果發現加入了西洋蔘和刺五加的蛹蟲草組合物效果最佳。本發明中利用刺五加作為組合物之一成分,達成無法預期之功效。
藉由上述之實驗中證明,蛹蟲草單方具有減緩小鼠呼吸道被LPS(內毒素)誘導發生的發炎症狀之能力。然而,組合蛹蟲草、西洋蔘與刺五加的複方,則具有更佳的保護功能。實驗顯示蛹蟲草組合物藉著抑制發炎細胞因子IL-1β和TNF-α的含量減緩呼吸道的發炎症狀。故本發明之蛹蟲草組合物具有改善呼吸道疾病的能力,尤其是內毒素引起之呼吸器官發炎病理。
綜上所述,本發明之蛹蟲草組合物皆係為天然成分,但具有比蛹蟲草單方更佳的消炎能力。本發明可以更有效地保護與改善呼吸道疾病,進而達到提升患者生活品質之功效。
藉由以上較佳具體實施例之詳述,係希望能更加清楚描述本發明之特徵與精神,而並非以上述所揭露的較佳具體實施例來對本發明之範疇加以限制。相反地,其目的是希望能涵蓋各種改變及具相等性的安排於本發明所欲申請之專利範圍的範疇內。因此,本發明所申請之專利範圍的範疇應該根據上述的說明作最寬廣的解釋,以致使其涵蓋所有可能的改變以及具相等性的安排。
國內寄存資訊
寄存機構:財團法人食品工業發展研究所
日期:民國107年3月31日
編號:BCRC 930195
Claims (9)
- 一種用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,係包含:以重量百分比計為60%~95%之蛹蟲草(Cordyceps militaris)、2%~25%之西洋蔘(Panax quinquefolius)、及2%~25%之刺五加。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該蛹蟲草係一蛹蟲草子實體、一蛹蟲草萃取物或兩者之組合。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該蛹蟲草包含有蟲草素,且該蟲草素佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.5%~2.0%。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該蛹蟲草包含有蟲草多醣,且該蟲草多醣佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於2.0%~9.0%。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該蛹蟲草包含有腺苷,且該腺苷佔該蛹蟲草組合物之重量百分比係介於0.02%~0.4%。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該蛹蟲草組合物係一口服劑型。
- 如申請專利範圍第6項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,其中該口服劑型係包含溶液劑、懸浮劑、滴劑、膠囊劑、錠劑、丸劑或粉劑。
- 如申請專利範圍第1項所述之用以改善呼吸道因內毒素引起之病理狀況之蛹蟲草組合物,進一步係包含有以重量百分比計為60%~80%之蛹蟲草、10%~20%之西洋蔘、及10%~20%之刺五加。
- 一種如請求項1所述之蛹蟲草組合物用於製備改善呼吸道疾病之藥物的用途,其中該呼吸道疾病係指因內毒素引起之病理狀況。
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