CN1904023B - 一种保健葡萄饮品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种保健葡萄饮品，特点在于在以葡萄为主要原料的饮品中添加有效量的B族维生素。本发明还提供了该饮品应用于保护心脑血管功能或预防心脑血管疾病，其中具有保护心脑血管功能优先是指以葡萄为主要原料的饮品和B族维生素可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗动脉粥样硬化，延缓靶器官损害，从而有利于消费者的健康，给消费者提供更多更好的选择。
Description
技术领域
本发明涉及一种保健葡萄饮品的配方及其在制备饮品中的应用。
背景技术
葡萄酒是选用优质新鲜葡萄经过压榨或用葡萄干经过发酵而制成的酒类饮料，酒精含量在8％～20％，味甘甜醇美，营养丰富并能防治多种疾病，盛行于法国，在欧美和世界各地流行。我国明朝李时珍在《本草纲目》上记载：“葡萄酒暖腰肾驻颜色。”《饮膳服食谱》上记载：“葡萄酒运气行滞使百脉流畅。”《古今图书集成》内记载：“葡萄酒主治胃阴不足、纳食不佳、肌肤粗糙、容颜无华。”这说明葡萄酒有消除疲劳，促进血液循环，增进食欲，帮助消化和美容等作用。
现代医学家、化学家、营养学家经过科学分析、临床研究，认为葡萄酒有它独特的营养价值，长期适量饮用，可防治贫血，软化血管，改善循环，防病养颜。葡萄酒中除含有一定量的水分和酒精外，还含有酯类、糖类、鞣酸、果胶、芳香油、蛋白质、多种矿物质、多种维生素、多种氨基酸，特别富含维生素P、C等。以营养成分居中的桃红葡萄酒为例，每100克中约含水分85克以上，含酒精12.1克(容量为15％)，热量为355.9千焦，蛋白质0.1克，钙31毫克，磷6毫克，铁0.3毫克，镁6毫克，锰0.06毫克，锌0.15毫克，硒0.2微克，含有10多种人体所必需的氨基酸，以及0.2～0.7克的乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸等有机酸。所含维生素有维生素B1、B2、B6、维生素P、泛酸、叶酸、烟酸和生物素等。另外，对国产红葡萄酒进行检测，发现白黎芦醇含量平均为0.3451mg/L(0.05951～0.81445mg/L)(朱明元，等.实用预防医学.2004；11(2)：389-390)。
葡萄酒中含有的非酒精成分“白黎芦醇”，具有降低胆固醇和甘油三酯的作用。葡萄酒内含有黄酮等多酚类物质，可改善血液循环。美国心脏病学家证明每天饮200毫升红葡萄酒能降低血小板聚集和血浆粘度，使血栓不易形成，因而可预防冠心病的发生。肥胖者轻中度的饮用红葡萄酒可使血同型半胱氨酸水平降低(Dixon JB，Dixon ME，O′BrienPE.Eur JClinNutr，2002；56(7)：608～14)。红葡萄酒中的儿茶素、槲皮(黄)素、白藜芦醇可能通过一些间接机制预防动脉粥样硬化的发生(Auger C，Teissedre PL，GerainP，etal.JAgric FoodChem，2005；53(6)：2015～21)。饮用红葡萄酒2周可以明显减弱2型糖尿病患者的胰岛素抵抗，但并没有影响血管反应性和一氧化氮的生成(NapoliR，Cozzolino D，Guardasole V，et al.Metabolism，2005；54(3)：306～13)。有规律摄入无酒精的葡萄酒可以预防膳食诱导的高胆固醇血症及动脉血栓的形成，其机制可能与血小板的功能下调有关(De Curtis A，Murzilli S，Di Castelnuovo A，et al.J Thromb Haemost，2005；3(2)：346-50)。
心血管疾病愈来愈严重地威胁着现代人类健康，越来越多的人们在注重改善生活方式的同时，更加注重科学饮食。酒类方面，人们逐渐倾向于选择保健酒。在为数不多的保健酒品种中，红葡萄酒为多数人首选。然而，世界卫生组织认为葡萄酒饮用量每天不超过50～100毫升；并且来自欧洲的两项研究对葡萄酒的保健功能提出了质疑。在瑞典的一项研究发现，摄入葡萄酒可能独立的与女性冠心病患者心率变异性有关，而对于酒精饮料或啤酒，没有上述发现(Janszky I，Ericson M，Blom M，et al.Heart，2005；91(3)：314～8)。在丹麦一项对69名38～74岁健康受试者研究中发现，与加或不加红葡萄提取液的饮水受试者相比，适量摄入红葡萄酒4周，其HDL-C和纤维蛋白原水平的改善作用均出现显著的差异。提示红葡萄酒较其他酒精饮料强的保护心血管功能可能是由于生活方式的混杂，而非红葡萄酒中的非酒精成分(Hansen AS，Marckmann P，Dragsted LO，et al.Eur J Clin Nutr，2005；59(3)：449-55)。因此，在提倡科学、文明饮食的现代，开发更具确切保健作用的葡萄酒饮品具有极大的公共卫生学意义和广阔的市场前景。
有关保健葡萄酒的相关专利公开情况如下：
专利公开号为1587365的中国专利公开了一种芹菜葡萄酒，其特征在于：它包括以下原料制成：解百纳60g～80g，芹菜提取液25g～40g。
专利公开号为1587364的中国专利公开了一种洋葱葡萄酒，其特征在于：它包括以下原料制成：解百纳60g～80g，洋葱提取液25g～40g。
专利公开号为1298938的中国专利公开了一种保健葡萄酒，其特点是将荷叶、枸杞子、罗汉果、山楂、甘草、玉竹、决明子、白芥子、绞股蓝、芦根、葛花、桑椹、女贞子制得保健液，然后与葡萄酒按一定比例混合搅匀，再经杀菌、澄清、分装即制得所需的产品。
专利公开号为1362509的中国专利公开的保健葡萄酒是采用：葡萄汁、灵芝、人参、桂皮、鹿茸、枸杞、牛鞭、黄连、甘草为主要原料配制而成。
专利公开号为1295124的中国专利公开了一种保健葡萄酒，其特点是将熟地黄、枸杞子、杜仲、当归、荷叶、麦冬、葡萄干、龙眼肉、红枣肉、桃仁制得保健液，然后与葡萄酒按一定比例混合搅匀，再经杀菌、澄清、分装即制得所需的产品。
专利公开号为1232082的中国专利公开了一种降脂保健葡萄酒及其制备方法。其特征在于每100公斤降脂保健葡萄酒含相当生药材量(重量百分比)灵芝0.5-50％，枸杞0.5-5％，大枣0.5-5％，甘草0.1-2％，橙皮0.1-1％，全汁葡萄酒30-60％，甜味剂小于15％，酸味剂0.1-1％，食用白酒及水适量，调整酒度低于25度。
虽然现有上述这些保健葡萄酒专利，但转化为产品的较少，在市场上，仍然缺乏真正有益于消费者健康或被消费者喜爱的保健葡萄酒品种。
发明内容
因此，本发明的目的是，克服现有葡萄酒品种存在的上述不足，提供一种具有较强心脑血管保护功能的保健葡萄酒。
为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种保健葡萄饮品，特点在于在以葡萄为主要原料的饮品中添加有效量的B族维生素。
所述的葡萄提取物来源于红葡萄、紫红葡萄或白葡萄中的一种，优先为红葡萄或紫红葡萄。
所述的B族维生素选自维生素B6、维生素B12、叶酸或甲酰四氢叶酸钙中的一种或几种。每升饮品中维生素B6的含量为50～500mg、维生素B12的含量为2.5～20mg、叶酸或甲酰四氢叶酸钙的含量为2～50mg。
所述的饮品进一步还包含其他活性成分，该活性成分选自矿物质、维生素、活性氨基酸、活性碳水化合物、活性蛋白质、活性植物化学物、多不饱和脂肪酸中的一种或几种。
饮品种类为酒类饮料、水饮料、果汁饮料和酸奶类饮料中的一种；其中饮品种类中酒类饮料优先为葡萄酒。
本发明提供了上述饮品应用于保护心脑血管功能或预防心脑血管疾病；其中所述的保护心脑血管功能优先是指以葡萄为主要原料的饮品和B族维生素可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗动脉粥样硬化，延缓靶器官损害；其中所述的心脑血管疾病是指高血压、高血脂、高血糖、动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗塞、心绞痛、脑卒中、短暂性缺血发作、糖尿病和周围血管疾病中的一种或几种。
本发明还提供一种应用于保护心脑血管内皮细胞功能的饮品，其特点在于在以葡萄为主要原料的饮品中添加有效量的B族维生素；其中每升保健葡萄饮品中B族维生素的含量为2～500mg，所述的饮品优先为葡萄酒。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种饮品，该饮品可以提高现有葡萄饮品尤其是现有葡萄酒的保健功能，其中以葡萄为主要原料的饮品和B族维生素可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗动脉粥样硬化，延缓靶器官损害，从而有利于消费者的健康，给消费者提供更多更好的选择。
下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明，并非对本发明的限定，凡依照本发明内容进行的任何本领域的等同替换，均属于本发明的保护范围。
具体实施方式
实施例1.含有叶酸的葡萄酒的制备
将筛选的鲜葡萄破碎、去梗，取葡萄浆备用；采用活性干酵母菌种，活化培养后接种到上述葡萄浆中；在25～30℃的温度下进行前期酒精发酵，5～10天后分离皮渣；进入后期发酵，当残糖低于4～5g/L时，停止发酵，密封储存；取储存的发酵酒上清液，调节pH值后接入活性干乳酸菌，在18～20℃的温度下进行苹果酸—乳酸发酵，10～20天后调整酒汁中游离二氧化硫浓度，过滤，净化，即得葡萄原酒；将葡萄原酒在橡木桶中储存；取储存的葡萄原酒，加入一定量叶酸，使叶酸浓度为2mg/L，并进行勾兑；然后在—4～5℃的温度下进行7～15天的冷冻处理；五道过滤、酒石分离、除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例2.含有叶酸的葡萄酒的制备
将筛选的鲜葡萄破碎、去梗，取葡萄浆备用；采用活性干酵母菌种，活化培养后接种到上述葡萄浆中；在25～30℃的温度下进行前期酒精发酵，5～10天后分离皮渣；进入后期发酵，当残糖低于4～5g/L时，停止发酵，密封储存；取储存的发酵酒上清液，调节pH值后接入活性干乳酸菌，在18～20℃的温度下进行苹果酸—乳酸发酵，10～20天后调整酒汁中游离二氧化硫浓度，过滤，净化，即得葡萄原酒；将葡萄原酒在橡木桶中储存；取储存的葡萄原酒，加入一定量叶酸，使叶酸浓度为50mg/L，并进行勾兑；然后在—4～5℃的温度下进行7～15天的冷冻处理；五道过滤、酒石分离、除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例3.含有叶酸的葡萄酒的制备
将筛选的鲜葡萄破碎、去梗，取葡萄浆备用；采用活性干酵母菌种，活化培养后接种到上述葡萄浆中；在25～30℃的温度下进行前期酒精发酵，5～10天后分离皮渣；进入后期发酵，当残糖低于4～5g/L时，停止发酵，密封储存；取储存的发酵酒上清液，调节pH值后接入活性干乳酸菌，在18～20℃的温度下进行苹果酸—乳酸发酵，10～20天后调整酒汁中游离二氧化硫浓度，过滤，净化，即得葡萄原酒；将葡萄原酒在橡木桶中储存；取储存的葡萄原酒，加入一定量叶酸，使叶酸浓度为20mg/L，并进行勾兑；然后在—4～5℃的温度下进行7～15天的冷冻处理；五道过滤、酒石分离、除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例4.含有甲酰四氢叶酸钙的葡萄酒的制备
按照传统工艺制备葡萄酒，加入甲酰四氢叶酸钙，使甲酰四氢叶酸钙浓度为10mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例5.含有叶酸、维生素B6的葡萄酒的制备
按照传统工艺制备葡萄酒，加入叶酸和维生素B6，使叶酸的浓度为25mg/L，维生素B6的浓度为50mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例6.含有叶酸、维生素B12的葡萄酒的制备
按照传统工艺制备葡萄酒，加入叶酸和维生素B12，使叶酸的浓度为10mg/L，维生素B12的浓度为5mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例7.含有叶酸、维生素B12、维生素B6的葡萄酒的制备
按照传统工艺制备葡萄酒，加入叶酸、维生素B12和维生素B6，使叶酸的浓度为10mg/L，维生素B12的浓度为2.5mg/L，维生素B6的浓度为500mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例8.含有甲酰四氢叶酸钙、维生素B12、维生素B6的葡萄酒的制备
按照传统工艺制备葡萄酒，加入甲酰四氢叶酸钙、维生素B12和维生素B6，使甲酰四氢叶酸钙的浓度为10mg/L，维生素B12的浓度为20mg/L，维生素B6的浓度为200mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例9.含有叶酸的葡萄汁饮料的制备
将筛选的鲜葡萄清洗、破碎、去梗，然后放入榨汁机内榨汁，过滤除渣后，放入均质机内均质，在鲜果汁中加入适量的砂糖和食用酸，脱气去油，经巴氏杀菌后制得原汁。加入叶酸，使叶酸的浓度为10mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例10.含有叶酸、维生素B6的葡萄汁饮料的制备
按照传统工艺制备葡萄汁饮料，加入叶酸和维生素B6，使叶酸的浓度为2mg/L，维生素B6的浓度为50mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例11.含有叶酸、维生素B12、维生素B6的葡萄汁饮料的制备
按照传统工艺制备葡萄汁饮料，加入叶酸、维生素B12和维生素B6，使叶酸的浓度为2mg/L，维生素B12的浓度为2.5mg/L，维生素B6的浓度为50mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例12.含有叶酸、维生素B12、维生素B6的葡萄汁饮料的制备
按照传统工艺制备葡萄汁饮料，加入叶酸、维生素B12和维生素B6，使叶酸的浓度为50mg/L，维生素B12的浓度为20mg/L，维生素B6的浓度为500mg/L，勾兑混匀，除菌过滤、精滤，而后装瓶即得。
实施例13.葡萄酒+叶酸对高脂血症大鼠血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
体重150～200g SD大鼠，饲喂高脂饲料(配方为：胆固醇0.5％，丙基硫氧嘧啶0.2％，胆酸钠0.2％，猪油5.0％，基础饲料94.1％)，另取30只正常大鼠作为正常对照组，正常对照组大鼠饲喂普通饲料。6周后，采血测血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将大鼠分为模型组、葡萄酒组(10ml/kg)、叶酸组(0.5mg/kg)、葡萄酒+叶酸组(10ml/kg+0.5mg/kg)，每组40只，分别灌胃，容量为1ml/100g，每日1次，连续6个月，6个月后取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、内皮素(ET)和一氧化氮(NO)水平，处死大鼠后，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组大鼠血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组大鼠血清CHO、LDL降低，HDL升高，其中葡萄酒+叶酸组的效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表1。
表1葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高脂血症大鼠血清血脂的影响(x±s)
与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
模型组大鼠血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组相比有显著性差异。葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组大鼠血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+叶酸组的效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表2。
与正常组相比，模型组大鼠血清ET水平明显升高、NO降低；与模型组相比，葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组大鼠血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+叶酸组效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表3。
肉眼观察，模型组及各处理组大鼠主动脉壁附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的大鼠仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的大鼠其脂质则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组大鼠主动脉壁斑块形成最严重；叶酸组和葡萄酒组次之；葡萄酒+叶酸组病变较轻；而正常对照组大鼠主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+叶酸组的大鼠主动脉壁斑块面积低于叶酸组和葡萄酒组。见表3。
综上所述：葡萄酒与叶酸长期合用对高脂血症大鼠，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
表2葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高脂血症大鼠血清SOD、MDA、
血小板聚集率的影响(x±s)
与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
表3葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高脂血症大鼠血清ET、NO、动脉粥样硬化斑块的影响(x±s)
与正组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
实施例14.葡萄酒+叶酸对高脂血症家兔血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
80只健康雄性新西兰大耳白兔(体重1.8～2.2kg)，饲喂高脂饲料(含97.75％基础饲料、0.25％胆固醇、2.0％猪油)，另取10只正常家兔作为正常对照组，正常对照组家兔饲喂普通饲料。4周后，采血测血清CHO、TG、HDL、LDL。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将家兔分为模型组、葡萄酒组(5ml/kg)、叶酸组(0.1mg/kg)、葡萄酒+叶酸组(5ml/kg+0.1mg/kg)，每组20只，分别灌胃，容量为5ml/kg，每日1次，连续13周，取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清SOD、MDA、ET和NO水平，乙醚麻醉，颈动脉放血处死动物，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组家兔血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组家兔血清CHO、LDL降低，HDL升高。其中葡萄酒+叶酸组效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表4。
表4葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高血脂家兔血脂的影响(x±s)
与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
模型组家兔血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组相比有显著性差异。葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组家兔血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+叶酸组的效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表5。
与正常组相比，模型组家兔血清ET水平升高、NO降低；与模型组相比，葡萄酒组、叶酸组、葡萄酒+叶酸组家兔血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+叶酸组效果优于葡萄酒或叶酸单用组。见表6。
肉眼观察，模型组及各处理组家兔主动脉壁均附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的家兔仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的家兔其脂质累积则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，可至胸主动脉、腹主动脉及其分叉处，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组家兔主动脉壁斑块形成最严重；叶酸组和葡萄酒组次之；葡萄酒+叶酸组病变较轻；而正常对照组家兔主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+叶酸组的家兔主动脉壁斑块面积低于叶酸组和葡萄酒组，见表6。
综上所述：葡萄酒与叶酸长期合用对高脂血症家兔，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
表5葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高脂血症家兔血清SOD、MDA、血小板聚集率的影响(x±s)
与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
表6葡萄酒+叶酸连续灌胃6个月对高脂血症家兔血清ET、NO、动脉粥样硬化斑块的影响(x±s)
与正常组比较，##P<0.01；与模型组比较：**P<0.01；与葡萄酒组比较，▲P<0.05
实施例15.葡萄酒+叶酸+维生素B6对高脂血症大鼠血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
体重150～200g SD大鼠，饲喂高脂饲料(配方同实施例13)，另取30只正常大鼠作为正常对照组，正常对照组大鼠饲喂普通饲料。6周后，采血测血清CHO、TG、HDL、LDL。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将大鼠分为模型组、葡萄酒组(10ml/kg)、叶酸+维生素B6组(0.2mg/kg+1.0mg/kg)、葡萄酒+叶酸+维生素B6组(10ml/kg+0.2mg/kg+1.0mg/kg)，每组40只，分别灌胃，容量为1ml/100g，每日1次，连续6个月，6个月后取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清SOD、MDA、ET和NO水平，处死大鼠后，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组大鼠血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、叶酸+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B6组大鼠血清CHO、LDL降低，HDL升高，其中葡萄酒+叶酸+维生素B6组效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B6组。
模型组大鼠血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组相比有显著性差异。葡萄酒组、叶酸+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B6组大鼠血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+叶酸+维生素B6组的效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B6组。
与正常组相比，模型组血清ET水平明显升高、NO明显降低；与模型组相比，葡萄酒组、叶酸+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B6组血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+叶酸+维生素B6组效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B6组。
肉眼观察，模型组及各处理组大鼠主动脉壁附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的大鼠仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的大鼠其脂质则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组大鼠主动脉壁斑块形成最严重；叶酸+维生素B6组和葡萄酒组次之；葡萄酒+叶酸+维生素B6组病变较轻；而正常对照组大鼠主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+叶酸+维生素B6组的大鼠主动脉壁斑块面积％均值低于叶酸+维生素B6组和葡萄酒组。
综上所述：葡萄酒与叶酸+维生素B6长期合用对高脂血症大鼠，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
实施例16.葡萄酒+叶酸+维生素B12对高脂血症大鼠血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
体重150～200g SD大鼠，饲喂高脂饲料(配方同实施例13)，另取30只正常大鼠作为正常对照组，正常对照组大鼠饲喂普通饲料。6周后，采血测血清CHO、TG、HDL、LDL。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将大鼠分为模型组、葡萄酒组(10ml/kg)、叶酸+维生素B12组(0.1+0.1mg/kg)、葡萄酒+叶酸+维生素B12组(10ml/kg+0.1+0.1mg/kg)，每组40只，分别灌胃，容量为1ml/100g，每日1次，连续6个月，6个月后取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清SOD、MDA、ET和NO水平，处死大鼠后，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组大鼠血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、叶酸+维生素B12组、葡萄酒+叶酸+维生素B12组大鼠血清CHO、LDL降低，HDL升高，其中葡萄酒+叶酸+维生素B12组效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12组。
模型组大鼠血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组相比有显著性差异。葡萄酒组、叶酸+维生素B12组、葡萄酒+叶酸+维生素B12组大鼠血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+叶酸+维生素B12组的效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12组。
与正常组相比，模型组血清ET水平明显升高、NO明显降低；与模型组相比，葡萄酒组、叶酸+维生素B12组、葡萄酒+叶酸+维生素B12组血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+叶酸+维生素B12组效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12组。
肉眼观察，模型组及各处理组大鼠主动脉壁附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的大鼠仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的大鼠其脂质则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组大鼠主动脉壁斑块形成最严重；叶酸+维生素B12组和葡萄酒组次之；葡萄酒+叶酸+维生素B12组病变较轻；而正常对照组大鼠主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+叶酸+维生素B12组的大鼠主动脉壁斑块面积低于叶酸+维生素B12组和葡萄酒组。
综上所述：葡萄酒与叶酸+维生素B12长期合用对高脂血症大鼠，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
实施例17.葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6对高脂血症家兔血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
80只健康雄性新西兰大耳白兔(体重1.8～2.2kg)，饲喂高脂饲料(同实施例14)，另取10只正常家兔作为正常对照组，正常对照组家兔饲喂普通饲料。4周后，采血测血清CHO、TG、HDL、LDL。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将家兔分为模型组、葡萄酒组(5ml/kg)、叶酸+维生素B12+维生素B6组(0.1+0.1+1mg/kg)、葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组(5ml/kg+0.1+0.1+1mg/kg)，每组20只，分别灌胃，容量为5ml/kg，每日1次，连续13周，取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清SOD、MDA、ET和NO水平，乙醚麻醉，颈动脉放血处死动物，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组家兔血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、叶酸+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组家兔血清CHO、LDL降低，HDL升高，其中葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组其效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12+维生素B6组。
模型组家兔血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组家兔相比有显著性差异。葡萄酒组、叶酸+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组家兔血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组的效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12+维生素B6组。
与正常组相比，模型组家兔血清ET水平升高、NO降低；与模型组相比，葡萄酒组、叶酸+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组家兔血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组效果优于葡萄酒或叶酸+维生素B12+维生素B6组。
肉眼观察，模型组及各处理组家兔主动脉壁均附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的家兔仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的家兔其脂质累积则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，可至胸主动脉、腹主动脉及其分叉处，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组家兔主动脉壁斑块形成最严重；叶酸+维生素B12+维生素B6组和葡萄酒组次之；葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组病变较轻；而正常对照组家兔主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+叶酸+维生素B12+维生素B6组的家兔主动脉壁斑块面积低于叶酸+维生素B12+维生素B6组和葡萄酒组。
综上所述：葡萄酒与叶酸+维生素B12+维生素B6长期合用对高脂血症大鼠，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
实施例18.葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6对高脂血症家兔血脂、血小板聚集、动脉粥样硬化等的影响
80只健康雄性新西兰大耳白兔(体重1.8～2.2kg)，饲喂高脂饲料(同实施例14)，另取10只正常家兔作为正常对照组，正常对照组家兔饲喂普通饲料。4周后，采血测血清CHO、TG、HDL、LDL。根据血脂水平(主要为CHO、LDL)将家兔分为模型组、葡萄酒组(5ml/kg)、甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组(0.1+0.1+1mg/kg)、葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组(5ml/kg+0.1+0.1+1mg/kg)，每组20只，分别灌胃，容量为5ml/kg，每日1次，连续13周，取血测定HDL、LDL、CHO、TG，血小板聚集率，血清SOD、MDA、ET和NO水平，乙醚麻醉，颈动脉放血处死动物，采集主动脉样本，用图像分析法检测主动脉脂质斑块面积。
结果：模型组家兔血清CHO、LDL、TG升高，HDL降低，与正常组相比有显著性差异，葡萄酒组、甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组家兔血清CHO、LDL降低，HDL升高。其中葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组其效果优于葡萄酒或甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组。
模型组家兔血清MDA升高，SOD降低，血小板聚集率增加，与正常组相比有显著性差异。葡萄酒组、甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组家兔血清MDA降低，SOD升高，血小板聚集率降低，其中葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组的效果优于葡萄酒或甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组。
与正常组相比，模型组家兔血清ET水平升高、NO降低；与模型组相比，葡萄酒组、甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组、葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组家兔血清ET水平降低、NO升高；葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组效果优于葡萄酒或甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组。
肉眼观察，模型组及各处理组家兔主动脉壁均附着有不同程度的淡黄色脂质斑块，病变较轻的家兔仅在升主动脉或主动脉弓处可见脂质斑块，并呈灶状分布；病变较重的家兔其脂质累积则从升主动脉、主动脉弓处弥漫性向下延伸，可至胸主动脉、腹主动脉及其分叉处，呈条索状或不规则小片状分布，突出于内膜表面；模型组家兔主动脉壁斑块形成最严重；甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组和葡萄酒组次之；葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组病变较轻；而正常对照组家兔主动脉壁光滑无斑块，呈灰白色。
显微镜下典型主动脉脂质斑块结构可见内皮细胞受损，炎性细胞浸润，泡沫细胞聚集，细胞坏死，纤维母细胞增生和平滑肌细胞增殖。各组病变程度与肉眼观察基本一致。
葡萄酒+甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组的家兔主动脉壁斑块面积低于甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6组和葡萄酒组。
综上所述：葡萄酒与甲酰四氢叶酸钙+维生素B12+维生素B6长期合用对高脂血症大鼠，可以协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗AS，延缓靶器官损害。
Claims (5)
1.一种葡萄酒，特点在于葡萄酒中添加有效量的叶酸或甲酰四氢叶酸钙，其中每升葡萄酒中叶酸或甲酰四氢叶酸钙的含量为2～50mg。
2.根据权利要求1所述的葡萄酒，其特征在于其制备方法是将筛选的鲜葡萄破碎、去梗，取葡萄浆备用；采用活性干酵母菌种，活化培养后接到葡萄浆中；在25～30℃温度下进行前期酒精发酵，5～10天后分离皮渣；进入后期发酵，当残糖低于4～5g/L时，停止发酵，密封储存；取储存的发酵酒上清液，调节PH值后接入活性干乳酸菌，在18～20℃温度下进行苹果酸-乳酸发酵，10～20天后调整酒汁中游离二氧化硫浓度，过滤，净化，即得葡萄原酒；将葡萄原酒在橡木桶中储存；取储存的葡萄原酒，加入一定量叶酸，使叶酸浓度为2mg/L、20mg/L或50mg/L，并进行勾兑；在-4～5℃温度下进行7～15天的冷冻处理；五道过滤、酒石分离、除菌过滤、精滤。
3.权利要求1所述的葡萄酒应用于保护心脑血管功能或预防心脑血管疾病。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的保护心脑血管功能是协同调节血脂、抗脂质过氧化、抑制血小板聚集、保护血管内皮细胞，改善血管顺应性，降低动脉粥样硬化斑块形成，协同抗动脉粥样硬化，延缓靶器官损害。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的心脑血管疾病是高血压、高血脂、动脉粥样硬化、冠心病、心肌梗塞、心绞痛、脑卒中、短暂性缺血发作和周围血管疾病中的一种或几种。
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