CN1876677A - 新型lhrh拮抗剂,其制备方法和药物用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及包含N－甲基化的氨基酸组分以及水溶性改善的肽。根据本发明，含有所述肽的药物可用于治疗激素－依赖性肿瘤和受激素影响的非恶性疾病状态。

Description

新型LHRH拮抗剂，其制备方法和药物用途
本发明是申请日为2001年3月12日的中国专利申请01807543.6的分案申请，原申请的发明名称为“新型LHRH拮抗剂，其制备方法和药物用途”。
本发明涉及溶解性改善的LHRH拮抗剂，制备这些化合物的方法，含有这些化合物的药物，以及所述药物用于治疗激素-依赖性肿瘤和受激素影响的非恶性病症如良性前列腺增生(BPH)和子宫内膜异位的用途。
用于定义肽的命名法与由IUPAC-IUB生物化学命名委员会释义的命名法(欧洲生物化学杂志(European J.Biochem).1984，138，9-37)一致，其中，与常规表示方法一致，N端的氨基在左，C端的羧基在右。LH-RH拮抗剂如本发明的肽包括天然的和合成的氨基酸，前者包括Ala，Val，Leu，Ile，Ser，Thr，Lys，Arg，Asp，Asn，Glu，Gln，Cys，Met，Phe，Tyr，Pro，Trp和His。每个氨基酸残基的缩写基于所述氨基酸的常用名并且Ala＝丙氨酸，Arg＝精氨酸，Gly＝甘氨酸，Leu＝亮氨酸，Lys＝赖氨酸，Pal(3)＝3-(3-吡啶基)丙氨酸，Nal(2)＝3-(2-萘基)丙氨酸，Phe＝苯丙氨酸，Cpa＝4-氯苯丙氨酸，Pro＝脯氨酸，Ser＝丝氨酸，Thr＝苏氨酸，Trp＝色氨酸，Tyr＝酪氨酸和Sar＝肌氨酸。如果不另指的话，本文记载的全部氨基酸来源于L系列。例如D-Nal(2)是3-(2-萘基)-D-丙氨酸的缩写以及Ser是L-丝氨酸的缩写。如果缩写形式合适的话，赖氨酸侧链中的ε氨基上发生的取代通过置于Lys后面括号内的一个术语来表示。
使用的其它缩写是：
Ac   乙酰基
B    4-(4-脒基苯基)氨基-1，4-二氧代丁基
Boc  叔丁氧羰基
Bop  苯并三唑-1-氧-三(二甲氨基)-磷六氟磷酸盐
DCC  二环己基碳二亚胺
DCM  二氯甲烷
Ddz  二甲氧苯基-二甲基亚甲氧基-羰基(二甲氧基-二甲基-Z)
DIC    二异丙基碳二亚胺
DIPEA  N，N-二异丙基乙胺
DMF    二甲基甲酰胺
Fmoc   芴基甲氧羰基
HF     氢氟酸
HOBt   1-羟基苯并三唑
HPLC   高压液相色谱
Me     甲基
TFA    三氟乙酸
Z      苄氧羰基。
本发明的肽是黄体生成素释放激素(LH-RH)的类似物，其具有以下结构：p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2，[LH-RH，促性腺素释放激素]。
二十多年来，研究人员已经寻找到LH-RH十肽的有效选择性拮抗剂[M.Karten和J.E.Rivier，内分泌综述(Endocrine Reviews)7，44-66(1986)]。这类拮抗剂的最大意义基于它们在内分泌学、妇科学、避孕和癌症方面的用途。已经制备了多种作为LH-RH有效拮抗剂的化合物。迄今为止发现的最有意义的化合物是那些具有修饰LH-RH结构的化合物。
第一系列有效拮抗剂通过将芳香氨基酸残基引入位点1、2、3和6或2、3和6来获得。书写所述化合物的常规方式如下所述：首先标明置换了LH-RH肽链中天然存在的氨基酸的氨基酸，以上角标数字标记发生交换的位点。并且，通地置于后面的符号“LH-RH”表示这些是发生了交换的LH-RH类似物。
已知的拮抗剂是：
[Ac-D-Cpa1，2，D-Trp3，6]LH-RH(D.H.Coy等，Gross，E.和Meienhofer，J.(编辑)，肽(Peptides)；第六次美国肽论坛会议汇编(Proceedings of the 6th American Peptide Symposium)，775-779，Pierce Chem.Co.，Rockville III.(1979)；
[Ac-Pro1，D-Cpa2，D-Nal(2)3，6]LH-RH(美国专利4,419,347)和[Ac-Pro1，D-Cpa2，D-Trp3，6]LH-RH(J.L.Pineda，等，临床内分泌代谢杂志(J.Clin.Endocrinol.Metab).56，420，1983)。
为了提高拮抗剂的作用效果，碱性氨基酸，如D-Arg后来被引入位点6。例如，[Ac-D-Cpa1，2，D-Trp3，D-Arg6，D-Ala10]LH-RH(ORG-30276)(D.H.Coy，等，内分泌学(Endocrinology)100，1445，1982)；和[Ac-D-Nal(2)1，D-Phe(4-F)2，D-Trp3，D-Arg6]LH-RH(ORF 18260)(J.E.Rivier等，Vickery B.H.Nestor，Jr.J.J.，Hafez，E.S.E(编辑).LHRH及其类似物(LHRH and its Analogs)，11-22页，MTP出版社，Lancaster，UK 1984)。
其它有效的LH-RH拮抗剂被记载在WO 92/19651，WO 94/19370，WO92/17025，WO 94/14841，WO 94/13313，US-A 5,300,492，US-A 5,140,009，EP 0 413 209 A1和DE 195 44 212 A1中。
后者公开了在位点6上具有经修饰的鸟氨酸或赖氨酸单位并且对应下式的化合物：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Xxx6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2，其中D-Xxx是一个通式(VI)的氨基酸基团
其它已知的H-RH-拮抗剂是安雷利克斯，加尼瑞克和西曲瑞克。
安雷利克斯(INN：Teverelix)：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
加尼瑞克：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-hArg(Et)2 6-Leu7-hArg(Et)2 8-Pro9-D-Ala10-NH2
西曲瑞克：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-Tyr5-D-Cit6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2。
本发明的目的在于制备对酶稳定性提高以及水溶性显著提高的新型LH-RH-拮抗剂。
所述目的通过下面的通式(I)化合物实现：
A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2(I)
其中
A      是一个乙酰基，
Xxx1  是D-Nal(2)，
Xxx2  是D-Cpa，
Xxx3  是D-Pal(3)，
Xxx4  是Ser，
Xxx5  是N-Me-Tyr，
Xxx6  是D-Cit，D-Hci或D-[·-N’-4-(4-脒基苯基)-氨基-1，4-二氧代丁基]-Lys(缩写：D-Lys(B))，
Xxx7   是Leu或Nle，
Xxx8   是Arg或Lys(iPr)，
Xxx9   是Pro而
Xxx10  是D-Ala或Sar
条件是
如果Xxx6是D-Lys(B)，则Xxx7是Nle，
如果Xxx6是D-Cit，则Xxx7是Nle且Xxx10是D-Ala，或
如果Xxx6是D-Hci，则Xxx7是Leu且Xxx10是D-Ala，
以及它们与药用酸形成的盐，特别是乙酸盐、扑酸盐和三氟乙酸盐。
根据本发明的另一方面，下列化合物及其与药用酸形成的盐是特别优选的：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Sar10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Phe(4-Cl)2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Cit6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Cit6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
根据本发明的另一方面，本发明的化合物以乙酸盐、三氟乙酸盐或扑酸盐的形式存在。
根据本发明的另一方面，本发明的化合物可以被用作药物或药物制剂。
根据本发明的另一方面，提供了含有至少一种本发明的化合物以及常规载体和赋形剂的药物制剂。
根据本发明的另一方面，提供了一种制备本发明通式I化合物的方法，其中按照常规方法在固相上或溶液中合成来源于具有适当保护基的Xxxm单元的片段，其中m是1至10的整数并且Xxx1被乙酰化，然后通过节段偶联将所述片段结合到固相上，并且完成偶联后，通过对Xxx10单元进行酰胺化用常规方法将通式I化合物从所述固相上除下。
根据本发明的另一方面，提供了本发明化合物用于生产治疗激素-依赖性肿瘤，特别是前列腺癌或乳腺癌以及用于其治疗需要LH-RH激素抑制的非恶性适应征的药物的用途。
根据本发明的另一方面，提供了一种生产药物制剂的方法，其中权利要求1至10之一所述的至少一种化合物与常规载体和赋形剂混合从而配制成一种药剂。
根据本发明的另一方面，提供了一种通过施用有效剂量的本发明的至少一种化合物来治疗激素-依赖性肿瘤，特别是前列腺癌、乳腺癌或子宫肌瘤以及其治疗需要LH-RH激素抑制的非恶性适应征如子宫内膜异位、良性前列腺增生(BPH)以及治疗哺乳动物中，特别是人类中雌性或雄性生育障碍的方法。
本发明的化合物可被用于治疗激素-依赖性肿瘤，特别是前列腺癌、乳腺癌或子宫肌瘤，还可被用于其治疗需要LH-RH激素抑制的非恶性适应征如子宫内膜异位、良性前列腺增生(BPH)。而且，它们可被用于治疗男性或女性的生育障碍。例如用于体外受精过程中的受控的卵巢过度刺激。为此，它们通常与常规载体和赋形剂混合并且按照本身已知的方法被制成药物。
通式(I)化合物的合成可以通过经典的片段缩合法或Merrifield的固相合成法来进行，通过利用侧链中已经乙酰化的D-赖氨酸与通式R1-COOH的羧酸一个接一个地进行合成或者通过D-赖氨酸6侧链中的酰胺键使十肽单元与适当的羧酸发生反应来进行合成。因此，在所述过程中R1-CO-基团的引入可以在三种不同的情况下进行：每个单元缩合生成肽之前，肽链中引入赖氨酸或鸟氨酸之后，但在下一个单元的缩合之前，或在所有单元缩合之后。
通式(I)化合物按照已知方法来合成，例如通过纯固相技术，部分固相技术(所谓的片段缩合)或通过经典的溶液偶联技术(参见M.Bodanszky，″肽合成原理(Principles of Peptide Synthesis)″，Springer Verlag 1984)。
例如，所述固相合成方法被记载在教科书″固相肽合成(Solid PhasePeptide Synthesis)″J.M.Stewart和J.D.Young，Pierce Chem.Company，Rockford，III，1984，和G.Barany和R.B.Merrifield″肽(The Peptides)″，第1章，1-285页，1979，Academic Press Inc中。经典溶液合成方法的处理被详细记载在″有机化学方法，肽的合成(Methoden der Organischen Chemie (Houben Weyl)，Synthese vonPeptiden)″E.Wünsch(编辑)1974，Georg Thieme Verlag，Stuttgart，FRG中。
按照以下步骤进行分步合成，例如首先将α-氨基被保护的羧基端氨基酸与通常用于此目的不溶性载体进行共价键合，除去该氨基酸的α-氨基保护基团，将由此得到的游离氨基基团通过下一个氨基酸的羧基基团键合到该下一个被保护的氨基酸，并且以这种方法将所要合成肽的常规氨基酸一步一步地按照正确的序列连接起来，连接了所有的氨基酸后，从所述载体上取下合成好的肽并且除去任何其它可能存在的侧链功能保护基团。以常规方式从相应的、常规被保护的氨基酸合成来进行分步缩合。
每个氨基酸的相互连接是按照用于此目的常规方法来进行的；特别适合的方法是：
●在有二环己基碳二亚胺或二异丙基碳二亚胺(DCC，DIC)存在的条件下的对称酸酐法
●常规的碳二亚胺方法
●碳二亚胺/羟基苯并三唑方法
(参见肽(The Peptides)，第2卷，编辑E.Gross和J.Meienhofer)。
在片段偶联方法中，优选使用偶联过程中不发生外消旋化的氮化物偶联方法或DCC-1-羟基苯并三唑或DCC-3-羟基-4-氧-3，4-二氢-1，2，3-苯并三嗪-方法。还可利用片段的活化酯。
N-端被保护的氨基酸的酯，如N-羟基琥珀酰亚胺酯或2，4，5-三氯苯基酯特别适合于氨基酸的分步缩合。具有大约乙酸酸度的N-羟基化合物如1-羟基苯并三唑能有效催化氨基分解。
本身存在的中间氨基保护基团是通过氢化作用而被除去的基团，如苄氧羰基(＝Z基)或可以被弱酸除去的基团。对于α-氨基的合适保护基团是，例如叔丁氧羰基、芴基甲氧羰基、苄氧羰基或苄硫羰基(carbobenzothio)(如果合适，每个例子具有对-溴-[原文如此]或对-硝基苄基)、三氟乙酰基、邻苯二酰基、邻-硝基苯氧乙酰基、三苯甲基、对-甲苯磺酰基、苯甲基、苯环上发生取代的苯甲基(对-溴-或对-硝基苄基)和α-苯乙基。这里可以参见P.Greenstein和Milton Winitz，氨基酸化学(Chemistry of Amino Acids)，纽约，1961，John Wiley andSons，Inc.，第2卷，例如883页起之各页，″肽合成原理(Principlesof Peptide Synthesis)″，Springer Verlag 1984，″固相肽合成方法(Solid Phase Peptide Synthesis)″J.M.Stewart和J.D.Young，Pierce化学公司，Rockford，III，1984，G.Barany和R.B.Merrifield″肽(The Peptides)″，第1章，1-285页，1979，Academic Press Inc.还有“肽(The Peptides)”，第2卷，编辑E.Gross和J.Maienhofer，Academic Press，纽约。这些保护基团基本上也适合于所述相应氨基酸的其它功能侧基(OH-基，NH2-基)的保护。
存在的羟基(丝氨酸，苏氨酸)优选用苄基及类似基团来保护。非α-位点的其它氨基(例如ω-位点上的氨基、精氨酸的胍基)优选进行正交保护。
除被R1-CO基团修饰的赖氨酸[空白]外，每个氨基酸单元均可以通过商业途径获得。
制备被R1-CO基团修饰的赖氨酸的方法的可能途径如下所述：
1.对α-羧酸基团进行适当的保护，例如通过酯化反应。
2.对ε-氨基进行适当的保护，例如用Z基团。
3.对α-氨基以这样一种方式进行保护(例如Boc-基团)以使相对于后来去除氨基保护基团的步骤产生选择性。
4.除去ε-氨基上的Z基团。
5.将需要的基团R1-CO-引入到ε-氨基上。
6.除去α-氨基上的保护基团。
7.任选对α-氨基进行可逆衍生，例如利用Z基团。
对于通过将赖氨酸的氨基与适当的羧酸或羧酸衍生物发生反应来引入R1-CO-基团，合适的方法基本与上述氨基酸的键合相同。然而，特别优选利用碳二亚胺例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺，和1-羟基苯并三唑进行的缩合反应。
所述氨基酸的键合反应在通常用于此目的的惰性溶剂或悬浮剂(例如二氯甲烷)中进行，如果需要，可加入二甲基甲酰胺以提高溶解度。
合适的合成载体是不溶性聚合物，例如珠子形式的聚苯乙烯树脂，该树脂在有机溶剂(例如一种聚苯乙烯和1％的二乙烯基苯的共聚物)中可以溶胀。可以按照下面的流程图在甲基二苯甲基胺树脂(MBHA树脂，即具有甲基二苯甲基胺基团的聚苯乙烯树脂)上合成被保护的十肽酰胺，在从所述载体上经HF裂解下来后，所述树脂提供了所需的肽C-端酰胺官能基团：
流程图
利用Boc-保护的氨基酸合成肽的方案
  阶段   操作   溶剂/试剂(v/v)   时间
1 冲洗 甲醇 2×2分钟
  2   冲洗   DCM   3×3分钟
  3   去除   DCM/TFA(1∶1)   1×30分钟
  4   冲洗   异丙醇   2×2分钟
  5   冲洗   甲醇   2×2分钟
  6   冲洗   DCM   2×3分钟
  7   中和   DCM/DIPEA(9∶1)   3×5分钟
  8   冲洗   甲醇   2×2分钟
  9   冲洗   DCM   3×3分钟
  10   停止   加入在DCM+DIC+HOBt中的Boc-As
  11   偶联   DCM，任选DCM/DCF   大约90分钟
  12   冲洗   甲醇   3×2分钟
  13   冲洗   DCM   2×3分钟
在CH2CI2/DMF中有二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-羟基苯并三唑(HOBt)存在的条件下经过90分钟，Nα-Boc-保护的氨基酸通常以三倍的摩尔过量发生偶联，并且在CH2Cl2中通过50％的三氟乙酸(TFA)作用半小时来去除Boc-保护基团。可采用Christensen的氯醌试验和Kaiser的茚三酮试验核实转化是否完全。通过在CH2Cl2以五倍过量的乙酰基咪唑进行乙酰化来封闭游离的氨基功能基团。在树脂上合成肽的反应步骤顺序按照流程图进行。为了去除与树脂结合的肽，将固相合成的各最终产物在真空中利用P2O5进行干燥并在0℃下用500倍过量的HF/苯甲醚10∶1/v∶v处理60分钟。
在真空中蒸馏HF和苯甲醚以后，在搅拌条件下采用无水乙醚进行冲洗来获得白色固体形式的肽酰胺，通过采用50％浓度的乙酸水溶液进行冲洗来除去附带获得的聚合物载体。通过在真空中小心浓缩所述的乙酸溶液，可以获得各种高粘度的油状肽，这些肽在冷却条件下通过加入无水醚而被转化成白色固体。
通过制备型高压液相色谱(HPLC)的常规方法进行进一步纯化。
通过与酸反应，所述肽能够以本身已知的方式转化为它们的酸加成盐。相反，可以通过其酸加成盐与碱反应来获得游离肽。肽扑酸盐可以通过所述肽的三氟乙酸盐(TFA盐)与游离扑酸或扑酸的相应的二钠盐反应来制得。为了此目的，在水溶液中用扑酸二钠盐在极性非质子介质，优选二甲基乙酰胺中的溶液处理所述的肽TFA盐，并分离出所形成的淡黄色沉淀物。
下列实施例用来说明本发明，但不限制本发明。
实施例1(D-68968)：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Arg8-Pro9-Sar10-NH2
在装填密度为0.55mmol/g的聚合物载体(氨甲基-取代的树脂，Fmoc保护，D-1675型，Bachem)上合成十肽。将赖氨酸偶联成Fmoc-D-Lys(Boc)-OH并利用20％的哌啶/DMF除去Fmoc保护基团。在同时除去所有侧链保护基团并从聚合物载体上脱离下来后，利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽。冻干后，得到98.5％浓度的十肽。
利用在DMF中的PyBop并加入DIPEA用4-(4-氨基苯基)氨基-1，4-二氧代丁酸在D-赖氨酸的·-氮上进行取代。利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽。通过冻干得到约99％浓度经验化学式为C82H106ClN19O15的产物(三氟乙酸盐)，该产物具有正确的FAB-MS 1633(M+H)(计算值1631.78096)。
实施例2(D-68969)：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
在装填密度为0.55mmol/g的聚合物载体(氨甲基-取代的树脂，Fmoc保护，D-1675型，Bachem)上合成十肽。将赖氨酸偶联成Fmoc-D-Lys(Boc)-OH并利用20％的哌啶/DMF除去Fmoc保护基团。在同时除去所有侧链保护基团并从聚合物载体上脱离下来后，分离出的约71％(HPLC)含量的粗肽不经纯化就进行进一步的反应。
利用在DMF中的PyBop并加入DIPEA用4-(4-氨基苯基)氨基-1，4-二氧代丁酸取代D-赖氨酸的侧链。利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽。冻干后，获得98.8％浓度经验化学式为C82H106ClN19O15的产物(三氟乙酸盐)，该产物具有正确的FAB-MS 1633(M+H)(计算值1631.78096)。
实施例3(D-68971)：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-Sar10-NH2
在装填密度为0.55mmol/g的聚合物载体(氨甲基-取代的树脂，Fmoc保护，D-1675型，Bachem)上合成十肽。将赖氨酸偶联成Fmoc-D-Lys(Boc)-OH并利用20％的哌啶/DMF除去Fmoc保护基团。在同时除去所有侧链保护基团和从聚合物载体上脱离下来后，利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽(含量约为59％，HPLC)。冻干后，得到95％浓度的十肽。
利用在DMF中的PyBop并加入DIPEA用4-(4-氨基苯基)氨基-1，4-二氧代丁酸取代D-赖氨酸的侧链。利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽。冻干后，获得96.6％浓度的产物(三氟乙酸盐)，该产物的经验化学式为C85H112ClN17O15，具有正确FAB-MS 1648(M+H)(计算值1645.8218)。
实施例4(D-68987)：
Ac-D-Nal(2)1-D-Phe(4-Cl)2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Lys(B)6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
在9.09g装填密度为0.55mmol/g的聚合物载体上合成D-Lys-6-未被取代的十肽，将赖氨酸6偶联成Fmoc-D-Lys(Boc)-OH。
从树脂上脱离后，分离到8.15g的粗肽。利用制备型HPLC纯化粗肽。利用在DMF中的PyBop并加入DIPEA用4-(4-氨基苯基)氨基-1，4-二氧代丁酸取代D-赖氨酸的侧链。利用制备型HPLC纯化被分离出的粗肽。冻干后，获得94.6％浓度的产物(三氟乙酸盐)，该产物的经验化学式为C85H112ClN17O15，具有相应FAB-MS 1646.8(M+H；计算值：1645.82)。
实施例5：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Cit6-Nle7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
实施例6：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Arg8-Pro9-D-Ala10-NH2
实施例7：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Cit6-Nle7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
实施例8：
Ac-D-Nal(2)1-D-Cpa2-D-Pal(3)3-Ser4-N-Me-Tyr5-D-Hci6-Leu7-Lys(iPr)8-Pro9-D-Ala10-NH2
制备实施例5至8中的肽的通用操作步骤：
利用Merrifield固相合成法(SPPS)[原文如此]和在溶液中经典片段缩合方法制备十肽。出于经济原因，优选利用聚合物载体合成肽序列的方法并且原则上可选择性地按照(1)Boc或(2)Fmoc方案进行合成；相应地，在每种情况下，甲基二苯甲基胺树脂(用于1)或Fmoc-2，4-二甲氧基-4’-(羧甲基氧)二苯甲基胺树脂(用于2)可以被用于D-丙氨酸的C-端键合。
固相合成，Merrifield方法：
采用5克装填密度约0.55mmol/g、粒积为200-400目的聚合物载体Fmoc-2，4-二甲氧基-4’-(羧甲基氧)二苯甲基胺树脂，Bachem D1675，在用于固相合成的标准反应条件下根据Fmoc方案合成十肽(流程图，表I)。
按照下列流程图利用N·-Fmoc-保护的氨基酸，在树脂上分步合成所述序列：
表I：
  步骤   操作   溶剂   时间   重复次数
  1   冲洗   DMF   2分钟   2x
  2   去除   在DMF中的20％哌啶   5分钟   2x
  3   冲洗   DMF   2分钟   2x
  4   冲洗   异丙醇   2分钟   1x
  5   冲洗   DMF   2分钟   2x
  6   冲洗   异丙醇   2分钟   1x
  7   冲洗   DMF   2分钟   2x
  8   偶联   Boc-AS-OH，HOBT，DIC在DMF中   90分钟   1x
  9   冲洗   DMF   2分钟   1x
  10   冲洗   异丙醇   2分钟   1x
  1l   冲洗   DMF   2分钟   1x
  12   冲洗   异丙醇   2分钟   lx
  13   冲洗   DMF   2分钟   1x
  14   冲洗   异丙醇   2分钟   1x
  15   检测   氯琨颜色试验*
(*按照T.Christensen，Acta Chem.Scand.B33，763-766，1979)
按照上述流程图进行固相合成十肽的方法-典型的(重复性的)反应参数：
-利用在DMF中的20％哌啶，在RT下处理2×5分钟来去除Fmoc保护基团(步骤2)。
-在有羟基苯并三唑(HOBt)存在的条件下，将各三倍摩尔过量的Fmoc-氨基酸与二异丙基碳二亚胺(DIC)进行偶联(步骤8)。
-从聚合物载体进行C-端去除包括利用三氟乙酸(TFA)去除氨基酸侧链保护基团。
从聚合物载体上除下后，如果采用5克的树脂，则形成约5-6克的含量为约70-80％所需成分的粗肽混合物；该成分通过后续的制备型HPLC色谱回收。
十肽的制备型HPLC纯化；色谱法条件：
制备型HPLC，Shimadzu，Dynamax柱RPl8，12μm 300？L＝250mmID＝41.4mm
设有时间程序的梯度系统，40％B·90％B，50分钟
洗脱液A：970ml的H2O+30ml的CH3CN+1ml的CF3COOH
洗脱液B：300ml的H2O+700ml的CH3CN+1ml的CF3COOH
UV-检测，·＝220nm，流速60ml/分钟
将收集到的级分在真空中浓缩并冷冻干燥。所形成的十肽为无色物质。
通过离子交换层析进行双分解从而成为药物开发所需的乙酸盐形式。
生物学作用的研究：
研究本发明式I化合物与受体的结合。研究基本按照Beckers等，欧洲生物化学杂志(Eur.J.Biochem).231，535-543(1995)中记载的方法进行。将利用上述合成法获得的西曲瑞克通过利用IodoGen试剂(Pierce)用[125I](Amersham；比活度为80.5Bq/fmol)碘化。通过反相高效液相色谱纯化所述的反应混合物，获得了不含未标记肽的一碘化西曲瑞克。对于每种情况，约80％的[125I]-西曲瑞克和本发明的未标记的化合物适于与特异性受体结合。
利用下列方法1和2检测本发明化合物的体外作用，采用[125I]-西曲瑞克测定在结合鉴定法中的结合亲合力(方法1)和以曲普瑞林作为激动剂刺激来测定其功能活性(方法2)。
方法1(利用西曲瑞克的例子测定KD)：
受体结合鉴定法按照Beckers，T.，Marheineke，K.，Reilnder，H.，Hilgard P.(1995)″对稳定超表达针对促性腺素释放激素(GnRH)的人脑垂体受体的哺乳动物细胞系的选择和表征(Selection andcharacterization of mammalian cell lines with stableoverexpression of human pituitary receptors for gonadoliberin(GnRH))″欧洲生物化学杂志(Eur.J.Biochem).231，535-543所述。
为了研究受体的结合，利用IodoGen-试剂(Pierce)和[125I](Amersham；80.5Bq/fmol的比活度)来对西曲瑞克进行碘化处理。利用具有交换相的高效液相色谱纯化所述的反应混合物，获得了不合未标记肽的一碘化西曲瑞克。约80％的[125I]-西曲瑞克能够与特异性受体结合。
在已有记载(Beckers等，1995)的生理学条件下利用完整细胞进行受体结合试验。通过在NaCl/Pi(137mM NaCl，2.7mM KCl，8.1mM Na2HPO4，11.47mM KH2PO4)/1mM EDTA中进行培养来分离表达人LHRH受体的稳定转染的LTK-细胞的分会合培养物，并通过离心进行收集。将细胞沉淀物重悬于结合缓冲液(不含H2CO3，含有4.5g/l的葡萄糖，10mM Hepes pH7.5，0.5％(质量/体积)BSA，1g/l杆菌肽，0.1g/l SBTI，0.1％(质量/体积)NaN3的DMEM)中。对于置换试验，将约225pM的[125I]-西曲瑞克(比活度为5-10×105dpm/pmol)以及各种浓度的未标记的本发明化合物作为竞争剂与0.25×106细胞/100μl进行温育。将在100μl结合介质中的细胞悬液在400μl分析试管中对200μl 84％体积百分比的硅油(Merck 550型)/16％体积百分比的石蜡油进行分层。在37℃下缓慢连续振荡培养1小时后，以9000rpm离心(转子型号HTA13.8；Heraeus Sepatec，Osterode/德国)2分钟将细胞从培养基中分离出来。切下含有细胞沉淀物的试管尖端。通过计数γ辐射来分析细胞沉淀物和上清。测得的非特异性结合物质的量终浓度为1μM包括未被标记的西曲瑞克并通常≤10％的总结合物。利用EBDA/配体-分析程序(Biosoft V3.0)进行结合数据的分析。
西曲瑞克具有170pmol/L(pM)的KD值(独立进行的实验次数：21)。
方法2(功能试验测定拮抗活性(IC50值))：
按照Beckers，T.，Reilnder，H.，Hilgard，P.(1997)″基于一种敏感细胞荧光素酶报道基因分析对促性腺激素释放激素类似物的表征(Characterization of gonadotropin-releasing hormone analogs basedon a sensitive cellular luciferase reporter gene assay)″，分析生物化学(Analyt.Biochem).251，17-23(Beckers等.1997)中所述，并作如下改进进行试验分析。在微量滴定板中利用含有添加剂和1％(v∶v)FCSi的DMEM将表达人LHRH受体和一种荧光素酶报道基因的细胞以每孔10000个细胞培养24小时。然后用1nM[D-Trp6]LHRH对所述细胞刺激6小时。刺激之前加入本发明的拮抗化合物，并且为了定量分析细胞的Luc活性而最终将所述细胞溶解。利用Hill模型通过非线性回归分析方法(C.Grunwald的程序EDX 2.0，Arzneimittelwerk Dresden)由剂量-效应曲线计算IC50值。
利用各个荧光素酶分析系统(Promega E4030)基本上按照(Promega技术公告(Promega Technical Bulletins)#101/161)所述，一式两份进行Luc-活性的定量分析。由于加入了辅酶A(CoA)，荧光素-CoA发生具有有利动力学参数的氧化反应。将培养基从微量滴定板中去除后，通过加入100μl的溶胞缓冲液(25mM Tris-磷酸盐pH7.8，2mM二硫苏糖醇，2mM 1，2-二氨基环己烷-N，N，N’，N’-四乙酸(CDTA)，10％(v∶v)甘油，1％(v∶v)Triton X-100)来将细胞溶解。室温下温育15分钟后，将10μl的溶胞产物转移到一个适于发光检测的白色微量滴定板(Dynatech)中。通过加入50μl的分析缓冲液(20mM麦黄酮(tricine)pH7.8，1.07mM(MgCO3)4Mg(OH)2，2.67mM MgSO4，0.1mM乙二胺四乙酸(EDTA)，33.3mM二硫苏糖醇，270uM辅酶A，470μM萤火虫(Photinus pyralis)荧光素，530μM rATPNa2)来启动酶促反应。1分钟后，使用EG & GBerthold MicroLumat LB 96P以5分钟的信号半衰期测定整整1秒钟的发光。
本发明化合物的物理化学和体外数据列于表2中。IC50代表功能活性而pM表示pmol/L。水中溶解度按照注释2)所述的方法来测定：
表2：
  化合物   水中溶解度2[mg/ml]   IC50[pM]
  西曲瑞克   0.002   198(5)1
  实施例1(D-68968)   1.03   1300(1)1
  实施例2(D-68969)   1.11   1400(1)1
  实施例3(D-68971)   1.36   4700(1)1
  实施例4(D-68987)   1.18   700(1)1
注释：
1)括号内的数字表示互相独立的实验次数
2)水中溶解度按照下述方法进行测定：
根据官方公报中记载的方法在林格液中的溶解度：
为了按照官方公报中记载的方法测定溶解度，将过量的测试物质与惰性载体物质如沙子混合后装入一根玻璃柱(容积约10ml)中。预先将一脱脂棉筛和一个玻璃纤维滤器插入到柱底部。将所述物质-沙子混合物在1.0ml要测定在其中溶解度的溶剂中溶胀1小时。然后将10ml的所述溶剂注入所述的玻璃柱中。利用蠕动泵对所述溶液进行再循环。在室温下(约20℃)进行测定。当连续流出的级分的质量浓度恒定时确定所述溶解度。
利用下述HPLC方法测定质量浓度[原文如此]
HPLC方法：
设备
HPLC-体系：Hewlett Packard 1100；检测器：HewlettPackard DAD 1100系列
柱：柱材料：Nucleosil 120-3 C18
    颗粒大小：3μm
    柱大小：125×4mm
    生产商：Macherey & Nagel
设备参数：注入体积：15μl
流速：1.0ml/min
炉温：45℃
波长：226nm
终止时间：15分钟
55％流动相A：混合970ml的Milli-Q-H20，30ml的乙腈和1ml的三氟乙酸。产生的pH是约1.9。
45％流动相B：混合300ml的Milli-Q-H20，700ml的乙腈和1ml的三氟乙酸。产生的pH是约1.8。
本发明的化合物能以适合于肽活性化合物的不同形式来进行用药。合适的用药方法对于本技术领域的技术人员来说是已知的。例如可以通过注射的方式来进行给药。例如可以通过非肠道的方式来进行给药。本发明中皮下(s.c.)，肌内(i.m.)，静脉内(i.v.)，口腔(例如舌下)或直肠用药是优选的。I.s.和i.m.给药是特别优选的。
本发明的化合物适于制备成不同的用药剂型，例如制备成冻干产物、溶液或悬浮液。合适的用药剂型及其制备方法对于本技术领域的技术人员来说是已知的。合适的赋形剂和填充剂是，例如己糖醇如甘露糖醇，特别是D-甘露糖醇、L-甘露糖醇或D，L-甘露糖醇，山梨醇如D-山梨醇，D-或L-阿卓糖醇，艾杜糖醇，葡萄糖醇和半乳糖醇。按照本身已知的方法，例如通过混合、悬浮或冻干来进行制备。
例A：用于制备s.c.注射液的冻干产物
1mg实施例1的化合物(相当于0.26-0.27mg的乙酸盐)；0-16.9重量份的D-甘露糖醇，优选0.1-7重量份(各基于实施例1)，和注射用水(由所述冻干产物制备注射液)。
制备：将1.62g的实施例1的化合物溶解在30％浓度的乙酸(约1.5升的注射用水和91.17g的乙酸)中。用1.5升的水稀释所述溶液。在无菌条件下，加入82.2g的甘露糖醇，通过无菌滤器分装到无菌的2ml注射小瓶中并进行冻干。获得了1mg实施例1的化合物的冻干产物。
本发明的化合物适合用于，例如治疗恶性或非恶性激素-依赖性病症，如治疗乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜异位、子宫肌瘤、良性前列腺增生(BPH)以及在治疗男性或女性的生育障碍方面，例如用于防止接受受控卵巢刺激、随后取出卵细胞以及助生殖技术的患者发生过早排卵。所述治疗可在哺乳动物，特别是人中进行。

Claims (14)

1.通式(I)的化合物及其与药用酸形成的盐，
A-Xxx1-Xxx2-Xxx3-Xxx4-Xxx5-Xxx6-Xxx7-Xxx8-Xxx9-Xxx10-NH2(I)，
其中
A   是一个乙酰基，
Xxx1是D-Nal(2)，
Xxx2是D-Cpa，
Xxx3是D-Pal(3)，
Xxx4是Ser，
Xxx5是N-Me-Tyr，
Xxx6是D-Cit或D-[·-N′-4-(4-脒基苯基)-氨基-1，4-二氧代丁基]Lys，其缩写为D-Lys(B)，
Xxx7是Leu或Nle，
Xxx8是Arg或Lys(iPr)，
Xxx9是Pro而
Xxx10是D-Ala或Sar，
条件是
如果Xxx6是D-Lys(B)，则Xxx7是Nle，或
如果Xxx6是D-Cit，则Xxx7是Nle而Xxx10是D-Ala。
2.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Cpa-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Lys(B)-Nle-Arg-Pro-Sar-NH2。
3.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Cpa-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Lys(B)-Nle-Arg-Pro-D-Ala-NH2。
4.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Cpa-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Lys(B)-Nle-Lys(iPr)-Pro-Sar-NH2。
5.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Phe(4-Cl)-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Lys(B)-Nle-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH2。
6.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Cpa-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Cit-Nle-Arg-Pro-D-Ala-NH2。
7.如权利要求1所述的化合物或其与药用酸形成的盐，所述化合物具有下式：Ac-D-Nal(2)-D-Cpa-D-Pal(3)-Ser-N-Me-Tyr-D-Cit-Nle-Lys(iPr)-Pro-D-Ala-NH2。
8.如权利要求1至7任一项所述的化合物，其中所述盐是乙酸盐、三氟乙酸盐或扑酸盐。
9.药物制剂，其包含至少一种权利要求1至8任一项所述的化合物以及常规载体和赋形剂。
10.制备权利要求1的通式(I)化合物以及权利要求2至8任一项所述的化合物的方法，其中通过常规方法在固相上或溶液中合成来源于具有适当保护基团的Xxxm单元的片段，其中m是1至10的整数并且Xxx1被乙酰化，然后通过节段偶联将所述片段结合到固相上并且完成偶联后，通过对Xxx10单元进行酰胺化用常规方法将通式I化合物从所述固相上除下。
11.如权利要求1至8所述的化合物用于生产治疗激素-依赖性肿瘤或其治疗需要LH-RH激素抑制的非恶性适应征或治疗哺乳动物雌性或雄性生育障碍的药物的用途。
12.权利要求11的用途，其中所述的激素-依赖性肿瘤为前列腺癌、乳腺癌或子宫肌瘤，其治疗需要LH-RH激素抑制的非恶性适应征为子宫内膜异位或良性前列腺增生。
13.权利要求11的用途，其中的哺乳动物为人类。
14.用于生产如权利要求9所述的药物制剂的方法，其中将至少一种权利要求1至8之一所述的化合物与常规载体和赋形剂混合并配制成一种药物。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100340572C (zh) * 2004-12-01 2007-10-03 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 新的lhrh拮抗剂
CN101037472B (zh) * 2006-03-14 2013-03-27 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 具有低组胺释放作用的促黄体生成素释放激素拮抗剂
CN102089320B (zh) 2008-01-24 2015-11-25 埃斯佩兰斯医药公司 溶解结构域融合构建体及其制备和使用方法
CN101597321B (zh) * 2008-06-03 2013-04-24 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 长效低组胺释放副作用的lhrh拮抗剂
WO2010142060A1 (zh) * 2009-06-11 2010-12-16 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 长效低组胺释放副作用的lhrh拮抗剂
KR102460297B1 (ko) 2012-10-30 2022-10-28 에스퍼란스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 항체/약물 컨쥬게이트 및 이의 사용 방법
CN104418936B (zh) * 2013-08-20 2018-06-05 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 Lhrh拮抗剂衍生物及其药物用途
FR3024612B1 (fr) * 2014-08-04 2018-03-09 Alstom Transp Tech Module d'alimentation electrique d'un bloc moteur, systeme de traction et vehicule electrique associe
RU2585367C1 (ru) * 2014-11-05 2016-05-27 Наталья Владимировна Спиридонова Способ лечения бесплодия у женщин с миомой матки

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5110904A (en) * 1989-08-07 1992-05-05 Abbott Laboratories Lhrh analogs
US5300492A (en) 1988-02-10 1994-04-05 Tap Pharmaceuticals LHRH analogs
US5140009A (en) 1988-02-10 1992-08-18 Tap Pharmaceuticals, Inc. Octapeptide LHRH antagonists
IL101074A (en) 1991-03-14 1997-09-30 Salk Inst For Biological Studi GnRH ANALOGS AND THEIR PREPARATION
ATE144538T1 (de) 1991-04-25 1996-11-15 Romano Deghenghi Lhrh-antagonisten
US5698522A (en) 1992-12-04 1997-12-16 Abbott Laboratories 6-position modified decapeptide LHRH antagonists
JP3568952B2 (ja) 1992-12-18 2004-09-22 アボット・ラボラトリーズ ５位及び６位に修飾アミノアシル残基を有するｌｈｒｈ拮抗薬
IL108509A0 (en) 1993-02-22 1994-05-30 Salk Inst For Biological Studi GnRH antagonist peptides
DE4320201A1 (de) * 1993-06-18 1995-01-12 Asta Medica Ag Verwendung von Cetrorelix und weiteren Nona- und Dekapeptiden zur Herstellung eines Arzneimittels zur Bekämpfung von Aids und zur Wachstumsstimulation
DE19544212A1 (de) 1995-11-28 1997-06-05 Asta Medica Ag Neue LH-RH-Antagonisten mit verbesserter Wirkung
DE19911771B4 (de) 1999-03-17 2006-03-30 Zentaris Gmbh LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung

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