UA79070C2 - Novel lhrh-antagonists, production and use thereof as medicament - Google Patents
Novel lhrh-antagonists, production and use thereof as medicament Download PDFInfo
- Publication number
- UA79070C2 UA79070C2 UA2002108075A UA2002108075A UA79070C2 UA 79070 C2 UA79070 C2 UA 79070C2 UA 2002108075 A UA2002108075 A UA 2002108075A UA 2002108075 A UA2002108075 A UA 2002108075A UA 79070 C2 UA79070 C2 UA 79070C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- compound according
- differs
- sra
- rai
- salt
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 5
- 229940124041 Luteinizing hormone releasing hormone (LHRH) antagonist Drugs 0.000 title 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 48
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 39
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 15
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 13
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 claims description 12
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 claims description 12
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 12
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 11
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 9
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 7
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 201000009273 Endometriosis Diseases 0.000 claims description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 206010046798 Uterine leiomyoma Diseases 0.000 claims description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 5
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 claims description 5
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 claims description 5
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 4
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims description 4
- 201000010260 leiomyoma Diseases 0.000 claims description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 claims description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229950005627 embonate Drugs 0.000 claims description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims 2
- 230000001629 suppression Effects 0.000 claims 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 32
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 abstract description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 21
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 16
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 13
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 13
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 13
- -1 4-(4-amidino-phenyl)-amino-1,4-dioxo-butyl Chemical group 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 9
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 9
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 7
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 6
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 5
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N CoASH Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-IBOSZNHHSA-N 0.000 description 3
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N coenzime A Natural products OC1C(OP(O)(O)=O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 RGJOEKWQDUBAIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005516 coenzyme A Substances 0.000 description 3
- 229940093530 coenzyme a Drugs 0.000 description 3
- KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N dephosphocoenzyme A Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(=O)NCCS)OC1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 KDTSHFARGAKYJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical class NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N N-tris(hydroxymethyl)methylglycine Chemical compound OCC(CO)(CO)[NH2+]CC([O-])=O SEQKRHFRPICQDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1,1-diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(NC)C1=CC=CC=C1 SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 2
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 2
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZELBLMDUXBNUSM-LBPRGKRZSA-N (2s)-2-amino-3-naphthalen-2-yloxypropanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(OC[C@H](N)C(O)=O)=CC=C21 ZELBLMDUXBNUSM-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108700012941 GNRH1 Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 101000573451 Homo sapiens Msx2-interacting protein Proteins 0.000 description 1
- 101100240594 Homo sapiens NIPAL4 gene Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 102100035378 Magnesium transporter NIPA4 Human genes 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102100026285 Msx2-interacting protein Human genes 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VIHYIVKEECZGOU-UHFFFAOYSA-N N-acetylimidazole Chemical compound CC(=O)N1C=CN=C1 VIHYIVKEECZGOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910003849 O-Si Inorganic materials 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910003872 O—Si Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010068042 Premature ovulation Diseases 0.000 description 1
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N Syringetin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UZMAPBJVXOGOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007997 Tricine buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 1
- 238000007098 aminolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052787 antimony Inorganic materials 0.000 description 1
- WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N antimony atom Chemical compound [Sb] WATWJIUSRGPENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N dihydrochrysin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 KCFYHBSOLOXZIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YGLLICRFEVEWOZ-UHFFFAOYSA-L disodium;3-carboxy-1-[(3-carboxy-2-oxidonaphthalen-1-yl)methyl]naphthalen-2-olate Chemical compound [Na+].[Na+].C1=CC=C2C(CC3=C4C=CC=CC4=CC(=C3O)C([O-])=O)=C(O)C(C([O-])=O)=CC2=C1 YGLLICRFEVEWOZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000007864 suspending Methods 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N tetrachloro-1,4-benzoquinone Chemical compound ClC1=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C(Cl)C1=O UGNWTBMOAKPKBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004044 trifluoroacetyl group Chemical group FC(C(=O)*)(F)F 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/23—Luteinising hormone-releasing hormone [LHRH]; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/02—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin
- A61P5/04—Drugs for disorders of the endocrine system of the hypothalamic hormones, e.g. TRH, GnRH, CRH, GRH, somatostatin for decreasing, blocking or antagonising the activity of the hypothalamic hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Опис винаходу
Винахід стосується І НКН-антагоністів з поліпшеними властивостями розчинності, способу одержання цих 2 сполук, лікарських засобів, які містять ці сполуки, а також застосування лікарських засобів для лікування гормональнозалежних пухлин та застосування гормональних препаратів при незлоякісних захворювання, таких як доброякісна гіперплазія передміхурової залози (ВРН) та ендометріоз.
Застосовувана для визначення пептидів номенклатура узгоджується з номенклатурою, яка тлумачиться
Комісією ІШРАС-ІОВ з біохімічної номенклатури (Еогореап 9. Віоспет. 1984, 138, 9-37), за якою, згідно з 70 традиційним уявленням, аміногрупи на М-кінці розташовані справа наліво, а карбоксильна група на С-кінці - зліва направо. І Н-КН-антагоністи, такі як пептиди згідно з винаходом, охоплюють природні та синтетичні амінокислоти, причому до перших належать АїЇа, МаїЇ, Гец, Пе, Зег, ТАг, Гуз, Аго, Авр, Авп, Сім, Сп, Сув,
Меї, Ре, Туг, Рго, Тгтр та Ніз. В основі скорочень для окремих амінокислотних залишків лежать традиційні назви амінокислот: АІа-аланін, Аго-аргінін, СіІу-гліцин, Іеи-лейцин, Іувз-лізин, Раї(3)-3-(З-піридил)аланін, 12 Ма/(2)-3-(2-нафтил)аланін, РПпе-фенілаланін, Сра-4-хлорфенілаланін, Рго-пролін, Зеп-серин, ТПг-треонін,
Тгр-триптофан, Туг-тирозин і Заг-саркозин. Усі описані авторами амінокислоти походять від І -серії, якщо не вказано іншого. Наприклад О-Ма|(2) є скороченням для 3-(2-нафтил)-О-аланіну, а Зег - скороченням для
ІЇ-серину. Заміщення в є-аміногрупі у боковому ланцюгу лізину представлено Через І уз у дужках, необов'язково у формі скорочення.
Інші скорочення:
Ас Ацетил в 4-(4-амідино-феніл)-аміно-1,4-діоксо-бутил
Вос Трет-бутилоксикарбоніл с
Вор Бензотриазол-1-окси-трис-(диметиламіно)-фосфоній-гексафторофосфат Ге)
ОСС Дициклогексилкарбодіїмід
ОСМ Дихлорметан ра; Диметоксифеніл-диметилметиленокси-карбоніл (Диметокси-диметил-7)
БІС Діїзопропілкарбодіїмід о
ПІРЕА М,М-діїзопропілетиламін у
ОМЕ Диметилформамід
Етос Флуоренілметилоксикарбоніл о
НЕ Фтористоводнева кислота Ге)
НОВІ 1 тідроксибензотриазол їм
НРІС Рідинна хроматофафія високого тиску
Ме Метил
ТЕА Трифтороцтова кислота 7 Бензилоксикарбоніл « 70 Пептиди згідно з винаходом являють собою аналоги гормону вивільнення лютеїнізуючого гормону (І Н-КН), як с що має таку структуру: р-СіІц-Нівз-Тгтр-зЗег- Туг-ОС1у-І еи-Агод-Рго-С1у-МН», (СН-КН, гонадореліні. :з» Понад 20 років дослідники шукають селективно активні антагоністи І Н-КН-декапептидів |М.Кагеп па
У.Е.Кіміег, Епдосгіпе Кеміємуз 7, 44-66 (1986)).
Великий інтерес до таких антагоністів пояснюється їх корисністю в галузях ендокринології, гінекології, - 15 попередження вагітності та онкології Було одержано велику кількість таких сполук, як потенційні
І нН-КН-антагоністи. Найцікавішими сполуками, які було виявлено на цей час, є сполуки, структура яких являє (Се) собою модифікацію І Н-КН-структури. о Першу серію ефективних антагоністів одержували через введення ароматичних амінокислотних залишків у позиції 1, 2, З та 6 або 2, З та 6. Звичне написання сполук виглядає так: спочатку вказують амінокислоти, які -і 20 у пептидному ланцюгу І Н-КН займають місце амінокислот, які там первісно перебували, причому позиції, в яких о відбувався обмін, позначаються цифрами верхнього індексу. Крім того, через позначення "/Н-КН" було продемонстровано, що йдеться про аналоги І Н-КН, на яких відбувається обмін.
Відомі антагоністи:
ІАс-О-Сра!?, О-Ттр3б) ІН-ВН (О.Н.Соу ей а). іп: Огоз5, Е. апа Меіеппоїег, .. (Еавз) Реріїдев;
Ргосееєдіподз ої (пе бій Атегісап Реріїде Зутровішт, 5.775-779, Ріегсе Спет.Со., КоскміМПе ПІ. (1979)|;
Ф) ІАс-Рго", О-Сра?, О-Маї(23391 ІН-ВЕН (Патент США Мо4.419.347| та |Ас-Рго", ЮО-Сра?, О-Тгтр?9;ф І Н-ВЕН ка ІУ..Ріпеаа, еї а!., 9. Сііп. Епадосгіпої. Меїаб. 56, 420, 1983).
Для поліпшення дії антагоністів у позицію б згодом вводили основні амінокислоти, наприклад О-Ага. бо Наприклад (Ас-О-Сра" 2, О-Тгтр3, О-Агоє, О-АїІа"9| ГН-ВН. (020-30276) (О.Н.Соу, еї аї., Епаосгіпоїюду 100, 1445, 19821; та (Ас-О-Ма(2)1, О-Рне(4-)?, О-Тгтр3, О-Аг9дбІ ІН-ЕН (ОБЕ 18260) Ю.Е. Віміег еї аї., іп: Міскегу В.Н.
Мезіог, г. 9У.3., Наїе, Е.5.Е (Едав). ІНКН апа її Апаіодв, 5.11-22 МТР Ргеззв, І апсавіег, ОК1984).
Інші ефективні І Н-КН-антагоністи описано у МО 92/19651, УМО 94/19370, МО 92/17025, МО 94/14841, УМО 94/13313, 05-А 5,300,492, О5-А 5,140,009, ЕР 0413209 А1 та ОЕ 19544212 АТ). 65 В останньому описано сполуки з модифікованою орнітиновою або лізиновою ланкою у позиції б, які відповідають такій формулі: Ас-О-Ма|(2)-О-Сра?-р-РаІ(3)3-Зег-Туго-О-Хххб-І еи "-АгудЗ-Рго?-О-АІа"9-МН»о, де -Д-
Ор-Ххх являє собою амінокислотну групу загальної формули (МІ) пон -0 рам чн сва-н
Іншими відомими І Н-КН-антагоністами є Апіагеїїх, Сапігеїїх та Сеїгогеїїх. Апіагеїїх Є (ІММ: Темегеїїх):
Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-бег'-Туго-О-Нсіб-І еи 7-І ув(іРг)8-Рго9-О-АІа9-МН» Сапігеїїх: 70 Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-бег"-Туг?-О-пАг(Ебд»б-І еи "-ПАга(ЕВ»З-Рго9-О-Аїа"9-МН»
Сегогеїїх:
Ас-О-Мап(2)-О-Сра?-О-РаІ(3)2-Зег"-Туг?-О-Сі-І еи"-Агде-Рго?-О-АІа"9-МНо
Метою винаходу є забезпечення нових ІН-КН-антагоністів, які мають підвищену ферментну стабільність і значно поліпшену розчинність у воді.
Ця задача вирішується завдяки сполукам загальної формули (І)
А-Ххх 1-Ххх2-Ххх З-Ххх 4-Ххх 5-Ххх 6-Ххх 7-Ххх 8-Ххх 9-Ххх 19-МНо (І) у якій
А означає ацетильну групу,
Ххх" 0-Ма((2),
Ххх2О-Сра,
ХххЗ р-Ра/(3),
Ххх" Вег см '
Ххх? М-Ме-Туг, і)
Ххх5 р-сії, р-Нсі або О-(6-М'-4-(4-амідинофеніл)-аміно-1,4-діоксо-бутиліІ-І уз (скорочено: О-І ув(В)),
ХХХ" Гец або Міеє,
ХххЗ Агу або І ув(іРг), о
Хо Ро, і їм-
Ххх "о р-Аїа або Заг, за умови, о що у разі, коли Ххх? означає О-І ув(В), то Ххх" є Міє, (о) з коли Ххх? означає О-Сії, то Ххх" є Міє і Ххх "9 є О-Аа, або М коли Ххх? означає О-Нсі, то Ххх" є І еи і Ххх "9 є О-Аїа, та їх солям з фармацевтично прийнятними кислотами, зокрема ацетатам, ембонатам та трифторацетатам.
Згідно з іншим аспектом винаходу, особливу перевагу віддають таким сполукам, а також їх солям з фармацевтично прийнятними кислотами: «
Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Ме "-АгодЗ-Рго?-Заго-МНо - с Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Міе "-АгодЗ-Рго?-0-АІа"9-МН» "з Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Міе І ув(іРг)8-Рго?-Заг'9-МН» " Ас-0-МаІ(2)1-0-Рпе(4-СІ)2-О-Раї(3)3-Зег'-М-Ме-туг?-О-І ув(В) 9-Міе -І ув(іІР г) 8-Рго9-О-АІа"9-МН»
Ас-0-Ма(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Зег"-М-Ме-Туг-О-сСіб-Ме"-АгаЗ-Рго?-О-АІа"9-МН? -І що Ас-О-Ма(2)-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Зег'-М-Ме-Туг?-О-Нсіб-І еи "-Агдб-Рго?-0-АЇІа 79-МН»
Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туг-О-Сіб-Ме"-І ув(іРг)8-Рго92-О-АІа"9-МН» о Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-Неіг-І еи7-І ув(іРг)8-Рго?-О-АІа"9-МН» о Згідно з іншим аспектом винаходу, сполуки згідно з винаходом існують у формі ацетатних, трифторацетатних 5р або ембонатних солей. - Згідно з іншим аспектом винаходу, сполуки згідно з винаходом застосовують як лікарські засоби або о фармацевтичні композиції.
Згідно з іншим аспектом винаходу, одержують фармацевтичні композиції, які включають принаймні одну зі сполук згідно з винаходом і традиційні носії та допоміжні речовини.
Згідно з іншим аспектом винаходу, пропонується спосіб одержання сполук згідно з винаходом загальної о формули І, при якому фрагменти ланок Ххх " з відповідними захисними групами, де т означає ціле число від 1 до 10, і Ххх" є ацетилованим, будують традиційним способом на твердій фазі або у розчині, відразу за цим ко фрагменти зв'язують із твердою фазою шляхом сегментного з'єднання і по завершенню з'єднання сполуки загальної формули І традиційним способом з амідуванням на ланці Ххх 9 відщеплюють від твердої фази. бо Згідно з іншим аспектом винаходу, пропонується застосування сполук згідно з винаходом для одержання лікарських засобів для лікування гормональнозалежних пухлин, зокрема карциноми передміхурової залози або раку молочної залози, а також незлоякісних показань, лікування яких вимагає пригнічення І Н-КН-гормону.
Згідно з іншим аспектом винаходу, пропонується спосіб одержання фармацевтичних композицій, при якому принаймні одну сполуку за одним з пп. з 1 по 10 змішують з традиційними носіями та допоміжними речовинами і бо розфасовують як лікарський засіб.
Згідно з іншим аспектом винаходу, пропонується спосіб лікування гормональнозалежних пухлин, зокрема карцином передміхурової залози, раку молочної залози або міоми матки, а також незлоякісних показань, лікування яких вимагає пригнічення І Н-КН-гормону, таких як ендометріоз, доброякісна гіперплазія передміхурової залози (ВРН), а також лікування порушень жіночої або чоловічої плідності у ссавців, зокрема людини, через введення активної дози принаймні однієї сполуки згідно з винаходом.
Сполуки згідно з винаходом можуть застосовуватися для лікування гормональнозалежних пухлин, зокрема карциноми передміхурової залози, раку молочної залози або міоми матки, а також незлоякісних показань, лікування яких вимагає пригнічення І Н-КН-гормону, таких як ендометріоз або доброякісна гіперплазія передміхурової залози (ВРН). Крім того, вони можуть застосовуватися для лікування порушень плідності жінок та 7/0 чоловіків, наприклад, для контрольованої оваріальної суперстимуляції у межах штучного запліднення (запліднення іп міїго). Для цього їх зазвичай відомими спеціалістам способами змішують з традиційними носіями та допоміжними речовинами і розфасовують як лікарські засоби.
Синтез сполук згідно з формулою (І) здійснюють як через послідовну побудову з застосуванням у боковому ланцюгу уже ацетильованого карбоновою кислотою загальної формули К"-СООН О-лізину шляхом класичної 75 Фрагментної конденсації або через твердофазний синтез за Мерифілдом, так і через перетворення декапептидної ланки з відповідними карбоновими кислотами Через амідний зв'язок у боковому ланцюгу
О-лізину?. Таким чином, введення К7-СО-групи може відбуватися у три різні моменти здійснення способу: перед конденсацією окремих ланок до пептиду, після вставлення лізину або орнітину у пептидний ланцюг, але до конденсації наступної ланки, або після конденсації всіх ланок.
Сполуки формули (І) можуть бути синтезовані відомими способами, наприклад, суто твердофазним способом, частково твердофазним способом (так звана фрагментна конденсація) або через класичне з'єднання розчинів |див. М.ВодапзакКу, "Ргіпсіріеєз ої Рерііде Зупіпевів", Зргіпдег Мегіад 1984).
Наприклад, способи твердофазного синтезу описано в роботах |епгрисп "Зоїід Рназе Реріїде Зупіпнезів",
У.М.еемжшай апа 9.О.Моипо, Ріегсе Спет.Сотрапу, КосКоога, Ії, 1984, та С.Вагапу апа К.В.Меїгтійеій "Те єм
Реріїідев", Сп.1, 5.1-285,1979, Асадетіс Ргезз Іпс.). Класичні способи синтезу в розчинах докладно описано в о роботі ("Меїйодеп дег Огдапізспеп Спетіе (Ноиреп-УУеуї!), Зупіпезе моп Реріідев" Е. УМіїпзсп (Негаиздебег) 1974,
Сеогуд Тпіете Мегіад, ЗішНдат, ВКО.
Поетапну побудову здійснюють, наприклад, так: спочатку карбокси-кінцеву амінокислоту, о-постійна аміногрупа якої є захищеною, ковалентно зв'язують із зазвичай застосовуваним для цього нерозчиннти носієм, | «в) який відщеплює о-аміно-захисну групу цієї амінокислоти, з утвореною таким чином вільною аміногрупою через їм свою карбоксигрупу зв'язується наступна захищена амінокислота, і таким чином поступово у належній послідовності з'єднується решта амінокислот пептиду, який має бути синтезований, а після з'єднання всіх (ав) амінокислот готові бокові функціональні захисні групи. Поетапна конденсація відбувається традиційним о способом через синтез із відповідних звичайним способом захищених амінокислот.
З5 З'єднання окремих амінокислот одна з одною відбувається зазвичай такими способами, зокрема: - - способом симетричного ангідриду у присутності дициклогексилкарбодіїміду або діїзопропілкарбодіїміду (сс, ІС) - карбодіїмідним способом в цілому « - карбодіїмідно-гідроксибензотриазольним способом |див. Те Реріїдез, Моіїште 2, Ед. Е. Сгов5 апа 3.
Меієпрогег). т с При з'єднанні фрагментів в оптимальному варіанті застосовують азидне з'єднання, яке здійснюють без ч рацемізації, або рос-1-гідроксибензотриазольний або я рос-3-лдрокси-4-оксо-3,4-дигідро-1,2,3-бензотриазиновий спосіб. Також можуть бути застосовані активовані естери фрагментів.
Для поетапної конденсації амінокислот особливо придатними є активовані естери М-захищених амінокислот, - такі як, наприклад, М-гідроксисукцинімідний естер або 2,4,5-трихлорфеніловий естер. Аміноліз добре со каталізується М-гідроксисполуками, які мають кислотність оцтової Кислоти, наприклад, 1-гідроксибензотриазолом. о Як проміжні амінозахисні групи, придатними є дегідратуючі групи, такі як, наприклад, - 20 бензилоксикарбонільний залишок (- 7-залишок) або слабкокислі відщеплювані групи. Як захисні групи для
А-постійних аміногруп придатними є, наприклад: м) третинні бутилоксикарбонільні групи, флуоренілметилоксикарбонільні групи, карбобензоксигрупи або карбобензтіогрупи (необов'язково з відповідним р-бром- або р-нітро-бензильним залишком), трифторацетильна група, фталільний залишок, о-нітрофеноксіацетильна група, тритильна група, р-толуолсульфонільна група, 22 бензильна група, заміщені у бензольному каркасі бензильні залишки (р-бром- або р-нітро-бензильний залишок) о та а-фенілетильний залишок. На них також вказано в роботах (еззе Р. Сгеепвівіп ипа Мійоп Уміпі:, Спетівігу ої Атіпо Асідз, Мем ЖМогк 1961", дойп УмПеу апа 5опв, Іпс., Моїште 2, наприклад, стор.883 і далі, "Ргіпсіріев ю ої Рерііде Зупіпевзів", Зргіпдег Мегпад 1984, "Бод Рназе Рерііде Зупіпевів" 9.М.5іежшай апа 4.0.Моипа,
Ріегсе Спет.Сотрапу, Коскіога, І, 1984, б.Вагапу апа к.В.Мегїтійеій "Те Реріідев", Сп. 1, 5.1-285,1979, 60 Асадетіс Ргезз Іпс. а також Те Реріідез, Моїште 2, Ед. Е. Сговзв апа у. Маїеппоїег, Асадетіс Ргезз, Мем
МогКк)|. В принципі, ці захисні групи є придатними також для захисту інших функціональних бокових груп (ОН-груп, МНо-груп) відповідних амінокислот.
Наявні гідроксигрупи (серин, треонін) в оптимальному варіанті захищаються бензильними та подібними до них групами. Інші не о-постійні аміногрупи (наприклад аміногрупи у о-позиції, гуанідиногрупа аргініну) в бо оптимальному варіанті є ортогонально захищеними.
Окремі амінокислотні ланки, за винятком модифікованого В 1-СО-групою лізину, виробляються серійно.
Можливий порядок здійснення способу одержання модифікованого В -СО-групою лізину є таким: 1. о-карбоновокислотну групу відповідним чином захищають, наприклад, шляхом етерифікації. 2. є-аміногрупу захищають, наприклад 2-групою, 3. о-аміногрупу (наприклад, Вос-групу) захищають таким чином, що забезпечується селективність щодо наступного відщеплення амінозахисних груп. 4. 7-групу на є-аміногрупі відщдеплюють. 5. На в-аміногрупі водять потрібну групу К7-СО. 6. Захисну групу на о-аміногрупі відщдеплюють. 7. о-аміногрупу необов'язково піддають оборотній дериватизації, наприклад, 2-групою.
Для введення Б "-СО-групи через перетворення аміногрупи лізину відповідною карбоновою кислотою або похідною карбонової кислоти придатним є в принципі такий самий спосіб, як описаний вище для з'єднання 75 амінокислот. Однак особливу перевагу віддають конденсації з застосуванням карбодіїміду, наприклад 1-етил-3-(З-диметиламінопропіл)-карбодіїмід, та 1-гідроксибензотриазолу.
Реакція для з'єднання амінокислот відбувається у зазвичай застосовуваному для цього розчиннику або суспендуючому агенті (наприклад, дихлорметані), причому для поліпшення розчинності необов'язково додають диметилформамід.
Як синтетична основа, придатними є нерозчинні полімери, наприклад, полістиролова смола у формі гранул, яка набухає в органічному розчиннику (наприклад, співполімеризат з полістиролу та 195 дивінілбензолу).
Побудову захищеного декапептидаміду на метил-бензгідриламіновій смолі (МВНА-смола, тобто, полістиролова смола, яка має метил-бензгідриламіногрупи), яка забезпечує потрібну С-кінцеву амідну функцію пептиду після
НеЕ-відщеплення носія, здійснюють згідно з такою схемою послідовності операцій: с
Схема послідовності операцій о вени маю 00000000 о » в Прмееня ом 0000000000000059ю в. о в Пемееня бом 00000000 й з в. в (Пронееня мет 00000000 з Прмееня бом 00000005 зо вто Додавання после урсмрстов « й - - з
Мо-Вос-захищені амінокислоти зазвичай з'єднують у потрійній молярній надлишковій кількості у присутності діззопропілкарбодіїміду (ІС) та 1-гідроксибензотриазолу (НОВО у СНЬСІО/ОМЕ протягом 9Охв і Вос-захисну групу -І відщеплюють через півгодинну дію 5095 трифтороцтової кислоти (ТРА) у СНьСі». Для контролю повного перетворення може служити випробування хлоранілом за Кристенсеном та випробування нінгідрином за іс) Кайзером. Решта вільних амінофункцій блокується через ацетилювання у п'ятиразовій надлишковій кількості о ацетилімідазолу в СНоСі». Черговість етапів реакції з побудови пептидів на смолі представлено у таблиці. Для відщеплення зв'язаних смолою пептидів відповідний кінцевий продукт твердофазного синтезу висушують у - вакуумі над РоСОв і обробляють у 500-разовій надлишковій кількості на НЕ/анізолі 10:1/об'єм:об'єм бохв при 020. о Після відгону НЕ та анізолу у вакуумі через екстрагування безводним етиловим етером у вигляді білої твердої речовини одержують пептиди, відокремлення паралельно одержаного полімерного носія здійснюють через вимивання 5095 водним розчином оцтової кислоти. Шляхом обережного звуження розчинів в оцтовій кислоті у вакуумі одержують відповідні пептиди у вигляді високов'язких олій, які перетворюються після додавання абс. етеру в холодильнику на білу тверду речовину. (Ф. Подальше очищення відбувається стандартними способами препаративної рідинної хроматографії високого ко тиску (НРІ С).
Перетворення пептидів на їхні кислі адиційні солі здійснюють з використанням кислот відомим спеціалістам во способом. | навпаки, вільні пептиди одержують шляхом перетворення їхніх кислих адиційних солей основами.
Пептидоембонати можуть бути одержані через перетворення солей трифтороцтової кислоти (ТЕА-солей) пептиду вільною ембоновою кислотою (памовою кислотою) або відповідною динатрієвою сіллю ембонової кислоти. Для цього сіль пептид-ТЕА у водному розчині перемішують із розчином динатрій-ембонату у полярному апротонному середовищі, в оптимальному варіанті - диметилацетаміді, і відокремлюють утворений в5 світло-жовтий осад.
Представлені нижче приклади пояснюють винахід, не обмежуючи його обсягу.
Приклад 1 (0-68968):
Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Ме "-АгодЗ-Рго?-Заго-МНо
Синтез декапептиду відбувається на полімерному носії з густиною завантаження 0,55ммоль/г (амінометил-заміщена смола, Етос-захист, тип О-1675, Ра. Васпет). Лізин з'єднували як Етос-О-І ув(Вос)-ОН,
Етос-захисні групи віддеплювали 2095 піперидином у ОМЕ. Після одночасного відщеплення всіх захисних груп бокових ланцюгів та відокремлення полімерного носія виділений необроблений пептид очищали шляхом препаративної НРІ С. Після висушування заморожуванням одержували 98,595 декапептид.
Заміщення на в-азоті ЮО-лізину 4-(4-амінофеніл)-аміно-1,4-діоксомасляною кислотою здійснювали за 70 допомогою РуВор у ОМЕ при додаванні СІРЕА. Очищення виділеного необробленого пептиду відбувалося шляхом препаративної НРІ С. Здійснене відразу за цим висушування заморожуванням забезпечувало приблизно 9995-й продукт (трифторацетат) сумарної формули СвоНіовСІМ19О45 з правильним РГАВ-М5 1633 (МАН) (розрах. 1631,78096)
Приклад 2 (0-68969):
Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Міе "-АгодЗ-Рго?-0-АІа"9-МН»
Синтез декапептиду здійснювали на полімерному носії з густиною завантаження 0,55ммоль/г (амінометил-заміщена смола, Етос-захист, тип ЮО-1675, Ра. Васпегп). Лізин з'єднували як Етос-О-І ув(Вос)-ОН,
Етос-захисні групи віддеплювали 2095 піперидином у ОМЕ. Після одночасного відщеплення всіх захисних груп бокових ланцюгів та відокремлення полімерного носія виділений необроблений пептид з вмістом приблизно 7190 (НРІ С) без очищення перетворювали далі.
Заміщення у боковому ланцюгу ЮО-лізину 4-(4-амінофеніл)-аміно-1,4-діоксо-масляного кислотою здійснювали за допомогою РуВор у ОМЕ при додаванні СІРЕА. Виділений необроблений пептид очищали шляхом препаративної НРІ С. Після здійсненого відразу за цим висушування заморожуванням одержували 98,8905-й продукт (трифторацетат) сумарної формули СвоНіобСІМ9О35 з правильним РБАВ-М5 1633 (МАН) (розрах. Се 1631,78096) (5)
Приклад З (0-68971):
Ас-О-Ма(2)-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Зег'-М-Ме-Туг?-О-І ув(В)9-Міе "-І ув(іРг)8-Рго?-Запо-МНо
Синтез декапептиду здійснювали на полімерному носії з густиною завантаження 0,55ммоль/г (амінометил-заміщена смола, Етос-захист, тип ЮО-1675, Ра. Васпегп). Лізин з'єднували як Етос-О-І ув(Вос)-ОН, о
Етос-захисні групи відщеплювали 2095 піперидином у ОМЕ. Після одночасного відщеплення всіх захисних груп ї- бокових ланцюгів та відокремлення полімерного носія виділений необроблений пептид (Сепаїї са. 5995, НРІ С) очищали шляхом препаративної НРІ С. Після висушування заморожуванням одержували 9590-й декапептид. о
Заміщення у боковому ланцюгу О-лізину 4-(4-амінофеніл)-аміно-1,4-діоксо-масляною кислотою здійснювали Ф за допомогою РуВор у ОМЕ при додаванні СІРЕА. Виділений необроблений пептид очищали шляхом
Зо препаративної НРІ С. Після здійсненого відразу за цим висушування заморожуванням одержували 96,6905-й - продукт (трифторацетат) сумарної формули Св5Н.442СІМ-7О35 з правильним РГАВ-М5 1648 (МАН) (розрах. 1645,8218)
Приклад 4 (0-68987) «
Ас-О-Маї(2)1-0-Рпе(4-СІ)2-О-РаІ(3)3-Вег"-М-Ме-Туг?-О-І ув(В) 9-Міе 7-І ув(іР г) 8-Рго?-О-АІа"0-МН»
Синтез 0-І уз-6-незаміщеного декапептиду здійснювали на 9,09 г полімерного носія з густиною завантаження не) с О,55ммоль/г, лізин? з'єднували як Етос-О-І ув(Вос)-ОН. з Після відщеплення смоли виділяли 8,15г необробленого пептиду. Очищення необробленого пептиду здійснювали шляхом препаративної НРІ С.
Заміщення у боковому ланцюгу О-лізину 4-(4-амінофеніл)-аміно-1,4-діоксо-масляною кислотою здійснювали 79 за допомогою РуВор у ОМЕ при додаванні СІРЕА. Виділений необроблений пептид очищали шляхом ї препаративної НРІ С. Після здійсненого відразу за цим висушування заморожуванням одержували 94,6905-й (Се) продукт (трифторацетат) сумарної формули Св5Н.412СІМ47О45 з відповідним БАВ-М5: 1646,8 (МАН; розрах.: о Макао риклад 5: -о 70 Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туг-О-Сіб-Ме"-АгудЗ-Рго?-О-АІа"9-МН» о Приклад 6:
Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-Ор-Нсі? | еи"-Агдв-Рго?-О-АІа 79-МНо
Приклад 7:
Ас-О-Ма(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Зег'-М-Ме-Туг?-О-Сі-Міе 7-І ув(іРг2)-Рго?-О-АІа"9-МНо
Приклад 8:
ІФ) Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-Нсі?- І еи 7-І ув(іРгУ)-Рго9-О-АІа"9-МН» ко Загальні технологічні вказівки для одержання пептидів згідно з Прикладами від 5 по 8:
Декапептиди можуть бути одержані як шляхом твердофазного синтезу за Мерифілдом (ЗРРБ), так і шляхом 60 класичної фрагментної конденсації у розчині. Побудові пептидної послідовності на полімерному носії віддають перевагу з економічних міркувань, і її здійснюють на вибір за методиками (1)Вос або (2)Етос; відповідним чином, застосовують або метил-бензгідриламінову смолу (для 1), або
Етос-2,4-диметокси-4-(карбоксиметилокси)-бензгідриламінову смолу (для 2) для С-кінцевого приєднання р-аланіну. 65 Твердофазний синтез. Спосіб Мерифілда:
Декапептиди синтезують за стандартизованих умов реакції (схема послідовності операцій, Таблиця 1) для твердофазного синтезу за Етос-методикою з застосуванням 5 грамів полімерного носія
Етос-2,4-диметокси-4-(карбоксиметилокси)-бензгідриламінової смоли, Ра. Васпегп 01675, густина завантаження приблизно О0,55ммоль/г, розмір частинок 200-40О0меш.
Поетапну побудову послідовності на смолі здійснюють за допомогою Мо-Етос-захищених амінокислот згідно з такою схемою послідовності операцій: о ів в прин 0 (волроню 111111111102е|; хо в зедіня 000 Волеон нов сурме збе) лх в Промианя 000 МЕ 00010000 15. контрольне випробування |випровування хлорним сарениюм| | сч ї Нилснннввьннанаяшьни о
Г див. Т. СНгівіепзеп, Ада Спет. Зсапа. В 33, 763-766, 1979)
Типові для способу (повторювані) параметри реакції твердофазного синтезу декапептидів згідно з вищевказаною схемою: о зо - відщеплення Етос-захисної групи 20 95 піперидином у ОМЕ, 2х5хв при кімнатній температурі (Етап 2). - з'єднання у триразових молярних надлишкових кількостях Етос-амінокислот з діїзопропілкарбодіїмідом - (ГІС) у присутності гідроксибензотриазолу (НОВІ) (Етап 8). о - С-кінцеве відщеплення полімерного носія, включаючи видалення захисних груп амінокислотних бокових ланцюгів трифтороцтовою кислотою (ТЕА). Ме
Після відщеплення полімерного носія при застосуванні 5 грамів смоли одержують приблизно 5-6 грамів ч- необробленої пептидної суміші з вмістом приблизно 70-80 905 потрібних компонентів; їх одержують шляхом здійсненої відразу після цього препаративної НРІ С.
Очищення декапептидів шляхом препаративної НРІ С: умови хроматографії: 19 Преп. НРІ С, Ра. 5пітаайги, колонка ЮОупатах ЕР18.12мкм, ЗООА, І -250мм, 10-41 4мм «
Градієнтна система з програмним керуванням, 4090 В--»9090о В, 5Охв шщ с Розчинник А: 970мл НоОЗОмл СНУСМнТмл СЕЗСООН й Розчинник В: ЗОобмл НгОж-700мл СНЗСМТмМл СЕЗСООН и"? УФ-виявлення, 5-22Онм, швидкість потоку бОмл/хв
Одержані фракції звужують у вакуумі і ліофілізують. Декапептиди утворюються у вигляді легкого безбарвного матеріалу. Перетворення на потрібну для подальшої фармакологічної переробки форму ацетатної солі -І здійснюють відразу після цього шляхом хроматографічного іонного обміну.
Дослідження біологічної дії: ї-о Сполуки згідно з винаходом за формулою | досліджують на їх рецепторне зв'язування. Спосіб базується на («в описаному в роботі |ВескКегз» еї а!., Еиг. 9). Віоспет. 231,535-543 (1995)) способі. Одержаний шляхом описаного -1 50 вище синтезу Сейгогеїїх йодують (| 22) (Атегзпат; питома активність 80,5Бк/фмоль) із застосуванням реактива
ІодосСеп (Ріегсе). Реакційну суміш очищають шляхом оберненофазової високоефективної рідинної 62 хроматографії, причому одержують моно-йодований Сеїгогейїх без неміченого пептиду. Придатними для специфічного рецепторного зв'язування є приблизно 8095 І"22І|-Сеїгогеїїх і неміченої сполуки згідно з винаходом.
Сполуки згідно з винаходом випробують на їх дію іп міго представленими нижче способами та 2, причому 22 спорідненість зв'язування визначають в аналізі зв'язування з | 1251|Ї-Сеїгогеїх (Спосіб 1) та функціональну
Ф! активність з Тгіріогейїп як агоністичним стимулом (Спосіб 2).
Спосіб 1 (визначення Ко на прикладі Сеїгогеїїх): о Аналіз рецепторного зв'язування згідно з (ВесКеге, Т., Магпеіїпеке, К., Кеїапаег, Н., Ніїдага Р. (1995) "Беіесіоп апа спагасієегілайоп ої таттайап сеї! пев ом/йй віабіе омегехргезвіоп ої Ппитап рішйагу 60 тесеріогв ог допадоїїрегіп (СПЕН)" Єнг. 9. Віоспет. 231, 535-543.
Для дослідження рецепторного зв'язування Сеїйгогеїїх із застосуванням реактиву ІосдосСеп (Ріегсе) йодують
Г25ІЇ (Атегзпат; питома активність 80,5Бк/фмоль). Реакційну суміш очищають шляхом високоефективної рідинної хроматографії з оберненням фаз, причому одержують моно-йодований Сеїйгогеїїх без неміченого пептиду. Приблизно 8095 І"22І| Секгогеїх були придатними для специфічного рецепторного зв'язування. 65 Аналіз рецепторного зв'язування здійснюють з інтактними клітинами за фізіологічних умов, як описано
ІВескКеге еї аЇ. 1995). Субконфлюентні культури стабільно трансфікованих І ТК-клітин, які експресують
ІНКН-рецептор людини, відокремлюють шляхом інкубації у Масі/Р; (137мМ Масі, 2,7мМ КСІ, 8,1мМ Ма»НРО,, 11,47мММ КНоРОДИмММ ЕОТА і збирають шляхом центрифугування. Осад клітин ресуспендують у зв'язувальному буфері (ОМЕМ без НьСО», з 4,5г/л глюкози, 10ММ Нерев, рН 7,5, 0,595 (маса/об'єм) ВЗА, Тг/л бацитрацину,
О, г/л 5ВТІ, 0,196 (маса/об'єм) Мама»). Для аналізів витіснення 0,25 х10бклітин/10О0мкл інкубують з приблизно 225пМ |25І|Ї-Сеїгогеїх (питома активність 5-10х10"арт/пмоль) та різними концентраціями неміченої сполуки згідно з винаходом як конкурентної сполуки. Шар суспензії клітин у 10Омкл зв'язувального середовища наносять у 400мкл трубках на 200мкл 84 90 (за об'ємом) силіконової олії (МегскК Тур 550)/1695 (за об'ємом) парафінової 70 олії. Після інкубації протягом їгод при 37 «С при повільному безперервному струшуванні клітини шляхом центрифугування протягом 2хв при 9000об./хв (Тип ротора НТА13.8; Негаєиз Зераїйес, Овіегоде/Сегтапу) відокремлюють від інкубаційного середовища. Кінці трубок, які містять осад клітин, зрізають. Осад клітин та надосадову рідину відразу за цим піддають аналізу шляхом підрахунку у-випромінення. Кількість неспецифічно зв'язаного матеріалу визначають при включенні неміченого Сеїгогеїїх з кінцевою концентрацією 1мкМ, і вона, як 72 правило, становить «1095 від загальної кількості зв'язування. Аналіз даних зв'язування здійснюють за допомогою аналітичної програми ЕВОАЛ ідапа (Віозой М3.0).
Сейгогеїїх виявляє Кро-значення 170 пікомолів на літр (пМ) (кількість незалежно проведених випробувань: 21).
Спосіб 2 (Функціональний аналіз для визначення антагоністичної ефективності (значення ІСьо)):
Аналіз здійснюють з указаною нижче модифікацією, як описано в роботі (ВесКегв5, Т., Кеїйапаег, Н.,
Ніїдага, Р. (1997) "Снагасієгігайоп ої допадоігоріп-геїеавіпд погтопе апаюдвз Бразей оп а зепвійме сеїїшаг
Ісітегазе геропег депе аззау", Апаїуї Віоспет. 251, 17-23 (ВесКеге еї а). 1997)Ї. 10 000 клітин на лунку, які експресують І НКН-рецептор людини та ген-репортер люциферази, протягом 24год культивують у мікротитрувальних планшетах із застосуванням ОМЕМ з додатками та 195 (обем:обем) ЕС5;. Клітини відразу за цим протягом бгод стимулюють, застосовуючи 1нНМ (О-ТгрУ| І НЕН. Перед стимуляцією додають антагоністичні с 29 сполуки згідно з винаходом, і клітини в кінці піддають лізису для квантифікації клітинної І ис-активності. Ге)
Підрахунок значень ІСво на основі кривих дози-ефективності здійснюють через нелінійний аналіз регресії з застосуванням Нії-моделі (Ргодгатт ЕХ 2.0 від С ОгипмжаІд, АггпеітЩШеметк Огевздеп). Квантифікацію
Гис-активності здійснюють по суті, як описано |ІРготеда Тесппіса! ВиПейпе 2Ж101/161) із застосуванням відповідної люциферазної аналітичної системи (Рготеда Е4030) на двох примірниках. Завдяки додаванню о коферменту А (СоА) відбувається окиснення люциферил-СоА з потрібною кінетикою. Після видалення - культурального середовища з мікротитрувального планшета клітини піддають лізису через додавання 100мкл лізисного буфера (25ММ Тгів-фосфату, рн 7,8, 2ММ дитіотреїтолу, 2ММ о 1,2-діаміноциклогексан-М,М,М',М'-тетраоцтової кислоти (СОТА), 1095 (об'єм:об'єм) гліцерину, 1956 (обємоб'єм) ду
Тиійоп Х-100). Через 15хв інкубація при кімнатній температурі 1Омкл лізату клітин переносять до придатного 39 для люмінометричного виявлення білого мікротитрувального планшета (Оупаїесн). в
Ферментну реакцію викликають через додавання 5Омкл аналітичного буфера (20мММ трицину, рН 7,8, 1,07мММ (МоСО3)Мо(ОН)2) 2,67ММ Ма9зоО,, 0,1ММ етилендіамін-тетраоцтової кислоти (ЕОТА), 33,9ММ дитіотреїтолу, 27ОмМкМ коферменту А, 470мкМ люциферину світляка (Рпоїіпиз ругаїїв), 530МкМ гАТРМа»). Через одну хвилину « для загального часу в одну секунду визначають люмінесценцію з половинним часом сигналу у п'ять хвилин із З 50 застосуванням ЕС Вегійоїа Місгої итас І В 96 Р. с У Таблиці 2 зібрано фізико-хімічні та іп міго дані сполук згідно з винаходом. ІСво стосується функціональної
Із» активності, а пМ означає кількість пікомолів на літр. Розчинність у воді визначали описаним у примітці 2) способом:
В.
Ф о з о ов
Ф)
ГІ Визначення розчинності способом Атізбіай у розчині Рингера:
Для визначення розчинності способом Атізріай випробувану речовину в надлишковій кількості змішують з во інертним носієм, таким як пісок, і поміщують у скляну колонку (об'єм приблизно ТОмл). На дні колони заздалегідь установлювали фільтри з вати та скловолокти. Суміш речовини з піском 1 годину замочують у 1,0мл розчинника, в якому має бути визначена її розчинність. Відразу за цим 1Омл розчинника заливають у скляну колонку. Розчин качають циклічно за допомогою шлангового насоса. Визначення здійснюють при кімнатній температурі (приблизно 202С). Розчинність визначають, коли масова концентрація послідовно взятих фракцій є 65 незмінною. Визначення масової концентрація здійснюють за допомогою описаного нижче НРІ С-способу.
НРІ С-Спосіб:
Обладнання
НРІ сС-система: Немлек РасКага 1100; Оесеіесіоп Неміейї Раскага СА Зегієвз 1100
Колонка:
Матеріал колонки: Мисіеовікю 120-3 Св
Розмір частинок: Змкм
Розмір колонки: 125хімм
Виробник: МасНегеу 8. Маде!
Параметри обладнання: 70 Об'єм ін'єкції: 15мкл
Швидкість потоку: 1,Омл/хв
Температура печі: 4596
Довжина хвилі: 22бнм
Час припинення: 15хв 5576 рухомої Фази А: змішують 97Омл Міїїй-О-Н2О, ЗОмл ацетонітрилу та їмл трифтороцтової кислоти.
Кінцевий рівень рН становить приблизно 1,9. 45956 рухомої фази В: змішують Зб0Омл Міїй-2-Н20, 700мл ацетонітрилу та їмл трифтороцтової кислоти.
Кінцевий рівень рН становить приблизно 1,8.
Введення сполук згідно з винаходом може відбуватися в різних прийнятних для пептидних активних речовин формах. Підходящі способи введення є добре відомими спеціалістам. Введення може відбуватися, наприклад, шляхом ін'єкції. Введення може відбуватися, наприклад, парентеральним шляхом. Перевагу віддають підшкірному (5.с), внутрішньом'язовому (і.т.), внутрішньовенному (і.м.-), букальному (наприклад, під'язиковому) або ректальному введенню. Особливу перевагу віддають і.5. та і.п. введенню.
Сполуки згідно з винаходом є придатними для одержання різних форм застосування, наприклад, для Га ліофілізатів, розчинів або суспензій. Придатні форми застосування та їх одержання спеціалістам відомі.
Придатними допоміжними речовинами та наповнювачами є, наприклад, гексити, такі як маніт, зокрема О-маніт, о
Ї-маніт або 0, -маніт, сорбіт, такий як Ю-сорбіт, Ю- або І-альтрит, ідит, глюцит та дульцит. Приготування відбувається відомими спеціалістам способами, наприклад, шляхом перемішування, суспендування або ліофілізації. о
Приклад А: Ліофілізат для 1мг сполуки згідно з Прикладом 1 для одержання підшкірного ін'єкційного розчину (відповідно 0,26-0,27мг ацетатної солі); 0-16,9 масових частин ЮО-маніту, в оптимальному варіанті 0,1-7 - масових частин, усе - по відношенню до Прикладу 1, та вода для ін'єкційних цілей (для одержання ін'єкційного о розчину з ліофілізату).
Одержання: 1,62г композиції за Прикладом 1 розчиняють у 30965-й оцтовій кислоті (приблизно 1,5 літра води о для ін'єкційних цілей та 91,17г оцтової кислоти). Розчин розводять водою у кількості 1,5 літра. Додають 82,2г ч- маніту, фільтрують через стерильний фільтр, розфасовують по 2мл стерильних ін'єкційних ампул в асептичних умовах і висушують шляхом заморожування. Одержують 1мг ліофілізату сполуки згідно з Прикладом 1.
Сполуки згідно з винаходом є придатними, наприклад, для лікування злоякісних або незлоякісних « гормональнозалежних захворювань, наприклад, для лікування карциноми молочної залози, карциноми передміхурової залози, ендометріозу, міоми матки, доброякісної гіперплазії передміхурової залози (ВРН), а - с також для лікування жіночих або чоловічих порушень плідності, наприклад, для профілактики передчасного ц викидання яйцеклітини у пацієнток, підданих контрольованій оваріальній стимуляції з наступним забиранням "» яйцеклітини та штучним заплідненням. Вищевказані приклади лікування можуть бути застосовані до ссавців, зокрема, людини. їм Фо рмула винаходу се) о 1. Сполуки загальної формули 1 - 20 А-Ххх -Ххх?-ХххЗ-Ххх"-Ххх?-Хххб-Ххх /-ХххЗ-Ххх?-Ххх 9-МН» (1), де с А являє собою ацетильну групу,
Ххх" являє собою О-Ма|(2),
Ххх? являє собою О-Сра, 52 ХххЗ являє собою О-Ра/(3),
Ф! Ххх" являє собою 5ег, з Ххх? являє собою М-Ме-Туг,
Ххх? являє собою 0-Сії або О-(Е-М'-4-(4-амідинофеніл)-аміно-1,4-діоксо-бутилі-І ув (скорочено: О-І ув(В)), во Ххх" являє собою Міє,
Ххх? являє собою Аг або І ув(ІРг),
Ххх? являє собою Ро, і
Ххх "о являє собою О-Аїа або Заг, за виключенням сполуки, у якій Ххх? являє собою 0-сСії і Ххх "о являє собою Заг, бо а також їх солі з фармацевтично прийнятними кислотами.
Claims (1)
- 2. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: Ас-0-МаІ(2)1-0-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Ме "-АгодЗ-Рго?-Загпо-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.З. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: Ас-0-Ма(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Зег"-М-Ме-Туг?-О-І ув(В) 9-Міе "-Агоб-Рго?-О-АІа"0-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.4. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туго-О-І ув(В) 9-Міе І ув(іРг)8-Рго?-Заг'9-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.5. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: Ас-О-Маї(2)1-0-Рне(4-СІ)2-О-Ра(3)3-Зег"-М-Ме-Туг?-О-І ув(В)9-Міе 7-І ув(іР)З-Рго?-О-АїІа"9-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.6. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: 19 Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туг-О-Сіб-Ме"-АгудЗ-Рго?-О-АЇа"9-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.7. Сполука за п. 1, яка відрізняється тим, що має формулу: Ас-0-МаІ(2)1-О-Сра?-О-РаІ(3)3-Бег'-М-Ме-Туг-О-Сіб-Ме"-І ув(іРг)8-Рго?-О-АІа"9-МН», або її сіль з фармацевтично прийнятними кислотами.8. Сполука за будь-яким з пп. 1 - 7, яка відрізняється тим, що сіль являє собою ацетат, трифторацетат або ембонат.9. Сполука за будь-яким з пп. 1-8, яка відрізняється тим, що її застосовують як лікарський засіб.10. Фармацевтична композиція, яка включає принаймні одну сполуку за будь-яким з пп. 1 - 8, а також традиційні носії та допоміжні речовини. сч » 11. Спосіб одержання сполук загальної формули 1 за будь-яким з пп. 1 - 7, у якому фрагмент з ланок Ххх " (о) з відповідними захисними групами, де т відповідає цілому числу від 1 до 10,|і Ххх є ацетильованим, загальноприйнятими методами синтезують на твердому носії або у розчині, потім фрагменти конденсують на твердому носії шляхом сегментного з'єднання і після завершення з'єднання сполук загальної формули 1 їх о зо Відщеплюють від твердої фази загальноприйнятим методом амідування по ланці Ххх 9,12. Застосування сполук за будь-яким з пп. 1-34 для одержання лікарських засобів для лікування - гормональнозалежних пухлин, зокрема карциноми передміхурової залози, раку молочної залози або міоми су матки, а також незлоякісних показань, лікування яких вимагає пригнічення І Н-КН-гормону, таких як ендометріоз, доброякісна гіперплазія передміхурової залози (ВРН) або для лікування порушень жіночої або чоловічої ме) фертильності у ссавців, зокрема людини. ї-13. Спосіб одержання фармацевтичної композиції за п. 10, який відрізняється тим, що принаймні одну сполуку за будь-яким з пп. 1-8 змішують з традиційними носіями та допоміжними речовинами і формулюють як лікарський засіб.14. Спосіб лікування гормональнозалежних пухлин, зокрема карциноми передміхурової залози, раку « Молочної залози або міоми матки, а також незлоякісних захворювань, лікування яких вимагає пригнічення в с І Н-КН-гормону, таких як ендометріоз, доброякісна гіперплазія передміхурової залози (ВРН), та лікування порушень жіночої або чоловічої фертильності у ссавців, зокрема людини, який відрізняється тим, що вводять ;» ефективну дозу принаймні однієї сполуки за будь-яким з пп. 1-8. Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних -І мікросхем", 2007, М 7, 25.05.2007. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і науки України. се) («в) - 50 (42) Ф) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/525,007 US6627609B1 (en) | 1999-03-17 | 2000-03-14 | LHRH antagonists having improved solubility properties |
| PCT/EP2001/002719 WO2001068676A2 (de) | 2000-03-14 | 2001-03-12 | Lh-rh-antagonisten, deren herstellung und verwendung als arzeimittel |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA79070C2 true UA79070C2 (en) | 2007-05-25 |
Family
ID=24091545
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA2002108075A UA79070C2 (en) | 2000-03-14 | 2001-12-03 | Novel lhrh-antagonists, production and use thereof as medicament |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1268522B1 (uk) |
| JP (1) | JP3805679B2 (uk) |
| KR (1) | KR100607396B1 (uk) |
| CN (2) | CN1443195A (uk) |
| AT (1) | ATE408619T1 (uk) |
| AU (2) | AU2001260110B2 (uk) |
| BG (1) | BG107121A (uk) |
| BR (1) | BR0109279A (uk) |
| CA (1) | CA2402193C (uk) |
| DE (1) | DE50114335D1 (uk) |
| DK (1) | DK1268522T3 (uk) |
| ES (1) | ES2312435T3 (uk) |
| HR (1) | HRP20020810A2 (uk) |
| HU (1) | HUP0300222A3 (uk) |
| IL (1) | IL151647A0 (uk) |
| MX (1) | MXPA02008870A (uk) |
| NO (1) | NO20024363L (uk) |
| NZ (1) | NZ521273A (uk) |
| PL (1) | PL357999A1 (uk) |
| PT (1) | PT1268522E (uk) |
| RU (1) | RU2248982C9 (uk) |
| SK (1) | SK14332002A3 (uk) |
| UA (1) | UA79070C2 (uk) |
| WO (1) | WO2001068676A2 (uk) |
| ZA (1) | ZA200207248B (uk) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100340572C (zh) * | 2004-12-01 | 2007-10-03 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 新的lhrh拮抗剂 |
| CN101037472B (zh) * | 2006-03-14 | 2013-03-27 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 具有低组胺释放作用的促黄体生成素释放激素拮抗剂 |
| AU2009206212B2 (en) | 2008-01-24 | 2014-01-16 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Lytic domain fusion constructs and methods of making and using same |
| CN101597321B (zh) * | 2008-06-03 | 2013-04-24 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 长效低组胺释放副作用的lhrh拮抗剂 |
| WO2010142060A1 (zh) * | 2009-06-11 | 2010-12-16 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 长效低组胺释放副作用的lhrh拮抗剂 |
| IL238323B2 (en) | 2012-10-30 | 2023-11-01 | Esperance Pharmaceuticals Inc | Antibody/drug conjugates and methods of use |
| CN104418936B (zh) * | 2013-08-20 | 2018-06-05 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | Lhrh拮抗剂衍生物及其药物用途 |
| FR3024612B1 (fr) * | 2014-08-04 | 2018-03-09 | Alstom Transp Tech | Module d'alimentation electrique d'un bloc moteur, systeme de traction et vehicule electrique associe |
| RU2585367C1 (ru) * | 2014-11-05 | 2016-05-27 | Наталья Владимировна Спиридонова | Способ лечения бесплодия у женщин с миомой матки |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5110904A (en) | 1989-08-07 | 1992-05-05 | Abbott Laboratories | Lhrh analogs |
| US5140009A (en) | 1988-02-10 | 1992-08-18 | Tap Pharmaceuticals, Inc. | Octapeptide LHRH antagonists |
| US5300492A (en) | 1988-02-10 | 1994-04-05 | Tap Pharmaceuticals | LHRH analogs |
| IL101074A (en) | 1991-03-14 | 1997-09-30 | Salk Inst For Biological Studi | GnRH ANALOGS AND THEIR PREPARATION |
| AU1371892A (en) | 1991-04-25 | 1992-12-21 | Romano Deghenghi | Luteinizing hormone releasing hormone antagonist peptides |
| US5698522A (en) | 1992-12-04 | 1997-12-16 | Abbott Laboratories | 6-position modified decapeptide LHRH antagonists |
| DK0683792T3 (da) | 1992-12-18 | 2002-01-14 | Abbott Lab | LHRH-antagonister med modificerede aminoacylrester i stilling 5 og 6 |
| IL108509A0 (en) | 1993-02-22 | 1994-05-30 | Salk Inst For Biological Studi | GnRH antagonist peptides |
| DE4320201A1 (de) * | 1993-06-18 | 1995-01-12 | Asta Medica Ag | Verwendung von Cetrorelix und weiteren Nona- und Dekapeptiden zur Herstellung eines Arzneimittels zur Bekämpfung von Aids und zur Wachstumsstimulation |
| DE19544212A1 (de) | 1995-11-28 | 1997-06-05 | Asta Medica Ag | Neue LH-RH-Antagonisten mit verbesserter Wirkung |
| DE19911771B4 (de) | 1999-03-17 | 2006-03-30 | Zentaris Gmbh | LHRH-Antagonist, Verfahren zu seiner Herstellung und seiner Verwendung |
-
2001
- 2001-03-12 AU AU2001260110A patent/AU2001260110B2/en not_active Ceased
- 2001-03-12 DE DE50114335T patent/DE50114335D1/de not_active Expired - Fee Related
- 2001-03-12 EP EP01933682A patent/EP1268522B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-03-12 AU AU6011001A patent/AU6011001A/xx active Pending
- 2001-03-12 KR KR1020027012059A patent/KR100607396B1/ko active IP Right Grant
- 2001-03-12 RU RU2002127786/04A patent/RU2248982C9/ru active
- 2001-03-12 PL PL01357999A patent/PL357999A1/xx unknown
- 2001-03-12 MX MXPA02008870A patent/MXPA02008870A/es active IP Right Grant
- 2001-03-12 CA CA2402193A patent/CA2402193C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-03-12 PT PT01933682T patent/PT1268522E/pt unknown
- 2001-03-12 ES ES01933682T patent/ES2312435T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-03-12 CN CN01807543A patent/CN1443195A/zh active Pending
- 2001-03-12 AT AT01933682T patent/ATE408619T1/de not_active IP Right Cessation
- 2001-03-12 SK SK1433-2002A patent/SK14332002A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-03-12 WO PCT/EP2001/002719 patent/WO2001068676A2/de active IP Right Grant
- 2001-03-12 BR BR0109279-0A patent/BR0109279A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-03-12 CN CNB2006100817821A patent/CN100500692C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-03-12 DK DK01933682T patent/DK1268522T3/da active
- 2001-03-12 IL IL15164701A patent/IL151647A0/xx unknown
- 2001-03-12 HU HU0300222A patent/HUP0300222A3/hu unknown
- 2001-03-12 JP JP2001567766A patent/JP3805679B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-03-12 NZ NZ521273A patent/NZ521273A/en unknown
- 2001-12-03 UA UA2002108075A patent/UA79070C2/uk unknown
-
2002
- 2002-09-10 ZA ZA200207248A patent/ZA200207248B/en unknown
- 2002-09-12 NO NO20024363A patent/NO20024363L/no not_active Application Discontinuation
- 2002-09-18 BG BG107121A patent/BG107121A/bg unknown
- 2002-10-10 HR HRP20020810 patent/HRP20020810A2/hr not_active Application Discontinuation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100447696B1 (ko) | 펩타이드 맥관형성 억제 약제 | |
| CN107011415A (zh) | 双齿肽结合物 | |
| CA2381461C (en) | Lhrh antagonists having improved solubility properties | |
| KR100286242B1 (ko) | 돌라스타틴 유도체 | |
| JPS61122297A (ja) | 新規ハロ低級アルキルグアニジノ置換アミノ酸化合物およびその製法 | |
| UA79070C2 (en) | Novel lhrh-antagonists, production and use thereof as medicament | |
| BR112013031575B1 (pt) | Composto peptídico ciclado de estrutura principal, composição farmacêutica, uso de um composto, e, processo para a manufatura de um composto | |
| Mezö et al. | Synthesis of Gonadotropin-Releasing Hormone III Analogs. Structure− Antitumor Activity Relationships | |
| CN114031670A (zh) | 一种靶向pd-l1的多肽及其应用 | |
| CN114478707B (zh) | 一种构象锁定蜂毒肽衍生物、偶联物及其制备和用途 | |
| Grun et al. | Peptide–polyethylene glycol conjugates: Synthesis and properties of peptides bearing a C-terminal polyethylene glycol chain | |
| US6716963B1 (en) | Peptide antiangiogenic drugs | |
| He et al. | An efficient strategy for the large-scale synthesis of head-to-tail cyclic peptides | |
| CN109575108A (zh) | 以ptp1b为靶点的新型bh3模拟肽化合物及其制备方法和应用 | |
| Hamza et al. | Synthesis of Some Analogues of Polymyxin E1 Antibiotic Using Automated Solid Phase Peptide Synthesis Assisted With Microwave Irradiation | |
| KR20000070542A (ko) | Ⅱ형 콜라겐에 특이적인 ｔ 세포 에피토프를 포함하는 펩티드 | |
| JP2000500431A (ja) | Ｄ−ペプチドの発生：方法および組成物 | |
| RU2084458C1 (ru) | Декапептид, обладающий противоопухолевой активностью | |
| CN1204342A (zh) | 抗癌的肽类 | |
| CN101027316A (zh) | 肿瘤靶向剂及其应用 | |
| CN114957390A (zh) | 肿瘤靶向多肽及其应用 | |
| Jensen | Controlled high-affinity ligand presentation in engineered hybrid bilayer membrane cell culture surfaces | |
| MXPA00011490A (en) | Peptide antiangiogenic drugs |