CN1857453B - 一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法，本发明的中药组合物是由如下重量配比的原料制成的：老鹳草50-300份，黄连25-200份，黄芪50-300份，党参25-200份；并且，本发明是用老鹳草、黄连来制备结肠释放药物组分，用黄芪、党参制备胃及小肠释放药物组分，而后把两组组分混合来制造本发明的中药组合物。本发明将为中医临床提供具有一定潜力的新药物，该制剂能够得到医师和患者的接受。本发明将会形成很好的市场前景和经济、社会效益。由于目前医药市场直接用于溃疡性结肠炎治疗的现代中成药极少，本发明有机会吸引众多医药企业的关注。

Description

一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法。

背景技术

溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis，UC)是以直肠、结肠粘膜及粘膜下层的炎症和溃疡形成为病理特点的慢性非特异性肠道疾病。其发病原因及机制尚不完全清楚，该病缠绵难愈，易复发，且有癌变倾向，已被WHO列为现代难治病之一。因中医药治疗UC具有多途径、多层次、多靶点以及副作用少的特点，可以长期维持康复治疗。

近年来大量报道显示该病的发病率有明显增高趋势，已受到国内外医学界的普遍重视。在UC治疗方面，目前西医主要依靠水杨酸偶氮磺胺吡啶、5-氨基水杨酸和皮质甾类药物制剂作为治疗的主要手段，但是反弹现象严重且毒副作用较大。虽然传统中医药在该领域的应用呈日益增加的趋势，但是由于给药方法繁琐(灌肠结合口服)，给患者用药带来诸多不便。如果采用现代药剂学的最新技术之一的结肠靶向给药，可以达到药物在病灶部位的释放并保持较高浓度，有利于药效的发挥，这也是诸多中医药临床医师的期盼。

口服结肠靶向给药系统(oral colon specific drug deliverysystem，OCDDS)是90年代后期发展起来的新型给药方式，目前国内外已有部分产品上市。OCDDS是通过药物传递技术(主要包括：利用胃肠道pH值差异、利用时滞效应、利用结肠酶或细菌降解等手段)使药物口服后，在上消化道不释放，将药物运送到人体回盲部后开始释放出来，释放速度可以根据治疗的需要调节，从而使药物在人体结肠发挥明显的局部或全身治疗作用。

发明内容

为解决上述问题的不足，本发明提供一种可解决目前治疗UC疗效不好或患者顺应性差的问题的治疗溃疡性结肠炎的中药组合物及其制备方法。

以下对本发明的药用机理进行说明。

UC是现代医学病名，祖国医学虽无与其完全对等的病名，但根据其病因、病机及临床表现，常将其归属于“肠游”、“泄泻”、“久痢”、“休息痢”、“肠风”、“滞下”等范畴。对于UC的病因，现代医学尚不十分清楚，中医亦然。古今文献多认为因禀赋异常，感受外邪，饮食不节，情志失调，劳倦内伤所致。上述五种相关因素，可能是单独致病，更可能是多种病因合力致病，病位在脾胃与大小肠。其发病机理为浊邪壅塞肠中，传导失司，气机不通，气血壅滞，肠络受损，下痢赤白。现代医家对UC病机有多种认识。总体上看，多数医家对UC的认识可以归纳为：脾气亏虚为发病之本，湿热邪毒为致病之标，瘀血阻络贯穿疾病始终，内疡形成为局部病理变化。故治疗UC主要应治以健脾化湿，佐以理气行滞，调整免疫功能，诱导炎症细胞调亡，减轻炎症反应，从而达到治疗结肠炎的目的。

本发明以传统经方为基础结合现代中药药理研究，以老鹳草为君药，黄连、黄芪为臣药，党参为佐药组成.本方具有健脾理气、清热燥湿、止痢止泻的功效.本发明药物制剂设计独特，采用先进的药物制剂技术，使药物释放分为两步，一部分药物组分(健脾理气、提高免疫力的成分)在胃及小肠正常释放，另一部分药物组分(清热燥湿、止痢止泻的成分)仅在结肠病变区定位突释，避免了有效成分在胃肠内的损失，提高了药物的局部浓度从而提高治疗效果，同时也减少了对胃肠道的刺激性.

本发明最终产品为治疗UC的中药结肠靶向制剂。主要用于脾虚湿滞型UC(西医分型称为慢性持续型UC)的治疗。

本发明是以如下方式实现的。本发明为一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，该药物是由如下重量配比的原料制成的：老鹳草50-300份，黄连25-200份，黄芪50-300份，党参25-200份。

如上所述的中药组合物的制备方法，它经过如下阶段：

1)取上述重量配比的老鹳草、黄连，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-12倍量的0-90％浓度乙醇回流提取2-3次，每次0.5-3小时，合并药液；

2)上述药液减压回收乙醇，浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加水至药材量的6-12倍或加乙醇使药液醇浓度达到40-80％，静置，取上清液滤过；

3)滤液减压浓缩成相对密度1.1-1.35(60℃)的稠膏真空干燥，或将滤液浓缩至相对密度1.05-1.2(60℃)喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉1；

4)药物细粉1加入适量辅料制成球形颗粒，备用；

5)按1∶1-1∶4的比例取Eudragit L100与Eudragit S100混匀，加无水乙醇配成浓度5-8％的醇溶液，加适量增塑剂，配成薄膜衣液，备用；

6)用所述薄膜衣液对所述球形颗粒进行包衣，包衣后的球形颗粒I备用；

7)取上述重量配比的黄芪、党参，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-10倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-2小时，合并药液；

8)药液减压浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加入吸附澄清剂使出现絮状沉淀，静置，取上清液滤过；

9)滤液减压浓缩成稠膏真空干燥，或将滤液直接喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉2；

10)药物细粉2直接入药或加入适量辅料制成颗粒II，备用；

11)取颗粒I和颗粒II均匀混合，制得成品。

把上述成品加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等，以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用剂型，如丸剂、散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、口服液等。

本发明具有健脾理气、清热燥湿、止痢止泻的功效，适用于治疗溃疡性结肠炎。本发明将为中医临床提供具有一定潜力的新药物，该制剂能够得到医师和患者的接受。本发明将会形成很好的市场前景和经济、社会效益。由于目前医药市场直接用于UC治疗的现代中成药极少，本发明有机会吸引众多医药企业的关注。

具体实施方式

以下结合试验例和实施例对本发明进行更为详细的说明。

实施例1

本发明的药物是由如下重量的原料制成的：老鹳草100g，黄连50g，黄芪100g，党参50g.

并且，本发明的药物是通过如下阶段制备的：

1)取上述重量的老鹳草、黄连切片或粉碎成粗粉，加入10倍药材量70％乙醇浸泡2小时后回流提取2次，每次1小时，合并药液；

2)上述药液减压回收乙醇，浓缩至药材量的1倍，浓缩液加水至药材量的10倍静置，取上清液滤过；

3)滤液减压浓缩成相对密度1.1(60℃)，喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉1；

4)药物细粉1加入适量微晶纤维素等制成球形颗粒，备用；

5)按1∶3的比例取Eudragit L100与Eudragit S100混匀，加无水乙醇配成6％的醇溶液，加邻苯二甲酸二丁酯为增塑剂，配成薄膜衣液，备用；

6)上述球形颗粒以上述薄膜衣液包衣，包衣后的球形颗粒I，备用；

7)取上述重量的黄芪、党参切片或粉碎成粗粉，加入药材6-10倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-2小时，合并药液；

8)药液减压浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加入吸附澄清剂使出现絮状沉淀，静置，取上清液滤过；

9)滤液减压浓缩成稠膏真空干燥，或将滤液直接喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉2；

10)药物细粉2加入适量辅料制成颗粒II，备用；

11)取颗粒I和颗粒II均匀混合，装胶囊，即得。

服用方法：成人每次4粒，每日2次。

实施例2

本发明的药物是由如下重量的原料制成的：老鹳草90g，黄连40g，黄芪90g，党参40g。

并且，本发明的药物是通过如下阶段制备的：

1)取上述重量的老鹳草、黄连切片或粉碎成粗粉，加入10倍药材量70％乙醇浸泡2小时后回流提取2次，每次1小时，合并药液；

2)上述药液减压回收乙醇，浓缩至药材量的1倍，浓缩液加水至药材量的10倍静置，取上清液滤过；

3)滤液减压浓缩成相对密度1.1(60℃)，喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉1；

4)药物细粉1加入适量微晶纤维素等制成球形颗粒，备用；

5)按1∶3的比例取Eudragit L100与Eudragit S100混匀，加无水乙醇配成6％的醇溶液，加邻苯二甲酸二丁酯为增塑剂，配成薄膜衣液，备用；

6)上述球形颗粒以上述薄膜衣液包衣，包衣后的球形颗粒I，备用；

7)取上述重量的黄芪、党参切片或粉碎成粗粉，加入药材6-10倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-2小时，合并药液；

8)药液减压浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加入吸附澄清剂使出现絮状沉淀，静置，取上清液滤过；

9)滤液减压浓缩成稠膏真空干燥，或将滤液直接喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉2；

10)药物细粉2加入适量辅料制成颗粒II，备用；

11)取颗粒I和颗粒II均匀混合，加入羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁适量，压片，包糖衣或薄膜衣即得。

服用方法：成人每次4片，每日2次。

试验例1制剂的药理、毒理学研究

1、实验材料

1.1动物：

Wistar雄性大鼠，体重220～250g，由吉林大学基础医学院实验动物室提供；昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由延边大学医学部实验动物科提供。

1.2药物：

中药复方结肠靶向胶囊(以下简称中药胶囊)每1g内容物相当于8.75g生药，临床成人4粒/次，2次/日，0.50g/粒，延边大学药学院制，批号：20051010；柳氮磺胺吡啶(Sulfasalazine Tablets，SASP)，上海三维制药有限公司产品，批号：20050103；固本益肠片，沈阳绿洲制药责任有限公司产品，批号：20050306。

1.3试剂盒：

丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、过氧化氢酶(CAT)、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒购于南京建成生物工程研究所，批号为20051024。

1.4试剂：

2，4-二硝基氯苯：日本东京化成贩卖株式会社提供。1.4仪器TDL-40B型离心机(上海安亭科学仪器厂造)，723A型可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司造)，GB204型电子天平(瑞士造)。

2、实验方法与结果

2.1急性毒性研究：

取小鼠随机分为5组，每组10只。将中药胶囊内容物给小鼠灌胃，根据预实验，最高剂量定为87.5g(生药)/kg，相当于临床用药量350倍，以0.8的比例递减，即为87.5、70、56、44.8、35.8g(生药)/kg五个剂量组。给药前小鼠禁食6h，24小时内一次性灌胃给药途径，每只小鼠剂量：0.2ml/10g。给药后记录小鼠各种中毒症状及死亡情况，死亡动物进行尸检解剖。连续观察14天。

结果：给药后1小时内小鼠自主活动明显减少，多数静卧，趴着不动，闭眼。1小时后小鼠陆续开始活动。外观行为活动与对照组小鼠无明显差异。粪便中有药物颜色。其他未见异常。2小时内，有2只小鼠死亡。解剖：小鼠胃体大，肠胀气，肝脏颜色加深，心、脾、肺、肾未见明显异常。存活小鼠第二日，又有5只小鼠死亡，死亡小鼠眼边有分泌物，其他症状同上。存活下来的小鼠，吃食物后，外观症状有所好转，活动增多，毛色光亮，粪便正常，体重增加。未见其他异常表现。死亡动物尸检未见脏器明显病变。死亡率用简化机率单位法求得LD50为55.4g(生药)/kg。结论：制剂毒性非常低，使用安全、方便。

2.2药效学研究

2.2.1对2，4-二硝基氯苯所致免疫型溃疡性结肠炎的影响：

取成年健康大鼠(200-220g)适应性喂养1周后，颈背部脱毛，每天用20g/L DNCB丙酮液(DNCB2.0g∶丙酮100ml)滴背一次，每次每鼠5滴，连用14d致敏。其后向肛内8cm处的结肠肠腔注入0.04mmol/L二硝基氯苯乙醇液(1g DNCB/50％乙醇100ml)一次，每次每鼠0.35ml，连续4d。造模第一天开始给药。动物随机分为正常组、模型组、阳性药对照组、中药胶囊高、中剂量组、低剂量组，共7组，每组15只。正常组与模型组予以饮用水灌胃，每日1次，共3周；阳性药对照组：固本益肠片、柳氮磺胺吡啶(SASP)，按相当于人的中等治疗剂量，灌胃给予大鼠SASP混悬液0.86g/Kg，每日1次，共3周；中药胶囊高、中、低剂量组分别以生药5.54g、2.77g、1.39g/kg，相当于中药胶囊内容物0.63g、0.32g、0.16g/kg灌胃给药，每日1次，共3周。

于造模完成后第4天，将禁食不禁水24h的大鼠称体重后以10％的水合氯醛(300mg/Kg)腹腔注射麻醉，背位固定。大鼠剖开胸腔，心脏采血，离心，取血清，-80℃保存，测定MDA、SOD、CAT。摘取胸腺、脾脏和结肠(肛门2cm处至盲肠段)。结肠沿肠系膜纵向剪开，用冷生理盐水冲洗掉肠内容物，肉眼观察结肠粘膜损伤的情况，以结肠粘膜损伤指数评分，评分标准见表1。称脾脏、结肠重量，计算脾脏、结肠重指数(均以重量/体重)。结肠刮取粘膜，在冰浴中匀浆，离心，取上清液，-80℃保存，测定MDA、SOD、NO等。另取一些结肠病变部位，甲醛固定，石蜡包埋，HE染色，光镜下观察病理组织学变化。

表1  结肠粘膜损伤指数评分标准

结果：

(1)造型：

14日3只大鼠结肠光镜下可见：大量炎细胞浸润，粘膜和粘膜下充血水肿，杯状细胞减少，造型21日3只大鼠结肠大量炎细胞浸润，粘膜和粘膜下充血水肿，杯状细胞减少，腺体大部分破坏，粘膜脱落坏死。证明免疫型溃疡性结肠炎模型成立。

(2)一般外观：

各组大鼠在DNCB丙酮液滴背2d起可见局部皮炎症损害及结痂，约6d后动物毛色失去光泽，部分有稀便。模型组精神倦怠甚至萎靡，活动及进食明显减少。但精神状态、活动及进食与模型组相比，阳性药对照组与低剂量组有所改善，高剂量组有明显改善。DNCB乙醇液灌肛第2d起各组大鼠腹泻，其肛周污秽，粪便恶臭，第4d部分大鼠有血便或粘液便，模型组症状比较严重，低剂量组较模型组有所好转，阳性药对照组与高剂量组有明显好转迹象。

(3)结肠组织病理观察：

光学显微镜下可见模型组结肠粘膜水肿，大量炎性细胞浸润，粘膜上皮脱落，溃疡形成呈显著病理改变。阳性药对照组和低剂量组结肠粘膜上皮显著增生，粘膜下肌层增厚，溃疡形成较模型组少而轻尚可见肠粘膜形成瘢痕组织，但阳性药对照组恢复状况好于低剂量组和中剂量组，高剂量组更接近于正常组，瘢痕组织也小于阳性药对照组。表明此中药复方对UC有一定的预防与治疗作用。

(4)对生理指标的影响：

肉眼观察结肠粘膜高度充血水肿，肠壁增厚，表面有坏死及溃疡形成，溃疡成点片状，甚或出现节段性肠壁溃疡，部分动物甚至发生中毒性巨结肠导致死亡。结肠粘膜病理改变表现为上皮脱落、缺损，大量的中性粒细胞及淋巴细胞浸润，有溃疡、坏死组织形成。肠粘膜隐窝局部或弥漫性消失，粘蛋白分泌减少或缺如。溃疡周围见水肿、充血及出血。与正常组比较，造模后大鼠体重降低；因炎症、水肿、溃疡形成等面使结肠重量增加；脾胀肿大，结肠粘膜损伤指数升高。

结果见表2

表2  对大鼠生理指标的影响结果(x±S)

(注：与正常组相比，^△表示P＜0.001；与模型组相比，^*表示P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001，以下同)

(5)对大鼠血清生化指标的影响

模型组：血清中MDA含量与CAT活力明显升高，SOD活力显著降低，经统计学处理，与正常组比较有显著性差异(P＜0.001)。

其他给药组：血清中CAT、SOD活力与模型组比较有显著性差异(P＜0.001或P＜0.01)，MDA含量较模型组降低，但没有显著性差异(P＞0.05)。结果见表3。

表3  对大鼠血清MDA、SOD、CAT的影响

(6)对大鼠结肠粘膜组织生化指标的影响

模型组：结肠粘膜组织中MDA、NO含量明显升高，SOD活力显著降低，经统计学处理，与正常组比较有显著性差异(P＜0.001)。

其他给药组：结肠粘膜组织中MDA含量和SOD活力与模型组比较有显著性差异(P＜0.001，P＜0.01或P＜0.05)。SASP组、高剂量组合中剂量组的NO含量与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，但低剂量组没有显著性差异(P＞0.05)。结果见表4。

表4  对大鼠结肠粘膜组织MDA、SOD、NO的影响

讨论：

给药组与模型组比较多数检测指标均有显著差异；给药组中高、中剂量组与低剂量组相比多数指标有显著差异，高剂量组与阳性对照组相比多数检测指标无显著性差异；研究结果提示该制剂对治疗大鼠试验性溃疡性结肠炎具有一定意义，并与给药剂量有关。

上述说明仅是对本发明实施例的详细描述，但本发明并不限定于上述实施方式。在权利要求书和说明书及其附图所示的范围之内通过一些修改，可实现不同的实施方式，而这种修改应属于本发明的范围。

Claims (3)

1.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，该药物是由如下重量配比的原料制成的：老鹳草50-300份，黄连25-200份，黄芪50-300份，党参25-200份，

它经过如下阶段制得：

1)按重量计取50-300份的老鹳草、25-200份的黄连，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-12倍量的70％浓度乙醇回流提取2-3次，每次0.5-3小时，合并药液；

2)上述药液减压回收乙醇，浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加水至药材量的6-12倍，静置，取上清液滤过；

3)滤液减压浓缩成在60℃时的相对密度1.1-1.35的稠膏真空干燥，或将滤液浓缩至在60℃时的相对密度1.05-1.2喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉1；

4)药物细粉1加入适量辅料制成球形颗粒，备用；

5)按1∶1-1∶4的比例取Eudragit L100与Eudragit S100混匀，加无水乙醇配成浓度5-8％的醇溶液，加适量增塑剂，配成薄膜衣液，备用；

6)用所述薄膜衣液对所述球形颗粒进行包衣，包衣后的球形颗粒I备用；

7)按重量计取50-300份的黄芪、25-200份的党参，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-10倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-2小时，合并药液；

8)药液减压浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加入吸附澄清剂使出现絮状沉淀，静置，取上清液滤过；

9)滤液减压浓缩成稠膏真空干燥，或将滤液直接喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉2；

10)药物细粉2直接入药或加入适量辅料制成颗粒II，备用；

11)取颗粒I和颗粒II均匀混合，制得成品。

2.根据权利要求1所述的一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物，该药物组合物为：老鹳草100份，黄连50份，黄芪100份，党参50份。

3.一种治疗溃疡性结肠炎的中药组合物的制备方法，它经过如下阶段：

1)按重量计取50-300份的老鹳草、25-200份的黄连，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-12倍量的70％浓度乙醇回流提取2-3次，每次0.5-3小时，合并药液；

2)上述药液减压回收乙醇，浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加水至药材量的6-12倍，静置，取上清液滤过；

3)滤液减压浓缩成在60℃时的相对密度1.1-1.35的稠膏真空干燥，或将滤液浓缩至在60℃时的相对密度1.05-1.2喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉1；

4)药物细粉1加入适量辅料制成球形颗粒，备用；

5)按1∶1-1∶4的比例取Eudragit L100与Eudragit S100混匀，加无水乙醇配成浓度5-8％的醇溶液，加适量增塑剂，配成薄膜衣液，备用；

6)用所述薄膜衣液对所述球形颗粒进行包衣，包衣后的球形颗粒I备用；

7)按重量计取50-300份的黄芪、25-200份的党参，切片或粉碎成粗粉，加入药材6-10倍量的水煎煮提取2-3次，每次0.5-2小时，合并药液；

8)药液减压浓缩至药材量的0.5-3倍，浓缩液加入吸附澄清剂使出现絮状沉淀，静置，取上清液滤过；

9)滤液减压浓缩成稠膏真空干燥，或将滤液直接喷雾干燥，干燥物粉碎过60-100目筛，得药物细粉2；

10)药物细粉2直接入药或加入适量辅料制成颗粒II，备用；11)取颗粒I和颗粒II均匀混合，制得成品。