CN1723023A - 在性功能障碍治疗中用作多巴胺激动剂的吗啉衍生物 - Google Patents
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- CN1723023A CN1723023A CN 200380105677 CN200380105677A CN1723023A CN 1723023 A CN1723023 A CN 1723023A CN 200380105677 CN200380105677 CN 200380105677 CN 200380105677 A CN200380105677 A CN 200380105677A CN 1723023 A CN1723023 A CN 1723023A
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Abstract
本发明提供式(I)、(Ia)和(Ib)化合物，其中：A选自C－X和N，B选自C－Y和N，R1选自H和(C1－C6)烷基，R2选自H和(C1－C6)烷基，X选自H、HO、C(O)NH2、NH2，Y选自H、HO、NH2、Br、Cl和F，Z选自H、HO、F、CONH2和CN；及其药学上可接受的盐、溶剂化物和前体药物；其条件是：就式(I)、(Ia)或(Ib)化合物而言，若A是C－X，B是C－Y，则X、Y和Z至少有一个必须是OH；就式(I)化合物而言，若A是C－X，B是C－Y，Y是H，Z是H，R1是H，R2是H，则X不能是OH；这些化合物可用作多巴胺激动剂，用于治疗例如性功能障碍。
Description
本发明涉及一类多巴胺激动剂，更确切为一类对D3有选择性而优于D2的激动剂。这些化合物可用于治疗和/或预防性功能障碍，例如女性性功能障碍(FSD)，特别是女性性唤起障碍(FSAD)，和男性性功能障碍，特别是男性勃起功能障碍(MED)。本文所称男性性功能障碍包括射精障碍，例如早泄、性感缺失(不能达到性高潮)，或者性欲障碍，例如性欲过少症(HSDD；缺乏对性的兴趣)。这些化合物还可用于治疗神经精神病学障碍和神经变性障碍。
本发明提供式(I)、(Ia)和(Ib)化合物
其中：
A选自C-X和N，
B选自C-Y和N，
R1选自H和(C1-C6)烷基，
R2选自H和(C1-C6)烷基，
X选自H、HO、C(O)NH2、NH2，
Y选自H、HO、NH2、Br、Cl和F，
Z选自H、HO、F、CONH2和CN；
及其药学上可接受的盐、溶剂化物和前体药物；
其条件是：
就式(I)、(Ia)或(Ib)化合物而言，若A是C-X，B是C-Y，R1是H或(C1-C6)烷基，R2是H或(C1-C6)烷基，则X、Y和Z中至少有一个必须是OH；
就式(I)化合物而言，若A是C-X，B是C-Y，Y是H，Z是H，R1是H，R2是H，则X不能是OH。
式(I)化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐。
式(I)化合物的药学上可接受的盐可以通过适当地将式(I)化合物与所需酸或碱的溶液混合在一起而容易地制备。盐可以从溶液中沉淀出来，过滤收集，或者可以通过蒸发溶剂来回收。
适合的酸加成盐是从生成无毒性盐的酸生成的，实例有盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、糖二酸盐(saccharate)、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对-甲苯磺酸盐和扑酸盐。
适合的碱盐可以从生成无毒性盐的碱生成，实例有钠、钾、铝、钙、镁、锌和二乙醇胺的盐。
关于适合的盐的评述，参见Berge et al，J.Pharm.Sci.，66，1-19，1977。
式(I)化合物的药学上可接受的溶剂化物包括其水合物。
在式(I)化合物的范围内还包括其多晶型。
式(I)化合物含有一个或多个不对称碳原子，因此存在两种或多种立体异构形式。非对映异构体的分离可以这样实现，即对式(I)化合物或者其适合的盐或衍生物的立体异构体混合物采用常规技术处理，例如分步结晶、色谱或H.P.L.C.。式(I)化合物的单个对映体也可以从对应的旋光纯中间体制备，或者利用适合的手性载体拆分对应的外消旋物，例如H.P.L.C.，或者使对应的外消旋物与适合的旋光活性酸或碱(视情况而定)反应，对所生成的非对映体盐进行分步结晶。
优选的本发明化合物是式(Ia)和(Ib)化合物。
特别优选的是式(Ia)化合物。
优选地，A是C-X或N，B是C-Y。更优选地，A是N，B是C-Y。更优选地，A是C-X，B是C-Y。
优选地，R1选自H和(C1-C4)烷基。更优选地，R1是H、甲基和乙基。进而更优选地，R1是H或甲基。最优选地，R1是H。
优选地，R2选自H和(C1-C4)烷基。更优选地，R2选自H、甲基和乙基。最优选地，R2选自H和甲基。
在特别优选的实施方式中，R2是H。在另外特别优选的实施方式中，R2是甲基。
优选地，X选自H、OH和NH2。最优选地，X选自H和OH。
在特别优选的实施方式中，X是H。在另外特别优选的实施方式中，X是OH。
优选地，Y选自H、NH2、Cl和F。最优选地，Y选自H和NH2。
在特别优选的实施方式中，Y是H。在另外特别优选的实施方式中，Y是NH2。
优选地，Z选自H、HO和F。最优选地，Z选自H或HO。
在特别优选的实施方式中，Z是H。在另外特别优选的实施方式中，Z是HO。
特别优选的是如本文所例证的本发明化合物(及其盐)；更优选的是：
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例7A)
S-(+)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例7B)
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚盐酸盐(实施例8)
R-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚(实施例15A)
S-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚(实施例15B)
R-(+)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例23A)
S-(-)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例23B)
2-溴-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例30)
2-羟基-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯甲酰胺(实施例35)
2-硝基-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例36)
2-氨基-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例37)
5-(4-丙基吗啉-2-基)吡啶-2-基胺(实施例44A和44B)
2-氯-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例54)
3-[(5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]苯酚(实施例60)
5-[(2S，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺(实施例66)
5-[(2R，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺(实施例67)
最优选的是：
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例7A)
S-(+)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例7B)
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚盐酸盐(实施例8)
R-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚(实施例15A)
S-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚(实施例15B)
R-(+)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例23A)
S-(-)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例23B)
5-(4-丙基吗啉-2-基)吡啶-2-基胺(实施例44A和44B)
2-氯-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚(实施例54)
5-[(2S，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺(实施例66)
5-[(2R，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺(实施例67)
本发明化合物可以按照已知方式、多种途径制备。下列途径阐述合成式(I)化合物的方法；技术人员将领会到用适当的拆分技术可以分离式(Ia)和(Ib)化合物。
按照反应流程1可以制备这样的式(I)化合物，其中A是C-X，B是C-Y，R1是H或(C1-C6)烷基，R2是H，其中X、Y和Z是如本文所述的。
流程1
式(III)化合物可以这样制备，即使式(II)醛与i)氰化物源或硝基甲烷反应，继之以ii)用硼烷、氢化铝锂或氢化作用还原。一些式(II)和(III)化合物也是商业上可得到的。
式(IV)化合物可以这样制备，即在适合的碱(例如三乙胺或4-甲基吗啉)的存在下，使式(III)化合物与iii)酰氯反应。典型的反应条件包含1.0当量胺(III)、1.2-2.0当量碱(优选三乙胺)、1.1-1.3当量酰氯，在二氯甲烷中，在25℃下。
式(V)化合物可以这样制备，即将式(IV)化合物用iv)还原剂(例如硼烷或氢化铝锂)还原。典型的条件包含1.0当量酰胺(IV)、1.2-3.0当量硼烷，在THF中，在回流下。式(V)化合物也可以这样制备，即在氰基硼氢化钠的存在下，将式(III)化合物用适合的醛还原性胺化。
式(VI)化合物可以这样制备，即在碱(例如三乙胺、碳酸钠和氢氧化钾)的存在下，使式(V)化合物与v)氯乙酰氯或者2-取代的氯乙酰氯(例如2-氯丙酰氯或2-氯丁酰氯)反应。典型的条件包含1.0当量胺(IV)、1.0-1.3当量酰氯、1.2-2.0当量三乙胺，在二氯甲烷中，在25℃下，然后将粗反应混合物溶于含有1.2-3.0当量含水氢氧化钾的IPA中。
式(I)化合物可以这样制备，即使式(VI)化合物与vi)还原剂(例如硼烷或氢化铝锂)反应。典型的条件包含1.0当量酰胺(VI)、1.2-3.0当量硼烷，在THF中，在回流下。
技术人员将领会到，由于X、Y或Z之一是羟基，将有必要在流程1的转化作用期间用适合的保护基团保护该羟基，然后除去保护基团。酚基团的去保护方法取决于保护基团。关于保护/去保护方法的实例，参见″Protective groups in Organic synthesis″，TW Greene and PGMWutz。例如，若羟基以甲基醚的形式被保护，则去保护条件包含在48％含水HBr中回流1-24小时，或者与三溴化硼烷在二氯甲烷中搅拌1-24小时。或者，若羟基以苄基醚的形式被保护，则去保护条件包含在氢气氛下用钯催化剂氢化。
按照反应流程2可以制备这样的式(I)化合物，其中A或B之一是N，R1是H或(C1-C6)烷基，R2是H，X、Y和Z是如本文所述的，其条件是X、Y或Z之一是NH2。该流程阐述了其中B是C-Y、Y是NH2的情况；技术人员将理解，其他化合物是同样可以实现的。
流程2
式(VII)化合物可以利用JP2001048864中描述的工艺制备。
式(VIII)化合物可以通过使环氧化物(VII)与vii)丙胺反应而制备。典型的反应条件包含搅拌环氧化物与过量胺，这种搅拌中单独进行的或者在二甲基亚砜中进行。
式(IX)化合物可以这样制备，即在碱(例如三乙胺、碳酸钠和氢氧化钾)的存在下，使式(VIII)化合物与v)氯乙酰氯或者2-取代的氯乙酰氯(例如2-氯丙酰氯或2-氯丁酰氯)反应。典型的条件包含1.0当量胺(VIII)、1.2-2.0当量三乙胺，在二氯甲烷中，在25℃下，然后将粗反应混合物溶于含有1.2-3.0当量含水氢氧化钾的IPA中。
式(X)化合物可以通过使式(IX)化合物与还原剂例如氢化铝锂反应而制备。典型的条件包含1.0当量酰胺(X)、1.2当量氢化铝锂，在THF中，在回流下。
式(I)化合物可以借助ix)去保护作用而制备。典型的条件包含1.0当量化合物(X)和5当量盐酸羟胺，在乙醇中，在回流下。
按照反应流程3可以制备这样的式(I)化合物，其中A是C-X，B是C-Y，R1是H，R2是H或(C1-C6)烷基，其中X、Y和Z是如本文所述的。
流程3
式(XII)化合物可以这样制备，即在适合的碱(例如三乙胺和4-甲基吗啉)的存在下，使式(XI)氨基酸酯与x)酰氯反应。典型的反应条件包含1当量氨基酸酯(XI)、1当量酰氯和3当量碱，在二氯甲烷中，在25℃下。一些式(XI)化合物是商业上可得到的。
式(XIII)化合物可以这样制备，即使式(XII)化合物与xi)硼烷-THF配合物反应，随后用酸分解硼-氮配合物，所生成的胺进行叔丁氧羰基保护。典型的反应条件包含1当量酰胺(XII)与3当量BH3-THF，在THF中，在回流下，冷却，小心地加入6M含水HCl，加热至回流达另外6小时。随后蒸发溶剂，溶于甲醇∶水(8∶1)混合物，加入5当量碱，例如氢氧化钾，以及1.5当量二碳酸二叔丁酯，将混合物搅拌72小时。
式(XIV)化合物可以通过使式(XIII)化合物与xii)HCl的有机溶液反应而制备。典型的反应条件包含1当量氨基甲酸酯(XIII)和1-10当量4M HCl的二噁烷溶液，在二噁烷中，在25℃下。
式(XV)化合物可以通过在碱(例如三乙胺或4-甲基吗啉)的存在下使式(XIV)化合物与xiii)2-溴苯乙酮反应而制备。2-溴苯乙酮可以从商业来源获得，或者可变通地，可以从母体苯乙酮借助本领域技术人员熟知的标准溴化方法加以制备。典型的条件包含1当量氨基醇(XIV)与1-3当量三乙胺和1当量2-溴苯乙酮，在65℃下。
式(I)化合物可以通过使式(XV)化合物与xiv)三乙基硅和三甲代甲硅烷基三氟甲磺酸酯(trimethylsilyltriflate)反应而制备。典型的条件包含在二氯甲烷中，在-78℃下，向1当量吗啉醇(XV)加入5-10当量三乙基硅烷，继之以加入2当量三甲代甲硅烷基三氟甲磺酸酯。
技术人员将领会到，由于X、Y或Z之一是羟基，将有必要在流程3的转化作用期间用适合的保护基团保护该羟基，然后除去保护基团。酚基团的去保护方法取决于保护基团。关于保护/去保护方法的实例，参见″Protective groups in Organic synthesis″，TW Greene and PGMWutz。例如，若羟基以甲基醚形式被保护，则去保护条件包含在48％含水HBr中回流1-24小时，或者与三溴化硼烷在二氯甲烷中搅拌1-24小时。或者，若羟基以苄基醚形式被保护，则去保护条件包含在氢气氛下用钯催化剂氢化。
其中位于吗啉氮α位的立体中心有绝对定义的式(I)化合物可以从式(XI)纯手性化合物开始，该式(XI)化合物可以是商业上可得到的或者通过容易为技术人员获得的化学文献方法制备。所得式(I)化合物将含有非对映异构体的混合物，可以在HPLC柱上分离。典型的条件包含通过Chiralcel OJ-H柱，用100％MeOH移动相洗脱。
按照反应流程4可以制备这样的通式(I)化合物，其中A或B之一是N，R1是H，R2是H或(C1-C6)烷基，X、Y和Z是如本文所述的，其条件是X、Y或Z之一是NH2。该流程阐述其中B是C-Y、Y是NH2的情况；技术人员将理解，其他化合物同样可以适用。
流程4
式(XVIII)化合物可以通过在碱(例如三乙胺或4-甲基吗啉)的存在下使式(XVI)化合物与xv)式(XIV)氨基醇反应而制备。典型的条件包含1当量氨基醇(XIV)与1-3当量三乙胺和1当量式(XVI)化合物，使用甲苯作为溶剂，在室温或更高温度下。式(XVI)化合物是商业上可得到的。
式(IXX)化合物可以通过使式(XVIII)化合物与xvi)从式(XVII)溴化物生成的有机金属试剂反应而制备。适合的有机金属试剂包括格丽雅(有机镁)或有机锂试剂，它们可以从溴化物借助卤素金属置换作用制备。典型的条件包括在无水醚溶剂例如四氢呋喃中，在室温下，向溴化物(XVII)加入异丙基氯化镁(进行卤素金属置换反应)，继之以加入吗啉酮(XVIII)。溴化物(XVII)可以利用WO 99/32475中所述工艺制备。
在醇溶剂例如甲醇中，吗啉醇(IXX)与xvii)氢化物还原剂例如硼氢化钠反应，可以被还原为二醇(XX)。
式(XXI)化合物可以通过从二醇(XX)借助ix)去保护作用而制备。典型的条件包含1.0当量化合物(XX)和5当量盐酸羟胺，在乙醇中，在回流下。
式(I)化合物可以通过xviii)用酸处理进行式(XXI)化合物的环化作用而制备。典型的条件采用浓硫酸和二氯甲烷溶剂，在室温或更高温度下。
所有上述反应和用在前述方法中的新原料的制备都是常规的，参照所引用的文献和下面的实施例和制备例，本领域技术人员熟知适合于进行反应或制备的试剂和反应条件以及分离所需产物的工艺。
本发明化合物可以作为选择性D3激动剂在疾病状态的治疗中使用。存在大量具有D2与D3二者的激动剂活性的化合物；不过，这类化合物的使用与大量副作用有关，包括恶心、呕吐、昏厥、低血压和心动过缓，其中一些会引起严重问题。
以前认为，现有技术化合物的功效来自它们激动D2的能力；不过，D2激动作用正是上述副作用的原因。
本发明提供一类选择性D3激动剂。偶然发现它们是有效的，同时减少了与非选择性的现有技术化合物有关的副作用。
本发明化合物可用于治疗性功能障碍、女性性功能障碍(包括性欲过少症、性唤起障碍、性高潮障碍和性交痛症)、男性勃起功能障碍、高血压、神经变性、精神病、抑郁(例如癌症患者抑郁、帕金森氏病患者抑郁、心肌梗塞后抑郁、亚综合征症状性抑郁、不孕女性抑郁、儿童抑郁(paediatric depression)、重症抑郁、单发作性抑郁、复发性抑郁、疟待儿童诱发的抑郁(child abuse induceddepression)、产后抑郁和老人性情暴躁综合征)、广泛性焦虑症、恐怖(例如广场恐怖、社交恐怖和单纯恐怖)、创伤后精神紧张综合征、逃避人格障碍、早泄、进食障碍(例如神经性食欲缺乏和神经性食欲过盛)、肥胖、化学品依赖(例如对酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥、烟碱和苯并二氮杂类成瘾)、簇性头痛、偏头痛、疼痛、阿尔茨海默氏病、强迫症、恐慌症、记忆障碍(例如痴呆、健忘症和年龄相关性认知减退(ARCD))、帕金森氏病(例如帕金森氏病痴呆、神经抑制剂诱发的震颤麻痹(neuroleptic-induced parkinsonism)和迟发性运动障碍)、内分泌障碍(例如高催乳激素血症)、血管痉挛(特别是在脑脉管系统中)、小脑共济失调、胃肠道障碍(牵涉能动性和分泌的改变)、精神分裂症的负性症状、经前期综合征、纤维肌痛综合征、紧张性尿失禁、图雷特氏综合征、拔毛发癖、盗窃癖、男性阳痿、注意缺陷多动症(ADHD)、慢性发作性偏头痛、头痛(与血管障碍有关)、情绪不稳定、病理性哭喊、睡眠障碍(猝倒)和休克。
本发明化合物特别适合于治疗女性性功能障碍、男性勃起功能障碍、神经变性、抑郁和精神病学障碍。
本发明化合物可用于男性性功能障碍，特别是男性勃起功能障碍。男性勃起功能障碍(MED)也称男性勃起障碍，被定义为：
“阴茎勃起不能达到和/或维持令人满意的性表现”(NIHConsensus Development Panel on Impotence，1993)
根据估计，各种程度(轻微、中等和完全阳痿)的勃起功能障碍(ED)的患病率在40至70岁男性中是52％，70岁以上的人中患病率更高(Melman et al 1999，J.Urology，161，p5-11)。这种病症对个人和伴侣的生活质量具有显著的负面影响，经常导致焦虑和紧张增加，引起抑郁和自尊心降低。而在二十年前，MED主要被视为一种心理学障碍(Benet et al 1994 Comp.Ther.，20：669-673)，现在已知大多数个人存在器质性原因。结果，在鉴别正常阴茎勃起的机理和MED的病理生理学上已经取得巨大进展。
阴茎勃起是一种血液动力学事件，它依赖于阴茎海绵体平滑肌与阴茎脉管系统的收缩与弛张平衡(Lerner et al 1993，J.Urology，149，1256-1255)。阴茎海绵体平滑肌在本文中也称海绵体平滑肌或阴茎海绵体。阴茎海绵体平滑肌的松弛引起进入阴茎海绵体小梁状空间的血流增加，导致它们向周围的被膜膨胀，压迫引流静脉。这引起血压大为升高，导致勃起(Naylor，1998，J.Urology，81，424-431)。
发生在勃起过程期间的变化是复杂的，需要高度的协调控制，牵涉外周与中枢神经系统和内分泌系统(Naylor，1998，J.Urology，81，424-431)。海绵体平滑肌收缩经由突触后α1肾上腺素受体的活化而受到交感去甲肾上腺素能神经支配的调控。MED可能与海绵体的内在平滑肌张力增加有关。不过，海绵体平滑肌松弛的过程在部分程度上受到非肾上腺素能非胆碱能(NANC)神经传递的介导。在阴茎中发现大量除NO以外的其他NANC神经递质，例如降钙素基因相关性肽(CGRP)和血管活性肠肽(VIP)。负责介导这种松弛作用的主要松弛因子是一氧化氮(NO)，它是从L-精氨酸由一氧化氮合成酶(NOS)合成的(Taub et al1993 Urology，42，698-704)。据认为减少海绵体平滑肌张力可能有助于NO诱导海绵体的松弛。在男性性唤起期间，NO从神经元和内皮中释放，结合并激活位于平滑肌细胞和内皮中的可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)，引起细胞内环鸟苷3’，5’-一磷酸(cGMP)水平的升高。这种cGMP上升会由于细胞内钙浓度([Ca2+]i)减少而引起海绵体松弛，其机理是未知的，不过据认为与蛋白激酶G的活化有关(可能由于Ca2+泵的活化和Ca2+激活的K+通道)。
在中枢神经系统内已经鉴别了多个潜在的调控性行为的部位。关键的神经递质据认为是血清素、去甲肾上腺素、催产素、一氧化氮和多巴胺。通过模拟这些关键神经递质之一的作用，可以调节性功能。多巴胺D3受体几乎仅仅在脑缘区域中被表达，这些区域牵涉回报、情绪和认知过程。
不受任何理论的局限，似乎“由于其在运动活动控制中的角色，黑质纹状体多巴胺能途径的完整性也是表现交媾行为所必需的。不知何故，具体对性功能而言，很可能多巴胺能够通过作用于位于下丘脑室旁核中的催产素能神经元、也许还作用于脊髓内的促勃起骶骨副交感核而引发阴茎勃起”。现在，似乎显著的部位是D3，而不是以前所认为的D2。
实质上，D3是性行为的引发者。
因此，本发明提供式(I)化合物在制备治疗或预防勃起功能障碍的药品中的用途。
轻微至中度MED患者应当可以采用本发明的化合物治疗而受益，严重MED患者也可能有响应。不过，早期研究提示，轻微、中等与严重MED患者的响应率可能在选择性D3激动剂/PDE5抑制剂组合中更大。轻微、中等与严重MED将是本领域技术人员所已知的术语，不过有关知识可以参见The Journal of Urology，vol.151，54-61(Jan1994)。
早期研究提示，下述MED患者组应当可以采用选择性D3激动剂和PDE5抑制剂(或者下文所述其他组合)治疗而受益。这些患者组在Clinical Andrology vol.23，no.4，p773-782和I.Eardley与K.Sethia的书″Erectile Dysfunction-Current Investigation andManagement″，published by Mosby-Wolfe的第3章中有详细描述，如下：精神性、器质性、血管性、内分泌性、神经性、动脉性、药物诱发的性功能障碍(乳原性)和与海绵体因素相关的性功能障碍，特别是静脉性原因。
因此，本发明提供式(I)、(Ia)或(Ib)化合物与PDE5抑制剂的组合在制备治疗勃起功能障碍的药品中的用途。
适合的PDE5抑制剂是如本文所述的。
本发明化合物可用于治疗或预防女性性功能障碍(FSD)，特别是FSAD。
按照本发明，FSD可以被定义为女性难以或者不能在性表达找到满足。FSD是多种不同女性性障碍的总称(Leiblum，S.R.(1998)-Definition and classification of female sexualdisorders.Int.J.Impotence Res.，10，S104-S106；Berman，J.R.，Berman，L.&Goldstein，I.(1999)-Female sexual dysfunction：Incidence，pathophysiology，evaluations and treatment options.Urology，54，385-391)。女性可能具有性欲缺乏、唤起或性高潮困难、性交痛或者这些问题的组合。若干类型的疾病、药物治疗、损伤或心理问题都能导致FSD。处于发展中的治疗方法是以治疗具体FSD亚型为目标，主要是性欲和唤起障碍。
FSD的分类最好比照正常女性性反应的阶段：性欲、唤起和性高潮来定义(Leiblum，S.R.(1998)-Definition and classificationof female sexual disorders.Int.J.Impotence Res.，10，S104-S106)。性欲或性冲动是性表达的动力。它的表现经常包括当有感兴趣的伴侣陪伴时或者当暴露于其他性刺激时的性思想。唤起是对性刺激的血管反应，其重要组分是生殖器充血，包括阴道润滑性增加、阴道伸长和生殖器感觉/敏感性增加。性高潮是在唤起期间已经达到高潮的性张力的释放。
因此，当女性在任意这些阶段(通常为性欲、唤起或性高潮)中的反应不充分或不满足，就会发生FSD。FSD分类包括性欲过少症、性唤起障碍、性高潮障碍和性交痛症。尽管本发明化合物将改善生殖器对性刺激的反应(正如在女性性唤起障碍中)，不过与此同时它还可以改善与性交有关的疼痛、紧张和不适，因此也治疗其他女性性障碍。
如果女性没有或者少有性的欲望，并且没有或者少有性的思想或幻想，那么存在性欲过少症。这种类型的FSD可能由于因自然绝经或手术绝经引起的睾酮水平低所致。其他原因包括疾病、药物治疗、疲劳、抑郁和焦虑。
女性性唤起障碍(FSAD)是以生殖器对性刺激的反应不充分为特征的。生殖器不会经历正常性唤起所特有的充血。阴道壁的润滑性很差，以致性交是疼痛的。性高潮也可能受到阻碍。唤起障碍可能由绝经期或分娩后与哺乳期间雌激素减少所致，也可能是由于具有血管因素的疾病所致，例如糖尿病和动脉粥样硬化。其他原因包括用利尿剂、抗组胺剂、抗抑郁剂(例如选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI))或抗高血压剂治疗。
性交痛症(包括交媾困难和阴道痉挛)是以因插入而疼痛为特征的，可能由减少润滑性的药物、子宫内膜异位、骨盆炎性疾病、炎性肠疾病或尿道问题所致。
正如以前所讨论的，D3被认为是性行为的引发者。阴蒂被视为与阴茎是同源的(Levin，R.J.(1991)，Exp.Clin.Endocrinol.，98，61-69)；同一机理在男性中提供勃起反应，在女性中提供生殖器血流增加，对FSD具有有关的效应。另外，proceptivity和感受性也有变化。
因而，按照本发明的优选方面，提供了式(I)、(Ia)或(Ib)化合物在制备治疗或预防女性性功能障碍的药品中的用途，所述功能障碍更确切为性欲过少症、性唤起障碍、性高潮障碍和性交痛症。
优选地，式(I)化合物可用于治疗或预防性唤起障碍、性高潮障碍和性欲过少症，最优选地用于治疗或预防性唤起障碍。
在优选的实施方式中，式(I)、(Ia)和(Ib)化合物可用于治疗患有女性性唤起障碍并伴有性欲过少症的个体。
美国精神病学协会的The Diagnostic and Statistical Manual(DSM)IV将女性性唤起障碍(FSAD)定义为：
“......持续或反复不能达到或者维持性兴奋的充分润滑-肿胀反应到性活动完成。这种紊乱肯定导致明显的痛苦或性交困难......”。
唤起反应由骨盆的血管充血、阴道润滑与膨胀和外生殖器的肿胀组成。紊乱导致明显的痛苦和/或性交困难。
FSAD是非常普遍的性障碍，影响绝经前、绝经期和绝经后(±激素替代疗法(HRT))的女性。它与伴发的障碍有关，例如抑郁、心血管疾病、糖尿病和泌尿生殖(UG)障碍。
FSAD的初步后果是充血/肿胀的缺乏、润滑的缺乏和生殖器快感的缺乏。FSAD的继发后果是性欲减少、性交期间疼痛和达到性高潮困难。
最近有假说认为，至少一部分具有FSAD症状的患者存在血管基础的问题(Goldstein et al.，Int.J.Impot.Res.，10，S84-S90，1998)，动物数据支持了这一观点(Park et al.，Int.J.Impot.Res.，9，27-37，1997)。
R.J.Levin教导我们，因为“......男性和女性生殖器在胚胎学上从共同的组织原基发育而来，男性和女性生殖器结构据称彼此是同源的。因而，阴蒂是阴茎的同源物，阴唇与阴囊是同源的......”(Levin，R.J.(1991)，Exp.Clin.Endocrinol.，98，61-69)。
功效尚在研究中的治疗FSAD的药物候选方案主要是勃起功能障碍疗法，该疗法促进男性生殖器的血液循环。
本发明化合物为恢复正常性唤起反应——也就是增加生殖器血流，引起阴道、阴蒂和阴唇充血提供了一种手段，因而是有利的。这将经由粘液渗出、阴道顺应性增加和生殖器敏感性增加而导致阴道润滑性增加。因此，本发明提供恢复或者加强正常性唤起反应的手段。
因而，按照本发明的优选方面，提供了式(I)、(Ia)或(Ib)化合物在治疗或预防女性性唤起障碍的药品中的用途。
在本文中，女性生殖器意味着：“生殖器官由内部和外部组成。内部器官位于骨盆内，由卵巢、子宫管、子宫和阴道组成。外部器官位于泌尿生殖隔膜外表和骨盆弓下方。它们包含阴阜、大阴唇与小阴唇、阴蒂、前庭、前庭球部和大前庭腺”(Gray′s Anatomy，C.D.Clemente，13th American Edition)。
本发明化合物可应用于下列FSD患者亚群：青年、老年、绝经前、绝经期、绝经后女性，接受或者没有激素替代疗法。
本发明化合物可在因下述原因患有FSD的患者中应用：
i)血管性病因，例如心血管或动脉粥样硬化疾病、高胆固醇血、吸烟、糖尿病、高血压、辐射、会阴创伤、髂下腹阴部脉管系统的创伤性损伤。
ii)神经性病因，例如脊髓损伤或者中枢神经系统疾病，包括多发性硬化、糖尿病、震颤麻痹、脑血管意外、外周神经病、创伤或根治性骨盆手术。
iii)激素/内分泌病因，例如下丘脑/垂体/生殖腺轴的功能障碍、卵巢的功能障碍、胰腺的功能障碍、手术或药物阉割、雄激素缺陷、催乳激素高循环水平(例如高催乳激素血症)、自然绝经、卵巢早衰、甲状腺机能亢进与减退。
iv)精神性病因，例如抑郁、强迫症、焦虑症、产后抑郁/“婴儿忧郁”、情绪性与关系性问题、行为性焦虑、婚姻不和谐、功能障碍性态度、性恐怖、宗教禁忌或创伤性既往体验。
v)药物诱发的性功能障碍，由选择性血清素再摄取抑制剂(SSRis)和其他抗抑郁疗法(三环类和主要镇静安定剂)、抗高血压疗法、抗交感神经剂、长期口服避孕丸疗法引起。
本发明化合物还可用于治疗抑郁。
多巴胺D3受体几乎仅仅在脑缘区被表达，这些区域涉及回报、情绪和认知过程。长期用若干类抗抑郁剂治疗已知会增加D3在缘区中的表达，地昔帕明的抗抑郁效果能够被舒必利(D2/D3拮抗剂)所阻滞，但是要注射到伏核(富集D3的区域)而非尾状壳核(富集多巴胺D2受体的区域)。另外，在用普拉克索(一种偏爱D3的激动剂)治疗的患者和临床前期抑郁模型中观察到抗抑郁效果。可用的信息提示，D3受体介导抗抑郁活性，选择性D3受体激动剂代表新的一类抗抑郁药。由于抗抑郁剂已知对其他精神病障碍有效，故D3激动剂将具有治疗精神病的潜力。
本发明提供选择性D3激动剂在制备治疗抑郁和精神病学疾病的药物中的用途。
优选地，所述D3激动剂对D3受体表现出功能效力，其EC50低于1000nM，更优选低于100nM，甚至更优选低于50nM，最优选低于10nM。
优选地，所述D3激动剂对D3的选择性优于D2，其中所述多巴胺D3受体激动剂对多巴胺D3受体的功能选择性比对多巴胺D2受体高至少约15倍，优选至少约27倍，更优选至少约30倍，最优选至少约100倍。
适合的病症包括抑郁(例如癌症患者的抑郁、帕金森氏病患者的抑郁、心肌梗塞后抑郁、亚综合征症状性抑郁、不孕女性的抑郁、儿童抑郁、重症抑郁、单发作性抑郁、复发性抑郁、疟待儿童诱发的抑郁、产后抑郁和老人性情暴躁综合征)、广泛性焦虑症、恐怖(例如广场恐怖、社交恐怖和单纯恐怖)、创伤后精神紧张综合征、逃避人格障碍、进食障碍(例如神经性食欲缺乏和神经性食欲过盛)、肥胖、化学品依赖(例如对酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥、烟碱和苯并二氮杂类成瘾)、阿尔茨海默氏病、强迫症、恐慌症、记忆障碍(例如痴呆、健忘症和年龄相关性认知减退(ARCD))、帕金森氏病(例如帕金森氏病痴呆、神经抑制剂诱发的震颤麻痹和迟发性运动障碍)、内分泌障碍(例如高催乳激素血症)、血管痉挛(特别是在脑脉管系统中)、小脑共济失调、精神分裂症的负性症状、紧张性尿失禁、图雷特氏综合征、拔毛发癖、盗窃癖、注意缺陷多动症(ADHD)、慢性发作性偏头痛、情绪不稳定、病理性哭喊、睡眠障碍(猝倒)和休克。
在优选的实施方式中，本发明提供式(I)、(Ia)和(Ib)化合物在制备治疗抑郁或精神病学障碍的药品中的用途。
适合的抑郁性病症和精神病学障碍是如上所述的。
本发明化合物还在神经变性的治疗中具有实用性；神经变性的来源包括神经毒素中毒；由视觉路径神经变性所致视力丧失，例如视觉路径(例如视网膜、视神经和/或枕叶)中的中风；癫痫发作；脑的葡萄糖和/或氧供应减低。
因此，本发明提供选择性D3激动剂在制备治疗神经变性的药品中的用途。
优选地，所述D3激动剂对D3受体表现出的功能效力，以EC50表示，为低于1000nM，更优选低于100nM，进而更优选低于50nM，最优选低于10nM。
优选地，所述D3激动剂对D3的选择性优于D2，其中所述多巴胺D 3受体激动剂对多巴胺D3受体的功能选择性比对多巴胺D2受体高至少约15倍，优选至少约27倍，更优选至少约30倍，最优选至少约100倍。
在优选的实施方式中，D3激动剂是式(I)、(Ia)或(Ib)化合物。
除了它们在治疗性功能障碍、抑郁、神经变性和精神病学障碍中的作用以外，本发明化合物有可能对大量其他适应症也有效。
因此，本发明提供了式(I)、(Ia)或(Ib)化合物在制备药品中的用途，所述药品可用于治疗高血压、早泄、肥胖、簇性头痛、偏头痛、疼痛、内分泌障碍(例如高催乳激素血症)、血管痉挛(特别是在脑脉管系统中)、小脑共济失调、胃肠道障碍(牵涉能动性和分泌的改变)、经前期综合征、纤维肌痛综合征、紧张性尿失禁、拔毛发癖、慢性发作性偏头痛、头痛(与血管障碍有关)。
D3/D2激动剂结合测定法
Gonazalez et al(Eup.J Pharmacology 272(1995)R1-R3)公开了测定化合物对D3和/或D2多巴胺受体的结合能力、因而测定这类化合物的结合选择性的测定法。因此，这种测定法在本文中称为结合测定法。
D3/D2激动剂功能测定法
下面详细描述适合于功能性测定化合物对D3和/或D2多巴胺受体的活性的测定法。
分别观察表达人D2和D3受体的GH4C1和CHO细胞系中的cAMP水平，将化合物评价为多巴胺D2和D3受体的激动剂或拮抗剂。
实验工艺
经由多巴胺D3受体抑制毛喉素-刺激的腺苷酸环化酶活性
材料
细胞培养基：
| hD3CHO培养基 |
| DMEM，高葡萄糖(Sigma D5671) |
| 2mM L-谷氨酰胺(Sigma G7513) |
| 10％透析过的FBS(Sigma F0392) |
表达人多巴胺D3受体的hD3CHO(中国仓鼠卵巢)细胞是在实验室内生成的。这些细胞是二氢叶酸还原酶基因缺陷的。
如下每周制备新鲜的培养基，使用前通过0.22μM滤器过滤。将培养基贮存在4℃下，在加入细胞之前温热至37℃。
细胞分散溶液(Cell Dissociation Solution，CDS)：(SigmaC-5914)
使用5mL从225cm2烧瓶中收获细胞(37℃，就hD2LGH4C1细胞而言5min，就hD3CHO细胞而言10分钟)。
磷酸缓冲盐水(PBS)：(Gibco 14040-091)
台盼蓝：(Sigma T8154)
毛喉素(Calbiochem 344273)
溶于蒸馏水至浓度20mM(将该储备液贮存在+4℃下)。在PBS缓冲液中进行500倍稀释，制备40μM的4x测定储备液。加入25μL的40μM储备液至最终测定体积100μL，得到最终测定浓度10μM。
供试化合物
溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM。
普拉克索标准
溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM。
环化酶活化Flashplate测定法(NEN SMP004B)
由Perkin-Elmer Life Sciences，Inc提供。
[125I]-环腺苷一磷酸(cAMP)(NEX 130)
由Perkin-Elmer Life Sciences，Inc提供。
具体设备
Westbart微量滴定平板摇床/培养箱
Packard Topcount NXT(ECADA相容性程序)
Tecan Genesis
Labsystems Multi-drop DW
用hD3CHO细胞测试化合物活性的方案
化合物稀释液
·包括普拉克索作为参照标准。由每4只平板生成10点半对数曲线。将化合物结果标准化成由细胞生成的最小(0nM普拉克索)和最大(100nM普拉克索)反应。也可以经由10点(半对数)曲线测试全部供试化合物。
·将供试化合物溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM。进一步经由10倍稀释将它们在100％DMSO中稀释至1mM(1000x所需最终测定浓度，例如1mM将得到1μM的顶端浓度)。
·将普拉克索溶于100％DMSO，得到浓度10mM。进一步经由100倍稀释将普拉克索在100％DMSO中稀释至0.1mM。
·进一步利用合适的Tecan Genesis方案在0.4％DMSO/PBS中进行稀释和加入，该方案能够按3.159倍进行系列稀释(半对数单位)。
TECAN GENESIS稀释液
·向微量平板的第1栏加入10μL供试化合物。向其中加入240μL的0.4％DMSO/PBS，得到25倍稀释液(0.04mM)。将20μL的0.04mM稀释液转移至第2栏的小孔，向其中加入180μL的0.4％DMSO/PBS，得到进一步的10倍稀释液，达到4x顶端测定浓度(0.004mM)。
·进行系列稀释(3.159倍)，实现半对数稀释系列：4μM，1.27μM，400nM，127nM，40nM，13nM，4nM，1.27nM，0.4nM，0.1nM
·将25μL(一式两份)系列稀释液转移至Flashplate的第2-11栏(参见附录)。由于最终测定体积为100μL，故最终测定浓度将是：1000μM，317nM，100nM，32nM，10nM，3.2nM，1nM，0.3nM，0.1nM，0.03nM
·最小对照(低对照)：向第1栏小孔E-H和第2栏小孔A-D加入25μL 0.4％DMSO/PBS(载体)。稍后加入细胞+毛喉素。
·最大对照(高对照)：经由250倍稀释将10mM普拉克索稀释在PBS中(10μL+2490μL PBS)，生成40μM普拉克索。进一步经由100倍稀释将40μM普拉克索稀释在0.4％DMSO/PBS中(100μL+9900μL载体)，生成400nM(标准普拉克索的4x测定浓度)。向Flashplate的第1栏小孔A-D和第12栏小孔E-H加入25μL的400nM普拉克索，得到最终100nM普拉克索。稍后加入细胞+毛喉素。
环化酶活化Flashplate测定法(NEN SMP004B)
·如材料一节所述，将毛喉素溶于蒸馏水，达到储备液浓度20mM。进一步用PBS稀释至40μM(4x测定浓度)。利用Multi-drop向全部小孔加入25μL的40μM储备液，得到最终浓度10μM。然后将平板密封，在37℃Westbart培养箱中培育，再收获细胞。
·从烧瓶中收获细胞，它们的融合率在70％-80％之间。有必要将加入到小孔中的全部组分温热至37℃。向每只T225烧瓶加入5mLCDS，在37℃下培育5分钟，然后用5mL PBS中和。然后将细胞在160g(1000rpm)下离心5分钟。弃去所得上清液，将细胞重新悬浮在刺激缓冲液(温热至37℃)中，达到5×105细胞/mL。然后将50μL细胞悬液分配到Flashplate的全部小孔中。
·立即将平板在37℃摇动培养箱上培育15分钟。用100μL检测混合物终止全部小孔中的反应(每一平板100μL 125I cAMP：11mL检测缓冲液)。
·将平板重新密封，在暗处培育3小时，以便在抗-cAMP抗体(包被各孔)、[125I]-cAMP示踪剂与细胞cAMP之间达到平衡。
·利用合适的ECADA相容性方案(Protocol 75)在PackardTopcount NXT上对平板计数。
冷冻安瓿的复苏
从液氮中取出安瓿，使它们平衡2分钟，因为所捕集的气体或液体可能导致安瓿迅速膨胀而爆炸。也可以在融化之前将它们置于-20℃下2分钟。
在37℃水浴中使安瓿快速完全融化。
将细胞悬液转移至含有10mL生长培养基的75cm2烧瓶中，在37℃5％CO2下培育24小时。细胞附着后(3-6小时)，除去培养基，换入新鲜培养基(以除去DMSO)。24小时后，如果接近融合，则将细胞转移至225cm2烧瓶中。如果没有，则继续培养细胞直至它们达到70％-80％融合。
细胞收获与分瓶
在星期五将细胞分瓶，以提供在星期一和星期二测定用的细胞。一周其余时间所需细胞在星期一分瓶。
有必要勿使hD3CHO细胞生长超过80％融合，或者分瓶比例＞1∶20，因为这对它们的增殖反应具有有害影响，并且将随后影响细胞进行测定的能力。
使细胞生长在225cm2烧瓶(Jumbos)中。向细胞加入的每种组分必须在使用前温热至37℃。
细胞收获
从烧瓶中除去生长培养基，将细胞用温热的PBS(Gibco.14040-091)洗涤，除去。
·向细胞加入5mL细胞分散缓冲液，置于培养箱中大约5分钟。
·急剧地拍打烧瓶，以从组织培养塑料上拍下所有剩余细胞。
·向细胞加入5mL PBS，用于洗涤基底和烧瓶。将细胞在160g(1000rpm)下离心5分钟，使细胞沉淀。
·弃去上清液，将细胞重新悬浮在5mL刺激缓冲液中。进行台盼蓝排除测定法，以测定活细胞的数量。
·将细胞稀释在刺激缓冲液中，得到浓度5×105细胞/mL。
·将细胞传代时，省略离心步骤，将细胞悬液分配到新的含有50mL培养基的T225烧瓶中。
分瓶比例
hD3CHO的分瓶比例在1∶5至1∶10之间。培养不能延续超过30代，因为随着代数的增加细胞系特征会丧失。
细胞系的低温保藏
有必要建立你们自己细胞的细胞库，以复苏供进一步使用。
·如前节所述收获细胞。在台盼蓝排除测定法之后，将细胞稀释在含有10％DMSO的培养基中，达到2至4×106细胞/mL。
·将细胞分为1mL等分试样，立即冷冻在″Mr Frosty″(含有新鲜IPA)中，逐渐降温至-80℃，然后转移至气相液氮贮存容器中(细胞可以在″Mr Frosty″中贮存长达2天)。
最好还是在冷冻之后融化一只安瓿来测试细胞活力。活力低于70％可能会因细胞数量低、并且存在碎屑而导致回收率的问题。
数据分析
利用ECADA分析数据。
经由下式得到全部化合物的标准化％(相对于普拉克索)：
标准化％＝(X-B0)/(Max-B0)×100
其中
X＝就给定浓度的供试化合物而言的平均净细胞数，
B0＝最小对照(0nM普拉克索)的平均净细胞数，
Max＝最大对照(100nM普拉克索)的平均净细胞数。
将标准化％(y)对激动剂浓度nM(x)作图，生成曲线。利用非线性回归拟合数据，斜率约定为1。由此测定供试化合物的EC50和％Emax。
测定平板布局(10点EC50)：
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| A | MAX | C1 | MIN | |||||||||
| B | MAX | C1 | MIN | |||||||||
| C | MAX | C2 | MIN | |||||||||
| D | MAX | C2 | MIN | |||||||||
| E | MIN | C3 | MAX | |||||||||
| F | MIN | C3 | MAX | |||||||||
| G | MIN | C4 | MAX | |||||||||
| H | MIN | C4 | MAX |
第1栏：小孔A-D＝MAX：高对照(细胞+毛喉素+100nM普拉克索)
小孔E-H＝MIN：低对照(细胞+毛喉素+载体)
第12栏：小孔A-D＝MIN：低对照(细胞+毛喉素+载体)
小孔E-H＝MAX：高对照(细胞+毛喉素+100nM普拉克索)
第2-11栏：供试化合物的10点系列稀释液(一式两份)。浓度从第2栏到第11栏递减(1000nM至0.03nM)。在第一平板中用普拉克索代替C1。
经由多巴胺D2受体抑制毛喉素-刺激的腺苷酸环化酶活性
材料
细胞培养基：
| HD2 GH4C1/hD2L培养基 |
| Hams F-12(Sigma N6013) |
| 2mM L-谷氨酰胺(Sigma G7513) |
| 10％FBS(Gibco 10106-169) |
| 700μg/mL遗传菌素(Gibco 10131-019) |
GH4C1/hD2L是表达人多巴胺D2长受体的大鼠垂体细胞。
如下每周制备新鲜的培养基，使用前通过0.22μM滤器过滤。将培养基贮存在4℃下，在加入细胞之前温热至37℃。
细胞分散溶液(CDS)：(Sigma C-5914)
使用5mL从225cm2烧瓶中收获细胞。
磷酸盐缓冲盐水(PBS)：(Gibco 14040-091)
台盼蓝：(Sigma T8154)
毛喉素(Calbiochem 344273)
溶于蒸馏水至浓度20mM(将该储备液贮存在+4℃下)。在PBS缓冲液中进行1000倍稀释，制备20μM的4x测定储备液。加入25μL的20μM储备液至最终测定体积100μL，得到最终测定浓度5μM。
供试化合物
溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM。
普拉克索标准
溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM。
环化酶活化Flashplate测定法(NEN SMP004B)
由Perkin-Elmer Life Sciences，Inc提供。
[125I]-环腺苷一磷酸(cAMP)(NEX 130)
由Perkin-Elmer Life Sciences，Inc提供。
具体设备
Westbart微量滴定平板摇动器/培育器
Packard Topcount NXT(ECADA相容性程序)
Tecan Genesis
Labsystems Multi-drop DW
方案
化合物稀释液
·包括普拉克索作为参照标准。每4只平板生成10点半对数曲线。将化合物结果标准化为由细胞生成的最小(0nM普拉克索)和最大(1000nM普拉克索)反应。也可以经由10点(半对数)曲线测试全部供试化合物。
·将供试化合物溶于100％DMSO，得到储备液浓度10mM(1000x所需最终测定浓度，例如10mM将得到10000nM的顶端浓度)。
·将普拉克索溶于100％DMSO，得到浓度10mM。进一步经由10倍稀释将普拉克索在100％DMSO中稀释至1mM。
·进一步利用合适的Tecan Genesis方案在0.4％DMSO/PBS中进行稀释和加入，该方案能够按3.159倍进行系列稀释(半对数单位)。
TECAN GENESIS稀释液
·向微量平板的第1栏加入10μL供试化合物。向其中加入240μL的0.4％DMSO/PBS，得到25倍稀释液(0.4mM)。将20μL的0.4mM稀释液转移至第2栏的小孔，向其中加入180μL的0.4％DMSO/PBS，得到进一步的10倍稀释液，达到4x顶端测定浓度(0.04mM)。
·进行系列稀释(3.159倍)，实现半对数稀释系列：40μM，12.7μM，4μM，1.27μM，400nM，130nM，40nM，13nM，4nM，1.3nM
·将25μL(一式两份)系列稀释液转移至Flashplate的第2-11栏(参见附录)。由于最终测定体积为100μL，最终测定浓度将是：10,000μM，3170nM，1000nM，320nM，100nM，32nM，10nM，3nM，1nM，0.3nM
·最小对照(低对照)：向第1栏小孔E-H和第2栏小孔A-D加入25μL 0.4％DMSO/PBS(载体)。稍后加入细胞+毛喉素。
·最大对照(高对照)：经由250倍稀释将10mM普拉克索稀释在PBS中(10μL+2490μL PBS)，生成40μM普拉克索。进一步经由10倍稀释将40μM普拉克索稀释在0.4％DMSO/PBS中(100μL+990μL载体)，生成4000nM(标准普拉克索的4x测定浓度)。向Flashplate的第1栏小孔A-D和第12栏小孔E-H加入25μL的4000nM普拉克索，得到最终1000nM普拉克索。之后加入细胞+毛喉素。
环化酶活化Flashplate测定法(NEN SMP004B)
·如材料一节所述，将毛喉素溶于蒸馏水，达到储备液浓度20mM。进一步用PBS稀释至20μM(4x测定浓度)。利用Multi-drop向全部小孔加入25μL，得到最终浓度5μM。然后将平板密封，在37℃Westbart培育器中培育，同时收获细胞。
·从融合率在70％-80％之间的烧瓶中收获细胞。有必要将加入到细胞中的全部组分温热至37℃。向每只225cm2烧瓶加入5mL CDS，在37℃下培育5分钟，然后用5mL PBS中和。然后将细胞在160g(1000rpm)下离心5分钟。弃去所得上清液，将细胞重新悬浮在刺激缓冲液(温热至37℃)中，达到1×105细胞/mL。然后将50μL细胞悬液分配到Flashplate的全部小孔中。
·立即将平板在37℃摇动培养箱上培育15分钟。用100μL检测混合物终止全部小孔中的反应(每只平板100μL 125I cAMP：11mL检测缓冲液)。
·将平板重新密封，在暗处培育3小时，以便在抗-cAMP抗体(包被小孔)、[125I]-cAMP示踪剂与细胞cAMP之间达到平衡。
·利用合适的ECADA相容性方案(Protocol 75)在PackardTopcount NXT上计数平板。
冷冻安瓿的复苏
从液氮中取出安瓿，使它们平衡2分钟，因为所捕集的气体或液体可能导致安瓿迅速膨胀而爆炸。也可以在融化之前将它们置于-20℃下2分钟。
在37℃水浴中使安瓿快速完全融化。
将细胞悬液转移至含有10mL生长培养基的75cm2烧瓶中，在37℃5％CO2下培育24小时。细胞附着后(3-6小时)，除去培养基，换入新鲜培养基(以除去DMSO)。24小时后，如果接近融合，则将细胞转移至225cm2烧瓶中。如果没有，则培养细胞直至它们的融合率为60％。
细胞收获与分瓶
在星期五对细胞分瓶，以提供在星期一和星期二测定的细胞。一周其余时间所需细胞在星期一分瓶。
有必要切勿使细胞生长超过60％融合，因为这对它们的增殖反应具有有害影响，并且将随后影响细胞进行测定的能力。
使细胞生长在225cm2烧瓶(Jumbos)中。向细胞加入的每种组分必须在使用前温热至37℃。
细胞收获
从烧瓶中除去生长培养基，将细胞用温热的PBS(Gibco.14040-091)洗涤，除去。
·向细胞加入5mL细胞分散缓冲液，置于培育器中大约5分钟。
·急剧地拍打烧瓶，以从组织培养塑料瓶中拍下所有剩余细胞。
·向细胞加入5mL PBS，用于洗涤基底和烧瓶。将细胞在160g(1000rpm)下离心5分钟，使细胞沉淀。
·弃去上清液，将细胞重新悬浮在5mL刺激缓冲液中。进行台盼蓝排除测定法，以测定活细胞的数量。
·将细胞稀释在刺激缓冲液中，得到浓度1×105细胞/mL。
·为了使细胞传代，省略离心步骤，将细胞悬液分配到新的含有50mL培养基的T225烧瓶中。
分瓶比例
GH4C1/D2的分瓶比在1∶3至1∶5之间。
细胞系的低温保藏
有必要建立你们自己细胞的细胞库，以复苏供进一步使用。
·如前节所述收获细胞。在台盼蓝排除测定法之后，将细胞稀释在含有10％DMSO的培养基中，达到2至4×106细胞/mL。
·将细胞分为1mL等分试样，立即冷冻在″Mr Frosty″(含有新鲜IPA)中，逐渐降温至-80℃，然后转移至气相液氮贮存容器中(细胞可以在″Mr Frosty″中贮存长达2天)。
最好还是在冷冻之后融化一只安瓿来测试细胞活力。活力低于70％可能会因细胞数量低、并且存在碎屑而导致回收率的问题。
数据分析
利用ECADA分析数据。
经由下式对全部化合物进行标准化％(相对于普拉克索)：
标准化％＝(X-B0)/(Max-B0)×100
其中
X＝就给定浓度供试化合物而言的平均净细胞数，
B0＝最小对照(0nM普拉克索)的平均净细胞数，
Max＝最大对照(100nM普拉克索)的平均净细胞数。
将标准化％(y)对激动剂浓度nM(x)作图，生成曲线。利用非线性回归拟合数据，斜率约定为1。由此测出供试化合物的EC50和％Emax。
测定平板布局(10点EC50)：
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| A | MAX | C1 | MIN | |||||||||
| B | MAX | C1 | MIN | |||||||||
| C | MAX | C2 | MIN | |||||||||
| D | MAX | C2 | MIN | |||||||||
| E | MIN | C3 | MAX | |||||||||
| F | MIN | C3 | MAX | |||||||||
| G | MIN | C4 | MAX | |||||||||
| H | MIN | C4 | MAX |
第1栏：小孔A-D＝MAX：高对照(细胞+毛喉素+100nM普拉克索)
小孔E-H＝MIN：低对照(细胞+毛喉素+载体)
第12栏：小孔A-D＝MIN：低对照(细胞+毛喉素+载体)
小孔E-H＝MAX：高对照(细胞+毛喉素+100nM普拉克索)
第2-11栏：供试化合物的10点系列稀释液(一式两份)。浓度从第2栏到第11栏递减(1000nM至0.03nM)。在第一平板中用普拉克索代替C1。
利用上述测定法，本发明化合物全部对D3受体具有功能效力(以EC50表示，低于1000nM)，并且对D3的选择性高于D2 10倍。
实施例8所述化合物对D3受体具有的功能效力以EC50表示为7.6nM，对D3的选择性高于D2 1315.8倍。选择性是通过将D2 EC50值除以D3 EC50值而计算出来的。若D2 EC50大于10000，则取10000用于计算。
不言而喻，本文对治疗的所有称谓包括治愈、减轻和预防性处置。
适合用在本发明组合中的辅助活性成分包括：
1)天然存在或合成的前列腺素或其酯。适用于此的前列腺素包括如下化合物，例如前列地尔、前列腺素E1、前列腺素E0、13，14-二氢前列腺素E1、前列腺素E2、eprostinol，天然、合成与半合成的前列腺素及其衍生物，包括WO 00/33825和/或2000年3月14日颁布的US 6,037,346中所述的那些(这些文献都引用在此作为参考)，PGE0、PGE1、PGA1、PGB1、PGF1α、19-羟基-PGA1、19-羟基-PGB1、PGE2、PGB2、19-羟基-PGA2、19-羟基-PGB2、PGE3α、卡前列素氨丁三醇、地诺前列素氨丁三醇、地诺前列酮、lipoprost、吉美前列素、甲烯前列素(metenoprost)、硫前列酮(sulprostune)、噻前列素和莫西赛利；
2)α-肾上腺素能受体拮抗剂化合物，也称为α-肾上腺素受体或α-受体或α-阻滞剂。适用于此的化合物包括：如1998年6月14日公布的PCT申请WO 99/30697所述α-肾上腺素能受体阻滞剂(其中涉及α-肾上腺素能受体的公开内容引用在此作为参考)，包括选择性α1-肾上腺素受体或α2-肾上腺素受体阻滞剂，以及非选择性肾上腺素受体阻滞剂，适合的α1-肾上腺素受体阻滞剂包括：芬妥胺、甲磺酸芬妥胺、曲唑酮、阿夫唑嗪、吲哚拉明、萘哌地尔、坦洛新、达哌唑、酚苄明、咪唑克生、依法克生、育亨宾、萝芙木生物碱、Recordati 15/2739、SNAP 1069、SNAP 5089、RS17053、SL 89.0591、多沙唑嗪、特拉唑嗪、阿巴诺喹和哌唑嗪；来自US 6,037,346(2000年3月14日)的α2-阻滞剂地苯那明、妥拉唑林、曲马唑嗪和地苯那明；如下列美国专利所述α-肾上腺素能受体：4,188,390、4,026,894、3,511,836、4,315,007、3,527,761、3,997,666、2,503,059、4,703,063、3,381,009、4,252,721和2,599,000，各自引用在此作为参考；α2-肾上腺素受体阻滞剂包括：可乐定、罂粟碱、盐酸罂粟碱，可选地在强心剂例如pirxamine的存在下；
3)NO-供体(NO-激动剂)化合物。适用于此的NO-供体化合物包括有机硝酸盐，例如单-、二-或三-硝酸盐，或者有机硝酸酯，包括三硝酸甘油酯(也称硝酸甘油)、异山梨醇5-单硝酸酯、异山梨醇二硝酸酯、季戊四醇四硝酸酯、赤藓醇四硝酸酯、硝普酸钠(SNP)、3-吗啉代sydnonimine、吗多明、S-亚硝基-N-乙酰基青霉胺(SNAP)、S-亚硝基-N-谷胱苷肽(SNO-GLU)、N-羟基-L-精氨酸、硝酸戊基酯、林西多明、林西多明氯水合物(SIN-1)、S-亚硝基-N-半胱氨酸、重氮鎓二醇酸化物(diazenium diolates)(NONO酸酯)、1，5-戊烷二硝酸酯、L-精氨酸、人参、大枣、吗多明、Re-2047、亚硝基化莫西赛利衍生物，例如NMI-678-11和NMI-937，如已公布的PCT申请WO 00/12075所述；
4)钾通道开放剂或调控剂。适用于此的钾通道开放剂/调控剂包括尼可地尔、色满卡林、左色满卡林、来马卡林、吡那地尔、cliazoxide、米诺地尔、charybdotoxin、格列本脲、4-氨基吡啶、BaCl2；
5)血管舒张剂。适用于此的血管舒张剂包括尼莫地平、吡那地尔、环扁桃酯、异克舒令、chloroprumazine、氟哌啶醇、Rec 15/2739、曲唑酮；
6)血栓烷A2激动剂；
7)CNS活性剂；
8)麦角生物碱。合适的麦角生物碱描述在2000年3月14日颁布的美国专利6,037,346中，包括醋麦角胺、溴麦角林、溴麦角脲、氰麦角林、地麦角腈(delorgotrile)、地舒勒近、马来酸麦角新碱、酒石酸麦角胺、乙舒麦角、麦角腈、麦角二乙胺、美舒麦角、甲麦角林、甲麦角胺、尼麦角林、培高利特、普罗麦角、丙麦角脲和特麦角脲；
9)调控钠尿因子作用的化合物，特别是心钠素(也称心房钠尿肽)，B型与C型钠尿因子，例如中性内肽酶或抑制剂；
10)抑制血管紧张素转化酶的化合物，例如依那普利，和血管紧张素转化酶与中性内肽酶的联合抑制剂，例如奥马曲拉；
11)血管紧张素受体拮抗剂，例如氯沙坦；
12)NO合成酶底物，例如L-精氨酸；
13)钙通道阻滞剂，例如氨氯地平；
14)内皮素受体拮抗剂和内皮素转化酶抑制剂；
15)胆固醇降低剂，例如他汀类(例如阿托伐他汀/Lipitor-商标)和贝特类(fibrates)；
16)抗血小板剂和抗血栓剂，例如tPA、uPA、华法令、水蛭素与其他凝血酶抑制剂、肝素、组织促凝血酶原激酶活化因子抑制剂；
17)胰岛素致敏剂，例如曲格列酮片剂，和降血糖剂，例如格列吡嗪；
18)L-DOPA或卡比多巴；
19)乙酰胆碱酯酶抑制剂，例如donezipil；
20)甾族或非甾族抗炎剂；
21)雌激素受体调控剂和/或雌激素激动剂和/或雌激素拮抗剂，优选雷洛昔芬或拉索昔芬、(-)-顺式-6-苯基-5-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-5，6，7，8-四氢萘-2-酚及其药学上可接受的盐，它们的制备描述在WO 96/21656中；
22)PDE抑制剂，更确切为PDE 2、3、4、5、7或8抑制剂，优选PDE2或PDE5抑制剂，最优选PDE5抑制剂(见下)，所述抑制剂优选地对相应酶的IC50小于100nM(其条件是PDE3和4抑制剂仅仅是局部或者对阴茎注射给药的)；
23)血管活性肠肽(VIP)、VIP模拟物、VIP类似物，更确切地受到下列物质的介导：一种或多种VIP受体亚型VPAC1、VPAC或PACAP(垂体腺苷酸环化酶活化肽)，一种或多种VIP受体激动剂或VIP类似物(例如Ro-125-1553)或VIP片段，一种或多种与VIP联合的α-肾上腺素受体拮抗剂(例如Invicorp、Aviptadil)；
24)黑皮素(melanocortin)受体激动剂或调控剂或者黑皮素增强剂，例如melanotan II、PT-14、PT-141或者如WO 99/64002、WO00/74679、WO 99/55679、WO 01/05401、WO 00/58361、WO 01/14879、WO 01/13112、WO 99/54358所要求保护的化合物；
25)血清素受体激动剂、拮抗剂或调控剂，更确切为5HT1A(包括VML 670)、5HT2A、5HT2C、5HT3和/或5HT6受体的激动剂、拮抗剂或调控剂，包括WO 99/02159、WO 00/02550和/或WO 00/28993中所述的那些；
26)睾酮替代剂(包括脱氢雄甾二酮)、睾酮(Tostrelle)、二氢睾酮或睾酮植入剂；
27)雌激素、雌激素与甲羟孕酮或乙酸甲羟孕酮(MPA)(也就是作为组合)或者雌激素与甲基睾酮激素替代治疗剂(例如HRT，尤其是Premarin、Cenestin、Oestrofeminal、Equin、Estrace、Estrofem、Elleste Solo、Estring、Eastraderm TTS、Eastraderm Matrix、Dermestril、Premphase、Preempro、Prempak、Premique、Estratest、Estratest HS、Tibolone)；
28)去甲肾上腺素、多巴胺和/或血清素转运蛋白的调控剂，例如安非他酮、GW-320659；
29)嘌呤能受体激动剂和/或调控剂；
30)神经激肽(NK)受体拮抗剂，包括WO 99/64008中所述的那些；
31)阿片样受体激动剂、拮抗剂或调控剂，优选ORL-1受体的激动剂；
32)催产素/加压素受体激动剂或调控剂，优选选择性催产素激动剂或调控剂；
33)大麻素受体调控剂；
34)SEP抑制剂(SEPi)，例如IC50小于100nM、更优选小于50nM的SEPi。优选地，根据本发明的SEP抑制剂具有大于30倍、更优选大于50倍优于中性内肽酶NEP EC 3.4.24.11和血管紧张素转化酶(ACE)而选择SEP的选择性。优选地，SEPi也具有大于100倍优于内皮素转化酶(ECE)的选择性。
通过本文对可以按照本发明所采用的专利和专利申请中所含有的化合物进行交叉参考，我们把治疗活性化合物定义在权利要求书(特别是权利要求1)和具体实施例中(全部引用在此作为参考)。
如果给以活性成分的组合，那么它们可以是同时、分开或顺序给药的。
辅助成分-PDE5抑制剂
利用文献方法评价其效力和选择性，继之以按照标准药学实践评价其毒性、吸收、代谢、药动学等，可以容易地确定任何特定cGMP PDE5抑制剂的适合性。
利用PDE5测定法可以测定cGMP PDE5抑制剂的IC50值(见下)。
优选地，根据本发明的药物组合中使用的cGMP PDE5抑制剂对PDE5酶具有选择性。优选地(当口服使用时)，它们有优于PDE3、更优选优于PDE3和PDE4的选择性。优选地(当口服时)，本发明的cGMPPDE5抑制剂优于PDE3、更优选优于PDE3和PDE4的选择性比例大于100、更优选大于300。
技术人员可以容易地测定选择性比例。利用既定文献方法可以测定对PDE3和PDE4酶的IC50值，参见SA Ballard et al，Journal ofUrology，1998，vol.159，pages 2164-2171和下文所述。
适用于本发明的cGMP PDE5抑制剂包括：
公开在EP-A-0463756中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在EP-A-0526004中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 93/06104中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 93/07149中的异构吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 93/12095中的喹唑啉-4-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 94/05661中的吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 94/00453中的嘌呤-6-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 98/49166中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 99/54333中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在EP-A-0995751中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮；公开在已公布的国际专利申请WO 00/24745中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在EP-A-0995750中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-4-酮；公开在已公布的国际申请WO 95/19978中的化合物；公开在已公布的国际申请WO 99/24433中的化合物；公开在已公布的国际申请WO 93/07124中的化合物；公开在已公布的国际申请WO 01/27112中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在已公布的国际申请WO 01/27113中的吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮；公开在EP-A-1092718中的化合物；公开在EP-A-1092719中的化合物。
进一步适用于本发明的PDE5抑制剂包括：
5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺酰基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)，也称1-[[3-(6，7-二氢-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基)-4-乙氧基苯基]磺酰基]-4-甲基哌嗪(参见EP-A-0463756)；5-(2-乙氧基-5-吗啉代乙酰基苯基)-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见EP-A-0526004)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-正丙氧基苯基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 98/49166)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 99/54333)；(+)-3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)-2-(2-甲氧基-1(R)-甲基乙氧基)吡啶-3-基]-2-甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7酮，也称3-乙基-5-{5-[4-乙基哌嗪-1-基磺酰基]-2-([(1R)-2-甲氧基-1-甲基乙基]氧基)吡啶-3-基}-2-甲基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 99/54333)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮，也称1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氢-2-(2-甲氧基乙基)-7-氧代-2H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺酰基}-4-乙基哌嗪(参见WO 01/27113，实施例8)；5-[2-异丁氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-(1-甲基哌啶-4-基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27113，实施例15)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺酰基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-苯基-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27113，实施例66)；5-(5-乙酰基-2-丙氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-异丙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d1嘧啶-7-酮(参见WO 01/27112，实施例124)；5-(5-乙酰基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮杂环丁烷基)-2，6-二氢-7H-吡唑并[4，3-d]嘧啶-7-酮(参见WO 01/27112，实施例132)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氢-2-甲基-6-(3，4-亚甲二氧基苯基)-吡嗪并[2′，1′：6，1]吡啶并[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)，也就是已公布的国际申请WO 95/19978中的实施例78和95化合物，以及实施例1、3、7和8化合物；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺酰基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑并[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)，也称1-[[3-(3，4-二氢-5-甲基-4-氧代-7-丙基咪唑并[5，1-f]-as-三嗪-2-基)-4-乙氧基苯基]磺酰基]-4-乙基哌嗪，也就是已公布的国际申请WO 99/24433中的实施例20、19、337和336化合物；已公布的国际申请WO 93/07124中的实施例11化合物(EISAI)；和来自Rotella DP，J.Med.Chem.，2000，43，1257的化合物3和14。
进而其他适合的PDE5抑制剂包括：
4-溴-5-(吡啶基甲基氨基)-6-[3-(4-氯苯基)-丙氧基]-3(2H)哒嗪酮；1-[4-[(1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基]-4-哌啶-羧酸，一钠盐；(+)-顺式-5，6a，7，9，9，9a-六氢-2-[4-(三氟甲基)-苯基甲基-5-甲基-cyclopent[4，5]咪唑并[2，1-b]嘌呤-4(3H)酮；furazlocillin；顺式-2-己基-5-甲基-3，4，5，6a，7，8，9，9a-八氢cyclopent[4，5]-咪唑并[2，1-b]嘌呤-4-酮；3-乙酰基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-6-羧酸酯；3-乙酰基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-6-羧酸酯；4-溴-5-(3-吡啶基甲基氨基)-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-3-(2H)哒嗪酮；1-甲基-5-(5-吗啉代乙酰基-2-正丙氧基苯基)-3-正丙基-1，6-二氢-7H-吡唑并(4，3-d)嘧啶-7-酮；1-[4-[(1，3-苯并二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基]-4-哌啶羧酸，一钠盐；Pharmaprojects No.4516(GlaxoWellcome)；Pharmaprojects No.5051(Bayer)；Pharmaprojects No.5064(Kyowa Hakko；参见WO 96/26940)；Pharmaprojects No.5069(Schering Plough)；GF-196960(GlaxoWellcome)；E-8010和E-4010(Eisai)；Bay-38-3045 & 38-9456(Bayer)和Sch-51866。
式(I)化合物可以单独给药，但是一般将与适合的药物赋形剂、稀释剂或载体混合给药，这些赋形剂、稀释剂或载体根据预期给药途径和标准药学实践加以选择。
因此，本发明提供组合物，其中包含式(I)、(Ia)或(Ib)化合物和药学上可接受的稀释剂或载体。
例如，式(I)、(Ia)或(Ib)化合物可以被口服、经颊或舌下给药，剂型为片剂、胶囊剂、卵状体剂、酏剂、溶液或悬液，其中可以含有矫味剂或着色剂，用于立即、延迟、改性、持续、脉冲或控制释放的应用。
这类片剂可以含有赋形剂，例如微晶纤维素、乳糖、柠檬酸钠、碳酸钙、二碱式磷酸钙和甘氨酸，崩解剂，例如淀粉(优选玉米、马铃薯或木薯淀粉)、淀粉羟乙酸钠、交联羧甲基纤维素钠和某些复合硅酸盐，和造粒粘合剂，例如聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、蔗糖、明胶和阿拉伯胶。另外，可以包括润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸、甘油山萮酸酯和滑石。
也可以采用相似类型的固体组合物作为明胶胶囊剂中的填充剂。在这一点上优选的赋形剂包括乳糖、淀粉、纤维素、奶糖或高分子量聚乙二醇。就水性悬液和/或酏剂而言，式(I)、(Ia)或(Ib)化合物可以与各种甜味剂或矫味剂、着色物或染剂混合，与乳化剂和/或悬浮剂混合，与稀释剂(例如水、乙醇、丙二醇和甘油)混合，及其组合。
式(I)、(Ia)或(Ib)化合物也可以被肠胃外给药，例如静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内或皮下，或者它们可以借助输注技术给药。就这类肠胃外给药而言，它们最好采用无菌水溶液的形式，其中可以含有其他物质，例如足够的盐或葡萄糖，使溶液与血液等渗。如果必要的话，水溶液应当被适当缓冲(优选地缓冲至pH 3-9)。借助本领域技术人员熟知的标准药学技术，容易实现适合的肠胃外制剂在无菌条件下的制备。
式(I)、(Ia)或(Ib)化合物也可以被鼻内给药或者吸入给药，通常以干粉的形式(自身，或者与乳糖形成的干燥混合物，或者混合组分粒子，例如与磷脂混合而成)以干粉吸入剂或气雾喷雾剂形式从加压容器、泵、喷雾器或雾化器中释放出来(优选雾化器，其中利用电子水力学产生细雾)，其中利用或者不用适合的推进剂，例如二氯氟甲烷。
加压容器、泵、喷雾器或雾化器含有活性化合物的溶液或悬液，其中例如包含乙醇(可选地含水乙醇)或适合的代用剂供活性成分、作为溶剂的推进剂和可选的表面活性剂的分散、溶解或延时释放，所述表面活性剂例如脱水山梨醇三油酸酯或寡乳酸。
在用于干粉或悬液制剂之前，将药物产品粉碎成适合于吸入递送的大小(通常小于5微米)。这可以借助任意适当的粉碎方法来实现，例如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、超临界流体加工成纳米粒、高压均质化或者喷雾干燥。
适合用在利用电子水力学产生细雾的雾化器中的溶液制剂可以每揿含有1μg至10mg本发明化合物，每揿体积可以从1μL至100μL不等。典型的制剂可以包含式(I)、(Ia)或(Ib)化合物、丙二醇、无菌水、乙醇和氯化钠。可以使用代用溶剂代替丙二醇，包括甘油和聚乙二醇。
用在吸入器或吹入器中的胶囊、泡眼和药筒(例如由明胶或HPMC制成)可以被配制成含有本发明化合物、适合的粉末基质(例如乳糖或淀粉)与改性剂(例如1-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸镁)的粉末混合物。
吸入/鼻内给药制剂可以被配制成立即和/或改性释放。
作为替代选择，式(I)、(Ia)或(Ib)化合物可以以栓剂或阴道栓剂的形式给药，或者它们可以以凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、霜剂、软膏剂或撒布粉剂的形式局部用药。式(I)、(Ia)或(Ib)化合物还可以被经皮或透皮给药，例如利用皮肤贴剂。它们还可以通过肺或直肠途径给药。
它们还可以通过眼部途径给药。就眼用而言，化合物可以被配制成在等渗的、pH调节的、无菌盐水中的微粉化悬液，或者优选在等渗的、pH调节的、无菌盐水中的溶液，其可选地与防腐剂联用，例如苯扎氯铵。作为替代选择，它们可以被配制在软膏、例如凡士林中。
就皮肤局部用药而言，式(I)、(Ia)或(Ib)化合物可以被配制成适合的软膏剂，其中含有悬浮或溶解在下列一种或多种的混合物中的活性化合物：矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。作为替代选择，它们可以被配制成适合的洗剂或霜剂，悬浮或溶解在下列一种或多种的混合物中：矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚乙二醇、液体石蜡、聚山梨酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
式(I)、(Ia)或(Ib)化合物还可以与环糊精联合使用。已知环糊精与药物分子形成包埋和非包埋的复合体。药物-环糊精复合体的形成可以改变药物分子的溶解度、溶解速率、生物利用度和/或稳定性。药物-环糊精复合体一般可用于大多数剂型和给药途径。作为与药物直接复合的替代选择，环糊精可以用作辅助性添加剂，例如载体、稀释剂或增溶剂。α-、β-与γ-环糊精是最常用的，适合的实例描述在WO-A-91/11172、WO-A-94/02518和WO-A-98/55148中。
下列非限制性实施例进一步例证本发明。
以下列非限制性实施例阐述本发明，其中使用下列缩写和定义：
αD 587nm下的旋光度
Arbacel 过滤剂
b 宽峰
Boc 叔丁氧羰基
CDCl3 氯仿-d1
CD3OD 甲醇-d4
δ 化学漂移
d 双峰
dd 双重双峰
DCM 二氯甲烷
DMF N，N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
h 小时
HCl 氯化氢
LRMS 低分辨率质谱
m 多重峰
m/z 质谱峰
min 分钟
Mpt 熔点
NaOH 氢氧化钠
NMR 核磁共振
q 四重峰
s 单峰
t 三重峰
Tf 三氟甲磺酰基
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TLC 薄层色谱
熔点是利用Perkin Elmer DSC7测定的，加热速率为20℃/分钟。
X-射线衍射数据是在室温下、利用Bruker Axs Smart-Apex CCD面积检测衍射计(MO Kα放射)记录的。从若干系列曝光求强度积分。每一曝光覆盖0.3°INω，曝光时间为60秒，全部曝光数据组多于一个球面。
实施例1
2-氨基-1-(3-甲氧基苯基)乙醇
在室温下，将3-甲氧基苯甲醛(27.2g，0.2mol)的THF(150ml)溶液加入搅拌着的3N HCl(aq)(150ml，0.3mol)与亚硫酸钠(37.8g，0.3mol)溶液。10分钟后，分批加入氰化钾(19.53g，0.3mol)，然后将反应混合物搅拌30分钟。加入二乙醚(800ml)和水(300ml)，随后分层。水层用二乙醚(500ml)反萃取，合并有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，然后在真空中浓缩，得到氰醇中间体，为无色的油(35.57g，0.22mol，＞100％)。然后将硼烷-四氢呋喃配合物(1M THF溶液)(400ml，0.4mol)小心地加入到氰醇的THF溶液(100ml)中。一旦泡腾停止，继续在氮气氛下、在回流下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却，然后用甲醇(40ml)猝灭，再在真空中浓缩，得到无色的油。加入6M HCl(aq)(200ml)，将反应物在回流下搅拌2小时，然后在真空中浓缩，得到白色固体。将其预吸附到二氧化硅上，然后经过柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶氨(90∶10∶1)洗脱，得到标题化合物，为无色的油(31.3g，0.19mol，94％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.60(bs，2H)，2.80(dd，1H)，3.02(dd，1H)，3.46(s，1H)，3.81(s，3H)，4.60(dd，1H)，6.81(d，1H)，6.91(d，1H)，6.93(s，1H)，7.22(t，1H).LRMS：m/z 168(M-H+).分析实测值C，56.66；H，8.28；N，6.91％.C9H13NO2·1.33H2O理论值C，56.33；H，8.27；N，7.30％.
实施例2
N-[2-羟基-2-(3-甲氧基苯基)乙基]丙酰胺
将三乙胺(52ml，0.37mol)加入到实施例1的胺(31.3g，0.19mol)在二氯甲烷(400ml)中的溶液中，将反应混合物在0℃氮气氛下搅拌10分钟。加入丙酰氯(16.3ml，0.19mol)，然后搅拌30分钟，使反应温度升至室温达另外5小时。将反应混合物用1N HCl(aq)(100ml)猝灭，然后用二氯甲烷萃取(2×50ml)。合并有机部分，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为无色的油，放置后结晶为白色晶体(28g，0.13mol，67％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.18(t，3H)，2.22(q，2H)，2.51(bs，1H)，3.31(m，1H)，3.71(dd，1H)，3.80(s，3H)，4.81(m，1H)，5.95(bs，1H)，6.80(d，1H)，6.90(d，1H)，6.91(s，1H)，7.22(t，1H).LRMS：m/z 224.Mpt：77-78℃.分析实测值
C，63.86；H，7.82；N，6.28％.C12H17NO3·0.1H2O理论值C，64.04；H，7.70；N.6.22％.
实施例3
1-(3-甲氧基苯基)-2-丙基氨基乙醇
将硼烷-四氢呋喃配合物(1M THF溶液)(376ml，0.4mol)加入到实施例2的酰胺(28g，0.13mol)在无水THF(100ml)的溶液中，然后使在氮气下搅拌的反应混合物回流达2.5小时。将反应混合物冷却，然后用甲醇(40ml)猝灭，再在真空中浓缩，得到不透明白色的油。加入6N HCl(aq)(200ml)，将反应混合物在回流下搅拌2小时。将反应混合物冷却，然后加入二氯甲烷(200ml)，分离各层。向水层加入碳酸钾使之呈碱性，然后用二氯甲烷反萃取(2×200ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为无色的油，放置后结晶，得到无色晶体(15.3g，0.07mol，59％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ：0.93(t，3H)，1.62(q，2H)，2.71(q，2H)，2.81(t，2H)，3.00(d，1H)，3.80(s，3H)，4.30(bs，1H)，4.89(d，1H)，6.81(d，1H)，6.91(d，1H)，6.93(s，1H)，7.22(t，1H).LRMS：m/z 210.Mpt：50-51℃.分析实测值C，67.47；H，9.02；N，6.45％.C12H19NO2·0.2H2O理论值C，67.70；H，9.19；N，6.58％.
实施例4
2-氯-N-[2-羟基-2-(3-甲氧基苯基)乙基]-N-丙基乙酰胺
将氢氧化钠(15.1g，0.38mol)的水(180ml)溶液加入到实施例3的胺(15.8g，0.08mol)在二氯甲烷(500ml)的溶液中，将溶液在室温下剧烈搅拌。然后加入氯乙酰氯(7.22ml，0.09mol)，将反应混合物搅拌另外30分钟。分离各层，水层用二氯甲烷(200ml)反萃取。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为无色的油(17.8g，0.06mol，83％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.62(q，2H)，3.21(q，2H)，3.57-3.71(m，2H)，3.82(s，3H)，4.01-4.21(bq，1H)，4.16(s，2H)，5.00(m，1H)，6.82(m，1H)，6.91-6.99(m，2H)，7.22(m，1H).LRMS：m/z 286.分析实测值C，57.38；H，6.95；N，4.67％.C14H20NO3Cl·0.33H2O 理论值C，57.64；H，7.14；N，4.80％.
实施例5
6-(3-甲氧基苯基)-4-丙基吗啉-3-酮
将氢氧化钾(4.2g，0.07mol)、异丙醇(500ml)和实施例4的酰胺(17.8g，0.06mol)一起与水(15ml)搅拌成不透明溶液达2小时。在真空中浓缩反应混合物，将黄色残余物溶于乙酸乙酯(200ml)。将其用水(200ml)、再用盐水(200ml)分配。将有机部分经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为黄色的油(15.8g，0.06mol，100％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.62(m，2H)，3.36(m，2H)，3.51(q，2H)，3.81(s，3H)，4.30-4.62(bq，2H)，4.79(d，1H)，6.85(d，1H)，6.91(d，1H)，6.95(s，1H)，7.29(t，1H).LRMS：m/z 272.分析实测值C，66.80；H，7.78；N，5.52％.C14H19NO3·0.1H2O 理论值C，66.96；H，7.71；N，5.58％.
实施例6
2-(3-甲氧基苯基)-4-丙基吗啉
在氮气氛下，将硼烷-四氢呋喃配合物(1M THF溶液)(200ml，0.19mol)历经30分钟滴加到实施例5所述的吗啉-3-酮(15.8g，0.06mol)的无水THF(100ml)溶液中。将反应混合物回流达3小时，然后冷却，加入甲醇(30ml)猝灭。然后在真空中浓缩反应混合物，将无色残余物小心地悬浮在4N HCl(aq)(400ml)中，然后回流2.5小时。将反应混合物冷却，加入二氯甲烷(200ml)。分离各层，向水层加入碳酸钾使之呈碱性，然后用二氯甲烷反萃取(3×100ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为无色的油(12.51g，0.05mol，84％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.59(q，2H)，2.05(t，1H)，2.23(t，1H)，2.40(t，2H)，2.81(d，1H)，2.98(d，1H)，3.80(s，3H)，3.85(t，1H)，4.05(d，1H)，4.60(d，1H)，6.81(d，1H)，6.91(d，1H)，7.21(t，1H)，7.23(s，1H).LRMS：m/z 236.分析实测值
C，68.94；H，8.80；N，5.79％.C14H21NO2·0.5H2O 理论值C，68.82；H，9.08；N，5.73％.
实施例7A
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
实施例7B
S-(+)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
将氢溴酸(250ml)和实施例6的茴香醚(8.62g，0.03mol)一起加热至回流达1小时。冷却后，将反应混合物用水(100ml)稀释，然后加入NH4OH(20ml)中和。然后用二氯甲烷萃取(2×100ml)黄色不透明溶液。合并有机萃取液，然后经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物的外消旋混合物，为黄色的油(7.78g，0.03mol，96％)。借助手性色谱分离对映体(Chiralpak AD 250*20mm柱)，用己烷∶异丙醇∶二乙胺(70∶30∶0.05)洗脱，得到对映体1(ee＞99.5％)和对映体2(ee＞99％)。每种对映体经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)洗脱，得到对映体1(7a)(3.02g，0.014mol，39％)和对映体2(7b)(3.15g，0.014mol，40％)，为无色的油。对映体1(7a)： 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.60(q，2H)，2.13(t，1H)，2.31(t，1H)，2.41(t，2H)，2.85(d，1H)，3.02(d，1H)，3.90(t，1H)，4.02(dd，1H)，4.60(d，1H)，6.78(d，1H)，6.80(s，1H)，6.91(d，1H)，7.20(t，1H).LRMS：m/z 222(M-H+).对映体2(7b)：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.60(q，2H)，2.13(t，1H)，2.31(t，1H)，2.41(t，2H)，2.85(d，1H)，3.02(d，1H)，3.90(t，1H)，4.02(dd，1H)，4.60(d，1H)，6.78(d，1H)，6.80(s，1H)，6.91(d，1H)，7.20(t，1H).LRMS：m/z 222(M-H+).
实施例8
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚盐酸盐
将实施例7的对映体1(7a)(3.00g，0.014mol)溶于二乙醚(180ml)，加入氯化氢(2.0M二乙醚溶液)(10ml)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后滗析溶剂，在真空中干燥，得到标题化合物，为白色固体(3.115g，0.012mol，90％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：1.06(t，3H)，1.81(m，2H)，3.02(t，1H)，3.16(t，2H)，3.20(t，1H)，3.60(t，2H)，4.01(t，1H)，4.26(d，1H)，4.71(d，1H)，6.78(d，1H)，6.82(s，1H)，6.83(d，1H)，7.21(t，1H).LRMS：m/z 222(M-H+).分析实测值C，59.74；H，7.98；N，5.25％.C13H19NO2·0.18H2O理论值C，59.82；H，7.86；N，5.37％.αD＝-5.66°(Methanol 10.6mg/10ml).
使标题化合物样品借助蒸汽扩散从甲醇∶二乙醚混合物中重结晶，得到X-射线晶体结构。借助Flack1的方法从衍射数据确定标题化合物的绝对立体化学，显示具有R构型。
参考文献1：H.D.FLACK，ACTA CRYST.1983，439，876-881
实施例9
2-氨基-1-(3，5-二甲氧基苯基)乙醇
遵循与实施例1相同的方法，从3，5-二甲氧基苯甲醛(5.00g，0.03mol)开始制备。在6M HCl (aq)中回流后，将反应混合物冷却，用二乙醚萃取(2×80ml)。弃去有机层，向水层加入碳酸钾碱化。水性残余物然后用乙酸乙酯萃取(3×70ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为淡黄色油(3.47g，0.018mol，59％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：2.77-2.86(m，2H)，3.78(s，6H)，4.60(m，1H)，6.38(s，1H)，6.52(s，2H).LRMS：m/z 198(M-H+).
实施例10
N-[2-(3，5-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基]丙酰胺
遵循与实施例2相同的方法，从实施例9所述胺(3.41g，0.017mol)开始制备。粗反应混合物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)洗脱，得到标题化合物，为浅黄色油(3.08g，0.012mol，70％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ：1.18(m，3H)，2.24(m，2H)，3.34(m，1H)，3.68(m，1H)，3.81(s，6H)，4.80(dd，1H)，5.95(bs，1H)，6.39(s，1H)，6.51(s，2H).LRMS：m/z 252(M-H-).
实施例11
1-(3，5-二甲氧基苯基)-2-丙基氨基乙醇
遵循实施例3的方法，从实施例10所述酰胺(3.06g，0.012mol)开始制备，得到标题化合物，为橙色的油(2.72g，0.011mol，94％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.56(m，2H)，2.61(m，2H)，2.77(d，2H)，3.78(s，6H)，4.70(t，1H)，6.38(s，1H)，6.51(s，2H).LRMS：m/z 240(M-H+).
实施例12
2-氯-N-[2-(3，5-二甲氧基苯基)-2-羟基乙基]-N-丙基乙酰胺
遵循与实施例4相同的方法，从实施例11所述胺(2.70g，0.011mol)开始制备，得到标题化合物，为黄色的油(3.56g，0.011mol，100％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.92(t，3H)，1.61(m，2H)，3.20(m，2H)，3.51-3.64(m，2H)，3.80(d，6H)，4.13(s，2H)，4.95(m，1H)，6.40(m，1H)，6.55(s，2H).LRMS：m/z 316(M-H+).
实施例13
6-(3，5-二甲氧基苯基)-4-丙基吗啉-3-酮
遵循与实施例5相同的方法，从实施例12所述酰胺(3.54g，0.011mol)开始制备，得到标题化合物，为黄色的油(2.44g，0.009mol，78％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.94(t，3H)，1.61(m，2H)，3.30(m，2H)，3.49(m，2H)，3.80(s，6H)，4.30(d，1H)，4.42(d，1H)，4.73(dd，1H)，6.42(s，1H)，6.53(s，2H).LRMS：m/z 280(M-H+).
实施例14
2-(3，5-二甲氧基苯基)-4-丙基吗啉
遵循实施例6的方法，从实施例13所述酰胺(2.42g，0.009mol)开始制备。在6M HCl(aq)中回流后，将冷却了的反应混合物用二乙醚萃取(2×80ml)。弃去有机层，向水层加入碳酸钾碱化。水性残余物然后用乙酸乙酯萃取(3×80ml)，合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，然后在真空中浓缩，得到标题化合物，为淡橙色油(2.14g，0.008mol，93％)。1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.58(m，2H)，2.01(m，1H)，2.22(dt，1H)，2.38(t，2H)，2.83(d，1H)，2.93(d，1H)，3.78(m，7H)，4.01(dd，1H)，4.45(dd，1H)，6.39(s，1H)，6.49(s，2H).LRMS：m/z 266(M-H+).
实施例15A
R-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚
实施例15B
S-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚
遵循与实施例7相同的途径，从实施例14所述3，5-二甲氧基苯基化合物(1.00g，0.004mol)开始制备，得到标题所示外消旋化合物，为褐色的油(145mg，0.61mmol，16％)。借助手性色谱分离对映体(Chiralpak AD 250*20mm柱)，用己烷∶异丙醇(80∶20)洗脱，得到对映体1(15a)(5.2mg)(ee＞98.94％)和对映体2(15b)(5.1mg)(ee＞96.46％)，为褐色的油。对映体1(15a)：
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.58(m，2H)，2.01(t，1H)，2.20(dt，1H)，2.37(t，2H)，2.81-2.92(m，2H)，3.89(dt，1H)，3.99(dd，1H)，4.38(dd，1H)，6.18(t，1H)，6.26(s，2H).LRMS：m/z 238(M-H+).对映体2(15b)：1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.58(m，2H)，2.01(t，1H)，2.20(dt，1H)，2.38(t，2H)，2.80-2.92(q，2H)，3.78(dt，1H)，3.98(dd，1H)，4.38(dd，1H)，6.18(s，1H)，6.25(s，2H).LRMS：m/z 238(M-H+).
实施例16
4-氟-3-甲氧基苯甲醛
在氮气氛下，将(4-氟-3-甲氧基苯基)甲醇(5.00g，0.03mol)和二氧化锰(33.4g，0.38mol)在二氯甲烷(100ml)中、在轻微回流下搅拌16小时。然后将冷却了的反应混合物通过arbacel过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为白色固体(4.18g，0.027mol，85％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：3.96(s，3H)，7.23(d，1H)，7.43(m，1H)，7.50(d，1H)9.91(s，1H).Mpt：61-63℃.分析实测值C，62.18；H，4.54％.C8H7FO2理论值C，62.34；H，4.58％.
实施例17
2-氨基-1-(4-氟-3-甲氧基苯基)乙醇
遵循与实施例1相同的方法，从4-氟-3-甲氧基苯甲醛(4.17g，0.03mol)开始制备。在6M HCl(aq)中回流后，将反应混合物冷却，用二乙醚萃取(2×60ml)。弃去有机层，向水层加入碳酸钾碱化。水性残余物然后用乙酸乙酯萃取(3×80ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为橙色的油(2.36g，0.013mol，47％)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：2.80-2.91(m，2H)，3.86(s，3H)，4.64(m，1H)，6.89(m，1H)，7.03(t，1H)，7.11(dd，1H).LRMS：m/z 186(M-H+).
实施例18
N-[2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基]丙酰胺
遵循与实施例2相同的方法，从实施例17所述胺(1.32g，0.007mol)开始制备。粗反应混合物经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(2∶1)洗脱，得到标题化合物，为黄色的油，放置后结晶(0.59g，0.002mol，35％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.18(t，3H)，2.24(q，2H)，2.58(bs，1H)，3.34(m，1H)，3.63(m，1H)，3.88(s，3H)，4.82(dd，1H)，5.98(bs，1H)，6.82(m，1H)，7.01(m，2H).LRMS：m/z 242(M-H+).
实施例19
1-(4-氟-3-甲氧基苯基)-2-丙基氨基乙醇
遵循与实施例3相同的方法，从实施例18所述酰胺(585mg，2.42mmol)开始制备。在6M HCl(aq)中回流后，将反应混合物冷却，用二乙醚萃取(2×50ml)。弃去有机层，向水层加入碳酸钾碱化。水性残余物然后用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为淡黄色油(448mg，1.97mmol，81％)。 1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.58(m，2H)，2.63(m，2H)，2.79(d，2H)，3.96(s，3H)，4.77(t，1H)，6.90(m，1H)，7.03(t，1H)，7.11(d，1H).LRMS：m/z 228(M-H+).
实施例20
2-氯-N-[2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-2-羟基乙基]-N-丙基乙酰胺
遵循与实施例4相同的方法，从实施例19所述胺(0.84g，4.00mmol)开始制备，得到标题化合物，为黄色的油(0.97g，3.00mmol，87％)。LRMS：m/z 304(M-H+)。粗品即可使用。
实施例21
6-(4-氟-3-甲氧基苯基)-4-丙基吗啉-3-酮
遵循与实施例5相同的方法，从实施例20所述酰胺(0.96g，3.00mmol)开始制备，得到标题化合物，为黄色的油(0.64g，2.40mmol，75％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.94(t，3H)，1.62(m，2H)，3.33(m，2H)，3.48(m，2H)，3.91(s，3H)，4.34(d，1H)，4.43(d，1H)，4.76(dd，1H)，6.85(m，1H)，7.01-7.08(m，2H).LRMS：m/z 268(M-H+).
实施例22
2-(4-氟-3-甲氧基苯基)-4-丙基吗啉
遵循与实施例6相同的方法，从实施例21所述吗啉-3-酮(633mg，2.37mmol)开始制备。在6M HCl(aq)中回流后，将反应混合物冷却，用二乙醚萃取(2×20ml)。弃去有机层，向水层加入碳酸钾碱化。水性残余物然后用乙酸乙酯萃取(3×20ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为黄色的油(552mg，2.18mmol，92％)。 1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.58(m，2H)，2.02(t，1H)，2.22(dt，1H)，2.38(t，2H)，2.85(d，1H)，2.93(d，1H)，3.80(m，1H)，3.84(s，3H)，4.01(dd，1H)，4.50(dd，1H)，6.88(m，1H)，7.02(t，1H)，7.09(d，1H).LRMS：m/z 254(M-H+).
实施例23A
R-(+)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
实施例23B
S-(-)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
遵循与实施例7相同的方法制备，从实施例22所述茴香醚(200mg，0.789mmol)开始制备。粗反应混合物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(90∶10)洗脱，得到标题所示外消旋化合物，为深黄色粘性油(149mg，0.62mmol，79％)。借助手性色谱分离对映体(ChiralpakAD 250*20mm柱)，用己烷∶异丙醇(90∶10)洗脱，得到对映体1(23a)，为不透明油(15mg)(ee＞99.5％)，和对映体2(23b)，为结晶性固体(16mg)(ee＞99％)。对映体1(23a)：
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.58(m，2H)，2.01(t，1H)，2.21(dt，1H)，2.37(t，2H)，2.82-2.97(bq，2H)，3.78(dt，1H)，3.99(dd，1H)，4.43(d，1H)，6.78(m，1H)，6.89-7.01(m，2H).LRMS：m/z 240(M-H+).αD＝+0.91(Ethanol 1.10mg/ml).对映体2(23b)：1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.58(m，2H)，2.01(t，1H)，2.22(dt，1H)，2.38(t，2H)，2.78(dd，2H)，3.78(dt，1H)，4.00(dd，1H)，4.43(dd，1H)，6.78(m，1H)，6.91(d，1H)，6.98(t，1H).LRMS：m/z 240(M-H+).αD＝-0.40(Ethanol 1.00mg/ml).
实施例24
2-氨基-1-(4-苄氧基苯基)乙醇
将氰化钾(20.15g，0.31mol)和氯化铵(16.4g，0.31mol)溶于水(60ml)，向其中加入4-苄氧基苯甲醛(32.9g，0.155mol)，继之以二乙醚(100ml)。将反应混合物在室温下剧烈搅拌48小时，然后用乙酸乙酯萃取(2×200ml)。合并有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到氰醇中间体，为黄色固体(34.2g，0.14mol，90％)。然后将氰醇溶于无水THF(300ml)，加入硼烷-甲基硫配合物(26.6ml，0.28mol)。将反应混合物回流2小时，然后用甲醇(50ml)猝灭。加入水(50ml)，继之以浓HCl(40ml)，将反应混合物搅拌2小时直至放热停止。然后在真空中浓缩反应混合物，残余物用水(100ml)稀释。然后向水溶液加入NH4OH(30ml)碱化，用乙酸乙酯萃取(3×150ml)。将有机萃取液经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为白色固体(24.8g，0.10mol，73％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.62(bs，3H)，2.81(dd，1H)，2.99(d，1H)，4.61(q，1H)，5.07(s，2H)，6.95(d，2H)，7.22-7.45(m，7H)LRMS：m/z 244(M-H+).
实施例25
N-[2-(4-苄氧基苯基)-2-羟基乙基]丙酰胺
将实施例24所述胺(24.8g，0.10mol)溶于二氯甲烷(700ml)，向其中加入三乙胺(20.86ml，0.15mol)。将反应混合物搅拌，冷却至0℃，然后滴加丙酰氯(7.12ml，0.082mol)。使反应混合物历经16小时温热至室温，然后用3M HCl(aq)(20ml)和水(100ml)猝灭。反应混合物用二氯甲烷萃取(3×200ml)，合并有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为澄清粘性树胶(27.5g，0.092mol，90％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.10(t，3H)，2.19(q，2H)，3.32-3.43(m，4H)，4.81(s，2H)，5.11(m，1H)，6.99(d，2H)，7.25-7.42(m，7H).LRMS：m/z 298(M-H-).
实施例26
1-(4-苄氧基苯基)-2-丙基氨基乙醇
向实施例25所述酰胺(27.5g，0.092mol)的无水THF(100ml)溶液加入硼烷-甲基硫配合物(17.5ml，0.18mol)，将反应混合物在回流下搅拌2小时。使反应混合物冷却，然后用甲醇(30ml)猝灭。加入水(50ml)和浓HCl(35ml)，将反应混合物搅拌直至不再冒泡，然后在真空中浓缩。向残余物加入水(250ml)，然后加入NH4OH(30ml)碱化。水层用乙酸乙酯萃取(3×200ml)，合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为白色固体(26.1g，0.09mol，99％)。 1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.58(q，2H)，2.62(m，2H)，2.81(m，2H)，4.72(dd，1H)，5.05(s，2H)，6.95(d，2H)，7.24(m，3H)，7.35(t，2H)，7.41(d，2H).LRMS：m/z 286(M-H+).
实施例27
6-(4-苄氧基苯基)-4-丙基吗啉-3-酮
将氢氧化钠(22.5g，0.56mol)的水(100ml)溶液加入到实施例26所述胺(26.0g，0.09mol)的二氯甲烷(400ml)溶液中，将溶液在室温下剧烈搅拌。然后加入氯乙酰氯(8.6ml，0.11mol)，将反应混合物搅拌另外60分钟。分离各层，水层用二氯甲烷(200ml)再萃取。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到无色的油。将氢氧化钾(15.0g，0.27mol)、异丙醇(400ml)和无色的油残余物一起与水(30ml)搅拌成不透明溶液达2小时。在真空中浓缩反应混合物，将黄色残余物溶于乙酸乙酯(200ml)。将其用水(200ml)、再用盐水(200m l)分配。将有机部分经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为白色固体(19.9g，0.06mol，67％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.62(m，2H)，3.34(m，2H)，3.51(m，2H)，4.32(d，1H)，4.41(d，1H)，4.72(dd，1H)，5.04(s，2H)，6.98(d，2H)，7.31-7.43(m，7H).LRMS：m/z 326(M-H+).
实施例28
2-(4-苄氧基苯基)-4-丙基吗啉
遵循与实施例26相同的方法，从实施例27所述吗啉-3-酮(19.9g，0.061mol)开始制备，得到标题化合物，为无色的油(17g，0.055mol，90％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.55(q，2H)，2.06(t，1H)，2.21(dt，1H)，2.35(dd，2H)，2.80(d，1H)，2.91(d，1H)，3.82(dt，1H)，4.02(dd，1H)，4.52(dd，1H)，5.05(s，2H)，6.98(t，2H)，7.24-7.42(m，7H).LRMS：m/z 312(M-H+).
实施例29
4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
将实施例28所述苄基醚(3.0g，9.64mmol)溶于甲醇(150ml)，加入10％披钯碳(800mg)。将反应混合物搅拌几分钟，然后分批加入甲酸铵(6.17g，96.4mmol)。将反应混合物小心地加热至80℃，直至不再放出气体。冷却后，将反应混合物通过arbacel过滤，用甲醇(50ml)洗涤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为白色结晶性固体(1.51g，6.83mmol，71％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.91(t，3H)，1.58(q，2H)，2.10(t，1H)，2.22(t，1H)，2.40(dd，2H)，2.81(d，1H)，2.93(d，1H)，3.85(t，1H)，4.02(dd，1H)，4.57(d，1H)，6.79(d，2H)，7.21(d，2H).LRMS：m/z 222(M-H+).
实施例30
2-溴-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
向实施例29所述苯酚(200mg，0.9mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液加入N-溴琥珀酰亚胺(161mg，0.9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌55分钟，然后在真空中浓缩。粗产物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(117.5mg，0.39mmol，44％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.96(t，3H)，1.59(q，2H)，2.03(t，1H)，2.23(t，1H)，2.40(t，2H)，2.81(d，1H)，2.98(d，1H)，3.82(t，1H)，4.01(d，1H)，4.56(d，1H)，6.96(d，1H)，7.20(d，1H)，7.49(s ，1H).LRMS：m/z 302(M-H+，Brisotope).
实施例31
2-(4-苄氧基-3-溴苯基)-4-丙基吗啉
在氮气氛下，向实施例30所述苯酚(117.5mg，0.39mmol)的无水DMF(10ml)溶液加入碳酸钾(75mg，0.54mmol)和苄基溴(0.07ml，0.54mmol)。将反应混合物加热至150℃达48小时。冷却后，在真空中浓缩反应混合物，使残余物在乙酸乙酯(50ml)与水(50ml)之间分配。然后用乙酸乙酯再萃取(2×20ml)水层。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物，为褐色的油。经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(98∶2)洗脱，得到标题化合物，为无色的油(153mg，0.39mmol，100％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.93(t，3H)，1.56(q，2H)，2.05(t，1H)，2.25(t，1H)，2.37(t，2H)，2.82(d，1H)，2.92(d，1H)，3.85(t，1H)，4.02(d，1H)，4.52(d，1H)，5.15(s，2H)，6.87(d，1H)，7.20(d，1H)，7.30(d，1H)，7.37(t，2H)，7.45(d，2H)，7.58(s，1H).LRMS：m/z 392(M-H+).
实施例32
2-苄氧基-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯甲酸甲基酯
向实施例31所述溴化物(153mg，0.39mmol)的无水DMF(4ml)溶液加入三乙胺(2.1ml，0.78mmol)和甲醇(2ml)，将反应混合物搅拌5分钟。加入[1，1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)与二氯甲烷的配合物(1∶1)(16mg，0.02mmol)，然后向反应混合物通入一氧化碳(g)(3只充气气囊)。在一氧化碳气氛下将反应混合物加热至100℃达16小时。冷却后，在真空中浓缩反应混合物，使残余物在乙酸乙酯(25ml)与水(20ml)之间分配。分离有机层，用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到黑色固体。经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶氨(90∶10∶1)洗脱，得到标题化合物，为无色的油(105mg，0.28mmol，73％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.94(t，3H)，1.60(m，2H)，2.18(s，4H)，2.43(m，2H)，3.00(m，2H)，3.90(s，3H)，4.04d，1H)，5.18(s，2H)，5.97(d，1H)，7.26-7.47(m，6H)，7.82(s，1H).LRMS：m/z 370(M-H+).
实施例33
2-苄氧基-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯甲酸
向实施例32所述甲基酯(105mg，0.28mmol)的甲醇(5ml)溶液加入10％氢氧化钠(aq)(15ml)，将乳白色悬液回流2小时。将现为无色的反应混合物冷却，然后加入2M HCl(aq)(几滴)中和。然后在真空中浓缩反应混合物，得到标题化合物，为灰白色固体(99mg，0.28mmol，100％)。LRMS：m/z 355(M-H+)。该物质以粗产物形式直接用于实施例34。
实施例34
2-苄氧基-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯甲酰胺
向实施例33所述粗苯甲酸(99mg，0.28mmol)加入亚硫酰氯(5ml)，将反应混合物加热至50℃达2小时。将反应混合物冷却，在真空中除去过量亚硫酰氯。然后将残余物溶于二氯甲烷(10ml)，向反应混合物通入氨(g)达10分钟。将所得悬液在室温下搅拌1小时，然后在真空中浓缩。粗产物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶氨(95∶5∶0.5)洗脱，得到标题化合物，为灰白色固体(88mg，0.25mmol，90％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.94(t，3H)，1.59(m，2H)，2.15-2.42(m，4H)，2.87(m，1H)，3.03(m，1H)，3.96(m，1H)，4.02(d，1H)，4.67(m，1H)，5.19(s，2H)，5.72(m，1H)，7.04(d，1H)，7.41(m，5H)，7.50(d，1H)，7.70(m，1H)，8.21(s，1H).LRMS：m/z 355(M-H+).
实施例35
2-羟基-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯甲酰胺
利用与实施例29相同的方法，从实施例34所述苄基酯(80mg，0.22mmol)开始制备，得到标题化合物，为灰白色固体(56mg，0.21mmol，96％)。 1H NMR(CD3OD，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.55(m，2H)，2.13(t，1H)，2.29(t，1H)，2.42(m，2H)，2.88(d，1H)，2.97(d，1H)，3.81(t，1H)，4.00(d，1H)，4.49(d，1H)，6.87(d，1H)，7.42(d，1H)，7.78(s，1H).LRMS：m/z 265(M-H+).
实施例36
2-硝基-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
将实施例29所述苯酚(100mg，0.45mmol)溶于硝酸∶水(1∶3)(2ml)，在室温下搅拌10分钟。然后将反应混合物用水(5ml)稀释，用NH4OH(1ml)碱化，然后用乙酸乙酯萃取(3×10ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(95mg，0.35mmol，79％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.97(t，3H)，1.33(t，2H)，1.43-1.79(bm，4H)，2.02(d，3H)，4.06(m，2H)，7.17(d，1H)，7.60(d，1H)，8.16(s，1H)，10.55(bs，1H).LRMS：m/z 267(M-H+).
实施例37
2-氨基-4-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
向实施例36所述硝基化合物(95mg，0.35mmol)的乙醇(10ml)溶液加入10％披钯碳(50mg)和甲酸铵(100mg，XS)。将反应混合物轻微加热至70℃，在该温度下保持1小时，然后冷却至室温。将反应混合物通过arbacel过滤，先用乙醇(20ml)、再用二氯甲烷(20ml)洗涤。合并有机洗涤液，在真空中浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(65mg，0.28mmol，78％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.91(t，3H)，1.55(m，2H)，2.12(t，1H)，2.25(dt，1H)，2.40(t，2H)，2.81-2.92(dd，2H)，3.82(t，1H)，4.00(d，1H)，4.42(d，1H)，6.60(m，2H)，6.71(s，1H).LRMS：m/z 237(M-H+).
实施例38
5-溴-2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶
将5-溴吡啶-2-基-胺(13.8g，0.08mol)、丙酮基丙酮(14.1ml，0.12mol)和对-甲苯磺酸(100mg)溶于甲苯(180ml)，在Dean Stark条件下回流14小时。冷却后，将褐色溶液倒入水(200ml)中，用甲苯萃取(2×200ml)。合并有机萃取液，用盐水(50ml)洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物。经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(1∶3)洗脱，得到标题化合物，为褐色的油(18.4g，0.073mol，92％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：2.18(s，6H)，5.90(s，2H)，7.11(d，1H)，7.92(d，1H)，8.62(s，1H).LRMS：m/z 253(M-H+，Brisotope).
实施例39
2-氯-1-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶-3-基]乙酮
在-78℃下，向实施例38所述溴代吡啶(2g，8.0mmol)的无水THF(30ml)溶液历经20分钟滴加丁基锂(2.5M己烷溶液)(3.5ml，8.8mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，然后滴加2-氯-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(1.2g，8.8mmol)的无水THF(20ml)溶液，保持温度为-78℃。继续在该温度下搅拌30分钟，然后加入1M HCl(aq)(50ml)，使反应混合物温热至室温。分离有机层，水层用乙酸乙酯(56ml)洗涤。合并有机层，然后用3M NaOH(aq)(10ml)和盐水(10ml)洗涤，再经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗的标题化合物，为褐色的油(1.34g，5.4mmol，67％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：2.20(s，6H)，4.68(s，2H)，5.92(s，2H)，7.32(d，1H)，8.38(d，1H)，9.16(s，1H).LRMS：m/z 249(M-H+).
实施例40
2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)-5-环氧乙烷基吡啶
向冷却至0℃的、实施例39所述酮(1.34g，5.4mmol)溶于无水THF(20ml)的溶液分批加入硼氢化钠(308mg，8.1mmol)。将反应混合物搅拌2小时，然后加入3M NaOH(aq)(10ml)，继续搅拌另外16小时。反应混合物用乙酸乙酯萃取(2×20ml)，合并有机萃取液，用盐水(5ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩。残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(1∶5)洗脱，得到标题化合物，为无色的油(900mg，4.2mmol，78％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：2.13(s，6H)，2.91(dd，1H)，3.25(t，1H)，3.98(t，1H)，5.90(s，2H)，7.20(d，1H)，7.62(dd，1H)，8.58(s，1H).LRMS：m/z 215(M-H+).
实施例41
1-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶-3-基]-2-丙基氨基乙醇
向实施例40所述环氧化物(900mg，4.2mmol)的DMSO(5ml)溶液加入丙胺(4ml，4.8mmol)，将反应混合物加热至40℃达4天。然后将反应混合物冷却，加入3M HCl(aq)(10ml)和水(10ml)，再用二乙醚洗涤(2×10ml)。弃去该有机层。水层用NH4OH(5ml)碱化，用乙酸乙酯萃取(3×10ml)。合并有机萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为油(1.15g，4.2mmol，100％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.93(t，3H)，1.62(m，2H)，2.11(s，6H)，2.69-2.82(m，3H)，3.06(dd，1H)，3.60(bs，2H)，4.92(dd，1H)，5.84(s，2H)，7.20(d，1H)，7.88(d，1H)，8.61(s，1H).LRMS：m/z 274(M-H+).
实施例42
6-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶-3-基]-4-丙基吗啉-3-酮
遵循与实施例27相同的方法，从实施例41所述胺(1.15g，4.2mmol)开始制备。经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(98∶2)洗脱，得到标题化合物，为褐色的膜(191mg，0.61mmol，14％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.97(t，3H)，1.65(m，2H)，2.13(s，6H)，3.38(m，1H)，3.42-3.56(m，2H)，6.61(t，1H)，4.35(d，1H)，4.45(d，1H)，4.91(dd，1H)，6.91(s，2H)，7.22(d，1H)，7.89(d，1H)，8.61(s，1H).LRMS：m/z 314(M-H+).
实施例43
6-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶-3-基]-4-丙基吗啉
向实施例42所述吗啉-3-酮(191mg，0.61mmol)的无水THF(5ml)溶液加入氢化铝锂(1M二乙醚溶液)(1.25ml，0.61mmol)，将反应混合物温热至回流达2.5小时。将反应混合物冷却至室温，然后加入1MNaOH(1.25ml)，得到白色沉淀。将反应混合物过滤，在真空中浓缩。弃去白色固体。浓缩滤液，经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(95∶5)洗脱，得到标题化合物，为白色的膜(108mg，0.36mmol，59％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.92(t，3H)，1.61(q，2H)，2.10(s，6H)，2.15(m，1H)，2.29(dt，1H)，2.40(t，2H)，2.82(d，1H)，3.02(d，1H)，3.90(t，1H)，4.08(d，1H)，4.71(d，1H)，5.89(s，2H)，7.20(d，1H)，7.81(d，1H)，8.60(s，1H).LRMS：m/z 300(M-H+).
实施例44A和44B
5-(4-丙基吗啉-2-基)吡啶-2-基胺
向实施例43所述2，5-二甲基吡咯(45mg，0.15mmol)的乙醇(3ml)溶液加入盐酸羟胺(52mg，0.75mmol)，将反应混合物加热至80℃达20小时。将反应混合物冷却至室温，在真空中浓缩。残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶氨(90∶10∶1)洗脱，得到外消旋化合物，为无色的膜(31mg，0.14mmol，94％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.92(t，3H)，1.60(m，2H)，2.11(t，1H)，2.25(dt，1H)，2.41(t，2H)，2.82-2.91(dd，2H)，3.89(dt，1H)，4.01(dd，1H)，4.57(bd，3H)，6.49(d，1H)，7.42(d，1H)，8.02(s，1H).LRMS：m/z 222(M-H+).
借助手性HPLC将该外消旋产物样品(580mg)分离为它的对映体。所用条件：Chiralpak AD柱(250×21.2mm)，洗脱剂甲醇∶乙醇(1∶1)，流速15mL/min。
得到较快洗脱的对映体实施例44A(保留时间8.3min)，＞99％ee.1H NMR(CDCl3，400MHz)与外消旋物相同.LRMS：m/z 222.分析实测C，63.54；H，8.60；N，18.38％.C12H19N3O.3H2O理论值C，63.58；H，8.71；N，18.53％.[α]25 546-2.1(c＝0.12，MeOH)；[α]25 436-8.9(c＝0.12，MeOH).
得到较慢洗脱的对映体实施例44B(保留时间9.4min)，＞98.9％ee.1H NMR(CDCl3，400MHz)与外消旋物相同.LRMS：m/z 222.分析实测C，63.53；H，8.57；N，18.36％.C12H19N3O.3H2O理论值C，63.58；H，8.71；N，18.53％.[α]25 546+2.4(c＝0.12，MeOH)；[α]25 436+7.2(c＝0.12，MeOH).
实施例45
2-乙基-6-(3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉-3-酮
将氢氧化钠(0.48g，12.0mmol)的水(2ml)溶液加入到实施例3所述产物(0.50g，2.4mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，将混合物在室温下搅拌。然后滴加2-氯丁酰氯(0.28ml，2.87mmol)，将反应混合物搅拌60小时。反应混合物用二氯甲烷(10ml)稀释，分离水层。将有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物，为澄清的油(含有环化与未环化产物的混合物)(0.57g)。LRMS：m/z 314(未环化产物的M-H+)，296(少量水的M-H+)，278(环化产物的M-H+)。将氢氧化钾(0.13g，2.20mmol)溶于水(1ml)，加入到粗产物(0.57g，1.83mmol)的异丙醇(5ml)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后在真空中蒸发有机溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(10ml)，分离水层。将有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物，为油。残余物经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(1∶5至1∶1)洗脱，得到标题化合物，为澄清的油(326mg，1.17mmol，49％)，为非对映体混合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t，3H)，1.00(t，3H)，1.60(m，2H)，2.00(bm，2H)，3.10-3.60(m，4H)，3.80(s，3H)，4.20(d，0.5H)，4.25(d，0.5H)，4.75(d，0.5H)，4.90(d，0.5H)，6.80(d，1H)，6.90(m，2H)，7.25(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 278(MH+)，276(MH-).
实施例46A和46B
2-乙基-6-(3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉
在氮气氛下，将硼烷-四氢呋喃配合物(1M THF溶液)(3ml，3mmol)滴加到实施例45所述产物(0.33g，1.18mmol)的无水THF(4ml)溶液中。将反应混合物在85℃下加热3小时，然后冷却，加入甲醇(1ml)猝灭。然后在真空中浓缩反应混合物，将残余物悬浮在6N HCl(aq)(10ml)中，加热至60℃达1.5小时。将反应混合物冷却，用二乙醚萃取(2×10ml)。向水层加入固体碳酸钾使之呈碱性(pH 9-10)，然后用二氯甲烷再萃取(2×15ml)。将二氯甲烷萃取液经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物，为澄清的油。经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(1∶10)洗脱，得到两种标题化合物，为单一的非对映体。
实施例46A：澄清的油(0.10g，0.38mmol，32％)：
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：1.00(m 6H)，1.60(bm，3H)，1.85(m，1H)，2.25(bt，2H)，2.35(s，1H)，2.45(m，1H)，2.60(m，1H)，2.65(m，1H)，3.70(s，1H)，3.80(s，3H)，4.80(s，1H)，6.80(d，1H)，7.00(m，2H)，7.25(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 264(M-H+).
实施例46B：澄清的油(0.10g，0.38mmol，32％)：
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t，3H)，1.00(t，3H)，1.60(bm，4H)，1.80(bs，1H)，2.00(bs，1H)，2.35(bs，2H)，2.85(bd，1H)，2.95(bd，1H)，3.60(s，1H)，3.80(s，3H)，4.60(s，1H)，6.80(d，1H)，6.95(s，2H)，7.25(t，1H).LRMS(APCI)：m/z 264(MH+).
实施例47A
3-(6-乙基-4-丙基-吗啉-2-基)-苯酚
将氢溴酸(48％aq.，5ml)和实施例46A所述产物(0.10g，0.38mmol)在80℃下加热16小时。冷却后，在真空中浓缩反应混合物。使残余物在氨水(0.880，15ml)与二氯甲烷(15ml)之间分配，分离各层，水层用二氯甲烷再萃取(2×15ml)。合并有机层萃取液，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩。粗产物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷、再用二氯甲烷∶甲醇(99∶1至95∶5)洗脱，得到标题化合物，为澄清的油(65mg，0.26mmol，69％)，为单一的非对映体。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(m 6H)，1.60(m，3H)，1.85(m，1H)，2.25(m，2H)，2.45(m，2H)，2.55(q，1H)，2.75(d，1H)，3.75(s，1H)，4.80(m，1H)，6.70(d，1H)，6.90(s，1H)，7.00(1H，d)，7.25(t，1H).LRMS(APCI)：m/z 250(MH+).分析实测值C，70.94％；H，9.16％；N，5.53％.C15H23NO2.0.3H2O理论值C，70.72％；H，9.34％；N，5.50％.
实施例47B
3-(6-乙基-4-丙基-吗啉-2-基)-苯酚
遵循与实施例47A相同的方法，从实施例46B所述产物(0.10g，0.38mmol)开始制备。无需经过二氧化硅柱色谱纯化。得到标题化合物，为黄色的油(57mg，0.23mmol，60％)，为单一的非对映体。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t，3H)，1.00(t，3H)，1.60(m，4H)，1.85(t，1H)，2.00(t，1H)，2.35(m，2H)，2.90(d，1H)，3.00(d，1H)，3.65(m，1H)，4.60(m，1H)，6.75(d，1H)，6.80(s，1H)，6.90(1H，d)，7.20(t，1H).LRMS(ESI)：m/z 250(MH+)，248(M-H-).分析实测值found C，71.63％；H，9.19％；N，5.55％.C15H23NO2.0.1H2O理论值C，71.73％；H，9.31％；N，5.58％.
实施例48
2-甲基-6-(3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉-3-酮
遵循与实施例45相同的方法，从实施例3所述产物(0.44g，2.10mmol)和2-氯丙酰氯(0.25ml，2.50mmol)开始制备。对标题化合物无需经过二氧化硅柱色谱纯化。得到标题化合物，为澄清的油(0.42g，1.60mmol，76％)，为非对映体的混合物。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.60(m，5H)，3.30(bm，2H)，3.50(bm，2H)，3.80(s，3H)，4.40(q，0.5H)，4.55(q，0.5H)，4.80(dd，0.5H)，4.95(dd，0.5H)，6.85(d，1H)，6.95(s，2H)，7.25(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 264(MH+)，262(MH-).
实施例49A和49B
2-甲基-6-(3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉
遵循与实施例46相同的方法，从实施例48所述产物(0.42g，1.6mmol)开始制备。经过二氧化硅柱色谱纯化，用乙酸乙酯∶戊烷(1∶6)洗脱，得到两种标题化合物，为单一的非对映体。
实施例49A：澄清的油(0.10g，0.40mmol，25％)：
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t 3H)，1.30(d，3H)，1.60(m，2H)，2.20-2.35(m，3H)，2.50(d，1H)，2.60(m，1H)，2.65(d，1H)，3.80(s，3H)，4.00(s，1H)，4.85(s，1H)，6.80(d，1H)，7.05(m，2H)，7.25(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 250(MH+).
实施例49B：澄清的油(0.10g，0.40mmol，25％)：
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t 3H)，1.25(m，3H)，1.60(m，2H)，1.80(m，1H)，2.00(bm，1H)，2.35(s，2H)，2.80(d，1H)，2.90(d，1H)，3.80(s，3H)，3.85(s，1H)，4.60(s，1H)，6.80(d，1H)，7.00(m，2H)，7.25(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 250(MH+).
实施例50A
3-(6-甲基-4-丙基-吗啉-2-基)-苯酚
遵循与实施例47A相同的方法，从实施例49A产物(0.10g，0.4mmol)开始制备。经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷、再用二氯甲烷∶甲醇(99∶1)洗脱，得到标题化合物，为澄清的油(70mg，0.30mmol，74％)，为单一的非对映体。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.35(d，3H)，1.55(m，2H)，2.25(m，2H)，2.35(m，1H)，2.50(m，1H)，2.55(m，1H)，2.75(d，1H)，4.05(s，1H)，4.85(m，1H)，6.70(d，1H)，6.90(s，1H)，7.00(1H，d)，7.20(t，1H).LRMS(APCI)：m/z 236(MH+).分析实测值C，70.62％；H，8.89％；N，5.95％.C14H21NO2.0.1H2O理论值C，70.91％；H，9.01％；N，5.91％.
实施例50B
3-(6-甲基-4-丙基-吗啉-2-基)-苯酚
遵循与实施例47A相同的方法，从实施例49B所述产物(0.10g，0.4mmol)开始制备。无需经过二氧化硅柱色谱纯化。得到标题化合物，为黄色的油(100mg，0.42mmol，103％-含有3％原料)，为单一的非对映体。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t，3H)，1.25(d，3H)，1.60(m，2H)，1.85(m，1H)，2.00(m，1H)，2.35(m，2H)，2.85(d，1H)，3.00(d，1H)，3.85(s，1H)，4.60(d，1H)，6.75(d，1H)，6.80(s，1H)，6.90(1H，d)，7.20(m，1H).LRMS(APCI)：m/z 236(MH+).分析实测值C，69.38％；H，8.86％；N，5.73％.C14H21NO2.0.45H2O理论值C，69.33％；H，9.06％；N，5.78％.
实施例51
1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-2-丙基氨基-乙醇
将三乙酰氧基硼氢化钠(1.25g，5.89mmol)小心地加入到2-氨基-1-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-乙醇(J.Med.Chem.，30(10)，1887，(1987))(600mg，2.98mmol)与丙醛(0.22ml，2.96mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，将反应混合物在室温下搅拌1小时。滴加碳酸氢钠溶液(饱和水溶液，10ml)，然后将反应混合物进一步用水(20ml)和二氯甲烷(20ml)稀释。分离水层，用二氯甲烷再萃取(2×20ml)。合并有机层，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩。粗产物经过二氧化硅柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶0.880氨(95∶5∶0.5至92∶8∶0.8)洗脱，得到标题化合物，为固体(320mg，1.31mmol，44％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.90(t，3H)，1.50(q，2H)，2.50-2.70(m，5H)，2.90(dd，1H)，3.80(s，3H)，4.65(dd，1H)，6.85(d，1H)，7.00(1H，d)，7.30(bd，1H).LRMS(APCI)：m/z 244(MH+)，226(MH+less H2O).
实施例52
6-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉-3-酮
将氯乙酰氯(0.11ml，1.33mmol)加入到实施例51所述产物(0.31g，1.27mmol)与三乙胺(0.19ml，1.36mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，在室温下搅拌60小时。将反应混合物用二氯甲烷(20ml)稀释，用盐酸(aq.1N，10ml)、水(10ml)和碳酸氢钠溶液(饱和水溶液，10ml)洗涤。将有机层经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到未环化产物，为油(0.40g)。LRMS(APCI)：m/z 320(未环化产物的MH+)，302(少量水的MH+)，284(环化产物的MH+)。将氢氧化钾(0.75g，1.33mmol)加入到未环化产物(0.40g，1.23mmol)的异丙醇(10ml)与水(0.4ml)溶液中，在室温下搅拌16小时。在真空中浓缩反应混合物，在二氯甲烷(30ml)与水(30ml)之间分配。分离各层，水层用二氯甲烷再萃取(2×20ml)。合并有机层，用水(30ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为油(0.34g，1.19mmol，94％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.60-1.70(m，2H)，3.30-3.40(m，2H)，3.40-3.55(m，2H)，3.95(s，3H)，4.35(bd，1H)，4.42(bd，1H)，4.78(dd，1H)，6.85(dd，1H)，7.00(s，1H)，7.38(dd，1H).LRMS(APCI)：m/z 284(MH+).
实施例53
6-(4-氯-3-甲氧基-苯基)-4-丙基-吗啉
在氮气氛下，将硼烷-四氢呋喃配合物(1M THF溶液)(3.5ml，3.5mmol)滴加到实施例52所述产物(0.33g，1.16mmol)的无水THF(3ml)溶液中。将反应混合物回流2.5小时，然后冷却，加入甲醇(1ml)猝灭。在真空中浓缩反应混合物，将残余物悬浮在4N HCl(aq.，8ml)中，回流2小时。将反应混合物冷却，用二氯甲烷萃取(2×10ml)。弃去有机层。向水层加入固体碳酸钾使之呈碱性(pH 9-10)，然后用二氯甲烷再萃取(2×15ml)。将二氯甲烷萃取液用水(10ml)洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，在真空中浓缩，得到标题化合物，为油(0.31g，1.15mmol，99％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.45-1.60(m，2H)，2.00(t，1H)，2.20(t，1H)，2.35(t，2H)，2.80(d，1H)，2.90(d，1H)，3.80(t，1H)，3.90(s，3H)，4.03(dd，1H)，4.55(d，1H)，6.85(dd，1H)，7.00(s，1H)，7.30(dd，1H).LRMS(APCI)：m/z 270(MH+).
实施例54
2-氯-5-(4-丙基-吗啉-2-基)-苯酚
遵循与实施例7b相同的方法(不过回流持续2.5小时而非1小时)，从实施例53所述产物(0.28g，1.02mmol)开始制备。无需经过二氧化硅柱色谱纯化。得到标题化合物，为淡褐色树胶(0.21g，0.82mmol，81％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.93(t，3H)，1.55(q，2H)，2.0(t，1H)，2.20(dt，1H)，2.30-2.40(m，2H)，2.80(bd，1H)，2.90(bd，1H)，3.80(dt，1H)，4.0(dd，1H)，4.30(d，1H)，6.87(dt，1H)，7.02(fd，1H)，7.25(s，1H).LRMS(APCI)：m/z 256(MH+).分析实测值C，60.71％；H，7.10％；N，5.45％.C13H18NO2Cl理论值C，61.05％；H，7.09％；N，5.48％.
实施例55
(2S)-2-(丙酰氨基)丙酸甲酯
将L-丙氨酸甲酯盐酸盐(14g，0.1mol)溶于二氯甲烷(150ml)，用三乙胺(30.45g，0.3mmol)处理。搅拌该溶液，滴加丙酰氯。搅拌过夜后，向混合物加入1M盐酸(200ml)猝灭，分离有机层。水层用二氯甲烷再萃取(3×200ml)，合并有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发，得到澄清的油(16.0g，定量)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.25(d，3H)，2.1(q，2H)，3.6(s，3H)，4.2(quin，1H)，8.2(bd，1H).LRMS(ESI+)m/z 160(MH+)
实施例56
(1S)-2-羟基-1-甲基乙基(丙基)氨基甲酸叔丁基酯
将实施例55所述产物溶于四氢呋喃(200ml)，在室温下向搅拌着的溶液加入硼烷-四氢呋喃配合物(300ml，0.3mol)。然后将混合物在回流下加热过夜。冷却至室温后，向反应物小心地加入6M盐酸(100ml)以猝灭反应，然后加热至回流达6小时。使反应混合物冷却至室温过夜，然后蒸发至干(11.77g)。粗混合物的m/z为118，与所需氨基醇中间体一致。然后将粗混合物溶于甲醇(50ml)与水(400ml)，再加入氢氧化钾(28.22g，0.5mol)。向混合物加入二碳酸二叔丁酯(32.87g，0.15mol)，继续搅拌3天。使反应混合物在DCM(500ml)与水(100ml)之间分配，分离有机层，水层用DCM再萃取两次。合并有机部分，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发得到粗产物。经过SiO2快速色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶880NH3(97∶3∶0.3)洗脱，得到所需产物(为澄清的油(4.5g，21％))，以及另外10g部分纯化的产物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.8(t，3H)，1.05(bs，3H)，1.4(m，11H)，2.95(bs，2H)，3.35(bm，3H)，4.6(bs，1H)LRMS(ESI+)m/z 240(MNa+)
实施例57
(2S)-2-(丙基氨基)丙-1-醇盐酸盐
将实施例56所述纯产物(4.2g，0.021mol)溶于二噁烷(10ml)，用4M HCl的二噁烷溶液(30ml)处理。将混合物在室温下搅拌16小时，然后蒸发得到白色固体(2.74g，92％)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.9(t，3H)，1.15(d，3H)，1.6(m，2H)，2.8(m，2H)，3.15(m，1H)，3.5(bm，1H)，3.6(m，1H)，5.4(bs，1H)，8.8(bd，2H).LRMS(APCI+)118(MH+)
实施例58
(5S)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-醇
将实施例57所述产物(1.0g，6.6mmol)溶于甲苯(10ml)，用三乙胺(1.38g，14mmol)处理，然后加入2-溴-3′-甲氧基苯乙酮(1.5g，6.6mmol)。将混合物加热至65℃，搅拌3天。冷却至室温后，使混合物在盐水与乙酸乙酯之间分配，分离有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发。残余物经过SiO2快速色谱纯化，用乙酸乙酯洗脱，得到所需吗啉醇(morpholinol)化合物，为立体异构体的混合物，淡黄色油(1.0g，58％)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：0.8(m，3H)，0.95(d，3H)，1.35(m，2H)，2.1(m，2H)，2.4(bm，1H)，2.6(m，1H)，2.75(m，1H)，3.5(d，1H)，3.75(m，4H)，6.0(s，0.75H)，6.1(s，0.25H)，6.85(d，1H)，7.05(m，2H)，7.25(t，1H).LRMS(ESI+)m/z 248(M-H2O)，266(MH+)，288(MNa+)
实施例59
(5S)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基-4-丙基吗啉
将实施例58所述产物(770mg，2.9mmol)溶于二氯甲烷(20ml)，在氮气氛下冷却至-78℃。向搅拌着的混合物加入三乙基硅烷(3.7ml，23mmol)，继而加入三甲代甲硅烷基三氟甲磺酸酯(1.1ml，5.8mmol)。继续搅拌过夜，使反应混合物达到室温。向反应物加入饱和碳酸氢钠水溶液以猝灭反应，用二氯甲烷萃取(三次)。合并有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发。粗产物经过SiO2快速色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇∶880氨(97∶3∶0.3)洗脱，得到所需吗啉化合物(600mg，83％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(m，3H)，1.1(b，d，3H)，1.6(bm，2H)，2.2-3.1(5H)，3.5(bm，1H)，4.85(m，4H)，4.6(b，1H)，6.8(d，1H)，6.95(m，2H)，7.25(m，1H+CHCl3)
LRMS(APCI+)m/z 250(MH+)
分析实测值C，71.53％；H，9.21％；N，5.55％.C15H23NO2.0.15H2O理论值C，71.48％；H，9.32％；N，5.56％.
实施例60
3-[(5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]苯酚
将实施例59所述产物(400mg，1.6mmol)溶于48％氢溴酸水溶液(8ml)，将混合物加热至80℃过夜。冷却至室温后，向混合物加入饱和碳酸氢钠水溶液猝灭反应，混合物用二氯甲烷萃取(三次)。合并有机层，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发，得到产物，为白色固体(285mg，76％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.9(m，3H)，1.1+1.2(2xd，3H)，1.5(m，2H)，2.3(m，2H)，2.5(bm，1H)，2.8(bm，1H)，3.1(d，1H)，3.5(bm，1H)，3.85(bm，1H)，4.6(d，1H)，6.8(m，2H)，6.95(m，1H)，7.2(t，1H)
LRMS(APCI+)，236(MH+)
分析实测值C，70.61％；H，9.00％；N，5.86％.C14H21NO2.0.1H2O理论值C，70.91％；H，9.01％；N，5.91％.
在Chiralcel OJ-H(250*21.2mm)HPLC柱上分离该非对映体混合物。移动相100％MeOH，流速15ml/min。将200mg溶于4ml MeOH，制备样品，注射250μL。得到两个主峰，保留时间为5.822min(实施例60A，57mg 28％)和7.939min(实施例60B，12mg，6％)。
实施例60A：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.85(t，3H)，1.05(d，3H)，1.5(m，2H+H2O)，2.2(m，2H)，2.4(m，1H)，2.8(m，1H)，3.0(d，1H)，3.4(t，1H)，3.9(dd，1H)，4.55(d，1H)，5.6(bs，1H)，6.75(d，1H)，6.85(s，1H)，6.95(d，1H)，7.2(t，1H)
HRMS m/z 236.1643(MH+)
实施例60B：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.15(d，3H)，1.55(m，2H)，2.4(m，2H)，2.55(t，1H)，2.65(dd，1H)，2.95(bm，1H)，3.8(d，1H)，3.95(d，1H)，4.55(dd，1H)，6.75(d，1H)，6.85(s，1H)，6.95(d，1H)，7.2(t，1H)
HRMS m/z 236.1643(MH+)
实施例61
(S)-2-丙基氨基-丙-1-醇盐酸盐
向(S)-(+)-2-氨基-1-丙醇(19.6g，0.26mol)的二氯甲烷(500ml)溶液加入丙醛(20.9ml，0.28mol)，继而加入预干燥的、经过粉碎的4A分子筛(40g)，将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物通过C盐垫过滤，用二氯甲烷洗涤垫子，蒸发溶剂，得到澄清的油。将该油溶于甲醇(200ml)，历经15分钟分批加入NaBH4。将混合物在室温下搅拌过夜，然后小心地加入2M HCl(aq)(200ml)猝灭反应，加入2M NaOH(200ml)碱化，蒸发除去甲醇。加入二碳酸二叔丁酯(115g，0.52mol)，继而加入1，4-二噁烷(200ml)，将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发除去1，4-二噁烷，得到澄清的油。向该油加入4M HCl的1，4-二噁烷溶液(200ml)，将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发除去溶剂，得到白色固体(24g)。
1H NMR(DMSO，400MHz)δ：0.95(t，3H)，1.2(d，3H)，1.6(m，2H)，2.8(m，2H)，3.15(m，1H)，3.5(bm，1H)，3.6(m，1H)，5.4(b，1H)，8.6-8.9(bd，2H)LRMS(APCI+)，118(MH+)
实施例62
(5S)-4-丙基-5-甲基吗啉-2-酮
将实施例61产物(4g，26mmol)溶于苯，继之以加入N-乙基二异丙胺(9.07ml，52mmol)和溴乙酸甲酯(2.4ml，26mmol)。将混合物加热至回流过夜，同时共沸除去水。蒸发除去溶剂，将粗产物溶于甲醇，预吸附到SiO2上，经过SiO2快速色谱处理，用40％EtOAc/戊烷洗脱，得到标题所示吗啉酮，为澄清的油(1.78g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ：0.9(t，3H)，1.1(d，3H)，1.5(m，2H)，2.25(m，1H)，2.6(m，1H)，2.8(m，1H)，3.2(d，1H)，3.6(d，1H)，4.05(dd，1H)，4.3(dd，1H)t.l.c.Rf＝0.18(50％EtOAc/Pentane，UV visualisation)
实施例63
(5S)-2-[6-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)吡啶-3-基]-4-丙基-5-甲基吗啉-2-醇
将5-溴-2-(2，5-二甲基-吡咯-1-基)-吡啶(1.5g 5.9mmol)与甲苯共沸，溶于THF(20ml)。将该混合物冷却至-78℃，加入叔丁基锂(1.7M戊烷溶液，7ml，11.9mmol)，同时维持温度低于-70℃。将实施例62产物溶于THF(20ml)，加完叔丁基锂后立即加入到混合物中。将混合物在-78℃下搅拌30分钟，此时加入NH4Cl(10％aq，150ml)，将混合物用EtOAc(200ml)萃取，用硫酸镁干燥，过滤，蒸发。经过SiO2快速色谱处理，用25％EtOAc/戊烷至50％EtOAc/戊烷分步梯度洗脱，得到标题化合物，为非对映体的混合物，比例大约3.5∶1，为黄色的油(480mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)(非对映体)δ：0.95(m，3H)，1.1，1.2(2xd，3H)1.5(m，2H)，2.15(s，6H)，2.4(m，1H)，2.5(d，1H)，2.6(m，1H)，2.75(m，1H)3.85-3.95(m，1H)，3.6，3.75，4.4(3xm，2H)，5.15(bs，1H)，5.9(s，2H)，7.2(d，1H)，8.05(dd，1H)，8.8(s，1H)
LRMS(ES+)，330(MH+)，352(MNa+)
LRMS(ES-)，328(M-H)
实施例64
(2S)-2-[{(2RS)-2-[6-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)吡啶-3-基]-2-羟基乙基}丙基]氨基]丙-1-醇
将(5S)-2-[6-(2，5-二甲基-1H-吡咯-1-基)吡啶-3-基]-4-丙基-5-甲基吗啉-2-醇(480mg，1.45mmol)溶于乙醇(5ml)和水(2ml)，用硼氢化钠(220mg，5.8mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后加入饱和NH4Cl水溶液(50ml)猝灭反应，用乙酸乙酯萃取(2×100ml)。合并有机萃取液，用MgSO4干燥，蒸发，得到400mg绒毛状白色固体，无需进一步纯化即可使用。
1H NMR(CDCl3，400MHz)非对映体δ：0.8-1.1(m，6H)，1.15，1.35(2xd，3H)，1.6-2.0(m，2H)2.1(s，6H)，2.5-4.05(m，7H)，4.8-5.2(m，1H)，5.9(s，2H)，7.2(m，1H)，7.8-8.1(m，1H)，8.55(m，1H).LRMS(ES+)，332(MH+)
实施例65
(2S)-2-[[(2RS)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-2-羟基乙基](丙基)氨基]丙-1-醇
将(2S)-2-[[(2RS)-2-(6-氨基吡啶-3-基)-2-羟基乙基](丙基)氨基]丙-1-醇(400mg，1.2mmol)溶于EtOH(5ml)，加入盐酸羟胺(419mg，6mmol)，将混合物加热至80℃过夜。在真空下除去溶剂，残余物经过SiO2快速色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/880氨(95∶5∶0.5，极性增至93∶7∶1)洗脱，得到标题化合物，为非对映体的混合物(300mg，98％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)(2种非对映体)δ：0.82-0.97(6H，m)，2.40-2.77(2H，m)，3.27-3.51(2H，m)，4.51(1H，m)，6.58(1H，m)，7.49(1H，m)，7.86(1H，m)
LRMS(APCI+)，254(MH+)
实施例66和67
5-[(2S，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺
和
5-[(2R，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺
将实施例65的“二醇”(300mg，1.2mmol)溶于二氯甲烷(3ml)，加入浓硫酸(3ml)。将混合物在室温下搅拌3小时。将反应物冷却至0℃，小心地加入6M氢氧化钠溶液猝灭反应，然后用二氯甲烷萃取(4×50ml)。合并萃取液，干燥(MgSO4)，蒸发，得到褐色胶状固体。经过SiO2快速色谱纯化，用含10％甲醇的乙酸乙酯洗脱，得到5mg富集了弱极性非对映体的产物(约80％d.e.)、12mg富集了弱极性非对映体的产物(约80％d.e.)和150mg非对映体的约1∶1混合物(总收率167mg，59％)。使后者1∶1混合物经过Chiralpak OD-H柱(250×21.2mm)HPLC纯化，用甲醇/乙醇(1∶1)洗脱。
得到较快洗脱的非对映体(保留时间8.1min)，＞99％d.e.(60mg，21％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)0.88(3H，t)，1.01(3H，d)，1.26(3H，t)，1.37-1.58(2H，m)，2.18-2.28(2H，m)，2.36-2.47(1H，m)，2.69-2.77(1H，m)，2.90(1H，m)，3.38(1H，m)，3.72(2H，d)，3.82(1H，m)，4.40(2H，brs)，4.45(1H，dd)，6.48(1H，d)，7.45(1H，dd)，8.04(1H，d)LRMS(ES+)：m/z 236(MH+)
[α]D 25 46.28(c 0.13，MeOH)
得到较慢洗脱的非对映体(保留时间10.5min)，＞99％d.e.(62mg，22％)。 1H NMR(CDCl3，400MHz)0.93(3H，t)，1.11(3H，d)，1.49(2H，m)，2.38(2H，m)，2.50-2.56(2H，m)，2.89(1H，m)，3.75(1H，m)，3.89(1H，m)，4.40(2H，brs)，4.46(1H，m)，6.50(1H，d)，7.50(1H，dd)，8.07(1H，d)LRMS(ES+)：m/z 236(MH+)
[α]D 2522.58(c 0.13，MeOH)
Claims (15)
1、式(I)、(Ia)或(Ib)化合物
其中：
A选自C-X和N，
B选自C-Y和N，
R1选自H和(C1-C6)烷基，
R2选自H和(C1-C6)烷基，
X选自H、HO、C(O)NH2、NH2，
Y选自H、HO、NH2、Br、Cl和F，
Z选自H、HO、F、CONH2和CN；
及其药学上可接受的盐、溶剂化物和前体药物；
其条件是：
就式(I)、(Ia)或(Ib)化合物而言，若A是C-X，B是C-Y，R1是H或(C1-C6)烷基，R2是H或(C1-C6)烷基，则X、Y和Z至少有一个必须是OH；
就式(I)化合物而言，若A是C-X，B是C-Y，Y是H，Z是H，R1是H，R2是H，则X不能是OH。
2、如权利要求1所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中A是C-X或N，B是C-Y。
3、如权利要求1-2所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中R1是H、甲基和乙基。
4、如权利要求1-3所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中R2选自H和甲基。
5、如权利要求1-4所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中X选自H、OH和NH2。
6、如权利要求1-5所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中Y选自H、NH2、Cl和F。
7、如权利要求1-6所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物，其中Z选自H、HO和F。
8、R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
S-(+)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
R-(-)-3-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚盐酸盐
R-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚
S-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯-1，3-二酚
R-(+)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
S-(-)-2-氟-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
5-(4-丙基吗啉-2-基)吡啶-2-基胺
2-氯-5-(4-丙基吗啉-2-基)苯酚
5-[(2S，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺
5-[(2R，5S)-5-甲基-4-丙基吗啉-2-基]吡啶-2-胺
9、如权利要求1-8所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物用作药物。
10、如权利要求1-8所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物在制备治疗病症的药品中的用途，所述病症选自：性功能障碍、女性性功能障碍(包括性欲过少症、性唤起障碍、性高潮障碍和性交痛症)、男性勃起功能障碍、高血压、神经变性、精神病、抑郁(例如癌症患者抑郁、帕金森氏病患者抑郁、心肌梗塞后抑郁、亚综合征症状性抑郁、不孕女性抑郁、儿童抑郁、重症抑郁、单发作性抑郁、复发性抑郁、虐待儿童诱发的抑郁、产后抑郁和老人性情暴躁综合征)、广泛性焦虑症、恐怖(例如广场恐怖、社交恐怖和单纯恐怖)、创伤后精神紧张综合征、逃避人格障碍、早泄、进食障碍(例如神经性食欲缺乏和神经性食欲过盛)、肥胖、化学品依赖(例如对酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥、烟碱和苯并二氮杂类成瘾)、簇性头痛、偏头痛、疼痛、阿尔茨海默氏病、强迫症、恐慌症、记忆障碍(例如痴呆、健忘症和衰老相关性认知减退(ARCD))、帕金森氏病(例如帕金森氏病痴呆、神经抑制剂诱发的震颤麻痹和迟发性运动障碍)、内分泌障碍(例如高催乳激素血症)、血管痉挛(特别是在脑脉管系统中)、小脑共济失调、胃肠道障碍(牵涉能动性和分泌的改变)、精神分裂症的负性症状、经前期综合征、纤维肌痛综合征、紧张性尿失禁、图雷特氏综合征、拔毛发癖、盗窃癖、男性阳痿、注意缺陷多动症(ADHD)、慢性发作性偏头痛、头痛(与血管障碍有关)、情绪不稳定、病理性哭喊、睡眠障碍(猝倒)和休克。
11、如权利要求10所要求保护的用途，其中所述病症是女性性功能障碍、男性勃起功能障碍、神经变性、抑郁和精神病学障碍。
12、如权利要求10所要求保护的用途，其中所述病症是男性勃起功能障碍。
13、如权利要求10所要求保护的用途，其中所述病症是女性的性欲过少症、性唤起障碍、性高潮障碍和性交痛症。
14、如权利要求13所要求保护的用途，其中所述病症是女性性唤起障碍和伴随的性欲过少症。
15、一种组合物，其中含有如权利要求1-8所要求保护的式(I)、(Ia)或(Ib)化合物和药学上可接受的稀释剂或载体。
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