CN1660051A - 一种藏药浴散剂的制备方法及其质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种藏药药浴散剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：取刺柏：1－10重量份；水柏枝：1－10重量份；烈香杜鹃：1－10重量份；大籽蒿：1－10重量份；麻黄1－10重量份；将进行过预处理的药材合物混合均匀，超微粉碎成0.01－100μm，包装即可。其中组合物中还可以加杜仲或独一味1－3重量份；还可加入助悬剂或香料；超微粉碎粉碎成0.01－0.5μm、0.4－1.2μm、1－50μm、40－80μm、60－100μm。本发明还公开了藏药浴散剂的含量测定方法，本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C₁₀H₁₅NO·HCl计，不得少于0.05％。

Description

一种藏药浴散剂的制备方法及其质量控制方法

技术领域

本发明涉及一种藏药浴散剂的制备方法及其质量控制方法，特别涉及一种五味甘露药浴散剂的制备方法及其质量控制方法。

背景技术

藏药浴就是全面体现藏医学理论体系和药物特点的独特的外治疗法之一，并在长期积累的医学知识基础上，逐渐和药物外治疗法相结合，经过千百年临床实践而发展成为药物疗法的分支，具有简便、适用范围广等特点。由于药浴直接作用于病变部位，见效快，无痛苦，不仅具有治疗作用，还同时具有清洁、预防、保健等优势，所以备受历代医家的重视和推崇，并伴随祖国医学外科的发展而成熟。的剂型改革。

五味甘露汤是传统的藏药浴方剂，其制法为刺柏、烈香杜鹃、大籽蒿、麻黄、水柏枝，将五味药材捣碎即可，用时煎汤，即得。此方为藏族验方，主要用于痹病即风湿性关节炎、类风湿关节炎、痛风、偏瘫、皮肤病、妇女产后疾病等。

发明内容

本发明目的在于提供一种五味甘露药浴散剂的制备方法及其含量测定方法。本发明技术方案如下：

取刺柏1-10重量份、水柏枝1-10重量份、烈香杜鹃1-10重量份、大籽蒿1-10重量份和麻黄1-10重量份，将进行过预处理的药材混合均匀，超微粉碎成0.01-100μm，包装即可。

其中上述原料药中还可以加杜仲1-3重量份或独一味1-3重量份，上述原料药中还可加入0.001-1重量份助悬剂或0.001-0.1体积份香料；

其中助悬剂为硅皂土、卡波姆、硅酸铝或丙烯酸钠(NP-700)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)白兰叶油、白兰花油、茉莉花油、薄荷油、白芷油、玫瑰油、灵香草油、杜鹃油、亚麻油或芝麻油等。

其中超微粉碎粉碎成0.01-0.5μm、0.4-1.2μm、1-50μm、40-80μm、60-100μm。

其中重量份/体积份所对应的单位为g/ml。

本药物组合物的质量控制方法中的含量测定方法如下：

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；以2-5∶98-95∶0.1-0.5甲醇-水-三乙胺为流动相，用磷酸调pH值至2-6；检测波长为210nm；柱温：15-25℃；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇溶液或含2-10％氨水的甲醇溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取粉碎成0.01-150μm的本药物组合物1.0-1.5g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液或含2-10％氨水的甲醇溶液25ml，称定重量，回流提取或超声提取30-60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C10H15NO·HCl计，不得少于0.05％。

中药、藏药中传统的粉碎加工方法使药物粒度最细在180-150μm之间。而本发明的将原料药超微粉碎成0.01-100μm，不再需要浸提、加热煎煮，因此本发明的方法的具体优点如下：

1、本发明生产加工简单、易行，改变了原使用方法中需要煎煮的繁杂程序，符合现代人的快节奏的生活；同时可实现了工业化生产，产品面向千家万户的患者，也可长途运输进入国际市场。

2、改变后的五味甘露药浴汤散，药物作用方式简单、方便，不需添加任何化学合成的稳定剂，所以使用安全，方便。在日常洗澡的过程中既可同时使用，疗效显著。

3、本发明采用天现代先进技术，有效地保留药材中的活性物质和药材的有效成份，又大大提高了生药成分的溶出度，同时提高生物利用度，使疗效更佳；

4、大大延长药品存放时间，便于使用和携带。采用加速试验方法，对本发明的新的五味甘露药浴散剂于37-40℃和相对湿度75％的条件下观察24个月，对各项进行测定，理化性状均未发生变化，各项指标均通过实验，说明其稳定性良好。

5、本发明采用高效液相法测定五味甘露浴散剂中的主要有效成分麻黄碱，结果表明，方法简便，重现性及稳定性比薄层扫描含量测定法提高，可作为质量控制指标。

下面实验例用于进一步说明但不限于本发明。

实验例1：超微粉碎与传统散汤剂的临床疗效比较试验

诊断标准：(1)主要临床表现：关节、肌肤、筋骨等部位痛，或肿胀晨僵、麻木重着、或屈伸不利，甚则关节肿大变形，强直不伸或肌肉萎缩等；(2)发病特点：多与气候变化有关；(3)性别年龄特点：好发于青壮年，女多于男；(3)性别年龄特点：好发于青壮年，女多于男。西医相应疾病的诊断：(1)类风湿性关节炎的诊断：必须具备下述4条或4条以上标准：a.晨僵至少1小时，持续6周以上；b.3个或3个以上的关节肿胀持续至少6周以上；)c.腕关节、掌指关节(MCP)或近端指间关节(PIP)肿胀6周以上；d.对称性关节肿胀；e.皮下类风湿结节；f.类风湿性因子阳性；g.手指关节X线变化证实。(2)风湿性关节炎诊断标准：a.临床表现：多有链球菌感染病史，急性期可有多发性及游走性关节酸痛，多发生在大关节，可伴红肿痛或结节或红斑，慢性期可仅感关节酸痛。b.化验：抗“O”在1∶500以上或抗链球菌激酶超过80单位，或抗透明质酸酶超过128单位，血沉增快或C反应蛋白(CRP)＞10％；c.X线片：骨质无损害。

验证病例标准：1、纳入病例标准：(1)符合藏医诊断标准者；(2)年龄为18～65岁的患者。2、排除病例标准：(1)类风湿性关节炎的晚期畸形、残废、丧失劳动力者；(2)年龄18岁以下，65岁以上，孕妇或哺乳期妇女；(3)虽为本病，但长期服用西药或其他药物者，必须停用，否则宜排除；(4)合并心血管、肝、胃和造血系统等严重原发疾病、精神病患者；(5)不符合纳入标准，未按规定用药，无法判定疗效或资料不全等，影响疗效或安全性判断者。

用药方法：治疗组：取刺柏1重量份、水柏枝1重量份、烈香杜鹃1重量份、大籽蒿1重量份和麻黄1重量份，将进行过预处理的药材混合均匀，超微粉碎成50μm，分装为500g/袋。每次一袋，注入浴盆，水温40℃，搅匀浸泡全身或患病部位，每日2次，每次15--30分钟，卧床发汗；对照组：取刺柏1重量份、水柏枝1重量份、烈香杜鹃1重量份、大籽蒿1重量份和麻黄1重量份，将进行过预处理的药材混合均匀，超微粉碎成200μm，分装为500g/袋。每次一袋，煎汤倒入浴盆，水温40℃，浸泡全身或患病部位，每日2次，每次15--30分钟，卧床发汗。

疗程：两组均以7天为一疗程，必要时可重复1-2个疗程。观察指标：1、关节、肌肉、筋骨等局部症状，如疼痛、肿胀程度的变化；2、关节功能的恢复情况；3、伴随的全身症状的改善情况；4、舌脉变化；5、血沉、抗“0”。疗效判定标准：1、痊愈：症状全部消失，功能活动恢复正常，主要西医检测指标正常；2、显效：全部症状消除或主要症状消除，关节功能基本恢复，能参加正常工作和劳动，检测指标基本正常；3、有效：主要症状基本消除，主要关节功能基本恢复或有明显进步，生活不能自理转为能够自理，或失去工作和劳动能力转为劳动和工作能力有所恢复，主要检测指标有所改善。

治疗组和对照组资料情况：性别：82例中，男性：治疗组23例，对照组1 3例；女性：治疗组28例，对照组18例。年龄分布见表1；各组病人入院时病程分布见表2；以下临床资料表明，治疗组、对照组在性别、年龄、病程等方面基本是均衡的，具有可比性。证型：选择病例治疗组和对照组均为寒性症。

表1：各组病人年龄分布情况

            组                       年龄(岁)      

  别       18-30      30-     40-     50-     60-65

治疗组     11         20      16      3       1

对照组     6          12      10      1       1

表2：  各组病程分布

           组                   入院时病程(年) 

  别      1-5     5-      10-      15-      20＜

治疗组    1       7       16       17       10

对照组    1       3       11       9        7

两组治疗效果非常显著，痊愈、显效、总有效率经卡方检验，P＜0.05，证明两组疗效有显著性差异。

表3：各组疗效比较

组别	疗效判断(例)					痊愈率％	痊愈显效率％	总有效率％
									痊愈	显效	有效	无效	合计
	治疗组	17	15	16	3									51	33.3	62.7	94.1
对照组						3	7	17	4	31	9.7	32.3	87.1

本发明是在原五味甘露浴汤散的基础上经工艺改进研制而成，在保持原有剂型药物疗效的同时，保留了藏医洗浴治疗的特色，将藏医药浴这一祖国民族瑰宝得到了充分的发扬。通过临床验证证明，五味甘露药浴汤散(即经过超微粉碎成50μm)具有显著的治疗作用，治疗组痊愈率33.3％，痊愈显效率62.7％，总有效率94.1％，对照组痊愈率9.7％，痊愈显效率32.3％，总有效率87.1％。治疗组疗效高于对照组，P＜0.05，两组有显著性差异。

实验例2：微粒粒度对释放度的影响试验

制备平均粒径为10μm、50μm、200μm三种微粒。

加速释放实验：精密称量各粒径的微粒100mg，置于6个100ml培养瓶中，准确加入0.1M的溶出液100ml，用带铝膜的盖子拧紧，即刻振摇混合后，用培养瓶横放，固定在固定台上，浸于预先温度调节在37℃的水浴中，每分钟100次振动，振动开始1、2、3、4、5、6小时，取出培养瓶，抽取各容器中浑浊液各10ml。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂；以2-5∶98-95∶0.3甲醇-水-三乙胺为流动相，用磷酸调pH值至3-4；检测波长为210nm；柱温：15-25℃；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇溶液或含8％氨水的甲醇溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：抽取各容器中浑浊液各10ml置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液或含8％氨水的甲醇溶液25ml，称定重量，回流提取或超声提取30-60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C10H15NO·HCl计

表4

序号	粒度	麻黄碱
								1	2	3	4	5	6
		1	50μm	0.030	0.041	0.045	0.053							0.058	0.062
2	75μm							0.020	0.023	0.027	0.030	0.031	0.034
		3	200μm	0.011	0.014	0.013	0.015							0.018	0.019

表4说明粒度越小，有效成分释放浓度越大。一般的机械粉碎最多达到的程度为200μm，本发明的改进为粉碎到0.01-100μm，有效成分的释放度增加。

实验例3：线性关系考察试验

精密吸取盐酸麻黄碱对照品溶液(0.022mg/ml)1、4、8、12、16、20μl，分别进样，测定峰面积积分值。以麻黄碱的进样量(μg)为横坐标，以峰面积积分值为纵坐标，得回归方程，见图1。

表5  盐酸麻黄碱线性关系考察

进样体积(μl)	进样量μg	峰面积
			1	0.022	118
4	0.088	490
			8	0.176	980
12	0.264	1439
			16	0.352	1924
20	0.440	2389

通过回归方程得到结果表明，在0.022～0.440μg的范围内具有良好的线性。

实验例4：不同溶媒提取效果比较试验

取同一批样品(批号，20010301)分别采用乙醚、甲醇、8％氨水甲醇溶液作为提取溶剂，所得溶液分别依法测定含量，结果见表6。

表6  不同溶媒提取结果

溶媒	样品(麻黄碱％)
						1	2	3	4	5
	甲醇乙醚含8％氨水甲醇溶液	0.0320.0480.073	0.0240.0380.069	0.0210.0260.072	0.0320.0360.067						0.0390.0490.072

结果表明，用甲醇及含8％氨水的甲醇作为溶媒提取盐酸麻黄碱比乙醚做提取溶剂合适。

实验例5：含量测定中提取方法、时间的选择试验：

对同一批样品(20010301)，以甲醇、8％氨水甲醇溶液为溶剂分别采用索氏提取器回流提取法及超声处理方法，并对提取时间进行考察，测定结果见表7。

表7  提取方法的选择

提取方法	麻黄碱含量(％)
								1	2	3	4	5	6
回流提取30分钟	0.058	0.061	0.072	0.069	0.065	0.072
							回流提取60分钟	0.067	0.067	0.073	0.062	0.065	0.074
超声提取30分钟	0.069	0.072	0.067	0.070	0.066	0.065
							超声提取60分钟	0.065	0.068	0.069	0.072	0.068	0.065
加入(含8％的氨水)甲醇超声提取30分钟	0.071	0.065	0.071	0.071	0.070	0.066
							加入(含8％的氨水)甲醇超声提取45分钟	0.072	0.071	0.073	0.070	0.071	0.073
加入(含8％的氨水)甲醇超声提取60分钟	0.070	0.073	0.073	0.065	0.076	0.071

结果表明，用回流提取、甲醇和含8％氨水的甲醇溶液超声提取盐酸麻黄碱含量无明显差别，超声提取30、45、60分钟无明显差异，但是，用8％氨水的甲醇溶液提取，样品杂质峰较少，同时，为了提取充分，采用样品以8％氨水的甲醇作为提取溶液，超声提取45分钟。

实验例6：精密度试验

精密吸取盐酸麻黄碱标准品溶液(0.022mg/ml)10μl，重复进样5次，盐酸麻黄碱的峰面积值为1201.1，RSD为1.37％。

表8精密度试验结果

序号	峰面积	平均	RSD(％)
				123456	1222.31178.11213.41189.11208.31195.3	1201.1	1.37

精密度试验结果表明，5次进样的RSD％为1.37％，表明精密度良好。

实验例7：稳定性试验

精密吸取样品(批号20010321)溶液10μl，分别于0，2，4，6，8小时进样测定，记录样品中盐酸麻黄碱的色谱峰面积值，8小时内峰面积值稳定。结果见表9。

表9  稳定性试验结果

时间(h)	峰面积	平均	RSD(％)
				0.02.04.06.08.0	1584.11605.01568.21558.31552.8	1573.7	1.35

实验例8：重现性试验

取同批样品(批号20010321)5份，按含量测定项下色谱条件测定，结果重现性良好，见表10。

表10  重现性试验结果

序号	样品重量	峰面积	样品含量(％)	平均(％)	RSD(％)
						12345	1.20451.20981.20321.20061.2013	1348.51359.21375.21386.61384.4	0.05840.05830.05670.05740.0594	0.0580	1.78

实验例9：加样回收实验

精密称取已知含量的样品(批号20010321，麻黄碱含量为0.06％)0.6g，精密称定，精密加入对照品溶液(0.45mg/ml)1ml，甲醇24ml，称定重量，超声处理60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取滤液，按上述样品含量测定方法测定，实验结果见表11。

表11  加样回收实验结果

序号	样品重(g)	样品中麻黄碱量(mg)	加入麻黄碱量(mg)	测得峰面积	测定结果(mg)	回收率(％)	平均回收率(％)	RSD(％)
									12345	0.60120.61000.60580.60470.6146	0.36010.36600.36350.36280.3688	0.450.450.450.450.45	4415.34418.64473.74391.24407.2	0.81220.81270.82290.80770.8106	100.399.6101.299.499.0	99.88	0.71

5次加样回收率试验的平均回收率为99.88％，RSD为0.71％，表明回收率良好。

实验例10：样品测定实验

精密吸取对照品溶液与样品溶液各10μl，分别进样测定，测定峰面积，以外标法计算样品中盐酸麻黄碱含量，见表12。

表12样品中盐酸麻黄碱的含量

批号	麻黄碱含量(％)		平均(％)
				20010301200103182001032120010328200104052001040620010412200104192001042520010429	0.0710.0610.0500.0530.0610.0810.0740.0690.0580.063	0.0720.0500.0500.0560.0640.0830.0760.0670.0600.065	0.0720.0560.0500.0540.0620.0820.0750.0680.0590.064

根据以上10批样品含量测定结果，五味甘露浴精含麻黄碱为品测定表明，本品含麻黄以盐酸麻黄碱计为0.050％～0.082％，以此为依据，本品含麻黄以盐酸麻黄碱(C₁₀H₁₅NO·HCl)计，不得少于0.05％。

附图说明：

图1：回归方程图

具体的实施方式

实施例1：

取刺柏2kg，水柏枝8kg，烈香杜鹃3kg，大籽蒿7kg，麻黄6kg，加杜仲1kg，预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成1μm，包装即可。

实施例2：

刺柏3kg，水柏枝5kg，烈香杜鹃7kg，大籽蒿4kg，麻黄9kg，加独一味2kg，加助溶剂卡波姆30g，加香料灵香草油5ml，预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成20μm，包装即可。

实施例3：

刺柏3kg，水柏枝3kg，烈香杜鹃3kg，大籽蒿3kg，麻黄3kg，加杜仲3kg，加混悬剂硅酸铝180g，预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成50μm，包装即可。

实施例4：

刺柏6kg，水柏枝2kg，烈香杜鹃1kg，大籽蒿2kg，麻黄6kg，加助溶剂卡波姆300g，加香料薄荷油50ml，预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成100μm，包装即可。

实施例5：

取刺柏2kg，水柏枝8kg，烈香杜鹃3kg，大籽蒿7kg，麻黄6kg，加独一味1kg，加香料芝麻油100ml加助溶剂硅皂土1kg，预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成0.1μm，包装即可。

实施例6：

取刺柏2kg，水柏枝8kg，烈香杜鹃3kg，大籽蒿7kg，麻黄6kg，加杜仲1kg，加混悬剂硅酸铝3g预处理后的藏药材混合均匀，超微粉碎成0.05μm，包装即可。

实施例7：五味甘露浴精(即经过超微粉碎成50μm的微粒)的含量测定

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂；以3∶97∶0.3甲醇-水-三乙胺为流动相，用磷酸调pH值至3.5；检测波长为210nm；柱温：20℃；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加含8％氨水的甲醇溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取粉碎成50μm的本药物组合物1.2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入含8％氨水的甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C₁₀H₁₅NO·HCl计，不得少于0.05％。

Claims (9)

1、一种五味甘露药浴散剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤：取刺柏1-10重量份，水柏枝1-10重量份，烈香杜鹃1-10重量份，大籽蒿1-10重量份，麻黄1-10重量份；将进行过预处理的药材组合物混合均匀，超微粉碎成0.01-100μm，包装。

2、如权利要求1所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中组合物中加杜仲1-3重量份或独一味1-3重量份。

3、如权利要求1或2所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中组合物中加0.001-1重量份助悬剂或0.001-0.1体积份香料。

4、如权利要求3所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中助悬剂是指硅皂土、丙烯酸钠、羧甲基纤维素钠或卡波姆。

5、如权利要求3所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中香料是指白兰叶油、白兰花油、茉莉花油、薄荷油、白芷油、玫瑰油、杜鹃油、亚麻油、芝麻油或灵香草油。

6、如权利要求1、2、4或5所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中超微粉碎粉碎成0.01-0.5μm、0.4-1.2μm、1-50μm、40-80μm、60-100μm。

7、如权利要求3所述的药浴散剂的制备方法，其特征在于其中超微粉碎粉碎成0.01-0.5μm、0.4-1.2μm、1-50μm、40-80μm、60-100μm。

8、一种藏药浴散剂的质量控制方法，其特征在于其中含量测定方法包括如下步骤：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂；以2-5∶98-95∶0.1-0.5甲醇-水-三乙胺为流动相，用磷酸调pH值至2-6；检测波长为210nm；柱温：15-25℃；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加甲醇溶液或含2-10％氨水的甲醇溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取粉碎成0.01-150μm的药物组合物1.0-1.5g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入甲醇溶液或含2-10％氨水的甲醇溶液25ml，称定重量，回流提取或超声提取30-60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C10H15NO·HCl计，不得少于0.05％。

9、如权利要求8所述的含量测定方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基键合硅胶为填充剂；以3∶97∶0.3甲醇-水-三乙胺为流动相，用磷酸调pH值至3.5；检测波长为210nm；柱温：20℃；理论板数按盐酸麻黄碱峰计算应不低于3000；

对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定，加含8％氨水的甲醇溶液制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取粉碎成50μm的本药物组合物1.2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入含8％氨水的甲醇溶液25ml，称定重量，超声处理45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本药物组合物含麻黄碱以盐酸麻黄碱C₁₀H₁₅NO·HCl计，不得少于0.05％。