CN1569156A - 治疗心脑血管疾病的药物制剂及其制备方法和质量控制方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物制剂及其制备方法和质量控制方法，本发明将丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材制成片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液体制剂等等不同剂型；本发明提供的质量控制的方法包括了性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目，可以利用其更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使生产企业、消费者能全面认识产品质地，与现有技术相比，本发明用于对心脑血管疾病的治疗，剂量准确、效果明显。

Description

治疗心脑血管疾病的药物制剂及其制备方法 和质量控制方法

技术领域：本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物制剂及其制备方法和质量控制方法，属于中药技术的领域。

技术背景：冠心病、动脉硬化、肺心病、多发性梗塞性痴呆等心脑血管疾病属气滞血瘀所致的头痛、眩晕、胸痛、心悸等症，是多发病，常见病，为了达到防治目的，许多发明人及药品企业做了大量的研究，也提供了一些治疗的产品；如上市场产品乐脉颗粒，以丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成，由于剂型仅为颗粒剂，我们在深入的研究、开发过程中发现该产品服用量大，易受潮，易氧化变质，光线、空气、水分等对其影响较大；运输、储存、使用、携带不便；不能口服药物的病人无法使用，应用面小；同时，为了更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，使消费者能全面认识产品质地，迫切需要研究控制该制剂质量的方法；就我们检索发现：目前，乐脉颗粒仅仅测定其中芍药的芍药苷的含量，检测指标单一，不能全面反应产品的质量，对于其它剂型，比如：胶囊、滴丸、口服液等还没有一个完整、可行的生产、质量控制方法；所以对于生产特别不利，不能指导生产；有一件关于用这七味药材制备纳米药物的专利申请，由于现有技术的限制，我们并不能按照它所说的再现公开的发明技术；所以得不到它所说的纳米产品，也就无法判定它的效果等等，实际上不能实施。

发明内容：本发明目的在于提供一种临床疗效显著、使用方便、无毒副作用的治疗心脑血管疾病的药物制剂及其制备方法和质量控制方法；本发明将丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液体制剂、滴丸剂、丸剂、酒剂、浸膏剂，注射制剂，包括：普通针剂、粉针剂、冻干粉针剂、输液剂，其他特殊制剂；包括缓控释制剂等等；其中：片剂服用量小，剂量准确，吞服方便，内容物含量差异小，质量稳定，某些易氧化变质及易潮解的药物可借助包衣加以保护，光线、空气、水分等对其影响较小；口服液吸收快，生物利用度高，服用方便，使用人群广；胶囊剂可掩盖不适的苦味，利于服用，不透光胶囊与较好的包装材料可使药物不受湿气和空气中氧、光线的影响，从而提高药物的稳定性；注射剂生物利用度高，起效速度快，无首过效应，适用于不能口服的患者；缓控释制剂使用方便，提供平衡持久的有效血药浓度，尤其适用于需长期用药的患者；本发明提供的质量控制的方法包括了性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目，其检测指标合理，检测方法简单易行，可以利用其更好的控制该制剂的质量，保证用药的安全性，能够更好的指导生产，使生产工艺控制更加严格合理，使生产企业、消费者能全面认识产品质地。

本发明是这样构成的：按照重量组分计算：它由丹参200～600份，川芎100～400份，赤芍100～400份，红花100～400份，香附100～300份，木香100～300份，山楂30～90份加辅料制备成片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液体制剂、滴丸剂、丸剂、酒剂、浸膏剂，注射制剂；包括：普通针剂、粉针剂、冻干粉针剂、输液剂，其他特殊制剂；包括缓控释制剂、贴膜剂、凝胶剂、分散片剂、微丸剂。准确的说所制备的制剂为片剂、分散片剂、软胶囊剂、微丸剂、胶囊剂、口服液体制剂、丸剂、滴丸剂、凝胶剂。

本发明药物制剂的制备方法是：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～5次，每次0.5～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，再用不同的方法制成不同的制剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件是：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入20％微晶纤维素，85％乙醇制粒，整粒，填充入胶囊，即得胶囊剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入3％羧甲基淀粉钠，85％乙醇适量制粒，整粒，压片，包衣，即得片剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，加入糖浆、1％山梨酸、蒸馏水，即得口服液。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入果葡糖浆制丸，即得丸剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃下浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的浸膏，4倍量的聚乙二醇-4000为基质，甲基硅油∶液体石蜡＝3∶1为冷却剂，制丸，即得滴丸剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏∶微晶纤维素＝3∶2)、淀粉(浸膏∶淀粉＝30∶1)、LS-HPC(浸膏∶LS-HPC＝10∶3)、十二烷基硫酸钠(浸膏∶十二烷基硫酸钠＝15∶2)、CMS-Na(浸膏∶CMS-Na＝6∶1)、二氧化硅(浸膏∶二氧化硅＝15∶1)、硬脂酸镁(浸膏∶硬脂酸镁＝30∶1)，5％淀粉浆制粒，整粒，压片，即得分散片。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入到聚乙二醇400(浸膏粉∶聚乙二醇＝1∶40)，以明胶为囊材制丸，整丸，干燥，即得软胶囊剂。

按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏粉∶微晶纤维素＝2∶1)混匀，90％乙醇溶液湿润，采用快速搅拌制粒技术，即得微丸剂。

质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定等项目的部分或全部；以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA、红花对照药材、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、川芎对照药材、芍药苷、赤芍对照药材、香附酮、香附对照药材、木香对照药材、山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上物质作为质量控制的检测指标。

质量控制方法以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA、红花对照药材、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、川芎对照药材、芍药苷、赤芍对照药材、香附酮、香附对照药材、木香对照药材、山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上品种物质作为该品种制剂鉴别方法的检测指标；质量控制方法以以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、芍药苷、香附酮、熊果酸中全部或部分品种物质作为该品种制剂含量测定方法的检测指标。

本发明质量控制方法主要包括以下性状、鉴别、检查、含量测定等项目的部分或全部；

性状：对于胶囊剂：产品内容物为黄棕色至棕褐色颗粒或粉末；气微，味苦；

对于片剂：产品为糖衣或薄膜包衣片，除去包衣后显黄棕色至棕褐色；气微，味微苦；

鉴别：丹参  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质作为对照物，检测波长在203～350nm范围内；

红花  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以红花对照药材、红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质作为对照物，检测波长在203～600nm范围内；

川芎  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以川芎对照药材、阿魏酸中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。展开剂可以为乙醚、正己烷、甲醇、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在205～350nm范围内；

赤芍  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以赤芍对照药材、芍药苷中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；展开剂可以为氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在205～350nm范围内；

木香  采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以木香对照药材作为对照药材，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、环己烷、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

香附  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以香附对照药材、香附酮中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；展开剂可以为苯、氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸、或喷以二硝基苯肼等溶液显色的方法；

方法2：采用气相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或，先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用OV-17或类似性质气相色谱柱，柱温在100～180℃，以香附酮作为对照物；

山楂  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5～30ul之间某一体积，以山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为苯、甲苯、氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括日光或紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2～30％硫酸乙醇、或喷以1～10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用醋酸乙酯超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在205～350nm范围内；

检查  包括装(重)量差异、水分、PH值、崩解时限、溶化性、粒度、相对密度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等全部或部分项目，具体检测方法与中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(1CP-MS)法进行测定的方法；

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一；

含量测定  方法1：以高效液相色谱法测定本品中丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质的含量，检测波长在200～350nm范围内；

方法2：采用高效液相色谱法测定本品中红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质的含量，检测波长在200～600nm范围内；

方法3：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中阿魏酸的含量，检测波长在205～350nm范围内；

方法4：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中芍药苷的含量，检测波长在205～350nm范围内；

方法5：采用气相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用OV-17或类似性质气相色谱柱，柱温在100～180℃，测定本品中香附酮的含量；

方法6：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用乙醚超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1～10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中熊果酸的含量，检测波长在203～300nm范围内。

本发明药物制剂具体的质量控制方法包括以下项目的部分或全部：

鉴别：丹参采用高效液相色谱法，样品前处理为以醋酸乙酯提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

红花  采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

川芎  采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩，C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

赤芍  采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm范围内，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

木香  采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为0.5ul，以木香对照药材作为对照药材，样品前处理为醋酸乙酯提取后再浓缩；展开剂可以为氯仿-环己烷-甲醇(2∶11∶5)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

香附  采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材；展开剂为苯-氯仿-甲醇(3∶11∶21)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

山楂  采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法；使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

检查  包括装(重)量差异、水分、PH值、崩解时限、溶化性、粒度、相对密度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等项目或部分项目，具体检测方法与中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一；

含量测定  方法1：采用高效液相色谱法，样品前处理为以甲醇提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，外标法计算供试品中丹参素的含量；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，外标法计算供试品中腺苷的含量；

方法3：采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩，C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，外标法计算供试品中阿魏酸的含量；

方法4：采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm，外标法计算供试品中芍药苷的含量；

方法5：采用气相色谱法，样品前处理采用甲醇超声处理法，使用OV-17气相色谱柱，柱温在150℃，测定本品中香附酮的含量；

方法6：采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法，使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，外标法计算供试品中熊果酸的含量。

根据祖国医学的理论，丹参活血通经，祛瘀止痛，清心除烦，凉血消痈，入心、心包、肝经；川芎活血行气，祛风止痛，入肝、胆、心包经，两药合用，共为君药；赤芍清热凉血，祛瘀止痛，入肝经；红花活血通经，入心、肝经两药合用，共为臣药；香附、木香行气、调中、止痛，共为佐药；山楂活血散结，为使药。与现有技术相比，本发明用于对心脑血管疾病的治疗，剂量准确、效果明显，制备的片剂服用量小，内容物含量差异小，质量稳定，某些易氧化变质及易潮解的药物可借助包衣加以保护，光线、空气、水分等对其影响较小；口服液吸收快，生物利用度高，使用人群广；制备的胶囊剂可掩盖不适的苦味，利于服用，不透光胶囊与较好的包装材料可使药物不受湿气和空气中氧、光线的影响，从而提高药物的稳定性；制备的注射剂生物利用度高，起效速度快，无首过效应，适用于不能口服的患者；缓控释制剂使用方便，提供平衡持久的有效血药浓度，尤其适用于需长期用药的患者；为了制备这些不同的制剂剂型，需要选用最为科学、合理的辅料、确定辅料的使用量以及设计相适应的、合理的制备工艺及制备的条件；本发明完成了这些工作；通过筛选、比较、创造性的提出了相关的辅料、用量、工艺等技术条件；申请人进行的实验表明：只有用这些条件才能够提供最好的、科学的、有效的药物制剂；本发明提供的质量控制方法能更好的控制以丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成的中药制剂的产品质量，保证用药的安全性，使用这种控制方法后，能够保证药物制成品的质量，从生产开始、选用原材料，到每一个生产过程的工艺步骤均必须严格按照工艺规程执行，否则产品就有可能不满足质量要求；我们在进行试验时发现：实施这种方法，要求选用优等的道地药材，否则制成品会出现不合格的情况；更有利于指导生产，使工艺控制更加严格合理，让消费者全面认识产品品质、放心使用这类药品。本发明选取的丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA、红花对照药材、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、川芎对照药材、芍药苷、赤芍对照药材、香附酮、香附对照药材、木香对照药材、山楂对照药材、熊果酸是本发明提供的药物配方中重要的有效活性成分，是制剂发挥功效(行气活血，化瘀通脉，治疗气滞血瘀所治的头痛、眩晕、胸痛和冠心病心绞痛、多发性脑梗塞等)的物质基础；检测这些成分对控制产品质量有重大意义，直接关系到临床药效，所以本发明选定了一系列的成分作为检测的指标，通过性状、鉴别、检查、指纹图谱、含量测定等项目的检测全面合理控制产品质量，采用这样的技术手段，达到了发明的目的。

本申请人作了一系列实验，可以证实本发明提供的制备方法有效可控，得到的制剂疗效好。

实验例1：对大鼠实验性脑缺血的保护作用。

取健康雄性Wistar大鼠50只，将动物随机分为5组，即假手术对照组、模型对照组、颗粒剂对照组10mg/kg组、本发明胶囊剂组、片剂组10mg/kg，每组10只，静脉注射给药后10分钟，将大鼠用12％水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉后固定，在大鼠右外耳道与眼眦中线剪一切口，分离肌肉，除去颧弓，暴露颞前窝，在颧骨和鳞状骨接合处前下方约2mm处钻一小颅窗，暴露大脑中动脉MCA，以细针挑起、电凝阻断大脑下静脉下缘处的MCA。然后逐层缝合伤口，回笼饲养。假手术组除不阻断MCA外，其余手术步骤同模型组。术后12小时再次静脉注射给药。分别在术后8小时和24小时，对动物进行行为评分。满分为11分，分数越高，动物的行为障碍越严重。另于术后24小时时将动物断头处死，开颅取脑，称湿脑重，然后在110℃烤箱中烤至恒重，称干脑重。计算脑组织含水量〔水％＝(湿质量-干质量)/湿质量×100％〕。结果模型组大鼠在术后8、24h均出现明显的行为改变，本发明药物制剂大鼠的神经症状均有不同程度的改善(见表1)；并且可显著降低脑水肿程度(见表2)。

           表1本发明组合物对大鼠行为缺陷程度的影响

组别	N	行为评分值
				8h	24h
		假手术组	8			0	0
模型组	9			9.0±1.2	7.7±1.0
		颗粒剂对照组10mg/kg	8			6.9±1.1**	5.2±1.3**
胶囊剂组10mg/kg	9			6.7±1.2**	5.0±1.0**
		片剂组10mg/kg	8			7.0±0.9**	5.4±0.8**

与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01

      表2本发明组合物对脑水肿的影响

组别	n	脑组织含水量(％)
			假手术组	8	77.25±0.66
模型组	9	80.23±0.88
			颗粒剂对照组10mg/kg	8	78.32±0.56**
胶囊剂组10mg/kg	9	78.00±0.63**
			片剂组10mg/kg	8	78.69±0.70**

与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01

结论：本发明制剂的药效与现有颗粒剂对照组相似。

实验例2：水分测定

取供试品5g，平铺于干燥至恒重的扁型称瓶中，精密称定，打开瓶盖在105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上述温度干燥1小时，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止，根据减失的重量，计算含有的水分百分数，数值越低越利于药物的稳定。

分组                        结果％              平均值

颗粒剂对照组1               4.9％

颗粒剂对照组2               4.6％               4.8％

颗粒剂对照组3               4.8％

片剂实验组1                 2.9％

片剂实验组2                 3.1％               3.2％

片剂实验组3                 3.5％

实验例3：服用量考查

分组             次数(次/天)      剂量(g/次)    剂量(g/天)

颗粒剂对照组1    1                30            30

颗粒剂对照组2    2                15            30

颗粒剂对照组3    3                10            30

胶囊剂实验组1    1                4.05          4.05

胶囊剂实验组2    2                2.02          4.05

胶囊剂实验组3    3                1.35          4.05

考察结果表明：本发明提供的胶囊制剂的服用量大大低于现有颗粒制剂，方便了病人的使用。

实验例4：辅料筛选

在制备过程中，加入的辅料是否得当直接影响制剂的制备、质量和临床应用效果，本申请人尝试过许多不同的辅料，从中选取出最好的供制备使用；为此，申请人也进行了一系列实验以获得最佳的工艺。

1.胶囊剂

1.1休止角的测定：采用固定漏斗法，将3只漏斗串联，最底端距水平放置坐标纸1.3cm处，小心地将按不同辅料制成的药粉分别沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的药粉圆锥体尖端接触到搂斗下口为止，由坐标纸测出圆锥体底部的直径(n＝5)，计算出休止角(tga＝H/R)，结果大于45％流动性差，易松散。

药粉的制备：按表1称取规定量的浸膏与辅料(均过80目)混合研匀，置干燥器内。

            表1不同辅料与浸膏的配伍处方

                   不同处方号辅料与浸膏重

实验号    成分       1     2     3     4     5

1         浸膏粉     25    20    20    20    20

2         淀粉             5

3         糊精                   5

4         微晶纤维素                   5

5         糖粉                               5

            表2不同处方药粉的休止角

处方号                         休止角

1                              39.84±2.11

2                              44.12±0.29

3                              43.68±0.69

4                                 37.12±1.01

5                                 41.69±0.47

根据上述实验，选定微晶纤维素加入该制剂。

1.2微晶纤维素用量的筛选

吸湿率的测定：将底部放有氯花钠饱和溶液的玻璃干燥器放入烘箱中，于40℃加热5小时，使干燥器内相对湿度为75.3％，在恒重的称量瓶中放入3mm厚的颗粒，精密称定后放入干燥器中，打开瓶盖，定时将称量瓶瓶盖盖严后取出精密称定，每组平行做3份，计算其吸湿率(％)，取均值。

                                 不同时间吸湿率

浸膏粉∶微晶纤维         0    3     6     12     24     48

     3∶1                0    5.25  7.88  10.35  11.27  12.28

     4∶1                0    4.52  7.01  9.98   10.95  12.12

     5∶1                0    5.68  7.59  10.12  11.25  12.31

根据上述实验，选定微晶纤维素用量为5∶1，即20％。

2.片剂

崩解时限检查：采用转篮法，升降式崩解仪，片剂取6片，观察30分钟内通过筛网的情况。通过率高则崩解性好，更宜人体吸收。

可压性考察：一次制粒颗粒得率70％以上，片剂硬度好、为好；一次制粒颗粒得率50-70％，片剂硬度稍差为较好；一次制粒颗粒得率50％以下，颗粒松散，片剂硬度差、为差。

                           崩解剂

           羧甲基淀粉钠              干燥淀粉        羧甲基纤维素钙

用量       1％    2％    3％    5％    10％    20％    5％    10％

15％

崩解时限   1      1      0      2      1       1       1      1      2

可压性     好     好     好     较好   差      差      较好   较好   较好

根据上述实验，选定羧甲基淀粉钠作为崩解剂，用量为3％

3.滴丸剂

不同药物加入方式及比例对滴丸成型的影响

基质             药粉加入方式  药物∶基质    成型情况

聚乙二醇-4000    粉末          1∶4          滴丸表面不光滑，颜色不均匀

聚乙二醇-4000    浸膏          1∶4          圆球形，光滑，颜色均匀，质地好

聚乙二醇-4000    粉末          3∶7          滴丸表面不光滑，颜色不均匀

聚乙二醇-4000    浸膏          3∶7          圆球形，光滑，颜色不均匀，质地好

聚乙二醇-6000    粉末          1∶4          滴丸表面不光滑，颜色不均匀

聚乙二醇-6000    浸膏          1∶4          圆球形，光滑，颜色不均匀，质地软

聚乙二醇-6000    粉末          3∶7          滴丸表面不光滑，颜色不均匀

聚乙二醇-6000    浸膏          3∶7          圆球形，光滑，颜色均匀，质地硬

根据上述实验，选定四倍量聚乙二醇-4000作为基质，药物以浸膏形式加入。

3.分散片∶分散片可迅速崩解成均匀混悬液，相对于普通片剂的明显优势就是能提高生物利用度。以硬度、脆碎度、分散时间、溶出度为指标，考察各处方的优劣。

                             分散片处方筛选

原辅料               原处方    处方1    处方2    处方3    处方4

药物浸膏(g)          150       150      150      150      150

微晶纤维素(g)        100       100      100      100      100

淀粉(g)              30        30       25       10       5

LS-HPC(g)            -         -        15       30       45

十二烷基硫酸钠(g)    20        20       20       20       20

5％淀粉浆            适量      -        适量     适量     适量

2％HPMC液            -         适量     -        -        -

CMS-Na(g)            25        25       25       25       25

二氧化硅(g)          10        10       10       10       10

硬脂酸镁(g)          5         5        5        5        5

项目                 原处方    处方1    处方2    处方3    处方4

硬度(N/mm²)         81        85       95       102      107

脆碎度(％)           有碎片    1.25     1.80     0.65     0.15

分散时间(s)    131     148     117     92      74

溶出度(％)     97.9    96.8    97.5    98.5    98.7

4、软胶囊：崩解时间：采用转篮法，升降式崩解仪，取6粒软胶囊，计算完全通过筛网时间的平均值。

    不同药物基质(药物∶基质＝1∶40)崩解时间比较

               聚乙二醇         液体石蜡         植物油

存放3个月         4                10              12

存放6个月         9                17              19

5、微丸：

                       不同处方微丸外观质量

浸膏粉4份  微晶纤维素1份          85％乙醇    3％PVP    块状

浸膏粉2份  淀粉1份                85％乙醇    3％PVP    球形、光滑、圆整

浸膏粉2份  微晶纤维素1份          85％乙醇    3％PVP    球形、光滑、圆整

浸膏粉2份  等比例混合赋形剂1份    85％乙醇    3％PVP    球形、光滑、圆整

          不同赋形剂对微丸粒度大小分布的影响

取干燥浸膏粉2份配比淀粉1份(处方1)、配比微晶纤维素1份(处方2)、配比等比例淀粉与微晶纤维素1份(处方3)制备成微丸，比较3种微丸的粒度大小，结果见表。

                   不同处方微丸粒度大小分布

处方号                 粒度大小及其分布

         过40目(％)    40～30目(％)    30～18目(％)    不过18目(％)

处方1        3             25              58              10

处方2        6             35              54              3

处方3        5             28              57              9

实验例5：工艺筛选

喷雾干燥

1.进料温度考察

喷雾干燥时清膏保持一定温度，有利于进入干燥塔内清膏的水分快速蒸发，缩短干燥时间，提高干燥效率；同时清膏温度较高，粘度降低，可防止清膏粘结喷头，为此对清膏保温温度进行了考察。

取清膏适量，均分为三份，分别在50±5℃、60±5℃、70±5℃保温6小时，即得。再测定芍药苷含量，结果见表：

              清膏保温温度考察

组别                                芍药苷(mg/g)

保温前                              27.6765

50±5℃                             27.5180

60±5℃                             27.2600

70±5℃                             27.0269

由表可得，清膏分别在50±5℃、60±5℃、70±5℃条件下保温6小时，芍药苷含量无明显变化，因此将清膏保温温度确定为50～70℃。

2.清膏相对密度考察

取清膏适量，分为四份，分别调至清膏相对密度为1.10(60℃)、1.12(60℃)、1.15(60℃)、1.20(60℃)，清膏60℃保温，在进风温度220±5℃，出风温度85±5℃条件下，以45～50ml/min速度进行喷雾干燥，观察物料干燥情况，结果见表。

          喷雾干燥清膏相对密度考察

清膏相对密度                         物料干燥情况

1.10(60℃)                           干燥粉末

1.12(60℃)                           干燥粉末

1.15(60℃)                           干燥粉末

1.20(60℃)                           物料粘壁，粘结成块

由表可得：清膏相对密度在1.10～1.15(60℃)时，喷雾干燥所得物料质量较好，因此将清膏确定为相对密度为1.10～1.15(60℃)。

3.进料速度筛选

进料速度的快慢影响物料的干燥状态，为此，将清膏(相对密度1.10，60℃)60±5℃保温，在进风温度：220±5℃，出风温度85±5℃条件下分别以45～50、50～55、55～60ml/min速度喷入干燥塔内进行干燥，观察物料干燥情况，结果见表。

                      进料速度筛选

    进料速度(ml/min)                物料干燥情况

    45～50                          干燥粉末

    50～55                          干燥粉末

    55～60                          物料粘壁，粘结

由表可得：进料速度在45～55ml/min范围，均可得到干燥粉末，为提高效率，确定进料速度在50～55ml/min。

4.进风温度、出风温度筛选

取清膏(相对密度1.10，60℃测)，60℃保温，以50～55ml/min速度进液，分别在不同进风温度、出风温度下进行喷雾干燥，观察物料干燥情况，结果见表。

              进风温度、出风温度筛选

进风温度(℃)        出风温度(℃)        物料干燥情况

180±5              65±5               物料粘壁，粘结

200±5              75±5               物料粘壁，粘结

220±5              85±5               干燥粉末

由表可得：进风温度在220±5℃，出风温度在85±5℃时，可得到干燥粉末，因此，确定进风温度在220±5℃，出风温度在85±5℃。

5.喷雾干燥前后比较

将清膏(相对密度1.10，60℃测)，60℃保温，以50～55ml/min速度，在进风温度225±5℃，出风温度87±5℃进行喷雾干燥，测定喷雾干燥前、后芍药苷含变量化及丹参、川芎、木香薄层色谱变化，结果见表。

                      喷雾干燥前、后比较结果

样品          干浸膏粉得率    芍药苷    丹参    川芎    木香

              (％)            (mg/g)    TLC     TLC     TLC

清膏          28.1            27.2738   +       +       +

干燥浸膏粉    27.3            27.1981   +       +       +

干浸膏粉得率(％)＝干燥浸膏粉/生药量。

由表可得：喷雾干燥前、后测定结果表明：芍药苷含量、丹参薄层色谱、川芎薄层色谱、木香薄层色谱均无变化，说明喷雾干燥工艺条件合理、可行。

申请人还进行了一系列的实验研究，以证明利用本发明提供的质量控制方法能更好的控制制成的中药制剂的产品质量，保证得到的药物具有有效的效果；

实验例1：丹酚酸B对家免血液流变性的影响

实验药物：丹酚酸B(SalB)，含量：98.5％，临用时用生理盐水新鲜配制成不同浓度。

实验动物：家免，体重1.9kg±0.2kg，雌雄各半

实验仪器：LBY-N6A自清洗旋转式粘度计

实验分组：实验家免分5组，每组8只，分别为：①对照组(1ml/kg)；②SalB小剂量组(2mg/kg)；③SalB中剂量组(6mg/kg)；④SalB大剂量组(18mg/kg)。家兔血液流变性测定：给药前采血一次，静脉注射给药30min后，再次取血。家免心脏取血4ml，置肝素干燥试管中，于LBY-N6A自清洗旋转式粘度计测量家免全血表观粘度、血浆粘度，计算红细胞聚集指数；红细胞压积(HCT)采用微量毛细管法，将血样吸入毛细玻璃管中4/5处，再将毛细管封口，置于微量血液离心机平面盘上，于1.2×10⁴r/min离心3min，取出在红细胞压积仪上读数。

结果：

1、SalB血粘度的影响

家免耳缘静脉注射SalB低、中、高剂量组，均与给药前作自身对照，结果30min后全血粘度显著下降(P＜0.05)。低剂量组低切(10s^-1)、中切(60s^-1)、高切(150s^-1)全血粘度分别下降12.1％、13.1％、10.3％；中剂量组低切、中切、高切全血粘度分别下降12.2％、13.1％、11.4％；高剂量组低切、中切、高切全血粘度分别下降22.5％、31.6％、28.3％。表明SalB对家兔全血粘度有明显的降低作用。

2、对家免红细胞压积、红细胞聚集指数和刚性指数的影响SalB低、中、高剂量组静脉注射30min后家免红细胞压积较给药前显著降低(P＜0.05＝，而生理盐水组无显著性影响。静脉注射SalB中、高剂量组后家兔红细胞聚集指数较给药前显著降低(P＜0.05＝，而SalB低剂量组家兔红细胞聚集指数与给药前相比也降低，生理盐水组给药前后无显著性变化。

组别              剂量             红细胞压积％               红细胞聚集指数％

                                 前            后             前            后

生理盐水对照组    1ml/kg    32.12±3.14    32.71±3.88    1.75±0.12    1.88±0.27

SalB小剂量组      2mg/kg    36.74±1.61    28.55±3.65    1.89±0.21    1.63±0.15

SalB中剂量组      6mg/kg    35.22±3.28    28.12±1.96    2.03±0.35    1.60±0.19

SalB大剂量组      18mg/kg   34.02±1.73    27.51±2.64    1.78±0.10    1.57±0.17

实验1表明丹酚酸B缺血性心脑血管疾病有较好的防治作用，根据文献报道还有很强的清除自由基和抗氧化作用，是丹参的主要活性成分。

实验例2：腺苷对血小板聚集率的影响

利用结扎一侧大脑中动脉(MCAO)的方法造成大鼠局灶性脑缺血模型。①假手术组：大鼠用氯胺酮腹腔注射麻醉(100mg/kg体重)，置左侧卧位，沿右眼及右耳之间的中点处剪毛，局部消毒后作一长约1.5cm的皮肤切口，分离题肌，暴露颧突和颈骨，用咬骨钳剪断颧弓，在颧弓根前方用牙科钻钻孔，手术显微镜下撕开硬脑膜，暴露大脑中动脉起始部，在大脑下静脉和嗅束间用外科无创伤缝合线，穿过大脑中动脉，不结扎血管，然后将领肌和皮肤分层缝合，局部消毒。②模型组：即在大脑下静脉和嗅束间用外科无损伤缝合线结扎大脑中动脉，并于结扎处远侧(离心端)切断，余同假手术组。③腺苷大、中、小剂量组，作大脑中动脉结扎术，术后于鼠尾静脉注射，剂量依次为6.65ml/kg、5.00ml/kg、3.30ml/kg，每日1次，连续5d。大鼠用25％乌拉坦腹腔注射麻醉(1g/kg体重)，剖腹，腹主动脉穿刺取血7ml，将其中的1.8ml、0.9ml分别注入已加抗凝剂3.8％拘橼酸钠的两个试管中(按9∶1比例进行)。另3ml血加入含消炎痛—EDTA·Na₂ 0.2ml试管内，混匀，4℃离心(3500r/min，15min)分离血浆，放-20℃保存。用BS-643型血小板聚集仪采用比浊法测定血小板聚集率。

组别                剂量(ml/kg)            血小板聚集率％

假手术组                                   45.95±13.55

模型组                                     60.58±11.68

腺苷大剂量组        7.58                   41.65±20.18

腺苷中剂量组        5.00                   45.25±15.18

腺苷小剂量组        3.30                   47.35±11.33

实验2表明腺苷是红花抑制血小板聚集的活性成分。

实验例3：芍药苷镇痛作用实验

扭体法：昆明种小鼠18～20g，30只雌雄各半，随机分成3组。实验组动物给芍药苷0.2mL/10g，阿司匹林组(A)动物给阿司匹林混悬液0.2g/kg，生理盐水组(S)给同体积的生理盐水。给药40min后，各组小鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2mL/只，观察30min内小鼠出现扭体反应的次数，镇痛率＝(对照组扭体次数-给药组扭体次数)/对照组扭体次数×100％。结果见表。

                  镇痛作用实验(扭体法)(x±s)

组别      剂量(ml/kg)    动物数(只)       出现扭体次数       镇痛率

(％)

生理盐水  20             10               54.5±24.8

芍药苷    20             10               25.6±8.7          58

阿司匹林  20             10               1.9±2.0           96

实验3表明芍药苷是芍药镇痛的主要成分。

实验例4：熊果酸对Triton-WR1339高脂血症小鼠的降血脂作用

取20～22g小鼠，雌雄兼用，随机分正常对照组、模型组、熊果酸4，8g/kg4组，禁食4h，正常对照和模型组均给予0.5％CMC-Na液20mL/kg，药物组分别给予不同浓度的药物混悬液20mL/kg，给药剂量为：熊果酸4和8g/kg，给药4h，除正常对照组外，均腹腔注射Triton-WR1339 400mg/kg，于2和10h分别给药2次。小鼠末次给药4h后，取血3000r/min×10min离心，分离血清，测试各鼠TCH、TG、HDL值。结果模型组较正常对照组血清TCH、TG、HDL值均明显升高，而用药组血清TCH、TG值较对照组降低，HDL值升高，见表。

                   对Triton-WR1339小鼠血清血脂的影响

组别      剂量(μg/mL)  鼠数    TCH(mmol/L)  TG(mmol/L)  HDL(mmol/L)  H/T(％)

正常对照  -             10      2.18±0.46   0.94±0.37  0.22±0.04   10.95±4.20

模型      -             10      4.32±0.44   12.37±5.16 0.88±0.27   18.19±6.62

熊果酸    4             10      3.76±0.41   7.42±4.26  1.02±0.24   25.52±6.17

          8             10      3.52±0.51   6.53±4.83  1.36±0.26   32.23±7.28

实验4表明：熊果酸对于治疗高脂血症、预防血管内皮损伤，阻止血管粥样硬化的形成有重要的意义，是山楂降血脂的有效成分。

实验1～4表明：本发明选择的指标成分是制剂中所含药物的重要有效成分，对制剂质量控制很重要。

实验例5：

①不同产地的川芎阿魏酸的含量比较：取不同产地的川芎，采用高效液相法测定其阿魏酸的含量(n＝3)，其平均含量结果见表。

            不同产地川芎中阿魏酸的含量(n＝3)

    样品                          平均含量(mg/g)

    四川川芎                      1.3271

    日本川芎I                     0.7360

    日本川芎II                    0.9507

    东盛川芎                      0.6530

    平顶山川芎                    1.0091

②不同产地川芎对血小板聚集的比较采用①中药材进行ADP诱导血小板聚集实验，制备富含血小板血浆(PRP)及不含血小板的血浆(PPP)。取比色管，每管加PRP100μL，药液50μl，最后加ADP(0.1mg/mL)50μL以不含血小板血浆为空白，记录加入ADP后的聚集百分率。以生理盐水为空白。

      药材               剂量(g/ml)        聚集百分率(P)(％)

      四川川芎           0.16              0.83±0.81

      日本川芎I          0.16              2.05±0.61

      日本川芎II         0.16              1.12±0.23

      东盛川芎           0.16              2.20±0.40

      平顶山川芎         0.16              0.98±0.12

③不同产地川芎对制剂药效影响

实验1组：四川川芎(其余六味药均采用一等品)制成的片剂

实验2组：日本川芎I(其余六味药均采用一等品)制成的片剂

实验3组：平顶山川芎(其余六味药均采用一等品)制成的片剂

取日本大耳白兔50只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，空白对照组(15ml)、实验1组(10g/kg)、实验2组(10g/kg)、实验3组(10g/kg)，每天分别灌胃给药1次，连续7天，末次灌胃给药后2h，所有动物均用戊巴比妥钠麻醉后，分离颈总动脉和颈外静脉后，施行动静脉搭桥术[2，3]，血液由颈总动脉经硅胶管流至颈外静脉时开始计时，15min后取出硅胶管内的丝线，在电子分析天平上称各组血栓的湿重，总重量减线重即为血栓湿重。

                  对血栓重量的影响(x±s)

组别         动物数        剂量(g/kg)        血栓湿重(mg)

对照组       10            10                109.82±3.26

实验1组：    10            10                92.20±3.45

实验2组：    10            10                105.22±9.87

实验3组：    10            10                99.00±5.68

实验5表明不同产地(等级)的药材其指标成分含量差异很大，所制的产品药效有很大不同，检测本发明的指标成分对控制产品质量有重大意义。

实验例6：

实验1组：均采用一等药材投料，鉴别合格，所有指标成分含量合格制成的胶囊。

实验2组：除芍药外均采用三等药材投料，鉴别合格，芍药苷含量合格制成的胶囊。

对血液流变学的影响：采用寒凝致瘀法，每兔先皮下注射0.1％肾上腺素0.4ml，然后再给予15min的冰水混合物冷刺激(将兔四肢放入冰水混合物中，但注意勿使其死亡)，2h后再重复皮下注射0.1％肾上腺素0.4ml造血瘀模型。用日本大耳白兔40只，雌雄各半，雌兔未孕，随机分为空白对照组、血瘀模型组、本发明胶囊实验1、2组，每组为10只。空白对照组及模型组每日灌服自来水15ml，血脉宁颗粒组每日按15.0g/kg的剂量灌服。上述各组每日灌服1次，连续7日。第8日除空白对照组外，其余各组均按上述方法制成血瘀证模型。第9日每组兔子在清醒状态下，心脏穿刺取血4ml，其中2ml迅速注入含肝素的抗凝管内，摇匀静置，用于检测血液流变学指标；1.2ml注入含3.8％的枸橼酸钠的硅化管内，用于检测红细胞沉降率。血液流变学指标的检测：采用全自动血液流变快测仪测定，先测定全血黏度后，将其低速离心(1500r/min，离心10min)，分离出血浆，然后测红细胞压积及红细胞沉降率采用全自动血细胞记数仪和温氏法测定，把上述测定值输入血液流变专用软件包，计算机自动计算出红细胞沉降率方程K值。

            各组用药后血液流变学变化比较

组别        n   血浆黏度(mPa·s)  红细胞压积        红细胞沉降率(mm/1h)  红细胞沉降率K值

空白对照组  10  1.53±0.08        0.3551±0.0258    3.20±0.45           8.15±1.42

模型组      10  1.89±0.06        0.4288±0.0276    11.32±0.52          36.44±6.23

实验1组     10  1.65±0.01        0.3862±0.0214    8.04±0.46           27.56 ±1.84

实验2组     10  1.78±0.01        0.4062±0.0214    10.14±0.46          31.56±1.84

实验6表明，实验1组药效优于实验2组，仅仅控制芍药苷的含量不能有效的控制制剂的质量。

实验例7：不同工艺比较

实验1组：采用喷雾干燥工艺制得的口服液

实验2组：未采用喷雾干燥工艺制得的口服液

①采用高效液相色谱法测定不同工艺所得产品阿魏酸含量

组别                    阿魏酸含量

实验1组：               0.165mg/ml(合格)

实验2组：               0.102mg/ml(不合格)

②取日本大耳白兔50只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，空白对照组(15ml)、实验1组(10g/kg)、实验2组(10g/kg)，每天分别灌胃给药1次，连续7天，末次灌胃给药后2h，所有动物均用戊巴比妥钠麻醉后，分离颈总动脉和颈外静脉后，施行动静脉搭桥术[2，3]，血液由颈总动脉经硅胶管流至颈外静脉时开始计时，15min后取出硅胶管内的丝线，在电子分析天平上称各组血栓的湿重，总重量减线重即为血栓湿重。

                对血栓重量的影响(x±s)

组别         动物数    剂量(g/kg)        血栓湿重(mg)

对照组       10        10                108.80±3.16

实验1组：    10        10                91.20±3.25

实验2组：    10        10                104.22±10.07

实验7表明，采用本发明的质量控制方法，工艺条件要求高，工艺步骤均必须严格按照工艺规程执行，使得所得的疗效好。

实验例8：不同含量测定方法比较

①取同一批本发明方法制得的片剂，按不同的方法进行含量测定。

重现性实验：取同一批样品，平行操作，测定5份，RSD值越小，方法的重现性越好。

方法                RSD(熊果酸含量)％

高效液相色谱法      1.1

薄层色谱法          2.9

滴定法              干扰大，滴定终点无法确定

实验表明，本发明所采用的高效液相色谱法对测定本发明产品的含量，简单易行，快速准确，而薄层色谱法操作繁琐，显色误差大；滴定法测定不准确。

②采用二等山楂投料制得的胶囊剂，分别用高效液相色谱法，薄层色谱法测定熊果酸含量。

方法                        熊果酸含量(g/ml)

高效液相色谱法              0.61(含量不合格)

薄层色谱法                  0.84(含量合格)

实验表明，由于薄层色谱法测定本发明产品时，显色误差大，不能有效的控制产品的质量。

实验例9：供试品溶液的制备

提取溶剂的考查：精密称取同一批胶囊剂0.5g，置50mlml量瓶中，分别加不同溶剂40ml，超声提取40min，放冷，滤过，取续滤液进样，测定其含量。

                不同溶剂提取的比较

提取溶剂          甲醇        氯仿             醋酸乙酯

丹参酮HA(mg/g)    1.61        1.59             1.53

实验表明，本发明所用的供试品溶液的制备方法具有可操作性。

具体实施方式：

本发明的实施例1：丹参200份，川芎100份，赤芍100份，红花100份，香附100份，木香10份，山楂30份，加水煎煮1次，每次1小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温(45～60℃)浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.15(50～60℃)的清膏，喷雾干燥(进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃)，得干燥浸膏粉，加入20％微晶纤维素，85％乙醇制粒，整粒，填充入胶囊，即得胶囊剂，产品名称为“乐脉胶囊”，每日3次，每次3粒。

本发明的实施例2：丹参499g，川芎249.5g，赤芍249.5g，红花249.5g，香附124.75g，木香124.75g，山楂62.4g，以上七味，加水煎煮三次，提取0.5小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温(45～60℃)浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.15(50～60℃)的清膏，喷雾干燥(进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃)，得干燥浸膏粉，加入3％羧甲基淀粉钠，85％乙醇制粒，整粒，压片，包衣，即得片剂，产品名称为“乐脉片”。

本发明的实施例3：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，加水煎煮3次，每次3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温(45～60℃)浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.15(50～60℃)的清膏，加入糖浆、1％山梨酸、蒸馏水，即得口服液。

本发明的实施例4：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，以上七味，加水煎煮1次，每次1小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温(45～60℃)浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.15(50～60℃)的清膏，喷雾干燥(进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃)，得干燥浸膏粉，加入果葡糖浆制丸，即得丸剂。

本发明的实施例5：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，加水煎煮3次，每次3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温(45～60℃)浓缩至浸膏相对密度为1.10～1.15(50～60℃)的浸膏，4倍量的聚乙二醇-4000为基质，甲基硅油：液体石蜡(3∶1)为冷却剂，制丸，即得滴丸剂。

本发明的实施例6：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏∶微晶纤维素＝3∶2)、淀粉(浸膏∶淀粉＝30∶1)、LS-HPC(浸膏∶LS-HPC＝10∶3)、十二烷基硫酸钠(浸膏∶十二烷基硫酸钠＝15∶2)、CMS-Na(浸膏∶CMS-Na＝6∶1)、二氧化硅(浸膏∶二氧化硅＝15∶1)、硬脂酸镁(浸膏∶硬脂酸镁＝30∶1)，5％淀粉浆制粒，整粒，压片，即得分散片。

本发明的实施例7：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入到聚乙二醇400(浸膏粉∶聚乙二醇＝1∶40)，以明胶为囊材制丸，整丸，干燥，即得软胶囊剂。

本发明的实施例8：丹参600份，川芎400份，赤芍400份，红花400份，香附300份，木香300份，山楂90份以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏粉∶微晶纤维素＝2∶1)混匀，90％乙醇溶液湿润，采用快速搅拌制粒技术，即得微丸剂。

实施例9：以丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成的中药制剂的质量控制方法：主要包括性状、鉴别、检查、含量测定等项目，对于胶囊剂包括以下具体项目的全部内容。

[性状]本品内容物应为黄棕色至棕褐色颗粒或粉末；气微，味微苦。

[鉴别](1)采用高效液相色谱法，样品前处理为以醋酸乙酯提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(2)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材。展开剂为苯-氯仿(2∶11)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(3)采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(4)采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩。C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(5)采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm范围内，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(6)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为0.5ul，以木香对照药材作为对照药材，样品前处理为醋酸乙酯提取后再浓缩，展开剂可以为氯仿-环己烷-甲醇(2∶11∶5)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(7)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材。展开剂为苯-氯仿-甲醇(3∶11∶21)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(8)采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法。使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

[检查]包括装(重)量差异、水分、崩解时限、粒度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等全部或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法。

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。

[含量测定](1)采用高效液相色谱法，样品前处理为以甲醇提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，外标法计算供试品中丹参素的含量≥10mg/袋。

(2)采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，外标法计算供试品中腺苷的含量≥15mg/袋。

(3)采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩。C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，外标法计算供试品中阿魏酸的含量≥15mg/袋。

(4)采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm，外标法计算供试品中芍药苷的含量≥20mg/袋。

(5)采用气相色谱法，样品前处理采用甲醇超声处理法。使用OV-17气相色谱柱，柱温在150℃，测定本品中香附酮的含量≥10mg/袋

(6)采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法。使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，外标法计算供试品中熊果酸的含量≥10mg/袋。

实施例10：以丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成的中药制剂的质量控制方法：主要包括性状、鉴别、检查、含量测定等项目，对于片剂包括以下具体项目的全部内容。

[性状]本品为糖衣或薄膜包衣片，除去包衣后显黄棕色至棕褐色；气微，味微苦。

[鉴别](1)采用高效液相色谱法，样品前处理为以醋酸乙酯提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(10∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(2)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以丹参对照药材。展开剂为苯-氯仿-甲醇(3∶11∶21)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(3)采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(40∶11)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(4)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以红花对照药材。展开剂为氯仿-甲醇(3∶11)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(5)采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩。C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(20∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(6)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以川芎对照药材。展开剂为氯仿-甲醇(5∶14)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(7)采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(3∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm范围内，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(8)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材。展开剂为氯仿-甲醇(6∶17)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(9)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为0.5ul，以赤芍对照药材作为对照药材，样品前处理为醋酸乙酯提取后再浓缩。展开剂可以为氯仿-环己烷-甲醇(1∶11∶5)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(10)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材。展开剂为苯-氯仿-甲醇(2∶10∶21)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

(11)采用气相色谱法，样品前处理采用甲醇超声处理法，使用OV-17气相色谱柱，柱温在150℃，以香附酮作为对照物。

(12)采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法。使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶13∶3)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(13)采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以山楂对照药材，展开剂为氯仿-醋酸乙酯(6∶17)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。

[检查]包括装(重)量差异、水分、崩解时限、粒度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法。

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。

[含量测定](1)采用高效液相色谱法，样品前处理为以甲醇提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(10∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，外标法计算供试品中丹参素的含量。

(2)采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(40∶11)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，外标法计算供试品中腺苷的含量。

(3)采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩。C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(20∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，外标法计算供试品中阿魏酸的含量。

(4)采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(3∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm，外标法计算供试品中芍药苷的含量。

(5)采用气相色谱法，样品前处理采用甲醇超声处理法。使用OV-17气相色谱柱，柱温在150℃，测定本品中香附酮的含量

(6)采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法。使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶13∶3)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，外标法计算供试品中熊果酸的含量。

实施例11：以丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂七味药材(或其提取物)制成的胶囊剂包括以下具体项目的全部内容。

[性状]本品应为分散片剂，为黄棕色至棕褐色；气微，味微苦。

[鉴别](1)采用高效液相色谱法，样品前处理为以醋酸乙酯提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照品，检测波长在281nm，供试品色谱中，与对照品色谱相同时间处，出相同色谱峰。

(2)采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照品，检测波长在254nm，供试品色谱中，与对照品色谱相同时间处，出相同色谱峰。

[检查]包括装(重)量差异、水分、崩解时限、溶化性、粒度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等项目或部分项目，具体检测方法与当时现行版的中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法。

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一。

[含量测定]采用高效液相色谱法，样品前处理为以甲醇提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照品，检测波长在281nm，外标法计算供试品中丹参素的含量。

Claims (15)

1、一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，其特征在于：按照重量组分计算：它由丹参200～600份，川芎100～400份，赤芍100～400份，红花100～400份，香附100～300份，木香100～300份，山楂30～90份加辅料制备成片剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液体制剂、滴丸剂、丸剂、酒剂、浸膏剂，注射制剂；包括：普通针剂、粉针剂、冻干粉针剂、输液剂，其他特殊制剂；包括缓控释制剂、贴膜剂、凝胶剂、分散片剂、微丸剂。

2、按照权利要求1所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂，其特征在于：所制备的制剂为片剂、分散片剂、软胶囊剂、微丸剂、胶囊剂、口服液体制剂、丸剂、滴丸剂、凝胶剂。

3、如权利要求1或2所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～5次，每次0.5～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，再用不同的方法制成不同的制剂。

4、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件是：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入20％微晶纤维素，85％乙醇制粒，整粒，填充入胶囊，即得胶囊剂。

5、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入3％羧甲基淀粉钠，85％乙醇适量制粒，整粒，压片，包衣，即得片剂。

6、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，加入糖浆、1％山梨酸、蒸馏水，即得口服液。

7、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入果葡糖浆制丸，即得丸剂。

8、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃下浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的浸膏，4倍量的聚乙二醇-4000为基质，甲基硅油∶液体石蜡＝3∶1为冷却剂，制丸，即得滴丸剂。

9、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏∶微晶纤维素＝3∶2)、淀粉(浸膏∶淀粉＝30∶1)、LS-HPC(浸膏∶LS-HPC＝10∶3)、十二烷基硫酸钠(浸膏∶十二烷基硫酸钠＝15∶2)、CMS-Na(浸膏∶CMS-Na＝6∶1)、二氧化硅(浸膏∶二氧化硅＝15∶1)、硬脂酸镁(浸膏∶硬脂酸镁＝30∶1)，5％淀粉浆制粒，整粒，压片，即得分散片。

10、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入到聚乙二醇400(浸膏粉∶聚乙二醇＝1∶40)，以明胶为囊材制丸，整丸，干燥，即得软胶囊剂。

11、按照权利要求3所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的制备方法，其特征在于：按照给定的重量组分取丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂，以上七味，加水煎煮1～3次，每次1～3小时，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内在45～60℃时浓缩至浸膏相对密度在50～60℃时测为1.10～1.15的清膏，喷雾干燥，技术条件：进液物料温度60±10℃，进液速度50～55ml/min，进风温度220±5℃，出风温度85±5℃，得干燥浸膏粉，加入微晶纤维素(浸膏粉∶微晶纤维素＝2∶1)混匀，90％乙醇溶液湿润，采用快速搅拌制粒技术，即得微丸剂。

12、如权利要求1或2所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查、含量测定等项目的部分或全部；以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA、红花对照药材、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、川芎对照药材、芍药苷、赤芍对照药材、香附酮、香附对照药材、木香对照药材、山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上物质作为质量控制的检测指标。

13、按照权利要求12所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：

质量控制方法以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA、红花对照药材、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、川芎对照药材、芍药苷、赤芍对照药材、香附酮、香附对照药材、木香对照药材、山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上品种物质作为该品种制剂鉴别方法的检测指标；

质量控制方法以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA、红花黄色素、红花明苷A、阿魏酸、芍药苷、香附酮、熊果酸中全部或部分品种物质作为该品种制剂含量测定方法的检测指标。

14、按照权利要求12或13所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：质量控制方法主要包括以下性状、鉴别、检查、含量测定等项目的部分或全部；

性状：对于胶囊剂，产品内容物为黄棕色至棕褐色颗粒或粉末；气微，味微苦；

对于片剂：产品为糖衣或薄膜包衣片，除去包衣后显黄棕色至棕褐色；气微，味微苦；

鉴别：丹参方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参对照药材、丹参酮IIA中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质作为对照物，检测波长在203~350nm范围内；

红花  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以红花对照药材、红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、丙酮、甲酸、水、甲醇、二氯甲烷、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质作为对照物，检测波长在203~600nm范围内；

川芎  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以川芎对照药材、阿魏酸中全部或部分物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。展开剂可以为乙醚、正己烷、甲醇、醋酸乙酯、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在205~350nm范围内；

赤芍  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以赤芍对照药材、芍药苷中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；展开剂可以为氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在205~350nm范围内；

木香  采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以木香对照药材作为对照药材，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为氯仿、环己烷、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

香附  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以香附对照药材、

香附酮中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；展开剂可以为苯、氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸、或喷以二硝基苯肼等溶液显色的方法；

方法2：采用气相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或，先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用OV-17或类似性质气相色谱柱，柱温在100~180℃，以香附酮作为对照物；

山楂  方法1：采用薄层色谱法，使用硅胶G或硅胶GF₂₅₄或硅胶H为薄层板，点样量为0.5~30ul之间某一体积，以山楂对照药材、熊果酸中一种或一种以上物质作为对照物，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法，展开剂可以为苯、甲苯、氯仿、甲醇、醋酸乙酯、甲酸、冰醋酸中某些种类试剂按照一定比例配制而成，检视条件包括日光或紫外光灯(254或365nm)下检视、氨气熏后再置紫外光灯(254或365nm)下检视、或喷以2~30％硫酸乙醇、或喷以1~10％香草醛硫酸等溶液显色的方法；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用醋酸乙酯超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在205~350nm范围内；

检查  包括装(重)量差异、水分、PH值、崩解时限、溶化性、粒度、相对密度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等全部或部分项目，具体检测方法与中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一；

含量测定  方法1：以高效液相色谱法测定本品中丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中丹参素或其钠盐、原儿茶醛、丹酚酸B、丹参乙酸镁、丹参酮IIA中全部或部分物质的含量，检测波长在200~350nm范围内；

方法2：采用高效液相色谱法测定本品中红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法。使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、庚烷磺酸钠、二甲基甲烷等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中红花黄色素、腺苷、红花明苷A中全部或部分物质的含量，检测波长在200~600nm范围内；

方法3：采用高效液相色谱法，样品前处理包括先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中阿魏酸的含量，检测波长在205~350nm范围内；

方法4：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中芍药苷的含量，检测波长在205~350nm范围内；

方法5：采用气相色谱法，样品前处理可采用甲醇超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用OV-17或类似性质气相色谱柱，柱温在100~180℃，测定本品中香附酮的含量；

方法6：采用高效液相色谱法，样品前处理可采用乙醚超声处理法或先以水溶解样品，再以醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇提取后再浓缩等方法；或直接以乙醇或醋酸乙酯或氯仿或二氯甲烷或乙醚或正丁醇超声处理后再过滤、浓缩等方法；使用C8或C18类型填料的色谱柱，以甲醇、乙腈、水、某比例(0.1~10％)的冰醋酸、某浓度磷酸盐缓冲液等其中部分品种溶剂在合适比例条件下为流动相，测定本品中熊果酸的含量，检测波长在203~300nm范围内。

15、按照权利要求14所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：具体的控制方法包括以下项目的部分或全部：

鉴别：丹参采用高效液相色谱法，样品前处理为以醋酸乙酯提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

红花  采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

川芎  采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩，C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

赤芍  采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm范围内，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

木香  采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为0.5ul，以木香对照药材作为对照药材，样品前处理为醋酸乙酯提取后再浓缩；展开剂可以为氯仿-环己烷-甲醇(2∶11∶5)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

香附  采用薄层色谱法，使用硅胶G为薄层板，点样量为1.0ul之间某一体积，以香附对照药材；展开剂为苯-氯仿-甲醇(3∶11∶21)，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，与对照物色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；

山楂  采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法；使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，供试品色谱中，与对照物色谱相同时间处，出相同色谱峰；

检查  包括装(重)量差异、水分、PH值、崩解时限、溶化性、粒度、相对密度、微生物限度、重金属、砷盐、农药残留等项目或部分项目，具体检测方法与中国药典附录收载的保持一致，另外关于重金属、砷盐的检测方法还包括以微波消解法处理样品，进而采用原子吸收法、等离子发射光谱(ICP-AES)或电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法进行测定的方法；

有关项目的限度要求如下：(1)重金属不得过百万分之二十；(2)砷盐不得过百万分之二；(3)有机氯农药残留总量不得过百万分之一；

含量测定  方法1：采用高效液相色谱法，样品前处理为以甲醇提取后再浓缩；使用C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(12∶33)为流动相，以丹参素作为对照物，检测波长在281nm，外标法计算供试品中丹参素的含量；

方法2：采用高效液相色谱法，样品前处理为氯仿提取后再浓缩等方法；用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-乙腈(41∶19)为流动相，以腺苷作为对照物，检测波长在254nm，外标法计算供试品中腺苷的含量；

方法3：采用高效液相色谱法，样品前处理以醋酸乙酯提取后再浓缩，C₁₈类型填料的色谱柱，以甲醇-水(23∶11)为流动相，以阿魏酸作为对照物，检测波长在322nm，外标法计算供试品中阿魏酸的含量；

方法4：采用高效液相色谱法，样品前处理采用甲醇超声，使用C₈填料的色谱柱，以甲醇-0.1％冰醋酸(5∶14)为流动相，以芍药苷作为对照物，检测波长在280nm，外标法计算供试品中芍药苷的含量；

方法5：采用气相色谱法，样品前处理采用甲醇超声处理法，使用OV-17气相色谱柱，柱温在150℃，测定本品中香附酮的含量；

方法6：采用高效液相色谱法，样品前处理采用醋酸乙酯超声处理法，使用C₁₈填料的色谱柱，以甲醇-水-0.2％冰醋酸(5∶14∶2)为流动相，以熊果酸作为对照物，检测波长在215nm，外标法计算供试品中熊果酸的含量。