CN102866211A

CN102866211A - 冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法

Info

Publication number: CN102866211A
Application number: CN2012103251017A
Authority: CN
Inventors: 刘近荣; 高治华; 赵东洋
Original assignee: SHANXI ZHENDONG TAISHENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: SHANXI ZHENDONG TAISHENG PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2011-12-31
Filing date: 2012-09-05
Publication date: 2013-01-09

Abstract

本发明涉及一种中药注射液制剂的检测方法，特别是一种冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；线性梯度洗脱，乙腈为流动相A，0.04%磷酸水溶液为流动相B，0min—A:B=4:96;60min—A:B=33:67;68min—A:B=33:67;72min—A:B=2:98；检测波长276nm；柱温：25℃～30℃；流速：0.7ml/min～0.8ml/min。且供试品指纹图谱与质量标准所附的对照指纹图谱的相似度不低于0.9；剔除溶剂峰，校正色谱峰后，相似度不低于0.90。

Description

冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法

发明领域

本发明涉及一种中药注射液制剂的检测方法，特别是一种冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法。

背景技术

中药特征指纹图谱，是指中药材经过适当处理后，采用一定的分析手段和仪器检测得到，能够识别其中各个组分群体特征的共有峰的图谱。它是一种综合的，可量化的手段，可用于鉴别中药材的真伪，评价中药质量的均一性和稳定性。中药指纹图谱可教全面的反映中药所含化学成分的种类与数量，进而反映中药的质量和中医所用药所体现的整体疗效，有效的表征中药质量；尤其在现阶段中药的有效成分大多尚未明确，中药指纹图的整体性和模糊性正好符合中药质控的要求，较之单一成分或指标成分的质控方法，更具有科学性和全面性，更加客观地从整体上评价中药的内在质量。目前已有一些药剂使用这种方法作为质量检测的手段，例如现有专利技术中200710098981.8一种双黄连注射液的制备方法及其成分检测方法；申请号：200610065282.9，一种黄芪皂苷注射液指纹图谱的质量检测方法；200910186698.X一种醒脑静注射液的检测方法；200910244324.9一种复方苦参注射液的检测方法等等。

冠心宁注射液记载于卫生部药品标准中药成方制剂第十七册。冠心宁注射液由丹参、川芎加工制成，具有活血化瘀，通脉养心的功效，用于治疗冠心病心绞痛。临川效果显著，近年销售不断提高。

现有技术中，公开了一些丹参、川芎的鉴别方法，但这些方法对于检测冠心宁注射液的质量专属性、特征性不够强，尤其是注射液，更应该有严格的检测方法控制产品质量，故待完善药品质量标准，提高质量可控性，确保用药安全。

发明内容

本发明目的在于解决冠心宁注射液的质量标准的检测，公开一种冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法。

本发明是通过如下技术方案实现的：一种冠心宁注射液的指纹图谱的检测方法，对照指纹图谱有10个特征峰，以6号峰位参照；相对保留时间1号峰：10.536±0.04；2号峰：11.145±0.02；3号峰：15.678±0.02；4号峰：17.071±0.5；5号峰：23.019±0.04；6号峰34.2826±0.02；7号峰：46.426±0.08；8号峰：50.879+0.06；9号峰53.936±0.03；10号峰57.239±0.04；且供试品指纹图谱与质量标准所附的对照指纹图谱的相似度不低于0.9；剔除溶剂峰，校正色谱峰后，相似度不低于0.90。

如图1所示意，为冠心宁注射液的对照指纹图谱。

本发明冠心宁注射液的指纹图谱检测方法包括如下步骤：

照高效液相色谱法（《中国药典》2010版一部附录），结合指纹图谱要求测定，参照物溶液的制备：取经五氧化二磷真空干燥24h的阿魏酸对照品适量，精密称定，加10%甲醇溶液制成每ml含0.25mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密量取冠心宁注射液0.8～1.1ml.置于5ml量瓶中，10%的甲醇（0.2%冰乙酸）稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

测定方法：分别精密量取参照物溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录85min图谱即得。

如图2、3、4、5所示意，分别为不同流动相下冠心宁注射液指纹图谱；如图6所示意，为不同流速下冠心宁注射液指纹图谱，如图7所示意，为不同柱温冠心宁注射液指纹图谱，如图8所示意，不同批号冠心宁注射液指纹图谱。

根据上述结果分析可以得知，色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；线性梯度洗脱，乙腈为流动相A，0.04%磷酸水溶液为流动相B，0min—A:B=4:96;60min—A:B=33:67;68min—A:B=33:67;72min—A:B=2:98；检测波长276nm；柱温：25℃～30℃；流速：0.7ml/min～0.8ml/min。

本发明采用高效液相色谱方法建立冠心宁注射液的指纹图谱，应用关于冠心宁注射液生产质量检测；采用药典会发布的相似度软件，将冠心宁注射液指纹图谱相似度阈值定为不低于0.9.，经实验证明方法准确，可靠，可以最大限度的体现各主要成分的特征峰。

附图说明

图1为冠心宁注射液的对照指纹图谱

图2为甲醇-0.1%TFA流动相下冠心宁注射液指纹图谱

图3为甲醇-0.5%H₃PO₄流动相下冠心宁注射液指纹图谱

图4为乙腈-0.5%H₃PO₄流动相下冠心宁注射液指纹图谱

图5为乙腈-0.04%H₃PO₄流动相下冠心宁注射液指纹图谱

图6为不同流速下冠心宁注射液指纹图谱

图7为不同柱温冠心宁注射液指纹图谱

图8为不同批号冠心宁注射液指纹图谱。

具体实施方式

实施例1，取丹参1000g 川芎 1200g

冠心宁注射液的制备方法包括如下步骤：

将两味原料药加水煎煮三次，第一次1.5小时，第二次、三次各2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.12～1.28的浸膏，加乙醇至含醇量71%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，再加乙醇至含醇量82%,冷藏，滤过，滤液用39%的氢氧化钠调节PH值至7.1～7.4，冷藏，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，稀释至1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至350～400ml。用9%的盐酸溶液调节PH值至2.3～2.8，冷藏，滤过，滤液以36%～39%的氢氧化钠调PH值至6.3～6.8，加热煮沸40分钟，加0.2%的活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加注射用水250ml，加硫酸氢钠0.3～0.6g,滤过，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。

实施例2，取丹参1200g 川芎 1000g

冠心宁注射液的制备方法包括如下步骤：

将两味原料药加水煎煮三次，第一次2小时，第二次、三次各1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.12～1.28的浸膏，加乙醇至含醇量76%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，在加乙醇至含醇量88%,冷藏，滤过，滤液用36%的氢氧化钠调节PH值至7.1～7.4，冷藏，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，稀释至1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至350～400ml。用8.5%的盐酸溶液调节PH值至2.3，冷藏，滤过，滤液以39%的氢氧化钠调PH值至6.8，加热煮沸40分钟，加0.1%的活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加注射用水250ml，加硫酸氢钠0.3g,滤过，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。

实施例3，取丹参1100g 川芎 1100g

冠心宁注射液的制备方法包括如下步骤：

将两味原料药加水煎煮三次，第一次1.8小时，第二次、三次各1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.12～1.28的浸膏，加乙醇至含醇量73%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，在加乙醇至含醇量84%,冷藏，滤过，滤液用37%的氢氧化钠调节PH值至7.1～7.4，冷藏，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，稀释至1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至350～400ml。用8.7%的盐酸溶液调节PH值至2.3～2.8，冷藏，滤过，滤液以38%的氢氧化钠调PH值至6.3～6.8，加热煮沸30分钟，加0.15%的活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加注射液水250ml，加硫酸氢钠0.5g,滤过，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。

取0812191、0802171、0805251、0807021、0807031、0807201不同批号冠心宁注射液，依照供试品制备方法，分别精密量取冠心宁注射液0.8～1.1ml.置于5ml量瓶中，10%的甲醇（0.2%冰乙酸）稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得，注入高效液相色谱仪，记录图谱。

色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；线性梯度洗脱，乙腈为流动相A，0.04%磷酸水溶液为流动相B，0min—A:B=4:96;60min—A:B=33:67;68min—A:B=33:67;72min—A:B=2:98；检测波长276nm；柱温：25℃～30℃；流速：0.7ml/min～0.8ml/min。如图8所示意，为不同批号冠心宁注射液的指纹图谱。

Claims

1.一种冠心宁注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于该方法中指纹图谱为：供试品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度不低于0.9；剔除溶剂峰，校正色谱峰后，相似度不低于0.90；指纹图谱应有10个特征峰，以6号峰位参照，相对保留时间1号峰：10.536±0.04；2号峰：11.145±0.02；3号峰：15.678±0.02；4号峰：17.071±0.5；5号峰：23.019±0.04；6号峰34.2826±0.02；7号峰：46.426±0.08；8号峰：50.879+0.06；9号峰53.936±0.03；10号峰57.239±0.04

如权利要求1所述的冠心宁注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；线性梯度洗脱，乙腈为流动相A，0.04%，磷酸水溶液为流动相B，0min—A:B=4:96;60min—A:B=33:67;68min—A:B=33:67;72min—A:B=2:98；检测波长276nm；柱温： 30℃；流速：0.8ml/min，

参照物溶液的制备：取经五氧化二磷真空干燥24h的阿魏酸对照品适量，精密称定，加10%甲醇溶液制成每ml含0.25mg的溶液，即得，

供试品溶液的制备：精密量取冠心宁注射液0.8～1.1ml.置于5ml量瓶中，10%的甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得；

测定方法：分别精密量取参照物溶液饿供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录85min图谱即得。

2.如权利要求1或2所述的冠心宁注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于该方法中的冠心宁注射液的原料药为：丹参1000～1200g 、川芎 1000～1200g。

3.如权利要求2所述的冠心宁注射液的指纹图谱检测方法，其特征在于该方法中冠心宁注射液的制备方法包括如下步骤：

将两味原料药加水煎煮三次，第一次1.5～2小时，第二次、三次各1～2小时，合并煎液，率够，滤液浓缩至相对密度1.12～1.28的浸膏，加乙醇至含醇量71%～76%，冷藏，滤过，滤液回收乙醇，再加乙醇至含醇量82%～88%,冷藏，滤过，滤液用36%～39%的氢氧化钠调节PH值至7.1～7.4，冷藏，滤过，滤液回收乙醇至无醇味，稀释至1000ml，冷藏，滤过，滤液浓缩至350～400ml，用8.5～9%的盐酸溶液调节PH值至2.3～2.8，冷藏，滤过，滤液以36%～39%的氢氧化钠调PH值至6.3～6.8，加热煮沸25～40分钟，加0.1%～0.2%的活性炭，稍冷，滤过，冷藏，加注射用水250ml，加硫酸氢钠0.3～0.6g,滤过，滤液加注射用水至1000ml，滤过，灌封，灭菌，即得。