CN104849375B - 橘红痰咳制剂的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种橘红痰咳制剂的检测方法，包括橘红痰咳制剂的指纹图谱和多成分含量测定检测方法。所述HPLC指纹图谱检测方法包括如下步骤：(1)供试品溶液的配制：(2)测定：精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到橘红痰咳制剂的指纹图谱。本发明克服了现有质量标准中仅对其单一化学成分定量控制的片面性，能更有效地表征产品的内在质量，提供了一种全面评价橘红痰咳制剂的科学方法，进一步完善了其质量控制体系。

Description

橘红痰咳制剂的检测方法

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，特别是涉及一种橘红痰咳制剂的检测方法。

背景技术

橘红痰咳制剂是由化橘红、苦杏仁、半夏(制)或水半夏、蜜百部、白前、茯苓、五味子和甘草等8味中药，采用现代制剂工艺精制而成，是治疗寒咳的甲类非处方药物，适用于痰湿阻肺型急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、咽喉炎、感冒等疾病的治疗。橘红痰咳方剂引经于宋代《太平惠民和剂局方》里的“二陈汤”，重用南国地道名贵中药材“化橘红”，并加以苦杏仁、白前、百部、五味子化裁而成，是温化寒痰的代表方剂。橘红痰咳系列制剂目前有橘红痰咳液、橘红痰咳液(无蔗糖型)、橘红痰咳煎膏、橘红痰咳颗粒、橘红痰咳泡腾片等五种产品形式，其中橘红痰咳液为广州市香雪制药股份有限公司独家品种。

2010版《中国药典》(一部)收载了橘红痰咳液(有糖型)的质量标准，橘红痰咳液(无蔗糖型)执行国家食品药品监督管理局颁标准(YBZ05962006)，橘红痰咳煎膏和橘红痰咳颗粒的质量标准分别收载在部颁标准(WS3-B-3522-98，WS3-B-2819-97)中。橘红痰咳煎膏和橘红痰咳颗粒现行质量标准中只有简单的理化鉴别项，专属性较差，不能有效控制产品质量。橘红痰咳液虽有专属性较强的薄层色谱鉴别及单一成分含量测定项，但是两个剂型的样品处理方法、检测方法、含量限度均不同，橘红痰咳液(无蔗糖型)同时进行化橘红和百部的薄层鉴别，而橘红痰咳液(有糖型)仅进行化橘红药材薄层鉴别。

目前，橘红痰咳系列制剂缺乏全面的质量控制方法，现行质量标准不完善、不统一，给质量管理工作带来诸多不便。为了有效保证临床疗效，使产品质量更稳定、可控，开展橘红痰咳制剂的质量控制方法研究，将不同剂型产品的质量标准进行统一，具有很强的实用价值和重大意义。

发明内容

基于此，本发明的目的是提供一种橘红痰咳制剂的检测方法。

具体的技术方案如下：

一种橘红痰咳制剂的检测方法，包括橘红痰咳制剂的HPLC指纹图谱检测方法，所述HPLC指纹图谱检测方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液的配制：

精密称取橘红痰咳制剂，加入体积浓度为50％～100％的甲醇溶解，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(2)测定

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到橘红痰咳制剂的指纹图谱；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱,3～5μm；流动相：乙腈为流动相A，体积浓度为0.01-5％的酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱方式为：从0-50min，流动相A的体积百分数由0％变化为42％；从50-80min，流动相A的体积百分数由42％变化为100％。

在其中一个实施例中，所述检测波长为254nm或320nm。

在其中一个实施例中，所述酸水溶液为甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液。

在其中一个实施例中，该检测方法还包括多成分含量检测方法，所述多成分含量检测方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯、苦杏仁苷、五味子醇甲对照品中的一个或几个，加入甲醇溶解，即得所述对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

精密称取橘红痰咳制剂，加水饱和正丁醇进行萃取，合并正丁醇萃取液，回收正丁醇萃取液至干，残渣转移至容量瓶中，甲醇定容至刻度，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(3)测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，即得；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱,3～5μm；流动相：乙腈为流动相A1，体积浓度为0.01-5％的甲酸水溶液或冰乙酸水溶液或磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液为流动相B1，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A1的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为205-215nm、244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

在其中一个实施例中，所述多成分含量检测方法中的梯度洗脱方式为：从0-50min，流动相A1的体积百分数由5％变化为42％；从50-80min，流动相A1的体积百分数由42％变化为100％。

在其中一个实施例中，所述多成分含量检测方法中的检测波长为210nm、254nm或320nm。

在其中一个实施例中，所述橘红痰咳制剂的原料组成包括：化橘红、苦杏仁、半夏或水半夏、蜜百部、白前、茯苓、五味子和甘草。

在其中一个实施例中，所述橘红痰咳制剂包括口服液、煎膏剂、糖浆剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、散剂或滴丸剂。

本发明的优点如下：

在指纹图谱分析基础上结合多有效成分定量分析，能同时兼顾定性和定量分析，既能客观反应中药的多样性与复杂性，又能更加真实的反映中药的内在质量，用于评价原料药材、中间品、成品质量的均一性和稳定性，体现了中药作用的整体性和模糊性。

1、橘红痰咳制剂的现行检测标准不统一、不完善，给质量管理工作带来诸多不便，本发明的检测方法将不同剂型产品的检测标准进行统一，可以节约大量的时间和成本，具有实用价值和重大意义。

2、本发明将橘红痰咳制剂高效液相色谱指纹图谱与多有效成分定量分析相结合，克服了现有质量标准中仅对其单一化学成分定量控制的片面性，能更有效地表征产品的内在质量，提供了一种全面评价橘红痰咳制剂的科学方法，进一步完善了其质量控制体系。

3、本发明可以更全面的监控橘红痰咳制剂原料药材、中间品、成品的质量，监控生产工艺的稳定性，大大提高了质量控制水平，保证产品质量均一、稳定。

4、本发明针对橘红痰咳制剂中所含化学成分的特点，对供试品的预处理方法、流动相、检测波长、洗脱程序、柱温、流速等条件进行了筛选和优化，选用的方法具有良好的重现性和可行性。

附图说明

图1为橘红痰咳制剂不同流动相HPLC谱图；

图2为21批橘红痰咳液HPLC指纹图谱(320nm)；

图3为20批橘红痰咳液HPLC指纹图谱(254nm)；

图4为实施例4样品的HPLC(254nm)指纹图谱；

图5为实施例4样品的HPLC(320nm)指纹图谱。

具体实施方式

以下结合实施例对本申请做进一步阐述。

实施例1橘红痰咳制剂的标准指纹图谱构建

1仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪为Waters Alliance HPLC系统，色谱柱为C18色谱柱(5μm，4.6mm×250mm)。

1.2试剂

乙腈、甲醇、甲酸、冰醋酸为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。

1.3试药

21批橘红痰咳液(无蔗糖型)均由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。

2.方法与结果

2.1供试品溶液制备

精密量取供试品5ml，加入相当于供试品10倍量的甲醇，超声处理30min，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液，制成供试品溶液。

2.2高效液相色谱分析：

取供试品溶液各5μl，注入超高效液相色谱仪，记录色谱图，见图1、图2。

色谱条件：流动相A为乙腈，流动相B为0.1％～5％酸水溶液，采用表1的梯度洗脱方式：

表1梯度洗脱表

时间(min)	A％	B％
			0	5	95
50	42	58
			75	100	0

检测波长：254nm、320nm；流动相流速1.0ml/min；柱温30℃，得到供试品的高效液相色谱指纹图谱。

色谱条件筛选实验：

1、流动相的选择

首先考察了甲醇-水、乙腈-水系统对成分分离的影响，记录该色谱条件下110min色谱图，80min后无色谱峰出现，故色谱记录时间为80min。乙腈-水系统从峰形、峰数、出峰时间上具有明显优势，因此选择乙腈-水系统进行进一步的条件优化。为了改善峰形，增加分离度，我们尝试在水相中加入一定比例的酸，发现峰形有明显的改善。经筛选甲酸、乙酸、磷酸、三氟乙酸等在0.01～5％的范围内可以起到改善分离的作用(如图1所示)。

2、测定波长的选择

采用DAD二级管阵列检测器进行全波长扫描，比较了200～400nm所得的HPLC图谱，结果在254nm，320nm波长检测时，其HPLC图谱中呈现较多的色谱峰，同时使各色谱峰分离度较好、出峰数目适中、峰形较好，故确定254nm、320nm处波长为指纹图谱检测波长。

3、色谱柱及仪器型号的考察

考察了Waters X-Bridge C18柱(4.6mm×250mm,5μm)，GRACE Alltima C18(4.6mm×250mm,5μm)，Kromasil C18柱(4.6mm×250mm,5μm)，DIONEXC₁₈(4.6mm×250mm,5μm)，YMCHydrosphere C18(5μm,4.6mm×250mm)等5种不同型号的色谱柱，其中Waters X-BridgeC18柱和DIONEX C18柱对各色谱峰分离度较佳，峰形较好。

4、柱温的选择

实验中考察了25℃、30℃、35℃、40℃、50℃等5个柱温条件下，各色谱峰的分离情况，结果表明，不同柱温下的色谱峰略有区别。

5、供试品溶液制备方法试验

为了能够在指纹图谱中全面反映橘红痰咳制剂的成分，采取直接对橘红痰咳制剂进行提取，分别对提取溶剂(甲醇、乙醇、75％甲醇、50％甲醇)、提取方式(超声、加热回流)及提取时间进行了考察，最终选择用甲醇超声提取，方法简便，得到的色谱峰信息丰富。

此外，为了对多有效成分进行准确定量，我们还尝试用不同极型有机试剂进行萃取，降低杂质干扰，分别考察了二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、水饱和正丁醇等对主要成分含量的影响，其中水饱和正丁醇萃取保留信息最为丰富。

采用上述方法建立标准指纹图谱：将12批橘红痰咳液样品指纹图谱测定数据导入国家药典委员会编制的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)”，用平均数的方法生成指纹图谱共有模式，并以此共有模式为橘红痰咳液的标准指纹图谱。

橘红痰咳制剂指纹图谱采用两个波长，其中254nm下有32个共有特征峰(如图2所示)，320nm下有20个共有特征峰(如图3所示)。

具体如下：

2.3指纹图谱的方法学考察

为了考察分析方法的可靠性，对指纹图谱检测方法的精密度、稳定性、重现性进行考察，结果证明，精密度、稳定性和重现性良好，满足指纹图谱的要求。

2.3.1精密度试验：取同一份供试品溶液连续进样6次，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液在254nm和320nm下相似度均等于1.000，仪器的精密度良好。精密度结果见表4：

表4精密度结果

2.3.2稳定性试验：稳定性考察：取同一份供试品溶液，分别在0、6、12、18、24、36、48、72小时进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液在254nm和320nm下相似度均等于1.000，供试品溶液在放置72小时内稳定。稳定性结果见表5：

表5稳定性结果

2.3.3重复性试验：取同一批橘红痰咳液供试品6份，按“供试品溶液的制备”项下方法制备，分别进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液在254nm和320nm下相似度均等于1.000，方法重复性好。结果见表6：

表6重复性结果

2.3.4中间精密度：取同一批号的橘红痰咳液，分别在不同日期、不同分析人员等变动因素条件下，依法测定，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价。

2.3.4.1不同分析时间：取同一批号橘红痰咳液，分别于不同日期按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1.000。相似度结果见表7：

表7不同分析时间相似度结果

	S1(日期1)	S2(日期2)	S3(日期3)	对照指纹图谱
					S1(日期1)	1.000	1.000	1.000	1.000
S2(日期2)	1.000	1.000	1.000	1.000
					S3(日期3)	1.000	1.000	1.000	1.000
对照指纹图谱	1.000	1.000	1.000	1.000

2.3.4.2不同分析人员：取同一批号橘红痰咳液，不同人员分别按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1.000。相似度结果见表8：

表8不同分析人员相似度结果

	S1(人员1)	S2(人员2)	对照指纹图谱
				S1(人员1)	1.000	1.000	1.000
S2(人员2)	1.000	1.000	1.000
				对照指纹图谱	1.000	1.000	1.000

实施例2橘红痰咳制剂的多成分含量检测方法

1仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪为Waters Alliance HPLC系统，色谱柱为Waters X-Bridge C18柱(4.6mm×250mm,5μm)。

1.2试剂

乙腈、甲醇、甲酸、冰醋酸为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。

1.3试药

1.3.1对照品

柚皮苷、野漆树苷对照品购自中国药品生物制品检定所。

1.3.2供试品

12批橘红痰咳液产品由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。

2方法与结果

2.1供试品溶液制备

精密吸取橘红痰咳液样品5ml于分液漏斗中，然后加水饱和正丁醇进行萃取，合并正丁醇萃取液，于旋转蒸发仪上蒸干，残渣转移至50ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

2.2对照品溶液制备

精密称取柚皮苷、野漆树苷对照品适量置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成混合对照品储备液。分别精密吸取混标储备液1ml，分别置于不同体积棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得系列混标溶液。

2.3线性范围

精密吸取各混标溶液10μl，注入高效液相色谱仪，以浓度对峰面积进行回归处理，得野漆树苷、柚皮苷的标准曲线，见表7。

色谱条件：色谱柱为C18色谱柱；流动相：乙腈为流动相A1，体积浓度为0.01-5％的甲酸水溶液或冰乙酸水溶液或磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液为流动相B1，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A1的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为205-215nm、244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

表9线性关系和范围

2.4精密度试验

取同一份供试品溶液，连续进样6次，记录各待测峰的保留时间、峰面积。结果(表10)显示野漆树苷和柚皮苷的保留时间、峰面积及含量的RSD值均小于1.0％，表明仪器精密度良好。

表10精密度试验结果

2.5重复性试验

取同一批橘红痰咳液，按“供试品溶液的制备”项下制备6份供试品溶液，分别进样，记录各待测峰的保留时间、峰面积。结果(见表11)显示柚皮苷、野漆树苷保留时间及含量的RSD值均小于1.0％，表明该方法的重复性良好。

表11重复性试验结果

2.6稳定性试验

取同一份供试品溶液，分别在制备后的0、6、12、18、24、36、48、72小时进样分析，记录各待测峰的保留时间、峰面积。结果(见表12)显示柚皮苷、野漆树苷保留时间及含量的RSD值均小于1.0％，表明72小时内，供试品溶液的稳定性良好。

表12稳定性试验结果

2.7加样回收率试验

精密量取同一批已知含量的橘红痰咳液，平行6份，分别精密加入一定量的混合对照品溶液，按“供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，测定并计算各成分的加样回收率及RSD，结果(见表13)显示，柚皮苷、野漆树苷的加样回收率分别为98.7％、98.1％，RSD均小于1.0％，表明方法准确度良好。

表13加样回收率结果

2.8中间精密度试验

取同一批次橘红痰咳液，不同人员分别按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，分别在不同日期、不同分析人员等变动因素条件下，依法测定，记录各待测峰的保留时间和峰面积。结果显示，不同日期下，柚皮苷、野漆树苷的保留时间和含量RSD均小于1.0％；不同分析人员的情况下，柚皮苷、野漆树苷的保留时间和含量RSD均小于1.0％；使用不同仪器的情况下，柚皮苷、野漆树苷的保留时间和含量RSD均小于2.0％，表明该方法中间精密度良好。

3样品测定结果

取不同批次的橘红痰咳液，按“供试品溶液”项下方法操作，在上述色谱条件下进行分析，用外标法计算样品中柚皮苷、野漆树苷含量。12批橘红痰咳液含量测定结果见表14。

表14样品检测结果

实施例3无蔗糖型橘红痰咳液中多有效成分含量测定

1仪器与试药

1.1仪器

高效液相色谱仪为Waters Alliance HPLC系统，色谱柱为Waters X-Bridge C18柱(5μm，4.6mm×250mm)。

1.2试剂

乙腈、甲醇、冰醋酸为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。

1.3试药

1.3.1对照品

柚皮苷、野漆树苷、苦杏仁苷、五味子醇甲对照品购自中国药品生物制品检定所。橙皮内酯水合物、异橙皮内酯购自上海源叶生物科技有限公司。

1.3.2供试品

无蔗糖型橘红痰咳液(批号：20141118)由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。

2方法与结果

2.1供试品溶液制备

精密吸取橘红痰咳液样品5ml于分液漏斗中，然后加水饱和正丁醇进行萃取，合并正丁醇萃取液，于旋转蒸发仪上蒸干，残渣转移至50ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。平行制备两份。

2.2对照品溶液制备

精密称取柚皮苷、野漆树苷、苦杏仁苷、五味子醇甲、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯等对照品适量置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每毫升各含300μg、50μg、50μg、10μg、40μg、20μg的混合对照品溶液。分别精密吸取混标储备液，分别置于不同体积棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得系列混标溶液。

2.3测定

精密吸取各混标溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定。

3样品测定结果

取橘红痰咳液，按“供试品溶液”项下方法操作，在上述色谱条件下进行分析，计算样品中柚皮苷、野漆树苷、苦杏仁苷、五味子醇甲、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯含量。结果显示该批橘红痰咳液中野漆树苷含量为0.147mg/ml，柚皮苷含量为4.592mg/ml，苦杏仁苷含量为0.140mg/ml，五味子醇甲含量为2.3μg/ml，橙皮内酯水合物含量为0.115mg/ml，异橙皮内酯含量为17.7μg/ml。

实施例4

取某一批次橘红痰咳颗粒，对其进行检测。

按实施例1的方法，得到该样品的指纹图谱如图4所示。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明样品的254nm下相似度为0.998，320nm下相似度为0.991。

按实施例3的方法，对该样品进行多成分含量检测，结果如下表15：

表15样品检测结果

序号	成分名称	含量(mg/g)
			1	野漆树苷	0.119
2	柚皮苷	4.550
			3	苦杏仁苷	0.145
4	橙皮内酯水合物	0.105
			5	异橙皮内酯	0.016
6	五味子醇甲	0.002

由上数据可知，该橘红痰咳颗粒样品在254nm、320nm下相似度均大于0.90，6个有效成分含量均符合内控质量标准规定，判定为合格产品。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (16)

1.一种橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，包括橘红痰咳制剂的HPLC指纹图谱检测方法，所述HPLC指纹图谱检测方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液的配制：

精密称取橘红痰咳制剂，加入体积浓度为50％～100％的甲醇溶解，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(2)测定

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到橘红痰咳制剂的指纹图谱；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱，3～5μm；流动相：乙腈为流动相A，体积浓度为0.01-5％的酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

2.根据权利要求1所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述检测波长为254nm或320nm。

3.根据权利要求1所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述酸水溶液为甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液。

4.根据权利要求1所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，该检测方法还包括成分含量检测方法，所述成分含量检测方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯、苦杏仁苷、五味子醇甲对照品中的一个或几个，加入甲醇溶解，即得所述对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

精密称取橘红痰咳制剂，加水饱和正丁醇进行萃取，取正丁醇萃取液，回收正丁醇萃取液至干，残渣转移至容量瓶中，甲醇定容至刻度，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(3)测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，即得；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱,3～5μm；流动相：乙腈为流动相A1，体积浓度为0.01-5％的甲酸水溶液或冰乙酸水溶液或磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液为流动相B1，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A1的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为205-215nm、244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

5.根据权利要求4所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述成分含量检测方法中的检测波长为210nm、254nm或320nm。

6.根据权利要求1-5任一项所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述橘红痰咳制剂的原料组成包括：化橘红、苦杏仁、半夏或水半夏、百部、白前、茯苓、五味子和甘草。

7.根据权利要求6所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述橘红痰咳制剂包括口服液、煎膏剂、糖浆剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂或散剂。

8.一种橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，包括橘红痰咳制剂的HPLC指纹图谱检测方法，所述HPLC指纹图谱检测方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液的配制：

精密称取橘红痰咳制剂，加入体积浓度为50％～100％的甲醇溶解，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(2)测定

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到橘红痰咳制剂的指纹图谱；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱，3～5μm；流动相：乙腈为流动相A，体积浓度为0.01-5％的酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0-50min，流动相A的体积百分数由0％变化为42％；从50-80min，流动相A的体积百分数由42％变化为100％。

9.根据权利要求8所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述检测波长为254nm或320nm。

10.根据权利要求8所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述酸水溶液为甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液。

11.根据权利要求8所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，该检测方法还包括成分含量检测方法，所述成分含量检测方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯、苦杏仁苷、五味子醇甲对照品中的一个或几个，加入甲醇溶解，即得所述对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

精密称取橘红痰咳制剂，加水饱和正丁醇进行萃取，取正丁醇萃取液，回收正丁醇萃取液至干，残渣转移至容量瓶中，甲醇定容至刻度，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(3)测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，即得；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱,3～5μm；流动相：乙腈为流动相A1，体积浓度为0.01-5％的甲酸水溶液或冰乙酸水溶液或磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液为流动相B1，采用梯度洗脱方式：从0-80min，流动相A1的体积百分数由0变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为205-215nm、244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

12.根据权利要求11所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述成分含量检测方法中的检测波长为210nm、254nm或320nm。

13.一种橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，包括橘红痰咳制剂的HPLC指纹图谱检测方法，所述HPLC指纹图谱检测方法包括如下步骤：

(1)供试品溶液的配制：

精密称取橘红痰咳制剂，加入体积浓度为50％～100％的甲醇溶解，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(2)测定

精密吸取供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，得到橘红痰咳制剂的指纹图谱；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱，3～5μm；流动相：乙腈为流动相A，体积浓度为0.01-5％的酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0-50min，流动相A的体积百分数由0％变化为42％；从50-80min，流动相A的体积百分数由42％变化为100％；

该检测方法还包括成分含量检测方法，所述成分含量检测方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

精密称取柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、异橙皮内酯、苦杏仁苷、五味子醇甲对照品中的一个或几个，加入甲醇溶解，即得所述对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

精密称取橘红痰咳制剂，加水饱和正丁醇进行萃取，取正丁醇萃取液，回收正丁醇萃取液至干，残渣转移至容量瓶中，甲醇定容至刻度，过滤，取续滤液，即得所述供试品溶液；

(3)测定

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测定，即得；

色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱,3～5μm；流动相：乙腈为流动相A1，体积浓度为0.01-5％的甲酸水溶液或冰乙酸水溶液或磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液为流动相B1，采用梯度洗脱方式：从0-50min，流动相A1的体积百分数由5％变化为42％；从50-80min，流动相A1的体积百分数由42％变化为100％；流速为0.3-1.2ml/min；检测波长为205-215nm、244-264nm或315-335nm；柱温20-50℃。

14.根据权利要求13所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述HPLC指纹图谱检测方法中的检测波长为254nm或320nm。

15.根据权利要求13所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述酸水溶液为甲酸水溶液、乙酸水溶液、磷酸水溶液或三氟乙酸水溶液。

16.根据权利要求13所述的橘红痰咳制剂的检测方法，其特征在于，所述成分含量检测方法中的检测波长为210nm、254nm或320nm。