CN1530101A - 一种具有净化血液、改善免疫力和调节血脂作用的保健食品组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种组合物，包括：菊苣提取物300－800重量份，大豆提取物5－120重量份，银杏提取物10－100重量份，维生素E 1－25重量份和维生素C 5－50重量份，该组合物能够改善因血液污染造成的免疫低下和高血脂症状，具有明显提高细胞免疫、体液免疫和单核－巨噬细胞功能的免疫调节作用和能够降低血清中胆固醇、甘油三脂的调节血脂的作用。
Description
发明领域
本发明涉及一种具有净化血液、改善免疫力和调节血脂作用的保健食品组合物。
背景技术
现代存在很多污染，人体在日常生活和代谢过程中血液也会受到污染。血液中的污染物有四类：病毒、细菌、自由基和脂肪团。前两种来自被污染的空气，后两种来自人体自身代谢。这些污染物在血液中的囤积会导致免疫力下降和高血脂症。因此对于提高免疫力和调节血脂作用的保健品存在着需求。
发明内容
本发明物的目的是提供一种以菊苣提取物、大豆提取物(含大豆异黄酮)、银杏提取物(含银杏黄酮)、维生素E和维生素C为原料的保健食品组合物，该组合物可通过清除血液中的上述四种污染源，起到净化血液的作用，从而达到显著的免疫调节和调节血脂作用，其中菊苣酸可通过增加血液中的粒细胞来刺激免疫系统，它可清除血液中的病毒和细菌；异黄酮类、黄酮类以及维生素类物质都具有很强的抗氧化作用，可清除自由基，并且对脂肪团可起到乳化作用，促进其代谢，从而使血液得到净化。
本发明的组合物包括(按重量份计)：
菊苣提取物 300-800
大豆提取物 25-200
银杏提取物 10-100
维生素E 1-25
维生素C 5-50。
本发明的组合物优选包括(按重量份计)：
菊苣提取物 300-400
大豆提取物 30-100
银杏提取物 10-100
维生素E 2.5-10
维生素C 10-40。
本发明的组合物最优选包括(按重量份计)：
菊苣提取物 300-350
大豆提取物 40-80
银杏提取物 20-50
维生素E 2.5-10
维生素C 15-30。
在以上所有情况下，银杏提取物中的银杏黄酮优选≥10％，更优选≥15％，还更优选≥24％；菊苣提取物中功效成分菊苣酸含量优选≥0.5％，更优选≥1％还更优选≥10％，甚至更优选≥30％。大豆提取物中大豆异黄酮的含量优选≥10％，更优选≥20％，通常为20-80％。
其中银杏提取物可以商购(例如从宁波利华制药有限公司购得)，或者可以根据现有技术方法制备，例如采用水提取和有机溶剂提取。
菊苣提取物可以商购，或者可以制备，例如制备过程可以包括将菊苣用水煎煮，过滤，醇沉，萃取，溶剂回收，干燥，获得产品，当然还可以使用本领域的其它任何方法。
大豆提取物可以商购，或者可以制备，制备过程例如包括将大豆脱脂脱油，醇浸提，萃取精制，溶剂回收，干燥，获得产品，当然还可以使用本领域的其它任何方法。
可以按照本领域的常规方法，将上述组合物制成任何适宜的剂型，例如丸剂，口服液，散剂，胶囊，颗粒制剂等。
例如一种方法包括按所述配比混合各种组分，制成软材，制粒，干燥，整粒，再压片。
例如另一种方法包括按所述配比混合各种组分，再加入水和任选的其它添加剂(如甜味剂、香味剂等)，制成口服液。
本配方的特定为各个组成部分基本或全部是天然的，以植物提取物为主，综合多种植物提取物的优点将几种功能成分进行科学配伍组合所得，使其效果更明显。并且压片的制备工艺简单易操作。
菊苣提取物的功效成分是菊苣酸，是目前国际流行的免疫调节剂，它主要是通过增加血液中的粒细胞来刺激免疫系统，通过粒细胞和巨噬细胞来增强噬菌细胞的性能：抑制病毒的繁衍；治疗真菌(酵母菌)感染；活化细胞浆(比如白细胞介素1)；增加T-淋巴细胞的数量以及通过增加T4细胞来改变T4/T8的比值。此外，试验表明，菊苣提取物可降低模型动物血糖、总胆固醇、甘油三酯；并能较好地降低全血、血浆粘稠度，因此，菊苣具有免疫调节和治疗高血糖、高血脂的综合药效。
大豆异黄酮是从大豆中提取的天然物质，是一种很强的抗氧化剂，是一种植物雌激素双向调节因子，对人体雌激素水平可起到双向调节作用。实验表明，大豆异黄酮能明显促进腹腔巨噬细胞的吞噬功能，提高胸腺重量和外周血T淋巴总数，促进PHA诱导的外周血淋巴细胞转化，大豆异黄酮不仅明显提高实验动物非特异性免疫系统的吞噬功能和B细胞的体液免疫系统功能，而且提高细胞免疫功能作为一种黄酮类物质，具有清除自由基、抗氧化和抑制脂质过氧化反应的作用。另据美国Wake Forest大学Baptist医学中心Crouse教授报告，大豆异黄酮能降低血中低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度，而且，大豆异黄酮含量愈高，总胆固醇和LDL降低值越大。近年日本植杉福井等发表研究报告表明，大豆异黄酮可降低体内胆固醇和脂肪量，并能影响脂肪代谢，改善更年期妇女高血压和高血脂症，预防心血管疾病。
实验表明，银杏叶提取物在动物体内作用后，可使中性粒细胞在吞噬和杀伤细菌时的MPO活性增高，从而增强中性粒细胞的吞噬杀菌功能，增强机体免疫调节的作用。银杏叶提取物(被誉为血液动力因子)能明显降低动物血清总胆固醇(TC)水平和甘油三酯(TG)水平，并能明显升高动物血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平，提示银杏叶提取物对动脉硬化有预防作用。
维生素C是维持机体正常免疫功能的必须物质，在免疫机制的许多重要环节上起重要作用。若缺乏维生素C会导致机体免疫功能低下。维生素C能诱发、促进干扰素(IFN)产生，从而增强免疫功能。维生素C也能增强体液免疫，参与免疫球蛋白的生成。临床实验表明，维生素C可以从不同角度发挥其降低血脂、总胆固醇、甘油三酯、中低密度脂蛋白，升高高密度脂蛋白的作用。
许多研究表明，维生素E对体液免疫有明显的促进作用，能增强抗体和补体的产生以及抗体对抗原的应答反应，促进淋巴细胞的增殖，分化和细胞因子的产生，提高免疫细胞的细胞毒作用和吞噬细胞的吞噬作用。维生素E还是一种降低血总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的物质，有调节血脂代谢，阻止脂肪肝形成及提高机体抗氧化能力的作用。
综上所述，本配方充分考虑了菊苣提取物、大豆提取物、银杏叶提取物、维生素E粉和维生素C粉通过各种不同机制在免疫调节和调节血脂方面发挥的作用及对人体的安全性。
具体实施例
以下通过实施例举例说明本发明，应该清楚的是，所述实施例仅用于说明的目的。
实施例1
通过将菊苣用水煎煮，过滤，醇沉，萃取，溶剂回收，干燥制备菊苣提取物。通过将大豆脱脂脱油，醇浸提，溶剂回收，萃取精制，溶剂回收，干燥来制备大豆异黄酮。将菊苣提取物、大豆提取物、银杏提取物、维生素E和维生素C混合，制成软材，制粒，干燥，整粒，压片，使得每片含有菊苣提取物300-350mg(菊苣酸含量≥1％)，大豆异黄酮40-80mg，银杏提取物20-50mg(银杏黄酮含量≥20％)，微生物E5-15mg，维生素C15-30mg。
实施例2
将菊苣提取物1000g(含菊苣酸≥1％)，大豆提取物240g(含大豆异黄酮50％以上)，银杏提取物90g(含银杏黄酮≥20％)，维生素E15g和维生素C50g混合，制成软材，制粒，干燥，整粒，压片。
实施例3
将菊苣提取物1000g(含菊苣酸≥1％)，大豆提取物200g(含大豆异黄酮50％以上)，银杏提取物90g(含银杏黄酮≥20％)，维生素E15g和维生素C50g混合，用10L水和适量糖稀释，制成口服液。
一、本发明组合物的免疫调节作用实验
样品：本发明组合物，褐色片状，0.55g/片。人体推荐量为4片/天，即每人每天2.2g，按60kg体重计为37mg/天/kg。将样品打成粉末状，用蒸馏水配制成所需浓度。
1.2动物SPF级BALB/C雌性小鼠，北京维通利华实验动物技术有限公司提供，合格证号：SCXK(京)2002-0003。将小鼠分为三批，每批48只，体重18-22g，按体重随机分为四组，每组12只，免疫一批进行脏器/体重比值，小鼠碳廓清试验；免疫二批进行迟发型变态反应，抗体生成的细胞检测，HC50测定、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验；免疫三批进行ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、NK细胞活性测定。
1.3剂量选择 三个剂量组低、中、高为人体推荐量的5倍、10倍、30倍，即185mg/kg、370mg/kg、1110mg/kg，溶剂对照组为蒸馏水。经口给予，灌胃量为0.4ml/20g，各试验组均连续灌胃30天后测相应的免疫指标。
1.4实验方法和观察指标
1.4.1脏器/体重比值测定 小鼠称重后脱臼处死，取脾脏与胸腺，滤纸吸干表面血污称重，计算脾脏/体重比值和胸腺/体重比重。
1.4.2绵羊红细胞诱发小鼠DTH(足跖增厚法)取羊血，用生理盐水洗涤3次(2000rpm，10分装)，每只鼠经腹腔注射2％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC 0.2ml，致敏后4天，测量左后足跖部厚度，同一部位测量三次，取平均值。然后在测量部位下注射20％(v/v，用生理盐水配制)压积SRBC 20μl，于注射后24小时测量左后足跖部厚度，以攻击前后足跖厚度的差值来表示DTH的程度。
1.4.3抗体生成细胞检测(Jerne改良载片法)，将压积SRBC用生理盐水配成2％的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0.2ml注射进行免疫，四天后，将小鼠颈椎脱臼处死，取出脾脏，放在盛有Hank’s液的小平皿内，用4层纱布将脾磨碎，制成细胞悬液，离心(1000r/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后将细胞悬浮在5ml RPM 1640培养液中，计数细胞，并将细胞浓度调整为5×106个/ml。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100ml)加热溶解后，放45℃水浴保温，与等量pH7.2-7.4，2倍浓度的Hank’s液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50ul 10％SRBC(v/v，用SA液配制)，25ul脾细胞悬液(5×106个/ml)，迅速混匀，倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上做平行片，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中温育1.5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1∶6)加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。
1.4.4半数溶血值(HC50)的测定 将压积SRBC用生理盐水配成2％的细胞悬液，每只鼠腹腔注射0.2ml进行免疫，四天后，摘眼球取血，分离血清。血清用SA缓冲液稀释300倍，取稀释后的血清1ml，依次加入10％SRBC0.5ml，补体1ml(用SA缓冲液按1∶6稀释)，另设不加血清动物对照管(用SA缓冲液代替)。置37℃恒温水浴25min，冰浴终止反应。2000r/min离心10min，取上清液1ml，都氏剂3ml于试管内，同时取10％SRBC(v/v)0.25ml，加都氏剂至4ml于另一试管内，充分混匀，放置10min后，于540nm处测定各管光密度值。
1.4.5小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验(体外法)实验前4天给每只小鼠腹腔注射2％压积绵羊红细胞0.2ml。用颈椎脱臼法处死小鼠，经腹腔注射给予小鼠含有5％小牛血清的Hank’s液5ml/只，轻揉腹部20次后抽取腹腔清洗液2ml，取0.5ml腹腔清洗液加入盛有hank’s液配制成1％鸡RBC悬液0.5ml的试管内，混匀，取混悬液0.5ml涂片，放入垫有湿纱布的瓷盘内，置37℃温箱内25min，取出后用生理盐水从玻片背面冲洗，固定、染色、阅片，计算吞噬率和吞噬指数。
1.4.6小鼠碳廓清试验 小鼠尾静脉注射1∶4稀释的印度墨汁，按每10g体重0.1ml计算，待墨汁注入，立即计时。墨汁注入后2分钟、10分钟分别从内眦静脉丛取血20μl，并立即将其加到2ml 0.1％碳酸钠溶液中。用生化分析仪在600nm波长处测定光密度(OD)，以碳酸钠溶液作空白对照。将小鼠处死，取肝脏和脾脏，用滤纸吸干脏器表面血污，称重，计算吞噬指数a；
K＝(1g OD1-1g OD2)/(t2-t1)a＝体重÷(肝重+脾重)×K1/3
1.4.7 NK细胞活性测定 无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的小平皿中，用4层纱布将脾磨碎，制成单细胞悬液，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)，最后用RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为2×107个/ml，取靶细胞和效应细胞各100μl(效靶比50∶1)，加入U型96孔培养板：靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl：上述各项均设三个复孔，于37℃、5％CO2培养箱中培养4h，然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100μl置平底96孔培养板，同时加入LDH基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/L的HCl 30μl，在酶标仪490nm处测定光密度值(OD)。
1.4.8 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法)，无菌取脾，置于盛有适量无菌hank’s液的小平皿中，用4层纱布将脾磨碎，制成细胞悬液。用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000rpm)。然后将细胞悬浮于2mL加10％小牛血清的1640完全培养液中，计数活细胞数，调整细胞浓度为3×106个/ml，再将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，在其中一孔加75μlConA液(相当于7.5μg/ml)，另一孔作为对照，置5％CO2，37℃CO2培养箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7ml，加入0.7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/mL)50μl/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。用生化分析仪以570nm处测光密度值。淋巴细胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值减去减去不加ConA孔的光密度值表示。
1.5实验数据用SPSS软件进行分析。
2结果
本发明组合物对试验动物体重的影响
表1 各组小鼠的初始体重
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 免疫一批体重(g) | 免疫二批体重(g) | 免疫三批体重(g) |
| 溶剂对照组 | 12 | 19.4±1.4 | 18.8±0.9 | 18.7±0.7 |
| 185 | 12 | 19.3±1.2 | 19.0±1.1 | 18.6±0.5 |
| 370 | 12 | 19.2±1.2 | 18.6±1.0 | 18.7±1.2 |
| 1110 | 12 | 19.2±1.2 | 19.1±1.2 | 18.7±0.8 |
| P值 | 0.935 | 0.807 | 0.993 |
表2各组小鼠的中期体重
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 免疫一批体重(g) | 免疫二批体重(g) | 免疫三批体重(g) |
| 溶剂对照组 | 12 | 20.7±1.3 | 19.8±0.8 | 20.1±0.9 |
| 185 | 12 | 19.9±1.3 | 19.5±1.2 | 19.3±0.4 |
| 370 | 12 | 19.7±1.1 | 19.6±1.2 | 19.6±1.3 |
| 1110 | 12 | 20.5±1.4 | 20.6±1.1 | 20.2±1.2 |
| P值 | 0.153 | 0.189 | 0.185 |
表3各组小鼠的末期体重
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 免疫一批体重(g) | 免疫二批体重(g) | 免疫三批体重(g) |
| 溶剂对照组 | 12 | 21.1±1.0 | 20.5±0.8 | 20.9±0.9 |
| 185 | 12 | 20.6±1.1 | 20.4±1.2 | 20.0±0.5 |
| 370 | 12 | 20.4±1.0 | 20.3±1.4 | 20.1±1.1 |
| 1110 | 12 | 20.9±1.2 | 20.8±1.2 | 20.6±1.4 |
| P值 | 0.182 | 0.835 | 0.149 |
由表1、2、3可见，各剂量组小鼠的初始体重、中期体重及末期体重与溶剂对照组比较差异均无显著意义(P＞0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠体重无明显影响。
2.2本发明组合物对脏器/体重比值的影响
表4本发明组合物对脏器/体重比值的影响
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 脾脏/体重(mg/g) | 胸腺/体重(mg/g) |
| 溶剂对照组 | 12 | 5.70±0.72 | 2.38±0.55 |
| 185 | 12 | 5.56±0.53 | 2.24±0.42 |
| 370 | 12 | 5.23±0.51 | 2.20±0.32 |
| 1110 | 12 | 5.25±0.40 | 2.07±0.39 |
| P值 | 0.111 | 0.177 |
由表4可见，各剂量组小鼠的脏器/体重比值与溶剂对照组比较差异均无显著意义(P＞0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠脏器/体重比值无明显作用。
2.3发明组合物对小鼠碳廓清试验的影响
表5 本发明组合物对小鼠碳廓清能力(吞噬指数a)的作用
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 吞噬指数a | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 3.75±0.85 | |
| 185 | 12 | 3.97±0.87 | 0.821 |
| 370 | 12 | 3.77±0.68 | 1.000 |
| 1110 | 12 | 3.88±0.63 | 0.954 |
由表5可见，各剂量组小鼠碳廓清能力(吞噬指数a)与对照组比较差异无显著意义(P＞0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠的碳廓清能力无增强作用，该项实验结果为阴性。
2.4本发明组合物对绵羊红细胞(SRBC)诱导小鼠DTH的影响
表6本发明组合物对绵羊红细胞诱导小鼠DTH的作用
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 24h足跖肿胀度(mm) | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 0.59±0.17 | |
| 185 | 12 | 0.68±0.45 | 0.989 |
| 370 | 12 | 1.26±0.47 | 0.002 |
| 1110 | 12 | 1.12±0.52 | 0.031 |
由表6可见，370mg/kg组、1110mg/kg组小鼠的足跖肿胀度与对照组比较差异有显著意义(P＜0.05)提示本试验条件下本发明组合物对小鼠的迟发型变态反应能力有显著的增强作用，该项实验结果为阳性。
2.5本发明组合物对抗体生成细胞数的影响
表7本发明组合物对抗体生成细胞数的影响
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 溶血空斑数(个/全脾) | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 82.8±15.9 | |
| 185 | 12 | 105.7±22.2 | 0.048 |
| 370 | 12 | 137.9±35.6 | 0.001 |
| 1110 | 12 | 146.0±14.3 | 0.000 |
由表7可见，185mg/kg组、370mg/kg组、1110mg/kg组溶血空斑数(个/全脾)均高于溶剂对照组，差异具有显著意义(P＜0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠抗体生成细胞的生成有促进作用，该项实验结果为阳性。
2.6本发明组合物对小鼠半数溶血值(HC50)的作用
表8本发明组合物对小鼠半数溶血值(半数溶血值HC50)的作用
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | HC50 | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 148.4±58.5 | |
| 185 | 12 | 175.2±51.4 | 0.207 |
| 370 | 12 | 186.0±29.0 | 0.080 |
| 1110 | 12 | 193.0±60.5 | 0.039 |
由表8可见，1110mg/kg组小鼠的HC与对照组比较差异有显著意义(P＜0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠半数溶血值有明显作用，该项实验结果为阳性。
2.7本发明组合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响
表9本发明组合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验的影响
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | 吞噬率(％) | P值 | 吞噬指数 | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 30.3±7.0 | 0.47±0.15 | ||
| 185 | 12 | 39.1±15.8 | 0.033 | 0.68±0.37 | 0.030 |
| 370 | 12 | 43.3±7.8 | 0.003 | 0.68±0.18 | 0.017 |
| 1110 | 12 | 47.4±6.4 | 0.000 | 0.80±0.20 | 0.000 |
由表9可见，185mg/kg组、370mg/kg组、1110mg/kg组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力(吞噬率和吞噬指数)高于溶剂对照组，差异具有显著意义(吞噬率P＜0.05，吞噬指数P＜0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力有明显的升高的作用，该项实验结果为阳性。
表10本发明组合物对小鼠NK细胞活性的影响
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | NK细胞活性％ | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 176.5±41.6 | |
| 185 | 12 | 179.8±37.0 | 0.878 |
| 370 | 12 | 165.6±66.9 | 0.614 |
| 1110 | 12 | 146.4±58.1 | 0.166 |
由表10可见，各剂量组的小鼠NK细胞活性与溶剂对照组比较差异无显著意义(P＞0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对NK细胞活性无提高作用。该项实验结果为阴性。
2.9 ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验
表11本发明组合物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验的影响
| 组别(mg/kg) | 动物数(只) | NK细胞活性％ | P值 |
| 溶剂对照组 | 12 | 0.12±0.07 | |
| 185 | 12 | 0.13±0.06 | 0.694 |
| 370 | 12 | 0.19±0.05 | 0.008 |
| 1110 | 12 | 0.18±0.06 | 0.031 |
由表11可见，370mg/kg组、1110mg/kgConA诱导的小鼠淋巴细胞转化活性高于溶剂对照组，差异有显著意义(P＜0.05)，提示本试验条件下本发明组合物对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化有明显的增强作用，该项试验结果为阳性。
3、小结
本试验条件下，经口连续给予小鼠不同剂量的本发明组合物30天，本发明组合物对小鼠的体重、脏/体比值(脾脏/体重与胸腺/体重)、碳廓清能力、NK细胞活性无明显影响。本发明组合物对+诱导的小鼠淋巴细胞转化、迟发型变态反应(足跖增厚法)、抗体生成细胞数、HC50、巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力有显著作用，提示本发明组合物对小鼠的细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能有促进作用，即具有免疫调节作用。
二、本发明组合物调节血脂作用实验
1材料与方法
1.1样品 本发明组合物，褐色片剂，瓶装，0.55g/片。人体推荐量为2片/次，2次/天，即每人每天2.2g，按60kg体重计为0.037g/天/kg。样品用蒸馏水配制成所需浓度。
1.2动物 SD雄性白鼠，72只，体重150-200g，河南省实验动物中心，合格证号：医动字第410104号，清洁级。
1.3高脂饲料 78.95％基础饲料、1％胆固醇、10％蛋黄粉、10％猪油、0.05％牛胆盐，其中基础饲料购于河南省实验动物中心合格证号：医动字第410105号。
1.4试剂和仪器TC、TG、HDL-C试剂盒均由上海科华-东菱诊断用品有限公司提供。测试仪器为美国生产的SPACE全自动化分析仪。
1.5剂量设计 设低、中、高三个试剂组分别为推荐量的5、15、30倍，即0.18g/kg、0.55g/kg、1.10g/kg，另设一个高脂饲料对照组和一个基础饲料对照组。经口给予受试物，灌胃量1ml/100g。
1.6试验方法 基础饲料喂养大鼠5天后，空腹过夜取尾血，测血清胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)，根据TC水平随机分为5组，三个剂量组、一个高脂饲料对照组和一个基础饲料对照组。试验期内三个剂量组给予高脂饲料和不同剂量的受试物，高脂饲料对照组给予高脂饲料和蒸馏水，基础饲料对照组给予基础饲料和蒸馏水。于试验的第28天称重，取尾血，测血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇三项指标。
1.7结果处理SPSS软件方差分析
2、结果
2.1本发明组合物对动物体重的影响
表12本发明组合物对动物体重的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | 体重(g) | 增重(g) | ||
| 初重 | 中期重 | 末重 | ||||
| 受试物组 | 0.18 | 14 | 165.6±10.1 | 249.9±21.6 | 336.1±22.0 | 170.4±19.3 |
| 0.55 | 15 | 159.7±8.5 | 250.0±18.5 | 334.8±29.1 | 175.1±26.2 | |
| 1.10 | 15 | 167.7±7.6 | 257.6±21.3 | 348.6±23.0 | 180.9±20.0 | |
| 高脂饲料对照组 | 14 | 168.5±10.4 | 272.8±20.8 | 351.4±33.1 | 182.9±31.1 | |
| 基础饲料对照组 | 14 | 163.1±8.7 | 241.7±40.3 | 323.4±49.5 | 160.4±45.8 | |
注：各剂量组与高脂饲料对照组比较，P＞0.05
由表12可见，各剂量组动物的初重、中期重、末重和增重与高脂对照组比较差异无显著意义(P＞0.05)，说明在本试验条件下本发明组合物对动物的体重无明显影响。
2.2本发明组合物对动物血脂TC的影响
表13本发明组合物对动物血脂TC的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | TC(mmol/L)试验前 | TC(mmol/L)试验后 |
| 受试物组 | 0.18 | 14 | 2.22±0.33 | 3.50±0.41 |
| 0.55 | 15 | 2.28±0.42 | 2.93±0.50** | |
| 1.10 | 15 | 2.29±0.45 | 2.93±0.75** | |
| 高脂饲料对照组 | 14 | 2.21±0.34 | 3.60±0.80 | |
| 基础饲料对照组 | 14 | 2.20±0.33 | 2.06±0.26** |
注：各组与高脂饲料对照组比较**P＜0.01
表14本发明组合物对大鼠血清TG的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 动物数(只) | TG(mmol/L)试验前 | TG(mmol/L)试验后 |
| 受试物组 | 0.18 | 14 | 0.65±0.20 | 1.98±0.79 |
| 0.55 | 15 | 0.71±0.31 | 2.10±1.14 | |
| 1.10 | 15 | 0.69±0.18 | 2.80±0.41* | |
| 高脂饲料对照组 | 14 | 0.74±0.17 | 3.60±0.80 | |
| 基础饲料对照组 | 14 | 0.73±0.27 | 1.14±0.31* |
注：各组与高脂饲料对照组比较*P＜0.01，**P＜0.01
表15本发明组合物对大鼠血清HDL-C影响
| 组别 | 剂 量(g/kg) | 动物数(只) | HDL-C(mmol/L)试验前 | HDL-C(mmol/L)试验后 |
| 受试物组 | 0.18 | 14 | 1.04±0.20 | 1.15±0.91 |
| 0.55 | 15 | 1.12±0.24 | 1.06±0.25 | |
| 1.10 | 15 | 1.08±0.25 | 1.08±0.17 | |
| 高脂饲料对照组 | 14 | 0.99±0.21 | 1.16±0.23 | |
| 基础饲料对照组 | 14 | 1.03±0.18 | 1.02±0.14 |
注：各组与高脂饲料对照组比较P＞0.05
由表13、表14可见，高脂饲料对照组动物血清TC、TG与基础饲料对照组比较差异有显著意义(P＜0.01)，说明本次试验高脂模型建立成功。试验后受试物0.55g/kg、1.10g/kg两个剂量组血清TC与高脂饲料对照组比较差异有极显著意义(P＜0.01)；1.10g/kg剂量组血清TG与高脂饲料对照组比较差异有显著意义(P＜0.05)，说明本发明组合物对大鼠血清中的TC、TG具有降低作用。
由表15可见，试验后受试物三个剂量组大鼠血清HDL-C与高脂饲料对照组比较差别无显著意义(P＞0.05)，说明本发明组合物对大鼠血清HDL-C无明显作用。
3、结论
以不同剂量的本发明组合物给予高脂模型大鼠喂饲28天，0.55g/kg、1.10g/kg两个剂量组的组合物均能使大鼠血清中TC明显降低，1.10g/kg剂量组的本发明组合物也能使大鼠血清中TG降低，结果表明在本试验条件下，本发明组合物具有调节血脂的作用。
Claims (8)
1、一种具有净化血液、改善免疫力和调节血脂作用的组合物，包括：
菊苣提取物300-800重量份
大豆提取物25-200重量份
银杏提取物10-100重量份
维生素E 1-25重量份
维生素C 5-50重量份。
2、根据权利要求1的组合物，其中各组分的含量为：
菊苣提取物300-400重量份
大豆提取物30-100重量份
银杏提取物10-100重量份
维生素E 2.5-10重量份
维生素C 10-40重量份。
3、根据权利要求2的组合物，其中各组分的含量为：
菊苣提取物300-350
大豆提取物40-80
银杏提取物20-50
维生素E 2.5-10
维生素C 15-30。
4、根据权利要求1-3中任一项的组合物，银杏提取物中的银杏黄酮≥10％，优选≥15％，更优选≥24％；菊苣提取物中功效成分菊苣酸含量优选≥0.5％，更优选≥1％，还更优选≥10％，甚至更优选≥30％；和大豆提取物中大豆异黄酮的含量优选≥10％，更优选≥20％，更通常为20-80％。
5、根据权利要求1-3中任一项的组合物，其中菊苣提取物由以下方法获得：将菊苣用水煎煮，过滤，醇沉，萃取，溶剂回收，干燥，获得产品。
6、根据权利要求1-3中任一项的组合物，其中大豆提取物由以下方法获得：将大豆脱脂脱油，醇浸提，溶剂回收，萃取精制，溶剂回收，干燥，获得产品。
7、制备权利要求1-3中任一项的组合物的方法，包括按所述配比混合各种组分，制成软材，制粒，干燥，整粒，再压片。
8、制备权利要求1-3中任一项的组合物的方法，包括按所述配比混合各种组分，再加入水和任选的其它添加剂(如甜味剂、香味剂等)，制成口服液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA031194648A CN1530101A (zh) | 2003-03-13 | 2003-03-13 | 一种具有净化血液、改善免疫力和调节血脂作用的保健食品组合物 |
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| CNA031194648A CN1530101A (zh) | 2003-03-13 | 2003-03-13 | 一种具有净化血液、改善免疫力和调节血脂作用的保健食品组合物 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103766906A (zh) * | 2014-02-18 | 2014-05-07 | 安国市金木生物科技有限公司 | 一种用于口服的含有菊苣粉的组合物及其制备方法 |
| CN109157651A (zh) * | 2018-09-06 | 2019-01-08 | 内蒙古科技大学包头医学院 | 具有免疫调节作用的组合物 |
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2003
- 2003-03-13 CN CNA031194648A patent/CN1530101A/zh active Pending
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