CN100339090C - 新的石榴叶提取物及其医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及新的石榴叶提取物及其医药用途。更具体讲，本发明涉及石留叶的有机溶剂或有机溶剂与水混合物的提取物，其中该提取物中含有至少50重量%先鞣质或至少5.6重量%鞣花酸，本发明还涉及所述石榴叶提取物在预防和/或治疗与高血脂有关疾病或症状中的用途。
Description
发明领域
本发明涉及新的石榴叶提取物及其医药用途。更具体讲，本发明涉及石榴叶的有机溶剂或有机溶剂与水混合物的提取物，其中该提取物中含有至少50重量％的鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。本发明还涉及所述石榴叶提取物在预防和/或治疗与高血脂有关疾病或症状中的用途。
背景技术
石榴叶为石榴的叶。近年来对石榴叶的研究有广泛报道，具体讲，在《光明中医》，2000，15(2)，27-9；《资源开发与市场，1999，15(4)，208-209，及《医药与保健》，1998，(4)，50中报道石榴叶与生姜配伍内服可治疗急性胃肠炎、外用清热消肿治疗皮肤红肿溃烂、石榴叶制成保健茶有助于眼睛及胃的保健，促进新陈代谢；在《中药药理与临床》，1998，14(1)：35-36，《时珍国医国药》，1998，9(4)，327及《山东中医药大学学报》，1999，23(5)，380-1中报道石榴叶水浸剂显著提高胃蛋白酶活性，增强胆汁分泌和小肠运动，可降低血清TC，TG，升高HDL，体外实验能抑制氧自由基的产生，静脉注射能显著提高大鼠脑膜血流量。但石榴叶水浸剂在调节血脂的作用强度上达不到有效的预防和/或治疗目的。
发明目的
本发明的目的在于寻找并开发能有效预防和/或调节血脂的物质。
本发明人经研究现已发现在石榴叶中通过用有机溶剂或有机溶剂与水的混溶剂提取得到的含鞣质提取物出人意料地显示出良好的调节血脂作用。其中该石榴叶提取物含至少50重量％鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。
因此，本发明第一方面涉及石榴叶提取物，其含有至少50重量％的鞣质酸和/或至少5.6重量％鞣花酸。
本发明再一方面涉及石榴叶提取物，其特征在于：该提取物是通过用有机溶剂或有机溶剂与水的混合物提取石榴叶得到的。
本发明还涉及药物组合物，其包括石榴叶提取物及药用载体或赋形剂，其中石榴叶提取物含至少50重量％鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。
本发明还涉及用于预防和/或治疗血脂升高或与血脂升高有关疾病或症状的产品，其包括石榴叶提取物及药用载体或赋形剂，其中石榴叶提取物含至少50重量％鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。
本发明还涉及石榴叶提取物在制备用于预防和/或治疗与血脂升高有关疾病或症状的产品中用途。
本发明还涉及预防和/或治疗与血脂升高有关疾病和/或症状或有血脂升高风险的患者的方法，其包括给予需要的宿主预防和/或治疗有效量的石榴叶提取物，其中该石榴叶提取物含至少50重量％鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。
本发明进一步涉及鞣花酸在制备用于预防和/或治疗与血脂升高有关疾病或症状的产品中的用途。
本发明还涉及用于预防和/或治疗血脂升高或与血脂升高疾病或症状的产品，其包括一定量的鞣花酸和适宜的载体或赋形剂。
发明详述
本发明中所用术语“有机溶剂”是指直链或支链的低级C1-4醇如甲醇，乙醇，异丙醇，丙醇或丁醇；C1-4酯如甲酸甲酯，乙酸甲酯或乙酸乙酯；己烷；或丙酮等。
本发明中所用术语“调节血酯”是指调节与血脂有关的指标如总胆固醇(TC)，甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白的任意一项或二项或三项或所有四项。
本发明中所用术语“宿主”是指哺乳动物，如人类。
根据本发明，本发明的石榴叶提取物含有至少5.6重量％鞣花酸。
根据本发明，本发明的石榴叶提取物可如下制备：
1)将粉碎的石榴叶用有机溶剂与水的混溶剂如75％乙醇在加热或回流下提取，
2)浓缩1)中提取液至浸膏；
3)加水至浸膏中并在冷却下放置24小时；
4)将3)中放置后得到的滤液通过大孔吸附树脂，然后用水及有机溶剂与水混溶剂如95％乙醇洗脱；
5)减压蒸发(80℃)洗脱液，真空干燥得呈膏状的石榴叶提取物。
根据本发明，本发明的石榴叶提取物优选含有50-90重量％的鞣质，更优选53-70重量％鞣质。
根据本发明，本发明石榴叶提取物中鞣质含量的测定可采用中华人民共和国药典2000年版附录XB中所记载的方法测定。
根据本发明，本发明的石榴叶提取物可单独给药或以其它适宜的给药途径给药。举例讲，本发明的石榴叶提取物可通过口服或非肠道途径如皮下，肌内，静脉等给药。口服给药的剂型包括片剂，胶囊，溶液，混悬液等；非肠道给药的剂型包括：注射剂，冻干粉针剂或滴注等。
下面的实施例是对本发明的进一步详细描述，但其不意味着对本发明任何限制。
实施例1石榴叶提取物的制备
取4.3公斤石榴叶水浸一液，晾干后炒20分钟，粉碎炒后的石榴叶，然后加入12-16倍量的70％乙醇，回流提取3次，每次1小时。浓缩合并的提取液到比重为1.12-1.13(20℃)浸膏，加水至浓度为0.5克生药(指石榴叶)/ml，所得混悬液在4℃环境中放置24小时，过滤，滤液通过D101树脂柱(石榴叶的总重量与树脂的体积比为40-44mg/ml树脂)，先用水洗脱至柱体积的2倍，再用95％乙醇洗脱至柱体积的2倍，合并水洗脱液和95％乙醇洗脱液，减压浓缩，然后真空干燥得干燥的浸膏状320克石榴叶提取物。用中国药典2000年版附录XB记录的皮粉法测得所得石榴叶提取物中总鞣质含量为55％，用中国药典附录VID中记载的高效液相色谱法测得石榴叶提取物中鞣花酸含量为6.3％。
实施例2
本发明实施例1的石榴叶提取物(今后简称提取物A)在家兔模型上对血脂升高的预防
材料与方法
试验动物 雄性日本大耳白兔。体重(2.21±0.2)kg(预防作用)。(1.81±0.14)kg(调脂作用)。购自中国医学科学院阜外医院动物科。合格证号：京动管字第003号。
试剂与受试物 提取物A，0.32g/粒。用时以蒸馏水配制成所需浓度。总胆固醇(TC)，甘油三脂(TG)，高密度脂蛋白(HDL)，低密度脂蛋白(LDL)试剂盒，购自北京中生生物高技术分司。批号：20010401。家兔高脂饲料，购自中国医学科学院实验动物研究所。
测试仪器：7060型(HITACHI)全自动生化分析仪。
试验方法：
取家兔用正常饲料喂养观察3天，耳缘静脉采血，分离血清，测TC，TG。根据TC和TG均匀分为4组，每组6只。然后饲以高脂料7天，同时灌胃口服不同剂量的提取物A。于药后第7，14，21天耳缘静脉采血，分离血清，测TC，TG，HDL和LDL。并计算VLDL[＝TC-LDL]和TC/HDL。观察提取物A对血脂的影响。提取物A不同剂量分别为75mg/kg及37.5mg/kg。对照组给等体积蒸馏水。结果见表1至表6。由表1至6中数据可看到本发明提取物A对家兔的血脂升高有显著预防作用。
实施例3
本发明提取物A在家兔血脂升高模型上对血脂的影响
试验动物，试剂与受试物及测试仪器同实施例1。
实验方法：
取家兔用正常饲料喂养观察3天，分别给予高脂料7天，耳缘静脉采血，分离血清，测TC，TG。根据TC和TG均匀分为6组，每组6只(试验分两次进行，每次每组3只)。然后继续饲以高脂料，同时灌胃口服不同剂量的提取物A。于提取物A后第14天耳缘静脉采血，分离血清，测TC，TG，HDL和LDL。并计算VLDL[＝TC-LDL]和TC/HDL。观察提取物A对血脂的影响。提取物A不同剂量为75mg/kg，37.5mg/kg及18.8mg/kg。对照组给等体积蒸馏水。给予提取物A体积：2mL/kg。数据处理：所得数据由Excel软件处理，组间t检验。结果见表7和8。由表7和8中数据可看到本发明提取物A对家兔的高血脂有显著的降低作用。
结果
表1 给药后1周家兔TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 对照组提取物A | 75 | 128.41±49.5674.99±32.72* | 1.14±0.741.27±1.12 | 67.11±22.2935.17±22.29* |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
表2 给药后1周家兔HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 对照组TPM-16TPM-16 | 7537.5 | 8.13±3.8115.33±5.67*13.15±7.64 | 70.33±61.2936.88±18.2568.52±30.03 | 18.45±10.895.25±2.15*15.26±5.02 |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
表3 给药后2周家兔TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 对照组TPM-16TPM-16 | 7537.5 | 382.89±278.19106.65±44.73*212.73±150.38 | 1.47±0.780.53±0.28*0.83±0.59 | 290.26±251.2454.52±17.88*166.84±161.84 |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
表4 给药后2周家兔HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 对照组TPM-16TPM-16 | 7537.5 | 13.77±6.3618.84±10.8717.46±9.24 | 77.04±34.3538.36±33.85*45.10±21.47* | 36.73±28.726.59±3.17*14.32±12.04 |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
表5 给药后3周家兔TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 对照组TPM-16TPM-16 | 7537.5 | 470.39±312.93111.77±70.66*370.56±263.27 | 1.29±0.770.51±0.41*0.60±0.35* | 350.64±248.3860.74±44.08*204.52±142.59 |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
表6 给药后3周家兔HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 对照组TPM-16TPM-16 | 7537.5 | 16.44±8.7123.52±11.9321.61±5.62 | 106.76±63.9734.59±19.62*94.44±71.48 | 30.83±18.025.18±3.22**18.18±14.70 |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01. n＝6
表7 给提取物A后2周家兔TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 对照组提取物A提取物A提取物A | 7537.518.8 | 494.7±146.0314.21±90.09*330.08±106.67*431.45±151.7 | 1.536±1.0631.541±1.071.507±0.9891.688±1.152 | 243.63±141.15104.64±39.88*168.58±107.98135.43±55.83* |
与对照组相比，P＜0.05. n＝6
表8 给提取物A后2周家兔HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 对照组提取物A提取物A提取物A | 7537.518.8 | 46.76±23.6493.61±33.59*78.05±24.82*68.8±32.57 | 251±140.1209.6±58.82161.5±112.3296.0±115.6 | 13.13±8.763.962±2.574*4.766±2.694*8.023±4.90 |
与对照组相比，*P＜0.05. n＝6
实施例4
本发明提取物A在大鼠模型上对大鼠血脂升高的预防作用
材料与方法
实验动物。雄性Wistar大鼠，非近交系封闭群。体重(170.23±14.89)g(预防实验)，(205.19±16.09)g(调脂试验)。购自中国预防医科院微生物流行病研究所。合格证号：京动管字99(038)号。
受试物与试剂。TPM-16胶囊。来源规格及批号同前。生化试剂来源及批号生产厂家同实施例1记载。
测试仪器：HITACHI7060全自动生化分析仪。
试验方法：
取大鼠随机分为7组，每组10只。正常饲料喂养观察5天，第6天起给予高脂饲料10天，同时给不同剂量的提取物A。第10天给提取物A后1小时，眼眶静脉丛采血，分离血清，测TC，TG，HDL和LDL。并计算VLDL[＝TC-LDL]和TC/HDL。提取物A不同剂量为75mg/kg及37.5mg/kg。模型对照组给等体积蒸馏水。正常对照组给普通饲料，并给等体积蒸馏水。结果见表9和表10，由表9和表10中数据可看到本发明提取物A对大鼠血脂升高有明显预防作用。
实施例5
本发明提取物A在大鼠高血脂模型上对大鼠高血脂的影响
试验动物、试剂与受试物及测试仪器用实施例4。
试验方法：
取大鼠共70只，随机分为7组，每组10只。给高脂料2周，第15天眼眶静脉丛采血，分离血清，测TC，TG。根据TC和TG做组间均匀调整。同时给不同剂量的提取物A。分别于给药后第7天和第14天眼眶静脉丛采血，分离血清，测TC，TG，HDL和LDL。并计算VLDL[＝TC-LDL]和TC/HDL。提取物A剂量为150mg/kg及75mg/kg。模型对照组给等体积蒸馏水。正常对照组给普通饲料，并给等体积蒸馏水。给药体积：1mL/kg。给药途径：口服灌胃。数据处理：所得数据由Excel软件处理，组间t检验。结果见表11-14。由表11-14中数据可见本发明提取物A为对大鼠的高血脂有明显控制作用。
表9 给提取物A后第10天大鼠TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 正常组 9模型组 10提取物A10提取物A10 | 7537.5 | 107.27±17.91**211.51±40.86168.33±22.35**179.14±27.37* | 0.909±0.2570.713±0.1700.595±0.191*0.928±0.154 | 20.48±14.94*63.24±18.9248.19±16.55*49.31±16.83* |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01.
表10给药后第10天大鼠HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 正常组 9对照组 10提取物A10提取物A10 | 7537.5 | 50.69±16.1638.95±6.8244.15±9.2247.23±10.63 | 86.69±10.93**145.12±50.69113.9±17.65*131.82±15.65 | 2.778±0.364**4.664±1.0933.555±0.818*3.725±0.620* |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01.
表11 给药后1周大鼠TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 模型组TPM-16TPM-16正常组 | 15075 | 179.83±32.85171.55±18.51150.94±9.78*124.64±6.28** | 1.14±0.5911.217±0.6600.791±0.2820.705±0.458 | 87.53±32.1684.52±21.5991.38±26.3541.29±20.54** |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01. n＝10
表12 给药后1周大鼠HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 对照组TPM-16TPM-16正常组 | 15075 | 78.91±56.6261.97±28.3979.21±25.24*61.13±9.01 | 92.3±32.9787.03±31.7159.56±25.7883.34±22.53 | 3.405±1.0693.290±1.4082.179±1.018*2.085±0.367** |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01. n＝10
表13 给药后2周大鼠TC，TG，LDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | TCmg/dL | TGmmoL/L | LDLmg/dL |
| 模型组TPM-16TPM-16正常组 | 15075 | 177.64±23.26155.72±20.61*156.66±20.61*122.26±10.31** | 2.339±0.9181.337±0.857*1.063±0.482*1.262±0.602* | 64.17±12.5686.08±34.74*92.15±20.05**60.53±13.35 |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01. n＝10
表14 给药后2周大鼠HDL，VLDL，TC/HDL变化(x±s)
| 药物 | 剂量mg/kg | HDLmg/dL | VLDLmg/dL | TC/HDL |
| 模型组TPM-16TPM-16正常组 | 15075 | 43.29±12.4851.11±21.9950.07±11.9352.45±17.31 | 113.47±23.2569.64±42.47*64.50±14.37**61.73±9.02** | 4.475±1.7523.139±0.758*3.285±0.8712.611±1.016** |
与对照组相比，*P＜0.05，**P＜0.01. n＝10
Claims (11)
1.石榴叶提取物，其含有至少50重量％的鞣质和/或至少5.6重量％鞣花酸。
2.权利要求1的石榴叶提取物，其中石榴叶提取物是由有机溶剂或有机溶剂与水混合物提取得到的，其含有至少50重量％鞣质。
3.权利要求1或2的提取物，其中所述石榴叶提取物含50-90重量％鞣质。
4.权利要求3的提取物，其中所述石榴叶提取物含53-70重量％鞣质。
5.权利要求1的提取物，其中所述石榴叶提取物含至少5.6重量％鞣花酸。
6.权利要求3的提取物，其中所述石榴叶提取物含至少5.6重量％鞣花酸。
7.权利要求4的提取物，其中所述石榴叶提取物含至少5.6重量％鞣花酸。
8.权利要求2的提取物，其中所述有机溶剂选自直链或支链的低级C1-C4醇、C1-4酯，己烷或丙酮。
9.权利要求8的提取物，其中C1-C4醇为乙醇。
10.药物组合物，其包括权利要求1-9任一项所要求的石榴叶提取物及药用载体。
11.权利要求1-9任一项要求的石榴叶提取物在制备用于预防和/或降低哺乳动物血脂升高的产品中用途。
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Legal Events
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Owner name: ZAOZHUANG CITY QINZEYUAN BIOLOGY TECHNOLOGY CO., Free format text: FORMER OWNER: YANGSHENGTANG CO., LTD Effective date: 20070608 |
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| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20070608 Address after: Wang Zhuang Industrial Park Shandong city of Zaozhuang Province Liu Yuan Zhen 277300 Yicheng District (Shandong Fengyuan Tongda Power Company Limited hospital) Applicant after: Yangshengtang Co., Ltd. Address before: 570216 Hainan Province, Haikou City Jinniu Gold Industrial Zone Road No. 6 Applicant before: Yangshengtang Co., Ltd |
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Granted publication date: 20070926 |
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