CN1318402C - 用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷－2－羧酸酰肼衍生物 - Google Patents

用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷－2－羧酸酰肼衍生物 Download PDF

Info

Publication number
CN1318402C
CN1318402C CNB018130488A CN01813048A CN1318402C CN 1318402 C CN1318402 C CN 1318402C CN B018130488 A CNB018130488 A CN B018130488A CN 01813048 A CN01813048 A CN 01813048A CN 1318402 C CN1318402 C CN 1318402C
Authority
CN
China
Prior art keywords
tetramethyleneimine
alkylsulfonyl
carboxylic acid
methyl
hydrazides
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB018130488A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1443163A (zh
Inventor
约翰内斯·埃比
亨丽埃塔·德姆洛
埃里克·阿尔吉里斯·基塔斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F Hoffmann La Roche AG filed Critical F Hoffmann La Roche AG
Publication of CN1443163A publication Critical patent/CN1443163A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1318402C publication Critical patent/CN1318402C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/48—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及化学式(I)的化合物及其药用的酯和/或盐，化学式(I)中R1、R2、R3、R4、R5和X的定义如说明书和权利要求书。这些化合物用作金属蛋白酶的抑制剂，金属蛋白酶如锌蛋白酶特别是锌水解酶，可有效地治疗与越来越多出现的血管收缩相关联的疾病状态。

Description

用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷-2-羧酸酰肼衍生物
本发明的目标化合物是有用的金属蛋白酶，如锌蛋白酶特别是锌水解酶抑制剂，这类化合物可有效地预防和治疗一些与越来越多出现的血管收缩相关联的疾病状态。这科疾病的例子有高血压、冠状动脉疾病、心脏功能不足、肾脏和心肌局部缺血、肾脏功能不足、透析、大脑局部缺血、心脏梗塞、偏头痛、蛛网膜下腔出血、雷诺氏综合症和肺部高压。此外这类化合物是用于抑制移植物排斥、器官保护和治疗眼科疾病的有用的抑制细胞生长剂和大脑保护剂。
内皮素是存在三种异构体的肽，这三种异构体是ET-1，ET-2和ET-3，它们各自被三种各截然不同的基因编码。它们最初是1988年由Yanagisawa在猪内皮细胞的条件培养基中发现的(Yanagisawa M；Kurihara H；Kimura S；Tomobe Y；Kobayashi M；Mitsui Y；YazakiY；Goto K； Masaki T：血管内皮细胞产生的一种新的强烈的血管收缩肽[参阅注解]，NARURE(1988年3月31日)，332(6163)卷，411～5页)。这些活性的ET是带有两个分子内二硫桥键的21个氨基酸的肽。它们是由203～212氨基酸的前原蛋白质产生的，此前原蛋白质被具有弗林蛋白酶特征的肽链内切酶处理成生物惰性的大-内皮素(大-ET)。这些大-ET在氨基酸21和22之间水解断裂而被特殊地处理为成熟的各种ET，氨基酸21和22分别是色氨酸21-缬氨酸22(大-ET-1、大ET-2)和在大-ET-3中为色氨酸21-异亮氨酸22。早在1988年就假定是一种特殊的金属蛋白酶造成这种特殊的断裂。在1994年从牛肾上腺纯化并克隆了ECE-1(内皮素转变酶-1)(Xu D、Emoto N、Giaid A、Slaughter C、Kaw S、de Witt D、Yanagisawa M：“ECE-1：一种促进大-内皮素-1的蛋白水解活性的膜-结合金属蛋白酶”，Cell(1994年)78期473～485页)。
ECE-1是膜结合的II型锌-肽链内切酶，具有最佳中性pH值及锌结合的不固定HExxHx(＞20)E。它属于亚族M13，具有包括活性部位的大的681氨基酸胞外结构域。M13族的其它成员有NEP24.11(中性肽链内切酶)、PEX、一种磷酸盐调节的中性肽链内切酶、及凯尔血型蛋白，此蛋白最近被描述为大-ET3加工酶。人类血统的M13族成员的特征是高的分子量(＞80kDa)、保存许多二硫桥键和复杂的糖基化模式。最近解决了NEP的结构。(Oefner等：J.Mol.Biol.2000年，296卷，341-349页)。ECE的催化区域结构和有关人类M13蛋白酶明显地比基体金属蛋白酶(MMP)的成员大(＞650个氨基酸)。MMP族属于metzincins，显示典型的HExxHxxGxxH模式，与MMP族不同，M13族成员是包括HExxHx(＞20)E模式的gluzincins。这两个族在催化区域结构的大小、结构和配体的锌配位模式方面无疑是不同的。两个族的活性部位显示了明显的差异，这种差异对抑制剂的类型和潜在的选择性有明显的影响。
因此，本发明的一个方面是提供了用于选择性抑制ECE-1的化合物，尤其是化学式(I)的化合物，及其药用的酯和/或药用盐：
Figure C0181304800081
其中：
R1是氢、烷基羰基，或芳基羰基；
R2是烷基、烷基环烷基、烷基环烷基烷基、环烷基、卤代烷基、羧烷基、氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基烷基、烷氧羰基烷基、链炔基、芳基、芳烷基、芳烷基(烷氧羰基)烷基、芳基羰基烷基、芳氧基烷基、芳基链烯基、芳基(烷氧羰基)烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环基或杂环基烷基；
R3是氢、芳基、烷基或芳烷基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基；
R4是氢、芳烷基、烷基、芳基、环烷基、环烷基烷基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳基磺酰基、羧烷基、羧烷基磺酰基、或烷氧羰基烷基；或基团-NR3R4或R5-[N-N(R4)]-R3形成饱和或不饱和5-或6-元脂肪族环；
R5是氢、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷氧羰基、芳氧基羰基、杂芳氧基羰基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、杂芳基烷基羰基、杂环基、(单-或二烷基氨基)-烷基羰基、(单-和二烷基)氨基磺酰基、芳氨基羰基、烷基、烷基羰基、烷氧羰基、芳基、芳烷基、芳基烷氧羰基或杂芳基；
R6是氢、烷基、芳基或羧烷基；
X是-S(O)2-、-S(O)2-NH-、-C(O)-，-C(O)NR6或C(O)-O-。
这里所使用的术语“烷基”，单独地或结合的，是指含有最多7个、优选最多4个碳原子的直-链或支-链烷基，例如甲基、乙基、正丙基、2-甲基丙基(异-丁基)、1-甲基乙基(异-丙基)、正丁基和1,1-二甲基乙基(叔丁基)。
术语“羧基”指基团-C(O)OH。
术语“氨基甲酰基”指基团-C(O)NH2。
术语“羰基”指基团-C(O)-。
术语“卤素”指氟、溴、氯和碘，优选氟和/或氯，最优选氟。
术语“磺酰基”指基团-S(O2)-。
术语“链烯基”指定义与烷基相同的烃链中含有至少一个烯属双键(包括例如乙烯基、烯丙基及丁烯基)
术语“链炔基”指定义与烷基相同的烃链中含有至少一个烯属三键(包括例如丙炔基，丁炔-(1)-基等)。
术语“烷氧基”，单独的或结合的，是指烷基醚基团，其中术语‘烷基’具有上述含义，如甲氧基、乙氧基，正丙氧基，异丙氧基，正丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。
术语“烷氧羰基”指化学式为-C(O)Rc的基团，其中Rc是上文定义的烷氧基。
术语“羟基”指基团-OH；术语“氰基”指基团-CN。
术语“羟烷基”是指被羟基取代的上文定义的烷基。
术语“硫代烷基”指被-SH基团取代的上文定义的烷基。
术语“卤代烷基”指被一至三个卤素原子，优选氟取代的上文定义的烷基，例如三氟甲基、2，2，2-三氟乙基等。
“羧烷基”是指被HOOC-基团取代的上文定义的低级-烷基。
术语“烷基羰基”，单独的或结合的，是指从链烷羧酸衍生的酰基，即烷基-C(O)-，如乙酰基、丙酰基、丁酰基、戊酰基、4-甲基戊酰基等。
术语“环烷基”，单独的或结合的，表示有3～8个、优选3～6个碳原子的饱和环烃基团，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。
术语“氨基”指基团-NH2。
术语R2的“芳基”，单独的或结合的，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，例如苯基、萘基或四氢萘基，优选苯基或萘基，及最优选苯基。此芳基部分可任选地被一个或多个，优选1～5个、更优选1～3个基团取代。这些基团独立地选自卤素，优选氟；烷氧羰基，例如甲基羰基；羧基；氰基；烷基；烷氧基；苯基；苯氧基；三氟甲基；三氟甲氧基。更优选氟、烷氧羰基、烷基、三氟甲基和三氟甲氧基，及最优选氟。最优选的芳香族基团是被一个或多个氟原子取代的萘基或苯基，例如萘基、2，3，4，5，6-五氟苯基或联苯基。
术语R3和R6的“芳基”，单独的或结合的，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，例如苯基、萘基或四氢萘基，优选苯基或萘基，及最优选苯基。此芳基部分任选被一个或多个，优选1～5个、更优选1～3个基团取代。这些基团独立地选自卤素，优选氟；烷氧羰基，例如甲基羰基；羧基；氰基；烷基；烷氧基；苯基；苯氧基；三氟甲基；三氟甲氧基；羟基；烷基酰氨基例如乙酰氨基；硝基；烷基磺酰基，例如甲基磺酰基。更优选烷基或烷氧基。
术语R4的“芳基”，单独的或结合的，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，例如苯基、萘基或四氢萘基，优选苯基或萘基，及最优选苯基。此芳基部分任选被一个或多个，优选地1-3个基团取代。这些基团独立地选自卤素，优选氟；烷氧羰基，例如甲基羰基；羧基；氰基；烷基；烷氧基；苯基；苯氧基；三氟甲基；三氟甲氧基；环己基；羟基；烷基酰氨基，例如乙酰氨基；硝基；烷基磺酰基，例如甲基磺酰基。更优选氟、氯、溴、烷氧基、羧基、烷氧羰基，及最优选氟。芳香族基团的实例是苯基、2,4,5-三氟苯基和2,4-二氟苯基。
术语R5的“芳基”，单独的或结合的，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，例如苯基、萘基或四氢萘基，优选苯基或萘基，及最优选苯基。此芳基部分任选被一个或多个、优选1～5个、更优选1-3个基团取代。这些基团独立地选自卤素、优选氟；烷氧羰基，例如甲基羰基；羧基；氰基；烷基；烷氧基；苯基；苯氧基；三氟甲基；三氟甲氧基。更优选烷基或烷氧基，例如甲基或甲氧基。这些芳基基团的实例有4-甲基-苯基和4-甲氧基-苯基。
术语“芳氧基”指上文定义的芳基通过氧连接到母体结构上，即芳基-O-。
术语R4的“杂芳基”，单独的或结合的，指一价单-或二环芳香族基团，它具有5～10个、优选具有5～6个环原子，并含有一个到三个杂原子、优选含有一个杂原子，杂原子如独立地选自氮、氧或硫。杂芳基的实例有噻吩基、异噁唑基、噻唑基、吡啶基、吡咯基、咪唑基、四唑基，优选吡啶基、异噁唑基和噻唑基。任选地，杂芳基可独立地被单-、双-或三-取代，取代基为苯基、烷基、烷基羰基、烷氧羰基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基、烷氧羰基烷基，优选烷基。
术语R3或R5的“杂芳基”，单独的或结合的，指一价单-或二环芳香族基团，它具有5～10个、优选具有5～6个环原子，并含有一个到三个杂原子、优选含有一个杂原子，杂原子如独立地选自氮、氧或硫。杂芳基的实例有吡啶基、噻吩基、异噁唑基、异喹啉基、喹啉基、吲哚基、嘧啶、哒嗪和吡嗪，优选噻吩基、呋喃基、吡咯烷基、吲哚基和异噁唑基。这些杂芳基基团可任选独立地被单-、二-或三-取代，取代基是苯基、烷基、烷基羰基、烷氧羰基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羧基，氧，烷氧羰基烷基，优选烷基。
术语“杂环基”，单独的或结合的，指非-芳香族单-或二环的一价基团，它具有5～10个、优选5～6个环原子，并含有一个到三个杂原子、优选含有一个杂原子，杂原子如独立地选自氮、氧或硫。这些杂环可任选被取代，取代基独立地选自卤素、烷基、烷氧基、氧代羧基、烷氧羰基等；和/或在仲氮原子(即-NH-)上被烷基、芳基烷氧羰基、烷基羰基取代；或在叔氮原子(即＝N-)上被氧化。杂环基团的实例是吗啉基、吡咯烷基、哌啶基等。
术语“二聚体形式”是指化合物中两个同样的化学式I化合物的两个R1基团被普通单键替代；或其中R1是谷胱甘肽-S-、或半胱氨酸-S-或酯、和/或它们的烷基羰基或芳基羰基衍生物，如乙酰基半胱氨酸-S-或苯甲酰半胱氨酸-S-，优选谷胱甘肽-S-、半胱氨酸-S-、乙酰基半胱氨酸-S-或苯甲酰半胱氨酸-S-。
术语“药用盐”指保留游离碱或游离酸的生物有效性和性质的那些盐，这些游离碱或游离酸是生物或其他方面合乎需要的。这些盐由无机酸和有机酸形成，无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；有机酸如乙酸、丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。此外这些盐可通过在游离酸中加入无机碱或有机碱来制备。无机碱衍生的盐包括，但不限于，钠、钾、锂、铵、钙、镁盐等。有机碱衍生的盐包括，但不限于，伯、仲和叔胺、取代胺包括自然存在的取代胺、环状胺和碱性离子交换树脂的盐，如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶、哌啶、聚乙烯亚胺树脂等的盐。
“药用的酯”是指通式(I)的化合物可在官能团处衍生，所提供的衍生物能够在体内转化回到母体化合物。这种化合物的实例包括生理上可接受的及代谢中易变的酯类衍生物，如甲氧基甲基酯，甲硫基甲基酯和新戊酰氧基甲基酯。此外，与代谢中易变的酯类似，能够在体内产生通式(I)的母体化合物的任何生理上可接受的通式(I)化合物的等价物都包括在本发明范围内。
化学式(I)的化合物可用于抑制哺乳动物的金属蛋白酶活性，特别是锌水解酶的活性。更明确地，化学式(I)的化合物是有用的治疗和预防一些失调的药物，这些失调与内皮素-转变酶(ECE)活性引起的疾病相关联。对这种酶的抑制将有用于治疗心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病、高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病，及用于创伤治疗及控制月经、青光眼。此外该化合物是有用的抑制细胞生长剂和大脑保护剂，用于抑制移植物排斥、器官保护及治疗眼科疾病。
更详细地，本发明涉及下列化学式(I)的化合物，及其二聚体形式，和/或它们的药用酯和/或药用盐，优选它们的药用酯和/或药用盐，及最优选它们的药用盐：
Figure C0181304800131
其中：
R1是氢、烷基羰基或芳基羰基；
R2是烷基、烷基环烷基、烷基环烷基烷基、环烷基、卤代烷基、羧烷基、氨基烷基、二烷基氨基烷基、烷氧基烷基、烷氧羰基烷基、链炔基、芳基、芳烷基、芳烷基(烷氧羰基)烷基、芳羰基烷基、芳氧基烷基、芳基链烯基、芳基(烷氧羰基)烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环基或杂环基烷基；
R3是氢、芳基、烷基、或芳烷基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基；
R4是氢、芳烷基、烷基、芳基、环烷基、环烷基烷基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳基磺酰基、羧烷基、羧烷基磺酰基、或烷氧羰基烷基；或基团-NR3R4或R5-[N-N(R4)]-R3形成饱和或不饱和的5-或6-元脂肪族环；
R5是氢、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷氧羰基、芳氧基羰基、杂芳氧基羰基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、杂芳基烷基羰基、杂环基、(单-或二烷基氨基)-烷基羰基、(单-和二烷基)氨基磺酰基、芳基氨基羰基、烷基，烷基羰基，烷氧羰基，芳基，芳烷基，芳基烷氧羰基或杂芳基；
R6是氢、烷基、芳基或羧烷基；
X是-S(O)2-、-S(O)2-NH-、-C(O)-、-C(O)NR6或C(O)-O-。
在一个优选的实施方案中，本发明涉及其中R1是氢的化合物。
在本发明另一个优选的实施方案中，R2是烷基、卤代烷基、烷基氨基、烷氧基、环烷基、环烷基氨基、芳基、芳烷基、芳氧基、芳烷基氨基、芳基烷氧基、杂芳基、氨基或(单-和二烷基)氨基；更优选烷基、卤代烷基、烷基氨基、烷氧基、环烷基、环烷基氨基、芳基、芳烷基或杂芳基；更更优选芳基或杂芳基；及最优选芳基。在R2的定义中，术语芳基尤其表示萘基或苯基，其中苯基任选被一个或多个氟取代或被一个苯基取代，例如R2是萘基、2，3，4，5，6-五氟苯基或联苯基。
根据本发明，R3优选为氢或烷基，最优选氢。
在上述化合物中R4优选氢、芳烷基、烷基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、环烷基烷基或羧烷基，更优选氢、烷基、芳烷基、环烷基、芳基磺酰基或羧烷基，最优选氢、烷基、环烷基、羧烷基或芳烷基，甚至更优选氢、烷基或芳烷基，例如氢、2，4，5-三氟苄基、2，4-二氟苄基、苄基、甲基、乙基、异丙基、异丁基、苄基或HO2C-CH2-、或环烷基丙基甲基。
在本发明优选的实施方案中R5是氢、烷基羰基、烷氧羰基、烷基磺酰基、芳基、芳烷基、芳基羰基、(单-和二烷基氨基)烷基羰基、(单-和二烷基)氨基磺酰基、芳基烷氧羰基、芳基氨基羰基、芳基磺酰基、杂芳基羰基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基、芳基氨基羰基、杂芳基或杂环基，更优选芳基、芳烷基、芳基羰基、芳基烷氧基、芳基氨基羰基、芳基磺酰基、杂芳基羰基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基、芳基氨基羰基、杂芳基或杂环基，更优选芳基磺酰基、芳烷基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基，及最优选4-甲基-苯磺酰基、苄基、4-甲氧基苯磺酰基、(1H-吲哚-3-基)乙酰基、噻吩-2-基或3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰基。
在上述化合物中X优选-SO2-、-C(O)-，及最优选-SO2-。
在本发明最优选的实施方案中的化合物是可用化学式(II)来描述的化合物及其药用酯和/或盐：
Figure C0181304800141
其中R1，R2，R3，R4，R5和X的定义同上。
在本发明进一步优选的实施方案中，R1是氢；R2是萘基或苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代，或被一个苯基取代；R3是氢或烷基；R4是氢、烷基或芳基烷基；R5是芳基磺酰基、芳烷基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基；及X是-SO2-。
本发明优选实施方案的化合物是实施例中说明的化合物。尤其本发明包括根据化学式(I)或(II)的选自下组的化合物：
a)(2S，4R)-4巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
b)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
c)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-酰肼；
d)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
e)(2S，4R)-4巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
f)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苯磺酰基-酰肼；
g)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼；
h)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-[(1H-吲哚-3-基)-乙酰基]-酰肼；
i)(2S，4R-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-噻吩-2-磺酰基-酰肼；
j)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰基)-酰肼；
k)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-环丙基甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
l)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-N’-(2，4，5-三氟-苄基)-酰肼；
m)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
n)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丙基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
o)(2S，4R)-[N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基]-乙酸；
p)(2S，4R)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
-q)(2S，4R)-4-巯基-1-(2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
r)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼；
s)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；及
t)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼。
放射免疫测定(对ECE-抑制的E，参阅下文)中这些化合物显示的IC50值为大约50nM～1μM。
本发明还涉及药物组合物，这些组合物含有上文定义的化合物和药用的赋形剂。
本发明一个进一步的实施方案涉及上文定义的化合物作为药剂制造中活性成分的用途，该药剂包含上文定义的化合物，用于预防和治疗内皮素-转化酶(ECE)的活性引起的疾病，尤其是心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病、高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病，及用于创伤治疗和控制月经、青光眼、与抑制细胞生长关联的疾病、眼科以及大脑保护性适应症和器官保护。
本发明进一步涉及上述化合物治疗或预防一些疾病的用途，这些疾病与心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病、高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病有关联，及用于创伤治疗和控制月经、青光眼、与抑制细胞生长关联的疾病、眼科以及大脑保护性适应症和器官保护。
此外本发明包括的上述化合物可用作治疗的活性物质，特别在与锌水解酶活性有关的疾病的范围，这些疾病如心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病、高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病，以及用于创伤治疗和控制月经、青光眼、与抑制细胞生长关联的疾病、眼科以及大脑保护性适应症和器官保护。
本发明还包括一种方法，用于治疗和/或预防处理心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病、高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病，及用于创伤治疗和控制月经、青光眼、与抑制细胞生长关联的疾病、眼科以及大脑保护性适应症和器官保护，此方法包括将上文定义的化合物引入到人类或动物肌体中。
本发明还涉及使用上文定义的化合物来抑制锌水解酶的活性。
本发明还涉及制备上文定义的化合物的方法，它包括化学式III的化合物
其中R1，R2和X的定义同上文，及A是HS-保护基，
a)与HNR3NR4R5反应来引入酰肼；或
b)HNR3NR4R5中R5为保护基团接着转换或引入R3和R4；可任选地接着转换R5和/或R2-X基团为不同的R5和/或R2-X基团、和/或脱保护基和/或者释放硫醇，及其中R3、R4和R5的定义同上。
本发明还涉及任何时候根据上述方法制造的上述化合物。
化学式(I)的化合物可根据本领域已知的方法或下述方法来制备。
除非另外指明，取代基R1、R2、R3、R4、R5、R6和X与上述相同。
流程1：
Figure C0181304800181
Figure C0181304800182
PG＝保护基团，如三苯甲基或PMB
流程1的步骤a)描述了羟基和氨基的全硅烷化，例如化合物1与六甲基二硅烷基胺/140℃反应，接着与R2SO2Cl在THF中反应或全部转换成下述其他R2X或与重碳酸二丁酯/NaHCO3在二噁烷/H2O中反应(BOC保护)。对于构型倒置的情况，生成的醇2用MeSO3H/Ph3P/DIAD在甲苯中处理(室温～80℃)(通过甲磺酸盐)；或用LiBr/DEAD/Ph3P在THF中处理(4℃～室温)(通过溴化物)；或用Ph3P/CCl4在CH2Cl2中处理(3℃～室温)(通过氯化物)。在保持构型的情况(通过甲磺酸盐)，醇2可通过与MeSO2Cl/吡啶/DMAP(0℃～室温)的反应转化为化学式3化合物。
为了引入保护的硫醇部分，化学式3的化合物被例如三苯基甲硫醇或4-甲氧基苄基硫醇及K-Ot-Bu在DMF中处理(对Br：0℃～室温；对Cl：0℃；对甲磺酸盐：室温～100℃)。酯4用水性LiOH在THF中水解(0℃～室温)给出酸5。
最终化合物的合成由流程2表示。
合成由酸1a的预活化(N-羟基-2-吡啶酮、N，N-二环己基碳二亚胺、4-乙基吗啉在CH2Cl2中，在室温)开始，接着与一种烷基肼(NHR3NHR4)反应(步骤a)，或酯1b直接用肼(NH2NH2·H2O)在EtOH中(在室温)处理生成羧酸酰肼2(R3、R4、R5＝H)。以下列方式完成成为游离硫醇3的转换：当PG(保护基团)是Tr时，通过与例如TFA/Et3SiH在0℃～室温反应；或者当PG是PMB时通过与例如TFA/Et3SiH在0～80℃的反应(步骤b)。
在羧酸酰肼2(R3、R4、R5＝H)的情况，通过还原氨基化引入R4：由醛在EtOH中形成亚胺，接着用NaBH3CN在THF中还原给出化合物4(步骤c)。为引入新的R5，在R4是烷基(R5＝H)的情况，通过与ClCOR5、ClCO2R5、ClSO2R5或ClSO2NR5，iPr2NEt或Huenig碱-CH2Cl2，在催化量DMAP或DMAP-聚合物或R5NCO的存在下，室温在THF中反应给出化合物4，化合物4脱保护生成上述最终的硫醇5(步骤c和b)。
化合物2或4选择性地脱BOC保护基(TFA、CH2Cl2在0℃)，接着与ClCO2R2、NEM或iPr2Net、CH2Cl2或R2NCO在THF中在0℃～室温反应(或转换成在上文引入R5中所述的全部其它R2X)给出化合物7(步骤e)。如上述脱去硫醇保护基给出最终的硫醇8(步骤b)。
Figure C0181304800201
流程3出示了合成酰肼的不同方法。
酸1预活化(N-羟基-2-吡啶酮、N，N-二环己基碳二亚胺、4-乙基吗啉在CH2Cl2中，在室温)，接着与烷基-肼羧酸苄酯(NHR3NHR4)反应(步骤a)给出酰肼2，酰肼2用HBr在AcOH中于0℃转化为3(步骤b)。也可通过预活化及与NHR3NR4R5反应从1直接转换到3(步骤c)。新R3的引入是用卤化物/NaH在DMF中(在0℃～室温，直接到化合物4，步骤e)反应来完成的。用下列方法脱保护基生成硫醇5：在PG是Tr的情况，通过与例如TFA/Et3SiH在0℃～室温反应，或在PG是PMB的情况，通过与例如TFA/Et3SiH在0℃～80℃反应(步骤d)。
流程3：
Figure C0181304800221
流程4表示合成酰肼另外的路线。
酸1预活化(N-羟基-2-吡啶酮、N，N-二环己基碳二亚胺、4-乙基吗啉在CH2Cl2中，在室温)接着与2-烷基-肼羧酸叔丁酯(NHR3NHBOC)反应(步骤a)给出酰肼2，用三乙基硅烷在TFA中0～80℃处理给出硫醇3(步骤b)。用卤代烷(R5-卤化物)和DMF及用NaH作为碱烷基化(0℃～室温)生成化合物4，化合物4用Et3SiH/TFA脱保护基(如流程1所述)后给出硫醇5(步骤c、d)。
选择性脱BOC-保护基(TFA在CH2Cl2中到化合物6)接着在催化量DMAP或DMAP-poly存在下与ClCO2R4、ClSO2R4、iPr2NBt或NEM在CH2Cl2中于室温反应给出化合物7(R4＝R5)和8，将它们分离并脱保护基(如流程1所述用Et3SiH/TFA)生成硫醇5(步骤e、f和d)。非完全取代的酰肼8可进一步被烷基化(R5-卤化物，及DMF/NaH，0℃～室温)，并脱保护基(如流程1所述用Et3SiH/TFA)生成硫醇5(步骤g和d)。
流程4：
流程5表示酰肼1进一步的转化。在iPr2EtN存在下在THF中用γ-溴代烷酰基氯酰基化(0℃～室温)给出化合物2，化合物2环化(NaH在DMF中，室温)，分离两个异构体并脱去硫醇的保护基(Et3SiH/TFA，如流程1所述)给出酰肼3和4。
流程5：
Figure C0181304800251
制备化学式5的化合物可按照流程6的反应路线：流程1中叙述了由羟基脯氨酸合成起始原料1。回流30分钟TFA/三异丙基脱保护基给出硫醇2，硫醇2被连接到树脂上。既可在开始或在NR3NR4R5处理后引入最终的R2X(流程9)。在第二种情况下，用本领域已知的方法将起始酸1的R2X(＝BOC)转化为易变的非酸性保护基团(例如R2X＝FMOC时，步骤a：首先用40％TFA在CH2Cl2中室温下选择性脱BOC-保护基，接着以NaHCO3作为碱与Fmoc-Osu在二噁烷/水中反应)，这些方法在例如M.Bodanszky和A.Bodanszky著“The Practice of Peptide Synthesis”中有说明，该书1984年由Springer Verlag在Berlin出版。
流程6：
Figure C0181304800261
如下制备树脂(步骤b)：连接剂4-(α，α-二苯基羟甲基)苯甲酸用TPTU、DIEA在DMF中活化，并加入二苯甲基胺树脂3。然后此树脂用硫醇2在CH2Cl2/TFA处理给出树脂负载的起始材料5。
Figure C0181304800281
流程7出示在树脂1上合成最终的化合物：此合成从预活化酸1(TPTU、Huenig碱，在DMF中在室温)开始，接着与烷基-肼(NH2NHR4)反应(步骤a)给出中间体2a，2b或4(R3、R4、R5＝H，步骤c)。用TFA/iPr3SiH在CH2Cl2中于室温完成与树脂的脱离给出游离的硫醇3(步骤b)。在羧酸酰肼4的情况，通过与ClCOR5、ClCO2R5、ClSO2R5或ClSO2NR5在DMF中反应引入新的R5给出化合物2，化合物2可任选被烷基化(卤代烷/DBU，在DMF中)给出二取代酰肼6(步骤d和f。如上述与树脂脱离给出最终的硫醇3。在酰肼4与ClSO2R5反应的情况，发生了化合物2a和2b的双磺酰基化(步骤d)，这些化合物如同相应的硫醇3一样，可在脱离树脂后分离。
如果R2X是FMOC：化合物2脱保护基(20％哌啶/DMF，然后与ClCO2R2、吡啶、DMF或R2NCO在DMF中于室温反应或转换为上文R4-引入中所述的全部其它R2X)给出化合物5(步骤e)。如上述烷基化(卤代烷/DBU在DMF中)和脱树脂保护基给出最终的硫醇3(步骤f和b)。
可通过各种本领域普通技术人员了解的体外和体内试验，来证明化学式(I)的化合物抑制金属蛋白酶活性特别是锌水解酶活性的能力。
A)细胞培养
如说明(Schweizer等：1997年，Biochem.J.，328卷871-878页)直到融合前在“细胞工厂”培养稳定的人类脐静脉内皮细胞系(ECV304)。在融合时用胰岛素/EDTA溶液洗脱细胞并用低速离心收集细胞。此细胞粒用磷酸盐缓冲的pH7.0的盐水洗涤一次并在-80℃储存备用。
B)从ECV304细胞中增溶ECE
如果没有另外说明，全部程序在0～4℃下进行。有1×109个细胞的细胞粒悬浮在50ml缓冲液A(20mM Tris/HCl，pH7.5，含有5mM MgCl2、100μM PMSF、20μM E64、20μM亮肽素)中并超声破碎。所生成的细胞均浆在100,000gav下离心60分钟。按照说明弃去上层清液，所生成的膜小球在50ml缓冲液A中匀化并离心。重复两次在缓冲液A中洗涤膜的碎片，最终制备的膜在4℃在50ml缓冲液B(缓冲液A+0.5％吐温20(v/v)、0.5％CHAPS(w/v)、0.5％毛地黄皂苷(w/v))中匀化并搅拌2小时。然后如说明沉积剩余的膜碎片。所生成的透明上层清液含有溶解的ECE，并以1.0ml的等分试样在-120℃储存直到使用。
C)ECE试验
该试验测量人类大ET-1产生的ET-1。为测量高数量的样品在96孔板中来完成试验。并使用特别先进的和最佳的涂布技术，在相同的孔中进行酶反应和所产生的ET-1的放射免疫测定。
D)涂板
Fluoronunc Maxisorp white(编码437796)96孔板在UV Stratalinker2400(Stratagene)中以1焦耳能量照射30分钟。然后此96孔板每孔注入300μl蛋白质A溶液(2μg在0.1M Na2CO3中，pH9.5)，并在4℃孵育48小时。涂过的板在使用前可在4℃最多储存3星期。
使用前弃去蛋白质A溶液，且此板在4℃用在0.1M Na2CO3中pH为9.5的0.5％牛血清白蛋白(BSA)封闭2小时。
板用双蒸水洗涤，并已准备好进行ECE试验。
E)筛选试验
试验化合物在DMSO中溶解并稀释。在孔中放入10μl DMSO，接着放入含有200ng大ET-1的125μl试验缓冲液(50mM Tris/HCl，pH 7.0，1μMN-(2-(巯甲基)-1-氧-3-苯丙基)-甘氨酸(Thiorphan)、0.1％NaN3、0.1％牛血清白蛋白)。通过加入50μl溶解的ECE(在试验缓冲液中稀释1∶30～1∶60倍(v/v))开始酶反应。酶反应在37℃进行30分钟。加入10μl pH7.0的150mMETDA使酶反应停止。
放射免疫测定：
ET-1的放射免疫测定基本按照以前的说明(Lffler，B.-M.和Maire，J.-P.，1994年，Endothelium 1：273-286页)来完成。在含有EDTA停止酶反应的混合物的板中加入25μl试验缓冲液，试验缓冲液含有20000cpm的(3-(125I)酪氨酸)-内皮素-1和25μl的ET特效的抗血清AS-3(在试验缓冲液中稀释，1∶1000)。这些板在混合下在4℃培养过夜。然后，用洗板器吸去液相，用双蒸水将板洗涤一次。在此洗过的板中加入200μl闪烁液(Microscint 40LSC-Cocktail，Packard，编码6013641)，在Topcount计数器上对板上每孔计数2分钟。
在板上用合成的ET-1以最终浓度为每孔0～3000pg的ET-1制出标准曲线。全部板都测试了最大ECE活性(在10μl DMSO存在下)的对照样品和产生ET-1免疫反应活性本底(在10mM EDTA或100μM磷酰二肽存在下)的对照样品。测定重复进行三次。
F)动力学测试
通过改变测试中使用的底物浓度，可使用所述试验格式来测定所使用的ECE制剂及不同的ECE抑制剂的动力学特征(即Km，Ki)。
G)以细胞为基础的ECE试验
如已发表的(Schweizer等：1997年，Biochem.J.，328卷871-878页)，MDCK细胞稳定地表达人类ECE-lc。在24孔板上培养的细胞在湿润空气/CO2(19∶1)气氛中融合在Dulbecco改进的Eagles介质(DMEM)中，此介质中补充了10％(v/v)牛胎儿血清(FBS)、0.8mg/ml geneticin、100i.u./ml青霉素和100μg/ml链霉素。在ECE试验前，用0.5ml DMEM-HBSS(1∶1)、pH7.0的补充了0.1％(w/v)牛血清白蛋白的10mM HEPES代替上述介质。加入溶在DMSO中的抑制剂，使其最终浓度为1％。加入0.42μM人的大ET-1使酶反应开始，并在培养器中于37℃使酶反应进行1.5小时。在培养结束时迅速移出培养介质，如上述用放射免疫测定法分析等分试样中产生的ET-1。
通过测量磷酰二肽(IC500.8±0.2μM)和CGS 314447(IC50 20±4nM)特有的抑制常数，来验证ECE筛选试验[De Lombaert，Stephane、Stamford，LisaB.、Blanchard，Louis、Tan，Jenny、Hoyer，Denton、Diefenbacher，Clive G.、Wei，Dongchu、Wallace，Eli M.、Moskal，Michael A.等：“内皮素-转变酶和中性肽链内切酶24.11的有效的非-肽双重抑制剂”，Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997年)，7卷(8期)，1059～1064页]。用与文献所述没有明显不同的方法由IC50值测量两种抑制剂，但所用的测量试验规程不同。在这种以细胞为基础的试验中磷酰二肽显示的IC50为4μM。因为如ECE被包埋在正常血浆膜环境中，此试验还给出了另外有关在更加生理的条件下抑制剂抑制效力的信息。重要的是要说明此筛选试验是在1μM N-(2-(巯甲基)-1-氧-3-苯丙基)-甘氨酸存在的情况下完成的，用以阻止由于NEP24.11的作用造成的任何潜在的大ET-1的降解。在存在或不存在N-(2-(巯甲基)-1-氧-3-苯丙基)-甘氨酸的情况下测量ET-1产生的初步试验中，在MDCK-ECE-lc转染的细胞中都不存在NEP活性。在后来的试验中不再在培养介质中加N-(2-(巯甲基)-1-氧-3-苯丙基)-甘氨酸。
根据上述方法，本发明的化合物在放射免疫测定(对ECE-抑制的E)中显示的IC50值为大约50nM～大约1000μM。优选化合物显示的值为50nM～1μM。
如上所述，含有化学式I的化合物的药物，如同制造这种药物的方法都是本发明的目标，该方法包括将一个或多个化学式I的化合物、及如果需要，将一种或多种其它有治疗价值的物质带到盖伦氏制剂的给药形式中。
药物组合物可以口服给药，例如以药片、带涂层的药片、糖衣丸、硬的或软的凝胶胶囊、溶液、乳液或悬浮液形式。还可实行直肠给药例如使用栓剂；局部或经由皮肤给药，例如使用药膏、乳剂、凝胶或溶液；或非肠道给药例如使用可注射的溶液。
为了制备药片、带涂层药片、糖衣丸或硬凝胶胶囊，本发明化合物可与药物惰性的无机或有机赋形剂混合。药片、糖衣丸或硬凝胶胶囊适宜的赋形剂的实例包括乳糖、玉米淀粉或它们的衍生物；滑石粉；硬脂酸或它们的盐。
用于软凝胶胶囊适宜的赋形剂包括例如植物油、蜡、脂肪、半-固态或液态多元醇等；然而根据活性成分的本性，可能有软凝胶胶囊根本不需要赋形剂的情况。
制备溶液和糖浆可使用的赋形剂包括例如水、多元醇、蔗糖、转化糖和葡萄糖。
注射液可使用的赋形剂包括例如水、醇、多元醇、甘油和植物油。
栓剂和局部或经由皮肤的用药可使用的赋形剂包括例如天然或硬化油、蜡、脂肪和半-固态或液态多元醇。
药物组合物还可包含防腐剂、抗氧剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、增味剂、改变渗透压的盐、缓冲液、涂层剂或抗氧剂。它们还可包含其他治疗上有价值的试剂。
其中以化学式I的化合物有效量给药的剂量依赖于具体活性成分的本性、患者的年龄和需求及用药的方式。一般考虑剂量为每天0.1～100mg/kg体重，虽然如果表明需要，可超越所引用的上限。
下面提供具体的实施例作为帮助实践本发明的指南，而无意限制
本发明的范围。
实施例
一般注释：
全部反应在氩气保护下完成。
缩写词：EtOH：乙醇；THF：四氢呋喃；Et2O：乙醚；MeOH：甲醇；CH2Cl2：二氯甲烷；EDCI：N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐；HOBT：1-羟基苯并三唑；DBU：1，8-二氮杂双环-[5.4.0]-十一碳-7-烯(1,5-5)；LAH：氢化铝锂；LDA：二异丙酰胺基锂；DEAD：偶氮二羧酸二乙酯；DIAD：偶氮二羧酸二异丙酯；DMAP：4-二甲氨基吡啶；DMAP-聚合物：聚合物-负载的(聚苯乙烯基2％DVB树脂，约1.6mmol“DMAP”/g树脂)4-(N-苄基-N-甲基氨基)吡啶；NEM：N-乙基吗啉；NMM：N-甲基吗啉；TBAF：氟化四丁基铵；DIEA：二乙胺；DMF：二甲基甲酰胺；TFA：三氟乙酸；TPTU：四氟硼酸[2-(2-吡啶酮-1-基)-1，1，3，3-四甲基]uronium盐；iPr2NEt：Huenigs碱或N-乙基二异丙基胺；FMOC-Osu：9-芴基甲氧基羰基-N-羟基琥珀酰亚胺酯。
实施例1：起始原料(酯-流程1)
将40g(220mmol)L-羟基脯氨酸甲酯-盐酸盐(在甲苯中悬浮两次并在减压下蒸发除去水)悬浮在600ml六甲基二硅烷基胺中并回流2小时。溶液在减压下蒸发并溶于100ml THF中，缓慢加入49.9g(220mmol)2-萘-磺酰氯在200ml THF中的溶液并室温搅拌16小时。加入150ml H2O，1小时后蒸发溶剂。剩余物在水/乙酸乙酯(3×)之间分配，有机相用10％NaCl洗涤，并用Na2SO4干燥给出60.4g(82％)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS：335(M+)。
流程1：
Figure C0181304800341
类似物：
L-羟基脯氨酸苄酯-盐酸盐和1-萘磺酰氯给出(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄酯。MS：411(MH+)；
L-羟基脯氨酸苄酯-盐酸盐和甲磺酰氯给出(2S，4R)-4-羟基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄酯，mp132～133℃，MS：300(MH+)；
-L-羟基脯氨酸甲酯-盐酸盐和甲磺酰氯用CH2Cl2萃取后给出(2S，4R)-4-羟基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸甲酯，mp115.5-117℃，MS：164(M-COOMe)。
通过甲磺酸盐：将13.9ml(215mmol)甲磺酸、29.8ml(215mmol)三乙胺和58.7g(224mmol)三苯基膦在150ml甲苯中的两相溶液加到60g(179mmol)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯的300ml甲苯悬浮液中，悬浮液被机械搅拌。加入44.9ml(233mmol)偶氮二羧酸二异丙基酯(放热！)后，将溶液在80℃加热2.5小时。室温加入300ml水，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。有机相用10％KHSO4(2×100ml)水溶液、10％NaCl(2×150ml)洗涤、Na2SO4干燥及蒸发，给出180g粗产物，快速色谱(乙酸乙酯/己烷1∶1)给出63.7g(86％)的(4S，2S)-4-甲磺酰氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯。
室温将64.2g(167mmol)三苯基甲硫醇缓慢加入到17.9g(160mmol)叔丁醇钾在300ml DMF的溶液中，并机械搅拌30分钟。然后在20 C加入63g(152mmol)(4S，2S)-4-甲磺酰氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯在300ml DMF中的溶液，在末端用冰浴冷却。反应物在100C加热1.3小时，冷却，蒸发到400ml并用250ml饱和的NH4Cl水溶液/乙酸乙酯萃取(3×300)。有机相用10％NaCl水溶液洗涤、干燥(Na2SO4)并蒸发。快速色谱(CH2Cl2/MeOH 99∶1)给出58.6g(65％，(2S，4R)/(2R，4R)-异构体约为4∶1，1H-NMR)及9.2g(10％，(2S，4R)/(2R，4R)-异构体约为1∶1，1H-NMR)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS：594(MH+)。
类似物：
(2S，4R)-4-羟基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸甲酯在80C 3.75小时后给出(4S，2S)-4-甲磺酰氧基-1-(甲磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，它与三苯基甲硫醇在100C加热45分钟给出(2S，4R)-1-甲磺酰基-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯((2S，4R)/(2R，4R)-异构体约为9∶1，1H-NMR)，MS：482(MH+)；
(2S，4R)-4-羟基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄酯在80C5小时后给出(2S，4S)-1-甲磺酰基-4-甲磺酰氧基-吡咯烷-2-羧酸苄酯，它与4-甲氧基苄基硫醇/叔丁醇钾加热30分钟给出(2S，4S)-1-甲磺酰基-4-甲磺酰氧基-吡咯烷-2-羧酸苄酯，mp91-92C，MS：453 (M+NH4 +)。
通过溴化物：在温度1.5～4.5C之间用0.5小时往76.5g(291.6mmol，6当量)三苯基膦的650ml THF溶液中加入44.6ml(286.8mmol，5.9当量)DEAD在70ml THF中的溶液。溶液搅拌0.5小时，然后加入42.2g(486.1mmol，10当量)LiBr，反应混合物再冷却到4C以加入20g(48.6mmol)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄酯在75mlTHF中的溶液。室温搅拌3小时，加入水及将此悬浮液浓缩并再溶于700ml乙酸乙酯和水。分层，无机相用100ml乙酸乙酯(3x)萃取，合并的有机层用盐水洗涤、MgSO4干燥并蒸发。通过结晶从乙酸乙酯/己烷中移出氧化三苯基膦，母液用使用己烷∶乙酸乙酯3∶1的硅胶柱色谱纯化，产生13.4g(62％)无色固体(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄酯，mp97-98C，MS：473(MH+)。
在0C用4.4ml(31.5mmol，1.15当量)4-甲氧基苄硫醇处理在150mlDMF中的3.38g(30.1mmol，1.1当量)叔丁醇钾。溶液在室温搅拌1小时，然后加入12.99g(27.4mmol)(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄酯在100ml DMF中的溶液。反应物室温搅拌过夜，真空下除去DMF，剩余物再溶于乙酸乙酯和1M KHSO4水溶液。分层，有机相用盐水洗涤、Na2SO4干燥并蒸发。油状粗产物用己烷/乙酸乙酯(3∶1～2∶1)作淋洗液通过硅胶快速色谱纯化，产生7.23g(48％)浅黄色固体(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄酯，mp90-91 C，MS：547(M+)。
类似物：
(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯与4-甲氧基苄硫醇/叔丁醇钾给出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯，MS：382(MH+)。
(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯与4-甲氧基苄硫醇/叔丁醇钾给出无色油状(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS：472(MH+)。
通过氯化物：((2S，4R)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯：本发明中间体的合成是本领域已知的，例如在国际专利申请WO 9820001和欧洲专利申请公开号EP-A-696593中有述)
将374g(1.48mol)(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯在1.6升CH2Cl2中的溶液用680g(2.6mol)三苯基膦处理，冷却到3～5C并用1.24升(12.8mol)CCl4处理10分钟。在此温度2小时后停止冷却，反应温度在2小时期间上升到35C。冷却回到20C并再搅拌5分钟。加入4升正庚烷，反应蒸发到2.9升，冷却到0C，过滤，剩余物用同样的方法处理两次，第三次将剩余物再溶解在2升CH2Cl2中，蒸发溶剂，用己烷/叔-丁基甲基醚9∶1作淋洗液通过硅胶过滤。蒸发溶剂给出347g(89％)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯，MS：246(MH+)。
冷却(-3C)76g(0.68 mol)叔丁醇钾在1.5升DMF中的溶液并缓慢地(1.5小时)用202g(0.73mol)三苯基甲硫醇在0.8升DMF中的溶液处理(最高1C)。在0C 2.5小时后，加入161g(0.61mol)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯在0.35升DMF中的溶液。反应在2C搅拌过夜，蒸发，溶于1.5升乙酸乙酯，倾入2.7升饱和NH4Cl水溶液并用乙酸乙酯萃取(2×)。有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。使用己烷/乙酸乙酯(95∶5～7∶3)的硅胶高效液相色谱给出268g(87％)(2S，4R)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯2-甲酯，MS：504(MH+)。
实施例2：水解(流程1)
在0C往14.8g(31.6mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯的950ml THF溶液中加入950ml 0.1MLiOH(95mmol)。溶液在室温搅拌2小时，用冰水稀释，加入1M KHSO4(pH2)酸化，用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发，产物用乙酸乙酯/己烷结晶，产生13.15g(90％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸无色固体，MS：456(MH+)。
采用类似方法制备下列化合物：
浅棕色泡沫状(2S，4R)-1-甲磺酰基-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸，MS：466(M-H-)；
(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯，MS：366(M-H-)；
可根据下列参考文献制备其它化合物：
2-(异丁基)肼羧酸叔丁酯(Faessler，Alexander；Bold，Guido；Capraro，Hans-Georg；Cozens，Robert；Mestan，Juergen；Poncioni，Bernard；Roesel，Johannes；Tintelnot-Blomley，Marina；Lang，Marc：具有口服生物可利用性的氮杂-肽类似物作为有效的人类免疫缺乏病毒I-型蛋白酶抑制剂，J.Med.Chem.(1996)，39(16)，3203-3216)。
2-(甲基)肼羧酸叔丁酯(Lenman，Morag M.；Lewis，Arwel；Gani，David：稠合1，2，5-三氮杂-1，5-二酮和一些N2-和N3-取代的衍生物的合成：顺式-肽基脯氨酰胺可能的构象模拟，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1997)，16期，2297-2311)。
N-甲基-肼羧酸苄酯(Lenman，Morag M.；Lewis，Arwel；Gani，David：稠合1，2，5-三氮杂-1，5-二酮和一些N2-和N3-取代的衍生物的合成：顺式-肽基脯氨酰胺可能的构象模拟，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1(1997)，16期，2297-2311)。
实施例3：合成酰肼
实施例3a：程序A(流程2)
(步骤1)在4.4g(9.6mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸的200ml CH2Cl2溶液中加入1.2g(10.8mmol，1.1当量)N-羟基-2-吡啶酮，接着在0C在30分钟期间加入2.2g(10.7mmol，1.1当量)N，N-二环己基碳二亚胺在25ml CH2Cl2中的溶液。在加入4.2ml(33.0mmol，3.4当量)NEM和1.9g(mmol，1.05当量)异丁基肼·硫酸盐以前，此悬浮液在此温度再搅拌4小时。反应混合物室温搅拌过夜。此悬浮液用0.55ml(9.6mmol，1.0当量)冰乙酸的10ml水溶液处理并搅拌1.5小时，用NaHCO3(5％)水溶液稀释并用CH2Cl2萃取。合并的有机相用1MKHSO4溶液、水和盐水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。用己烷研制生成5.02g(定量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-酰肼，它直接用于后面的反应。
Figure C0181304800391
(步骤2)在10mlTFA中的222mg(0.42mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-酰肼用0.68ml(4.2mmol，10当量)三乙基硅烷在80C处理90分钟。真空下蒸发溶剂，粗产物用快速色谱纯化，产生148mg(86％)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-酰肼浅黄色晶体，MS：408(MH+)。
采用类似方法制备下列化合物：
由(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和
b)苄肼接着脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-酰肼白色固体，MS：442(MH+)；
c)对甲苯磺酰基肼接着脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色固体，MS：506(MH+)；
d)甲肼接着脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-酰肼白色晶体，MS：366(MH+)；
由(2S，4R)-1-甲磺酰基-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和对-甲苯磺酰基肼接着脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色晶体，MS：394(MH+)。
实施例3b：程序B (程序A的步骤1接着步骤3～4-流程2)
(步骤3)在0C用5.6ml(32.6mmol，4当量)N-乙基二异丙基胺、3.1g(16.3mmol，2当量)对甲苯磺酰氯和100mg(0.8mmol，0.1当量)DMAP处理在450ml CH2Cl2中的4.3g(3.15mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-酰肼，室温搅拌过夜，加入2.05g(16.1mmol，2当量)MeNHCH2CO2K，溶液在室温搅拌1小时，加入1MKHSO4溶液并分相。有机层用饱和NaHCO3萃取，无机层用CH2Cl2洗涤。合并的有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥和蒸发。粗的剩余物用己烷∶乙酸乙酯2∶1作淋洗液的快速色谱纯化，生成2.68g(48％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼，它可直接用于下面的反应。
(步骤4)在2.68g(3.9mmol，1当量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷酮-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼的100mlTFA溶液中加入6.2ml(39mmol，10当量)三乙基硅烷，混合物在80C加热1.5小时、真空浓缩及再溶于甲苯并蒸发。用己烷研制生成粗产物，粗产物进一步用己烷∶乙酸乙酯1∶1的快速色谱纯化产生1.65g(74％)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色晶体，MS：562(MH+)。
采用类似方法制备下列化合物(步骤1，3，4)：
由(2S，4R)4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸
b)和甲肼，接着与对-甲苯磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-酰肼白色晶体，MS：520(MH+)；
c)和异丁肼·硫酸盐，接着与4-叔丁基-苯基磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-叔丁基-苯磺酰基)-N’-异丁基-酰肼白色晶体，MS：604(MH+)；
d)和甲肼，接着与甲磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲磺酰基-N’-甲基-酰肼白色固体，MS：444(MH+)；
e)和异丁肼·硫酸盐，接着与甲磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-甲磺酰基-酰肼白色晶体，MS：486(MH+)；
f)和苄肼，接着与甲磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-甲磺酰基-酰肼白色晶体，MS：520(MH+)；
g)和苄肼；接着与对-甲苯磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-酰肼白色晶体，MS：596(MH+)；
由(2S，4R)-1-甲磺酰基-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸
a2)与苄肼，接着与甲磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-甲磺酰基-酰肼白色固体，MS：408(MH+)；
b2)与异丁基肼·硫酸盐，接着与甲磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-甲磺酰基-酰肼无色固体，MS：450(MH+)；
c2)与异丁基肼·硫酸盐，接着与对-甲苯磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼无色固体，MS：374(MH+)；
d2)与异丁基肼·硫酸盐，接着与4-叔丁基-苯磺酰氯反应并脱保护基：(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基吡咯烷-2-羧酸N’-(4-叔丁基-苯磺酰基)-N’-异丁基-酰肼白色晶体，MS：492(MH+)；
实施例3c：程序C(流程2)
与程序A，B类似(步骤1，3)，由(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯和甲肼，接着用对-甲苯磺酰氯处理，得到(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸1-叔丁酯，它可直接用于后面的反应。
(步骤5)将在10ml CH2Cl2中的2.37g(4.3mmol)(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸1-叔丁酯用4ml TFA在0C处理，在冰箱中保持过夜。蒸去溶剂，粗料用甲苯(2×)和己烷(3×)溶解并蒸发，产生(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷的TFA盐粗产物，它没有进一步纯化可用于下面的反应。
(步骤6)在0C往250mg(0.44mmol，1.0当量)(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷酮·TFA的5ml CH2Cl2溶液中加入360μl(2.1mmol，4.8当量)N-乙基二异丙胺和70μl(0.56mmol，1.2当量)氯甲酸苯酯。溶液室温搅拌过夜，加入1N KHSO4分相，无机相用CH2Cl2萃取，有机层用1M KHSO4和盐水洗涤、Na2SO4干燥并蒸发。
(步骤7)粗料再溶于10ml TFA，室温加入700μl(4.4 mmol，10当量)三乙基硅烷，溶液在80C搅拌70分钟。蒸发并用采用己烷∶乙酸乙酯1∶1的快速色谱纯化、接着冷冻干燥产生149.2mg(75％)(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苯酯白色固体，MS：450(MH+)。
用相同的方式(步骤6，7)制备下列化合物：
由(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷·TFA和氯甲酸正丁酯、氯甲酸异-丙酯、丁基氨磺酰氯、环丙基氨磺酰氯、苄基氨磺酰氯：
(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯无色胶状物，MS：430(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸异丙酯白色固体，MS：416(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸丁基酰胺白色冻干固体，MS：463(M-H)-；
(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸环丙基酰胺白色冻干固体，MS：447(M-H)-；
(2S，4R)-2-[N’-甲基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸苄基酰胺白色冻干固体，MS：497(M-H)-；
根据规程(步骤5～7)，由(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸1-叔丁酯用氯甲酸异-丙基酯、氯甲酸正丁酯、氯甲酸苄酯、氯甲酸苯酯、喹啉-8-磺酰氯、噻吩-2-磺酰氯、苄基氨磺酰氯、丁基氨磺酰氯或环丙基氨磺酰氯处理给出下列化合物：
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸异丙基酯白色固体，MS：458(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯白色固体，MS：472(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯白色固体，MS：506(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苯酯白色固体，MS：492(MH+)；
(2S，4R)-4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苄基)-酰肼白色固体，MS：563(MH+)；
(2S，4R)-4-巯基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苄基)-酰肼白色固体，MS：518(MH+)；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸苄基酰胺白色冻干固体，mp 67C，MS：539(M-H)-；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸丁基酰胺白色冻干固体，MS：467(M-H)-；
(2S，4R)-2-[N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯基磺酰基)-肼基羰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酸环丙基酰胺白色冻干固体，MS：489(M-H)-。
实施例3d：程序D-直接由酯形成(流程3)
类似Ruye Xing和Robert P.Hanzlik：J.Med.Chein.1998，41，1344-1351的方法进行下列反应：
(步骤8)在5g(10.6mmol，1当量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯的20ml甲醇溶液中加入6.45ml(110mmol，10当量)水合肼，溶液在室温搅拌3天。蒸发溶剂，接着用EtOH、乙醚和己烷溶解并蒸发。真空干燥浅黄色固体给出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸酰肼，mp 130C，MS：472(MH+)。
(步骤9)将150mg(0.3mmol，1.0当量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸酰肼的5ml TFA溶液和0.65ml三异丙基硅烷在室温搅拌3天，蒸发溶剂，剩余物再溶于饱和NaHCO3溶液：乙酸乙酯中，分相后无机相用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤。柱色谱得到68mg(61％)白色泡沫状(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸酰肼，MS：352(MH+)。
实施例3e：程序E-中间体(流程3)
类似程序D步骤8，由(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯和水合肼制备下列化合物：
(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸酰肼灰白色固体，mp 172C，MS：594(MH+)。
(步骤10)在室温向3.0g(5.05mmol(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸酰肼的乙醇悬浮液中加入0.56ml(5.6mmol，1.1当量)苯甲醛，反应混合物在80C加热3小时。蒸发溶剂，剩余物用乙酸乙酯∶己烷1∶1作淋洗液的硅胶快速色谱纯化，产生2.75g(80％)白色泡沫状的(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸亚苄基-酰肼，MS：682(MH+)。
(步骤11)向2.48g(3.64mmol(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸亚苄基-酰肼中加入228.6mg(3.64mmol，1.0当量)NaBH3CN在12.4ml THF中的溶液，接着加入在8.7ml THF中的691.8mg(3.64mmol，1.0当量)甲苯-4-磺酸。该溶液在室温搅拌2小时，另外加入mmol，0.3当量NaBH3CN，反应在室温搅拌过夜。混合物用乙酸乙酯稀释，用盐水、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，Na2SO4干燥及蒸发溶剂。
剩余物溶于11ml 1M NaOH和15ml THF中并搅拌1小时，用乙酸乙酯稀释并加入9ml 1M KHSO4，接着加入5％NaHCO3溶液。此微碱性溶液用乙酸乙酯萃取。有机相用水和盐水洗涤、Na2SO4干燥并蒸发产生2.45g(98％)白色泡沫状的(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’苄基-酰肼，MS：684(MH+)。(类似于Alexander Fssler，Guido Bold，Hans-Georg Capraro，Robert Cozens，Jurgen Mestan，Bernard Poncioni，Johannes Rsel，Marina Tintelnot-Blomley，and Marc Lang：J.Med.Chem.1996年，39卷，16期，3203-3216页.)
用类似的方法由(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸酰肼和2，5-二氟-苯甲醛制备下列化合物：
(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-酰肼白色泡沫体，MS：720(MH+)。
实施例3e：程序E-最终产物(流程3)
(步骤12)在0 C往200mg(0.3mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-酰肼的3ml CH2Cl2溶液中加入60μl(0.35mmol，1.2当量)N，N-二异丙基乙胺、72.5mg(0.35mmol，1.2当量)4-甲氧基苯磺酰氯和22.5mg(0.1 2当量)DMAP-聚合物。室温将悬浮液振动3天，另外加入25μl(0.15mmol，0.5当量)N，N二异丙基乙胺、31mg(0.15mmol，0.5当量)4-甲氧基苯磺酰氯和22.5mg(0.12当量)DMAP-聚合物，继续反应1天。过滤并用CH2Cl2洗涤树脂后，浓缩有机相，粗料通过快速色谱纯化得到152mg(61％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼，其可直接用于后面的反应。
(步骤13)在0C向148mg(0.17mmol(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼的3.0mlTFA溶液中加入276μl(1.73mmol，10当量)三乙基硅烷。混合物在室温搅拌30分钟，蒸发溶剂，剩余物再溶于乙酸乙酯、饱和NaHCO3水溶液中，分层，无机相用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。剩余物用乙酸乙酯∶己烷(1∶1.5～1∶1)的梯度通过快速色谱纯化产生76mg(72％)白色泡沫状的(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼，MS：612(MH+)。
用类似方法由(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基酰肼和对甲苯酰氯、乙酰氯、对甲氧苯甲酰氯反应接着脱保护基制备下列化合物：
(b)(2S，4R)-4-甲基-苯甲酸N-苄基-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼白色泡沫体，MS：560(MH+)。
(c)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-乙酰基-N’-苄基-酰肼白色固体，mp 64C，MS：484(MH+)。
(d)(2S，4R)-4-甲氧基-苯甲酸N-苄基-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼白色泡沫体，MS：576(MH+)。
由(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-酰肼和2，4-二氟苯甲酰氯、2-噻吩碳酰氯、甲磺酰氯、甲氧基苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯、苯磺酰氯、4-氟苯磺酰氯：
(e)(2S，4R)-2，4-二氟-苯甲酸N-(2，5-二氟-苄基)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼白色泡沫体，MS：618(MH+)。
(f)(2S，4R)-噻吩-2-羧酸N-(2，5-二氟-苄基)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼白色泡沫体，MS：588(MH+)。
(g)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-甲磺酰基-酰肼白色泡沫体，MS：556(MH+)。
(h)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼白色泡沫体，MS：648(MH+)。
(i)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(噻吩-2-磺酰基)-酰肼白色泡沫体，MS：624(MH+)。
(j)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-苯磺酰基-酰肼白色泡沫体，MS：618(MH+)。
(k)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(4-氟-苯磺酰基)-酰肼白色泡沫体，MS：636(MH+)。
实施例3f：根据流程4合成
类似于程序A-步骤1，由(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和N-甲肼羧酸苄酯制备中间体(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N-甲肼羧酸苄酯灰白色晶体，MS：620(MH+)。
(步骤14)将2.45g(1.52mmol)(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N-甲肼羧酸苄酯溶于9ml乙酸，在0℃加入9ml HBr(33％乙酸溶液)并在0℃搅拌4小时。浓缩溶液，剩余物溶于CH2Cl2和饱和NaHCO3水溶液中，分层，无机相用CH2Cl2萃取，合并的有机相用盐水洗涤，Na2SO4干燥。粗产物用乙酸乙酯∶己烷1∶1的快速色谱纯化产生380mg(44％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-苄基-N-甲基-酰肼白色固体，mp 83.2℃，MS：576(MH+)。
根据流程2(步骤4)脱保护基给出：
(2S，4R)4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-苄基-N-甲基-酰肼白色固体。mp 69℃，MS：456(MH+)。
(步骤16)将在7.5mlDMF中的180mg(0.31mmol(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-苄基-N-甲基-酰肼在0℃用16.5mg(0.34mmol，1.1当量)NaH和21μl(0.34 mmol，1.1当量)碘甲烷处理，溶液在室温搅拌3小时，溶液用水和CH2Cl2稀释，分相，无机层用CH2Cl2萃取，合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。粗料通过快速色谱用乙酸乙酯∶己烷2∶1到乙酸乙酯的梯度淋洗纯化得到110mg(60％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N，N-二甲基-酰肼，它用流程2所述规程脱保护(步骤4)给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N，N-二甲基-酰肼白色固体，mp 133.2℃，MS：470(MH+)。
流程4：
Figure C0181304800501
13)N-甲肼羧酸苄酯，N-羟基-2-吡啶酮，DDC，NEM，CH2Cl2
14)HBr，AcOH
15)TFA，Et3SiH
16)NaH，RBr，DMF
17)TFA，Et3SiH
实施例3g：根据流程5合成
类似程序A-步骤1，由(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和2-(甲基)肼羧酸叔丁酯制备中间体(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N’-甲肼羧酸叔丁酯白色晶体，MS：586(MH+)。
(步骤19)在室温向200mg(0.34mmol)(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N’-甲肼羧酸叔丁基酯的10ml TFA溶液中加入0.54ml(3.4mmol，10当量)三乙基硅烷，溶液在80℃搅拌1小时。真空蒸发溶剂，粗料用乙酸乙酯/己烷通过快速色谱纯化生成61.6mg(40％)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-三氟乙酰基-酰肼白色固体，MS：461(MH+)。
(步骤20，21)根据程序(流程4，步骤16)，由(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N’-甲肼羧酸叔丁酯和溴化苄制备(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N’-甲基-N-苄基-肼羧酸叔丁酯，它根据流程2(步骤4)直接脱BOC和PMB-保护基给出无色油状的(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-苄基-N-甲基酰肼，MS：456(MH+)。
(步骤22)在9ml CH2Cl2中的2g(3.4mmol)(2S，4R)-N’-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N’-甲肼羧酸叔丁酯用3.4mlTFA处理2小时。浓缩溶液，再溶于甲苯并蒸发。剩余物溶于乙酸乙酯和饱和NaHCO3水溶液中，分层，无机层用乙酸乙酯萃取，合并的有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥及浓缩生成1.67g(定量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-酰肼白色固体，MS：486(MH+)。
(步骤23)向1.67g(3.4mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-酰肼中加入0.78g(4.08mmol，1.2当量)甲苯磺酰氯、0.7ml(4.08mmol，1.2当量)N-乙基二异丙基胺和106mg(0.17mmol，0.05当量)DMAP-树脂，接着3天后再加入324mg(1.7mmol，0.5当量)甲苯磺酰氯。过滤反应物，加入1M HCl，无机相用CH2Cl2萃取。合并的有机相用盐水洗涤、Na2SO4干燥并浓缩。粗产物用乙酸乙酯∶己烷1∶2通过快速色谱纯化产生350mg(13％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷2-羧酸N-甲基-N’N’-二-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色固体，MS：794(MH+)；和630mg(29％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色固体，MS：640(MH+)。
这些化合物根据流程2(步骤4)脱保护基给出：
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’N’-二-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色晶体，mp110℃，MS：674(MH+)。
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色晶体，mp 103.5℃，MS：520(MH+)。
(步骤25，26)根据程序(流程4，步骤16)，由(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼和溴化苄制备(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼，它根据流程2(步骤4)直接脱保护基给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色固体，mp 82.5℃，MS：610(MH+)。
流程5：
实施例3h：合成环状化合物(流程6)
(步骤27)在0℃向150mg(0.25mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸酰肼的65ml THF溶液中加入52μl(0.3mmol，1.2当量)iPr2EtN和29μl(0.25mmol)4-溴丁酰基氯。溶液在室温搅拌2小时，将溶液浓缩并再溶于乙酸乙酯/H2O中，无机相用乙酸乙酯萃取，有机相用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。用乙酸乙酯∶己烷1∶1的柱色谱纯化得到170mg(92％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲硫烷基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-溴-丁酰基)-酰肼，它溶于120mlDMF中并用17mg(0.38mmol，55％在矿物油中)NaH处理，溶液搅拌2小时，浓缩并溶于乙酸乙酯/H2O中。无机相用乙酸乙酯萃取，有机相用盐水洗涤并用Na2SO4干燥。粗产物通过柱色谱纯化，得到75mg(45％)白色泡沫状(2S，4R)-4-三苯甲硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2-氧代-吡咯烷-1-基)-酰胺和40mg(25％)白色泡沫状的(2S，4R)-1-[4-三苯甲硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-四氢哒嗪-3-酮。这两个化合物分别在0℃～室温在TFA(2ml/mmol三苯甲硫烷基)中用10当量三乙基硅烷处理，直到检测不到离析物为止，分别生成白色泡沫状的(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2-氧代-吡咯烷-1-基)-酰胺，MS：420(MH+)；及白色泡沫状的(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-四氢-哒嗪-3-酮，MS：420(MH+)。
流程6
Figure C0181304800541
27)Br(CH2)3COCl、iPr2NEt、THF
28)NaH、DMF、室温，接着分离两个化合物
29)Et3SiH、TFA
实施例4：酰肼衍生物的固相合成
结构单元合成(流程7)：
(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯(19.48g，53mmol)用TFA(80ml)在CH2Cl2(120ml)中处理15分钟。减压浓缩反应混合物，所生成的深红色油状物在乙醚/正己烷(1∶4 v/v，860ml)中研制。收集沉淀的盐并减压干燥(18.9g)，直接用于下一步。
(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸的TFA盐(18.9g，53mmol)，在1，4-二噁烷/含有NaHCO3(17.8g，212mmol)的H2O(300ml)中用Fmoc-OSu(19.7 g，58.3mmol)处理，并机械搅拌16小时。反应混合物用水(400ml)稀释并用乙醚(2×)洗涤。加入乙酸乙酯(400ml)和HCl(25％，50ml)。有机相用H2O、饱和NaCl萃取和洗涤，用MgSO4干燥。过滤并减压浓缩得到泡沫状产物(22.5g)。
流程7
Figure C0181304800551
1.40％TFA/CH2Cl2
2.Fmoc-Osu，NaHCO3，H2O，1，4-二噁烷
3.TFA，三异丙基硅烷
上述泡沫状产物(20.7g，42.3mmol)溶于TFA(350ml)中，加入三异丙基硅烷(43.5ml)。混合物回流0.5小时，并减压浓缩。加入乙醚(100ml)及正己烷(300ml)产生沉淀物。倾出上清液，减压并在高真空下干燥沉淀物得到白色泡沫状的(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.6g，MS：370MH+)
树脂衍生化(流程8)
连接剂4-(α，α-二苯基羟甲基)苯甲酸(18.3g，60mmol)用TPTU(17.8g，60mmol)、DIEA(30.8ml、180mmol)在DMF(无水，250 ml)中活化3分钟。将混合物加到含有二苯甲胺树脂(负载-NH2量为0.9mmol/g，44.4g)的烧瓶中，烧瓶振动1小时。在过滤器上收集该树脂并用(DMF/异丙醇，3次交替)、CH2Cl2、乙醚洗涤及干燥：54.65g，0.65mmol/g(以重量增加计算的负载量)。
向上述CH2Cl2洗涤过的树脂(46.9g，30mmol)中加入在CH2Cl2(无水，550ml)中的(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(12.2g，36mmol)和TFA(80ml)的混合物。将红色的混合物振动1.5小时，然后过滤树脂，用(CH2Cl2/异丙醇，3次交替)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥：42g，0.65mmol/g(以重量增加计算的负载量)。
向上述CH2Cl2洗涤过的树脂(33.5g，22mmol)中加入CH2Cl2(无水，450ml)中的(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.7g，26mmol)和TFA(67ml)的混合物。将红色混合物振动1.5小时，然后过滤树脂，用(CH2Cl2/异丙醇，3次交替)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥：42g，0.59mmol/g(以重量增加计算的负载量)。
流程8：
1.4-(α，α-二苯基羟甲基)苯甲酸，四氟硼酸[O-(1，2-二氢-2-氧代吡啶-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基]uronium盐(TPTU)，Huenig碱
2.(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸或(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸，TFA，CH2Cl2
实施例5：平行的固相化学(流程9)
典型程序：步骤1，2
由上述(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(0.4g，0.26mmol)衍生的树脂用DMF(无水，5ml)、TPTU(0.18g，0.61mmol)、DIEA(0.21ml，1.21mmol)处理10分钟。真空下除去DMF溶液，反应瓶中加入苄氧基碳酰肼(0.13g，0.77mmol)在DMF(无水，3ml)中的溶液。反应混合物振动0.5小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥。
树脂(440mg)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理10分钟，收集滤液并减压浓缩，剩余物从乙酸(10ml)中冷冻-干燥产生41mg(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸苄酯白色冻干产物，MS：508.3(MNa+)。
通过上述程序平行制备的其他化合物在表1中出示。
流程9：
Figure C0181304800581
典型程序：步骤3，2
上述由(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(0.5g，0.33mmol)衍生的树脂用DMF(无水，5ml)、TPTU(0.19g，0.65mmol)、DIEA(0.22ml，1.3mmol)处理10分钟。真空下除去DMF溶液，反应瓶中加入4-甲氧基苯磺酰肼(0.20g，1.00mmol)的DMF(无水，5ml)溶液。反应混合物振动1小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥。
树脂(540mg)用40％TFA/CH2Cl2、三异丙基硅烷(0.5ml)处理15分钟，收集滤液并减压浓缩，剩余物通过制备型RP-HPLC纯化，汇集所需的级分，由乙酸(10ml)冷冻-干燥生成(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼白色冻干产物，MS：520.1(MH-)
通过上述程序平行制备的其他化合物在表1中出示。
典型程序：步骤3，6，2
由上述(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(4.3g，2.75mmol)衍生的树脂用DMF(无水，30ml)、TPTU(1.63g，5.50mmol)、DIEA(1.41ml，8.25mmol)处理15分钟。真空下除去DMF溶液，反应瓶中加入甲苯-4-磺酰肼(1.54g，8.25mmol)的DMF(无水，30ml)溶液。反应混合物振动16小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥。
典型的烷基化步骤例如：
向树脂(0.8g，0.45mmol)中加入DMF(无水，10ml)、二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.08ml，0.54mmol)、2，5-二氟溴化苄(0.11g，0.54mmol)，混合物振动16小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CHCl2、乙醚洗涤并干燥。
树脂(0.16g)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理15分钟，收集滤液并减压浓缩，剩余物用制备型RP-HPLC纯化，所需级分汇集并由乙酸中冷冻-干燥产生(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟苄基)-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼白色冻干产物，MS：632.0(MH+)。
通过上述程序平行制备的其他化合物在表1中出示。还得到了二取代产物。
典型程序：步骤4，5，2
上述由(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(1.0g，0.65mmol)衍生的树脂，用DMF(无水，10ml)、TPTU(0.39g，1.3mmol)、DIEA(0.45ml，2.6mmol)处理10分钟。真空下除去DMF溶液，反应瓶加入水合肼(25％，0.42ml，3.25mmol)的DMF(无水，8ml)溶液。反应混合物振动1小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥。
在此树脂(0.22g，0.14mmol)中加入DMF(无水，3ml)、DIEA(0.10ml，0.60mmol)、4-氟苯磺酰氯(0.11g，0.56mmol)，混合物振动3.5小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤及干燥。
此树脂(0.25mg)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理15分钟，收集滤液并减压浓缩，剩余物通过制备型RP-HPLC纯化，汇集所需级分并从乙酸(10ml)中冷冻-二干燥得到(2S，4R)-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-氟-苯磺酰基)-酰肼白色冻干产物，MS：510.2(MH-)。
通过上述程序平行制备的其他化合物在表1中出示。
典型程序：步骤3，7，2
由上述(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(20.1g，11.9mmol)衍生的树脂用DMF(无水，150ml)、TPTU(7.1g，23.8mmol)、DIEA(6.1ml，35.7mmol)处理10分钟。真空下除去DMF溶液，反应瓶中加入甲苯-4-磺酰肼(6.65g，35.7mmol)的DMF(无水，100ml)溶液。反应混合物振动16小时，在过滤器上收集树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、DMF洗涤。
用20％哌啶/DMF(2×5分钟)实现Fmoc基团的脱去。
吡咯烷取代反应按照例如：
在此树脂(0.60g，0.30mmol)中加入DMF(无水，6ml)、吡啶(0.12ml，1.50mmol)、8-喹啉磺酰氯(0.08g，0.36mmol)，混合物振动16小时，在过滤器上收集此树脂，用(DMF/异丙醇交替三次)、CH2Cl2、乙醚洗涤并干燥。
此树脂(0.25mg)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理15分钟，收集滤液并减压浓缩，剩余物用制备型RP-HPLC纯化，汇集所需级分，从乙酸(10ml)中冷冻-干燥得到(2S,4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-氟-苯磺酰基)-酰肼白色冻干产物，MS：505.3(MH-)。
通过上述程序平行制备的其他化合物在表1中出示。
表1
名称  离子喷雾MS 离析物 步骤：流程9
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苯基-酰肼 M+H 428.4 苯基酰肼 3，2
苯甲酸(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼 M+H 456.3 苯甲酸酰肼 1，2
(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸甲酯  M+H 410.3 羧酸甲酯酰肼 1，2
(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸苄基酯  M+Na508.3 苄氧基羰酰肼 1，2
呋喃-2-羧酸(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼  M+H 446.3 2-糠酸酰肼 1，2
烟酸(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼三氟-乙酸盐(1∶1) M+H 457.3 烟酸酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼  M+NH4523.2 甲苯-4-磺酰肼 3，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸酰肼三氟-乙酸盐(1∶1)  M+H352.2 水合肼 4，2
(2S，4R)4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼  M-H520.1 4-甲氧基苯磺酰肼 3，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯甲酰基)-酰肼  M+H470.2 4-甲基-苯甲酰基-酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(噻吩-3-基-乙酰基)-酰肼  M+H476.1 噻吩-3-基-乙酰基-酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(1H-吲哚-3-基-乙酰基)-酰肼  M+H509.3 1H-吲哚-3-基-乙酰基-酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(噻吩-2-羰基)-酰肼  M+H462.2 噻吩-2-羰基-酰肼 1，2
(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸(3-氟-苯基)-酰胺 M+H 489.2 3-氟-苯基酰胺酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苯磺酰基-酰肼  M-H 490.2 苯磺酰肼 3，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-乙酰基-酰肼  M+H 394.3 乙酰肼 1，2
异烟酸(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-酰肼三氟-乙酸盐(1∶1) M+H 457.3 异烟酸酰肼 1，2
(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸苯基酰胺  M+H 471-2 苯基酰胺羧酸 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-二甲氨基乙酰基-酰肼三氟-乙酸盐(1∶1) M+H 437.3 二甲氨基乙酰肼 1，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’，N’-二-(4-甲基-苯磺酰  M+NH4677.3 甲苯-4-磺酰肼 3，2
基)-酰肼
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4537.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.碘甲烷 3，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷2-羧酸N，N’-二甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 534.2 1.甲苯-4-磺酰肼；2.碘甲烷 3，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，4-二氟-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4545.1 2，4-二氟磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2-氟-苯磺酰基)-酰肼 M+H 510.2 2-氟-苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-氟-苯磺酰基)-酰肼 M+H 510.2 4-氟-苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N，N’-二-(4-氟-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4685.2 4-氟-苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲磺酰基-酰肼 M+NH4447.2 甲磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-噻吩-2-磺酰基-酰肼 M+H 498.0 2-噻吩磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-N-[4-[N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼基磺酰基]-苯基]-乙酰胺 M+NH4566.1 N-乙酰基对氨基苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-肼羧酸二甲酰胺 M+H459.3 N，N-二甲氨磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲磺酰基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4569.7 4-甲磺酰基苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯 M+H 511.2 3，5-二甲基异 4，5，2
烷-2-羧酸N’-(3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰基)-酰肼 噁唑-4-磺酰氯
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N，N’-二-(3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰基)-酰肼 M+H 670.1  3，5-二甲基异噁唑-4-磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丙烷磺酰基-酰肼 M+NH4475.2 异丙基磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(3-氟-苯磺酰基)-酰肼 M+H 510.3  3-氟-苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’N’-二-(3-氟-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4684.9  3-氟-苯磺酰氯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-环丙基甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 558.1 1.甲苯-4-磺酰肼2.溴甲基环丙烷 3，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-酰肼 M+H 478.2 α-溴代-2，5-二氟甲苯 4，5，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-N’-(2，4，5-三氟-苄基)-酰肼 M+NH4667.1 1.甲苯-4-磺酰肼2.2，4，5-三氟苄基溴 3，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 632.0 1.甲苯-4-磺酰氯2.2，5-三氟苄基溴 3，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丙基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 548.1 1.甲苯-4-磺酰肼2.碘代异丙烷 3，6，2
(2S，4R)-[N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N-(4-甲基-苯磺酰 M+H 564.1 1.甲苯-4-磺酰肼 3，6，2
基)-肼基]-乙酸 2.溴乙酸叔丁酯
(2S，4R)-4-巯基-2-[N’-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基羰基]-吡咯烷-1-羧酸苄酯 M-H 448.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.苄氧基碳酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2，6-二氟-苯甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 454.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.2，6-二氟-苯甲酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 505.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.8-喹啉磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-2-[N’-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基羰基]-吡咯烷-1-羧酸丁酯 M-H 414.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.氯甲酸丁酯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-2-[N’-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基羰基]-吡咯烷-1-磺酸酰胺 M-H 393.0 1.甲苯-4-磺酰肼2.氯-磺酸酰胺 3，7，2
(2S，4R)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4549.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.联苯基-4-磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4491.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.3-氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4491.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.2-氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2，4，5-三氟-苯磺酰 M+NH4 1.甲苯-4-磺酰 3，7，2
基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 527.3 肼2.2，4，5-氟-苯磺酰氯
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-苯氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4565.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-苯氧基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 546.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.联苯基-4-磺酰氯3.碘甲烷 3，7，6，2
(2S，4R)-1-(3-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 488.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.3-氟-苯磺酰氯  3.碘甲烷 3，7，6，2
(2S，4R)-1-(2-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 488 1.甲苯-4-磺酰肼2.2-氟-苯磺酰氯  3.碘甲烷 3，7，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2，4，5-三氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.2-氟-苯磺酰氯3.碘甲烷 3，7，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-苯氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H 562 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-苯氧基-苯磺酰氯3.碘甲烷 3，7，6，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-丙基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 496.1 1.甲苯-4-磺酰肼 2.4-丙基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰 M-H 473.0 1.甲苯-4-磺 3，7，2
基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 酰肼2.3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰氯
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-甲磺酰基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 532.0 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-甲磺酰基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-噻吩-2-磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 460.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.噻吩-2-磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-2-[N’-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基羰基]-吡咯烷-1-磺酸二甲基酰胺 M-H 421.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.氯磺酸二甲基酰胺 3，7，2
(2S，4R)-1-(4-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 472.1 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-异丙磺酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 420.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.异丙磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2，4-二氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 490.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.2，4-二氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 544.0 1.甲苯-4-磺酰肼2.2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-甲磺酰基-吡咯烷- M-H 392.1 1.甲苯-4-磺 3，7，2
2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 酰肼2.甲磺酰氯
(2S，4R)-1-(2，5-二氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 490.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.2，5-二氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 468.1 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-甲基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-N-[4-[4-巯基-2-[N’-(4-甲基-苯磺酰基)-肼羰基]-吡咯烷-1-磺酰基]-苯基]-乙酰胺 M-H 511.2 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-乙酰胺-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 526.0 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-丁氧基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2-萘-1-基-乙基磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M-H 526.0 1.甲苯-4-磺酰肼2.2-萘-1-基-乙基磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(4-氯-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4507.3 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-氯-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.4-三氟甲基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2-甲基-1-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰  M+NH4487.4 1.甲苯-4-磺酰肼2.2-甲 3，7，2
基)-酰肼  基-苯磺酰氯
(2S，4R)-1-(萘-1-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+H506.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.萘-1-磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-苯基甲磺酰基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4487.4  1.甲苯-4-磺酰肼2.苯基甲磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2，6-二氯-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.2，6-二氯-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.4  1.甲苯-4-磺酰肼 2.2-三氟甲基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3-甲基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4487.4  1.甲苯-4-磺酰肼2.3-甲基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3-氯-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4507.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.3-氯-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2-氯-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4507.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.2-氯-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3，4-二氯-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.3，4-二氯-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(4-甲氧基-苯磺酰  M+NH4  1.甲苯-4-磺 3，7，2
基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼  503.4  酰肼2.4-甲氧基-苯磺酰氯
(2S，4R)-4-巯基-1-(3-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4541.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.3-三氟甲基-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-苯磺酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4473.4  1.甲苯-4-磺酰肼2.苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(3，4-二氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4509.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.3，4-二氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-1-(2，6-二氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4509.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.2，6-二氟-苯磺酰氯 3，7，2
(2S，4R)-4-巯基-1-(2，3，4-三氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼 M+NH4527.3  1.甲苯-4-磺酰肼2.2，3，4-三氟-苯磺酰氯 3，7，2
实施例A
以常规方式加工含有下列成分的片剂：
成分 每片剂量
化学式I的化合物 10.0～100.0mg
乳糖 125.0mg
玉米淀粉 75.0mg
滑石粉 4.0mg
硬脂酸镁 1.0mg
实施例B
以常规方式加工含有下列成分的胶囊：
成分 每个胶囊剂量
化学式I的化合物 25.0mg
乳糖 150.0mg
玉米淀粉 20.0mg
滑石粉 5.0mg
实施例C
注射液可具有下列组分：
化学式I的化合物 3.0mg
明胶 150.0mg
苯酚 4.7mg
注射液用水 加到1.0ml
实施例D
500mg化学式I的化合物悬浮在3.5ml Myglyol 812和0.08g苄醇中。悬浮液被充入一个带有剂量阀门的容器中。通过阀门在压力下在容器中充入5.0g氟里昂12。通过振动使氟里昂溶于Myglyol-苄醇混合物中。此喷雾容器含有可单独使用的大约100次单次剂量。

Claims (20)

1.通式I的化合物，或它们的药用盐：
Figure C018130480002C1
其中：
R1是氢；
R2是烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、氨基或二烷基氨基；
R3是氢、烷基、芳基磺酰基或杂芳基磺酰基；
R4是氢、芳烷基、烷基、环烷基烷基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、羧烷基；
R5是烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、杂芳基羰基、杂芳基烷基羰基、(单-或二烷基氨基)-烷基羰基、(单-和二烷基)氨基磺酰基、芳氨基羰基、烷基、烷基羰基或芳基烷基；
X是-S(O)2-、-C(O)-或C(O)-O-；
其中：
术语“烷基”，单独地或结合的，是指含有最多7个碳原子的直-链或支-链烷基；
术语“卤素”指氟、溴、氯和碘；
术语“烷基羰基”，单独的或结合的，是指从链烷羧酸衍生的酰基，即烷基-C(O)-，其中术语“烷基”如上所定义；
术语“环烷基”，表示有3～8个碳原子的饱和环烃基团；
R2中的术语“芳基”，单独的或结合的，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，其任选被一个或多个独立地选自卤素、烷基、烷氧基、苯基、苯氧基、三氟甲基、烷基磺酰基、烷基酰氨基和烷氧基的基团所取代；
R3中的术语“芳基”，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环；
R4中的术语“芳基”，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，其任选被一个或多个独立地选自卤素、烷基、烷基氨基和烷基磺酰基的基团所取代；
R5中的术语“芳基”，指芳香族碳环基团，即芳香族或部分芳香族的6元或10元环，其任选被一个或多个独立地选自卤素和烷基的基团所取代；
术语“杂芳基”，单独的或结合的，指一价单-或二环芳香族基团，它具有5～10个环原子，并含有一个到三个杂原子、任选被苯基单-、双-或三-取代。
2.根据权利要求1的化合物，其中R2是芳基或杂芳基。
3.根据权利要求1或2的化合物，其中R2是芳基。
4.根据权利要求1～3中任意一项的化合物，其中R2是萘基或苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代或被一个苯基取代。
5.根据权利要求1～4中任意一项的化合物，其中R2是萘基、2，3，4，5，6-五氟苯基或联苯基。
6.根据权利要求1～5中任意一项的化合物，其中R3是氢或烷基。
7.根据权利要求1～6中任意一项的化合物，其中R3是氢。
8.根据权利要求1～7中任意一项的化合物，其中R4是氢、芳烷基、烷基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、环烷基烷基或羧烷基。
9.根据权利要求1～8中任意一项的化合物，其中R4是氢、烷基、环烷基、羧烷基或芳烷基。
10.根据权利要求1～9中任意一项的化合物，其中R4是氢、烷基或芳基烷基。
11.根据权利要求1～10中任意一项的化合物，其中R4是氢、2，4，5-三氟苄基、2，4-二氟苄基、苄基、甲基、乙基、异丙基、异丁基、苄基或HO2C-CH2-、或环烷基丙基甲基。
12.根据权利要求1～11中任意一项的化合物，其中R5是芳基磺酰基、芳烷基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基。
13.根据权利要求1～12中任意一项的化合物，其中R5是4-甲基-苯磺酰基、苄基、4-甲氧基苯磺酰基、(1H-吲哚-3-基)乙酰基、噻吩-2-基、或3，5-二甲基-异噁唑-4-磺酰基。
14.根据权利要求1～13中任意一项的化合物，其中X是-SO2-。
15.根据权利要求1～14中任意一项的化合物，其化学式为：
Figure C018130480004C1
16.根据权利要求1～15中任意一项的化合物，其中
R1是氢；
R2是萘基或苯基，其中苯基任选地被一个或多个氟取代或被一个苯基取代；
R3是氢或烷基；
R4是氢、烷基或芳基烷基；
R5是芳基磺酰基、芳烷基、杂芳基烷基羰基、杂芳基磺酰基；及
X是-SO2-。
17.根据权利要求1～16中任意一项的化合物，选自：
a)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丁基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
b)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
c)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-酰肼；
d)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
e)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
f)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苯磺酰基-酰肼；
g)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼；
h)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-[(1H-吲哚-3-基)-乙酰基]-酰肼；
i)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-噻吩-2-磺酰基-酰肼；
j)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(3，5-二甲基异噁唑-4-磺酰基)-酰肼；
k)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-环丙基甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
l)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-N’-(2，4，5-三氟-苄基)-酰肼；
m)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(2，5-二氟-苄基)-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
n)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-异丙基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
o)(2S，4R)-[N’-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-N-(4-甲基-苯磺酰基)-肼基]-乙酸；
p)(2S，4R)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸N’-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
q)(2S，4R)-4-巯基-1-(2，3，4，5，6-五氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；
r)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N’-苄基-N’-(4-甲氧基-苯磺酰基)-酰肼；
s)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼；及
t)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸N-甲基-N’-苄基-N’-(4-甲基-苯磺酰基)-酰肼。
18.一种药物组合物，它含有根据权利要求1～17中任意一项的化合物及一种或多种药用赋形剂。
19.权利要求1～17任意一项的化合物作为活性成分在制造药物中的用途，这些药物用于预防和治疗由内皮素-转变酶活性引起的一些疾病，尤其是心肌局部缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺部高压、哮喘、大脑血管痉挛、蛛网膜下腔出血、惊厥前期、肾脏疾病、动脉硬化症、伯格氏病，高安氏动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠失调、内毒素休克和败血病，及用于创伤治疗和控制月经、青光眼、与抑制细胞生长有关的疾病、眼科和大脑保护性适应症及器官保护的用途。
20.一种制备权利要求1～17中任意一项定义的化合物的方法，该方法包括将化学式III的化合物
其中R1、R2和X的定义如上文，及A是HS-保护基团，
a)与HNR3NR4R5反应以引入酰肼；或
b)HNR3NR4R5中R5为保护基团，接着转换或引入R3和R4；
可任选地接着转换R5和/或R2-X基团为不同的R5和/或R2-X基团、和脱保护基及释放硫醇，及其中R3、R4和R5的定义与权利要求1所定义的相同。
CNB018130488A 2000-07-19 2001-07-11 用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷－2－羧酸酰肼衍生物 Expired - Fee Related CN1318402C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP00114948 2000-07-19
EP00114948.3 2000-07-19

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1443163A CN1443163A (zh) 2003-09-17
CN1318402C true CN1318402C (zh) 2007-05-30

Family

ID=8169225

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB018130488A Expired - Fee Related CN1318402C (zh) 2000-07-19 2001-07-11 用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷－2－羧酸酰肼衍生物

Country Status (18)

Country Link
US (1) US6444829B1 (zh)
EP (1) EP1317428B1 (zh)
JP (1) JP2004504298A (zh)
KR (1) KR100580056B1 (zh)
CN (1) CN1318402C (zh)
AR (1) AR033543A1 (zh)
AT (1) ATE323673T1 (zh)
AU (1) AU2001276396A1 (zh)
BR (1) BR0112543A (zh)
CA (1) CA2415665A1 (zh)
DE (1) DE60118941T2 (zh)
ES (1) ES2261443T3 (zh)
MX (1) MXPA03000363A (zh)
PA (1) PA8522401A1 (zh)
PE (1) PE20020339A1 (zh)
UY (1) UY26844A1 (zh)
WO (1) WO2002006224A1 (zh)
ZA (1) ZA200300172B (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6589997B2 (en) * 2001-06-29 2003-07-08 North Shore-Long Island Jewish Health System Small-molecule modulators of hepatocyte growth factor/scatter factor activities
CN1294120C (zh) * 2003-10-21 2007-01-10 山东大学 吡咯烷类基质金属蛋白酶抑制剂及其应用
AT509045B1 (de) 2010-01-29 2011-06-15 Planta Naturstoffe Vertriebsges M B H Verbindungen zur behandlung von asthma bronchiale
CN103145572A (zh) * 2013-03-20 2013-06-12 康化（上海）新药研发有限公司 天然产物氯化γ-正缬氨酸盐酸盐的不对称合成方法
CN105712910B (zh) * 2016-03-08 2017-06-06 北京化工大学 （n‑芳基亚磺酰基）磺酰肼及其制备方法
WO2021029158A1 (ja) * 2019-08-09 2021-02-18 サンアプロ株式会社 スルホンアミド化合物、非イオン系光酸発生剤、およびフォトリソグラフィー用樹脂組成物
CN113030292A (zh) * 2021-01-29 2021-06-25 京博农化科技有限公司 一种对三氟甲氧基苯胺基甲酰肼含量的分析方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US493333A (en) * 1893-03-14 Air-heating furnace
CN1232451A (zh) * 1996-08-28 1999-10-20 普罗克特和甘保尔公司 取代的环状胺金属蛋白酶抑制剂

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1283906C (en) * 1983-05-09 1991-05-07 Makoto Sunagawa .beta.-LACTAM COMPOUNDS AND PRODUCTION THEREOF
IL117440A0 (en) * 1995-03-31 1996-07-23 Pfizer Pyrrolidinyl hydroxamic acid compounds and their production process

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US493333A (en) * 1893-03-14 Air-heating furnace
CN1232451A (zh) * 1996-08-28 1999-10-20 普罗克特和甘保尔公司 取代的环状胺金属蛋白酶抑制剂

Also Published As

Publication number Publication date
MXPA03000363A (es) 2003-05-27
CN1443163A (zh) 2003-09-17
DE60118941T2 (de) 2006-12-21
BR0112543A (pt) 2003-07-01
US6444829B1 (en) 2002-09-03
PE20020339A1 (es) 2002-04-23
US20020040048A1 (en) 2002-04-04
PA8522401A1 (es) 2002-09-30
UY26844A1 (es) 2002-01-31
EP1317428A1 (en) 2003-06-11
ZA200300172B (en) 2004-04-07
KR100580056B1 (ko) 2006-05-12
KR20030024797A (ko) 2003-03-26
AR033543A1 (es) 2003-12-26
DE60118941D1 (de) 2006-05-24
JP2004504298A (ja) 2004-02-12
AU2001276396A1 (en) 2002-01-30
CA2415665A1 (en) 2002-01-24
WO2002006224A1 (en) 2002-01-24
ATE323673T1 (de) 2006-05-15
EP1317428B1 (en) 2006-04-19
ES2261443T3 (es) 2006-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6884801B2 (ja) 血漿カリクレインインヒビターとしてのピラゾール誘導体
TWI353985B (en) Novel compounds
CN1918131B (zh) 谷氨酰胺酰基环化酶抑制剂
US7273885B2 (en) Inhibitors of serine proteases, particularly HCV NS3-NS4A protease
EP1009758B1 (en) Meta-benzamidine derivatives as serine protease inhibitors
JP5518997B2 (ja) カテプシン阻害薬としてのプロリン誘導体
CN103635489B (zh) 血浆前激肽释放酶结合蛋白
TWI353977B (en) Novel sulphonylpyrroles
TWI228123B (en) Antithrombotic compounds
RU2475494C2 (ru) Хиноксалинилмакроциклические ингибиторы серинпротеазы вируса гепатита с
ES2327819T3 (es) Imidazolidinonas como inhibidores de la serina proteasa ns3 del virus de la hepatitis c.
TWI222441B (en) Heteroaryl aminoguanidines and alkoxyguanidines and their use as protease inhibitors
CN101273028B (zh) 丙型肝炎病毒的大环抑制剂
TW523510B (en) Vitronectin receptor antagonists, their preparation and their use
JPH07500341A (ja) ＧＰＩＩ↓ｂＩＩＩ↓ａ受容体特異性非ペプチド性インテグリン阻害剤
EA024109B1 (ru) Ингибиторы протеинкиназ
CN1997640A (zh) 作为代谢调节剂的经取代芳基和杂芳基衍生物及其相关病症的预防和治疗
CA2557247A1 (en) Compounds as inhibitors of hepatitis c virus ns3 serine protease
TW200902044A (en) Sulfur compounds as inhibitors of hepatitis C virus NS3 serine protease
MXPA02010375A (es) Inhibidores macrociclicos de la ns3-serina proteasa del virus de la hepatitis c que comprenden porciones alquil y arilalanina p2.
JP2003500376A (ja) Ｘａ因子の阻害剤
JP2009275048A (ja) Ｃ型肝炎ウイルスのｎｓ３セリンプロテアーゼの大環状インヒビター
WO1991015487A1 (fr) Nouveau derive de 4-1-benzoxazine-4h-3,1
US6740682B2 (en) Meta-benzamidine derivatives as serine protease inhibitors
CN1318402C (zh) 用作金属蛋白酶抑制剂的吡咯烷－2－羧酸酰肼衍生物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20070530

Termination date: 20090711