CN1303877C - 菹草石芽组织培养方法 - Google Patents
菹草石芽组织培养方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1303877C CN1303877C CN200510065450.XA CN200510065450A CN1303877C CN 1303877 C CN1303877 C CN 1303877C CN 200510065450 A CN200510065450 A CN 200510065450A CN 1303877 C CN1303877 C CN 1303877C
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bud
- clint
- medium
- curly pondweed
- water
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 241000555922 Potamogeton crispus Species 0.000 title claims description 11
- 238000012258 culturing Methods 0.000 title claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 19
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 11
- 240000001085 Trapa natans Species 0.000 claims description 16
- 235000009165 saligot Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000005556 hormone Substances 0.000 claims description 8
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 claims description 8
- 239000006870 ms-medium Substances 0.000 claims description 7
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 6
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 claims description 4
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 4
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 2
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 abstract description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 abstract description 5
- 230000035784 germination Effects 0.000 abstract description 3
- 238000004161 plant tissue culture Methods 0.000 abstract description 2
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 abstract 2
- 241000238557 Decapoda Species 0.000 abstract 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 8
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000756999 Potamogetonaceae Species 0.000 description 2
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000012851 eutrophication Methods 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- MUKYLHIZBOASDM-UHFFFAOYSA-N 2-[carbamimidoyl(methyl)amino]acetic acid 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoic acid Chemical group NC(=N)N(C)CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O MUKYLHIZBOASDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000000050 nutritive effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000012090 tissue culture technique Methods 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
Abstract
本发明属于植物组织培养技术领域。运用菹草石芽组培快繁技术,大规模生产菹草优质组培苗,以克服该植物种子在自然条件下极难萌发、石芽生长受季节限制且萌发率低,阻滞大规模繁殖推广的弊端,适应我国恢复水生植被、发展草食性鱼类或蟹类的养殖和净化水质,以及湖泊和池塘引种的迫切需要,从而恢复良好的水生生态环境,推动我国渔业的可持续发展。
Description
一、技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域。
二、背景技术
我国水域生态系统的污染严重,水环境质量的下降对水生生物资源造成了严重破坏,要恢复水生生态系统的平衡,净化水质,促进渔业的发展,引种水体净化植物,具有重要意义。
菹草(Potamogeton crispus L.)为眼子菜科(Potamogetonaceae)多年生沉水草本植物,其营养价值和经济价值较大。菹草对水域富营养化有较强的适应能力,在受生活污水较严重污染的水体中亦能茂密生长,具有净化水体的作用,是冬季至初夏期间净化水质的主要水生植物。但由于种子在自然条件下极难萌发、石芽生长受季节限制且萌发率低,难以大规模繁殖推广。
目前国内外尚无菹草组织培养技术研究的相关报道。
三、发明内容
本发明的目的是:发明一种大规模生产菹草优质组培苗的技术,以克服该植物种子在自然条件下极难萌发、石芽生长受季节限制且萌发率低,阻滞大规模繁殖推广的弊端,适应我国恢复水生植被、发展草食性鱼类或蟹类的养殖和净化水质,湖泊和池塘引种的迫切需要,推动我国渔业的可持续发展。
本发明的技术方案是:
利用菹草石芽进行不定芽诱导培养,通过激素调控,可使其不定芽诱导频率提高至100%。
无菌体系的建立是决定其能否顺利进行分化诱导的关键。通过调整改善外植体灭菌处理条件和培养基状态,在遏止外植体的褐化和污染方面取得了成功,促使其继代增殖的正常进行,从而获得快速繁殖的不定芽。
本发明建立了菹草优质快繁系,从石芽转入分化,植株再生频率为100%。
在以上研究的基础上,本项发明建立了菹草不定芽的繁殖方法如下:
(1)在添加BA和KT激素条件下由菹草外植体石芽的诱导不定芽;
(2)在添加BA激素条件下,进行不定芽的继代培养;
(3)在添加NAA激素条件下,培养出完整的生根的再生植株
该繁殖方法性能稳定,试验重复性好,试管苗分化良好。
各培养阶段的培养基配方和激素配比如下表:
菹草石芽培养各阶段的培养基配方
组培阶段 | 培养基组成成分 |
不定芽诱导 | BA 0.5mg/L,KT 1.0mg/L |
愈伤组织继代 | BA 0.3mg/L |
植株生根 | NAA 0.1mg/L |
本发明效果是:以石芽为外植体不定芽诱导频率达到100%;试管苗的生根率达90%以上。
通过石芽的诱导培养研究,大规模生产菹草的试管苗,并用组织培养等技术手段改良菹草的农艺品质,以利于推广开发。如有足够投资,用此技术方案,可年生产菹草试管苗100万株以上。菹草经济价值较大,首先因其草质嫩脆而为草食性鱼类的良好饵料,石芽含有丰富的核黄素有助于蛋黄质量的提高而作为鸭等禽类的饲料,菹草丛生之处是蟹类的良好栖息地和脱壳期与蟹殖期的隐蔽场所和上等农田绿肥;其次是具一定的营养价值:物质含量中粗蛋白质占26.72%,粗脂肪占5.48%,粗纤维占15.78%,无氮浸出物占35.67%。更重要的是菹草对水域富营养化有较强的适应能力,在受生活污水较严重污染的水体中亦能茂密生长,具有净化水体的作用,是冬季至初夏期间净化水质的主要水生植物。兼有优良饲料、恢复水生植被和净化水体的特点,使之在湖泊与池塘发展可持续的渔业系统的需求方面将有所作为。
四、具体实施方式
1.建立无菌体系
将菹草石芽用自来水洗净后,在70%乙醇中浸泡30s,用0.1%HgCl2水溶液,含少量吐温80,灭菌9min,再用无菌蒸馏水洗涤5次。将灭菌后的石芽接种到附加3%蔗糖的不加外源激素的MS培养基上,在温度为25土2℃和光强为2000lx,每日光照12h的条件下建立无菌体系。
2.菹草石芽组织培养方法
利用菹草石芽进行不定芽诱导培养,通过激素调控,可使其不定芽诱导频率提高至100%。
无菌体系的建立是决定其能否顺利进行分化诱导的关键。通过调整改善外植体灭菌处理条件和培养基状态,在遏止外植体的褐化和污染方面取得了成功,促使其继代增殖的正常进行,从而获得快速繁殖的不定芽。
具体实施方法如下:
(1)不定芽诱导
无菌的石芽外植体切成3cm左右的小段,接种在添加BA0.5mg/L,KT1.0mg/L的MS培养基上,在温度为25±2℃、光强为2000lx、每日光照12h条件下进行菹草外植体石芽的不定芽诱导。
(2)不定芽的继代培养
将诱导出的丛状不定芽分离成小丛,在添加BA 0.3mg/L的MS培养基上,进行不定芽的继代培养。
(3)生根培养
丛状不定芽分离并切成3cm左右的单个植株,在添加NAA 0.1mg/L条件下,培养出完整的生根的再生植株,培养条件温度25±2℃和光强2000lx,每日光照12h。
该繁殖方法性能稳定,试验重复性好,试管苗分化良好。以石芽为外植体不定芽诱导频率达到100%;试管苗的生根率达90%以上。
Claims (1)
1、一种菹草石芽组织培养方法,其特征是用菹草石芽进行不定芽诱导培养,培养出完整的菹草试管苗,其方法为:
(1)将菹草石芽用自来水洗净后,在70%乙醇中浸泡30s,用含吐温80的0.1%HgCl2水溶液灭菌9min,再用无菌蒸馏水洗涤5次,将灭菌后的石芽接种到附加3%蔗糖的不加外源激素的MS培养基上,在温度为25±2℃和光强为2000lx,每日光照12h的条件下建立无菌体系;
(2)在添加BA 0.5mg/L和KT1.0mg/L的MS培养基,由菹草外植体石芽诱导不定芽;
(3)添加BA0.3mg/L的MS培养基,进行不定芽的继代培养;
(4)在添加NAA0.1mg/L的MS培养基,培养出完整的生根的再生植株。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN200510065450.XA CN1303877C (zh) | 2003-12-08 | 2003-12-08 | 菹草石芽组织培养方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN200510065450.XA CN1303877C (zh) | 2003-12-08 | 2003-12-08 | 菹草石芽组织培养方法 |
Related Parent Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNB031010652A Division CN1257642C (zh) | 2002-02-06 | 2003-01-09 | Cmos图像传感器 |
CNB2003101065594A Division CN1237868C (zh) | 2003-12-08 | 2003-12-08 | 菹草胚培养方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1701661A CN1701661A (zh) | 2005-11-30 |
CN1303877C true CN1303877C (zh) | 2007-03-14 |
Family
ID=35631757
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200510065450.XA Expired - Fee Related CN1303877C (zh) | 2003-12-08 | 2003-12-08 | 菹草石芽组织培养方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1303877C (zh) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102450149A (zh) * | 2010-11-01 | 2012-05-16 | 南京中科水治理工程有限公司 | 一种菹草扦插繁殖方法 |
CN102090182B (zh) * | 2010-12-27 | 2012-05-23 | 中国科学院测量与地球物理研究所 | 一种菹草石芽的播种方法 |
CN103053422B (zh) * | 2013-01-09 | 2014-03-26 | 成都华都农业发展有限责任公司 | 繁殖穿叶眼子菜的方法 |
CN103734017B (zh) * | 2014-01-22 | 2016-04-20 | 云南大学 | 一种菹草的组织培养方法 |
CN106954549B (zh) * | 2017-02-27 | 2019-05-28 | 水生藻安生物科技(武汉)有限公司 | 一种篦齿眼子菜组织培养与快速繁殖方法 |
CN111631136B (zh) * | 2020-07-14 | 2022-11-25 | 安顺职业技术学院 | 一种眼子菜休眠芽的组织培养与快速繁殖方法 |
-
2003
- 2003-12-08 CN CN200510065450.XA patent/CN1303877C/zh not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN1701661A (zh) | 2005-11-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101611697B (zh) | 甘薯商19的脱毒快繁方法 | |
CN102870680B (zh) | 一种适宜脱毒兔眼蓝莓的高效快繁方法 | |
CN109479715B (zh) | 利用组培苗叶片快速繁育大花绣球无尽夏的方法 | |
CN103380730A (zh) | 一种杜梨组培快繁方法 | |
CN1806512A (zh) | 绿玉树扦插繁殖和组织培养快速繁殖的方法 | |
CN101836585A (zh) | 一种大花红景天的组培育苗方法 | |
CN1303877C (zh) | 菹草石芽组织培养方法 | |
CN108243959B (zh) | 一种以黄粱木茎段为外植体的高效再生方法 | |
CN102138532A (zh) | 太和贡椿组织培养繁殖种苗技术 | |
CN101491213B (zh) | 淡水芦苇非愈伤组织培养方法 | |
CN104094848B (zh) | 油桐下胚轴愈伤组织诱导及高效再生植株的方法 | |
CN106613079A (zh) | 一种半夏种茎生产方法 | |
CN112425506A (zh) | 一种黄金艾草的组织培养快速繁殖方法 | |
CN1237868C (zh) | 菹草胚培养方法 | |
CN105052740B (zh) | 一种利用橡胶草叶片再生植株的方法 | |
CN1586166A (zh) | 大花蕙兰优质种苗快速繁殖方法 | |
CN103238519A (zh) | 一种柳枝稷组织培养快速育苗方法 | |
CN115005105A (zh) | 一种蓝莓组织培养方法 | |
CN115152629A (zh) | 一种树莓组织培养方法 | |
CN1293801C (zh) | 一种快速繁殖枳橙的方法 | |
CN113016610A (zh) | 一种藜麦下胚轴离体再生方法 | |
CN100433971C (zh) | 苦草球茎离体培养再生方法 | |
CN116602215B (zh) | 一种高效诱导达乌里胡枝子愈伤组织再生体系的建立方法 | |
CN1285259C (zh) | 非洲蟛蜞菊的繁殖方法 | |
CN104429963B (zh) | 一种马蔺游离花粉培养方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
C17 | Cessation of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20070314 Termination date: 20100108 |