CN1293801C

CN1293801C - 一种快速繁殖枳橙的方法

Info

Publication number: CN1293801C
Application number: CN 200510031836
Authority: CN
Inventors: 邓子牛; 胡春华
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2005-07-08
Filing date: 2005-07-08
Publication date: 2007-01-10
Anticipated expiration: 2025-07-08
Also published as: CN1709044A

Abstract

本发明公开了一种快速繁殖枳橙的方法，其包括如下步骤：(1)嫁接植株带节茎段外植体芽的诱导萌发诱导培养基配方为MS+BA 0.5～1.5mg·L^-1；(2)芽的增殖继代培养使用培养基MS+BA 0.2～1mg·L^-1+NAA 0.01～0.1mg·L^-1；(3)生根培养与移栽以1/2MS+NAA 0.2～0.5mg·L^-1+0.2%活性炭诱导增殖芽生根，培养温度24±2℃，每天连续光照10-14小时，光照强度为1000～1500lx；培养20～35天后，取出试管苗移栽，移栽基质配方为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶0.8-1.2。应用本发明繁殖枳橙，获得的再生植株质量高，繁殖系数可达3以上，能达到工厂化繁殖柑橘砧木的技术要求。

Description

一种快速繁殖枳橙的方法

技术领域

本发明涉及一种快速繁殖枳橙的方法，尤其是涉及一种以嫁接植株为外植体及连续继代增殖培养的方法。

背景技术

枳橙[C.sinensis(L.)Osb×Poncirus trifoliate(L.)Raf.]为甜橙与枳的杂种，是世界各柑橘生产国广泛应用的砧木，生长势比枳壳强，继承了枳壳抗脚腐病、抗衰退病的特性，并具有耐旱、耐寒、耐贫瘠，对土壤适应性广、与大多数商用品种亲和力强等特征。

在柑橘离体培养快速繁殖方面，目前多数利用实生苗胚轴、子叶培养，仅有少数采自嫁接树茎尖或茎段为外植体，这主要是因为，芽的分化质量差，分化系数低，培养过程中容易产生愈伤组织，特别是在芽的增殖培养过程中产生愈伤组织成苗，往往产生性状变异，出现良种种性不稳定的问题，达不到工厂化繁育柑橘苗木的技术要求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种芽的分化质量好，分化系数高，良种种性稳定的以嫁接植株为外植体及连续继代增殖培养的枳橙组织培养快速繁殖方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的。

其包括如下步骤：(1)嫁接植株带节茎段外植体芽的诱导萌发诱导培养基配方为MS+BA 0.5～1.5mg·L^-1(优选方案为MS+BA 1mg·L^-1)；(2)芽的增殖继代培养使用培养基MS+BA 0.2～1mg·L^-1+NAA 0.01～0.1mg·L^-1(优选方案为MS+BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.05mg·L^-1)连续继代增殖培养；(3)生根培养与移栽以1/2MS+NAA 0.2～0.8mg·L^-1+0.2％活性炭(优选方案为1/2MS+NAA 0.5mg·L^-1+0.2％活性炭)培养基诱导增殖芽生根，培养温度24±2℃，每天连续光照10-14小时，光照强度为1000～1500lx；培养20～35天后，取出试管苗移栽，移栽基质配方为白砂土∶草炭＝1∶0.8～1.2或者白砂土∶发酵棉籽壳＝1∶0.8-1.2(优选方案为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶1)。

本发明的优点是：枳橙嫁接树茎段外植体诱导芽质量好，芽能在增殖培养基连续多代增殖，再生植株无变异，繁殖系数可达3以上，达到工厂化繁育柑橘苗木的技术要求。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步描述。

实施例1

(1)外植体芽的诱导萌发取带芽单节茎段作外植体诱导芽的萌发，枝条去叶、刺后，剪成5cm长的茎段，自来水冲洗60min，在超净工作台上用70％酒精表面消毒1min，再用0.1％的升汞溶液消毒12min，倒去升汞溶液，无菌水冲洗3～4次；将经过处理的茎段置于超净工作台上，用解剖刀切成1.5cm长的单节带芽茎段，然后芽眼朝上，平放于培养基上进行培养；培养基配方为MS+BA 1mg·L^-1，培养温度24±2℃，每天连续光照12小时，光照强度为1200lx。接种7天后芽全部萌发，嫩芽整齐、健壮，生长速度快，15天可达1.5～2cm高。

(2)芽的增殖继代培养当芽萌发一个星期后，将嫩芽从基部切下，转入芽增殖培养基(MS+BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.05mg·L^-1)进行增殖培养；待形成丛芽后，分离成单芽，部分单芽继续增殖；在增殖继代培养条件下，接种芽基部产生大量丛芽，芽梢长势好，生长快，叶色浓绿，叶片舒展，有效新梢多，一个月即可继代一次，平均月增殖系数3.36。

(3)生根培养与移栽从增殖培养的嫩芽中选取生长健壮的芽梢，接种到生根培养基(1/2MS+NAA 0.5mg·L^-1+0.2％活性炭)进行生根培养；生根率能达到95～100％；培养30天后，取出试管苗，洗净培养基，转入装有白砂土与草炭(1∶1)的培养钵中，用塑料薄膜覆盖，在温室炼苗，成活率在90％以上；一个月后去膜，继续在温室中生长。

实施例2

(1)外植体芽的诱导萌发诱导培养基配方为MS+BA 0.5mg·L^-1，其它条件同实施例1，接种10天后芽全部萌发，20天可达1.5～2cm高；(2)芽的增殖继代培养继代培养基为MS+BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.02mg·L^-1，芽月增殖系数2.86；(3)生根培养与移栽从增殖培养的嫩芽中选取生长健壮的芽梢，接种到生根培养基(1/2MS+NAA 0.5mg·L^-1+0.2％活性炭)进行生根培养；生根率能达到95％；培养25天后，取出试管苗，洗净培养基，转入装有白砂土与发酵棉籽壳(1∶1)的培养钵中，用塑料薄膜覆盖，在温室炼苗，成活率92％。

实施例3

外植体芽的诱导萌发、芽的增殖继代培养同实施例1，生根培养基改为1/2MS+NAA 0.2mg·L^-1+0.2％活性炭，生根率为63％，培养30天后，取出试管苗，洗净培养基，转入装有白砂土与发酵棉籽壳(1∶1)的培养钵中，用塑料薄膜覆盖，在温室炼苗，成活率85％。

Claims

1、一种快速繁殖枳橙的方法，包括如下步骤：(1)嫁接植株带节茎段外植体芽的诱导萌发诱导培养基配方为MS+BA 0.5～1.5mg·L^-1；(2)芽的增殖继代培养使用培养基MS+BA 0.2～1mg·L^-1+NAA 0.01～0.1mg·L^-1连续继代增殖培养；(3)生根培养与移栽以1/2MS+NAA 0.2～0.8mg·L^-1+0.2％活性炭培养基诱导增殖芽生根，培养温度24±2℃，每天连续光照10-14小时，光照强度为1000～1500lx；培养20～35天后，取出试管苗移栽，移栽基质配方为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶0.8-1.2。

2、根据权利要求1所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述芽的诱导培养基配方为MS+BA 1.0mg·L^-1。

3、根据权利要求1或2所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述芽的增殖继代培养基配方为MS+BA 0.5mg·L^-1+NAA 0.05mg·L^-1。

4、根据权利要求1或2所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.5mg·L^-1+0.2％活性炭。

5、根据权利要求3所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.5mg·L^-1+0.2％活性炭。

6、根据权利要求1或2所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述移栽基质配方为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶1。

7、根据权利要求3所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述移栽基质配方为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶1。

8、根据权利要求4所述的快速繁殖枳橙的方法，其特征在于，所述移栽基质配方为白砂土∶草炭或发酵棉籽壳＝1∶1。