CN114793903A - 一种脱毒草莓种苗的繁育方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种脱毒草莓种苗的繁育方法，涉及草莓种苗繁育技术领域，由以下步骤组成：步骤一、挑选母株样本进行脱毒组培，制成初代脱毒草莓试管苗；步骤二、对初代脱毒草莓试管苗进行病毒检测，进行初代脱毒草莓试管苗的增殖培育，制成初代种苗；步骤三、对初代种苗进行增殖检测，检测无病毒后培养为生产种苗；步骤四、对草莓生产种苗进行定植扩繁，培育移栽后作为生产用苗进行种植。本发明通过采用热处理分生组织培养的技术手段，以脱毒为目的，结合多次反复的病毒鉴定，在确认已经把草莓体内的病毒彻底去除的情况下加速繁殖出大量生产种苗，并进一步定植扩繁出生产用苗，以供生产种植，从而降低繁育难度，减少培育的周期。

Description

一种脱毒草莓种苗的繁育方法

技术领域

本发明涉及草莓种苗繁育技术领域，具体涉及一种脱毒草莓种苗的繁育方法。

背景技术

草莓，多年生草本植物，高10-40厘米，茎低于叶或近相等，密被开展黄色柔毛，叶三出，小叶具短柄，质地较厚，倒卵形或菱形，上面深绿色，几无毛，下面淡白绿色，疏生毛，沿脉较密，叶柄密被开展黄色柔毛，聚伞花序，花序下面具一短柄的小叶，花两性，萼片卵形，比副萼片稍长，花瓣白色，近圆形或倒卵椭圆形，聚合果大，宿存萼片直立，紧贴于果实，瘦果尖卵形，光滑，花期4-5月，果期6-7月，脱毒草莓是取其分生区细胞先脱分化成具有全能性的愈伤组织，然后进行体外细胞培养，长成植株后再种，这样的草莓由于不产生毒素影响自己生长，所以可以长的更大不易烂，一般作物的脱毒苗都是当季栽培，收获后，需要使用新的脱毒苗种植下一茬，所以一般脱毒苗栽培都是一次性的，整体的培植成本较高，培育周期较长。

发明内容

本发明提供一种脱毒草莓种苗的繁育方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种脱毒草莓种苗的繁育方法，由以下步骤组成：

步骤一、挑选母株样本进行脱毒组培，制成初代脱毒草莓试管苗；

步骤二、对初代脱毒草莓试管苗进行病毒检测，进行初代脱毒草莓试管苗的增殖培育，制成初代种苗；

步骤三、对初代种苗进行增殖检测，检测无病毒后培养为生产种苗；

步骤四、对草莓生产种苗进行定植扩繁，培育移栽后作为生产用苗进行种植。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤一还包括有，选取草莓芽的分生组织尖端0.2-0.3mm的生长点作为母本样本，然后在无菌环境下进行热处理，热处理时培养箱中保持16-18h/天的光照时间，光照强度保持在6000-10000lux，处理温度以室温为起点，每天升高1度，至30℃后，每天升温0.5℃，到38℃±0.2℃时，开始计时，热处理期间应密切注意水分的管理，可以向珍珠岩中浇水保持空气相对湿度在50%-70%之间，在38℃高温条件下处理45-50天，去除母株样本中的病毒，将热处理后的母株样本置于培养基中进行初代脱毒草莓试管苗的培育，选取母本样本时，需选用不同品种，不同尖端长度的草莓芽的分生组织作为母本样本进行培育。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述培养基通常选用MS培养基，培养基中需添加生产调节剂，培养基的选用比重根据实际使用需求进行调控，同时MS培养基的pH值设置至5.7-5.9之间，并加入适量琼脂进行混合，MS培养基制成分装后需进行灭菌处理。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤二还包括有，检测选用PCR分子检测法，切取少量初代脱毒草莓试管苗组织进行检测，多次病毒检测确认无毒后，在实验室模拟草莓生长温、湿度及光照，稳定草莓生产环境，进行草莓的授粉，进行初代脱毒草莓试管苗的小批量增殖培育，获取初代种苗。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤三还包括有，将初代种苗进行热处理脱毒组培后，进行增殖检测，开始二次种植实验，稳定草莓性状，培育高质量生产种苗，多次进行草莓的脱毒培育，减少外界环境对种苗产生的影响，从而提高草莓产量，达到增产增收的效果。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤四还包括有，于实验室有机质土壤中模拟定植，进行草莓的扩繁培育，待草莓根系长度到达1.4-1.8cm时，将草莓种苗移栽至适宜自然环境中进行组合附基培育，培育5-8天，草莓种苗新根生出，新叶旺盛时，即获取生产用苗，进行大批量种植使用，定植扩繁移栽后，草莓繁殖快，不受环境影响，可快速移栽，适宜新型产业化的建设。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述草莓种苗移栽的自然环境为，温度20-25℃，土壤湿度50%-75%，空气湿度40%-60%，同时需注意通风，组合附基培育时，草莓根系需附着培养基于土壤中生长，另应避免阳光直射，遮光率在50%-65%间。

由于采用了上述技术方案，本发明相对现有技术来说，取得的技术进步是：

1、本发明提供一种脱毒草莓种苗的繁育方法，采用热处理分生组织培养的技术手段，以脱毒为目的，结合多次反复的病毒鉴定，在确认已经把草莓体内的病毒彻底去除的情况下加速繁殖出大量生产种苗，并进一步定植扩繁出生产用苗，以供生产种植，从而降低繁育难度，减少培育的周期。

2、本发明提供一种脱毒草莓种苗的繁育方法，多次进行草莓的脱毒培育，稳定草莓性状，减少外界环境对种苗产生的影响，进而提高种苗品质，从而提高草莓产量，达到增产增收的效果。

3、本发明提供一种脱毒草莓种苗的繁育方法，脱毒增殖培育后的草莓，相较常规种苗生长更加旺盛，染病率低，成活率高，而且果实色泽、大小、形状也更加优质，品相更加良好，此外，定植扩繁移栽后，草莓繁殖快，不受环境影响，可快速移栽，适宜新型产业化的建设。

附图说明

图1为本发明的工艺流程图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细说明：

实施例1

如图1所示，本发明提供了一种脱毒草莓种苗的繁育方法，由以下步骤组成：

步骤一、挑选母株样本进行脱毒组培，制成初代脱毒草莓试管苗，选取草莓芽的分生组织尖端0.2-0.3mm的生长点作为母本样本，然后在无菌环境下进行热处理，热处理时培养箱中保持16-18h/天的光照时间，光照强度保持在6000-10000lux，处理温度以室温为起点，每天升高1度，至30℃后，每天升温0.5℃，到38℃±0.2℃时，开始计时，热处理期间应密切注意水分的管理，可以向珍珠岩中浇水保持空气相对湿度在50%-70%之间，在38℃高温条件下处理45-50天，去除母株样本中的病毒，将热处理后的母株样本置于培养基中进行初代脱毒草莓试管苗的培育，选用MS培养基，培养基中需添加生产调节剂，培养基的选用比重根据实际使用需求进行调控，同时MS培养基的pH值设置至5.7-5.9之间，并加入适量琼脂进行混合，MS培养基制成分装后需进行灭菌处理，选取母本样本时，需选用不同品种，不同尖端长度的草莓芽的分生组织作为母本样本进行培育；

步骤二、对初代脱毒草莓试管苗进行病毒检测，进行初代脱毒草莓试管苗的增殖培育，制成初代种苗，检测选用PCR分子检测法，切取少量初代脱毒草莓试管苗组织进行检测，多次病毒检测确认无毒后，在实验室模拟草莓生长温、湿度及光照，稳定草莓生产环境，进行草莓的授粉，进行初代脱毒草莓试管苗的小批量增殖培育，获取初代种苗；

步骤三、对初代种苗进行增殖检测，检测无病毒后培养为生产种苗，将初代种苗进行热处理脱毒组培后，进行增殖检测，开始二次种植实验，稳定草莓性状，培育高质量生产种苗；

步骤四、对草莓生产种苗进行定植扩繁，培育移栽后作为生产用苗进行种植，于实验室有机质土壤中模拟定植，进行草莓的扩繁培育，待草莓根系长度到达1.4-1.8cm时，将草莓种苗移栽至适宜自然环境中进行组合附基培育，培育5-8天，草莓种苗新根生出，新叶旺盛时，即获取生产用苗，进行大批量种植使用，草莓种苗移栽的自然环境为，温度20-25℃，土壤湿度50%-75%，空气湿度40%-60%，同时需注意通风，组合附基培育时，草莓根系需附着培养基于土壤中生长，另应避免阳光直射，遮光率在50%-65%间。

实施例2

如图1所示，在实施例1的基础上，本发明提供一种技术方案：优选的，选取同一品种，同一草莓芽的分生组织尖端0.2mm的生长点十组，每五组作为一例，草莓培育例1为母本样本，草莓培育例2为对比样本，母本样本采用本繁育方法的热处理脱毒及繁育方法进行培育，对比样本不进行任何人为干预，即母本样本进行脱毒培育，对比样本不进行脱毒培育。

待到母本样本定植扩繁培育移栽时，将十组草莓生产用苗分别对比进行实验，获取对比样本感染病毒后产生的负面影响，根据实际培育对比发现，感染病毒的草莓生产用苗出现植株生长势衰退、产量下降和果实品质变劣的情况。

实施例3

如图1所示，在实施例1、实施例2的基础上，本发明提供一种技术方案：优选的，将实施例2中尚存活的样本进行实验室存留，进行多年种植的对比实验，发现未脱毒的草莓生产用苗出现严重的植株生长缓慢、叶子皱缩情况，而且果实畸形率较高，整体品质逐年变差，整体减产30％-70％，在第三年基本难以保证存活率，脱毒后的草莓生产用苗相较于未脱毒的草莓生产用苗，性状更加稳定，成活率更高，与实验的未脱毒的草莓生产用苗对比，整体存活率高85％-90％，此外，脱毒后的草莓生产用苗果实果形一致，饱满紧实，抗病性和耐热性更强，整体产量增产达30％-50％。

下面具体说一下该脱毒草莓种苗的繁育方法的工作原理。

如图1所示，选取草莓芽的分生组织尖端0.2-0.3mm的生长点作为母本样本，然后在无菌环境下进行热处理，热处理时培养箱中保持16-18h/天的光照时间，光照强度保持在6000-10000lux，处理温度以室温为起点，每天升高1度，至30℃后，每天升温0.5℃，到38℃±0.2℃时，开始计时，热处理期间应密切注意水分的管理，可以向珍珠岩中浇水保持空气相对湿度在50%-70%之间，在38℃高温条件下处理45-50天，去除母株样本中的病毒，将热处理后的母株样本置于培养基中进行初代脱毒草莓试管苗的培育，选用MS培养基，培养基中需添加生产调节剂，培养基的选用比重根据实际使用需求进行调控，同时MS培养基的pH值设置至5.7-5.9之间，并加入适量琼脂进行混合，MS培养基制成分装后需进行灭菌处理，然后对初代脱毒草莓试管苗进行病毒检测，进行初代脱毒草莓试管苗的增殖培育，制成初代种苗，检测选用PCR分子检测法，切取少量初代脱毒草莓试管苗组织进行检测，多次病毒检测确认无毒后，在实验室模拟草莓生长温、湿度及光照，稳定草莓生产环境，进行草莓的授粉，进行初代脱毒草莓试管苗的小批量增殖培育，获取初代种苗，对初代种苗进行增殖检测，检测无病毒后培养为生产种苗，将初代种苗进行热处理脱毒组培后，进行增殖检测，开始二次种植实验，稳定草莓性状，培育高质量生产种苗，对草莓生产种苗进行定植扩繁，培育移栽后作为生产用苗进行种植，于实验室有机质土壤中模拟定植，进行草莓的扩繁培育，待草莓根系长度到达1.4-1.8cm时，将草莓种苗移栽至适宜自然环境中进行组合附基培育，培育5-8天，草莓种苗移栽的自然环境为，温度20-25℃，土壤湿度50%-75%，空气湿度40%-60%，同时需注意通风，草莓种苗新根生出，新叶旺盛时，即获取生产用苗，进行大批量种植使用。

上文一般性的对本发明做了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之做一些修改或改进，这对于技术领域的一般技术人员是显而易见的。因此，在不脱离本发明思想精神的修改或改进，均在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：由以下步骤组成：

步骤一、挑选母株样本进行脱毒组培，制成初代脱毒草莓试管苗；

步骤二、对初代脱毒草莓试管苗进行病毒检测，进行初代脱毒草莓试管苗的增殖培育，制成初代种苗；

步骤三、对初代种苗进行增殖检测，检测无病毒后培养为生产种苗；

步骤四、对草莓生产种苗进行定植扩繁，培育移栽后作为生产用苗进行种植。

2.根据权利要求1所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤一还包括有，选取草莓芽的分生组织尖端0.2-0.3mm的生长点作为母本样本，然后在无菌环境下进行热处理，热处理时培养箱中保持16-18h/天的光照时间，光照强度保持在6000-10000lux，处理温度以室温为起点，每天升高1度，至30℃后，每天升温0.5℃，到38℃±0.2℃时，开始计时，热处理期间应密切注意水分的管理，可以向珍珠岩中浇水保持空气相对湿度在50%-70%之间，在38℃高温条件下处理45-50天，去除母株样本中的病毒，将热处理后的母株样本置于培养基中进行初代脱毒草莓试管苗的培育，选取母本样本时，需选用不同品种，不同尖端长度的草莓芽的分生组织作为母本样本进行培育。

3.根据权利要求2所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述培养基通常选用MS培养基，培养基中需添加生产调节剂，培养基的选用比重根据实际使用需求进行调控，同时MS培养基的pH值设置至5.7-5.9之间，并加入适量琼脂进行混合，MS培养基制成分装后需进行灭菌处理。

4.根据权利要求1所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤二还包括有，检测选用PCR分子检测法，切取少量初代脱毒草莓试管苗组织进行检测，多次病毒检测确认无毒后，在实验室模拟草莓生长温、湿度及光照，稳定草莓生产环境，进行草莓的授粉，进行初代脱毒草莓试管苗的小批量增殖培育，获取初代种苗。

5.根据权利要求1所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤三还包括有，将初代种苗进行热处理脱毒组培后，进行增殖检测，开始二次种植实验，稳定草莓性状，培育高质量生产种苗。

6.根据权利要求1所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述步骤四还包括有，于实验室有机质土壤中模拟定植，进行草莓的扩繁培育，待草莓根系长度到达1.4-1.8cm时，将草莓种苗移栽至适宜自然环境中进行组合附基培育，培育5-8天，草莓种苗新根生出，新叶旺盛时，即获取生产用苗，进行大批量种植使用。

7.根据权利要求6所述的一种脱毒草莓种苗的繁育方法，其特征在于：所述草莓种苗移栽的自然环境为，温度20-25℃，土壤湿度50%-75%，空气湿度40%-60%，同时需注意通风，组合附基培育时，草莓根系需附着培养基于土壤中生长，另应避免阳光直射，遮光率在50%-65%间。

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