CN1266697A - 红曲及其提取物在制备药品或保健品食品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了红曲及其提取物预防或治疗病理性或生理性的骨质细胞减少或不足及骨密度降低,并促进和恢复骨质细胞生长的作用,可用于制备治疗或预防骨质疏松症及促进儿童骨骼生长的药品或保健食品。

Description

红曲及其提取物在制备药品或保健食品中的应用

本发明涉及红曲及其提取物的用途，尤其涉及在制备药品或保健食品中的用途。

红曲为曲霉科红曲霉菌寄生在粳米或其它基质原料上感染而成的一味传统中药，具有活血化瘀、健脾消食之功效，中医传统用于治疗食积饱胀、瘀滞腹痛等症。现代医学证明红曲有降血压、降脂、降胆固醇和降血糖的作用(参见中国发明专利申请：93100737.2、97103970.4和97112548.1)，临床上主要应用红曲直接粉碎后加入赋形剂制成的片剂或胶囊剂，治疗高血脂症及其相关的心脑血管疾病。

据统计报道，随着人口的老龄化，全球骨质疏松患者已有二亿多人，尤其成为绝经期及绝经后妇女的常见病和多发病。骨质疏松症是以骨量减少为特征的骨的系统性疾病，临床表现为骨吸收大于骨生成，骨密度降低、骨骼变脆，易造成骨折。临床治疗骨质疏松的药物主要有雌激素、降钙素、钙剂、活性维生素D、氟化物及双磷酸盐类等，但这些化学药物或存在着应用上的限制或长期服用后会产生依赖性，并有诱发其它病变的毒副作用(《中华内分泌代谢杂志》，1998；14(1)：29～33)。目前应用的治疗骨质疏松药降钙素等，主要是阻止钙质进一步流失，但对促进骨质细胞生长作用不明显(《中华实验外科杂志》1998；15(5)：465～466)。另外，儿童在生长发育过程中，为促进骨胳生长及防止缺钙，临床上常使用龙牡壮骨冲剂。

本发明的目的在于提供中药红曲及其提取物在制药或保健品中的新用途。

实际上，本发明涉及利用红曲及其提取物具有的促进和恢复骨质细胞生长，增加骨密度的作用，制备可治疗或预防骨质疏松症的药品或保健食品。

本发明还涉及利用红曲及其提取物的促进骨质细胞生长、增加骨密度的作用，制备促进儿童骨胳生长的药品或保健食品。

为了更好地理解本发明的实质，下面用红曲乙酸乙酯提取物的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途。同样地，将红曲、红曲的其它溶剂提取物或红曲与其提取物合用也可达到同样的药理效果，区别仅在使用的量上的不同。

首先，用粳米或其它基质为原料，按传统方法或文献方法，将红曲霉菌接种，使其发酵培养，至全部米粒或基质变为紫红色时，得到红曲药材(《中药大辞典》上册，991页，上海科技出版社，77年版；中国发明专利申请90110240.7；93100737.2；97112548.1)。

能够实现本发明目的的红曲可由以下红曲霉菌接种发酵产生：紫红曲菌(Monascus purpucus)、发白红曲菌(M.albidus)、烟色红曲菌(M.fuliginosusSato)、丛毛红曲菌(M.pilosus Sato)、软毛红曲菌(M.pubigerus Sato)、巴斯红曲菌(M.Paxii)和红色霉曲菌(M.ruber van Tieghem)等。

然后，称取1.0公斤红曲，灭菌、烘干和粉碎后，用乙酸乙酯提取，提取液回收到溶剂后，得62.2克干浸膏。称取40.0干浸膏，加入800毫升蒸馏水，加适量的常规助溶剂，加热搅拌，过滤、灭菌、密封备用。

红曲原料也可用碱水或有机溶媒提取，例如用95％乙醇、丙酮、氯仿、石油醚等。用有机溶媒提取时，以95％乙醇为溶剂，所得的红曲提取物收率最高；以石油醚为溶剂，所得的红曲提取物收率最低。用95％乙醇、丙酮、乙酸乙酯或氯仿提取时杂质较多，如经过加碱溶解、酸化沉淀的步骤进行精制处理后，得到的提取物抗骨质疏松的活性更高。

1、动物急性毒性试验

(1)口服给药：

健康雄性小鼠，体重18～25克，用5％红曲乙酸乙酯提取物水溶液灌胃0.5ml/10g(相当于生药38.3g/Kg)，连续一周后，未见小鼠死亡。

(2)注射给药：

健康雄性小鼠，体重18～25克，用5％红曲乙酸乙酯提取物水溶液进行腹腔注射，连续一周，观察动物死亡情况。红曲乙酸乙酯提取物的LD₅₀值为18.32±4.82g/kg。

2、用常规药理试验观察了以上方法制备的红曲乙酸乙酯提取物对新生大鼠

颅骨成骨细胞增殖的影响。

按文献方法(参见《上海医科大学学报》1991；18：475)对新生大鼠颅骨成骨细胞进行分离和培养，传二代成骨细胞经消化后以含10％胎牛血清的RPMI1640稀释，以2×10⁴/孔加入，96孔培养板培养24小时，以每6孔为一平行样本，加入不同浓度的待测样品溶液或对照品溶液，培养三天后，以³H-胸腺嘧啶核苷掺入法(参见《BONE》1996；18：59～65)检测，结果列于表1。

表1红曲乙酸乙酯提取物对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖影响测定结果

              (x±s，n＝6)药物浓度(mg/L)                      CMP值空白对照组                     380.3±31.3

10                           404.2±46.2*

50                           444.8±55.3**

100                          810.5±90.1***

1000                         1113.2±89.8***

5000                         1130.4±105.2***注：与对照组对比：*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01

本研究结果显示：红曲的乙酸乙酯提取物以剂量依赖的方式，促进成骨细胞的增殖，当低浓度时(10mg/L)，其对成骨细胞增殖作用影响不大(P＞0.05)；而当浓度为50gm/L时，已表现出明显的促进成骨细胞增殖作用(P＜0.05)。在50-1000mg/L范围内，其促进作用随着浓度的升高而迅速增加，于1000 mg/L时达最大效应(P＜0.01)，并在浓度大于1000mg/L后其作用呈饱和趋势。

3、红曲及其乙酸乙酯提取物对去卵巢雌性大鼠骨质密度的增强作用

选取3月龄SD雌性大鼠，体重200±10g，随机分为7组：生理盐水对照组、去势组、去势+龙牡壮骨冲剂组(龙牡壮骨冲剂为市售的预防及治疗儿童骨胳发育不良及缺钙的药品，武汉健民制药厂生产，鄂：卫药准字(90)1324号)、去势+红曲原料组、去势+红曲乙酸乙酯提取物组(分为10、50和100mg/kg/天三个剂量组)，所有大鼠均以3％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，除对照组行单纯开腹之外(假手术)，其余6组均行双侧卵巢切除术，术后大鼠于室温下分笼饲养，自由摄水，每天每只予以标准饲料18g。术后三周开始给治疗组大鼠灌胃给药，按常法处理(参见《中华妇科杂志》1999，34(2)：91-93)，分别于术后一个月、二个月和三个月用双能X线吸收测量仪测定股骨中端骨密度，其结果列于表2。

    表2：各组大鼠术后股骨骨密度的变化(g/cm²，x±s，n＝8)组别       剂量mg/kg/天    1个月              2个月            3个月对照组       --      0.241±0.034      0.234±0.023       0.236±0.021去势组(模型    --      0.198±0.024**    0.187±0.032***    0.183±0.022***

组)去势+龙牡壮    5000    0.208±0.033^△      0.222±0.033^△△     0.224±0.031^△△△骨冲剂组去势+红曲原    2000    0.202±0.026^△      0.215±0.021^△△     0.221±0.024^△△△

料组去势+红曲乙    10      0.204±0.025^△      0.208±0.021^△       0.216±0.028^△△酸乙酯提取物去势+红曲乙    50      0.206±0.021^△      0.215±0.022^△△     0.226±0.026^△△△酸乙酯提取物去势+红曲乙    100     0.222±0.020^△△    0.227±0.026^△△△   0.231±0.024^△△△酸乙酯提取物与对照组比较：*p＞0.05  **p＜0.05  ***p＜0.01与模型组比较：^△P＞0.05  ^△△P＜0.05  ^△△△P＜0.01

以上动物体内试验结果表明：红曲的乙酸乙酯提取物和红曲原料均可使去卵巢雌性大鼠的骨质密度增强，这种作用并随着服药时间的增长而逐渐明显。其中，红曲原料以2000mg/kg/天给药的作用与龙牡壮骨冲剂以5000mg/kg/天给药的作用相当。红曲的乙酸乙酯提取物还以剂量依赖方式促进去卵巢雌性大鼠骨密度的提高，当以100mg/kg/天剂量服用红曲乙酸乙酯提取物时，在术后一个月时已表现出明显的提高骨质密度作用(p＜0.05)，而在术后二个月时便达最大效应(P＜0.01)。

从以上结果，可得出本发明的优点在于：

本发明提供了红曲及其提取物具有促进和恢复骨质细胞增殖及增加骨密度作用，可用于制备预防或治疗病理性或生理性的骨质细胞减少或不足及骨密度降低的药品或保健食品。

本发明还提供了红曲及其提取物可用于制备预防或治疗骨质疏松症的药品或保健食品。

本发明尚提供了红曲及其提取物具有促进儿童骨胳生长的作用，可用于制备促进儿童骨胳生长的药品或保健食品。

下面将描述本发明的实施例，但本发明的内容完全不局限于此。

实施例1：采用发酵完全的红曲原料2.0kg，粉碎后用95％乙醇提取，合并提取液，减压回收溶剂后得到210.3g干浸膏。然后取该干浸膏200g、微粉硅胶200g、无水乳糖200g、硬脂酸镁50g，混合均匀后用少量95％乙醇为润湿剂，按公知技术制粒，再制成每粒含150mg提取物的胶囊剂。

实施例2：采用发酵完全的红曲原料2.5kg，粉碎后用乙酸乙酯提取，合并提取液，减压回收溶剂后得到120.5g干提取物。然后取提取物100g、微粉硅胶150g、无水乳糖150g、硬脂酸镁50g，按实施例1所述方法，制成每粒含100mg提取物的胶囊剂。

实施例3：采用发酵完全的红曲原料2.5kg，粉碎后用氯仿提取，合并提取液，减压回收溶剂后得到132.6g干提取物。然后取提取物100g，加入与实施例2相同种类和比例的赋形剂，按实施例1所述方法，制成每粒含100mg提取物的胶囊剂。

实施例4：采用发酵完全的红曲原料2.0kg，粉碎后用丙酮提取，合并提取液，减压回收溶剂后得到184.7g干提取物。然后取提取物150g，加入与实施例1相同种类和比例的赋形剂，按实施例1所述方法，制成每粒含150mg提取物的胶囊剂。

实施例5：采用发酵完全的红曲原料4.0kg，粉碎后用2.0％NaOH水溶液浸泡，三天后开始渗漉提取，不断添加NaOH水溶液至流出液色浅时止。合并渗漉液，用10％HCL中和至中性，再用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，得到62.5g干浸膏。然后取60g干浸膏，加入与实施例2相同种类和比例的赋形剂，按实施例1所述方法，制成每粒含50mg提取物的胶囊剂。

实施例6：实施例1方法得到红曲干浸膏。然后取200g，加入2000ML2％NaOH水溶液，分次捏溶。用10％HCL中和碱水液至中性，再用乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，回收溶剂至干，得到34.2g干浸膏。然后取30g干浸膏，加入与实施例2相同种类和比例的赋形剂，按实施例1所述方法，制成每粒含50mg提取物的胶囊剂。

实施例7，按本技术领域技术人员公知的方法制备红曲提取物的片剂，其中所述片剂按实际需要制成含10-30％的红曲提取物。用上述实施例2制取红曲提取物。取150g红曲提取物、微粉硅胶420g、无水乳糖350g、氧化硅30g，混合30分钟后，再筛入200g硬脂酸镁，继续混匀，最后用12/32英寸的标准凹冲压成片。

实施例8：采用发酵完全的红曲原料1.0kg，干燥、粉碎后，过200-300目筛，装成每粒含400mg红曲原料粉末的胶囊剂。

实施例9：同实施例8方法得到红曲原料粉末，取红曲原料粉末250g、微粉硅胶80g、无水乳糖70g、硬脂酸镁50g，按公知制片技术和装备制成每片含250mg红曲原料粉末的片剂。

Claims (3)

1、红曲及其提取物在制备预防或治疗病理性或生理性的骨质细胞减少或不足及骨密度降低以及促进和恢复骨质细胞生长的药品或保健食品中的应用。

2、根据权利要求1红曲及其提取物可用于制备治疗或预防骨质疏松症的药品或保健品。

3、根据权利要求1红曲及其提取物可制备具有促进儿童骨胳生长作用的药品或保健食品。