CN1217945C

CN1217945C - Crf受体拮抗剂以及与其有关的方法

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Publication number: CN1217945C
Application number: CN998131717A
Authority: CN
Inventors: M·哈达彻; J·耐尔森; B·P·迪克; 郭志强; 黄青; J·R·穆卡赛
Original assignee: Neurocrine Biosciences Inc
Current assignee: Neurocrine Biosciences Inc
Priority date: 1998-11-12
Filing date: 1999-11-12
Publication date: 2005-09-07
Anticipated expiration: 2019-11-12
Also published as: DK1129091T3; PT1129091E; ATE225349T1; US6514982B1; WO2000027846A3; JP2002529465A; HK1038926B; IL142893A0; WO2000027846A2; KR20010080990A; NO20012194D0; NZ510955A; NO20012194L; HK1038926A1; EP1129091A2; CA2350642A1; ES2180338T3; CN1328559A; EP1129091B1; DE69903333T2

Abstract

本发明公开了可用于在温血动物中治疗多种病症、包括表现出CRF分泌过多的病症例如中风的CRF受体拮抗剂。本发明的CRF受体拮抗剂具有式(I)的结构，包括其立体异构体和可药用盐，其中n、m、A、B、C、R、R₁、R₂和Ar如文中所定义。本发明还公开了含有CRF受体拮抗剂和可药用载体的组合物以及使用该组合物的方法。

Description

CRF受体拮抗剂以及与其有关的方法

技术领域

本发明一般涉及CRF受体拮抗剂以及通过向有需要的温血动物施用所述拮抗剂来治疗疾病的方法。

发明背景

第一个促肾上腺皮质激素-释放因子(CRF)从羊下丘脑分离得到并证实它是一种41个氨基酸的肽(Vale等，《科学》(Science)213：1394-1397，1981)。随后，分离出了人和大鼠CRF的序列并证实了它们是相同的，但它们与羊的CRF在41个氨基酸残基中有7个不同(Rivier等，《美国国家科学院院报》(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)80：4851，1983；Shibahara等，EMBO J.2：775，1983)。

已发现CRF可以引起内分泌、神经和免疫系统功能的显著改变。据信CRF是促肾上腺皮质激素(“ACTH”)、β-内啡肽和其它鸦片-促黑素细胞-促肾上腺皮质激素原(“POMC”)衍生的肽从垂体前叶的基础释放和应激释放的主要生理调节剂(Vale等，《科学》(Science)213：1394-1397，1981)。简言之，据信CRF是通过与遍布于脑(DeSouza等，《科学》(Science)224：1449-1451，1984)、垂体(DeSouza等，《酶学方法》(Methods Enzymol.)124：560，1986；Wynn等，《生物化学生物物理研究通讯》(Biochem.Biophys.Res.Comm.)110：602-608，1983)、肾上腺(Udelsman等，《自然》(Nature)319：147-150，1986)和脾(Webster，E.L.和E.B.DeSouza，《内分泌学》(Endocrinology)122：609-617，1988)的质膜受体结合而产生其生物学作用。CRF受体与GTP-结合蛋白偶联(Perrin等，《内分泌学》(Endocrinology)118：1171-1179，1986)，后者介导CRF-刺激的细胞内cAMP生产的增加(Bilezikjian，L.M.和W.W.Vale，《内分泌学》(Endocrinology)113：657-662，1983)。现已从大鼠(Perrin等，Endo 133(6)：3058-3061，1993)和人的大脑(Chen等，PNAS 90(19)：8967-8971，1993；Vita等，FEBS 335(1)：1-5，1993)中克隆出了CRF的受体。该受体是一种415个氨基酸的蛋白质，含有7个跨膜结构域。大鼠和人序列同一性的比较显示出在氨基酸水平的高度同源性(97％)。

除了其刺激ACTH和POMC生产的作用外，据信CRF还协调多种对应激的内分泌、自主和行为应答，并且还可能与情感障碍的病理生理学有关。此外，据信CRF还是免疫、中枢神经、内分泌和心血管系统之间通讯的关键媒介物(Crofford等，《临床研究杂志》(J.Clin.Invest.)90：2555-2564，1992；Sapolsky等，《科学》(Science)238：522-524，1987；Tilders等，《调节肽》(Regul.Peptides)5：77-84，1982)。总之，CRF似乎是重要的中枢神经系统的神经递质之一并在综合身体对应激的全面反应中起重要作用。

直接向脑给药CRF可以引起与在暴露于应激环境的动物中所观察到的相同的行为、生理和内分泌反应。例如，脑室内注射CRF可以引起行为激活(Sutton等，《自然》(Nature)297：331，1982)、脑电图的持续激活(Elilers等，《大脑研究》(Brain Res.)278：332，1983)、交感神经肾上腺髓质激素(sympathoadrenomedullary)途径的刺激(Brown等，《内分泌学》(Endocrinology)110：928，1982)、心率和血压的升高(Fisher等，《内分泌学》(Endocrinology)110：2222，1982)、耗氧量的增加(Brown等，《生命科学》(LifeSciences)30：207，1982)、胃肠活动的改变(Williams等，《美国生理学杂志》(Am.J.Physiol.)253：G582，1987)、食物消耗量的抑制(Levine等，《神经药理学》(Neuropharmacology)22：337，1983)、性行为的改变(Sirinathsinghji等，《自然》(Nature)305：232，1983)和免疫功能的减弱(Irwin等，《美国生理学杂志》(Am.J.Physiol.)255：R744，1988)。此外，临床数据表明，CRF可能在抑郁、与焦虑有关的障碍、神经性食欲缺乏的大脑中分泌过多(DeSouza，《药物化学年报》(Ann.Reports in Med.Chem.)25：215-223，1990)。因此，临床数据表明CRF受体拮抗剂可能代表新的抗抑郁和/或抗焦虑药物，可用于治疗表现出CRF分泌过多的神经精神病。

最早的CRF受体拮抗剂是肽(参见，例如Rivier等，美国专利4,605,642；Rivier等，《科学》(Science)224：889，1984)。尽管这些肽证实了CRF受体拮抗剂可以减弱对CRF的药理学应答，但肽CRF受体拮抗剂存在肽疗法的常见缺点，包括缺乏稳定性和口服活性有限。最近报道了小分子的CRF受体拮抗剂。例如，已报道了用作CRF受体拮抗剂的取代的4-硫代-5-氧代-3-吡唑啉衍生物(Abreu等，美国专利5,063,245)和取代的2-氨基噻唑衍生物(Courtemanche等，澳大利亚专利AU-A-41399/93)。这些衍生物可以分别在1-10μM和0.1-10μM的范围内有效地抑制CRF与其受体的结合。

最近，提出了许多小分子的CRF受体拮抗剂，包括如下专利文献中所公开的化合物：WO 94/13643、WO 94/13644、WO 94/13661、WO 94/13676、WO 94/13677、WO 95/10506、WO 95/33750、WO96/35689、WO 97/00868、WO 97/35539、WO 97/35580、WO 97/35846、WO 97/44038、WO 98/035 10、WO 98/05661、WO 98/08846、WO98/08847、WO 98/11075、WO 98/15543、WO 98/21200和WO98/29413。

由于CRF的生理学重要性，开发具有显著的CRF受体结合活性并且可以拮抗CRF受体的生物学活性的小分子仍是令人想望的目标。这些CRF受体拮抗剂将可以用于治疗内分泌、精神病学和神经病学的病症或疾病，包括广义的与应激有关的疾病。

虽然通过施用CRF受体拮抗剂来调节CRF已取得了很大的进展，但仍需要有效的小分子CRF受体拮抗剂。此外还需要含有所述CRF受体拮抗剂的药物组合物以及涉及使用该拮抗剂治疗例如与应激有关之病症的方法。本发明满足了这些需要，并且具有其它相关的优点。

发明概述

简言之，本发明涉及CRF受体拮抗剂，尤其涉及具有如下结构通式(I)的CRF受体拮抗剂：

包括其立体异构体、前药和可药用盐，其中n、m、A、B、C、X、R、R₁、R₂和Ar如下所定义。

本发明的CRF受体拮抗剂具有广泛的治疗用途，可用于治疗各种病症或疾病，包括与应激有关的病症。该方法包括，向有需要的动物给药有效量的本发明CRF受体拮抗剂，优选以药物组合物的形式给药。因此，在另一个实施方案中，公开了含有一种或多种本发明的CRF受体拮抗剂和可药用载体和/或稀释剂的药物组合物。

通过以下详细描述，本发明的各个方面将是显而易见的。为此，在文中列出了许多详细描述某些方法、化合物和/或组合物的参考文献，并将这些文献全文引入本文作为参考。

发明详述

总的来说，本发明涉及可用作促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)受体拮抗剂的化合物。

在第一个实施方案中，本发明的CRF受体拮抗剂具有如下结构(I)：

包括其立体异构体、前药和可药用盐，其中：

n是1或2；

A和C彼此独立地是氮、碳或CH；

B是氮或CR₃；

条件是，A、B和C中至少有一个是氮；A、B和C不全是氮；并且A-B和B-C之一是双键；

X是氮或CH；

Ar是芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R是任选的取代基，其在每次出现时彼此独立地是烷基、亚烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，其中m是0、1、2或3并且表示R取代基的数目；

R₁是-C(H)_0，1(R₄)(R₅)或-SO₂R₅；

R₂是氢或烷基；

R₃是氢、烷基或卤代烷基；

R₄是氢、酮基、烷基、亚烷基或卤素；和

R₅是式-Y-Z-R₆的基团，其中

Y是二价烷基、取代的二价烷基(alkanediyl)或直接键(direct bond)，

Z是NH、-N(R₇)、O、S、SO₂、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO₂)、(SO₂)NH、NR₈C(＝O)O或直接键(directbond)；

R₆是氢、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基；或者

R₇和R₈相同或不同并且彼此独立地是烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基；或者

R₆和R₇与它们所连接的氮原子合在一起形成杂环或取代的杂环；

或者R₄和R₅合在一起形成环烷基、取代的环烷基、环烷基环烷基、取代的环烷基环烷基、环烷基芳基、取代的环烷基芳基、环烷基杂环或取代的环烷基杂环。

本文中所用的上述术语具有如下含义：

“烷基”是指含有1至10个碳原子的直链或支链、无环或环状的、饱和或不饱和的脂肪烃，术语“低级烷基”具有与烷基相同的含义但只含1至6个碳原子。代表性的饱和直链烷基包括甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基等；饱和的支链烷基包括异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、异戊基等。代表性的饱和环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、-CH₂环丙基、-CH₂环丁基、-CH₂环戊基、-CH₂环己基等；不饱和的环烷基包括环戊烯基和环己烯基等。环烷基也称为“碳环”，包括二和多环碳环，例如十氢萘和金刚烷基。不饱和的烷基含有至少一个相邻碳原子之间的双键或叁键(分别称为“链烯基”或“链炔基”)。代表性的直链和支链链烯基包括乙烯基、丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、异丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2，3-二甲基-2-丁烯基等；代表性的直链和支链链炔基包括乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基等。

“亚烷基(alkylidenyl)”表示从同一个碳原子上取走了两个氢原子的二价烷基，例如＝CH₂、＝CHCH₃、＝CHCH₂CH₃、＝C(CH₃)CH₂CH₃等。

“二价烷基(alkanediyl)”是指从同一个碳原子或不同的碳原子上取走了两个氢原子的二价烷基，例如-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH(CH₃)CH₂-等。

“芳基”是指芳香族碳环部分，例如苯基或萘基。

“芳基烷基”是指有至少一个烷基氢原子被芳基部分代替了的烷基，例如苄基、-CH₂-(1或2-萘基)、-(CH₂)₂苯基、-(CH₂)₃苯基、-CH(苯基)₂等。

“杂芳基”是指含有至少一个选自氮、氧和硫的杂原子并且含有至少一个碳原子的5至10元芳香族杂环，包括单环和二环环系。代表性的杂芳基包括(单不仅限于)呋喃基、苯并呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、吡咯基、吲哚基、异吲哚基、氮杂吲哚基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、噁唑基、异噁唑基、苯并噁唑基、吡唑基、咪唑基、苯并咪唑基、噻唑基、苯并噻唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、噌啉基、二氮杂萘基和喹唑啉基。

“杂芳基烷基”是指有至少一个烷基氢原子被杂芳基部分代替了的烷基，例如-CH₂吡啶基、-CH₂嘧啶基等。

“杂环”是指5至7元单环或7至14元多环杂环，所述杂环可以是饱和的、不饱和的或芳香性的，并且含有1至4个彼此独立地选自氮、氧和硫的杂原子，并且其中的氮和硫杂原子可以任选地被氧化，氮杂原子可以任选地被季铵化，包括上述的任意杂环与苯环稠合形成的二环以及三环(和更高级的)杂环。杂环可以通过任何杂原子或碳原子进行连接。杂环包括以上定义的杂芳基。因此，除了以上所列的芳香族杂芳基外，杂环还包括(但不仅限于)吗啉基、吡咯烷酮基(pyrrolidinonyl)、吡咯烷基、哌啶基、乙内酰脲基、戊内酰胺基、氧杂环丙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基等。

“杂环烷基”是指有至少一个烷基氢原子被杂环代替了的烷基，例如-CH₂吗啉基等。

“环烷基”是指饱和或不饱和的(但不是芳香性的)含有3-8个碳原子的碳环，例如环戊烷、环己烷、环庚烷、环己烯等。

“环烷基环烷基”是指与环烷基环稠合的环烷基环，例如十氢萘。

“环烷基芳基”是指与芳基稠合的环烷基，例如四氢萘。

“环烷基杂环”是指与杂环稠合的环烷基环。

本文所用术语“取代的”是指有至少一个氢原子被取代基代替了的上述基团(例如烷基、芳基、芳基烷基、杂芳基、杂芳基烷基、杂环、杂环烷基等)。在酮基取代基(“-C(＝O)-”)的情况下，有两个氢原子被替换。当被取代时，本文中所用的“取代基”包括卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基、取代的杂环烷基、-NR_aR_b、-NR_aC(＝O)R_b、-NR_aC(＝O)NR_aNR_b、-NR_aC(＝O)OR_b、-NR_aSO₂R_b、-OR_a、-C(＝O)R_a、-C(＝O)OR_a、-C(＝O)NR_aR_b、-OC(＝O)NR_aR_b、-SH、-SR_a、-SOR_a、-S(＝O)₂R_a、-OS(＝O)₂R_a、-S(＝O)₂OR_a，其中R_a和R_b相同或不同并且彼此独立地是氢、烷基、卤代烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基。

“卤素”是指氟、氯、溴和碘。

“卤代烷基”是指有至少一个氢原子被卤素代替了的烷基，例如三氟甲基等。

“烷氧基”是指通过氧桥连接的烷基部分(即，-O-烷基)，例如甲氧基、乙氧基等。

“烷硫基”是指通过硫桥连接的烷基部分(即，-S-烷基)，例如甲硫基、乙硫基等。

“烷基磺酰基”是指通过磺酰基桥连接的烷基部分(即，-SO₂-烷基)，例如甲基磺酰基、乙基磺酰基等。

“烷基氨基”和“二烷基氨基”是指通过氮桥连接的一个或两个烷基部分(即，-N-烷基)，例如甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基等。

“羟基烷基”是指被至少一个羟基取代的烷基。

“单或二(环烷基)甲基”表示被一个或两个环烷基取代的甲基，例如环丙基甲基、二环丙基甲基等。

“烷基羰基烷基”表示被-C(＝O)烷基取代的烷基。

“烷基羰基氧基烷基”表示被-C(＝O)O烷基或-OC(＝O)烷基取代的烷基。

“烷氧基烷基”表示被-O-烷基取代的烷基。

“烷硫基烷基”表示并-S-烷基取代的烷基。

“单或二(烷基)氨基”分别表示被一个或两个烷基取代的氨基。

“单或二(烷基)氨基烷基”表示被单或二(烷基)氨基取代的烷基。

本文中，结构式(I)的

表示任选地被1或2个R取代基取代的-CH₂CH₂-或-CH＝CH-(即，当n＝1并且m＝1或2时)，或任选地被1、2或3个R取代基取代的-CH₂CH₂CH₂-(即，当n＝2并且m＝1、2或3时)。在这方面，该部分是-CH₂CH(R)-、-CH(R)CH₂-、-CH(R)CH(R)-、-CH-C(R)-、-C(R)＝CH-、-C(R)＝C(R)-、-CH₂CH₂CH(R)-、-CH₂CH(R)CH₂-、-CH(R)CH₂CH₂-、-CH(R)CH₂CH(R)、-CH(R)CH(R)CH₂和-CH₂CH(R)CH(R)-，其中的R在每次出现时可以相同或不同并且彼此独立地选自以上所列的R基团。

本发明的代表性的化合物包括如下结构式(Ia)至(In)的化合物：

在一个优选的实施方案中，n是1，m是0并且本发明的CRF受体拮抗剂具有式(Ia)的结构。在另一个优选的实施方案中，n是1，m是1并且本发明的CRF受体拮抗剂具有式(Ib)或(Ic)的结构。

根据对A、B和C部分的选择，本发明的CRF受体拮抗剂包括具有如下结构式(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的化合物：

当化合物(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的X是CH时，本发明的代表性化合物包括如下化合物(I-1a)、(I-2a)、(I-3a)和(I-4a)；当化合物(I-1)、(I-2)、(I-3)和(I-4)的X是氮时，本发明的代表性化合物包括如下化合物(I-1b)、(I-2b)、(I-3b)和(I-4b)：

在一个优选的实施方案中，R₁是如下结构式所示的-SO₂R₅：

在另一个实施方案中，R₁是-C(H)_0，1(R₄)(R₅)，其同时表示-CH(R₄)(R₅)和-C(R₄)(R₅)。在这一方面，其代表性的实施方案包括如下R₁部分(i)、(ii)和(iii)：

本发明代表性的R₄部分包括但不仅限于氢、酮基(即，＝O)、卤素(氟、氯、溴和碘)、甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、＝CH₂、＝CHCH₃和＝CHCH₂CH₃。因此，代表性的R₁部分包括但不仅限于：

在R₁的R₄和R₅基团合在一起形成环烷基的实施方案中，形成的R₁基团具有如下结构：

环烷基包括环丙基、环戊基、环己基等。类似地，取代的环烷基是带有一个或多个以上定义的取代基的环烷基。例如，在一个实施方案中，环烷基被一个或多个烷基取代，而代表性的R₁部分包括：

其中R’和R″相同或不同并且彼此独立地选自，例如，烷基，例如甲基或乙基。

在其中R₁的R₄和R₅基团合在一起形成环烷基芳基的实施方案中，形成的R₁基团包括具有如下结构的化合物：

或

包括其以上所定义的任选取代的类似物。

在又一个实施方案中，R₄和R₅合在一起形成环烷基环烷基或环烷基杂环，所形成的R₁基团包括，例如具有如下结构的化合物：

包括其以上所定义的任选取代的类似物。

如上所述，在一个实施方案中，R₅是式-Y-Z-R₆的基团，其中

Y是二价烷基、取代的二价烷基或直接键，

Z是NH、-N(R₇)、O、S、SO₂、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO₂)、(SO₂)NH、NR₈C(＝O)O或直接键；

R₆和R₇与它们所连接的氮原子合在一起形成杂环或取代的杂环。

在一个实施方案中，R₅部分中的Y是二价烷基，Z是直接键，R₆是氢。该R₅部分包括烷基、饱和烷基、不饱和烷基、低级烷基、低级饱和烷基、低级不饱和烷基、饱和的直链烷基、饱和的支链烷基、饱和的环烷基、不饱和的环烷基、链烯基、直链链烯基、支链链烯基、炔基、直链炔基和支链炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)₂)、正戊基、正己基、异己基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基和乙炔基。

在另一个实施方案中，R₅部分中的Y和Z是直接键，R₆包括芳香族环，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基和氯苯基。

在另一个实施方案中，R₅部分中的Y是直接键，Z是NH并且R₆如上所定义。因此，R₆可以是氢，从而R₅是氨基。或者，R₆可以是烷基，从而R₅是烷基取代的氨基，例如异丙基氨基和乙基氨基。或者，R₆可以是芳基或取代的芳基，从而R₅是芳基氨基或取代的芳基氨基，例如，(甲氧基苯基)氨基、((三氟甲氧基)苯基)氨基、(苯基取代的苯基)氨基(也称为(二苯基)氨基)和(二(三氟甲基)苯基)氨基。或者，R₆可以是芳基烷基或取代的芳基烷基，从而R₅是(芳基烷基)氨基或(取代的芳基烷基)氨基，例如(苄基)氨基(也称为(苯基甲基)氨基)、(环丙基苯基)氨基和(苯基乙基)氨基。根据该实施方案，优选R₄是羰基。

在另一个实施方案中，R₅部分中的Y是二价烷基，Z是N(R₇)并且R₆如上所定义，其中R₇也如上所定义。因此，R₅是-Y-N(R₇)(R₆)，即，包括二取代的氨基部分。在一个实施方案中，Y是亚甲基，即，-CH₂-，从而R₅是-CH₂-N(R₇)(R₆)。正如以上所定义的，R₆和R₇各自选自烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基，其中R₆还可以是氢。在一个实施方案中，R₆是氢。

-N(R₆)(R₇)基团中的R₆和R₇基团之一或二者同时可以是烷基或取代的烷基，包括饱和的烷基、不饱和的烷基、低级烷基、低级饱和烷基、低级不饱和烷基、饱和直链烷基、饱和支链烷基、饱和环烷基、不饱和环烷基、链烯基、直链链烯基、支链链烯基、炔基、直链链炔基和支链链炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)₂)、正戊基、正己基、异己基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基和乙炔基。

-N(R₆)(R₇)基团中的R₆和R₇基团之一或二者同时可以含有芳香族环，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基和氯苯基。

因此，-N(R₆)(R₇)可以是，例如(丙基)(环丙基甲基)氨基、(2-氰基乙基)(甲基)氨基、(2-氰基乙基)(苄基)氨基、(乙基)((2-(二甲基氨基)乙基))氨基、(2-羟基乙基)(苄基)氨基、二(2-羟基乙基)氨基、(丙基)(2-羟基乙基)氨基、(环己基)(乙基)氨基、(羧甲基)(甲基)氨基、二(苄基)氨基和((2-羟基)(2-苯基)乙基))(甲基)氨基。

如上所述，R₆和R₇与它们共同连接的氮原子合在一起可以形成杂环或取代的杂环。因此，-N(R₆)(R₇)可以表示杂环，例如吖丙啶基、甲基取代的吖丙啶基、

或取代的杂环，例如

和

以上所定义的杂环可以含有多个除-N(R₆)(R₇)的氮之外的杂原子(即非碳原子)。例如，该杂环还可以含有第二个氮，或含有氧或硫。当存在第二个氮时，杂环将有两个氮，例如哌嗪基。当存在氧时，杂环将同时含有氧和氮，例如吗啉基。当存在硫时，杂环将同时含有硫和氮，例如硫代吗啉基。这些含有两个或多个杂原子的杂环可以是取代或未取代的。例如，吗啉基可以被两个烷基取代，例如，在吗啉基氧原子的两侧各有一个甲基。当杂环是哌嗪基时，未在式-N(R₆)(R₇)中明确显示出的氮原子可以被取代，其取代基的例子是，例如烷基(例如甲基)、取代的烷基(例如2-羟基乙基)或芳基烷基(例如苄基)。

在另一个实施方案中，Y是取代的二价烷基，Z是杂原子或直接键，R₆如上所定义。在一个优选的实施方案中，R₄是氢。因此，Y是带有取代基的二价烷基，其中的取代基可以是，例如羟基。二价烷基可以是，例如，亚乙基(即，-CH₂-CH₂-)或亚正丙基(即，-CH₂CH₂CH₂-)，从而取代的二价烷基可以是，例如-CH(OH)-CH₂-或-CH₂-CH(OH)-CH₂-。

在另一个实施方案中，Y是二价烷基例如亚甲基(-CH₂-)，Z是酰氨基，即，-NHC(＝O)-或-C(＝O)NH-，R₆如上所定义。在一个优选的实施方案中，R₄是氢。因此，在一个实施方案中，R₅是-CH₂-NHC(＝O)-R₆。

在另一个实施方案中，Y是二价烷基例如亚甲基(-CH₂-)，Z是磺酰氨基，即，-NHSO₂-或-SO₂NH-，R₆如上所定义。在一个优选的实施方案中，R₄是氢。因此，在该实施方案中，R₅是-CH₂-NHSO₂-R₆。

在另一个实施方案中，Y和Z是直接键，R₆如上所定义。因此，在该实施方案中，R₅是-R₆。在一个实施方案中，当R₅是-R₆时R₄是烷基。在另一个实施方案中，当R₅是-R₆时R₄是羰基。R₆部分可以是烷基、饱和烷基、不饱和烷基、低级烷基、低级饱和烷基、低级不饱和烷基、饱和直链烷基、饱和支链烷基、饱和环烷基、不饱和环烷基、链烯基、直链链烯基、支链链烯基、炔基、直链炔基和支链炔基。代表性的例子是甲基、三氟甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)₂)、正戊基、正己基、异己基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基和乙炔基。R₆可以是取代的烷基，其中取代的烷基可以带有一个、两个或多个取代基。

在另一个实施方案中，Y和Z是直接键并且R₆如上所定义。因此，在该实施方案中，R₅是-R₆。在一个实施方案中，当R₅是-R₆时R₄是氢。在另一个实施方案中，当R₅是-R₆时R₄是烷基。

在另一个实施方案中，Y是直接键，Z是酯基，即-C(＝O)O-或-OC(＝O)-，R₆如上所定义。在该实施方案中，R₅是-酯-R₆，优选R₅是-C(＝O)-O-R₆。在一个实施方案中，R₄是氢。R₆部分可以是烷基，优选低级饱和烷基，例如甲基、乙基、丙基等。

在另一个实施方案中，Y是取代的二价烷基，Z是直接键或氧，R₆如上所定义。在该实施方案中，R₄优选是H。在另一个实施方案中，R₄优选是烷基。二价烷基可以是C₁-C₆二价烷基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基等，二价烷基上所取代基可以是，例如羟基、卤素、氨基、烷基等。因此，Y可以是-CH(OH)-或-CH(OH)-CH₂-等。在一个实施方案中，R₆是芳基或取代的芳基，例如苯基或氯苯基。在另一个实施方案中，R₆是烷基或取代的烷基，例如甲基或氟甲基。

在另一个实施方案中，R₁是SO₂R₅，其中Y是直接键，Z是直接键，R₆如上所定义。因此，在该实施方案中，R₁是-SO₂-R₆。

在另一个实施方案中，Y是二价烷基，Z是O或S，R₆如上所定义。例如，R₅可以是-CH₂-O-CH₃，其中Y是亚甲基、Z是O、R₆是烷基、特别是甲基。在一个优选的实施方案中，R₄是羰基。在另一个优选的实施方案中，R₄是氢。在又一个优选的实施方案中，R₄是烷基。

在另一个实施方案中，Y是直接键，Z是直接键，R₆是式＝CH₂、＝CH-CH₃、＝CH-CH₂-CH₃、＝CH-CH(CH₃)-CH₃的烷基或取代的烷基及其同系物。取代的烷基上的取代基可以是，例如羟基或卤素(例如氟)。

R₆部分可以是烷基、饱和烷基、不饱和烷基、低级烷基、低级饱和烷基、低级不饱和烷基、饱和直链烷基、饱和支链烷基、饱和环烷基、不饱和环烷基、链烯基、直链链烯基、支链链烯基、链炔基、直链链炔基和支链链炔基。代表性的例子是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、1-乙基丙基(即，-CH(Et)₂)、正戊基、正己基、异己基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基和乙炔基。

R₆部分可以是取代的烷基，其中取代的烷基可以带有一个或多个取代基。适宜的取代基包括三氟甲基、羟基和卤素(即，氟、氯、溴、碘)。

R₆部分可以包括芳香族环，例如芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基。代表性的例子是苯基、甲氧基苯基和氯苯基。

R₆部分可以是杂环、杂环烷基、取代的杂环、取代的杂环烷基，例如呋喃基、呋喃基甲基和噻吩基、噻吩基甲基。

在一个优选的实施方案中，当R₅是-R₆并且R₆是以上所列的烷基时，R₄是氢。在另一个实施方案中，当R₅是-R₆并且R₆是以上所列的烷基时，R₄是烷基。在一个优选的实施方案中，当R₅是-R₆并且R₆包括以上所列的芳香族环时，R₄是氢。在另一个实施方案中，当R₅是-R₆并且R₆包括以上所列的芳香族环时，R₄是烷基。

本发明代表性的R₁基团具体包括实施例中公开的各R₁基团，以及甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、-CH(乙基)₂、-CH(正丙基)₂、-CH(正丁基)₂、-CH₂CH₂OCH₃、-CH(甲基)(CH₂OCH₃)、-CH(乙基)(CH₂OCH₃)、-CH(正丙基)(CH₂OCH₃)、-CH(正丁基)(CH₂OCH₃)、-CHC≡CH、-CH(甲基)(乙基)、-CH(甲基)(正丙基)、-CH(甲基)(正丁基)、-CH(甲基)(正戊基)、-CH(甲基)(CH₂CH₂CH₂CH(CH₃)₂)、-CH(乙基)(正丙基)、-CH(乙基)(正丁基)、-CH(乙基)(正戊基)、-CH(正丙基)(正丁基)、-CH(正丙基)(正戊基)、环丙基、环丁基、环己基、2-甲基环己基、3-甲基环己基、1，2，3，4-四氢萘基(1和2)、苄基、2-氯苄基、CH(甲基)(苄基)、-CH(乙基)(苄基)、-CH(正丙基)(苄基)、-CH(正丁基)(苄基)、-CH₂(环丙基)、-CH₂(环丁基)、-CH₂CH(甲基)CH₂CH₃、-CH₂CH(乙基)CH₂CH₃、-CH₂C(CH₃)₃、-CH₂C≡CH、-CH₂C(＝O)CH₂CH₃、-C(＝O)环丙基、-C(＝O)NH苄基。

本发明代表性的任选的R基团包括，当存在时，甲基、乙基、正丙基、异丙基、异丁基、＝CH₂和＝CHCH₃。

在更具体的本发明的实施方案中，本发明代表性的Ar基团包括(但不仅限于)实施例中公开的Ar基团，以及2，4-二氯苯基、2，4-二甲基苯基、2-氯-4-甲基苯基、2-甲基-4-氯苯基、2，4，6-三甲基苯基、2-氯-4-甲氧基苯基、2-甲基-4-甲氧基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2-三氟甲基-4-氯苯基、3-甲氧基-4-氯苯基、2，5-二甲氧基-4-氯苯基、2-甲氧基-4-三氯甲基苯基、2-甲氧基-4-异丙基苯基、2-甲氧基-4-三氟甲基苯基、2-甲氧基-4-异丙基苯基、2-甲氧基-4-甲基苯基、4-甲基-6-二甲基氨基吡啶-3-基、4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基、6-二甲基氨基-吡啶-3-基和4-二甲基氨基-吡啶-3-基。

在另一个实施方案中，本发明的化合物具有以上式(I)的结构，其中R₄是氢、酮基、C_1-6烷基、单或二(C_3-6环烷基)甲基、C_3-6环烷基、C_3-6链烯基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷基羰基氧基C_1-6烷基或C_1-6烷氧基C_1-6烷基；R₅是氢、Ar、C_1-6烷基Ar、OAr、C_1-8烷基、C_3-6环烷基、O(C_1-8烷基)、单或二(C_3-6环烷基)甲基、C_3-6链烯基、C_3-6炔基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基Ar、羟基C_1-6烷基、噻吩基C_1-6烷基、呋喃基C_1-6烷基、C_1-6烷硫基C_1-6烷基、吗啉基、单或二(C_1-6烷基)氨基C_1-6烷基、氨基、(C_1-6烷基)氨基、二(C_1-6烷基)氨基、(C_1-6烷基Ar)氨基、(C_1-6烷基)(Ar)氨基、C_1-6烷基羰基C_1-6烷基、磺酰基(C_1-8烷基)、-C(＝O)C_1-6烷基、被咪唑基取代的C_1-6烷基或式-(C_1-6二价烷基)-O-(CO)_0，1-Ar的基团；或R₄和R₅合在一起形成与任选地被一个或多个彼此独立地选自C_1-6烷基的取代基取代的Ar稠合的C_5-8环烷基或C_3-8环烷基；Ar在每次出现时彼此独立地是苯基或萘基，所述苯基和萘基任选地被1、2或3个彼此独立地选自卤素、C_1-6烷基、三氟甲基、氰基、C_1-6烷氧基、苄氧基、C_1-6烷硫基、硝基、氨基和单或二(C_1-6烷基)氨基的取代基所取代；或任选地被1、2或3个彼此独立地选自卤素、C_1-6烷基、三氟甲基、羟基、氰基、C_1-6烷氧基、苄氧基、C_1-6烷硫基、硝基、氨基、单或二(C_1-6烷基)氨基和哌啶基的取代基取代的芳香族C_3-12杂环。

本发明的化合物可以通过已知的有机合成方法制备，包括在实施例中详细描述的方法，并且通常以游离碱的形式使用。或者，可将本发明的化合物以酸加成盐的形式使用。本发明的游离碱氨基化合物的酸加成盐可以通过本领域熟知的方法制备，并可以从有机酸和无机酸形成。适宜的有机酸包括马来酸、富马酸、苯甲酸、抗坏血酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、水杨酸、柠檬酸、葡糖酸、乳酸、扁桃酸、肉桂酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、乙醇酸、谷氨酸和苯磺酸。适宜的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。术语结构式(I)的“可药用盐”包括任何和所有可接受的盐形式。

通常，结构式(I)的化合物可以通过本领域技术人员熟知的有机合成方法以及实施例中所描述的代表性的方法进行制备。例如，结构式(I)的合成通常通过合成如下所示的所需亚结构(I-1)、(I-2)、(I-3)或(I-4)来进行。各个这些亚结构的合成又在实施例中进行了举例说明。

结构式(I-1)的一般合成方法

结构式(I-2)的一般合成方法

结构式(I-3)的一般合成方法

结构式(I-4)的一般合成方法

此外，结构式(I-1)和(I-4)的化合物还可以通过如下反应方案A通过合成中间体4，然后将中间体4转变成相应的结构式(I-1)“结构式10”或(I-4)“结构式8”进行制备：

反应方案A

结构式(I-1)和(I-4)的化合物还可以按照如下反应方案B和C进行制备：

反应方案B

反应方案C

化合物作为CRF受体拮抗剂的效力可以通过各种试验方法进行测定。本发明的适宜的CRF拮抗剂可以抑制CRF与其受体的特异性结合并拮抗与CRF有关的活性。结构式(I)的化合物可以通过一种或多种被广泛接受的为此目的的试验来检测其作为CRF拮抗剂的活性，包括(但不仅限于)DeSouza等(《神经科学杂志》(J.Neuroscience)7：88，1987)和Battaglia等(《突触》Synapse 1：572，1987)所公开的方法。如上所述，适宜的CRF拮抗剂包括显示CRF受体亲和性的化合物。CRF受体亲和性可以通过测定化合物抑制放射标记的CRF(例如[¹²⁵I]酪氨酸-CFR)与其受体(例如从大鼠大脑皮质膜制备的受体)结合之能力的结合研究来测定。DeSouza等(文献出处同上，1987)所描述的放射配体结合试验提供了测定化合物对CRF受体的亲和性的试验方法。该活性通常从IC₅₀值(从受体上置换50％放射标记的配体所需的化合物浓度)来计算，并用“K_i”值来表示，其通过如下方程式来计算：

K_{i} = \frac{{IC}_{50}}{i + L / K_{D}}

其中L＝放射配体，K_D＝放射性配体对受体的亲和性(Cheng和Prusoff，《生化药理学》(Biochem.Pharmacol.)22：3099，1973)。

除了抑制CRF受体结合外，化合物的CRF受体拮抗剂活性可以通过化合物拮抗与CRF有关之活性的能力来确定。例如，已知CRF可以刺激各种生物化学过程，包括腺苷酸环化酶活性。因此，可以通过测定cAMP水平来评估化合物作为CRF拮抗剂拮抗CRF刺激的腺苷酸环化酶活性的能力。Battaglia等描述的CRF刺激的腺苷酸环化酶活性试验(文献出处同上，1987)提供了测定化合物拮抗CRF活性之能力的试验。因此，CRF受体拮抗剂的活性可以通过通常包括开始的结合试验(例如由DeSouza所描述的(文献出处同上，1987))和随后的cAMP筛选过程(例如由Battaglia所描述的(文献出处同上，1987))的试验方法来测定。

就CRF受体结合亲和性而言，本发明的CRF受体拮抗剂具有小于10μM的K_i值。在本发明的一个优选实施方案中，CRF受体拮抗剂具有小于1μM的K_i值，更优选小于0.25μM(即250nM)。正如以下将要详细描述的，本发明的代表性化合物通过实施例9所述的方法进行了检测。K_i值小于1μM的优选化合物是化合物I-2a-1至I-2a-6、I-2a-8、I-2a-9、I-2a-12至I-2a-25、I-2a-27至I-2a-44、I-2a-46至I-2a-76、I-4b-1和I-4b-2。K_i值小于250nM的更优选的化合物是化合物I-2a-1至I-2a-4、I-2a-6、I-2a-8、I-2a-9、I-2a-12至I-2a-18、I-2a-20至I-2a-25、I-2a-28至I-2a-36、I-2a-38至I-2a-43、I-2a-46至I-2a-73、I-2a-76、I-4b-1和I-4b-2。

本发明的CRF受体拮抗剂在CRF受体位点显示活性，并可用作治疗剂来治疗各种病症或疾病，包括内分泌、精神病学和神经病学的病症或疾病。更具体地讲，本发明的CRF受体拮抗剂可用于治疗由于CRF分泌过多所引起的病症或疾病。由于确信CRF是激活和协调对应激的内分泌、行为和自主应答的关键神经递质，因此本发明的CRF受体拮抗剂可用于治疗神经精神病。可以用本发明的CRF受体拮抗剂治疗的神经精神病包括情感障碍例如抑郁；与焦虑有关的病症，例如广义的焦虑症、恐慌症、强迫症、异常的攻击行为；心血管异常例如不稳定心绞痛和反应性高血压；饮食障碍，例如神经性食欲缺乏、食欲过盛和过敏性肠综合征。CRF拮抗剂还可用于治疗由应激引起的与各种疾病状态有关的免疫抑制，以及中风。本发明CRF拮抗剂的其它用途包括治疗炎症(例如类风湿性关节炎、眼色素层炎、哮喘、炎性肠疾病和胃肠动力)、库兴氏病(Cushing’sdisease)、婴幼儿抽搐、婴儿和成人癫痫症和其它癫痫发作，以及各种物质滥用和脱瘾(包括酒精)。

在本发明的另一个实施方案中，公开了含有一种或多种CRF受体拮抗剂的药物组合物。为了进行给药，可将本发明的化合物配制成药物组合物。本发明的药物组合物含有本发明的CRF受体拮抗剂(即结构式(I)的化合物)和可药用载体和/或稀释剂。CRF受体拮抗剂以可以有效治疗具体病症的量、即足以产生CRF受体拮抗剂活性的量存在于组合物中，并优选具有患者可接受的毒性。根据给药途径的不同，优选本发明的药物组合物含有0.1mg-250mg/剂的CRF受体拮抗剂，更优选1mg-60mg。本领域技术人员可以很容易地确定适宜的浓度和剂量。

可药用的载体和/或稀释剂是本领域技术人员熟知的。对于以溶液形式配制的组合物，可接受的载体和/或稀释剂包括盐水和无菌水，并可选择性地含有抗氧剂、缓冲剂、抑菌剂和其它常用添加剂。组合物还可以配制成丸剂、胶囊、颗粒剂或片剂，它们除了含有CRF受体拮抗剂外，还含有稀释剂、分散剂和表面活性剂、粘合剂和润滑剂。本领域技术人员可以根据公认的方法，例如《Remington’s药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences)，Gennaro编，Mack Publishing Co.，Easton，PA 1990中公开的方法，以适宜的方式配制CRF受体拮抗剂制剂。

此外，本发明还包括前药。前药是指当向患者给药时可以在体内释放出结构式(I)化合物的任何共价结合的载体。前药通常通过将功能基以可以通过常规处理或在体内裂解生成母体化合物的方式修饰制得。前药包括，例如，其中的羟基、氨基或巯基与任何在向患者给药时可以裂解形成羟基、氨基或巯基的基团结合的本发明化合物。因此，代表性的前药的例子包括(但不仅限于)结构式(I)化合物的醇和胺官能基的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。此外，在羧酸(-COOH)的情况下，还可以采用酯，例如甲酯、乙酯等。

就立体异构体而言，结构式(I)的化合物可以带有手性中心并可以以外消旋体、外消旋混合物和单个对映体或非对映体的形式存在。所有这些异构体形式均包括在本发明的范围内，包括其混合物。此外，结构式(I)化合物的某些结晶形式可以以多晶型存在，所述多晶型也包括在本发明的范围内。另外，某些结构式(I)的化合物还可以和水或其它有机溶剂形成溶剂化物。所述溶剂化物同样包括在本发明的范围内。

在另一个实施方案中，本发明提供了治疗各种病症或疾病，包括内分泌、精神病学和神经病学的病症或疾病的方法。所述方法包括，向温血动物施用足以治疗所述病症或疾病量的本发明化合物。所述方法包括全身性给药本发明的CRF受体拮抗剂，优选以药物组合物的形式给药。本文所用的全身性给药包括口服和胃肠外给药方法。对于口服给药，适宜的CRF受体拮抗剂的药物组合物包括散剂、颗粒剂、丸剂、片剂和胶囊，以及液体制剂、糖浆、混悬剂和乳剂。这些组合物还可含有矫味剂、防腐剂、助悬剂、增稠剂和乳化剂以及其它可药用添加剂。对于胃肠外给药，可将本发明的化合物配制成含水注射溶液，该溶液除了CRF受体拮抗剂外，还可含有缓冲剂、抗氧剂、抑菌剂和常用于所述溶液的其它添加剂。

如上所述，可以通过施用本发明的化合物来治疗多种病症或疾病。具体地讲，可将本发明的化合物对温血动物给药以治疗抑郁、焦虑症、恐慌症、强迫症、异常的攻击行为、不稳定心绞痛、反应性高血压、神经性食欲缺乏、食欲过盛、过敏性肠综合征、应激引起的免疫抑制、中风、炎症、库兴氏病、婴幼儿抽搐、癫痫和物质滥用和脱瘾。

提供以下实施例是用来进行说明的，而非限定性的。

实施例

本发明的CRF受体拮抗剂可以通过实施例1-12中公开的方法进行制备。实施例13提供了测定受体结合活性(K_i)的方法，实施例14公开了用于筛选本发明化合物对CRF-刺激的腺苷酸环化酶活性的试验。

实施例1

结构式(I-1)的代表性化合物的合成

结构式(I-1a)

化合物(2)

将2，4-二氯-6-甲基-3-乙酯吡啶(1)(5.0g 21.36mmol)、4-庚基胺(21.36mmol)和三乙胺(2.97ml，21.36mmol)的乙醇溶液加热回流过夜。蒸除乙醇并将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠(bicarbonate)溶液和盐水洗涤。将有机层用碳酸钠干燥然后真空浓缩。通过硅胶柱用乙酸乙酯-己烷洗脱将化合物(2)与(1)和(3)分离。

化合物(4)

将化合物(2)(20.0mmol)和肼(25.0mmol)的乙醇溶液回流过夜。蒸除乙醇并将残余物溶于乙酸乙酯，用水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到化合物(4)，该化合物不经纯化直接用于随后的步骤。

化合物(5)

将化合物(4)(15.0mmol)和三氯氧磷(15ml)的混合物回流3小时，冷却，倒在冰上并用1N NaOH中和。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后浓缩得到所需的化合物(5)。

化合物(6)

向化合物(5)(15.0mmol)的THF溶液中加入三-正丁基(1-乙氧基)乙烯基锡(10.0mmol)和二(三苯膦)氯化钯(II)(10％mol)。将混合物回流24小时。将溶液在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩。将残余物溶于四氯化碳并在冰浴温度下加入到吡啶高溴酸盐(75.0mmol)的四氯化碳悬浮液中。将温度升至室温并搅拌4小时。将混合物用氯仿稀释并依次用盐水、盐酸(10％)、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用碳酸钠干燥然后真空浓缩。将化合物(6)通过硅胶柱纯化。

化合物(7)

向化合物(6)(10.0mmol)的THF溶液中加入1M六甲基乙硅氮烷基锂(lithium hexamethyldisilizane)的THF溶液(11.0mmol)并将混合物室温搅拌过夜。将混合物通过用乙酸乙酯稀释的1N盐酸中和。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩。将残余物溶于THF并加入BH₃-THF(1M)，然后将反应液回流8小时。将混合物用1N盐酸水解并用乙酸乙酯稀释，将有机层用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，然后真空浓缩得到化合物(7)。

化合物(8)

向化合物(7)(0.5mmol)的DMF溶液中依次加入NaH(0.6mmol)和2，3-二氯-5-三氟甲基-吡啶(0.6mmol)。将混合物于90℃加热过夜。将反应混合物用1N盐酸中和，然后在水和乙酸乙酯之间进行分配。将有机层用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤然后真空浓缩。将混合物通过硅胶柱纯化，用乙酸乙酯-己烷洗脱。

结构式(I-1b)的化合物可以以相同的方式制得，但用2，4-二氯-6-甲基-3-乙酯嘧啶(1’)代替相应的吡啶(1)，如以下反应方案所示。

结构式(I-1b)

化合物(4’)

将化合物(2’)(20.0mmol)和2，4-二氯苯肼(25.0mmol)的乙醇溶液回流过夜。蒸除乙醇并将残余物溶于乙酸乙酯，用水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩得到化合物(4’)，该化合物不经纯化直接用于随后的步骤。

化合物(5’)

将化合物(4’)(15.0mmol)和三氯氧磷(15ml)的混合物回流3小时，冷却，倒在冰上并用1N NaOH中和。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后浓缩得到所需产物(5’)。

化合物(6’)

向化合物(5’)(15.0mmol)的THF溶液中加入三-正丁基(1-乙氧基)乙烯基锡(10.0mmol)和二(三苯膦)氯化钯(II)(10％mol)。将混合物回流24小时。将溶液在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机相用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩。将残余物溶于四氯化碳并在冰浴温度下加入到吡啶高溴酸盐(75.0mmol)的四氯化碳悬浮液中。将温度升至室温并搅拌4小时。将混合物用氯仿稀释并依次用盐水、盐酸(10％)、饱和碳酸氢钠溶液洗涤，用碳酸钠干燥然后真空浓缩。将化合物(6’)通过硅胶柱纯化。

化合物(7’)

向化合物(6’)(10.0mmol)的THF溶液中加入氢化钠(11.0mmol)并将混合物室温搅拌过夜。将混合物通过用乙酸乙酯稀释的1N盐酸中和。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后真空浓缩。将残余物溶于THF并加入BH₃-THF(1M)，然后将反应液回流8小时。将混合物用1N盐酸水解并用乙酸乙酯稀释，将有机层用饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤，然后真空浓缩得到化合物(7’)。

实施例2

结构式(I-2)的代表性化合物的合成

结构式(I-2a)

α-邻苯二甲酰亚胺-2，4-三氯苯乙酮(1)

将α-2，4-三氯苯乙酮(15g，67mmol)在搅拌下于5℃下加入到邻苯二甲酰亚胺钾(16g，86mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(70ml)悬浮液中。5分钟后，将形成的溶液升温至室温，然后于50℃加热0.5小时。加热后，将溶液用泵浓缩并将得到的固体在乙酸乙酯/碳酸氢钠溶液之间进行分配，然后将得到的有机层合并。将有机层干燥然后蒸除所有溶剂得到固体。将该固体用二氯甲烷和乙醚重结晶得到化合物(1)，9.6g。

化合物(2)

将α-邻苯二甲酰亚胺-2，4-三氯苯乙酮(1)(9.6g)的二甲基甲酰胺二甲缩醛(30ml)溶液回流1小时。回流后，TLC显示反应完全，高真空蒸除溶液溶剂得到黄褐色固体(2)。

2-(2’，4’-二氯苯基)-3-氨基吡唑(3)

向化合物(2)(14g，36mmol)的无水乙醇(300mL)悬浮液中加入无水肼(1.2g，36mmol)。黄褐色的悬浮液缓慢变成透明的深棕色溶液。将溶液室温搅拌1小时，然后补加无水肼(1.2g，36mmol)。将溶液加热回流2小时，形成白色固体。将反应混合物冷却至室温并滤出固体。将滤液浓缩然后在饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯之间进行分配。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤然后浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到棕色粘稠固体状所需产物(3)(7.7g，33.8mmol，94％)，将其通过GC/MS进行鉴定。

2-甲基-4-羟基-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(4)

将化合物(3)(7.7g，33.8mmol)、乙酰乙酸乙酯(8.4g，65mmol)和120mg对甲苯磺酸一水合物的200mL苯溶液回流2小时。将反应混合物浓缩然后溶于20mL二苯基醚。将二苯基醚于240℃加热10分钟，冷却然后过滤收集固体，用乙醚冲洗。得到棕色固体状产物(4)(2.5g，8.4mmol，25％)，将其通过¹HNMR进行鉴定。

2-甲基-4-氯-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(5)

将化合物(4)(2.0g，6.8mmol)和三氯氧磷(10mL)的混合物回流2小时，冷却，倒在碎冰上，用1N NaOH中和。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩得到黄色固体，将其在乙醚中研制。得到浅黄色固体状所需产物(5)(1.1g，3.2mmol，47％)，将其通过GC/MS、元素分析和¹HNMR进行鉴定。

2-甲基-4-(N-4-庚基)-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(6)

将(5)(0.3g，0.96mmol)和对甲苯磺酸一水合物(250mg)在0.8mL 4-庚胺中的混合物在5ml反应瓶中于180℃回流6小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化(己烷/乙酸乙酯，1∶1)得到黄色油状所需产物(6)(140mg，0.36mmol，37％)，将其通过GC/MS和¹H NMR进行鉴定。

化合物(7)(I-2a-1)

将2-甲基-4-(N-4-庚基)-7-(2’，4’-二氯苯基)-吡唑并吡啶(6)(43.9mg，0.11mmol)、碳酸钾(31.0mg，0.22mmol)和1，2-二溴乙烷在丁酮(2ml)中的混合物于85℃加热过夜。真空蒸除溶剂并将残余物在乙酸乙酯和水之间进行分配，将有机层用硫酸镁干燥，过滤然后真空浓缩。将化合物(7)通过硅胶柱纯化，用二氯甲烷-甲醇(10-1)洗脱，然后通过LC/MS进行鉴定。¹H NMR(CDCl₃，TMS)：0.93(t，6H)；1.37(m，4H)；1.61(m，4H)；2.58(5，3H)；3.67(t，24)；3.82(m，1H)；4.45(t，2H)；6.22(s，1H)；7.35(d，1H)；7.53(s，1H)；7.86(d，1H).

化合物(8)

将化合物(7)(43mg，0.1mmol)的甲苯(2ml)溶液用活化的二氧化锰催化剂(100mg)在回流下处理16小时。用硅藻土垫滤除催化剂并将滤液蒸发至干，然后通过制备TLC(硅胶)用乙酸乙酯∶己烷(1∶1)纯化得到化合物(8)。

或者，结构式(I-2a)的化合物可以通过如下方法制备。

结构式(I-2a)

4-硝基吡唑(9)

将吡唑(Lancaster)(30.0g，441mmol)分批加入到冰浴冷却的220ml 97％硫酸中。将混合物于55℃加热并缓慢加入30ml 70％硝酸(0.5mol，1.1当量)。然后将反应混合物于55℃搅拌3小时(通过TLC乙酸乙酯/己烷1/1检测反应，吡唑R_f＝0.4，I2显色，硝基吡唑R_f＝0.6，UV下观察)，冷却，倒入600ml冰水中并用6N NaOH溶液中和(pH7)。然后将产物用乙酸乙酯萃取(5×150ml)。将有机相合并，用水(100ml)、盐水(100ml)洗涤然后用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩得到白色固体状所需产物(9)(37.0g，326mmol，74％)。GC/MS：m/z＝113(100％)。

4-氨基吡唑(10)

将4-硝基吡唑(9)(15.0g，133mmol)加入到10％钯碳(7.0g，6.65mmol，5％mmol)的乙醇(100ml)悬浮液中。将混合物在氢气压力(40psi)下室温搅拌3小时。通过TLC(乙酸乙酯/己烷1/1，4-硝基吡唑R_f＝0.6，UV下观察，4-氨基吡唑R_f 0.1，UV下观察)检测反应终点。用硅藻土垫滤除催化剂然后蒸除溶剂。得到布尔戈尼红色的油状产物(10)(10.5g，126mmol，95％)，该产物不经纯化直接用于随后的步骤。GC/MS：m/z＝83(100％)。

亚胺(11)。

将4-氨基吡唑(10)(10.5g，126mmol)、乙酰乙酸乙酯(18.0g，140mmol，1.05当量)和催化量的对甲苯磺酸一水合物(1.3g，6.65mmol，5％)的100mL苯溶液用迪安斯达克分水器回流约1小时。通过TLC(乙酸乙酯/己烷1/1，4-氨基吡唑R_f＝0.1，亚胺R_f＝0.5，UV下观察，放置过夜后变为棕色)检测反应终点。真空蒸除溶剂并将亚胺通过短的硅胶色谱柱纯化得到黄褐色固体状所需产物(11)(22.4g，125mmol，91％)。GC/MS：m/z＝195(100％)。

5-甲基-7-羟基-吡唑并[4，3-b]吡啶(12)

将亚胺(11)(7.03g，35.9mmol)加入到沸腾的二氧六环(30mL)和二苯基醚(30mL)的溶液中。将混合物加热至有固体形成(5分钟)。将反应混合物继续加热2分钟。停止加热。通过LC/MS(196峰的消失)检测环化反应的结束。冷却至室温后，加入300ml乙醚并将反应混合物搅拌15分钟。将固体用乙醚冲洗。得到黄褐色结晶固体状所需产物(12)(5.09g，34.1mmol，95％)。LC/MS：[M+H]’＝150。

5-甲基-7-氯-吡唑并[4，3-b]吡啶(13)

将环化的化合物(12)(4.58g，30.7mmol)的三氯氧磷(30mL)溶液于110℃加热30分钟。通过LC/MS(150的峰消失，出现168的峰)检测反应终点。冷却至室温后，将反应混合物倒在冰上并用6NNaOH溶液将pH调至5。过滤收集固体并将母液的水层用乙酸乙酯萃取(3×250ml)。将上述固体溶于合并的有机相中，用盐水洗涤(1×250ml)然后用硫酸钠干燥，过滤然后浓缩。将粗产物通过短的硅胶色谱柱进行纯化得到浅黄色固体状所需产物(13)(4.50g，26.8mmol，87％)。GC/MS：m/z＝167(100％)；LC/MS：[M+H]’＝168。

3-溴-5-甲基-7-氯-吡唑并[4，3-b]吡啶(14)

将氯化合物(13)(600mg，3.58mmol)在冰浴冷却下溶于水/甲醇(12mL/12mL)混合物中。向冷却的混合物中滴加(629mg，3.94mmol，1.1当量)的H₂O/MeOH(1mL/1mL)溶液。10分钟后，溶液变为透明LC/MS显示不再含有氯化合物。将反应混合物浓缩除去甲醇。将粗品反应混合物用乙酸乙酯萃取(3×50ml)。将有机相合并，用盐水洗涤(1×100ml)并用硫酸钠干燥，过滤然后真空浓缩。得到浅黄色固体状所需产物(14)。GC/MS：m/z＝245，247(100％)；LC/MS：[M+H]’＝246，248。

3-溴-5-甲基-7-(5-氨基壬烷)-吡唑并[4，3-b]吡啶(15)

将化合物(14)(1.0g，0.4mmol)和5-氨基壬烷(1.7g，12mmol)以及对甲苯磺酸(1.5g，8mmol)在反应瓶中于160℃加热过夜。将残余物溶于乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液、盐水洗涤，用硫酸镁干燥然后真空浓缩。将残余物用甲苯研制，分离出形成的固体然后真空干燥得到912mg白色固体状产物(15)。LCMS：(M+H)＝353，354。

3-(2，4-二氯苯基)-5-甲基-7-(5-氨基壬烷)-吡唑并[4，3-b]吡啶 (16)

将化合物(15)(100mg，0.27mmol)、2，4-二氯苯基硼酸(63.7mg)、乙醇(0.6ml)、2M碳酸钠溶液(0.6ml)、Pd(PPh₃)₄(10mg)和甲苯(1.6ml)的混合物于160℃加热过夜。将溶液在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机层用硫酸镁干燥然后真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化得到34mg产物(16)。LCMS(M+H)419，420。

化合物(17)(I-2a-2)

向化合物(16)(34mg，0.08mmol)的2-丁酮(3ml)溶液中加入碳酸钾(67.18mg，0.48mmol)和二溴乙烷(30.48mg，0.16mmol)并将混合物加热回流过夜。将混合物在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机层用硫酸镁干燥然后真空浓缩。将粗产物通过硅胶色谱纯化，用乙酸乙酯-己烷(1-1)洗脱得到10mg产物(17)(在下表2中称为“化合物(I-2a-1)”)。LC/MS(M+H)＝445，446。

本发明的其它代表性化合物通过以上实施例中所描述的方法制备，其分析数据如下表1中所示。

表1

代表性化合物的分析数据

或者，结构式(I-2b)的化合物可以通过如下反应方案制备：

结构式(I-2b)

化合物(2’)

将(1’)(4.50g，30mmol)(T.Huynh-Dinh等，《有机化学杂志》(J.Org.Chem.)40：2825-2830，1975)和三氯氧磷(15mL)的混合物回流3小时，冷却，倒在碎冰上，用1N NaOH中和。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩得到所需产物(2’)。

化合物(3’)

向(2’)(3.37g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)的溶液中加入溴(3.84g，24mmol)在甲醇(10mL)和水(10mL)中的溶液。将反应混合物室温搅拌2小时。将反应混合物用硫代硫酸钠溶液洗涤，用乙酸乙酯萃取。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(3’)。

化合物(4’)

将(3’)(2.50g，10mmol)和对甲苯磺酸一水合物(100mg)在3mL4-庚胺中的混合物于120℃回流5小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(4’)。

化合物(5’)

向搅拌的(4’)(1.63g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)钯(0)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸钠水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇溶液(8mL)。将形成的混合物在氮气氛下回流过夜。将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释并用饱和氯化铵溶液洗涤一次。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(5’)。

化合物(6’)

将(5’)(390mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸钾(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(6’)。

实施例3

结构式(I-3)的代表性化合物的合成

N-氧化物(4)

将通过Clayton和Kenyon公开的方法(《化学会志》(J.Chem.Soc.)，2952-57，1950)制备的化合物(3)(7.31g，50mmol)、mCPBA(9.49g，55mmol)在二氯甲烷(200mL)中的混合物室温搅拌2小时。将反应混合物在二氯甲烷和水之间进行分配。将二氯甲烷用硫酸钠干燥，过滤然后浓缩得到所需产物N-氧化物(4)。

化合物(5)

将N-氧化物(4)(4.87g，30mmol)和三氯氧磷(15mL)的混合物回流3小时，冷却，倒在碎冰上，然后用1N NaOH中和。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥然后浓缩得到化合物(5)。

化合物(6)

向化合物(5)(3.61g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的混合物中加入溴(3.84g，24mmol)的甲醇(10mL)和水(10mL)溶液。将反应混合物室温搅拌2小时。将反应混合物用硫代硫酸钠水溶液洗涤，然后用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯层合并，用硫酸钠干燥，过滤然后浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到化合物(6)。

化合物(7)

将(6)(2.60g，10mmol)和对甲苯磺酸一水合物(100mg)在3mL4-氨基-庚烷中的混合物于120℃回流5小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化得到化合物(7)。

化合物(8)

向搅拌的化合物(7)(1.69g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)-钯(0)(Lancaster)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸钠水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇(8mL)溶液。将形成的黄褐色混合物回流过夜。将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释并用饱和氯化铵溶液洗涤一次。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到化合物(8)。

化合物(9)

将化合物(8)(404mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸钾(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化得到化合物(9)。

或者，结构式(I-3b)的化合物可以通过如下反应方案制得。

结构式(I-3b)

化合物(2’)

向(1’)(Imai，《化学药物通报》(Chem Pharm.Bull.)12：1030-1039，1964)(3.34g，20mmol)在甲醇(20mL)和水(20mL)中的混合物中加入溴(3.84g，24mmol)的甲醇(10mL)和水(10mL)溶液。将反应混合物室温搅拌2小时。将反应混合物用硫代硫酸钠水溶液洗涤，然后用乙酸乙酯萃取。将乙酸乙酯层合并，用硫酸钠干燥，过滤然后浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(2’)。

化合物(3’)

将(2’)(2.48g，10mmol)和对甲苯磺酸一水合物(100mg)在3mL4-庚胺中的混合物于120℃回流5小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(3’)。

化合物(4’)

向搅拌的(3’)(1.63g，5mmol)的10mL甲苯溶液中加入四(三苯膦)-钯(0)(578mg，0.5mmol，10％mol)和2.0M碳酸钠水溶液(8mL)，然后加入2，4-二氯-苯硼酸(1.14g，6mmol)的乙醇(8mL)溶液。将形成的混合物在氮气氛下回流过夜。将反应混合物冷却，用乙酸乙酯稀释并用饱和氯化铵溶液洗涤一次。将有机层用硫酸钠干燥，过滤，浓缩。将残余物通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(4’)。

化合物(5’)

将(4’)(390mg，1mmol)、1，2-二溴乙烷(1mL)和碳酸钾(276mg，2mmol)在10mL 2-丁醇中的混合物回流4小时。将反应混合物冷却，在乙酸乙酯和碳酸氢钠水溶液之间进行分配。将有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，通过快速硅胶色谱纯化得到所需产物(5’)。

实施例4

结构式(I-4)的代表性化合物的合成

结构式(I-4b)

2-氨基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-3-甲腈(3)

将丙酮醇(1)(20.0mL，0.260mol)、2，4，6-三甲基苯胺(2)(36.5mL，0.260mol)和4-甲苯磺酸一水合物(0.20g)的溶液在苯(115mL)中用迪安斯达克分水器回流以除去水。2小时后，加入丙二腈(16.4ml，0.260mol)并继续加热14小时。将混合物冷却至室温，浓缩，将残余物进行色谱分离(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到27.0g(43％)棕色油状的化合物(3)。

N-[3-氰基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-2-基]乙酰胺 (4)

将化合物(3)(25.3g，0.106mol)和乙酸酐(11.0ml，0.117mol)的混合物在乙酸(25mL)中回流45分钟，冷却至室温，倒在碎冰上然后用乙酸乙酯萃取。将有机层用碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥然后浓缩得到33.6g(100％)黄色泡沫状化合物(4)。

2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-3，7-二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-酮(5)

将化合物(4)(32.1g，0.144mol)和85％磷酸(30mL)的混合物于130℃加热30分钟。将形成的混合物冷却至室温，在剧烈搅拌下倒入冰水中，然后滤出形成的沉淀并真空干燥得到21.6g(67％)粉色固体状化合物(5)。

4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-3，7-二氢-吡咯并[2.3- d]嘧啶(6)

将化合物(5)(18.3g，65.0mmol)在POCl₃(30mL)中的混合物回流3小时，冷却至室温，倒入冰水中，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取液用碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥然后真空浓缩。将残余物进行色谱分离(用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到16.3g(84％)褐色粉末状化合物(6)。

4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙酰基)-3，7- 二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶(7)

将化合物(6)(11.2g，37.4mmol)加入到20当量氯化铝和25当量氯乙酰氯的氯仿溶液(150mL)中。将溶液加热回流16小时。分出有机层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥然真空蒸发得到化合物(7)。

4-(4-庚基氨基)-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙酰基)-3，7-二氢吡咯并[2，3-d]嘧啶(8)

将化合物(7)(730mg，2mmol)、4-氨基庚烷(250mg，2.2mmol)和三乙胺(250mg，2.5mmol)的混合物室温搅拌16小时。将溶液用乙酸乙酯稀释并用盐水洗涤。将有机层用硫酸钠干燥然后蒸发至干得到化合物(8)。

化合物(9)

将(8)(440mg，1mmol)的THF(10mL)溶液冷却至0℃，然后缓慢加入1M六甲基乙硅氮烷基锂的THF(1mL)溶液。将反应液加热回流16小时，蒸发至干，用乙酸乙酯和己烷通过快速色谱纯化得到化合物(9)。

或者，结构式(I-4a)的化合物可以通过如下反应方案制备。

结构式(I-4a)

2-氨基-5-甲基-1-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯-3-甲酸乙酯(11)

将丙酮醇(1)(20mL，0.26mol)、2，4，6-三甲基苯胺(2)(36.5mL，0.260mol)和4-甲苯磺酸一水合物(0.21g)的溶液在苯(115mL)中用迪安斯达克分水器回流以除去水。2小时后，加入氰基乙酸乙酯(27.7ml，0.26mol)并继续加热14小时。将混合物冷却至室温，浓缩，将残余物进行色谱分离(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到21.4g(29％)黄色油状的化合物(11)。

3-乙氧羰基-4-羟基-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(12)

将化合物(11)(12.3g，43.0mmol)、3-乙氧基巴豆酸乙酯(6.79g，43.0mmol)和4-甲苯磺酸一水合物(0.50g)的二甲苯(100mL)溶液回流30分钟。再用30分钟的时间蒸除溶剂，然后将化合物冷却至室温。加入叔丁醇钾(4.82g，43.0mmol)的无水乙醇(50mL)溶液并将混合物于80℃加热3小时，冷却至室温，用乙酸(2.50mL)处理然后真空浓缩。将残余物加入乙酸乙酯中，用乙醚处理析出6.91g(46％)白色粉末状的化合物(12)。

4-羟基-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(13)

将化合物(12)(4.11g，11.7mmol)在1.0M氢氧化锂(25mL)和乙醇(15mL)中的溶液加热回流17小时。将混合物冷却至室温，用稀盐酸中和并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取液用氯化钠水溶液洗涤，干燥，然后真空浓缩。将残余物在二苯基醚(2.5mL)中于200℃加热2小时，冷却至室温，然后用甲醇-乙酸乙酯结晶得到1.41g(43％)白色粉末状的化合物(13)。

4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶 (14)

化合物(14)按照以上制备化合物(6)时所用的相同方法从化合物(13)制备。

4-氯-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(15)

化合物(15)按照以上制备化合物(7)时所用的相同方法从化合物(14)制备。

4-(4-庚基氨基)-2，6-二甲基-7-(2，4，6-三甲基苯基)-5-(2-氯乙酰基)-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶(16)

化合物(16)按照以上制备化合物(8)时所用的相同方法从化合物(15)制备。

化合物17

化合物(17)按照以上制备化合物(9)时所用的相同方法从化合物(16)制备。

结构式(I-4b)的化合物可以按照如下反应制备。

结构式(I-4b)

5-烯丙基-4，6-二氯-2-甲基嘧啶(18)

将乙脒盐酸盐(11.2g，119mmol)加入到搅拌的甲醇钠(6.41g，119mmol)的甲醇(180mL)溶液中。5分钟后，加入烯丙基丙二酸二乙酯(18ml，91mmol)并将混合物加热回流15小时，冷却至室温，然后真空浓缩得到20g白色固体状的粗品吡啶。将其在三氯氧磷(100mL)中加热回流5小时。将混合物冷却至室温，倒在碎冰(200mL)上，用NaHCO₃粉末中和然后用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液干燥(硫酸镁)，真空浓缩，然后将残余物进行色谱分离(用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到7.32g(30％)浅黄色油状的嘧啶(18)。

5-烯丙基-4-氯-6-(2，4-二氯苯胺基)-2-甲基嘧啶(19)

将氢化钠的矿物油分散液(60％，1.38g，34.5mmol)加入到搅拌的嘧啶(18)(3.50g，17.2mmol)和2，4-二氯苯胺(3.07g，18.9mmol)的DMF(40mL)溶液中。25分钟后，将混合物倒入水(100mL)中并用二氯甲烷萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO₄)，真空浓缩，将残余物进行色谱分离(用二氯甲烷洗脱)得到2.09g(37％)白色粉末状的嘧啶(19)。

4-氯-1-(2，4-二氯苯基)-6-甲基-5，7-二氮杂吲哚(20)

将高碘酸钠(3.83g，17.9mmol)加入到搅拌的(19)(1.94g，5.90mmol)的3∶1丙酮-水(55mL)溶液中。将混合物短时间加热以形成均相，然后加入2.5％四氧化锇的叔丁醇溶液(0.4mL)。20小时后，将混合物用水(50mL)和饱和硫代硫酸钠(50mL)稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液真空浓缩，将残余物在二氯甲烷(40mL)和4N HCl(5mL)中搅拌4小时。将混合物倒入饱和NaHCO₃中，用二氯甲烷萃取，干燥(MgSO₄)然后真空浓缩。将残余物进行色谱分离(用二氯甲烷洗脱)得到0.929g(50％)白色固体状的二氮杂吲哚(20)。

3-溴-1-(2，4-二氯苯基)-4-(4-庚基氨基)-6-甲基-5，7-二氮杂吲哚(21)

将溴(0.077mL，1.5mmol)加入到搅拌的(20)(214mg，0.685mmol)的二氧六环(21mL)溶液中。4小时后，将混合物用氯化钠水溶液稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO₄)然后真空浓缩得到溴化物粗品。将其加入4-庚胺(3mL)中并于90℃加热45分钟。将形成的混合物冷却至室温，真空浓缩，将残余物通过制备TLC纯化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到227mg(70％)黄色油状的(21)，其在放置中固化。

N-烯丙基-3-溴-1-(2，4-二氯苯基)-4-(4-庚基)氨基-6-甲基-5，7- 二氮杂吲哚(22)

将氢化钠的矿物油分散液(60％，80mg，2.0mmol)加入到搅拌的(21)(186mg，0.396mmol)的DMF(5mL)溶液中。10分钟后，加入烯丙基碘(0.15mL，1.6mmol)并继续搅拌90分钟。将混合物用水和氯化钠水溶液稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO₄)，真空浓缩，然后将残余物通过制备TLC纯化(用5％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到117mg(58％)白色固体状的(22)。

化合物(23)(I-4b-1)

将四(三苯膦)钯(0)(22mg，0.019mmol)加入到搅拌的5(83mg，0.16mmol)和醋酸钾(85mg，0.87mmol)的DMF(3mL)溶液中，然后将形成的混合物于83℃加热45分钟。将混合物冷却至室温，倒入氯化钠水溶液中并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液真空浓缩，将残余物通过制备TLC纯化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到59mg(86％)无色油状的(23)。¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.57(d，J＝2.4Hz，1H)，7.49(d，J＝8.4Hz，1H)，7.38(dd，J＝8.6，2.3Hz，1H)，6.98(s，1H)，5.38(br s，1H)，5.12(br s，1H)，4.93(h，J＝5.0Hz，1H)，4.03(br s，2H)，2.54(s，3H)，1.71-1.48(m，4H)，1.38-1.26(m，4H)，0.92(t，J＝7.4Hz，6H)；LCMS(MH⁺，429).

化合物24(I-4b-2)

将烯烃(23)(9.4mg，0.022mmol)和10％吸附在活性炭上的钯(3mg)在乙酸乙酯(2mL)中在氢气气囊下搅拌5小时。将混合物用硅藻土垫过滤，真空浓缩，将残余物通过制备TLC纯化(用15％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)得到4.9mg(52％)无色油状的(24)：

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.55(d，J＝2.7Hz，1H)，7.48(d，J＝8.4Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.7，2.7Hz，1H)，6.63(br s，1H)，4.85(h，J＝4.9Hz，1H)，3.43(dd，J＝12.3，4.8Hz，1H)，3.23-3.19(m，1H)，3.22(dd，J＝12.0，9.6Hz，1H)，2.54(s，3H)，1.68-1.43(m，4H)，1.39-1.25(m，7H)，0.95-0.89(m，6H)；LCMS(MH⁺，431).

实施例5

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

本发明其它的代表性化合物通过如下反应方案制备。

化合物(2)

将化合物(1)(270mg，0.86mmol)、对甲苯磺酸一水合物(225mg，1.18mmol)和DL-2-氨基-1-戊醇(1mL)于160℃加热3小时。将混合物冷却至室温，用二氯甲烷稀释，然后在硅胶柱上纯化(用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱)得到408mg(100％)黄色固体状的化合物(2)：

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.76(d，J＝4.8Hz.1H)，7.53(br s，1H)，7.24-7.12(m，2H)，7.20(d，J＝7.8Hz，1H)，6.12(s，1H)，3.76-3.67(m，3H)，2.49(s，3H)，1.63-1.56(m，2H)，1.45-1.32(m，3H)，0.89(t，J＝7.1Hz，3H)；LC/MS(MH⁺，379).

化合物(3)

将化合物(2)(478mg，0.86mmol)溶于48％HBr(5mL)并于110℃加热4天。将混合物冷却至室温，小心地用固体NaOH碱化，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液干燥(MgSO₄)然后真空浓缩得到159mg(51％)黄色泡沫状的化合物(3)：

¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.86(d，J＝8.4Hz.1H)，7.52(d，J＝2.1Hz，1H)，7.34(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，6.30(s，1H)，4.69(br s，1H)，4.60(dd，J＝12.0，3.6Hz，1H)，4.10(dd，J＝12.2，8.6Hz，1H)，3.88-3.85(m，1H)，2.58(s，3H)，1.78-1.55(m，4H)，1.05(t，J＝7.4Hz，3H)；LC/MS(MH⁺，361).

化合物(4)

将氢化钠的矿物油分散液(60％，10mg，0.25mmol)加入到搅拌的化合物(3)(16mg，0.044mmol)的DMF(0.5mL)溶液中。5分钟后，加入1-溴丙烷(0.050mL，0.55mmol)并继续搅拌10分钟。将混合物小心地用饱和碳酸氢钠溶液稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的萃取液真空浓缩，然后将残余物通过制备TLC纯化(用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱)得到7mg(40％)黄色油状的化合物(4)，其中R₁是正丙基。

该方法是合成表2中所列化合物的代表性方法。

表2

代表性化合物的分析数据

实施例6

结构式(I-2A)的其它代表性化合物

表3的代表性化合物通过以上实施例5中所描述的方法制备。

表3

代表性化合物的分析数据

实施例7

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表4的代表性化合物通过如下方法制备(R＝乙基或氢)：

表4

代表性化合物的分析数据

实施例8

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表5的代表性化合物通过如下方法制备：

表5

代表性化合物的分析数据

实施例9

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表6的代表性化合物通过如下方法制备：

表6

代表性化合物的分析数据

实施例10

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表7的代表性化合物通过如下方法制备：

表7

代表性化合物的分析数据

实施例11

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表8的代表性化合物通过如下方法制备：

表8

代表性化合物的分析数据

实施例12

结构式(I-2A)的其它代表性化合物的合成

表9的代表性化合物通过如下方法制备：

表9

代表性化合物的分析数据

实施例13

具有CRF受体结合活性的代表性化合物

可以通过DeSouza等(《神经科学杂志》(J.Neurosci.)7：88-100，1987)描述的常规放射性配体结合试验来评估本发明化合物对CRF受体的结合活性。通过使用各种放射性标记的CRF配体，可用该试验来评估本发明化合物对任何CRF受体亚型的结合活性。简言之，结合试验涉及从CRF受体上置换放射性标记的CRF配体。

更具体地讲，结合试验用约1×10⁶稳定转染人CRF受体的细胞/管在1.5ml Eppendorf管中进行。向各试管中加入约0.1ml含或不含未标记的蛙皮降压肽、硬骨鱼紧张肽I或CRF(最终浓度为1μM)的试验缓冲液(例如，Dulbecco’s磷酸盐缓冲盐水，10mM氯化镁，20μM杆菌肽)(用来测定非特异性结合)、0.1ml[¹²⁵I]酪氨酸-羊CRF(最终浓度约200pM或接近于通过Scatchard分析测得的KD)和0.1ml含CRF受体之细胞的膜悬浮液。将混合物于22℃保温2小时，然后通过离心将结合的和游离的放射性配体分离。将沉积物洗涤两次后，在紧靠沉积物的上方对试管进行切割并以大约80％的效率在γ计数器中监测放射性。所有放射性配体的结合数据均用Munson和Rodbard(《分析生物化学》(Anal.Biochem.)107：220，1990)的非线性最小二乘法曲线拟合程序LIGAND进行分析。

实施例14

CRF-刺激的腺苷酸环化酶活性

还可以通过各种功能性试验对本发明的化合物进行评估。例如，可以将本发明的化合物进行CRF-刺激的腺苷酸环化酶活性的筛选。测定CRF-刺激的腺苷酸环化酶活性的试验可以按照Battaglia等的描述(《突触》(Synapse)1：572，1987)进行，并对其进行改良以使该试验适用于完整的细胞制品。

更具体地讲，常规的试验混合物在0.5mL的最终体积中含有如下物质：2mM L-谷氨酰胺、20mM HEPES和1mM IMBX的DMEM缓冲液溶液。在刺激研究中，将带有转染的CRF-受体的完整细胞置于24孔板中并与各种浓度的CRF相关肽和不相关肽一起在37℃下保温1小时以确定特定受体亚型的药理学排列顺序图型。保温后，吸出培养液，将各孔轻柔地用新鲜的培养液洗涤一次，然后吸出培养液。为了测定细胞内cAMP的量，将300μl 95％乙醇和20mM盐酸的溶液加入到各孔中并将形成的悬浮液于-20℃保温16-18小时。将溶液转移至1.5mL Eppendorf管内并将各孔用另外200μl乙醇/盐酸洗涤并与第一部分合并。将样品冷冻干燥然后用500μl乙酸钠缓冲液重新悬浮。用来自Biomedical Technologies Inc.(Stcoughton，MA)的单抗体试剂盒测定样品中的cAMP。为了对化合物进行功能性评估，将引起cAMP生产80％刺激的CRF或相关肽的单一浓度与各种浓度的竞争性化合物(10^-12至10^-6M)一起保温。

可以理解，尽管为了说明的目的在文中对本发明的具体实施方案进行了描述，但可以进行各种修改而不背离本发明的实质和范围。因此，本发明仅受所附权利要求的限定。

Claims

1.具有如下结构(I)的化合物：

包括其立体异构体、前药和可药用盐，其中：

n是1；

A和C各自独立地是氮、碳或CH；

B是氮或CR₃；

X是氮或CH；

Ar是芳基、取代的芳基、杂芳基或取代的杂芳基；

R是可选的取代基，在每种情况下，其独立地是烷基、亚烷基、芳基烷基或杂芳基烷基，其中m是0、1或2并且表示R取代基的数目；

R₁是-C(H)_0，1(R₄)(R₅)或-SO₂R₅；

R₂是氢或烷基；

R₃是氢、烷基或卤代烷基；

R₄是氢、酮基、烷基、亚烷基或卤素；和

R₅是式-Y-Z-R₆的基团，其中

Y是二价烷基、取代的二价烷基或直接键，

Z是NH、-N(R₇)、O、S、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH、NH(SO₂)或直接键；

R₆是氢、C₁-C₆烷基、C₃-C₇环烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环、取代的杂环；或者

R₇和R₈相同或不同并且独立地是烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基；或者

R₄和R₅合在一起形成环烷基、取代的环烷基、环烷基环烷基、取代的环烷基环烷基、环烷基芳基、取代的环烷基芳基、环烷基杂环或取代的环烷基杂环；

除非另外指明，上述术语具有如下含义：

“烷基”是指C₁-C₆烷基或C₃-C₇环烷基；

“亚烷基”表示从同一个碳原子上取走了两个氢原子的二价烷基；

“二价烷基”是指从同一个碳原子或不同的碳原子上取走了两个氢原子的二价烷基；

“芳基”是指芳香族碳环部分；

“芳基烷基”是指有至少一个烷基氢原子被芳基部分代替了的烷基；

“杂芳基”是指含有至少一个选自氮、氧和硫的杂原子并且含有至少一个碳原子的5至10元芳香族杂环，包括单环和二环环系；

“杂芳基烷基”是指有至少一个烷基氢原子被杂芳基部分代替了的烷基；

“杂环”是指5至7元单环或7至14元多环杂环，所述杂环可以是饱和的、不饱和的或芳香性的，并且含有1至4个彼此独立地选自氮、氧和硫的杂原子，并且其中的氮和硫杂原子可以任选地被氧化，氮杂原子可以任选地被季铵化，包括上述的任意杂环与苯环稠合形成的二环以及三环和更高级的杂环，杂环可以通过任何杂原子或碳原子进行连接。杂环包括以上定义的杂芳基；

“杂环烷基”是指有至少一个烷基氢原子被杂环代替了的烷基；

“环烷基”是指饱和的含有3-8个碳原子的碳环；

“环烷基环烷基”是指与环烷基环稠合的环烷基环；

“环烷基芳基”是指与芳基稠合的环烷基；

“环烷基杂环”是指与杂环稠合的环烷基环；

所用术语“取代的”是指有至少一个氢原子被取代基代替了的上述基团；在酮基取代基“-C(＝O)-”的情况下，有两个氢原子被替换；当被取代时，所用的“取代基”包括卤素、羟基、氰基、硝基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、烷基、烷氧基、烷硫基、卤代烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基、取代的杂环烷基、-NR_aR_b、-NR_aC(＝O)R_b、-NR_aC(＝O)NR_aNR_b、-NR_aC(＝O)OR_b、-NR_aSO₂R_b、-OR_a、-C(＝O)R_a、-C(＝O)OR_a、-C(＝O)NR_aR_b、-OC(＝O)NR_aR_b、-SH、-SR_a、-SOR_a、-S(＝O)₂R_a、-OS(＝O)₂R_a、-S(＝O)₂OR_a，其中R_a和R_b相同或不同并且彼此独立地是氢、烷基、卤代烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基、取代的芳基烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂芳基烷基、取代的杂芳基烷基、杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基；

“卤素”是指氟、氯、溴和碘；

“卤代烷基”是指有至少一个氢原子被卤素代替了的烷基；

“烷氧基”是指通过氧桥连接的烷基部分；

“烷硫基”是指通过硫桥连接的烷基部分；

“烷基氨基”和“二烷基氨基”是指通过氮桥连接的一个或两个烷基部分。

2.权利要求1的化合物，其中n是1并且具有如下结构之一：

3.权利要求1的化合物，具有如下结构之一：

4.权利要求3的化合物，其中X是CH并且具有如下结构之一：

5.权利要求3的化合物，其中X是N并且具有如下结构之一：

6.权利要求1的化合物，其中Ar是苯基或取代的苯基。

7.权利要求6的化合物，其中，取代的苯基是2，4-二氯苯基、2-氯-4-甲基-苯基、2-甲基-4-氯-苯基、2，4，6-三甲基-苯基、2-氯-4-甲氧基-苯基、2-甲基-4-甲氧基-苯基或2，4-二甲氧基-苯基。

8.权利要求1的方法，其中Ar是杂芳基或取代的杂芳基。

9.权利要求8的化合物，其中的杂芳基是吡啶基。

10.权利要求8的化合物，其中取代的杂芳基是4-甲基-6-二甲基氨基-吡啶-3-基。

11.权利要求1的化合物，其中R是烷基。

12.权利要求1的化合物，其中R是芳基烷基。

13.权利要求1的化合物，其中R₁是-CH(正丙基)₂、-CH(正丙基)(CH₂OCH₃)或-CH(乙基)(CH₂OCH₃)。

14.权利要求1的化合物，其中R₁是-SO₂R₅。

15.权利要求1的化合物，其中R₁是-C(H)_0，1(R₄)(R₅)。

16.权利要求15的化合物，其中R₁是-CH₂R₅。

17.权利要求15的化合物，其中R₁是-C(＝O)R₅。

18.权利要求15的化合物，其中R₁是-CH(R₄)(R₅)。

19.权利要求1的化合物，其中R₄是氢。

20.权利要求1的化合物，其中R₄是烷基。

21.权利要求1的化合物，其中R₄是酮基。

22.权利要求1的化合物，其中Y是二价烷基或取代的二价烷基。

23.权利要求1的化合物，其中Y是直接键。

24.权利要求1的化合物，其中Z是NH、-N(R₇)、O、S、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、NHC(＝O)、C(＝O)NH或NH(SO₂)。

25.权利要求1的化合物，其中Z是直接键。

26.权利要求1的化合物，其中R₆是氢、C₁-C₆烷基或C₃-C₇环烷基、或者是取代的C₁-C₆烷基或C₃-C₇环烷基。

27.权利要求1的化合物，其中R₆是芳基、取代的芳基。

28.权利要求1的化合物，其中R₆是杂环、取代的杂环、杂环烷基或取代的杂环烷基。

29.权利要求1的化合物，其中R₂是甲基。

30.权利要求1的化合物，其中R₂是乙基。

31.权利要求1的化合物，具有如下结构：

32.权利要求31的化合物，其中Ar是2，4-二氯苯基、2-氯-4-甲基苯基、2-三氟甲基-4-氯苯基或2-甲氧基-4-三氟甲基。

33.权利要求31的化合物，其中m是0。

34.权利要求31的化合物，其中R₁是CH(烷基)(烷基)。

35.权利要求34的化合物，其中R₁是CH(正丙基)₂。

36.权利要求34的化合物，其中R₁是CH(正丁基)₂。

37.权利要求31的化合物，其中m是1并且R是烷基。

38.权利要求37的化合物，其中R是甲基、乙基或正丙基。

39.权利要求38的化合物，其中R₁是-CH₂(环烷基)。

40.权利要求39的化合物，其中R₁是-CH₂(环丙基)。

41.权利要求38的化合物，其中R₁是CH(烷基)(烷基)。

42.权利要求41的化合物，其中R₁是CH(正丙基)₂或CH(正丁基)₂。

43.权利要求1的化合物，它是具有下列结构的化合物：

44.含有权利要求1所述的化合物和可药用载体或稀释剂的药物组合物。

45.权利要求1所述的化合物用于制备在温血动物中治疗表现出CRF分泌过多之病症的药物的用途。

46.权利要求45的用途，其中药物所治疗的病症是中风。

47.权利要求45的用途，其中药物所治疗的病症是抑郁。

48.权利要求45的用途，其中药物所治疗的病症是焦虑。

49.权利要求45的用途，其中药物所治疗的病症是过敏性肠综合症。

50.权利要求45的用途，其中药物所治疗的病症是炎性肠疾病。