CN117264967B - 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用 - Google Patents

一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN117264967B
CN117264967B CN202311195940.6A CN202311195940A CN117264967B CN 117264967 B CN117264967 B CN 117264967B CN 202311195940 A CN202311195940 A CN 202311195940A CN 117264967 B CN117264967 B CN 117264967B
Authority
CN
China
Prior art keywords
gbwox
ginkgo
gene
regeneration
tissue culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202311195940.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN117264967A (zh
Inventor
付芳芳
许薇
许平俊
薛良交
钟寅枭
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Forestry University
Original Assignee
Nanjing Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Forestry University filed Critical Nanjing Forestry University
Priority to CN202311195940.6A priority Critical patent/CN117264967B/zh
Publication of CN117264967A publication Critical patent/CN117264967A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN117264967B publication Critical patent/CN117264967B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
    • C12N15/8202—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation by biological means, e.g. cell mediated or natural vector
    • C12N15/8203—Virus mediated transformation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/10—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in agriculture
    • Y02A40/146—Genetically Modified [GMO] plants, e.g. transgenic plants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开了一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用，涉及植物基因工程技术领域。银杏GbWOX3A基因来源于银杏种胚，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。银杏GbWOX3A基因在银杏种胚发育及愈伤组织再生过程中的表达具有特异性，通过转基因功能验证实验证实了过表达GbWOX3A能够促进植物组培再生过程中不定芽的再生。因此，银杏GbWOX3A基因在植物组织再生过程中具有重要的理论意义及应用价值，尤其对于提高裸子植物再生效率方面扮演着重要的角色。

Description

一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用
技术领域
本发明涉及植物基因工程技术领域，具体涉及一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用。
背景技术
银杏在世界自然保护名录中属于濒危物种，在自然条件下繁殖困难，人工繁殖手段主要集中在扦插、分蘖、嫁接以及人工播种等方式，其繁殖周期长、成本高且容易受到环境影响。从银杏各种离体组织通过组织培养方式获得大量再生苗能够解决其周期长、成本高等缺点，减少工作量，短时间内获得大量银杏苗，提高育苗效率。因此，银杏分子育种迫切需要建立高效的组培再生体系。然而到目前为止，在组培再生过程中胚性愈伤组织诱导率低且愈伤组织极易褐化，无胚性愈伤组织诱导不定芽，间接体胚发生困难。银杏遗传转化体系同样未成功建立，难以通过转基因技术助力银杏再生，提高再生效率。因此，明晰银杏组培再生过程的调控机制，促进银杏离体组织再生极为重要。
WOX基因家族是真核生物中同源盒(Homeobox)家族的一员，是植物中独特的转录因子。该家族成员都有保守的Homeodomain同源域(HD)，编码60-66个氨基酸，形成螺旋-转角-螺旋(HTH)结构与DNA结合。该结构在维持Homeodomain功能完整性上发挥重要作用，其在不同物种中均非常保守。研究表明，WOX基因具有调节植物胚胎发育和极化、分生组织干细胞的维持、侧向器官和花器官的形成、应激反应等功能，尤其是在调控细胞增殖和分化促进植物组织再生方面发挥重要作用。
目前，体外再生的困难限制了大多数木本植物(尤其是裸子植物)的繁殖和基因改良，且裸子植物的WOX基因在促进植物组织培养再生过程中功能研究尚未有报道，因此挖掘裸子植物中提高组织培养再生过程的关键基因极为重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种来源于银杏种胚的GbWOX3A基因，其次在于提供GbWOX3A基因在植物组织培养中的应用。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的：
本发明的第一目的在于，提供了一种银杏GbWOX3A基因，所述银杏GbWOX3A基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
进一步改进在于，所述银杏GbWOX3A基因来源于银杏种胚。
进一步改进在于，所述银杏GbWOX3A基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明的第二目的在于，提供了一种银杏GbWOX3A基因在在植物组织培养中的应用。
进一步改进在于，所述应用为，在植物组织培养过程中，过表达银杏GbWOX3A基因促进植物组培再生过程中不定芽的再生。
进一步改进在于，所述植物为84K杨。
进一步改进在于，所述促进84K杨组培再生过程中不定芽的再生的方法为，先构建pCAMBIA1302-GbWOX3A过表达载体，再将过表达载体转化至农杆菌EHA105感受态中，最后利用农杆菌介导法转化84K杨的离体叶片。
本发明提具有如下有益效果：
本发明从银杏种胚中克隆得到银杏WOX家族的GbWOX3A基因CDS全长，该基因在银杏种胚发育及愈伤组织再生过程中的表达具有特异性，通过转基因功能验证实验证实了过表达GbWOX3A能够促进植物组培再生过程中不定芽的再生。因此，GbWOX3A基因在植物组织再生过程中具有重要的理论意义及应用价值，尤其对于提高裸子植物再生效率方面扮演着重要的角色。
附图说明
图1为GbWOX3A的克隆全长条带(图中：M为DL2000 DNA Marker)；
图2为GbWOX3A克隆序列与基因组预测序列对比图；
图3为pCAMBIA1302-GbWOX3A过表达载体图谱；
图4为GbWOX3A在不同阶段的胚及愈伤组织中的表达模式；
图5为在84K杨中过表达GbWOX3A与pCAMBIA1302-GFP空载体转化过程中的对比图。
具体实施方式
下面结合附图对本申请作进一步详细描述，有必要在此指出的是，以下具体实施方式只用于对本申请进行进一步的说明，不能理解为对本申请保护范围的限制，该领域的技术人员可以根据上述申请内容对本申请作出一些非本质的改进和调整。
1、材料与试剂
本实施例中未注明具体的实验方法，均可按照常规方法进行。如J.萨姆布鲁克等《分子克隆实验指南》、F.奥斯伯等《精编分子生物学实验指南》中所述条件，或按照所用产品生产厂商的使用说明。
银杏种胚是于2021年10月在南京林业大学校园内园林实验实训中心内一棵树龄约40年的银杏雌株上收集。
RNA提取试剂盒和质粒提取试剂盒购自OMEGA公司，其货号分别为R6827和D6943；逆转录试剂购自Monad公司，其货号为：MR05101M；克隆PCR所使用的高保真酶购自宝日医生物技术(北京)有限公司(TaKaRa中国)，其货号为D2215；胶回收试剂盒购自诺唯赞生物科技有限公司，货号为DC301；普通PCR反应的2×Rapid Taq Master Mix购自诺唯赞生物科技有限公司，其货号为P222；限制性内切酶NcoⅠ和SpeⅠ购自全式金生物技术有限公司，其货号分别为JN101和JS601；同源重组酶购自诺唯赞生物科技有限公司，其货号为C112；植物表达载体为pCAMBIA1302-GFP；大肠杆菌DH5α以及农杆菌EHA105均购自北京擎科生物有限公司，其货号分别为TSC-C14和TSC-A03；MS和LB培养基为本领域常用培养基，其配方参考J.萨姆布鲁克等《分子克隆实验指南》。
本实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可通过商业途径得到。
2、方法
2.1、GbWOX3A的全长克隆
用RNA提取试剂盒提取银杏种胚的RNA，提取出来的RNA进行琼脂糖凝胶电泳，检查RNA的完整性；然后，通过NanoDrop 2000检测RNA的浓度及纯度，后将其置于-80℃备用。用Monad公司的反转录试剂进行逆转录得到种胚的cDNA。在银杏全基因组CDS文件中查找GbWOX3A的CDS序列信息，根据序列信息使用Oligo软件设计克隆全长的正向引物：5′-ATGCCGATAACCAAAAATTACTTAGGCC-3′；和反向引物：5′-TCATAAGCCACTACACAGTGGAAAC-3′，以及在线网站(https://crm.vazyme.com/cetool/singlefragment.html)上设计带有同源臂的正向引物：5′-acgggggactcttgaccATGCCGATAACCAAAAATTACTTAGGC-3′和反向引物：5′-aagttcttctcctttactagtTAAGCCACTACACAGTGGAAAC-3′。
以cDNA为模板，使用高保真酶进行扩增，PCR反应的程序为：98℃3min，然后是35个循环，即98℃10s，58℃5s，72℃1min，最后是72℃5min。PCR结束后对产物进行电泳检测(图1)，并使用胶回收试剂盒回收产物，具体操作见说明书。回收后的片段用同源臂引物以相同的程序进行二次PCR并回收。表达载体pCAMBIA1302-GFP使用限制性内切酶NcoⅠ和SpeⅠ进行双酶切，双酶切反应程序为：37℃孵育15min后80℃加热20min终止反应。线性化的pCAMBIA1302-GFP载体与第二次PCR后的产物在同源重组酶的作用下37℃进行重组连接30min，反应结束后将连接产物转到大肠杆菌DH5α感受态细胞中，转化步骤见说明书，最后将复苏液均匀的涂布到带有Kana抗性的LB固体培养基上，37℃倒置培养16h。待培养结束挑取培养基上的单克隆进行鉴定，首先是用无菌牙签挑取单克隆于10μL无菌水中混匀，然后吸取2μL菌液用于菌液PCR鉴定，剩余8μL保存在4℃。菌液PCR鉴定使用2×Rapid TaqMaster Mix，PCR反应程序为：95℃3min，
然后进行35个循环，即95℃15s，58℃15s，72℃15s，最后是72℃5min。将PCR鉴定成功的剩余8μL菌液送擎科公司测序鉴定目的片段是否完全克隆成功。用DNAMAN软件进行序列比对(图2)，比对成功的菌液在37℃，200rpm进行扩大培养后进行质粒提取，质粒提取步骤见说明书，获得的pCAMBIA1302-GbWOX3A质粒(图3)保存于-20℃。扩增的目的片段，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，长561bp，编码186个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.2、GbWOX3A在银杏种胚发育及体外再生过程中的表达模式
在南京林业大学校园内园林实验实训中心内一棵树龄约40年的雌株银杏，于2021年收集其9-11月份的种子，按照胚的长度将种子分成5个等级。将第五阶段的胚接种到MS+1mg/L 6-BA+1mg/L NAA+30g/L Sucrose+7g/L Agar培养基上进行愈伤组织的诱导，pH为5.8，25℃，暗培养15天后进行光照培养。采集五个阶段的愈伤组织样本，包括愈伤组织形成前的子叶发育期(接种后7天)、愈伤组织形成初期(接种后15天)以及愈伤组织增殖阶段(接种后25天、36天和54天)。总共对五个阶段的胚(Em1-5)、两个阶段的胚乳(En1，En5)和五个阶段的愈伤组织(C1-5)进行了取样，每个有三个生物学重复，在液氮中快速冷冻并保存到-80℃冰箱。然后将它们用于转录组测序和Gb WOX3A表达的定量实时PCR分析。
RNA提取及反转录步骤同2.1，根据MonAmpTM Green qPCR Mix(None/Low/High ROX)(货号为MQ10201)说明书用ABI 7500Real time PCR Systems(AppliedBiosystems)进行qRT-PCR。实验设置三个生物学重复和三个技术重复。以银杏GADPH基因作为内参基因，内参qRT-PCR的上游引物为：5′-ATCCACGGGAGTCTTCAC-3′，下游引物为：5′-CTCATTCACGCCAACAAC-3′；用PrimerPremier6设计的GbWOX3A的qRT-PCR的上游引物为：5′-CCAGAATCACAAAGCCAGGGATAGG-3′，下游引物为：5′-TCCATTCCTTCTTCACCTCATCTGC-3′。qRT-PCR反应体系如表1：
表1.qRT-PCR反应体系
qRT-PCR程序设置为：95℃预变形30s，95℃变性10s，58℃退火10s，72℃延伸30s，其中变性、退火、延伸设置为40个循环。荧光定量结果通过2-ΔΔCT方法计算测定GbW OX3A的相对定量表达水平。结果显示如图4，GbWOX3A基因主要在胚胎的早期发育阶段及愈伤组织形成初期表达。
3、过表达GbWOX3A基因对84K杨离体再生的影响
3.1、重组质粒pCAMBIA1302-GbWOX3A转化到农杆菌EHA105
参考擎科公司的EHA105 Chemically Competent Cell说明书，采用冻融法将pCAMB IA1302-GbWOX3A转化EHA105农杆菌感受态中，具体步骤如下：
(1)将-80℃保存的农杆菌感受态置于冰上融化成冰水混合状态加入1μL重组质粒，轻轻混匀后依次冰上静置5min、液氮5min、37℃水浴5min、冰浴5min。
(2)向离心管中加入700μL不含抗生素的LB液体培养基，混匀后28℃，200rpm复苏3h。
(3)吸取复苏液均匀涂布到含Kana和Rif抗性的LB固体培养基上，将平板倒置放于28℃暗培养3天后挑单克隆鉴定，鉴定步骤同2.1。
能扩增得到目的条带的菌落为阳性克隆，在含50mg/LKan LB液体培养基上培养至OD600为1左右，加入50％无菌甘油，液氮速冻2min，-80℃保存备用。
3.2、农杆菌介导的84K杨叶片遗传转化
取84K杨(Populus alba×P.glandulosa)无菌苗幼苗的顶端前5个叶片，切成1cm2大小(含叶脉)接种于WPM+0.1mg/L KT+1.5mg/L 2,4-D+0.5g/L MES+20g/L Sucr ose+7g/LAgar，25℃避光预培养2天。采用农杆菌侵染法进行转化，将农杆菌菌液在28℃摇至OD600为0.6左右，用MS液体等体积重悬。将预培结束的叶片置于重悬液中侵染10-15min后，吸干表面多余菌液，接种至WPM+0.1mg/L KT+1.5mg/L 2,4-D+0.5g/L MES+20g/L Sucrose 7g/LAgar+100μM AS，25℃避光共培养。2天后，将它们转移到WPM+0.1mg/L KT+1.5mg/L 2,4-D+0.5g/L MES+20g/L Sucrose+7g/L Agar+2mg/L Hyg+200mg/L Cef+200mg/L timentin.进行愈伤组织诱导筛选。30天后，将它们转移到MS+0.1mg/L NAA+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L MES+20g/L Sucrose+7g/L Ag ar+1.5mg/L Hyg+200mg/L Cef+200mg/L timentin进行分化培养。侵染15天后统计出愈率(愈伤组织块数/外植体数)，76天后统计不定芽诱导率(不定芽数量/外植体数)，数据统计结果如表2所示。
表2.愈伤组织形成及不定芽再生的数据统计表
3.3、过表达GbWOX3A对84K杨组培再生过程的影响
如图5所示，pCAMBIA1302-GFP空载对照组(EV)和pCAMBIA1302-GbWOX3A转基因组在出愈时间和不定芽形成时间上一致，但在再生的不定芽数量上有差异。愈伤组织在侵染15天后被诱导出来，并在35天左右大多数外植体均形成愈伤组织，在农杆菌侵染后约76天，再生出杨树不定芽。EV和GbWOX3A基因使得愈伤组织质地和体积适中，颜色青绿色，出愈率均为100％。
然而，如表2所示，GbWOX3A基因在不定芽诱导方面作用突出，出芽率高达47.2％；而EV的出芽率为24.7％。同时，值得注意的是，GbWOX3A使得每个外植体诱导出的不定芽数量是EV的5-6倍。这一结果证明了GbWOX3A在体外再生诱导不定芽过程中的重要功能，从而为改善银杏组培再生提供了可能。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种银杏GbWOX3A基因，其特征在于，所述银杏GbWOX3A基因来源于银杏种胚，所述银杏GbWOX3A基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述银杏GbWOX3A基因编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种如权利要求1所述的银杏GbWOX3A基因在植物组织培养中的应用，其特征在于，所述应用为，在植物组织培养过程中，过表达银杏GbWOX3A基因促进植物组培再生过程中不定芽的再生数量，其中，所述植物为84K杨。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述促进84K杨组培再生过程中不定芽的再生数量的方法为，先构建pCAMBIA1302-GbWOX3A过表达载体，再将过表达载体转化至农杆菌EHA105感受态中，最后利用农杆菌介导法转化84K杨的离体叶片。
CN202311195940.6A 2023-09-15 2023-09-15 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用 Active CN117264967B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311195940.6A CN117264967B (zh) 2023-09-15 2023-09-15 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311195940.6A CN117264967B (zh) 2023-09-15 2023-09-15 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN117264967A CN117264967A (zh) 2023-12-22
CN117264967B true CN117264967B (zh) 2024-04-26

Family

ID=89205556

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202311195940.6A Active CN117264967B (zh) 2023-09-15 2023-09-15 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN117264967B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104232679A (zh) * 2009-01-28 2014-12-24 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物及其制备方法
CN104450777A (zh) * 2014-10-13 2015-03-25 南京农业大学 一种改善植物钾素吸收效率,对抗缺钾胁迫的方法及其中使用的重组表达载体
WO2020108620A1 (zh) * 2018-11-29 2020-06-04 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 提高植物再生能力的靶基因、调控分子及其应用
CN111254150A (zh) * 2020-02-13 2020-06-09 南京林业大学 一种银杏GbFLSa基因及其表达蛋白和应用
CN112430260A (zh) * 2020-11-23 2021-03-02 中国科学院华南植物园 胚胎发育晚期丰富蛋白DoLEA36或其编码基因在调控植物愈伤组织形成中的应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104232679A (zh) * 2009-01-28 2014-12-24 巴斯夫植物科学有限公司 具有增强的产量相关性状的植物及其制备方法
CN104450777A (zh) * 2014-10-13 2015-03-25 南京农业大学 一种改善植物钾素吸收效率,对抗缺钾胁迫的方法及其中使用的重组表达载体
WO2020108620A1 (zh) * 2018-11-29 2020-06-04 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 提高植物再生能力的靶基因、调控分子及其应用
CN111254150A (zh) * 2020-02-13 2020-06-09 南京林业大学 一种银杏GbFLSa基因及其表达蛋白和应用
CN112430260A (zh) * 2020-11-23 2021-03-02 中国科学院华南植物园 胚胎发育晚期丰富蛋白DoLEA36或其编码基因在调控植物愈伤组织形成中的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
毛白杨PtoWOX11/12a对杨树扦插苗生长发育的影响;李真;王留强;卢孟柱;;林业科学;20171115(第11期);全文 *
水稻窄叶突变体相关基因的研究进展;潘境涛;谢红卫;钱明娟;徐斌;蔡耀辉;彭晓珏;;分子植物育种;20171108(第12期);全文 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN117264967A (zh) 2023-12-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110760515B (zh) 一种lncRNA lnc12及其在调控杨树不定根发育中的应用
CN107541520B (zh) 与水稻根发育和抗逆性相关OsSAUR11基因及编码蛋白与应用
CN112831478B (zh) 一种调控水稻垩白的蛋白质OsCAT8及其编码基因和应用
WO2021169925A1 (zh) 一种融合蛋白及其应用
CN112501182A (zh) 一种杨树erf转录因子基因及其应用
CN112175965B (zh) 增强水稻稻瘟病和白叶枯病抗性的基因、蛋白及提高水稻稻瘟病和白叶枯病抗性的方法
He et al. Agrobacterium-mediated transformation of large DNA fragments using a BIBAC vector system in rice
CN116855529B (zh) OsbHLH186基因在改良水稻粒型中的应用
CN117264967B (zh) 一种银杏GbWOX3A基因及其在植物组织培养中的应用
CN105585623A (zh) 抗病转TaMYB-KW基因小麦的培育方法及相关生物材料与应用
CN106434659B (zh) 大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用
CN112553203A (zh) 一种调控杨树生长发育的长链非编码RNA-lnc5及其应用
CN115807030B (zh) 一种与落叶松开花时间相关的LaSCL6蛋白及其编码基因和应用
CN111909956A (zh) 阻断或减弱水稻OsNAC092基因表达以提高水稻抗旱性的方法
CN116478998B (zh) 水稻韧皮部特异性表达启动子POs04g0452500及其应用
CN111748554B (zh) 烟草Nt-miRNA203在烟碱含量调节中的应用
CN114561387B (zh) 花生启动子及其应用
CN113416732B (zh) 一种铁皮石斛盐诱导型启动子proDoMYB75及应用
CN117384919A (zh) 一种NtERF283基因及其编码的蛋白与应用
CN116200406A (zh) 一种落羽杉TdADH3基因及其表达蛋白和应用
CN117025621A (zh) 一种百合珠芽形成调控基因LlLBD18的克隆及其应用
CN116041461A (zh) 一种石斛KNOX类转录因子基因DoSTM及其应用
CN116813738A (zh) GmNAC120基因在负调控大豆盐胁迫应答中的应用
CN116731140A (zh) 水稻OsERF103蛋白及其编码基因在提高植物干旱耐受性中的应用
CN118146329A (zh) 与植物抗逆性相关蛋白SpJAZ5及其编码基因与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant