CN116850112A - 莲胚胎提取物、制备方法及在修复抗衰化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种莲胚胎提取物、制备方法及在修复抗衰化妆品中的应用。所述莲胚胎提取物的制备方法，包括：选择新鲜的睡莲花朵，去除花瓣，取出花托；将花托进行切割，将胚胎内容物提取出来；将获得的胚胎内容物与水混合，然后在40‑80℃下，500‑200rpm搅拌1‑3小时，得到混合物；2000‑4000rpm转速对所述混合物进行离心5‑15分钟，收集离心后的上清液；将所述上清液进行浓缩处理，控制其相对密度1.02‑1.12。本发明通过专门提取莲胚胎的有效成分，有效利用其药理活性，并成功避免了有效成分之间的交叉混淆。此外，它还开创了一种全新的抗衰老修复化妆品，这种化妆品预计能够有效抗衰老并修复皮肤，充分发挥莲胚胎的药理效用。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物提取物，尤其涉及一种莲胚胎提取物、制备方法及在修复抗衰化妆品中的应用。
背景技术
莲是一种富有生命力的水生植物，其生命周期漫长，而且能在各种环境条件下茁壮生长。它的根茎如藤蔓般盘绕，饱满且内部蕴含丰富的通气孔道。每一节的上方都长有黑色的鳞叶，下方则生长着如同须毛般的不定根。莲叶呈现出盾形的轮廓，直径可达90厘米，边缘稍微波浪，叶面润滑并带有白色的粉末，叶脉自中心向外散发，形成放射状的图案。莲花的直径介于10到20厘米之间，花瓣形状多样，莲胚胎（即莲子房）直径在2到10厘米之间，坚硬的坚果呈椭圆形或者卵形，莲子同样是这两种形状。
莲花在文化史上占据了重要的地位，它的纯洁的象征意义引人深思。其莲根有着强大的净化水质的能力，能有效地吸收有害的重金属离子，对生态环境有着巨大的贡献。莲花可用以泡茶，其叶柄和花柄均可食用，全株均可用于药用和湿地自然景观的营造。作为一种传统药物，莲也被广泛用于治疗消化不良、痔疮等疾病。现代药学研究发现，莲花瓣中富含多种黄酮类、黄糖苷类、花青素类以及没食子酸等酚酸类成分，具有很好的抗氧化，抗炎及抗肿瘤等生物活性。
然而，过去的研究和开发往往将莲作为一个完整的整体进行处理，而并没有考虑到其各部位特性的差异。这种方式虽然简单，但实际上并不能最大限度地发挥出莲的所有有效成分。因为每一个部位都有其独特的化学成分和药理活性，如果不区分地进行提取，可能会导致有效成分混杂，从而影响每一种有效成分的浓度和效果。
在制药或化妆品行业，这种问题尤为严重。因为没有精确地提取莲的有效成分，可能会导致产品的效果受到影响，降低特定成分的效力，甚至可能引发不良反应。例如，如果没有精确地提取莲的有效成分，可能就无法实现理想的抗氧化和抗炎效果。
目前的研究主要集中在莲的种质资源收集、新品种培育、莲花精油组成、花色形成机制、花瓣和茎秆的营养物质分析以及化学成分分析等方面。而对于莲胚胎的研究，目前还很少见到。莲胚胎是植物繁育的重要器官，其提取物中含有独特的化学成分。如果能针对莲胚胎的有效成分进行专门的提取和利用，无疑将大大提高其在药物和化妆品领域的应用价值。
发明内容
发明人的主要构想是创建一种专门针对莲胚胎独特有效成分的提取技术。发明人相信，通过专门对莲胚胎的有效成分进行独立提取，不仅可以最大限度地利用其独特的活性成分，提升这些成分在化妆品中的浓度，从而提高化妆品的效用。更重要的是，这种方法可以避免活性成分的交叉混淆，确保化妆品中莲胚胎成分的纯度，这意味着能更精确地控制化妆品的性质和效果。
另一个核心构想是将莲胚胎的有益成分应用于制作具有抗衰老修复功效的化妆品。考虑到莲胚胎的药理活性，发明人期待通过专门提取和利用莲胚胎的有效成分，研发出一种全新的抗衰老修复化妆品。
据此发明人完成下述发明内容：
本发明的第一个方面，提供一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与水混合搅拌；
离心得到上清液；
浓缩。
优选地，一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与水混合搅拌，所述胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；
离心得到上清液；
上清液浓缩至相对密度1.02-1.12。
优选地，一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；
将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物提取出来；
将获得的胚胎内容物与水混合，然后在40-80℃下，500-200rpm搅拌1-3小时，得到混合物；胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；
2000-4000rpm转速对所述混合物进行离心5-15分钟，收集离心后的上清液；
将所述上清液进行浓缩处理，控制其相对密度1.02-1.12，得到所述睡莲莲胚胎提取物。
优选地，一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与含酶水溶液混合搅拌；
离心得到上清液；
浓缩；
所述含酶水溶液中包含氯化锌、酶和非离子表面活性剂。
优选地，所述酶为多酚氧化酶和糖苷酶中的至少一种。
优选地，所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：
0.04-0.1%氯化锌；
0.3-0.7%酶；
0.1-0.5%非离子表面活性剂；
余量为水。
进一步优选地，一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；
将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物提取出来；
将获得的胚胎内容物与含酶水溶液混合，然后在40-80℃下，500-200rpm搅拌1-3小时，得到混合物；胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；
2000-4000rpm转速对所述混合物进行离心5-15分钟，收集离心后的上清液；
将所述上清液进行浓缩处理，控制其相对密度1.02-1.12，得到所述睡莲莲胚胎提取物；
所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.04-0.1%氯化锌、0.3-0.7%酶、0.1-0.5%非离子表面活性剂、余量为水。
本发明的第二个方面，提供一种莲胚胎提取物，采用上述方法制备而成。
本发明的第三个方面，提供一种莲胚胎提取物在制备修复抗衰化妆品中的应用。
本发明的第四个方面，提供一种修复抗衰化妆品，包含上述莲胚胎提取物。
优选地，所述修复抗衰化妆品中包含1-10wt%莲胚胎提取物。
优选地，所述化妆品为面膜、粉底、隔离霜、化妆水、精华素、保湿油、营养霜、粉饼、洁面乳、洗发精、乳液或软膏。
本发明的有益效果表现在以下几个方面：
专项提炼：本发明开发了一种针对莲胚胎有效成分的专门提取方法。这种策略有利于最大限度地利用莲胚胎内含有的特有活性成分，并能有效地防止各种活性成分之间的交互干扰。
抗老修复功效：本发明通过将莲胚胎的有效成分用于化妆品的制作，创造出一种新型的抗衰老修复化妆品。考虑到莲胚胎本身的药理效应，预期本发明的化妆品将能有效抗衰老并修复皮肤，从而发挥显著的效果。
总之，本发明通过专门提取莲胚胎的有效成分，有效利用其药理活性，并成功避免了有效成分之间的交叉混淆。此外，它还开创了一种全新的抗衰老修复化妆品，这种化妆品预计能够有效抗衰老并修复皮肤，充分发挥莲胚胎的药理效用。
实施方式
一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；这一步骤是为了获取最佳的原材料。在盛花期，莲胚胎的药理活性成分最为丰富，因此在这个时候收集是最理想的。花朵的外部花瓣部分与本发明无关，应去除。花托中包含的胚胎内容物是本发明的重要原料。
将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物（即莲子房）提取出来；通过切割和挤压，可以最大限度地获取胚胎内容物，这是富含有效成分的部分。
将获得的胚胎内容物与含酶水溶液混合，然后在40-80℃下，500-200rpm搅拌1-3小时，得到混合物；胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；这一步骤是为了使胚胎内容物中的有效成分更好地溶解出来，形成一个均匀的混合物。温度和搅拌速度的选择，以及搅拌的持续时间，都是为了确保有效成分的最大溶出。含酶水溶液中的酶可以帮助分解莲胚胎中的复杂成分，使有效成分更易被提取出来。
2000-4000rpm转速对所述混合物进行离心5-15分钟，收集离心后的上清液；离心是为了进一步提纯，将混合物中的固体杂质和有效成分分离，只保留上清液，其中含有我们需要的有效成分。
将所述上清液进行浓缩处理，控制其相对密度1.02-1.12，得到所述睡莲莲胚胎提取物；浓缩的目的是提高活性成分的浓度，使得最终的提取物中含有较高浓度的有效成分。通过控制相对密度，可以确保提取物的质量和活性。
所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.04-0.1%氯化锌、0.3-0.7%酶、0.1-0.5%非离子表面活性剂、余量为水；这一步骤描述了制备含酶水溶液的方法。氯化锌、酶和非离子表面活性剂的比例都有助于提高有效成分的溶解和提取。氯化锌在这个过程中是为了提供锌离子，以帮助提高所用酶的活性和稳定性。然而，必须小心使用，因为过多的金属离子会抑制酶的活性。表面活性剂的作用主要是：增加胚胎内容物和酶之间的接触面，使酶能更有效地作用于胚胎内容物；降低细胞壁和胚胎内容物之间的表面张力，使酶更容易渗透细胞壁，从而提高酶的作用效率。
所述酶为多酚氧化酶和糖苷酶中的至少一种；较好地，所述酶为质量比(1-2):(1-2)的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶。酶的选择是基于它们在提取过程中的作用。多酚氧化酶可以氧化多酚类物质，而糖苷酶可以切断糖苷键，两者共同作用，使得胚胎内容物中的有效成分更易被提取出来。
所述非离子表面活性剂为烷基酰胺类、烷基葡糖苷类、脂肪醇聚氧乙烯醚类或脂肪醇聚甘油酯类。
各例中：
睡莲为热带睡莲，由珠海市绿色未来生物科技有限公司科技有限公司提供。
AEO-9，印尼POLYCHEM的脂肪醇聚氧乙烯醚。
多酚氧化酶，酶活力2.5万u/g，购自华中海威(北京)基因科技有限公司。
实施例中采用的糖苷酶为β-葡萄糖苷酶，酶活力为2000U/g，购自江苏奥福生物科技有限公司。
实施例1
一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
首先，在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；
接下来，将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物提取出来；
将获得的300克胚胎内容物与1000克水混合，然后在50℃的条件下，以100rpm的速度进行搅拌，搅拌过程持续2小时；
搅拌完成后，3000rpm的速度对混合物进行离心10分钟。随后收集离心后的上清液；
最后，将收集到的上清液进行浓缩处理，直至其相对密度达到1.06，便得到所述的睡莲莲胚胎提取物。
实施例2
一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
首先，在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；
接下来，将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物提取出来；
将获得的300克胚胎内容物与1000克含酶水溶液混合，然后在50℃的条件下，以100rpm的速度进行搅拌，搅拌过程持续2小时；
搅拌完成后，3000rpm的速度对混合物进行离心10分钟。随后收集离心后的上清液；
最后，将收集到的上清液进行浓缩处理，直至其相对密度达到1.06，便得到所述的睡莲莲胚胎提取物。
所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.07%氯化锌、0.5%酶、0.3%非离子表面活性剂AEO-9、余量为水。
所述酶为多酚氧化酶。
实施例3
与实施例2不同在于：所述酶为糖苷酶。
实施例4
与实施例2不同在于：所述酶为质量比2:1的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶。
实施例5
与实施例2不同在于：所述酶为质量比1:1的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶。
实施例6
与实施例2不同在于：所述酶为质量比1:2的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶。
实施例7
与实施例2不同在于：所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.07%硫酸锌、0.5%多酚氧化酶、0.3%非离子表面活性剂AEO-9、余量为水。
实施例8
与实施例2不同在于：所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.5%多酚氧化酶、0.3%非离子表面活性剂AEO-9、余量为水。
实施例9
与实施例2不同在于：所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.07%氯化锌、0.5%多酚氧化酶、余量为水。
实施例10
与实施例2不同在于：所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：0.12%氯化锌、0.5%多酚氧化酶、0.3%非离子表面活性剂AEO-9、余量为水。
测试例1
一、试验原理及依据
人体皮肤的解剖和组织结构学指出：皮脂腺是一种泡状腺体，其多开口于毛囊上部，它的分泌也在第二特征发育后增多，受雄性激素影响明显。皮脂腺是附属于皮肤的一个重要腺体，是产生皮脂的重要部位，它可分泌皮脂，皮脂进入皮囊经过毛孔排到皮肤表面。皮脂腺是雄激素的靶器官，睾酮使皮脂腺体积增大，分泌增加，特别是人体内皮脂合成催化剂5α-还原酶过分活跃，致使二氢睾酮（DHT，一种雄性激素）分泌增多，促使皮脂腺功能失常性地增大。5α-还原酶是人体将游离睾丸激素转化为DHT的酶，如果没有5α-还原酶，DHT就无法形成。故通过抑制5α-还原酶的活性来降低DHT水平能有效缓解皮脂腺过度分泌油脂，从而起到控油的功效。
二、试验目的
本试验旨在检测本产品莲叶提取物作为控油功效化妆品，在减缓施用部位皮脂分泌和沉积，或使施用部位出油现象不明显状态时发生的功效；主要通过检测产品对5α-还原酶的抑制率为指标评价物质控油功效。
三、试验受试物
测试样品：测试浓度为80mg/mL；
阳性对照物：非那雄胺溶液测试浓度为2.5mmol/L。
四、试验步骤
1）称取适量样品进行预处理；
2）预处理完的样品溶液按步骤加入试剂，使其反应完全；
3）同时取适量阳性对照物加入试剂，使其反应完全；
4）将反应完全的试剂移取适量，上机测其吸光度；
5）记录数据，计算5α-还原酶抑制率及统计学差异值。
五、结果计算
5α-还原酶是依赖还原型辅酶Ⅱ(NADPH)的膜蛋白酶，能不可逆地转化睾酮（Testosterone，T）为双氢睾酮（Dihydrotestosterone，DHT）。计算试验样品对5α-还原酶抑制的能力并计算统计学差异P值，来判定样品是否具有控油功效。
式中：A样品：表示样品管的吸光度；
B样品底物：表示样品本底管的吸光度；
C：表示溶剂管的吸光度；
D：表示溶剂本底管的吸光度。
本试验结果表征为试样对5α-还原酶的抑制率，与具有控油功效的对照物进行比较，如果阳性对照物抑制率高于空白对照组且统计学差异值（P＜0.05），则试验结果有效，试验样品抑制率高于空白对照组且统计学差异值（P＜0.05），则说明试验样品具有控油功效，试验进行三次平行试验，用三次平行试验平均值作为测试结果如表1。
各例中的P值均＜0.05。
表1：抑制率测定结果表
| 5α-还原酶抑制率，% | |
| 空白对照组 | 0.65 |
| 阳性对照组 | 73.98 |
| 实施例1 | 31.28 |
| 实施例2 | 42.55 |
| 实施例3 | 40.11 |
| 实施例4 | 44.27 |
| 实施例5 | 46.30 |
| 实施例6 | 43.84 |
| 实施例7 | 40.92 |
| 实施例8 | 36.14 |
| 实施例9 | 40.47 |
| 实施例10 | 38.22 |
实施例1与实施例2-9的主要区别在于酶解步骤。在实施例1中，并没有进行酶解步骤，而实施例2-9则在提取过程中加入了不同的酶和酶的配比。我们可以看到，进行酶解步骤的实施例2-9的5α-还原酶抑制率普遍高于没有进行酶解步骤的实施例1。这说明，酶解步骤对提高5α-还原酶抑制率有重要作用。
通过比较实施例4-6（采用多酚氧化酶和糖苷酶的复配酶）与实施例2-3（采用单一酶），我们可以看出，在抑制5α-还原酶的能力上，复配酶的效果显著优于单一酶。首先，实施例2采用单一的多酚氧化酶，抑制率为42.55%，而实施例3采用单一的糖苷酶，抑制率为40.11%。而当采用复配酶时，如实施例4（质量比为2:1的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶），实施例5（质量比为1:1的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶）和实施例6（质量比为1:2的多酚氧化酶和糖苷酶混合酶），抑制率分别为44.27%，46.30%和43.84%，这些数值均优于使用单一酶的抑制率。此结果可能的原因是复配酶在酶解过程中起到协同作用，提高了提取效率，从而增强了最终产品的5α-还原酶抑制能力。具体来说，多酚氧化酶和糖苷酶可能在酶解过程中作用于不同的靶点或途径，使得提取物中的活性成分得以更全面的释放。比如多酚氧化酶可能促进多酚类物质的氧化，而糖苷酶可能帮助糖苷类物质的解聚，两者协同作用，可以得到更高效的抽提效果。另外，从实施例4-6的结果来看，多酚氧化酶和糖苷酶的比例对最终的抑制率也有一定影响，其中质量比为1:1的混合酶在抑制率上表现最佳。这可能说明，适当的酶比例可以更好地发挥酶的协同效应，从而提高提取效果。总的来说，这些结果表明，在提取莲胚胎中的活性物质时，采用复配酶并调整适当的酶比例可以显著提高提取效率和抑制5α-还原酶的能力，进一步提升其抗皱紧致的功效。
实施例2和实施例7的区别主要在于使用的锌离子化合物不同，实施例2采用的是氯化锌，而实施例7采用的是硫酸锌。锌离子化合物在这个提取过程中的主要作用是作为酶的助因子，有助于维持酶的活性结构，从而增强其在酶解过程中的作用。从实施例2和实施例7的测试结果来看，实施例2的5α-还原酶抑制率为42.55%，而实施例7的5α-还原酶抑制率为40.92%。这表明，采用氯化锌作为酶的助因子比使用硫酸锌更好，存在较大差异。
实施例2和实施例8的主要区别在于实施例8的含酶水溶液中并未添加锌离子化合物，即氯化锌。如前所述，氯化锌在这一过程中主要作为酶的助因子，有助于维持酶的活性结构，并进一步增强酶的作用。因此，去掉氯化锌会影响酶的活性和提取效果。从测试数据看，实施例2的5α-还原酶抑制率为42.55%，而实施例8的5α-还原酶抑制率为36.14%。这表明不含氯化锌的实施例8的抑制率较低。
实施例2和实施例9的主要区别在于实施例9的含酶水溶液中并未添加非离子表面活性剂，这种表面活性剂一般用于增强溶液中的酶和物质的接触面，提高酶解效率。我们可以从表格中看出，实施例2的5α-还原酶抑制率为42.55%，而实施例9的5α-还原酶抑制率为40.47%。这表示不含非离子表面活性剂的实施例9的抑制率稍低于实施例2。非离子表面活性剂的主要作用在于降低水与其他物质的表面张力，增大酶与被酶解物质的接触面积，从而提高酶解效率。因此，实施例9中，由于未添加非离子表面活性剂，可能导致酶解效率相对降低，因此，其5α-还原酶抑制率相比实施例2略有降低。这个结果再次印证了非离子表面活性剂在酶解过程中的重要作用，它可以提高酶解效率，从而提高提取效果。
实施例2和实施例10的主要区别在于氯化锌的添加量。实施例2中氯化锌的质量百分比为0.07%，而实施例10中氯化锌的质量百分比为0.12%。通过抑制率测定结果表，我们可以看到实施例2的5α-还原酶抑制率为42.55%，而实施例10的抑制率为38.22%，实施例10的抑制率明显低于实施例2。氯化锌在这个过程中主要充当酶的助因子，帮助维持酶的活性，但是添加过多的氯化锌可能会对酶的活性产生抑制作用，导致其活性降低，这可能是实施例10的抑制率比实施例2低的主要原因。这个结果表明，在使用酶助因子的过程中，需要控制合适的添加量，过多的添加量可能会对酶的活性产生抑制作用，反而降低酶解的效率。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种莲胚胎提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与水混合搅拌；
离心得到上清液；
浓缩。
2.根据权利要求1所述的莲胚胎提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与水混合搅拌，所述胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；
离心得到上清液；
上清液浓缩至相对密度1.02-1.12。
3.根据权利要求2所述的莲胚胎提取物的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：
在盛花期选择新鲜的睡莲花朵，去除花朵外的花瓣部分，随后取出花托；
将取出的花托进行切割，通过挤压的方式将胚胎内容物提取出来；
将获得的胚胎内容物与水混合，然后在40-80℃下，500-200rpm搅拌1-3小时，得到混合物；胚胎内容物与水的质量比为(20-60):100；
2000-4000rpm转速对所述混合物进行离心5-15分钟，收集离心后的上清液；
将所述上清液进行浓缩处理，控制其相对密度1.02-1.12，得到所述睡莲莲胚胎提取物。
4.一种莲胚胎提取物的制备方法，包括下述步骤：
切割莲花的花托，取出胚胎内容物；
将胚胎内容物与含酶水溶液混合搅拌；
离心得到上清液；
浓缩；
所述含酶水溶液中包含氯化锌、酶和非离子表面活性剂。
5.根据权利要求4所述的莲胚胎提取物的制备方法，其特征在于，所述酶为多酚氧化酶和糖苷酶中的至少一种。
6.根据权利要求4或5所述的莲胚胎提取物的制备方法，其特征在于，所述含酶水溶液由下述质量百分比原料组成：
0.04-0.1%氯化锌；
0.3-0.7%酶；
0.1-0.5%非离子表面活性剂；
余量为水。
7.一种莲胚胎提取物，其特征在于，采用权利要求1-6任一项所述方法制备而成。
8.权利要求7所述莲胚胎提取物在制备修复抗衰化妆品中的应用。
9.一种修复抗衰化妆品，其特征在于，包含权利要求7所述莲胚胎提取物。
10.根据权利要求9所述的修复抗衰化妆品，其特征在于，所述化妆品为面膜、粉底、隔离霜、化妆水、精华素、保湿油、营养霜、粉饼、洁面乳、洗发精、乳液或软膏。
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