CN113318018A - 一种玫瑰花提取物及其提取方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种玫瑰花提取物及其提取方法与应用。所述玫瑰花提取物的提取方法，包括以下步骤：S1.将玫瑰花进行低温真空提取，所述低温真空提取的真空度为‑70～‑90kPa，提取温度为40～60℃，提取时间为4.5～5.5h，过滤，得到玫瑰花水；S2.将S1得到的玫瑰花水和甘油作为提取剂，对玫瑰花蕊进行提取，提取的温度为80～100℃，提取的时间为150～210min；所述玫瑰花水与甘油的质量比为0.25～3：1，过滤。本发明所述提取方法通过利用玫瑰花水和甘油的混合溶液对玫瑰花蕊进行提取，玫瑰花水和甘油的混合溶液能够有效将玫瑰花蕊中的鞣花酸和鞣花单宁提取出来，所得玫瑰花提取物中鞣花酸的含量较高。所述玫瑰花提取物可作为提高化妆品中鞣花酸含量的添加剂，其鞣花酸的稳定性高。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取物技术领域，更具体地，涉及一种玫瑰花提取物及其提取方法与应用。
背景技术
鞣花酸是一种天然多酚二内酯组分，属于没食子酸的二聚衍生物，广泛存在于各种软果、坚果等植物组织中。虽然鞣花酸能以游离的形式存在，但更多的是以缩合形式(如鞣花单宁)存在于自然界中。因其具有独特的化学和生理活性，在护肤品中可起到多重效果，如抗氧化、抗衰老、抗紫外线增白及保湿，因此对多种因素造成的皮肤老化(皱纹和色素沉着)都有独到的功效，在化妆品领域有着广阔的应用前景。
鞣花酸一般由单宁类合成或从植物组织中提取。现有技术有利用单宁酸酸解法合成制备得到鞣花酸，虽然鞣花酸的产率较高，但反应需要在高温下进行，且要求设备耐酸，生产成本较高，实际生产中未见报道。对于从植物组织中提取，虽然鞣花酸广泛存在于各种植物组织中，但其只有一部分能以游离的形式存在，更多的是以缩合形式(如鞣花单宁、苷等)存在，因此所得植物提取物中鞣花酸含量较低。玫瑰花提取物作为常规的化妆品添加剂，其也含有鞣花酸，目前玫瑰花提取物的提取工艺主要为水提或乙醇提取，如专利CN105055581A和 CN111117770A，但这些提取方法只能将部分鞣花酸提取出来，所得玫瑰花提取物中鞣花酸的含量较低(一般小于200mg/L)；若能够提高玫瑰花提取物中鞣花酸含量，有利于增强玫瑰提取物的护肤效果。
另外，无论是单宁类合成或从植物组织中提取所得的鞣花酸固体，若直接将其添加至化妆品中，其在溶解性不佳，导致鞣花酸在化妆品中的稳定性差，容易析出。因此在化妆品中的用量受限。
发明内容
本发明为克服现有技术玫瑰花提取物中鞣花酸含量低，提供一种玫瑰花提取物的提取方法，所得玫瑰花提取物中鞣花酸含量较高。
本发明的另一个目的在于提供一种玫瑰花提取物。
本发明的另一个目的在于提供所述玫瑰花提取物的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
一种玫瑰花提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1.将玫瑰花进行低温真空提取，所述低温真空提取的真空度为-70～ -90kPa，提取温度为40～60℃，提取时间为4.5～5.5h，过滤，得到玫瑰花水；
S2.将S1得到的玫瑰花水和甘油作为提取剂，对玫瑰花蕊进行提取，提取的温度为80～100℃，提取的时间为150～210min；所述玫瑰花水与甘油的质量比为0.25～3：1；过滤，所得滤液即为玫瑰花提取物。
现有一般采用高温水提的方法来提取玫瑰花水，然而所得玫瑰花水因高温使得挥发性成分较少。而本发明S1采用低温真空提取的方法提取玫瑰花水，所得玫瑰花水的挥发性成分较多，并且发明人通过实验发现，利用所述玫瑰花水和甘油的混合溶液能够有效将玫瑰花蕊中的鞣花酸和鞣花单宁提取出来，在此溶液体系下加热一定温度，部分鞣花单宁物质可转化成鞣花酸，从而提高玫瑰花提取物中鞣花酸的含量。
优选地，S1中，所述低温真空提取的真空度为-75～-86kPa，提取温度为在 45～55℃。
优选地，S2中，所述玫瑰花水与甘油的质量比为0.5～2：1。
优选地，S2中，所述提取剂与玫瑰花蕊的液料比(质量比)为40～60：1。
本发明所采用的玫瑰花蕊可选用新鲜玫瑰花蕊，也可选用制备玫瑰干花过程中产生玫瑰花蕊。进一步地，在提取之前，玫瑰花蕊经过粉碎、过筛处理，优选过四十目筛。
本发明所述玫瑰花选用新鲜玫瑰花，不同玫瑰花品种对本发明所述提取方法提取鞣花酸没有任何影响。本发明选取山东平阴玫瑰花鲜花。
本发明还保护一种玫瑰花提取物。所述玫瑰花提取物由上述提取方法提取得到。
进一步地，本发明还保护所述玫瑰花提取物的应用。一般地，在水剂还是乳化体系中，如化妆品的溶液体系中，鞣花酸的质量含量大于0.01％都极不稳定，容易析出。而玫瑰花提取物能够有效提高化妆品中鞣花酸的溶解度及稳定性。具体地：
所述玫瑰花提取物作为鞣花酸载体在提高化妆品中鞣花酸含量中的应用。具体地，所述玫瑰花提取物作为提高化妆品中鞣花酸含量的添加剂的应用。所述玫瑰花提取物在提高保湿喷雾中鞣花酸稳定性中的应用。
经测试发现，玫瑰花提取物具有抗氧化、美白以及保湿功效。玫瑰花提取物在化妆品中的添加量大于0.3wt％时，对DPPH自由基的清除率大于85％；可抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素生成，具有美白功效；可以增加皮肤角质层含水量，具有保湿功效。
鞣花酸具有独特的化学和生理活性，在护肤品中可起到多重效果，如抗氧化、抗衰老、抗紫外线增白及保湿，因此对多种因素造成的皮肤老化(皱纹和色素沉着)都有独到的功效。随着鞣花酸含量增高，其抗氧化与美白功效明显增强。
玫瑰花提取物可以具体应用在水剂、乳液、膏霜等驻留型化妆品以及洁面、洗发水、沐浴露等洗去型剂型中。
本发明所述玫瑰花提取物中鞣花酸含量为350～460mg/L。
本发明所述玫瑰花提取物的添加量为化妆品质量的0.5～25％。
进一步地，本发明还保护包含上述玫瑰花提取物的化妆品。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明所述提取方法通过利用低温真空提取的玫瑰花水和甘油的混合溶液对玫瑰花蕊进行提取，玫瑰花水和甘油的混合溶液能够有效将玫瑰花蕊中的鞣花酸和鞣花单宁提取出来，并且在其溶液体系及一定温度下，部分鞣花单宁物质可转化成鞣花酸，所得玫瑰花提取物中鞣花酸的含量较高。所述玫瑰花提取物可作为提高化妆品中鞣花酸含量的添加剂，其鞣花酸的稳定性高。
附图说明
图1为实施例1保湿喷雾溶液的状态图；
图2为实施例1保湿喷雾溶液(放置一个月后)的状态图；
图3为对照样1保湿喷雾溶液的状态图；
图4为对照样1保湿喷雾溶液(放置1h后)的状态图；
图5为对照样2保湿喷雾溶液的状态图；
图6为对照样2保湿喷雾溶液(放置1h后)的状态图；
图7为玫瑰花提取物的DPPH清除率图。
具体施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
如无特殊说明，本发明所用原料、试剂及溶剂，均为商业购买未经任何处理。下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式并不受下述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。另外，关于本说明书中“份”、“％”，除非特别说明，分别表示“质量份”、“质量％”。
玫瑰花及玫瑰花蕊的来源：山东平阴玫瑰。玫瑰花蕊经过粉碎、过四十目筛处理。
实施例1
一种玫瑰花提取物的提取方法，包括以下步骤：
S1.称取新鲜的玫瑰花50kg，洗净沥干，投入150L低温真空提取设备中，设置真空度为-80kPa，提取温度控制在45℃左右，搅拌速度30rpm/min，提取时间5h。冷凝收集玫瑰花水粗提物，过0.22um滤膜，即得到玫瑰花水。
S2.称取2g玫瑰花蕊于250mL锥形瓶，加入50g玫瑰花水与50g甘油(玫瑰花水与甘油的质量比为1：1)，液料比为50：1，90℃水浴搅拌210min，过滤后，所得滤液即为玫瑰花提取物。
实施例2～15
实施例2～15的提取方法与实施例1基本相同，其区别点如表1所示，表1
对比例1
本对比例玫瑰花提取物的提取方法采用水代替玫瑰花水，水与甘油的质量比为1:1，其它步骤及条件与实施例1相同。
对比例2
本对比例玫瑰花提取物的提取方法采用水代替玫瑰花水，水与甘油的质量比为1:3，其它步骤及条件与实施例1相同。
对比例3
本对比例玫瑰花提取物的提取方法直接采用水作为提取剂，其方法如下：称取2g玫瑰花蕊于250mL锥形瓶，加入100g水，液料比为50：1，90℃水浴搅拌210min，过滤后，所得滤液即为玫瑰花提取物。
对比例4
本对比例玫瑰花提取物的提取方法只采用玫瑰花水作为提取剂，其方法如下：称取2g玫瑰花蕊于250mL锥形瓶，加入100g玫瑰花水，液料比为50：1， 90℃水浴搅拌210min，过滤后，所得滤液即为玫瑰花提取物。
对比例5
本对比例玫瑰花提取物的提取方法只采用甘油作为提取剂，其方法如下：称取2g玫瑰花蕊于250mL锥形瓶，加入100g甘油，液料比为50：1，90℃水浴搅拌210min，过滤后，所得滤液即为玫瑰花提取物。
对比例6
本对比例还采用实施例1中S1所得的玫瑰花水进行对比。
测试
1、鞣花酸含量的测定方法
方法：使用高效液相色谱仪，利用鞣花酸对照品的浓度与峰面积的线性关系，再根据玫瑰提取物样品的峰面积计算出样品中的鞣花酸浓度。
1)色谱条件
流动相乙腈：0.1％磷酸＝23:77
流速：1mL/min
柱温：室温
检测波长：254nm
2)标准样品
称取0.0110g鞣花酸，用甲醇稀释至50mL。
分别进样4、8、12、16、20μL按上述色谱条件进行测定，利用所得结果计算得到的标曲方程为y＝7980.8x+77.084。
3)5％玫瑰花蕊甘油水提取物样品
用移液枪移取0.5mL样品(上述实施例及对比例所得样品)，用甲醇稀释至 10mL。
进样20μL按上述色谱条件进行测定，计算出样品中鞣花酸的含量，其结果表2所示：
表2
2、稳定性测试
将实施例1得到的玫瑰花提取物(鞣花酸含量为463.35mg/L)配制成保湿喷雾(配方如表3所示)，玫瑰花提取物的质量百分数为25％，即保湿喷雾中鞣花酸含量为0.01158％。
表3
对照样1：在同样的保湿喷雾配方中去除玫瑰花提取物，加入等量的鞣花酸 (配方如表4所示)；
对照样2：在同样的保湿喷雾配方中去除玫瑰花提取物，以鞣花酸甘油溶液的形式加入保湿喷雾，加入等量的鞣花酸(配方如表5所示)；
表4
| 成分 | 质量百分数％ |
| 鞣花酸 | 0.01158 |
| 丁二醇 | 1 |
| 1，2-戊二醇 | 1 |
| 水 | 97.98842 |
表5
| 成分 | 质量百分数％ |
| 鞣花酸 | 0.01158 |
| 丁二醇 | 1 |
| 1，2-戊二醇 | 1 |
| 甘油 | 12.5 |
| 水 | 85.48842 |
观察上述所得保湿喷雾的稳定性，情况如下：
表6
分别对对照样1和对照样2的固体析出物进行检验，其主要为鞣花酸。可见，相比于对照样1和对照样2的现有溶液体系，添加了本发明所述玫瑰花提取物的溶液体系能够有效增强鞣花酸的稳定性。
3、抗氧化—DPPH自由清除实验
DPPH又称1,1,-二苯基-3-硝基苯肼，是一种很稳定的氮中心自由基，它的稳定性主要来自共振稳定作用的三个苯环的空间阻碍。使夹在中间的氮原子不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用。它的无水乙醇溶液呈紫色，在517nm 波长下最大吸收，吸光度与浓度呈现线性关系。向其中加入自由基清除剂时可以结合DPPH,使自由基数量减少，溶液颜色变浅，借此来评价自由基清除能力。
将玫瑰花提取物，用乙醇配置成2％、1.5％、1％、0.5％、0.3％、0.15％浓度，用乙醇配置DPPH使其浓度达到0.2028mmol/L浓度。
按照如下表7格添加试剂，摇匀之后静置30min，之后在517nm的条件下检测吸光度。
表7
清除率％＝[1-(Ar-As)/A0]×100％。
如图7与表8所示，玫瑰提取物加醇在检测范围0～2％内，随浓度升高，DPPH 清除率增大，最大清除率为90.94％。由此可知玫瑰花提取物具有较好的抗氧化功效。
表8
| 玫瑰提取物(％) | DPPH清除率(％) |
| 0 | 0 |
| 0.15 | 36.96 |
| 0.3 | 86.78 |
| 0.5 | 89.72 |
| 1 | 89.96 |
| 1.5 | 90.21 |
| 2 | 90.94 |
4、美白功效—酪氨酸酶活性测试
酪氨酸酶是一种氧化酶，且是调控黑色素生成的限速酶。酪氨酸酶主要参与两个反应过程：催化L-酪氨酸羟基化转变为L-多巴和氧化L-多巴形成多巴醌，多巴醌经一系列反应后，形成黑色素。本测试方法在反应体系中加入酪氨酸酶及L-酪氨酸模拟体内反应过程,通过比较加样品与不加样品时黑色素的产生量差异，来测定样品对酪氨酸酶活性的抑制能力。
4.1试剂配制
PBS溶液：用超纯水配制1/15M PBS，调PH至6.8。
L-酪氨酸溶液：用上述配置好的1/15M PBS溶液溶解适量3-(3,4-二羟基苯基)-L-丙氨酸，配制成1.5mM的L-酪氨酸酶溶液。
酪氨酸酶溶液：用1/15M PBS 5倍稀释酪氨酸酶母液，配制成2000unit/ml 酪氨酸酶溶液。
4.2阳性对照样品：用DMSO溶解适量4-Butylresorcinol，配制成20mg/mL 4-Butylresorcinol。实验组样品为样品原液。
4.3设置如下表所示的酪氨酸酶活性抑制反应体系
酪氨酸酶活性抑制反应体系
| T(样品) | T0(样品对照) | C0(空白) | |
| 样品(mL) | 0.3 | 0.3 | 0 |
| 酪氨酸酶溶液(mL) | 0.1 | —— | 0.1 |
| 1/15MPBS(mL) | 2.2 | 2.7 | 2.5 |
| L-酪氨酸溶液(mL) | 0.4 | —— | 0.4 |
4.4操作流程
0.1mL酪氨酸酶/PBS→2.2mL PBS→0.3mL样品溶液/溶剂→震荡混匀， 25℃水浴10min→0.4mL L-酪氨酸/PBS→震荡混匀，25℃水浴10min→470nm 吸光度测定
4.5计算酪氨酸酶活性抑制率
酪氨酸酶活性抑制率＝[1-(T-T0)/C0]*100％。
经计算，实施例1所得的玫瑰花提取物的酪氨酸酶活性抑制率为82.45％。
5、保湿测试
选取亚洲成年志愿者前手臂内侧区域，通过比较测试区域使用样品前和使用样品后0.5h、1h的皮肤经表皮水分流失率(TEWL)、皮肤角质层水分含量的数值变化，评价样品的改善皮肤屏障、保湿功效。变化率＝(Tn-T0)/T0*100％。
表9 5％玫瑰提取物水溶液测试结果
注：皮肤角质层水分含量数值越大，表明皮肤角质层水分含量越高；变化率越大，说明样品的保湿效果越好。皮肤经表皮水分流失率(TEWL)数值越小，表明皮肤屏障功能越好；变化率为负值，说明样品具有改善皮肤屏障的效果，且变化率越小，说明样品改善皮肤屏障的效果越好。
分析表格数据可知，使用玫瑰花提取物水溶液30min、1h后，皮肤角质层水分含量均比使用前升高，推测玫瑰花提取物水溶液有保湿功效趋势。使用玫瑰花提取物水溶液30min、1h后，皮肤经表皮水分流失率均比使用前升高，推测该浓度下的玫瑰花提取物水溶液改善皮肤屏障功效趋势不明显。
显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种玫瑰花提取物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将玫瑰花进行低温真空提取，所述低温真空提取的真空度为-70～-90kPa，提取温度为40～60℃，提取时间为4.5～5.5h，过滤，得到玫瑰花水；
S2.将S1得到的玫瑰花水和甘油作为提取剂，对玫瑰花蕊进行提取，提取的温度为80～100℃，提取的时间为150～210min；所述玫瑰花水与甘油的质量比为0.25～3：1；过滤，所得滤液即为玫瑰花提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，S1中，所述低温真空提取的真空度为-75～-86kPa，提取温度为在45～55℃。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，S2中，所述玫瑰花水与甘油的质量比为0.5～2：1。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，S2中，所述提取剂与玫瑰花蕊的液料比为40～60：1。
5.一种玫瑰花提取物，其特征在于，由权利要求1～4任一项所述的提取方法提取得到。
6.权利要求5所述玫瑰花提取物作为提高化妆品中鞣花酸含量的添加剂的应用。
7.权利要求5所述玫瑰花提取物在提高化妆品中鞣花酸稳定性中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述玫瑰花提取物中鞣花酸含量为350～460mg/L。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述玫瑰花提取物的添加量为化妆品质量的0.5～2.5％。
10.一种化妆品，其特征在于，包含权利要求5所述玫瑰花提取物。
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20210831 |