CN116731900A - 菌、肥及其生产富含sod的桃及果酒的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了复合菌，其包含有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌。本发明还提供了含该菌的肥料。本发明还提供了所述菌、肥培育富含SOD的水果的用途，还提供了进一步生产果酒的方法，包括：纤维素酶解；酶解水果浆液混合复配；啤酒酵母、葡萄酒酵母、乳酸克鲁维酵母三种菌种组合进行一次发酵得原浆酒；二次发酵、巴杀得成品果酒。相比传统栽培方法，通过直接向果树施加产SOD蜡样芽孢杆菌，本发明惊人地实现了水果SOD含量大大地提高，而且，产量亦显著提高。本发明的制酒方法可很好地保持水果的SOD，SOD的有效含量明显高于普通果酒。
Description
技术领域
本发明属于生物领域，涉及一种菌、肥及其生产富含SOD的桃及果酒的方法。
背景技术
随着国人消费水平的逐渐升级，对于绿色、无污染、功能性的水果的消费需求迅猛增长。SOD对于人体代谢产生的自由基具有较好的清除作用，在培养绿色、环保、有机水果的基础上进一步提升水果内的SOD含量具有良好的实际价值，尤其是对SOD含量不高的物种。
进一步，在高质高值水果栽培的基础上，开发健康环保、绿色有机果酒的制备工艺，进一步提升水果产品的附加价值，对于果品行业的升级发展具有重要的意义。
发明内容
一方面，本发明提供了一种富含SOD的果酒的制备方法，该方法包含如下步骤：
1)、酶解：向灭菌的水果浆液中加入浆液总重量0.05-0.1％的纤维素酶，进行酶解处理；
2)、复配：将上步所得酶解水果浆液与竹沥膏按照1-2:1的重量比充分混合复配，然后加热将料液灭菌，得复配液；
3)、一次发酵：上步所得复配液加入含啤酒酵母、葡萄酒酵母和乳酸克鲁维酵母的发酵剂发酵，至发酵液中的酒精度达到2-5度，得原浆酒；
4)、二次发酵：将上步所得原浆酒降温至8-12℃，继续发酵8-12天，过滤、巴杀得成品果酒。
任选地，所述啤酒酵母、葡萄酒酵母和乳酸克鲁维酵母的重量比为3:2:1。
任选地，所述发酵剂为所述复配液重量的0.2-0.4％，如为0.3％。
任选地，所述一次发酵的温度控制在30℃以下。
任选地，所述纤维素酶酶解处理的温度为30-40℃，如为35℃，处理时间可为2-6h。
任选地，所述酶解前水果浆液的灭菌方法包括：135℃-140℃(如138℃)、2-6秒超高温灭菌处理水果浆液。
任选地，所述复配过程中的所述加热灭菌包括：将料液加热至75-85℃(如85℃)并保持6-8分钟。
任选地，所述巴杀的温度为60-80℃，时间为15-20分钟。
任选地，制酒所用水果原料为富含SOD的蜜桃，高SOD蜜桃的栽培方法可以包含如下步骤：
A、构建专用栽培基质料，此专用栽培基质料以重量份计算包含：
A-1、禽畜粪便25-35份；大豆饼粕25-35份；经充分堆肥处理的养殖场垫料40-60份；
A-2、钾矿粉2-4份；磷矿粉2-4份；
A-3、疏松多孔料(即疏松多孔结构的物料)5-10份：经粉碎处理后直径小于0.5cm且长度小于2cm的硬质灌木或乔木枝干茬子；
B、栽培基质料发酵、分液：
B-1、预处理：向所述专用栽培基质料中添加速效碳源(如葡萄糖)5-10份；
B-2、发酵：上步所得栽培物料混匀后调整含水量在40-50％w/w之间，然后加入复合菌剂，所述复合菌剂中含有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、和胶质芽孢杆菌，复合菌剂可先在碳源充足的适宜环境中充分扩繁活化再行接种，然后充分进行有氧发酵，如100-200h后停止搅拌完成发酵；
B-3、喷淋处理：发酵完成的栽培基质料堆垛，然后雾化喷洒栽培料2-10倍重量的水分，部分水分为栽培基料吸收，淋出的水分收集起来，称为喷洒用菌液，可冷藏备用；剩余的栽培基质料堆垛则称为栽培料；
C、果树的栽培：
C-1、栽培料的施用：沿果树的树根(比如沿滴水线)在外周挖一圈环状沟，可按每亩20-40公斤的量将所制备的栽培料施用到环状沟中代替原生土壤，地表覆盖普通壤土；
C-2、特别管理：在果树的茎部钻孔至髓心，注射蜡样芽孢杆菌菌液，另外，还向果树树冠喷洒步骤B-3所收集的喷洒用菌液；
C-3、常规管理：果树的整个种植周期内，在步骤C-2的特别管理之外，其余种植管理方法与常规果树种植方法相同。
任选地，步骤C-2所述蜡样芽孢杆菌的注射操作或喷洒用菌液的喷洒操作，在生长期(即现蕾之前的阶段)、现蕾期、幼果期(套袋前的阶段)、套袋期和摘袋期(去掉果袋后的阶段)中的至少一个阶段进行；优选地，所述蜡样芽孢杆菌的注射操作，分别在生长期、现蕾期、期、套袋期和摘袋期进行，喷洒用菌液的喷洒操作可在生长期、幼果期和套袋期这几个阶段进行；任选每个阶段的操作进行分1-3次进行。
任选地，所述注射操作在生长期或现蕾期分两次进行，幼果期、套袋期和摘袋期则仅注射1次。
任选地，注射所述蜡样芽孢杆菌时，每亩果树每次施用所述蜡样芽孢杆菌菌液的量为150-250mL，其中蜡样芽孢杆菌的浓度为150-250亿cfu/mL。
任选地，所述喷洒操作在生长期分3次进行，幼果期分两次进行，套袋期则仅喷洒1次。
任选地，进行所述喷洒操作前，控制喷洒用菌液中蜡样芽孢杆菌的浓度为50-100亿cfu/mL，每亩果树每次施用所述喷洒用菌液500-700mL。
任选地，所述复合菌剂用量为30-40重量份，且每克菌剂中活菌总数≥200亿CFU，所述复合菌剂可定购或自制，其中蜡样芽孢杆菌含量可高于其他菌，如枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌的比例为2-3:4-5:1。
任选地，所述蜡样芽孢杆菌选自保藏号为CGMCC NO.0175、CGMCC NO.0760或CGMCCNO.0761中至少一种的菌株。
另一方面，本发明对应提供了一种富含SOD的水果的栽培方法，包括：向果树施用产SOD蜡样芽孢杆菌。以蜜桃为例，其栽培方法可如前面逐层举例所描述。
本发明的有益效果包括：
本发明惊人地实现了水果果肉SOD含量数倍地提高。本发明的制酒方法可很好地保持水果的SOD，通过与竹沥复配，使得产品具有清心肺胃之火、豁痰润燥定惊的功效，同时具有竹沥特有的清香气味；本发明通过配置纤维素酶提升了整体发酵速率及产品口感，采用了啤酒酵母、葡萄酒酵母、乳酸克鲁维酵母三种菌种组合，使得产品具有特别清香的口感；本发明的二次发酵，也保证了营养成分的良好保留。
具体实施方式
以下实施例详细说明了本发明。如无特别说明，本发明所使用的各种原料及各项设备均为常规产品，均能够通过市场购买获得。
一、果酒的制备
⑴、打浆：利用高速旋转的打浆机转头将后面第二部分实施例3A收获的水果打成浆汁，过筛滤过直径在2mm以上的壳、核、渣、滓；
⑵、灭菌：上步所得水果浆液采用138℃，2-6秒超高温灭菌处理，并冷却至30℃；
⑶、酶解：向上步所得水果浆液中加入浆液总重量0.1％的纤维素酶，35℃酶解处理4h；
⑷、复配：将上步所得酶解水果浆液与竹沥膏按照1:0.5的重量比充分混合复配，然后将料液加热至85℃保持6-8分钟进行灭菌，最后冷却至室温，得复配液；
⑸、一次发酵：上步所得复配液加入发酵剂发酵，至发酵液中的酒精度达到2-5度为止，得原浆酒；发酵剂由啤酒酵母、葡萄酒酵母、乳酸克鲁维酵母三种酵母按照固体菌剂3:2:1的重量比进行复配，发酵剂总重占水果-竹沥复配料总重的0.3％，发酵过程中控制温度不超过30℃；
⑹、二次发酵：将上步所得原浆酒降温至10℃，继续发酵10天，过滤0.5mm以上的渣滓，得成品果酒；
⑺、巴杀：上步所得成品果酒经60-80℃、15-20分钟杀菌；
⑻、检测发现：果酒的SOD保持在20-25IU/mL,果酒甘冽,同时具有竹沥特有的清香气味,甲醇等有害物的含量亦不超标。
二、蜜桃的培育
实施例1、专用栽培基质料的构建
本发明的专用栽培基质料以重量份计算包含：鸡粪30份；大豆饼粕30份；经充分堆肥处理的猪养殖场垫料50份；钾矿粉4份；磷矿粉4份；疏松多孔料6份：经粉碎处理后直径小于0.5cm且长度小于2cm的硬质灌木或乔木枝干茬子。
实施例2、栽培基质料发酵、分液
在实施例1的基础上，按照如下步骤进行栽培基质料发酵、分液。
①预处理：向所述专用栽培基质料中添加葡萄糖10份。
②发酵：上步所得栽培物料混匀后调整含水量在40-50％w/w(重量比)之间，然后加入复合菌剂35份，活菌总数≥200亿CFU/g,所述复合菌剂的组成为枯草芽孢杆菌：蜡样芽孢杆菌：胶质芽孢杆菌＝2:4:1，其中复合菌剂先在碳源充足的环境中充分扩繁活化再行接种，持续搅拌曝气，有氧发酵150h，停止搅拌完成发酵。
③喷淋处理：发酵完成的栽培基质料堆垛，然后雾化喷洒栽培料5倍重量的水分，部分水分为栽培基料吸收，淋出的水分收集起来并装入密封罐冷藏贮存，称为喷洒用菌液；剩余的栽培基质料堆垛则称为栽培料。
实施例3、蜜桃的栽培
①栽培料的施用：沿果树的树根在外周挖一圈环状沟，将所制备的栽培料按每亩30公斤的量施用到环状沟中代替原生土壤，地表覆盖普通壤土。
②特别管理：
在果树离地约10cm的茎部钻与树干夹角40-60度的孔，孔径约5mm，钻孔平均数量2个，深度达至髓心，注射蜡样芽孢杆菌菌液，每亩果树每次施用所述蜡样芽孢杆菌菌液的量为200mL(蜡样芽孢杆菌的浓度为200亿cfu/mL)，兑水稀释后滴注至钻孔内，所述注射操作在生长期或现蕾期分两次进行，幼果期、套袋期和摘袋期则仅注射1次。
另外，还向果树树冠喷洒实施例2所收集的喷洒用菌液(其中蜡样芽孢杆菌的浓度为50亿cfu/mL)，每亩果树每次喷洒耗用所述喷洒用菌液700mL，菌液适当活化后兑水稀释即可直接喷洒在树冠上，所述喷洒操作在生长期分3次进行，幼果期分两次进行，套袋期则仅喷洒1次。喷洒应尽量使叶片、树干、果实等部位均有被水均匀附着，注意避开强风及午间强光时段，一般在上午10点前或下午5点以后喷。
③常规管理：果树的整个种植周期内，在步骤②的特别管理之外，其余种植管理方法与常规果树种植方法相同。
本申请人发现，无论使用的蜡样芽孢杆菌的保藏号为CGMCC NO.0175、CGMCCNO.0760或CGMCC NO.0761(仅菌株不同，其他条件均相同)，上述实验蜜桃的产量均达1-1.2万斤/亩，均显著高于不用本发明的SOD菌及专用栽培料的传统栽培方法(0.6-0.8万斤/亩)，更惊人的是，进一步对照发现，本发明大大提高了蜜桃果肉的平均SOD含量，数据对比如下：
Claims (10)
1.复合菌剂，其包含有枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌，该蜡样芽孢杆菌选自保藏号为CGMCC NO.0175、CGMCC NO.0760或CGMCC NO.0761中至少一种的菌株,所述蜡样芽孢杆菌的活菌数量可高于枯草芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌，活菌数比枯草芽孢杆菌：蜡样芽孢杆菌:胶质芽孢杆菌可＝2-3:4-5:1。
2.含任一在先权利要求所述复合菌剂的肥料，其可包含土壤用肥、蜡样芽孢杆菌菌液和喷洒用菌液三个单元，优选其制备包括：
A、构建栽培基质料，该栽培基质料以重量份计算包含：
A-1、禽畜粪便25-35份；大豆饼粕25-35份；经充分堆肥处理的养殖场垫料40-60份；
A-2、钾矿粉2-4份；磷矿粉2-4份；
A-3、疏松多孔料5-10份：直径小于0.5cm且长度小于2cm的硬质灌木或乔木枝干茬子；
B、栽培基质料发酵、分液：
B-1、预处理：向所述栽培基质料中添加速效碳源5-10份；
B-2、发酵：上步所得栽培基质料混匀后调整含水量在40-50％w/w之间，然后加入所述复合菌剂，充分进行有氧发酵；
B-3、喷淋处理：将上步发酵完成的栽培基质料堆垛，然后向其喷洒其2-10倍重量的水，收集从栽培基质料淋出的液体得到喷洒用菌液，剩余的栽培基质料堆垛称为栽培料。
3.如前一权利要求所述的肥料，其特征是，所述速效碳源为葡萄糖，所加复合菌剂的用量可为20-40重量份，且每克菌剂中活菌总数≥200亿CFU。
4.富含SOD的桃的栽培方法，该方法包含向桃施用任一在先权利要求所述的复合菌剂或肥料，可选地，所述桃为蜜桃，所述方法可包括如下的栽培管理：
C-1、栽培料的施用：沿果树的树根挖一圈环状沟，按每亩20-40公斤的量，将所制备的栽培料施用到环状沟中，地表覆盖普通壤土；
C-2、特别管理：在果树的茎部钻孔至髓心，注射蜡样芽孢杆菌菌液，另外，还向果树树冠喷洒所收集的喷洒用菌液；
C-3、常规管理：果树的整个种植周期内，除步骤C-2的特别管理之外，其余种植管理方法与常规果树种植方法相同。
5.如前一权利要求所述的栽培方法，其特征是：步骤C-2所述蜡样芽孢杆菌的注射操作或喷洒用菌液的喷洒操作，在生长期、现蕾期、幼果期、套袋期和摘袋期中的至少一个阶段进行；优选地，所述蜡样芽孢杆菌的注射操作在生长期、现蕾期、幼果期、套袋期和摘袋期均进行，所述喷洒用菌液的喷洒操作可在生长期、幼果期和套袋期这几个阶段进行；任选每个阶段的操作进行分1-3次进行。
6.如权利要求3-5所述的栽培方法，其特征是，所述注射操作在生长期或现蕾期分两次进行，幼果期、套袋期和摘袋期则注射1次。
7.如前一权利要求所述的栽培方法，其特征是，注射所述蜡样芽孢杆菌时，每亩果树每次施用所述蜡样芽孢杆菌菌液的量为150-250mL，其中蜡样芽孢杆菌的浓度为150-250亿CFU/mL。
8.如权利要求3-5所述的栽培方法，其特征是，所述喷洒操作在生长期分3次进行，幼果期分两次进行，套袋期则仅喷洒1次。
9.如前一权利要求所述的栽培方法，其特征是，进行所述喷洒操作前，控制所述喷洒用菌液中蜡样芽孢杆菌的浓度为50-100亿CFU/mL，每亩果树每次施用所述喷洒用菌液500-700mL。
10.制备富含SOD的果酒的方法，包含如下步骤：
1)、酶解：向灭菌(包括：135℃-140℃、2-6秒超高温灭菌处理)的水果浆液中加入浆液总重量0.05-0.1％的纤维素酶，进行酶解处理，温度可为30-40℃；
2)、复配：将上步所得酶解水果浆液与竹沥膏按照1-2:1的重量比充分混合复配，然后加热将料液灭菌(包括：将料液加热至75-85℃并保持6-8分钟)，得复配液；
3)、一次发酵(温度控制在30℃以下)：向上步所得复配液中加入含啤酒酵母、葡萄酒酵母和乳酸克鲁维酵母(重量比为3:2:1)的发酵剂(重量为复配液的0.2-0.4％，如为0.3％)发酵，至发酵液中的酒精度达到2-5度，得原浆酒；
4)、二次发酵：将上步所得原浆酒降温至8-12℃，继续发酵8-12天，过滤、巴杀(60-80℃，时间为15-20分)得成品果酒。
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