CN116725165A - 富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉的制备方法,包括以下步骤:(1)对沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,打成匀浆,然后进行灭菌,得到沙田柚匀浆;(2)取沙田柚匀浆,接种鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,35~37℃发酵22~26h后,然后进行灭菌,得发酵的沙田柚匀浆;(3)将发酵的沙田柚匀浆在干燥盘中铺开,进行热泵干燥,然后进行粉碎,过80目筛,即制得富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉。本发明还公开一种由上述方法制得的沙田柚果粉及其应用。
Description
技术领域
本发明涉及食品领域,具体涉及富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉及其制备方法和应用。
背景技术
随着现代生活节奏的加快,饮食结构的改变,以及社会老龄化等因素的影响,便秘发病率呈逐年上升的趋势,并成为影响人们生活质量最常见的病症之一。便秘患者除了排便困难,通常伴随肠屏障结构破坏、肠道炎症、肠道菌群紊乱等肠道稳态失衡的症状。目前市面上使用的通便产品以药物类成分或单一类型的膳食纤维(DF)(单一类型是指不溶性或可溶性膳食纤维)补充剂为主。其中,不溶性膳食纤维(IDF)难以被肠道菌群酵解利用,在促进肠道蠕动,增大粪便体积,促进排便方面的效果,通常优于可溶性膳食纤维(SDF),而SDF为肠道菌群主要能量来源,在促进肠道有益菌增殖,保护肠粘膜屏障结构,降低肠道炎症中的效果更好。所以IDF和SDF组合使用,可优劣互补,获得更好的健康效应。如专利CN201610134107.4公开了一种含SDF和IDF的组合物具有良好的通便效果,但该组合物主要是纯化的DF,如小麦麸DF、燕麦DF、菊粉等,并辅以麦香香精、阿斯巴甜等添加剂复配而成,使原材料中的非目标性营养成分丢失,导致原有的健康功效减少,食物感差,且该组合物是否能调节肠道稳态并不明晰。
沙田柚属芸香科柑橘属水果,是我国重点发展的柚子品种。沙田柚果实呈葫芦形或梨形,由外到内依次为油胞层、白皮层、囊衣、果肉和籽(见图1),其中包含油胞层、白皮层的果皮和囊衣占其整果重量的50%左右。发明人研究发现沙田柚各组织部位均富含黄酮和DF等活性成分(见图2),推测沙田柚制备成的果粉,可能是改善肠道健康相关食品的天然功能基料。
然而,对于作为食品的原料,沙田柚油胞层,白皮层和囊衣富含黄酮糖苷类化合物,苦味严重,不利于以其制备的果粉直接利用。目前柑橘类产品主要通过盐/糖渍结合特定酶处理进行脱苦,该方法操作步骤繁琐,使用的酶制剂主要由霉菌属分泌,成本较高,安全性有待考察,且制备果粉杂质太多,营养价值不高。现有技术还有利用乳酸菌发酵脱除苦味的报道;具体为专利CN 201310219928.4公开了一种脱苦柚子皮的生产方法,主要工艺流程为:柚皮切块-糖渍-乳酸菌发酵-脱苦后的柚子皮块;该方法虽然能够脱除柚子皮的苦味,但是在乳酸菌发酵之前,该方法采用大量糖腌渍柚皮,糖可掩盖苦味,所以利用乳酸菌发酵脱苦的真实效果如何尚未可知;其次,该方法制备的柚皮糖含量高,只能用于生产柚皮蜜饯、蜂蜜柚子茶和柚皮果酱等,附加值低。
而且,发明人还发现以囊衣、白皮层和果肉直接制备的沙田柚果粉虽然富含DF,但SDF含量很低,IDF/SDF为7~10:1,这不利于调节肠道稳态。
所以,针对上述问题,有必要开发一种既能降低苦味,又能富集活性成分,特别是富集SDF,且绿色环保的沙田柚果粉的制备方法,并为沙田柚功能食品开发提供新途径。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉的制备方法。
本发明的目的之二在于提供一种由上述方法制得的沙田柚果粉。
本发明的目的之三在于提供上述沙田柚果粉在改善便秘及肠道稳态失衡的保健食品中的应用。
本发明的目的之一通过以下技术方案来实现:
一种富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉的制备方法,包括以下步骤:
(1)对沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,打成匀浆,然后进行灭菌,得到沙田柚匀浆;
(2)取沙田柚匀浆,接种鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,35~37℃发酵22~26h后,然后进行灭菌,得发酵的沙田柚匀浆;
(3)将发酵的沙田柚匀浆在干燥盘中铺开,进行热泵干燥,然后进行粉碎,过80目筛,即制得富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉。
在步骤(1)中,用于制备沙田柚匀浆的组织部位包括白皮层,囊衣和果肉。
在沙田柚的各组织部位中,囊衣和白皮层中的总黄酮和总DF(TDF)含量最高,其次是籽和油胞层,果肉最次(如图2所示);考虑到油胞层和籽的苦涩味最为严重,且油胞层富含精油,即这两个部位会严重影响沙田柚果粉的风味,感官和质地,本发明采用沙田柚中的白皮层,囊衣和果肉制备沙田柚粉;因此,本发明在保证果粉感官品质的同时,最大程度地富集了沙田柚的黄酮和DF。
本发明优选肠道益生菌——鼠李糖乳杆菌,对沙田柚匀浆进行发酵,一方面,利用其分泌的糖苷水解酶转化苦味黄酮糖苷为无苦味且活性更强的黄酮苷元,另一方面,当沙田柚匀浆中可溶性糖消耗殆尽时,鼠李糖乳杆菌会以IDF为碳源,分解转化IDF为更易被机体酵解利用的SDF,提高沙田柚果粉的营养品质。
此外,成熟度较高的沙田柚的白皮层、囊衣和果肉匀浆中可溶性糖含量为3.5~4.2g/100g FW,pH值为4.0~4.5,水分含量为80~83%,可直接作为鼠李糖乳杆菌生长的天然培养基,保证鼠李糖乳杆菌的活力,有利于沙田柚匀浆发酵,且绿色环保,最大程度的保证沙田柚果粉的纯度。本发明优选以12月~1月采收、成熟度较高的沙田柚为原料制备沙田柚果粉。
在步骤(1)中,所述灭菌为于95~105℃条件下灭菌5~10min。
在步骤(2)中,接种鼠李糖乳杆菌的活菌数为4~8×107cfu/g。
在步骤(2)中,所述灭菌为于95~105℃条件下灭菌5~10min。
在步骤(3)中,将发酵后的沙田柚匀浆以1~1.5cm的厚度铺开,进行热泵干燥。
在步骤(3)中,在55~65℃和相对湿度5~10%的条件下进行热泵干燥42~48h。
在步骤(3)中,热泵干燥后的沙田柚果粉的水分含量在5%以下。
经本发明方法制得的沙田柚果粉基本脱除了苦味,脱苦率达65~70%,而且总黄酮含量为50.2~53.4mg CE/g DW,TDF含量为58.3~61.2%,其中SDF和IDF含量分别为10.5~11.3%和47.3~49.9%,IDF/SDF比值由7:1降至4.3~4.6:1。
本发明的目的之二通过以下技术方案来实现:一种由上述方法制得的沙田柚果粉。
本发明的目的之三通过以下技术方案来实现:上述沙田柚果粉在改善便秘和肠道稳态失衡的保健食品中的应用。
具体地,上述沙田柚果粉在保护肠粘膜屏障结构的保健食品中的应用。
与现有技术相比,本发明具有如下优点:
(1)本发明使用沙田柚的白皮层,囊衣和果肉制备沙田柚粉,在保证果粉感官品质的同时,最大程度地富集了沙田柚黄酮和DF;此外,白皮层,囊衣和果肉占整果重量的80%以上,以这三个部位制粉基本实现了沙田柚的全利用,避免了资源的浪费。
(2)本发明通过鼠李糖乳杆菌发酵沙田柚匀浆,不引入外源性杂质,绿色环保,在降低沙田柚果粉苦味的同时,还能提高总黄酮量,转化IDF为SDF,提高其营养品质,使本发明的沙田柚果粉对调节肠道菌群结构和肠粘膜屏障稳态具有显著效果;
具体地,本发明经鼠李糖乳杆菌发酵制得的沙田柚果粉的脱苦率达65~70%,基本脱除苦味;与未发酵的沙田柚果粉相比,发酵后果粉总黄酮和SDF含量分别提高了18~26%和44~55%。
(3)本发明的沙田柚果粉能有效缩短便秘小鼠首例排黑便时间,增加排黑便粒数和黑便含水量。
而且,与未发酵的沙田柚果粉相比,经鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉能更有效促进便秘小鼠肠道Bifidobacteriu、norank_f_Muribaculaceae等益生菌增殖,抑制Desulfovibrio等有害菌增殖,提高小鼠结肠粘膜屏障结构完整性,进而减少细菌内毒素透过肠粘膜屏障。
(4)本发明制备的沙田柚果粉,苦味低,柚子风味浓郁,富集了黄酮和SDF,具有改善便秘及肠道稳态失衡的作用,可作为高品质的保健食品基料,也为沙田柚的精深加工开拓了新途径,提高产品的附加值。
附图说明
图1为沙田柚不同组织部位示意图;
图2为沙田柚不同组织部位总黄酮和TDF的含量(柱面上标注字母完全不同时,表示差异具有统计学意义,p<0.05,下同);
图3为鼠李糖乳杆菌发酵与未发酵沙田柚果粉对便秘小鼠首粒排黑便时间、6h排黑便数量及黑便含水量的影响;
图4为鼠李糖乳杆菌发酵与未发酵沙田柚果粉对便秘小鼠血清LPS水平的影响;
图5为鼠李糖乳杆菌发酵与未发酵沙田柚果粉对便秘小鼠结肠组织病理变化的影响;(A)为H&E染色,(B)为粘液层染色(AB-PAS染色);
图6为鼠李糖乳杆菌发酵与未发酵沙田柚果粉对便秘小鼠结肠组织紧密连接蛋白mRNA表达的影响;
图7为鼠李糖乳杆菌发酵与未发酵沙田柚果粉对便秘小鼠肠道菌群的调节作用。
附图标记:1-油胞层,2-白皮层,3-果肉,4-囊衣,5-籽。
具体实施方式
以下实施例仅用于阐述本发明,而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例。所述技术领域的普通技术人员依据以上本发明公开的内容和各参数所取范围,均可实现本发明的目的。
本发明实施例采用的沙田柚选取采收时间在12月~1月之间,成熟度较高的沙田柚作为原料。
本发明对苦味评价方法,以及黄酮含量、DF、IDF及TDF含量的测定方法如下:
1.苦味评价:
以奎宁为苦味标准物质,配置成不同浓度的溶液,将苦味程度依次分为苦度值0.5(无苦味)、1.0(少许苦)、2.5(稍苦)、5.0(较苦)和10(极苦)共5个等级;
取沙田柚果粉,按照1:20(w/v)料液比加入相应体积的蒸馏水,在5000r/min的条件下均质10min,得到均一的溶液备用。感官评定小组由20名20~30岁口感正常的成人组成,评定员用蒸馏水漱口后,取3mL奎宁溶液于口中,使其到达舌根处并停留10s后吐出,确定不同苦度值对应的口味感受,按照相同的方法,依次对样品溶液进行苦味评价,确定其苦度值与苦味等级。
沙田柚果粉的脱苦率(%)=(A1-A2)/A1×100%,其中A1为未发酵沙田柚果粉的苦度值,A2为乳酸菌发酵脱苦后的沙田柚果粉的苦度值。
2.黄酮含量测定:
(1)黄酮类物质的提取:取沙田柚果粉,按照1:4(w/v)料液比加入4℃预冷的80%丙酮溶液,在冰浴下以10000r/min均质5min,离心,收集上清液,残渣按照上述方式重复提取一次,合并2次提取液,真空条件下45℃旋转蒸发至干,用80%甲醇水溶液(v/v)溶解提取物并定容至25mL,分装后于-20℃冰箱保存备用。
(2)总黄酮含量的测定:取1mL适度稀释的上述黄酮提取物,45℃旋转蒸发至干,加入1mL四氢呋喃/乙醇(1:1,v/v)溶液复溶后,转入25mL带刻度的试管中,分别加入NaBH4溶液(0.5mL,50mmol/L)和AlCl3溶液(0.5mL,74.6mmol/L),室温下震荡30min,加入0.5mL50mmol/L的NaBH4溶液,室温下震荡30min,加入2mL 4℃预冷的0.8mol/L乙酸溶液,室温下避光震荡15min后,加入1mL 20mmol/L的四氯对醌溶液,95℃油浴锅中加热60min。将反应后的试管放入自来水中浸泡冷却,用甲醇将反应后的溶液体积补足至4mL,加入1mL 16%(m/v)的香草醛甲醇溶液,混匀后加入2mL 12mol/L的HCl溶液,混匀,室温避光反应15min,吸取200μL反应上清液于96孔板,在波长490nm处测定吸光值。以儿茶素作为标准品制作标准曲线,样品的总黄酮含量以每g样品中所含儿茶素当量(catechin equivalents,CE)表示,即mg CE/g DW。
3.SDF、IDF及TDF含量的测定:
参照GB 5009.88-2014《食品中膳食纤维的测定》的方法分别测定沙田柚果粉中SDF和IDF的含量,TDF的含量为二者含量之和。
对比例1:未发酵的沙田柚果粉制备方法如下:
(1)将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于95℃条件下灭菌10min,得到沙田柚匀浆。
(2)将沙田柚匀浆以1cm的厚度在干燥盘中铺开,在55℃、相对湿度5%的条件下,热泵干燥48h,粉碎,过80目筛,制得沙田柚果粉,该果粉的苦度值、总黄酮、SDF、IDF、TDF含量及IDF/SDF比值见表1。
对比例2:加糖发酵(即糖渍结合发酵)的沙田柚果粉制备方法如下:
(1)配制质量体积浓度为10%的白砂糖溶液;将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,按照柚子与白砂糖溶液质量比1:5的比例将二者混合,放入榨汁机打成匀浆,并于95℃条件下灭菌10min,得到加糖后的沙田柚匀浆;
(2)取加糖后沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵22h后,于95℃条件下灭菌10min,得加糖发酵的沙田柚匀浆;
(3)将加糖发酵后的沙田柚匀浆以1cm的厚度在干燥盘中铺开,在55℃、相对湿度5%的条件下,热泵干燥48h,粉碎,过80目筛,制得加糖发酵的沙田柚果粉,该果粉的苦度值、脱苦率、总黄酮、SDF、IDF、TDF含量及IDF/SDF比值见表1。
实施例1:制备富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉
(1)将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于95℃条件下灭菌10min,得到沙田柚匀浆。
(2)取沙田柚匀浆,接种活菌数为4×107cfu/g的鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,35℃发酵26h后,于95℃条件下灭菌10min,得发酵的沙田柚匀浆。
(3)将发酵的沙田柚匀浆以1cm的厚度在干燥盘中铺开,在55℃、相对湿度5%的条件下,热泵干燥48h,粉碎,过80目筛,制得富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉,该果粉的苦度值、脱苦率、总黄酮、SDF、IDF、TDF含量及IDF/SDF比值见表1。
实施例2:制备富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉
(1)对沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于100℃条件下灭菌8min,得到沙田柚匀浆。
(2)取沙田柚匀浆,接种活菌数为6×107cfu/g的鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,36℃发酵24h后,于100℃条件下灭菌8min,得发酵的沙田柚匀浆。
(3)将发酵的沙田柚匀浆以1.2cm的厚度在干燥盘中铺开,在60℃、相对湿度8%的条件下,热泵干燥45h,粉碎,过80目筛,制得富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉,该果粉的苦度值、脱苦率、总黄酮、SDF、IDF、TDF含量及IDF/SDF比值见表1。
实施例3:制备富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉
(1)对沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于105℃条件下灭菌5min,得到沙田柚匀浆。
(2)取沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵22h后,于105℃条件下灭菌5min,得发酵的沙田柚匀浆。
(3)将发酵的沙田柚匀浆以1.5cm的厚度在干燥盘中铺开,在65℃、相对湿度10%的条件下,热泵干燥42h,粉碎,过80目筛,制得富集黄酮和SDF的低苦味沙田柚果粉,该果粉的苦度值、脱苦率、总黄酮、SDF、IDF、TDF含量及IDF/SDF比值见表1。
表1不同实施例所得沙田柚果粉的苦度值、脱苦率、总黄酮、SDF、IDF、TDF的含量及IDF/SDF的比值
注:同一列数字旁字母完全不同时,表示差异有统计学意义(p<0.05),下同。
上述表1的结果表明,经本发明方法制得的沙田柚果粉基本脱除苦味,其总黄酮和SDF的含量较未发酵的沙田柚果粉均显著提高;且其SDF的含量显著高于加糖发酵制备的沙田柚果粉;这是因为在对比例2的发酵体系中存在大量游离糖,乳酸菌会优先选择利用这类碳源,不利于IDF的转化,因此导致SDF的含量较低,且其IDF/SDF比例与未发酵的沙田柚果粉相当。
实施例4:不同乳酸菌发酵的对比试验
试验组1:将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于105℃条件下灭菌5min,得到沙田柚匀浆;取沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵24h后,于105℃条件下灭菌5min,得发酵的沙田柚匀浆;将发酵的沙田柚匀浆以1.5cm的厚度在干燥盘中铺开,在65℃,相对湿度10%的条件下,热泵干燥42h,粉碎,过80目筛,制得沙田柚果粉;所得沙田柚果粉的脱苦率、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量见表2。
试验组2:将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于105℃条件下灭菌5min,得到沙田柚匀浆;取沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的植物乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵24h后,于105℃条件下灭菌5min,得发酵的沙田柚匀浆;将发酵的沙田柚匀浆以1.5cm的厚度在干燥盘中铺开,在65℃,相对湿度10%的条件下,热泵干燥42h,粉碎,过80目筛,制得沙田柚果粉;所得沙田柚果粉的脱苦率、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量见表2。
试验组3:将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于105℃条件下灭菌5min,得到沙田柚匀浆;取沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的嗜酸乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵24h后,于105℃条件下灭菌5min,得发酵的沙田柚匀浆;将发酵的沙田柚匀浆以1.5cm的厚度在干燥盘中铺开,在65℃,相对湿度10%的条件下,热泵干燥42h,粉碎,过80目筛,制得沙田柚果粉;所得沙田柚果粉的脱苦率、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量见表2。
试验组4:将沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,放入榨汁机打成匀浆,并于105℃条件下灭菌5min,得到沙田柚匀浆;取沙田柚匀浆,接种活菌数为8×107cfu/g的干酪乳杆菌,搅拌均匀,37℃发酵24h后,于105℃条件下灭菌5min,得发酵的沙田柚匀浆;将发酵的沙田柚匀浆以1.5cm的厚度在干燥盘中铺开,在65℃,相对湿度10%的条件下,热泵干燥42h,粉碎,过80目筛,制得沙田柚果粉;所得沙田柚果粉的脱苦率、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量见表2。
表2不同乳酸菌发酵的沙田柚果粉的脱苦率、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量
上述表2的结果表明,鼠李糖乳杆菌发酵对沙田柚果粉的脱苦效果最佳,且经其发酵制得的果粉总黄酮与SDF含量均最高。
实施例5:不同干燥方式制备沙田柚果粉的试验
常见的果粉干燥的方式包括热风干燥、热泵干燥、微波干燥、冷冻干燥及喷雾干燥,考虑到沙田柚匀浆粘度较大,难以在没有包埋剂的情况下直接喷雾干燥,而且包埋剂的加入会影响果粉的纯度,降低其DF和黄酮类活性成分的含量,不利于其作为功能因子用于健康食品的开发。因此,本实施例比较了前4种干燥方法对沙田柚果粉苦味、总黄酮和DF含量的影响。
试验的具体操作为:将经实施例1步骤(1)~(2)得到的沙田柚匀浆,分别通过热风干燥、热泵干燥、微波干燥及冷冻干燥后,粉碎,过80目筛,制备成沙田柚果粉;各取15g上述制备的果粉,用于苦味评价和总黄酮,SDF、IDF及TDF含量的分析,结果见表3。
表3不同干燥方式制备的沙田柚果粉的苦味、总黄酮、SDF、IDF及TDF含量
经4种干燥方式制备的沙田柚果粉的苦味均处于少许苦水平;经热风干燥、热泵干燥和微波干燥的沙田柚果粉SDF、IDF和TDF含量相当,其中IDF和TDF的含量明显高于经冷冻干燥的沙田柚果粉;此外,经热泵干燥和冷冻干燥的沙田柚果粉总黄酮含量较高。因此,综合各因素,本发明选用热泵干燥制备沙田柚果粉。
实施例6:沙田柚果粉的应用试验
本实施例的试验均设置以下四个试验组别:
正常对照组(NC):对正常的小鼠投喂普通膳食;
模型组(MC):采用洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型,投喂普通膳食;
鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉干预组(F-SWFP):采用洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型,投喂添加了5%鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉(即实施例1的沙田柚果粉)的膳食;通过体表面积折算法进行动物与人类等效剂量换算,该添加量下小鼠每日沙田柚果粉的摄入量对应成人每日摄入25g该果粉;
未发酵的沙田柚果粉干预组(SWFP):采用洛哌丁胺诱导便秘小鼠模型,投喂添加了5%未发酵的沙田柚果粉(即对比例1的沙田柚果粉)的膳食;该添加量下小鼠每日沙田柚果粉的摄入量对应成人每日摄入25g该果粉。
试验1:设置上述四个试验组别,连续投喂2周膳食(水分自由摄入);分析四个试验组别小鼠的首粒排黑便时间、6h排黑便粒数、黑便含水量的变化,结果见图3。
图3的结果显示,鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉能有效改善上述便秘相关指标,且与未发酵果粉效果相当。
试验2:设置上述四个试验组别,连续投喂2周膳食(水分自由摄入);然后采用ELISA试剂盒分析四个试验组别的小鼠血清内毒素(LPS)水平,结果见图4。
图4的结果显示,鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉有效降低了小鼠血清LPS的水平,且效果明显优于未发酵果粉,说明本发明制备的沙田柚果粉能有效减少细菌内毒素透过肠粘膜屏障,换言之本发明制备的沙田柚果粉保护了小鼠结肠粘膜屏障结构完整性。
试验3:设置上述四个试验组别,连续投喂2周膳食(水分自由摄入);然后通过H&E和AB-PAS染色分别观察小鼠结肠组织病理变化和杯状细胞粘液分泌的情况,结果见图5。
结果发现经鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉能有效增加结肠组织基底层厚度,减少炎性细胞浸润,增加杯状细胞数量进而促进粘液分泌,从而保护便秘小鼠结肠粘膜屏障结构完整性,且效果明显优于未发酵的沙田柚果粉。
进一步采用RT-PCR技术分析各组小鼠结肠组织紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)表达的变化,如图6所示,经鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉能更有效的提高结肠组织ZO-1和Occludin mRNA表达水平,即提高小鼠结肠粘膜屏障结构完整性,且效果明显优于未发酵的沙田柚果粉。
试验4:设置上述四个试验组别,连续投喂2周膳食(水分自由摄入);然后通过16SrRNA测序技术分析小鼠结肠内容物菌群结构的变化。
如图7所示,经鼠李糖乳杆菌发酵的沙田柚果粉较未发酵果粉更有效促进了便秘小鼠肠道Bifidobacterium和norank_f_Muribaculaceae等益生菌的增殖,抑制Desulfovibrio等有害菌的增殖,纠正了便秘小鼠的肠道菌群失调,进而保护其肠道粘膜屏障。
Claims (8)
1.一种富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)对沙田柚削去油胞层,切成小块并除籽后,打成匀浆,然后进行灭菌,得到沙田柚匀浆;
(2)取沙田柚匀浆,接种鼠李糖乳杆菌,搅拌均匀,35~37℃发酵22~26h后,然后进行灭菌,得发酵的沙田柚匀浆;
(3)将发酵的沙田柚匀浆在干燥盘中铺开,进行热泵干燥,然后进行粉碎,过80目筛,即制得富集黄酮和可溶性膳食纤维的低苦味沙田柚果粉。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是,在步骤(2)中,接种鼠李糖乳杆菌的活菌数为4~8×107cfu/g。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征是,在步骤(3)中,在55~65℃和相对湿度5%~10%的条件下进行热泵干燥42~48h。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征是,在步骤(3)中,将发酵后的沙田柚匀浆以1~1.5cm的厚度铺开,进行热泵干燥。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征是,在步骤(1)和(2)中,所述灭菌为于95~105℃条件下灭菌5~10min。
6.一种由权利要求1至5任一项所述方法制得的沙田柚果粉。
7.权利要求6所述的沙田柚果粉在改善便秘和肠道稳态失衡的保健食品中的应用。
8.权利要求6所述的沙田柚果粉在保护肠粘膜屏障结构的保健食品中的应用。
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