CN116640823A - 一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 - Google Patents
一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116640823A CN116640823A CN202310687597.0A CN202310687597A CN116640823A CN 116640823 A CN116640823 A CN 116640823A CN 202310687597 A CN202310687597 A CN 202310687597A CN 116640823 A CN116640823 A CN 116640823A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- bovine
- bovine collagen
- hours
- yield
- preparing high
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 117
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 title claims abstract description 61
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 title claims abstract description 61
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 title claims abstract description 60
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 7
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims abstract description 61
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 40
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 22
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000005185 salting out Methods 0.000 claims abstract description 5
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 36
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 16
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 claims description 12
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 claims description 12
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 claims description 12
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 claims description 10
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 10
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 7
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 claims description 6
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 6
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 6
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 6
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 4
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 4
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 2
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims 7
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 6
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 abstract description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 abstract 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 abstract 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 12
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 11
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 7
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 4
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 210000001361 achilles tendon Anatomy 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 210000000003 hoof Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明公开了一种制备高得率酶解牛胶原蛋白的方法，以黄牛骨为原料，主要步骤包括清洗去杂质，冻干；粉碎筛分，脱脂脱钙，冻干；在超声波清洗器中进行酶解，然后盐析、透析，冻干得到牛胶原蛋白。其中三次冻干处理为后面的加工和反应提供了低水分、疏松的结构，提高了粉碎、酶解的效率，而超声波能打散胶原纤维，有利于胶原蛋白在酶解中的溶出。本发明的牛胶原蛋白的得率为40～50％(基于脱脂脱钙牛骨粉)。
Description
技术领域
本发明属于生物材料领域，涉及一种提高酶解牛胶原蛋白提取得率的方法.
背景技术
从动物骨和皮中酶解胶原蛋白的制备流程长，如何提高胶原蛋白的得率一直是研究的课题。对于不同的动物原料，提取的工艺也不一样。目前对于牦牛骨、牛跟腱、猪跟腱研究比较多，而对于普通牛，如黄牛，虽然骨头易得，但研究较少，特别需要一种易普及、高得率提取胶原蛋白的方法。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种高得率酶解牛胶原蛋白的方法，能让普通牛骨得到更好的应用，降低胶原蛋白的制作成本。黄牛骨可以包括牛骨、牛跟腱、牛蹄筋等，无需分离。具体来说，本发明的制备方法中包含三步冻干，冻干后的原料水分含量少，材质疏松，有利于后续粉碎、脱脂脱钙和酶解反应。本发明的制备方法中，还包含超声波辅助酶解，超声波有利于打散胶原纤维，使胶原蛋白在酶解过程中更好地溶出。
本发明提供的方法包括以下步骤：
步骤一 黄牛骨去除杂质，砍碎，NaOH溶液中浸泡后，冻干
步骤二 粉碎机粉碎，筛分，得到牛骨粉
步骤三 石油醚低温回流脱脂，得到脱脂骨粉
步骤四 乙二胺四乙酸震摇脱钙，冻干，得到脱脂脱钙骨粉，
步骤五 在超声波清洗器中进行胃蛋白酶提取,离心，得到胶原蛋白粗品
步骤六 胶原蛋白粗品进行盐析、过滤、透析、冻干，得到牛胶原蛋白。
优选地，步骤一中，NaOH的浓度为0.1～0.3mol/L NaOH，浸泡温度为5℃。
优选地，步骤一中，冻干条件为-20℃预冻2～4小时,真空干燥10h。
优选地，步骤二中，筛分采用40-100目标准筛。
优选地，步骤三中，低温回流脱脂在50-60℃进行。
优选地，步骤四中，乙二胺四乙酸二钠盐的浓度为0.1～0.2mol/L,pH为7.5～7.8。
优选地，步骤四中，脱脂脱钙牛骨粉冻干的条件为在-30℃预冻2～4小时,真空干燥10～16h。
优选地，步骤五中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的300-600U/g脱脂脱钙牛骨粉，pH1.5～2，温度24～26℃,酶解10～14h。
优选地，步骤五中，超声波清洁器的功率300-400W,频率40Hz，每30min运行后停30min。
优选地，步骤五中，离心条件为转速8000-10000rpm,离心时间70-90min.
优选地，步骤六中，盐析后，用4-6层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品
优选地，步骤六中，先用0.1mol/L醋酸透析20-40h,再用蒸馏水透析20-30h.
优选地，步骤六中，冻干条件为-40℃～-50℃预冻8～10小时，真空干燥15～20小时。
本发明中，酶解牛胶原蛋白的得率通过冻干后的牛胶原蛋白质量W1和冻干后的脱脂脱钙牛骨粉质量W0来计算：
牛胶原蛋白提取得率％＝(冻干后的牛胶原蛋白质量W1/冻干后的脱脂脱钙牛骨粉W0)×100
本发明与现有技术相比，其有益效果是，通过在传统酶解方法的基础上，增加了冻干步骤，以及超声波辅助酶解，提高了胶原蛋白提取效率。酶解牛胶原蛋白的得率可达到40～50％，而且取自普通黄牛骨，成本低，制备过程采用的其他原料也普通易得，工艺步骤较少，易控制。
具体实施方式
下面对本发明做进一步的详细说明，以下将描述本发明的具体实施方式，需要指出的是，在这些实施方式的具体描述过程中，为了进行简明扼要的描述，本说明书不可能对实际的实施方式的所有特征均作详尽的描述。应当可以理解的是，在任意一种实施方式的实际实施过程中，正如在任意一个工程项目或者设计项目的过程中，为了实现开发者的具体目标，为了满足系统相关的或者商业相关的限制，常常会做出各种各样的具体决策，而这也会从一种实施方式到另一种实施方式之间发生改变。此外，还可以理解的是，虽然这种开发过程中所作出的努力可能是复杂并且冗长的，然而对于与本发明公开的内容相关的本领域的普通技术人员而言，在本公开揭露的技术内容的基础上进行的一些设计、制造或者生产等变更只是常规的技术手段，不应当理解为本公开的内容不充分。
除非特别说明，本发明中使用的仪器装置及其试剂均为常规使用的仪器装置及试剂，均可从市场上购买获得。下面实施例中使用的超声波清洗器型号为KQ-50DB，冷冻干燥机型号为Pilot2-4T，但这些设备选型不限制本发明的实质内容。
实施例1
黄牛骨去除残余肉和表面杂质，砍碎成粒，浸泡于0.1mol/L NaOH溶液中，在温度为5℃条件下震摇5小时。过滤后用蒸馏水反复洗涤牛骨粒至中性。牛骨粒冻干，冻干的条件为在-20℃预冻2小时,真空干燥10h。冻干后的牛骨粒经粉碎机粉碎，并过40目标准筛，得到牛骨粉。采用石油醚作为溶剂，在60℃水浴中对牛骨粉进行低温回流脱脂。脱脂牛骨粉在5℃下沥干水分，然后加入到0.2mol/L乙二胺四乙酸二钠盐浓缩溶液中，在温度3℃，pH 7.5的条件下震摇4小时，以脱除钙质。然后冻干得到脱脂脱钙牛骨粉，冻干的条件为在-30℃预冻2小时,真空干燥10h。取10g冻干后的脱脂脱钙牛骨粉，酶解在超声波水浴中进行，超声波功率300W，每30min运行后停30min。脱脂脱钙牛骨粉加入到0.5mol/L的含胃蛋白酶的乙酸溶液中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的350U/g。调节pH1.9，水浴温度25℃,酶解12h。反应后用离心过滤获得上清液，离心条件8000r/min,离心70min。用NaOH溶液调节pH到7.8，然后加入NACl溶液，待沉淀析出后，4层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品。牛胶原蛋白溶液粗品先用乙酸溶液透析40小时，再以蒸馏水透析20小时，获得牛胶原蛋白凝胶。牛胶原蛋白水凝胶在-40℃预冻10h，真空条件下升华干燥处理15h，得到牛胶原蛋白。冻干后的牛胶原蛋白为4.12克，牛胶原蛋白的得率为41.2％。
实施例2
黄牛骨去除残余肉和表面杂质，砍碎成粒，浸泡于0.2mol/L NaOH溶液中，在温度为5℃条件下震摇5小时。过滤后用蒸馏水反复洗涤牛骨粒至中性。牛骨粒冻干，冻干的条件为在-20℃预冻3小时,真空干燥10h。冻干后的牛骨粒经粉碎机粉碎，并过60目标准筛，得到牛骨粉。采用石油醚作为溶剂，在50℃水浴中对牛骨粉进行低温回流脱脂。脱脂牛骨粉在5℃下沥干水分，然后加入到0.15mol/L乙二胺四乙酸二钠盐浓缩溶液中，在温度3℃，pH 7.6的条件下震摇4小时，以脱除钙质。然后冻干得到脱脂脱钙牛骨粉，冻干的条件为在-30℃预冻3小时,真空干燥12h。取10g冻干后的脱脂脱钙牛骨粉，酶解在超声波水浴中进行，超声波功率300W，每30min运行后停30min。脱脂脱钙牛骨粉加入到0.5mol/L的含胃蛋白酶的乙酸溶液中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的450U/g。调节pH1.9，水浴温度25℃,酶解10h。反应后用离心过滤获得上清液，离心条件9000r/min,离心90min。用NaOH溶液调节pH到7.8，然后加入NACl溶液，待沉淀析出后，5层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品。牛胶原蛋白溶液粗品先用乙酸溶液透析30小时，再以蒸馏水透析25小时，获得牛胶原蛋白凝胶。牛胶原蛋白水凝胶在-50℃预冻8h，真空条件下升华干燥处理12h，得到牛胶原蛋白。冻干后的牛胶原蛋白为4.58克，牛胶原蛋白的得率为45.8％。
实施例3
黄牛骨去除残余肉和表面杂质，砍碎成粒，浸泡于0.3mol/L NaOH溶液中，在温度为5℃条件下震摇5小时。过滤后用蒸馏水反复洗涤牛骨粒至中性。牛骨粒冻干，冻干的条件为在-20℃预冻4小时,真空干燥10h。冻干后的牛骨粒经粉碎机粉碎，并过100目标准筛，得到牛骨粉。采用石油醚作为溶剂，在60℃水浴中对牛骨粉进行低温回流脱脂。脱脂牛骨粉在5℃下沥干水分，然后加入到0.15mol/L乙二胺四乙酸二钠盐浓缩溶液中，在温度3℃，pH7.8的条件下震摇4小时，以脱除钙质。然后冻干得到脱脂脱钙牛骨粉，冻干的条件为在-30℃预冻4小时,真空干燥16h。取10g冻干后的脱脂脱钙牛骨粉，酶解在超声波水浴中进行，超声波功率300W，每30min运行后停30min。脱脂脱钙牛骨粉加入到0.5mol/L的含胃蛋白酶的乙酸溶液中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的600U/g。调节pH1.9，水浴温度26℃,酶解14h。反应后用离心过滤获得上清液，离心条件10000r/min,离心80min。用NaOH溶液调节pH到7.8，然后加入NACl溶液，待沉淀析出后，6层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品。牛胶原蛋白溶液粗品先用乙酸溶液透析20小时，再以蒸馏水透析30小时，获得牛胶原蛋白凝胶。牛胶原蛋白水凝胶在-50℃预冻8h，真空条件下升华干燥处理20h，得到牛胶原蛋白。冻干后的牛胶原蛋白为5.1克，牛胶原蛋白的得率为51％。
本发明实施例展示的是整体的技术方案，并不能完全分割。但为了进一步展示本发明，下面的对比例没有采用牛骨粒冻干和超声波处理，可以看出得率低于本发明的各实施例。
黄牛骨去除残余肉和表面杂质，砍碎成粒，浸泡于0.2mol/L NaOH溶液中，在温度为5℃条件下震摇5小时。过滤后用蒸馏水反复洗涤牛骨粒至中性。牛骨粒经粉碎机粉碎，得到牛骨粉。采用石油醚作为溶剂，在50℃水浴中对牛骨粉进行低温回流脱脂。脱脂牛骨粉在5℃下沥干水分，然后加入到0.15mol/L乙二胺四乙酸二钠盐浓缩溶液中，在温度3℃，pH7.6的条件下震摇4小时，以脱除钙质。然后冻干得到脱脂脱钙牛骨粉，冻干的条件为在-30℃预冻3小时,真空干燥12h。取10g冻干后的脱脂脱钙牛骨粉，加入到0.5mol/L的含胃蛋白酶的乙酸溶液中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的450U/g。调节pH1.9，水浴温度25℃,酶解10h。反应后用离心过滤获得上清液，离心条件9000r/min,离心90min。用NAOH溶液调节pH到7.8，然后加入NACl溶液，待沉淀析出后，5层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品。牛胶原蛋白溶液粗品先用乙酸溶液透析30小时，再以蒸馏水透析25小时，获得牛胶原蛋白凝胶。牛胶原蛋白水凝胶在-50℃预冻8h，真空条件下升华干燥处理10h，得到牛胶原蛋白。冻干后的牛胶原蛋白为3.2克，牛胶原蛋白的得率为32％。
上述仅为本发明的优选实施例而已，并不对本发明起到任何限制作用。任何所属技术领域的技术人员，在不脱离本发明的技术方案的范围内，对本发明揭露的技术方案和技术内容做任何形式的等同替换或修改等变动，均属未脱离本发明的技术方案的内容，仍属于本发明的保护范围之内。
Claims (13)
1.一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，包括下列步骤：
步骤一 黄牛骨去除杂质，砍碎，NAOH溶液中浸泡后，冻干；
步骤二 粉碎机粉碎，筛分，得到牛骨粉；
步骤三 石油醚低温回流脱脂，得到脱脂骨粉；
步骤四 乙二胺四乙酸震摇脱钙，冻干，得到脱脂脱钙骨粉；
步骤五 在超声波清洗器中进行胃蛋白酶提取,离心，得到胶原蛋白粗品；
步骤六 胶原蛋白粗品进行盐析、过滤、透析、冻干，得到牛胶原蛋白。
2.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤一中，NaoH的浓度为0.1～0.3mol/L NaOH，浸泡温度为5℃。
3.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤一中，冻干条件为-20℃预冻2～4小时,真空干燥10h。
4.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤二中，筛分采用40-100目标准筛。
5.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤三中，低温回流脱脂在50-60℃进行。
6.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤四中，乙二胺四乙酸二钠盐的浓度为0.1～0.2mol/L,pH为7.5～7.8。
7.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤四中，脱脂脱钙牛骨粉冻干的条件为在-30℃预冻2～4小时,真空干燥10～16h。
8.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤五中，胃蛋白酶用量为牛骨粉的300-600U/g脱脂脱钙牛骨粉，pH1.5～2，温度24～26℃,酶解10～14h。
9.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤五中，超声波清洁器的功率300-400W,每30min运行后停30min。
10.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤五中，离心条件为转速8000-10000rpm,离心时间70-90min。
11.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤六中，盐析后，用4-6层滤布过滤得到牛胶原蛋白凝胶粗品。
12.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤六中，先用0.1mol/L醋酸透析20-40h,再用蒸馏水透析20-30h。
13.如权利要求1所述的高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法，其特征在于，步骤六中，冻干条件为-40℃～-50℃预冻8～10小时，真空干燥15～20小时。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310687597.0A CN116640823A (zh) | 2023-06-12 | 2023-06-12 | 一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310687597.0A CN116640823A (zh) | 2023-06-12 | 2023-06-12 | 一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116640823A true CN116640823A (zh) | 2023-08-25 |
Family
ID=87622945
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310687597.0A Pending CN116640823A (zh) | 2023-06-12 | 2023-06-12 | 一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116640823A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106939325A (zh) * | 2016-01-05 | 2017-07-11 | 许昌学院 | 一种牛骨胶原蛋白的制备方法 |
| CN107630061A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-01-26 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 牦牛骨ⅰ型胶原蛋白的制备方法 |
| CN109762865A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-17 | 武汉轻工大学 | 一种牛骨胶原多肽的生产方法 |
| CN110272485A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-09-24 | 江苏大学 | 超声酸预处理辅助酸酶法提取白鲢鱼鱼皮胶原蛋白的方法 |
| CN112724244A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-04-30 | 王朝辉 | 一种牛骨胶原蛋白肽及其生产方法 |
-
2023
- 2023-06-12 CN CN202310687597.0A patent/CN116640823A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106939325A (zh) * | 2016-01-05 | 2017-07-11 | 许昌学院 | 一种牛骨胶原蛋白的制备方法 |
| CN107630061A (zh) * | 2017-09-29 | 2018-01-26 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 牦牛骨ⅰ型胶原蛋白的制备方法 |
| CN109762865A (zh) * | 2019-03-25 | 2019-05-17 | 武汉轻工大学 | 一种牛骨胶原多肽的生产方法 |
| CN110272485A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-09-24 | 江苏大学 | 超声酸预处理辅助酸酶法提取白鲢鱼鱼皮胶原蛋白的方法 |
| CN112724244A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-04-30 | 王朝辉 | 一种牛骨胶原蛋白肽及其生产方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN100345867C (zh) | 一种酸溶性鱼皮胶原蛋白及其制备方法 | |
| CN1478421A (zh) | 一种海参全粉食品及其制备方法 | |
| CN101126104A (zh) | 采用酸酶复合制备天然活性胶原蛋白的方法 | |
| CN110564802A (zh) | 一种耗牛跟腱骨胶原蛋白的提取方法 | |
| CN112608968B (zh) | 一种以罗非鱼鳞原料生产鱼胶原蛋白肽的方法 | |
| CN114957386A (zh) | 一种用鱼鳞生产胶原三肽的方法 | |
| CN112079913A (zh) | 从鲟鱼软骨中提取非变性ii型胶原蛋白的工艺 | |
| CN102851341A (zh) | 双酶复合法水解鳕鱼皮制备胶原多肽 | |
| CN111150069A (zh) | 采用酶解法结合喷雾干燥制备芦笋副产物膳食纤维的方法 | |
| CN113563459A (zh) | 一种胶原蛋白肽生产过程中蛋白提取工艺 | |
| CN113388657A (zh) | 扫频超声耦合酶解制备食源性ace抑制肽的方法 | |
| CN113444761A (zh) | 一种低免疫原性鱼皮胶原蛋白及其制备方法 | |
| JPH0577681B2 (zh) | ||
| CN106188329B (zh) | 一种扇贝多糖的提取方法和制品 | |
| CN116640823A (zh) | 一种高得率酶解牛胶原蛋白的制备方法 | |
| CN115368454B (zh) | 一种明胶及其制备方法 | |
| CN107467676B (zh) | 一种生产大豆膳食纤维—核桃蛋白复配产品的方法 | |
| CN115403668A (zh) | 一种斑点叉尾鮰鱼鳔生物活性胶原蛋白肽的提取工艺 | |
| CN115449535A (zh) | 一种骨源胶原三肽及其制备方法 | |
| CN115717136A (zh) | 一种胃蛋白酶提取生产工艺 | |
| CN111471120B (zh) | 一种硫酸软骨素的制备方法及应用 | |
| CN114107415A (zh) | 一种含小分子活性肽羊栖菜提取物的制备方法 | |
| CN113133521A (zh) | 一种海参形海参酶解冻干粉及其制备方法 | |
| CN111748595A (zh) | 一种具有抗氧化作用的活性多肽 | |
| CN111423525A (zh) | 一种提取硫酸软骨素的方法、硫酸软骨素及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Cao Xuehua Inventor after: Wang Meng Inventor after: Wang Wenjun Inventor after: Wu Wenjing Inventor after: He Yaqing Inventor before: He Yaqing Inventor before: Cao Xuehua Inventor before: Wu Wenjing Inventor before: Wei Dongsheng Inventor before: Wang Meng Inventor before: Yue Shurong |