CN111748595A - 一种具有抗氧化作用的活性多肽 - Google Patents

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孙坤来
陈荫
赵玉勤
王斌
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Abstract

本发明公开了一种具有抗氧化作用的活性多肽，属于活性多肽提取技术领域，包括以下步骤：S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于生理盐水中浸泡，浸泡之后烘干，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过筛，制得粉末，待用；S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，搅拌均匀，制得混合液，待用；S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至碱性，制得碱性混合液，待用；S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于50‑60℃下酶解4‑6h，得到水解液，待用；S5、灭酶：将水解液于70‑80℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶30‑40min分钟，冷却至室温，待用；S6、离心分解；S7、蒸发浓缩；S8、冷冻干燥，选用合理的蛋白酶进行酶解，制备工艺科学合理，能最大程度的提取海湾扇贝内的活性多肽。

Description

一种具有抗氧化作用的活性多肽
技术领域
本发明涉及活性多肽提取技术领域，更具体地说，涉及一种具有抗氧化作用的活性多肽。
背景技术
海湾扇贝，属瓣鳃纲，异柱目，扇贝科，扇贝属，又称大西洋内湾扇贝，贝壳中等大小，近圆形，壳表黄褐色，放射肋20条左右，肋较宽而高起，肋上无棘，生长纹较明显，无足丝，壳顶位于背侧中央，前壳耳大，后壳耳小，原产于美国东海岸，1982年由张福绥引进中国，并开展人工养殖，现年产量约8万吨，主要集中于山东、辽宁，常年可收获，以春季质量较好。
抗氧化肽是抗氧化物质中一大门类，通常把具有抑制生物大分子过氧化或清除体内自由及功能的生物活性肽成为抗氧化肽，抗氧化肽以非活性状态存在于蛋白质长链中，采用适当的方法水解蛋白质可以得到这些寡肽，而且它们具有原蛋白质或组成氨基酸所没有的功能，与机体的代谢调节、免疫、内分泌、衰老等有着十分密切的关系，在生命活动中起着非常重要的作用，近些年来，随着人们对合成抗氧化剂安全问题的日益重视，天然抗氧化肽因为其较强的抗氧化性和高安全性，正受到越来越多的关注，国内外对天然抗氧化肽进行了大量研究，已有多种保健产品和药物推向市场，市场前景十分可观，抗氧化肽主要由蛋白质经蛋白酶水解产生，采用的蛋白质种类很多，其中主要是陆地蛋白质资源，包括等大米蛋白、玉米蛋白、乳清蛋白、酪蛋白等，但是利用这些蛋白酶水解制备抗氧化肽的效果并不是十分理想，提取出来的活性多肽不具有良好的抗氧化性能，同时存在着提取效率低下的问题，不能最大化的提取活性多肽。
发明内容
1．要解决的技术问题
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种具有抗氧化作用的活性多肽，它选用合理的蛋白酶进行酶解，制备工艺科学合理，能最大程度的提取海湾扇贝内的活性多肽。
2．技术方案
为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案：
一种具有抗氧化作用的活性多肽，包括以下步骤：
S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于生理盐水中浸泡，浸泡之后烘干，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过筛，制得粉末，待用；
S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，搅拌均匀，制得混合液，待用；
S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至碱性，制得碱性混合液，待用；
S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于50-60℃下酶解4-6h，得到水解液，待用；
S5、灭酶：将水解液于70-80℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶30-40min分钟，冷却至室温，待用；
S6、离心分解：将冷却至室温后的水解液在3000-5000r/min的转速下离心25-35min分钟，取上清液，用截留分子量≤ 0000Da 的超滤膜进行超滤，制得超滤液，待用；
S7、蒸发浓缩：将超滤液蒸发浓缩，待用；
S8、冷冻干燥：将蒸发浓缩后的水解液在真空下进行冷冻干燥，制得活性多肽，选用合理的蛋白酶进行酶解，制备工艺科学合理，能最大程度的提取海湾扇贝内的活性多肽。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S1中，所述生理盐水的浓度为0.9%，浸泡时间为30-45min，烘干温度为65-75℃，烘干时间为16-18h，充分粉碎后过50目筛。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S2中，所述粉末和蒸馏水按照重量份为1:1.5的比例添加。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S3中，将pH调节至9.0-10.0。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S4中，所述酶解过程中采用频率为18-20KHz的超声波处理。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S6中，所述蒸发浓缩的温度为100-120℃，蒸发时间为20-30min。
作为本发明的一种优选方案，在步骤S8中，所述真空的真空度为0-0.6MPa，冷冻干燥的温度为10-15℃，冷冻时间为20-23h。
3．有益效果
相比于现有技术，本发明的优点在于：
（1）本发明首先对扇贝去壳，并在生理盐水中浸泡，促进了后续活性多肽的提取，经粉碎过筛、制备混合液和pH调节为提取提供了良好的制备环境。
（2）本发明选用Alcalase蛋白酶，在适宜的调节下进行酶解、灭酶和离心分解、蒸发浓缩和冷冻干燥后，可以最大程度上实现活性多肽的提取，且提取的活性多肽具有良好的抗氧化性。
（3）本发明在酶解的过程中使用了超声处理，进一步加快了酶解的速度。
（4）本发明选用合理的蛋白酶进行酶解，制备工艺科学合理，能最大程度的提取海湾扇贝内的活性多肽。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种具有抗氧化作用的活性多肽，包括以下步骤：
S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于浓度为0.9%的生理盐水中浸泡30min，浸泡之后烘干16h，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过50目筛，制得粉末，待用；
S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，粉末和蒸馏水按照重量份为1:1.5的比例添加，搅拌均匀，制得混合液，待用；
S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至9.0，制得碱性混合液，待用；
S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于50℃下酶解6h，酶解过程中采用频率为18KHz的超声波处理，得到水解液，待用；
S5、灭酶：将水解液于70℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶40min分钟，冷却至室温，待用；
S6、离心分解：将冷却至室温后的水解液在3000r/min的转速下离心35min分钟，取上清液，用截留分子量≤ 0000Da 的超滤膜进行超滤，制得超滤液，待用；
S7、蒸发浓缩：将超滤液在100℃蒸发浓缩30min后，待用；
S8、冷冻干燥：将蒸发浓缩后的水解液在真空度为0-0.6MPa的真空下进行冷冻干燥，冷冻干燥的温度为10℃，冷冻时间为23h，制得活性多肽。
实施例2：
一种具有抗氧化作用的活性多肽，包括以下步骤：
S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于浓度为0.9%的生理盐水中浸泡38min，浸泡之后烘干17h，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过50目筛，制得粉末，待用；
S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，粉末和蒸馏水按照重量份为1:1.5的比例添加，搅拌均匀，制得混合液，待用；
S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至9.5，制得碱性混合液，待用；
S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于55℃下酶解5h，酶解过程中采用频率为19KHz的超声波处理，得到水解液，待用；
S5、灭酶：将水解液于75℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶35min分钟，冷却至室温，待用；
S6、离心分解：将冷却至室温后的水解液在4000r/min的转速下离心30min分钟，取上清液，用截留分子量≤ 0000Da 的超滤膜进行超滤，制得超滤液，待用；
S7、蒸发浓缩：将超滤液在110℃蒸发浓缩25min后，待用；
S8、冷冻干燥：将蒸发浓缩后的水解液在真空度为0-0.6MPa的真空下进行冷冻干燥，冷冻干燥的温度为13℃，冷冻时间为22h，制得活性多肽。
实施例3：
一种具有抗氧化作用的活性多肽，包括以下步骤：
S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于浓度为0.9%的生理盐水中浸泡45min，浸泡之后烘干18h，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过50目筛，制得粉末，待用；
S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，粉末和蒸馏水按照重量份为1:1.5的比例添加，搅拌均匀，制得混合液，待用；
S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至10，制得碱性混合液，待用；
S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于60℃下酶解4h，酶解过程中采用频率为20KHz的超声波处理，得到水解液，待用；
S5、灭酶：将水解液于80℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶30min分钟，冷却至室温，待用；
S6、离心分解：将冷却至室温后的水解液在5000r/min的转速下离心25min分钟，取上清液，用截留分子量≤ 0000Da 的超滤膜进行超滤，制得超滤液，待用；
S7、蒸发浓缩：将超滤液在120℃蒸发浓缩20min后，待用；
S8、冷冻干燥：将蒸发浓缩后的水解液在真空度为0-0.6MPa的真空下进行冷冻干燥，冷冻干燥的温度为15℃，冷冻时间为20h，制得活性多肽。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其改进构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，包括以下步骤：
S1、扇贝处理：将扇贝去壳后置于生理盐水中浸泡，浸泡之后烘干，烘干之后置入粉碎机中，充分粉碎后过筛，制得粉末，待用；
S2、制备混合液：在粉末中加入蒸馏水，搅拌均匀，制得混合液，待用；
S3、pH调节：在混合液中加入氢氧化钠，将pH调节至碱性，制得碱性混合液，待用；
S4、酶解：在碱性混合液中置入Alcalase蛋白酶，于50-60℃下酶解4-6h，得到水解液，待用；
S5、灭酶：将水解液于70-80℃下水浴灭活Alcalase蛋白酶30-40min分钟，冷却至室温，待用；
S6、离心分解：将冷却至室温后的水解液在3000-5000r/min的转速下离心25-35min分钟，取上清液，用截留分子量≤ 0000Da 的超滤膜进行超滤，制得超滤液，待用；
S7、蒸发浓缩：将超滤液蒸发浓缩，待用；
S8、冷冻干燥：将蒸发浓缩后的水解液在真空下进行冷冻干燥，制得活性多肽。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S1中，所述生理盐水的浓度为0.9%，浸泡时间为30-45min，烘干温度为65-75℃，烘干时间为16-18h，充分粉碎后过50目筛。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S2中，所述粉末和蒸馏水按照重量份为1:1.5的比例添加。
4.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S3中，将pH调节至9.0-10.0。
5.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S4中，所述酶解过程中采用频率为18-20KHz的超声波处理。
6.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S6中，所述蒸发浓缩的温度为100-120℃，蒸发时间为20-30min。
7.根据权利要求1所述的一种具有抗氧化作用的活性多肽，其特征在于，在步骤S8中，所述真空的真空度为0-0.6MPa，冷冻干燥的温度为10-15℃，冷冻时间为20-23h。
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