CN115919756A - 一种金柚原浆口服液及其制备方法和用途 - Google Patents

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CN115919756A CN202211282614.4A CN202211282614A CN115919756A CN 115919756 A CN115919756 A CN 115919756A CN 202211282614 A CN202211282614 A CN 202211282614A CN 115919756 A CN115919756 A CN 115919756A
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黄霖
钟永辉
温禄腾
张伟斯
刘袆帆
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Meizhou City Meixian District Agricultural Science Research Institute
Meizhou Jumbo Golden Pomelo Industry Co ltd
Zhongkai University of Agriculture and Engineering
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Meizhou City Meixian District Agricultural Science Research Institute
Meizhou Jumbo Golden Pomelo Industry Co ltd
Zhongkai University of Agriculture and Engineering
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Abstract

本发明属于植物原浆口服液技术领域，具体涉及一种金柚原浆口服液及其制备方法和用途。本发明提供的金柚原浆口服液由金柚原浆、木糖醇、柠檬酸、山梨酸钾和水制成。本发明提供的金柚原浆口服液是以天然金柚原浆为活性成分，以木糖醇作为甜味剂，以柠檬酸作为酸味剂，制得的口服液酸甜适口，直接服用，携带方便；而且该口服液活性成分天然无毒副作用，药物成分少，化痰止咳效果显著，药效明确，可以大大提高口服液的安全性，是一种较为理想的化痰止咳药物。

Description

一种金柚原浆口服液及其制备方法和用途
技术领域
本发明属于植物原浆口服液技术领域，具体涉及一种金柚原浆口服液及其制备方法和用途。
背景技术
金柚是岭南特色水果，果实外观金黄，果大，汁多味甜，富含营养物质和药用价值，深受大家喜爱。梅州是中国的“金柚之乡”，仅梅州县2020年的种植面积高达25.5万亩，产量约55.4万吨。目前金柚主要利用方式还是以鲜销为主，由于柚子的采收期集中，鲜销数量有限，时间较短，效益不高，造成严重的浪费。
感冒是一种常见病和多发病，轻者表现为鼻塞，打喷嚏和流鼻涕，重者往往表现为发烧、头痛、咳嗽，还会引发咽喉炎、支气管炎甚至肺炎。如果轻症感冒没有得到及时的治疗，往往变成重症感冒，一般都伴随咳嗽、喉咙有痰、气喘等症状。目前治疗感冒的药物多种多样，有片剂、胶囊剂、颗粒剂和口服液等不同形式。口服液是将原材料用水或其他溶剂，采用适当的方法提取，经浓缩制成的内服液体剂型，具有服用携带方便、保存性能良好等优点，深受消费者的青睐。
专利文献CN107319545A公开了一种润肺止咳的口服液及其制备方法，该润肺止咳的口服液主要是采用库尔勒香梨、百合、玉竹及橘皮等为原料，通过提取有效成分，混合制成口服液。制得的润肺止咳的口服液不添加任何防腐剂、着色剂等添加剂，无毒副作用，可长期食用；酸甜可口，方便携带，具有清肺、润肺、止咳化痰、防治上呼吸道感染、支气管炎、防癌抗癌的作用。
专利文献CN107438504A公开了一种小儿清热止咳口服液及其制备方法，该清热止咳口服液的原料为：连翘、淡豆豉、薄荷、荆芥、炒栀子、大黄、青蒿、赤芍、槟榔、厚朴、黄芪、半夏、柴胡、枇杷叶、浙贝母、虎杖、甜味剂、酸度调节剂和防腐剂。该小儿清热止咳口服液对于2,4-二硝基苯酚引起的非感染性发热和细菌内毒素引起的感染性发热均有很好的抑制作用，且持续时间更长能够达到快速治疗疾病的目的；对于小儿急性上呼吸道感染引起的发热、咳嗽、咽痛和咽喉出血等症状有明显的改善作用。
金柚富含黄酮类化合物、多酚、维生素等营养物质，其还含有膳食纤维、微量元素等物质，对人体具有较好的保健作用，具有较大的开发价值。
发明内容
本发明提供了一种金柚原浆口服液及其制备方法。本发明提供的金柚原浆口服液是以天然金柚原浆为活性成分，添加木糖醇作为甜味剂，添加柠檬酸作为酸味剂和抗氧化剂，制得的口服液对咳嗽、喘气以及肺部炎症具有显著的作用，可用作化痰止咳药物，而且该金柚原浆口服液活性成分少，成分明确，用后不会引起高血压、高血糖和高血脂等副作用，是一种安全性高、适用性广的化痰止咳口服液。
本发明提供了一种金柚原浆口服液，由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆25～35％、木糖醇2～4％、柠檬酸0.03～0.08％、山梨酸钾0.01～0.03％，余量为水。
进一步地，所述金柚原浆与木糖醇的质量比为10:1。
进一步地，所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、木糖醇3％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％，余量为水。
进一步地，本发明还提供了所述金柚原浆的制备方法为：
步骤A：挑选新鲜金柚清洗，消毒5～10min，接着用水冲淋4～8min，削去金柚的表皮并收集表皮，对去表皮的白柚果切割去掉柚皮，留下柚果肉；
步骤B：将步骤A收集的表皮粗碎、细磨，过200-300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为40～40℃的条件下酶解100～120min，得果皮浆；
步骤C：将步骤B得到的柚果肉粗碎、打浆、细磨，过200-300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为40～40℃的条件下酶解40～90min，得果肉浆；
步骤D：将步骤B制得的果皮浆与步骤C制得的果肉浆按比例5:5调配混合，混合后脱气，均质，灭菌，即得。
进一步地，所述步骤B和步骤C中的复合酶的添加量为0.3～0.5g/100g，所述复合酶由果胶酶和蛋白酶按质量比1:1混合组成。
进一步地，所述步骤D中的脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理4～5s；所述均质条件为：在压力为20～30MPa，温度为40～45℃的条件下均质2～3次，所述灭菌条件为：在温度为100～135℃的条件下处理4～10s。
进一步地，本发明提供了所述金柚原浆口服液的制备方法，包括以下步骤：
步骤S1：将金柚原浆、木糖醇和水搅拌均匀，静置8～10min后，接着加入柠檬酸和山梨酸钾，搅拌均匀，得混合液；
步骤S2：将步骤S1得到的混合液进行脱气，均质，将均质后温度达到85～95℃的混合液装入玻璃瓶中，排气后趁热密封，灭菌，即得。
进一步地，所述步骤S2中的脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理4～5s；所述均质条件为：在压力为20～30MPa，温度为40～45℃的条件下均质2～3次。
进一步地，所述步骤S2中的灭菌条为：在温度为85℃的条件下处理10～20min。
此外，本发明还提供了所述金柚原浆口服液在制备治疗化痰止咳药物中的用途。
现有技术虽有柚子具有化痰止咳，消食块膈，主治孕妇食少、口淡、去胃中恶气，解酒毒，消除饮酒者口中的异味等功效的记载，但是没有任何文献有公开柚子化痰止咳的具体治疗效果和作用机理。目前，现有技术记载的柚子功效大多处于推测阶段，对于柚子的研究也大多还处在柚子的食品加工方面，对于柚子的药效研究目前尚未发现。
发明人一直致力于金柚深加工的研究，以期降低金柚的资源浪费，提高金柚的可资源化价值。发明人首次提出了对金柚药效的研究，将金柚削皮切瓣酶解后制成金柚原浆，深入研究了金柚原浆的有效成分和含量，详细阐述了金柚原浆化痰止咳的治疗效果和作用机理，为金柚原浆用于化痰止咳方面的用药奠定了基础。
本发明提供的金柚原浆口服液是以金柚原浆为活性成分，以木糖醇为甜味剂，以柠檬酸为酸味剂和抗氧化剂，以山梨酸钾为防腐剂，各成分相互作用可以有效的提高口服液的稳定性，保证口服液化痰止咳的治疗效果。在摸索试验过程中，发明人添加木糖醇仅仅只是为了掩盖金柚的苦味，以提高口服液的适口性，但是，发明人在深入研究中意外地发现，将木糖醇与金柚原浆按特定的比例进行添加，将木糖醇与柠檬酸按特定的顺序添加，可以有效的防止活性成分的氧化作用，提高了口服液的稳定性。
发明人推测其原理为：本发明先添加的特定比例的木糖醇可以与金柚原浆中的钙离子和钾离子等阳离子形成复合物，接着木糖醇还可以将金柚原浆中的多酚类物质、黄酮类物质、维生素C和β-胡萝卜素等易氧化物质黏附聚集，减少该易氧化物质与氧气接触的空间，从而降低氧化作用，将柚皮苷和维生素等有效物质紧紧聚集，集中释放，提高药效的发挥。发明人接着添加的柠檬酸与少量游离的钙离子和钾离子等阳离子螯合聚集，对聚集的多酚类物质、黄酮类物质、维生素C和β-胡萝卜素等易氧化物质进行内部抗氧化保护，进一步降低有效成分的氧化作用，接着游离的柠檬酸，在金柚原浆外层形成抗氧化层，进一步阻碍氧气接近，减少黄酮类物质的氧化作用，从而提高口服液有效成分的含量，保证口服液的药效，延长保质期。
同时，发明人在深入了解金柚原浆的有效成分后，发现金柚原浆的黄酮类物质含量占比较大，该金柚黄酮类物质具有较好的降血脂、降血糖和降血压的作用，解决了目前大多数市售的化痰止咳中成药用药后会提高血压的副作用，为高血压患者提供了一种化痰止咳效果显著的新药物。另外，本发明添加的特定比例的柠檬酸使口服液呈现的酸性环境不仅可以提高口服液的适口性，还可以提高山梨酸钾的防腐作用，可以进一步地提高口服液的保质期。
与现有技术相比，本发明提供的金柚原浆口服液具有以下优点：
(1)本发明提供的金柚原浆口服液以天然金柚原浆为活性成分，添加了木糖醇甜味剂和柠檬酸酸味剂，酸甜适口，直接服用，方便携带；而且该口服液天然无毒副作用，药物成分少，药效明确，可以大大提高口服液的安全性；
(2)本发明提供的金柚原浆口服液还可以具有化痰止咳效果显著，稳定性高和药物稳定的优点，是一种较为理想的化痰止咳药物。
附图说明：
图1为不同浓度金柚原浆对AAPH诱导的红细胞溶血保护效果图；
图2为RAW244.7细胞产NO的含量图；
图3为RAW244.7细胞分泌IL-4的含量图；
图4为RAW244.7细胞分泌TNF-α的含量图；
图5为正常阴性对照组的小鼠肺部病理切片图；
图6为痰浊模型阴性对照组的小鼠肺部病理切片图；
图7为30％金柚原浆组的小鼠肺部病理切片图；
图8为30％化州橘红组的小鼠肺部病理切片图；
图9为咳喘宁组的小鼠肺部病理切片图；
图10为支气管中炎症因子IL-4、IL-4、IL-10含量的表达图；
图11为促炎因子TNF-α的含量表达图；
图12为MAPK和NF-κB p45蛋白的表达图。
具体实施方式
以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。本发明中所涉及的成分，均可通过市售或本领域常规技术手段获得。
实施例1、金柚原浆的制备
步骤A：挑选新鲜金柚，在鼓泡清洗机中浸泡清洗并消毒8min，接着用水冲淋4min，使用削皮机削去金柚的表皮并收集表皮，对去表皮的白柚果切割去掉柚皮，留下柚果肉；
步骤B：将步骤A收集的表皮粗碎、细磨，过200～300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为50℃的条件下酶解110min，得果皮浆，所述复合酶的添加量为0.4g/100g，所述复合酶由果胶酶和蛋白酶按质量比1:1混合组成；
步骤C：将步骤B得到的柚果肉粗碎、打浆、细磨，过200～300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为50℃的条件下酶解80min，得果肉浆，所述复合酶的添加量为0.4g/100g，所述复合酶由果胶酶和蛋白酶按质量比1:1混合组成；
步骤D：将步骤B制得的果皮浆与步骤C制得的果肉浆按比例5:5调配混合，混合后脱气，均质，灭菌，所述脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理5s；所述均质条件为：在压力为25MPa，温度为45℃的条件下均质2次，所述灭菌条件为：在温度为120℃的条件下处理8s，即得。
实施例2、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆25％、木糖醇2.5％、柠檬酸0.04％、山梨酸钾0.01％、水72.45％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
制备方法：
步骤S1：将金柚原浆、木糖醇和水搅拌均匀，静置10min后，接着加入柠檬酸和山梨酸钾，搅拌均匀，得混合液；
步骤S2：将步骤S1得到的混合液进行脱气，均质，所述脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理5s，所述均质条件为：在压力为25MPa，温度为45℃的条件下均质2次，将均质后温度达到85～95℃的混合液装入玻璃瓶中，排气后趁热密封，灭菌，所述灭菌条为：在温度为85℃的条件下处理15min，即得。
实施例3、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、木糖醇3％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％、水44.93％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
制备方法如实施例2类似。
实施例4、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆35％、木糖醇3.5％、柠檬酸0.04％、山梨酸钾0.03％、水41.41％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
制备方法如实施例2类似。
对比例1、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、赤藓糖醇3％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％、水44.93％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
制备方法如实施例2类似。
与实施例3的区别在于：将木糖醇替换为赤藓糖醇。
对比例2、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、木糖醇4％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％、水43.93％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
制备方法如实施例2类似。
与实施例3的区别在于：增加木糖醇的含量。
对比例3、一种金柚原浆口服液
所述金柚原浆口服液由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、木糖醇3％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％、水44.93％；所述金柚原浆为实施例1制得的柚金柚原浆。
步骤S1：将金柚原浆、木糖醇、柠檬酸、山梨酸钾和水，搅拌均匀，得混合液；
步骤S2：将步骤S1得到的混合液进行脱气，均质，所述脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理5s，所述均质条件为：在压力为25MPa，温度为45℃的条件下均质2次，将均质后温度达到85～95℃的混合液装入玻璃瓶中，排气后趁热密封，灭菌，所述灭菌条为：在温度为85℃的条件下处理15min，即得。
实验例一、金柚原浆的营养物质含量测定实验
1、实验方法：
将实施例1制得的金柚原浆进行营养物质含量测定，其中：采用福林酚法测定总多酚含量，参考NY/T 2010-2011测定总黄酮含量，参考NY/T 2014-2011测定柚皮苷含量，参考GB 5009.83-2014测定β-胡萝卜素含量，参考DBS52/019-2014测定矿物质元素，参考GB5009.84-2014测定维生素B1含量，参考GB 5009.85-2014测定维生素B2含量，参考GB5009.154-2014测定维生素B4含量，参考GB 14754-2010测定维生素C含量，参考GB5009.89-2014测定烟酸含量。
2、实验结果：
实验结果如表1所示。
表1金柚原浆营养物质含量
营养物质 含量
总多酚(mg/100g) 35.40±0.22
总黄酮(mg/100g) 950.48±7.45
柚皮苷(mg/L) 23.08±0.54
β-胡萝卜素(mg/100g) 0.12±0.01
钙(mg/L) 121.12±0.57
铜(mg/L) 0.07±0.01
铁(mg/L) 2.31±0.02
钾(mg/L) 579.20±0.14
镁(mg/L) 41.07±0.03
磷(mg/L) 50.35±0.37
锌(mg/L) 0.48±0.01
维生素B1(mg/100g) 0.44±0.02
维生素B2(mg/100g) 0.53±0.02
维生素B4(mg/100g) 0.32±0.01
维生素E(mg/100g) 52.41±0.45
维生素C(mg/100g) 104.90±0.28
烟酸(ug/100g) 230.53±4.51
实验例二、红细胞溶血实验
1、实验材料：
使用PBS将实施例1制得的金柚原浆配成不同浓度的待测液，具体是以黄酮含量浓度的金柚原浆为稀释比例，分别稀释金柚原浆黄酮的含量浓度为954.95mg/100g、477.47mg/100g、238.74mg/100g、119.37mg/100g、59.48mg/100g。
2、红细胞悬浮液预处理：
取适量的红细胞悬浮液在4℃下以3000r/min离心5min去除上清液，再加入适量PBS溶液后离心，此步骤重复三次。达到除去红细胞悬浮液中的细胞碎片，得到结构完整的红细胞沉淀，并将红细胞沉淀用PBS配成体积比为4％的红细胞悬液。
3、实验方法：
取0.2mL预处理好的红细胞悬液并加入200μL待测液，AAPH组加入等体积AAPH溶液，空白对照组加入等体积PBS溶液，与红细胞充分混匀，37℃下避光缓和震荡孵育30min后，加入AAPH溶液，混匀，相同条件下孵育2.5h后测定实验结果。实验设计三次平行。
4、实验结果：
实验结果如图1所示。由图1可知，不同浓度的金柚原浆对AAPH诱导的红细胞溶血保护效果表现出剂量反应，在相同的孵育条件下，空白对照组添加PBS而不经AAPH处理，自然产生的溶血率为23.93％，而AAPH组的溶血率为44.01％，显著高于经金柚原浆处理后的实验组(p<0.01)。当金柚原浆黄酮的含量为119.37mg/100g时，溶血率为10.18％与其它的实验组有显著差异，具有较好的抗红细胞溶血效果。
实验例三、细胞抗炎性实验
1、实验材料：
30％金柚原浆(金柚原浆口服液中的配比，以黄酮含量约为238.74mg/100g左右)、30％化州橘红(将化橘红浸泡浓缩至黄酮含量和金柚原浆的黄酮含量相近，黄酮含量约为238.74mg/100g左右，简称HJH)、咳喘宁(桂龙咳喘宁片，OTC，简称KCN，5g/kg，大连天山药业有限公司)和脂多糖(LPS，上海碧云天生物技术公司)。
2、实验方法：
从液氮罐中取一株冻存的RAW244.7细胞，快速放入37℃水浴锅中晃动使细胞在短时间内解冻。然后迅速转移到15mL无菌离心管中，加入含9mL体积分数10％胎牛血清和质量浓度10g/L双抗(链霉素与青霉素混合液)的DMEM培养基，1200xg离心10min。除去上清液，加入新鲜的培养基，吹打细胞混匀，倒入培养皿，在37℃，含体积分数5％的CO2的培养箱中培养。取对数生长期的细胞按每孔1×105的密度接种到94孔板中，培养24h后，吸去上清液，实验组分别加入LPS，30％化州橘红，咳喘宁和30％金柚原浆100μL，对照组和空白组(无细胞)加入等量的完全培养液，每组设置3个平行孔。37℃、5％CO2培养箱培养24h。收集上清液，参考Griess和ELISA试剂盒测定NO，IL-4和TNF-α的含量。
3、实验结果：
3.1、NO的含量结果如图2所示：
一氧化氮(NO)是机体内广泛存在的小分子化合物，在心血管、消化、免疫、呼吸等系统的调节中具有广泛的病理生理作用，被普遍认为是细胞内传导信号的第二信使。NO在正常情况下含量很少，可由内皮细胞、神经细胞等细胞合成释放，主要由一氧化氮合酶催化产生。当细胞被LPS等物质刺激时会增加NO的表达量，大量的NO被诱导表达进而介导炎症等疾病的发生发展。30％金柚原浆组的NO含量为27.43±0.42pg/mL，较空白组23.87±0.43pg/mL而言，能显著提高RAW244.7细胞产NO的能力。
3.2、IL-4的含量结果如图3所示：
白细胞介素IL4是一种促炎因子，IL-1的产生可刺激某些特定细胞分泌IL-4，在发热和急性炎症反应中发挥着关键作用。IL-4能诱导T细胞和B细胞的增殖分化以增强免疫，还可以刺激肝脏合成急性期蛋白参与炎症反应。30％金柚原浆组的IL-4含量为43.12±0.82pg/mL，较30％化州橘红组、咳喘宁组、空白组而言，具有显著差异效果，促进能力最佳。
3.3、TNF-α的含量结果如图4所示：
细胞因子是介导抗体免疫应答和炎症反应的物质，TNF-α是由巨噬细胞产生的能杀伤肿瘤细胞和促进B淋巴细胞增生的细胞因子，对肿瘤有抑制或直接溶解的作用。30％金柚原浆的TNF-α含量为404.44±12.77pg/mL，显著高于30％化州橘红组、咳喘宁组和空白组，提高了巨噬细胞分泌TNF-α的能力。
实验例四、化痰止咳抗炎性动物实验
1、实验材料：
30％金柚原浆(金柚原浆口服液中的配比，以黄酮含量约为238.74mg/100g左右)、30％化州橘红(将化橘红浸泡浓缩至黄酮含量和金柚原浆的黄酮含量相近，黄酮含量约为238.74mg/100g左右，简称HJH)和咳喘宁(桂龙咳喘宁片，OTC，简称KCN，5g/kg，大连天山药业有限公司)。
实验方法：
2.1、小鼠酚红排泌量法测定排痰量：
将30％金柚原浆、30％化州橘红和咳喘宁对小鼠进行灌胃处理，1次/d，连续7d。实验前小鼠禁食不禁水12h，然后各组小鼠按0.3ml/20g体重灌胃给药，其中正常阴性对照组给等体积生理盐水。给药后1h将小鼠置于10×10×10cm的玻璃罩中，用0.3ml的25％的浓氨水雾化45s，结束后立即取出小鼠，观察有无咳嗽反应。小鼠酚红排泌量法测定排痰量，第7d给药30min后，各实验组小鼠腹腔注射2.5％酚红溶液0.5mL。30min后，进行痰浊阻肺型小鼠模型构建；模型鉴定成功后，脱颈椎处死小鼠，分离气管，剪下自甲状软骨下至器官分支处气管，用5％碳酸氢钠溶液冲洗3次，每次0.5mL。合并3次冲洗液，用紫外分光光度计548nm处测OD值。
2.2、小鼠肺部病理切片观察：
毛细管排痰量测定完成后依次断颈处死小鼠，结扎右主支管处，取右肺上叶部分肺组织，4％戊二醛固定，HE染色，光学显微镜下进行观察组织形态学改变。
2.3、肺部炎症因子的含量测定：
用穿刺针插入气管上端，用PBS反复冲洗左肺3次，2mL/次，将回收的肺泡灌洗液于4℃，1500r/min离心10min，取上清液，使用试剂盒方法，生化法检测NO，ELISA法分别检测IL-4、IL-4、IL-10含量。取右肺中叶，准确称取肺组织，按重量体积比用生理盐水在冰浴下制成10％的肺组织匀浆，3000r/min离心10min，取上清液。ELISA法测定TNF-α的含量。
2.4、MAPK、NF-kB p45信号通路的影响：
取右肺中叶，准确称取肺组织，按重量体积比用生理盐水在冰浴下制成10％的肺组织匀浆，提取RNA。用qRT-PCR测定TNF-α的mRNA表达量。
收集肺部组织匀浆，提取蛋白，利用Western blot检测紧密蛋白表达情况。使用BCA蛋白分析试剂盒测定其蛋白浓度。等量蛋白的样品用SDS-PAGE凝胶分离，转移到PVDF膜上，用一抗孵育24h。第二天取出膜，PBST洗涤3次，10min。按说明书用封闭液稀释二抗后孵育。避光现配现用ECL显影液，在暗室内显影，最后拍照记录。
2、实验结果：
3.1、小鼠酚红排泌量法测定排痰量如表2所示。
表2金柚原浆含量对小鼠酚红排泌量的影响
组别 动物数/N <![CDATA[酚红排泌量/μg·mL<sup>-1</sup>]]>
正常阴性对照组 4 8.75±0.44a
痰浊模型阴性对照组 4 4.54±0.33b
30％金柚原浆组 4 5.53±0.43c
30％化州橘红组 4 8.58±0.81a
咳喘宁组 4 8.40±0.33a
注：小写字母表示具有显著性(P＜0.05)。
由表2可知，与痰浊模型阴性对照组比较，正常阴性对照组、30％金柚原浆组、30％化州橘红组、阳性对照组均能增加小鼠气管酚红排泌量，差异具有统计学意义(P<0.05)。
3.2、小鼠肺部病理切片结果如图5～图9所示：
其中：图5为正常阴性对照组，图4为痰浊模型阴性对照组，图7为30％金柚原浆组，图8为30％化州橘红组，图9为咳喘宁组。
由上述小鼠肺部病理切片可知：正常阴性对照组小鼠可见支气管粘膜上皮完整，管壁正常，纤毛排列整齐，无明显的炎性细胞渗出，肺泡结构完整，无明显扩张。痰浊模型阴性对照组小鼠支气管粘膜上皮脱落，纤毛缺失，支气管管壁可见明显增厚，杯状细胞增多，粘膜层有大量炎症细胞浸润，肺泡壁部分断裂，肺泡腔增大，个别肺泡融合成肺大泡，肺间质可见明显大量炎症细胞。30％金柚原浆和30％化州橘红组可见支气管上皮比痰浊模型阴性对照组完整，纤毛增多，支气管管壁略有增厚，粘膜下炎症细胞浸润较痰浊模型组有所改善，肺泡腔轻度扩大，肺间质炎细胞浸润减轻。咳喘宁组小鼠支气管、肺泡及肺间质结构较正常阴性对照组相似。
3.3、肺部炎症因子的含量如图10所示：
与正常阴性对照组(CK)相比，痰浊模型阴性对照组小鼠肺泡灌洗液中NO、IL-4、IL-4、IL-10的含量均具有差异，差异有统计学意义(P<0.01)。与痰浊模型阴性对照组相比，30％金柚原浆组、30％化州橘红(HJH)组和咳喘宁(KCN)组均能有效降低痰浊模型阴性对照组小鼠肺部NO、IL-4、IL-4、IL-10含量，差异有统计学意义(P<0.01)。其中，30％金柚原浆组具有调节支气管中炎症因子IL-4、IL-4、IL-10含量的表达。
3.4、MAPK、NF-kB p45信号通路的影响如图11和图12所示：
由图11qRT-PCR测定TNF-α结果可知，30％金柚原浆组对小鼠中促炎因子TNF-α在mRNA转录上具有一定的抑制作用，对相关细胞因子的蛋白表达水平产生影响，从而可以发挥出金柚原浆在体内的抗炎效果。
MAPK细胞通路参与细胞增殖、分化、凋亡等多种生理过程，还可调节激活NF-κB信号通路，是与炎症反应密切相关的信号转导通路。而NF-κB信号通路是抗炎信号转导通路中最重要的下游通路，在炎症反应中发挥着极其重要的调控作用。
由图12可知，30％金柚原浆组和30％化州橘红(HJH)组对MAPK中的蛋白表达水平显著降低，说明金柚原浆对MAPK信号通路的活化发挥了有效的抑制作用。而且，金柚原浆对MAPK的活化呈现出剂量依赖的抑制作用。
痰浊模型阴性对照组中，NF-κB p45的表达显著增强；在加入30％金柚原浆或者化橘红后，可不同程度的抑制小鼠肺部中NF-κB p45蛋白的表达。
综上所述，实验表明：金柚原浆对小鼠的咳嗽、喘气以及肺部炎症具有作用。
实验例五、金柚原浆口服液的稳定性实验
1、实验材料：
实施例3、对比例1、对比例2和对比例3制得的金柚原浆口服液。
2、实验方法：
参考药典规定的稳定试验方法进行测定，将实施例3、对比例1、对比例2和对比例3制得的金柚原浆口服液在温度为40℃，湿度为75％的条件下放置12个月，测定金柚原浆口服液中总黄酮的含量。
3、实验结果：
试验结果如表3所示：
表3金柚原浆口服液总黄酮的含量
由表3可知：
(1)本发明提供的金柚原浆口服液在温度为40℃，湿度为75％的条件下放置12个月，总黄酮的含量基本变化不大，说明各成分在本发明提供的口服液体系中相互作用起增强口服液稳定性的作用，保证口服液的药效，延长口服液的保质期；
(2)将木糖醇替换为赤藓糖醇的对比例1制得的口服液在温度为40℃，湿度为75％的条件下放置12个月，总黄酮的含量下降明显，说明木糖醇与其他成分可以相互作用协调起增强抗氧化作用，从而提高口服液的稳定性。
(3)将木糖醇含量增加的对比例2制得的口服液在温度为40℃，湿度为75％的条件下放置12个月，总黄酮的含量下降不明显，但是木糖醇添加量增加，会使口服液偏甜，口感黏糊，没有酸甜适口的感觉，而且增加木糖醇的含量也无法降低总黄酮的氧化作用，说明木糖醇与金柚原浆的添加比例对口服液的稳定性也有一定的影响作用；
(4)将口服液原料同时搅拌均匀的对比例3制得的口服液在温度为40℃，湿度为75％的条件下放置12个月，总黄酮的含量也有一定的下降趋势，说明木糖醇与柠檬酸的添加顺序对口服液的稳定性也有较大的影响。发明人猜测其原因可能是同时加入木糖醇和柠檬酸，二者同时与金柚原浆的阳离子物质螯合，没有形成有序的双层抗氧化层，导致抗氧化效果降低。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (10)

1.一种金柚原浆口服液，其特征在于，由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆25～35％、木糖醇2～4％、柠檬酸0.03～0.08％、山梨酸钾0.01～0.03％，余量为水。
2.如权利要求1所述的金柚原浆口服液，其特征在于，所述金柚原浆与木糖醇的质量比为10:1。
3.如权利要求2所述的金柚原浆口服液，其特征在于，由以下成分及其重量百分比组成：
金柚原浆30％、木糖醇3％、柠檬酸0.05％、山梨酸钾0.02％，余量为水。
4.如权利要求1～3任一所述的金柚原浆口服液，其特征在于，所述金柚原浆的制备方法为：
步骤A：挑选新鲜金柚清洗，消毒5～10min，接着用水冲淋4～8min，削去金柚的表皮并收集表皮，对去表皮的白柚果切割去掉柚皮，留下柚果肉；
步骤B：将步骤A收集的表皮粗碎、细磨，过200-300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为40～40℃的条件下酶解100～120min，得果皮浆；
步骤C：将步骤B得到的柚果肉粗碎、打浆、细磨，过200-300目筛，去滤渣，接着加入复合酶在温度为40～40℃的条件下酶解40～90min，得果肉浆；
步骤D：将步骤B制得的果皮浆与步骤C制得的果肉浆按比例5:5调配混合，混合后脱气，均质，灭菌，即得。
5.如权利要求4所述的金柚原浆口服液，其特征在于，所述步骤B和步骤C中的复合酶的添加量为0.3～0.5g/100g，所述复合酶由果胶酶和蛋白酶按质量比1:1混合组成。
6.如权利要求4所述的金柚原浆口服液，其特征在于，所述步骤D中的脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理4～5s；所述均质条件为：在压力为20～30MPa，温度为40～45℃的条件下均质2～3次，所述灭菌条件为：在温度为100～135℃的条件下处理4～10s。
7.如权利要求1～4任一所述的金柚原浆口服液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤S1：将金柚原浆、木糖醇和水搅拌均匀，静置8～10min后，接着加入柠檬酸和山梨酸钾，搅拌均匀，得混合液；
步骤S2：将步骤S1得到的混合液进行脱气，均质，将均质后温度达到85～95℃的混合液装入玻璃瓶中，排气后趁热密封，灭菌，即得。
8.如权利要求7所述的金柚原浆口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的脱气条件为：在真空度为-0.08MPa的条件下处理4～5s；所述均质条件为：在压力为20～30MPa，温度为40～45℃的条件下均质2～3次。
9.如权利要求7所述的金柚原浆口服液的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中的灭菌条为：在温度为85℃的条件下处理10～20min。
10.如权利要求1～4任一所述的金柚原浆口服液在制备治疗化痰止咳药物中的用途。
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Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1591123A1 (en) * 2003-01-21 2005-11-02 Su, Wei-wei Uses of naringenin, naringin and salts thereof as expectorants in the treatment of cough, and compositions thereof
CN1899552A (zh) * 2006-07-13 2007-01-24 广东化州中药厂制药有限公司 无糖型橘红痰咳口服液
CN101828615A (zh) * 2010-02-21 2010-09-15 福州市食品工业研究所 文旦柚果茶及其制造方法
CN102415528A (zh) * 2011-12-13 2012-04-18 甘肃赫原生物制品有限公司 木糖醇保健口服液及其制备方法
CN103622905A (zh) * 2013-12-17 2014-03-12 中山大学 一种矫味柚皮苷口服溶液及其制备方法
CN103750183A (zh) * 2013-12-05 2014-04-30 福建南海食品有限公司 蜜柚口含片及其制备方法
CN104027645A (zh) * 2014-06-13 2014-09-10 河南科技大学第一附属医院 一种止咳化痰口服液及其制备方法
CN104171774A (zh) * 2014-06-30 2014-12-03 谢婧 一种酶解风味金柚膏及其制作方法
CN106262913A (zh) * 2016-09-22 2017-01-04 安徽省金天柱农业科技有限公司 一种健胃养脾瓜蒌籽油口服液及其制备工艺
CN106889513A (zh) * 2017-01-17 2017-06-27 梅州市珍宝金柚实业有限公司 一种金柚原浆的生产方法
CN109010564A (zh) * 2018-10-15 2018-12-18 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) 一种具有降血脂作用的药用甘薯叶提取物的制备方法及应用
CN110638891A (zh) * 2019-11-06 2020-01-03 陕西博森生物制药股份集团有限公司 一种止咳口服液
CN111227247A (zh) * 2020-03-10 2020-06-05 中国农业科学院农产品加工研究所 具有改善肠道菌群结构和缓减动脉粥样硬化功能的柑橘产品及其制备方法与应用
CN112998265A (zh) * 2021-05-13 2021-06-22 广东南粤药业有限公司 一种具有止咳化痰功效的化橘红组合物及其制备方法

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1591123A1 (en) * 2003-01-21 2005-11-02 Su, Wei-wei Uses of naringenin, naringin and salts thereof as expectorants in the treatment of cough, and compositions thereof
CN1899552A (zh) * 2006-07-13 2007-01-24 广东化州中药厂制药有限公司 无糖型橘红痰咳口服液
CN101828615A (zh) * 2010-02-21 2010-09-15 福州市食品工业研究所 文旦柚果茶及其制造方法
CN102415528A (zh) * 2011-12-13 2012-04-18 甘肃赫原生物制品有限公司 木糖醇保健口服液及其制备方法
CN103750183A (zh) * 2013-12-05 2014-04-30 福建南海食品有限公司 蜜柚口含片及其制备方法
CN103622905A (zh) * 2013-12-17 2014-03-12 中山大学 一种矫味柚皮苷口服溶液及其制备方法
CN104027645A (zh) * 2014-06-13 2014-09-10 河南科技大学第一附属医院 一种止咳化痰口服液及其制备方法
CN104171774A (zh) * 2014-06-30 2014-12-03 谢婧 一种酶解风味金柚膏及其制作方法
CN106262913A (zh) * 2016-09-22 2017-01-04 安徽省金天柱农业科技有限公司 一种健胃养脾瓜蒌籽油口服液及其制备工艺
CN106889513A (zh) * 2017-01-17 2017-06-27 梅州市珍宝金柚实业有限公司 一种金柚原浆的生产方法
CN109010564A (zh) * 2018-10-15 2018-12-18 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) 一种具有降血脂作用的药用甘薯叶提取物的制备方法及应用
CN110638891A (zh) * 2019-11-06 2020-01-03 陕西博森生物制药股份集团有限公司 一种止咳口服液
CN111227247A (zh) * 2020-03-10 2020-06-05 中国农业科学院农产品加工研究所 具有改善肠道菌群结构和缓减动脉粥样硬化功能的柑橘产品及其制备方法与应用
CN112998265A (zh) * 2021-05-13 2021-06-22 广东南粤药业有限公司 一种具有止咳化痰功效的化橘红组合物及其制备方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
彭磊等编著: "药果同源", 31 January 2022, 云南科技出版社, pages: 57 *
李微等: "正交设计结合药效学试验优选小儿肺咳口服液的提取工艺", 中国实验方剂学杂志, vol. 22, no. 02, 31 January 2016 (2016-01-31), pages 28 - 32 *
李振羽等: "柚子副产物制备泡腾片的工艺研究", 现代食品科技, vol. 35, no. 12, 31 December 2019 (2019-12-31), pages 241 - 248 *
梁颂名等主编: "临床中医方药学", 30 November 2008, 广东科技出版社, pages: 70 *
王琴等: "响应面法优化超声-微波协同辅助提取金柚幼果总黄酮工艺", 食品研究与开发, vol. 41, no. 02, 31 January 2020 (2020-01-31), pages 83 - 91 *
纳雨农等: "金柚幼果黄酮对AAPH诱导红细胞氧化损伤的保护作用", 现代食品科技, vol. 38, no. 02, 28 February 2022 (2022-02-28), pages 36 - 45 *

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