CN115561380A - 一种丹参膏的检测方法 - Google Patents
一种丹参膏的检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115561380A CN115561380A CN202111639370.6A CN202111639370A CN115561380A CN 115561380 A CN115561380 A CN 115561380A CN 202111639370 A CN202111639370 A CN 202111639370A CN 115561380 A CN115561380 A CN 115561380A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- salvianolic acid
- methanol
- thin
- ethyl acetate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000011135 Salvia miltiorrhiza Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 239000002674 ointment Substances 0.000 title claims description 24
- 241000304195 Salvia miltiorrhiza Species 0.000 title abstract description 7
- SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[3-[1-carboxy-2-(3,4-dihydroxyphenyl)ethoxy]carbonyl-2-(3,4-dihydroxyphenyl)-7-hydroxy-2,3-dihydro-1-benzofuran-4-yl]prop-2-enoyloxy]-3-(3,4-dihydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C=1C=C(O)C=2OC(C=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(C(=O)OC(CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)C=2C=1C=CC(=O)OC(C(=O)O)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 111
- SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N Lithospermic acid B Natural products C([C@H](C(=O)O)OC(=O)\C=C\C=1C=2[C@H](C(=O)O[C@H](CC=3C=C(O)C(O)=CC=3)C(O)=O)[C@H](OC=2C(O)=CC=1)C=1C=C(O)C(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C(O)=C1 SNKFFCBZYFGCQN-VWUOOIFGSA-N 0.000 claims abstract description 111
- STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N salvianolic acid B Natural products OC(=O)C(Cc1ccc(O)c(O)c1)OC(=O)C=Cc2cc(O)c(O)c3OC(C(C(=O)OC(Cc4ccc(O)c(O)c4)C(=O)O)c23)c5ccc(O)c(O)c5 STCJJTBMWHMRCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 111
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 40
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 108
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 94
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 82
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 61
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 claims description 57
- 244000132619 red sage Species 0.000 claims description 51
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 50
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 49
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 48
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 42
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 38
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims description 34
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 33
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 32
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 claims description 25
- 235000005412 red sage Nutrition 0.000 claims description 24
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 23
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 19
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 19
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 16
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 16
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims description 15
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 15
- HELHKLNWSVLNDP-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol;propan-2-one Chemical compound OC.CC(C)=O.CCOC(C)=O HELHKLNWSVLNDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 13
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 13
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 13
- WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 1,6-dimethyl-8,9-dihydronaphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione;1-methyl-6-methylidene-8,9-dihydro-7h-naphtho[1,2-g][1]benzofuran-10,11-dione Chemical compound O=C1C(=O)C2=C3CCCC(=C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2.O=C1C(=O)C2=C3CCC=C(C)C3=CC=C2C2=C1C(C)=CO2 WTPPRJKFRFIQKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 11
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims description 11
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 9
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 8
- 239000006260 foam Substances 0.000 claims description 8
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 8
- 230000001502 supplementing effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000007689 inspection Methods 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 49
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 32
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 24
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 10
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 5
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 4
- 206010000077 Abdominal mass Diseases 0.000 description 4
- 201000000736 Amenorrhea Diseases 0.000 description 4
- 206010001928 Amenorrhoea Diseases 0.000 description 4
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 4
- 208000005171 Dysmenorrhea Diseases 0.000 description 4
- 206010013935 Dysmenorrhoea Diseases 0.000 description 4
- 208000019255 Menstrual disease Diseases 0.000 description 4
- 208000001431 Psychomotor Agitation Diseases 0.000 description 4
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 4
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 4
- 231100000540 amenorrhea Toxicity 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 4
- 206010019847 hepatosplenomegaly Diseases 0.000 description 4
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 239000004973 liquid crystal related substance Substances 0.000 description 3
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 239000009123 dan-shen root extract Substances 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 2
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- FVNMAWQFIILJGS-UHFFFAOYSA-N O.OC.CC#N.OC=O Chemical compound O.OC.CC#N.OC=O FVNMAWQFIILJGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- KYHPCNBJMHQCQS-UHFFFAOYSA-N chloroform ethyl acetate formic acid methanol toluene Chemical compound C(=O)O.CO.C(C)(=O)OCC.ClC(Cl)Cl.C1(=CC=CC=C1)C KYHPCNBJMHQCQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000003255 drug test Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 230000002175 menstrual effect Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229940023462 paste product Drugs 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 239000013074 reference sample Substances 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 230000001550 time effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/90—Plate chromatography, e.g. thin layer or paper chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及一种丹参膏的检测方法，检测方法包括对丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查和丹参膏中丹酚酸B含量测定，该检测方法在原检测方法的基础上增加了丹酚酸B薄层鉴别和丹酚酸B含量测定，通过方法学考察，该检测方法具有专属性强、耐用性好、良好的回收率等效果，能有效的检测产品的质量情况，进一步控制了产品质量。
Description
技术领域
本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种丹参膏的检测方法。
背景技术
丹参膏，为贵州威利德制药有限公司的产品，功能为祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，瘕积聚，腹痛刺痛，热弊疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。
收载于WS3-B-0711-91，标准中原有检测项目为：性状和相对密度。未涉及产品的理化鉴别和丹酚酸B的薄层鉴别检查及丹参膏中丹酚酸B的含量测定项目，不能有效控制丹参膏产品的质量。
为了解决上述问题，有效的提高产品质量，提升丹参膏的质量标准，本发明团队对丹参膏原检测方法进行深入研发、考察，建立了一种用于丹参膏的检测方法。该检测方法增加了丹参膏的理化鉴别、丹酚酸B的薄层鉴别和丹酚酸B的含量测定，可有效的控制产品的质量，进一步提高产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是提供一种丹参膏的检测方法。
本发明所述丹参膏的制法为：取丹参1000g，加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，滤液加入红糖400g，搅拌使溶化，滤过，滤液浓缩至相对密度在30℃时为1.30，制成1000g，即得；
本发明所述丹参膏的理化鉴别为取本品1～2ml，加水至5～10ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
优选的，
本发明所述丹参膏的理化鉴别为取本品1ml，加水至5ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
本发明所述丹参膏的检测方法为：丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查和丹参膏中丹酚酸B含量测定含量测定。
本发明所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.2～0.8g，加乙酸乙酯80～120ml，加热回流提取30～120min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～3μl、对照品溶液1～3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
优选的，
本发明所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.3～0.6g，加乙酸乙酯90～110ml，加热回流提取40～100min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～2μl、对照品溶液1～2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
进一步优选的，
本发明所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.4～0.5g，加乙酸乙酯95～100ml，加热回流提取50～80min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～1.5μl、对照品溶液1.5～2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
更进一步优选的，
本发明所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.5g，加乙酸乙酯100ml，加热回流提取60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明所述丹参膏中丹酚酸B含量测定的方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-0.5～1％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备取本品0.5～3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯20～30ml，称定重量，超声处理30～60min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B60μg的溶液；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
优选的，
本发明所述丹参膏中丹酚酸B含量测定的方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-1％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备取本品2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，称定重量，超声处理45min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B60μg的溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
本发明含量测定中所述超声处理，功率140W，频率42kHz。
有益效果：
1.本发明是在原检测方法的基础上增加了丹酚酸B薄层鉴别和丹酚酸B含量测定，通过方法学考察，该检测方法具有专属性强、耐用性好、良好的回收率等效果，能有效的检测产品的质量情况，进一步控制产品质量。
2.本发明对丹酚酸B薄层鉴别中供试品的称样量、点样量及提取方法、提取时间、展开剂比例等进行了筛选实验，得到丹酚酸B薄层鉴别方法的优选方案，并对其进行了方法学考察，结果在专属性考察中，在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的主斑点，且斑点分离较好，阴性无干扰，表明此方法专属性强；在重现性考察中，10批样品检验结果一致，表明此方法的稳定性；在耐用性考察中，在不同薄层板、温度、湿度下考察，结果斑点分离好，无干扰，表明此方法耐用性好。
3.本发明对丹酚酸B含量测定方法对供试品提取溶剂、提取方法、提取时间，流动相比等进行了的筛选实验，得到了含量测定的优选方案，并对其进行了方法学考察，结果在线性考察中，丹酚酸B浓度在0.1249μg～1.3737μg范围内呈良好的线性关系；在精密度考察中，同一供试品溶液，重复点样6次，记录吸光度，RSD为0.28％，说明有良好的精密度；在重复考察中，处理6份样品，记录吸光度，RSD为1.45％，说明有良好的重复性；在专属性考察中，回收率试验结果表明丹酚酸B的回收率为99.07％，RSD为1.92％，说明本法有良好的回收率；专属性考察结果表明样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰，且阴性无干扰；并对10批样品进行了丹酚酸B含量测定，结果10批丹酚酸B平均含量均为0.58mg，暂定标准为0.3mg。
附图说明
图1丹参膏取样量为0.2g薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图2丹参膏取样量为0.5g薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图3丹参膏取样量为0.8g薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图4丹参膏样品点样量为1μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图5丹参膏样品点样量为2μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图6丹参膏样品点样量为3μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图7对照品点样量为1μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图8对照品点样量为2μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图9对照品点样量为3μl时薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图10三批丹参膏成品专属性薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹参膏20200302，3为丹参膏20200303，4为丹酚酸B对照品溶液)；
图11丹参膏成品阴性薄层鉴别图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液，3为阴性样品)；
图12低温4℃下展开鉴别考察图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图13室温24℃下展开鉴别考察图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图14低湿30％下展开鉴别考察图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图15高湿65％下展开鉴别考察图(注：1为丹参膏20200301，2为丹酚酸B对照品溶液)；
图16丹酚酸B标准曲线图。
具体实施方式
实施例1
【制法】取丹参1000g，加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，滤液加入红糖400g，搅拌使溶化，滤过，滤液浓缩至相对密度在30℃时为1.30，制成1000g，即得。
【性状】本品为深棕色稠厚的半流体，气微，味甜、苦。
【检查】相对密度 取本品10g，加水20ml稀释后依法测定，为1.11。
【鉴别】
(1)取本品1ml，加水至5ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
(2)称取本品0.5g，加乙酸乙酯100ml，加热回流提取60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】丹酚酸B
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-1％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备 取本品2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，称定重量，超声处理45min(功率140W，频率42kHz)，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B60μg的溶液；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1g含丹参以丹酚酸B(C36H30O16)计，不得少于0.30mg。
【功能与主治】祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，瘕积聚，腹痛刺痛，热弊疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。
【用法与用量】口服，一次9g，一日2次。
【注意】忌食生冷，辛辣、油腻之物。
【规格】每瓶装125g
【贮藏】密封，置阴凉处。
实施例2
【制法】取丹参1000g，加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，滤液加入红糖400g，搅拌使溶化，滤过，滤液浓缩至相对密度在30℃时为1.30，制成1000g，即得。
【性状】本品为深棕色稠厚的半流体，气微，味甜、苦。
【检查】相对密度 取本品10g，加水20ml稀释后依法测定，为1.11。
【鉴别】
(1)取本品1.5ml，加水至7ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
(2)称取本品0.2g，加乙酸乙酯80ml，加热回流提取30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】丹酚酸B
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-0.5％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备 取本品0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯20ml，称定重量，超声处理30min(功率140W，频率42kHz)，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B 60μg的溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1g含丹参以丹酚酸B(C36H30O16)计，不得少于0.30mg。
【功能与主治】祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，瘕积聚，腹痛刺痛，热弊疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。
【用法与用量】口服，一次9g，一日2次。
【注意】忌食生冷，辛辣、油腻之物。
【规格】每瓶装125g
【贮藏】密封，置阴凉处。
实施例3
【制法】取丹参1000g，加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，滤液加入红糖400g，搅拌使溶化，滤过，滤液浓缩至相对密度在30℃时为1.30，制成1000g，即得。
【性状】本品为深棕色稠厚的半流体，气微，味甜、苦。
【检查】相对密度 取本品10g，加水20ml稀释后依法测定，为1.11。
【鉴别】
(1)取本品2ml，加水至10ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
(2)称取本品0.8g，加乙酸乙酯120ml，加热回流提取120min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液3μl、对照品溶液3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【含量测定】丹酚酸B
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以以比例为30∶70的乙腈-0.8％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备 取本品3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，称定重量，超声处理60min(功率140W，频率42kHz)，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B60μg的溶液；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每1g含丹参以丹酚酸B(C36H30O16)计，不得少于0.30mg。
【功能与主治】祛瘀止痛，活血通经，清心除烦。用于月经不调，经闭痛经，瘕积聚，腹痛刺痛，热弊疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛。
【用法与用量】口服，一次9g，一日2次。
【注意】忌食生冷，辛辣、油腻之物。
【规格】每瓶装125g
【贮藏】密封，置阴凉处。
为了进一步验证本发明的有效性，发明人进行了一系列的验证试验，摘录部分如下：
实验例
1.丹参膏的理化鉴别
取本品1ml，加水至5ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。该鉴别主要考察样品中的皂苷理化鉴别，取丹参膏样品按此方法鉴别，理化反应明显。
2.丹酚酸B薄层鉴别方法的筛选
2.1试剂与试药
丹参膏(批号20200301、20200302、20200303、20200304、20200305、20200306、20200307、20200308、20200309、20200310)；丹酚酸B对照品(111562-201615)由中国药品生物制品检定所提供；硅胶GF254薄层板：青岛海洋化工厂分厂生产的硅胶GF254薄层板；试剂：甲苯、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸为分析纯。
2.2鉴别方法筛选
取丹参膏(20200301)0.5g，分别按以下薄层方法试验，结果见表1。
方法一(参照2020版药典丹参药材质量标准)：取丹参膏0.5g，加乙醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液作为供试品溶液。再取丹酚酸B对照品，加乙醇制成每1ml1.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使成条状，以三氯甲烷-甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(6:4:8:1:4)为展开剂，展开，展至约4cm，取出，晾干，再以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(4:1)为展开剂，展开，展至约8cm，取出，晾干，分别置日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
方法二(参照2020版药典丹参水提物质量标准)：取丹参膏0.5g，加水5ml使溶解(如有不溶物，滤过，取滤液)，作为供试品溶液。另取丹酚酸B对照品，加水制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述二种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(2∶3∶4∶0.5∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
方法三：称取丹参膏0.2g，加乙酸乙酯100ml，加热回流提取60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为3∶2∶1的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
表1薄层方法对比表
结果:由表1可知，“方法三”处理的样品，斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好，故为暂定优选薄层方法。
2.3薄层鉴别方法的确认
2.3.1供试品取样量的确定
取丹参膏(20200301)，按“2.2”项下的“方法三”实验，筛选供试品取样量。结果见表2、图1、图2、图3。
表2供试品取样量筛选表
结果：由表2可知，取样量为0.5g和0.8g时，薄层均为斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“0.5g”为优选取样量。
2.3.2供试品点样量的确定
根据“2.3.1”项下的优选薄层方法，筛选供试品点样量。结果见表3。图4、图5、图6。
表3供试品点样量筛选表
由表3可知，点样量为1μl时，薄层斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“1μl”为优选样品点样量。
2.3.3对照品点样量的确定
根据“2.3.2”项下的优选薄层方法，筛选对照品点样量。结果见表4。图7、图8、图9。
表4对照品点样量筛选表
由表4可知，点样量为2μl时，对照品薄层斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“2μl”为优选对照品点样量。
2.3.4供试品提取溶剂的筛选
根据“2.3.3”项下的优选薄层方法，筛选样品的提取溶剂。结果见表5。
表5提取溶剂筛选表
由表5可知，乙酸乙酯作供试品提取溶剂时，结果斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“乙酸乙酯”为优选样品提取溶剂。
2.3.5提取方法的筛选
根据“2.3.4”项下的优选薄层方法，筛选样品的提取方法。结果见表6。
表6提取方法筛选表
由表6可知，回流提取时，结果显示斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“回流提取”为优选样品提取方法。
2.3.6提取时间的筛选
根据“2.3.5”项下的优选薄层方法，筛选样品的提取时间。结果见表7。
表7提取时间筛选表
由表7可知，回流提取时间为60min和120min时，薄层结果均显示斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“60min”为优选样品提取时间。
2.3.7展开剂比例筛选
根据“2.3.6”项下的优选薄层方法，筛选展开剂比例。结果见表8。
表8展开剂比例筛选表
由表8可知，展开剂丙酮-乙酸乙酯-甲醇例为“5:4:2”时，薄层结果均显示斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好。故“5:4:2”为展开剂优选比例。
2.3.8结果
经过以上筛选实验，得出丹参膏中丹酚酸B的薄层鉴别优选方法为：
称取丹参膏0.5g，加乙酸乙酯100ml，加热回流提取60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.4方法学验证
2.4.1专属性
分别取丹参膏样品(20200301、20200302、20200303)，薄层板选用青岛海洋化工厂硅胶GF254板(批号：20160218)，在温度为24℃，湿度为55％的环境下，按“2.3.8”项下的方法制得供试品溶液，分别取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液点样、展开、显色，254nm紫外光灯下检视，在供试品色谱中，与对照品色谱相应的位置上显相同的主斑点，斑点分离较好，且阴性无干扰，结果见图10、图11。
2.4.2重现性
取丹参膏10批，分别按“2.3.8”的薄层鉴别方法展开，结果见表9。
表9试验方法、条件及重现性试验结果
由表9可知，10批丹参膏的薄层均显示斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，重现性好，表明本方法重现性好。
2.4.3耐用性
2.4.3.1不同薄层板的比较
取按丹参膏样品10批，分别按“2.3.8”的的方法展开，比较青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板的薄层，结果见表10。
表10不同薄层板耐用性结果表
由表10可知，高效硅胶板商品板斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中；硅胶G商品板斑点清晰，分离达到要求,Rf值适中，故本方法耐用性好。
2.4.3.2不同温度的比较
取丹参膏(20200301)，薄层板选用青岛海洋化工厂硅胶GF254板(批号：20160218)，按“2.3.8”的薄层鉴别方法，分别在温度为4℃和24℃，湿度均为55％的环境下，展开，结果见图12、图13。
由图12、13可知，薄层斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个温度条件下均能得到较好的鉴别色谱，故本方法耐用性好。
2.4.3.3不同湿度的比较
取丹参膏样品(20200301)，薄层板选用青岛海洋化工厂硅胶GF254板(批号：20160218)，按“2.3.8”的薄层鉴别方法，在温度24℃，湿度分别为30％和65％的环境下，展开，结果见图14、图15。
由图14、15可知，薄层斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个湿度条件下均能得到较好的鉴别色谱，故本方法耐用性好。
3.丹酚酸B含量测定方法的筛选
3.1仪器与试药
高效液相色谱仪：THERMO液相色谱仪；丹参膏：贵州威利德制药有限公司；丹酚酸B对照品(来源：中国食品药品检定研究院；批号：111562-201615)；试剂：甲醇、乙腈为色谱醇、甲酸为分析纯、水为重蒸馏水。
3.2测定方法的来源
参照2020版药典丹参药材、丹参片中丹酚酸B的含量测定方法，分别取丹参膏2g，按以下方法检测：
方法一(丹参药材质量标准)
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1％磷酸溶液(22:78)为流动相；柱温为20℃；流速为每分钟1.2ml；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于6000。
对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇-水(8:2)混合溶液制成每1ml含0.10mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取丹参膏2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水(8:2)混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率140W，频率42kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水(8:2)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水(8:2)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
方法二(丹参片质量标准)
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59)为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含10μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取丹参膏2g，精密称定，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理(功率250W，频率33kHz)20分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
方法三
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-1％冰醋酸溶液(50∶50)为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备 取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加水制成每1ml含10μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取丹参膏2g，精密称定，置50ml量瓶中，加水适量，超声处理(功率250W，频率33kHz)20分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
结果：“方法一”和“方法二”峰形不好，出峰时间长，重现性差；“方法三”相对峰形较好，出峰时间短，重现性较好，故暂定“方法三”为丹参膏中丹酚酸B的测定方法。
3.3测定方法的确认实验
3.3.1流动相比例的筛选
以“乙腈-1％冰醋酸溶液”为流动相，比例分别为“50∶50”、“50∶60”、“50∶70”进行检测，结果发现比例为“50∶70”时，峰形相对较好，分离度好，且出峰时间最短，故流动相“乙腈-1％冰醋酸溶液”的优选比例为“30∶70”。
3.3.2供试品提取溶剂的筛选
根据“3.3.1”项下的优选方法，筛选供试品提取溶剂。结果见表11。
表11提取溶剂的选择
结果：由表11可知，以乙酸乙脂作提取溶剂，丹参膏的丹酚酸B含量最高，故“乙酸乙脂”为优选。
3.3.3供试品提取方法的筛选
根据“3.3.2”项下的优选方法，筛选提取方法，结果见表12。
表12提取方法的选择
结果：由表12可知，回流提取含量与超声提取含量无差异，从成本考虑，超声提取为优选。
3.3.4超声提取时间的筛选
根据“3.3.3”项下的优选方法，筛选超声提取时间，结果见表13。
表13提取时间影响
结果：由表13可知，超声提取45分钟就完全提取，故选择提取时间为45分钟。
3.3.5色谱柱的筛选
根据“3.3.4”项下的优选方法，筛选色谱柱，采用不同品牌十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的柱子实验，结果见表14。
表14不同色谱柱的测定结果
由表14可知，不同品牌十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱对含量测定无影响。
3.3.6结果
通过上述筛选实验，得到丹参膏中丹酚酸B含量测定的优选方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以“乙腈-1％冰醋酸溶液(30∶70)”为流动相；检测波长为286nm。理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备 取丹参膏2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙脂25ml，称定重量，超声处理45min(功率140W，频率42kHz)，放冷，再称定重量，用乙酸乙脂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B60μg的溶液；
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
3.4方法验证
3.4.1线性考察
分别精密吸取丹酚酸B对照品溶液(0.062442mg/ml)2、6、10、14、18、22μl进样，记录色谱，以峰面积为纵坐标，以进样量(μg)为横坐标作图，计算丹酚酸B回归方程为：A＝8505.9943C+73.4571(r＝0.9993)，回归方程拟合过原点的直线方程为：A＝8579.9227C；将一供试品溶液进样分析，所得峰面积分别代入上式计算，丹酚酸B相对偏差0.28％，故可认为标准曲线过原点，回归方程截距为零。由此含量测定可采用外标一点法计算。丹酚酸B在0.1249μg～1.3737μg之间线性关系良好，结果见表15、图16。
表15线性关系考察
3.4.2精密度试验
取对照品溶液0.0624mg/ml重复进样6次，记录色谱，结果见表16，RSD为0.0.28％，说明有良好的精密度。
表16精密度试验
3.4.3重复性试验
按“3.3.6”项下的方法制备6份供试品溶液，分别进样，记录色谱，计算，结果见表17，RSD为1.45％，说明有良好的重复性。
表17重复性试验
3.4.4回收率试验
采用加样回收，精密吸取已测定含量的样品1g(丹酚酸B含量:0.5890mg/g)，再加入丹酚酸B对照品适量，按正文所述色谱条件测定，计算回收率，结果见表18，丹酚酸B的回收率为99.07％，RSD为1.92％，说明本法有良好的回收率。
表18回收率试验
3.4.5专属性
取丹参膏按供试品溶液制备方法制备样品溶液，按上述色谱条件，分别取对照品溶液、样品溶液注入液相色谱仪，样品溶液色谱在对照品溶液色谱相应位置有相应的色谱峰，且分离较好，阴性无干扰，见专属性色谱图。
3.4.6样品稳定性试验
取丹参膏，按“3.3.6”项下的方法制备供试品溶液，按上述色谱条件测定丹酚酸B峰面积，结果见表19。
表19样品稳定性试验
由表19可知，被测溶液丹酚酸B峰面积8h内RSD均小于2％，故被测溶液在8h内均稳定。
3.4.6十批含量样品测定：结果表20。
表20十批样品含量测定结果
根据表20的十批含量测定结果，暂订本品限度为：本品每1g含丹参以丹酚酸B(C36H30O16)计，不得少于0.30mg。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1.一种丹参膏的检测方法，检测方法用于检测以下制备方法制备而出的产品，丹参膏的具体制备方法为：取丹参1000g，加水煎煮三次，第一次2h，第二、三次各1h，合并煎液，滤过，滤液加入红糖400g，搅拌使溶化，滤过，滤液浓缩至相对密度在30℃时为1.30，制成1000g，即得；其特征在于，所述丹参膏的检测方法为：丹参膏的理化鉴别，丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查和含量测定。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述丹参膏的理化鉴别为取本品1～2ml，加水至5～10ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏的理化鉴别为取本品1ml，加水至5ml，强力振摇，产生多量持续性的泡沫。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.2～0.8g，加乙酸乙酯80～120ml，加热回流提取30～120min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～3μl、对照品溶液1～3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.3～0.6g，加乙酸乙酯90～110ml，加热回流提取40～100min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～2μl、对照品溶液1～2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.4～0.5g，加乙酸乙酯95～100ml，加热回流提取50～80min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1～1.5μl、对照品溶液1.5～2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏中丹酚酸B薄层鉴别检查方法为：称取丹参膏0.5g，加乙酸乙酯100ml，加热回流提取60min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照通则0502的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以比例为5:4:2的丙酮-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏中丹酚酸B含量测定的方法为：
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-0.5～1％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备取本品0.5～3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯20～30ml，称定重量，超声处理30～60min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B 60μg的溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述丹参膏中丹酚酸B含量测定的方法为:
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以比例为30∶70的乙腈-1％冰醋酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于3000；
供试品溶液的制备取本品2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙酸乙酯25ml，称定重量，超声处理45min，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备取丹酚酸B对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含丹酚酸B 60μg的溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
10.根据权利要求8～9任一项所述的检测方法，其特征在于：供试品溶液制备中所述超声处理，功率140W，频率42kHz。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111639370.6A CN115561380A (zh) | 2021-12-29 | 2021-12-29 | 一种丹参膏的检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202111639370.6A CN115561380A (zh) | 2021-12-29 | 2021-12-29 | 一种丹参膏的检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115561380A true CN115561380A (zh) | 2023-01-03 |
Family
ID=84737932
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202111639370.6A Pending CN115561380A (zh) | 2021-12-29 | 2021-12-29 | 一种丹参膏的检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115561380A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1689636A (zh) * | 2004-04-07 | 2005-11-02 | 北京奇源益德药物研究所 | 以丹参和红花制成的中药注射剂的质量控制方法 |
| CN102008683A (zh) * | 2010-11-19 | 2011-04-13 | 贵阳新天药业股份有限公司 | 一种脑康泰片的质量检测方法 |
| CN109700936A (zh) * | 2019-03-01 | 2019-05-03 | 潍坊舒美生物科技有限公司 | 一种补肾健脾丹参膏及其制备工艺 |
-
2021
- 2021-12-29 CN CN202111639370.6A patent/CN115561380A/zh active Pending
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1689636A (zh) * | 2004-04-07 | 2005-11-02 | 北京奇源益德药物研究所 | 以丹参和红花制成的中药注射剂的质量控制方法 |
| CN102008683A (zh) * | 2010-11-19 | 2011-04-13 | 贵阳新天药业股份有限公司 | 一种脑康泰片的质量检测方法 |
| CN109700936A (zh) * | 2019-03-01 | 2019-05-03 | 潍坊舒美生物科技有限公司 | 一种补肾健脾丹参膏及其制备工艺 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| KASHYAP KUMAR DUBEY 等: "Evaluation and Optimization of Downstream Process Parameters for Extraction of Betulinic Acid from the Bark of Ziziphus jujubae L.", THE SCIENTIFIC WORLD JOURNAL, vol. 2013, 31 December 2013 (2013-12-31), pages 1 - 10 * |
| ZHANGXIN22..: "丹参膏", pages 1 - 2, Retrieved from the Internet <URL:httpswww.doc88.comp-0794693952215.html> * |
| 于丽梅 等: "舒心通脉片的薄层色谱鉴别", 人参研究, no. 01, 31 December 2009 (2009-12-31), pages 22 - 23 * |
| 于亚男 等: "丹参中非法添加9种黄色合成色素薄层色谱鉴别", 亚太传统医药, vol. 13, no. 15, 31 August 2017 (2017-08-31), pages 15 - 17 * |
| 张爱岑 等: "复方丹参膏中丹皮酚的定性定量分析", 中成药, no. 12, 20 December 1994 (1994-12-20), pages 12 - 14 * |
| 林少霞 等: "参罗胶囊质量标准研究", 今日药学, vol. 27, no. 03, 31 March 2017 (2017-03-31), pages 149 - 152 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107843677B (zh) | 赤芍对照提取物及其制备方法和应用 | |
| CN104398642A (zh) | 一种复方黄柏液的制备及质量检测方法 | |
| CN105467059A (zh) | 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN107607649B (zh) | 一种黑骨藤的检测方法 | |
| CN109632978B (zh) | 一种茯苓对照提取物及其制备方法和应用 | |
| CN109142588B (zh) | 一种莲芝消炎胶囊hplc特征图谱及其构建方法和应用 | |
| CN102078403A (zh) | 一种小儿热咳口服液中药制剂的检测方法 | |
| CN109085285B (zh) | 一种肠炎宁颗粒的质量控制方法 | |
| CN112730674B (zh) | 一种罗汉茶的质量检测方法 | |
| CN101791366A (zh) | 一种对不同产地穿龙薯蓣及同属药材进行质量检测的方法 | |
| CN108037200B (zh) | 一种滋肾宁神丸的质量检测方法 | |
| CN115561380A (zh) | 一种丹参膏的检测方法 | |
| CN113484429B (zh) | 桃核承气汤物质基准的建立方法 | |
| CN115575541A (zh) | 一种银黄二陈合剂中多种活性成分同时测定方法 | |
| CN111948331B (zh) | 一种无糖型清肝颗粒的质量检测方法 | |
| CN110687224B (zh) | 雷公藤药材及其制剂雷公藤多苷片中雷公藤内酯甲的测定方法 | |
| CN110075179B (zh) | 一种斑唇马先蒿配方颗粒、制备方法及其检测方法 | |
| CN115808473A (zh) | 一种可用于中药复方当归四逆汤质量控制的新方法 | |
| CN112946129A (zh) | 一种止泻糖浆剂的质量检测方法 | |
| CN114113447B (zh) | 一种鹿苓安肾颗粒的质量检测方法 | |
| CN114636762B (zh) | 一种麝香心痛宁片的质量控制方法 | |
| CN112630370B (zh) | 小儿健胃糖浆有效成分的检测方法 | |
| CN112903868B (zh) | 一种复方番石榴制剂中多种化学成分的含量测定方法 | |
| CN102475727A (zh) | 片仔癀外用制剂的检测方法 | |
| CN115372501B (zh) | 一种浙贝母或湖北贝母对照提取物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |