CN115363988A

CN115363988A - 一种胶原面膜纸的制备方法

Info

Publication number: CN115363988A
Application number: CN202211171156.7A
Authority: CN
Inventors: 陆金婷; 程咏梅; 石丽虹; 王立军; 任伟业
Original assignee: Wuxi Biot Bio Technology Co ltd
Current assignee: Wuxi Biot Bio Technology Co ltd
Priority date: 2022-09-23
Filing date: 2022-09-23
Publication date: 2022-11-22
Anticipated expiration: 2042-09-23
Also published as: CN115363988B

Abstract

本发明公开了一种胶原面膜纸的制备方法，包括如下步骤：(1)将动物组织表面剔除毛发或剥去筋膜，去掉脂肪层后切成组织碎片、冷冻；(2)将步骤(1)制得的组织碎片浸泡在氢氧化钠溶液中，浸泡完后用纯化水清洗数次；(3)将经过步骤(2)处理所得物料置于盐酸溶液中，浸泡完后用纯化水清洗数次，制得胶原纤维丝；(4)将步骤(3)制得的胶原纤维丝，用纯化水分散成一定浓度的胶原混悬液，再加入一定量的活性物质、乳化剂，混合均匀后倒入冻干模具中，冷冻干燥，制得胶原冻干海绵；(5)将胶原冻干海绵切割成薄片，即得胶原面膜纸。本发明面膜纸可以促进细胞再生，改善肌肤纹理，延缓皮肤衰老，促进皮肤损伤修复。

Description

一种胶原面膜纸的制备方法

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，尤其是涉及一种胶原面膜纸的制备方法。

背景技术

胶原与人体皮肤胶原的结构相似，生物相容性好，可以快速进入皮肤深层，对皮肤具有良好的营养作用。且胶原中存在具有大量羧基和羟基的羟脯氨酸和羟赖氨酸等氨基酸，及大量的甘氨酸等天然保湿因子，能提高组织细胞的贮水能力，对皮肤细胞的生长、分裂、增殖、迁移及分化具有良好的促进作用。胶原能够给皮肤提供养分，延缓皮肤衰老，促进皮肤的创面修复。

目前，市面上常见的胶原面膜形式，主要以湿性面膜和冻干面膜为主。湿性面膜是将面膜基材(无纺布、生物纤维、海藻酸钠凝胶、蚕丝等)浸泡在含有胶原、透明质酸钠等活性物质的精华液中，装入铝塑复合袋中密封成一片包装，使用时直接取出沾满精华液的面膜敷于面部即可。冻干面膜是将胶原、透明质酸等活性物质直接喷涂于面膜基材上，然后干燥成干膜，使用时用纯化水浸润后直接敷于面部。湿性面膜中由于使用的胶原、透明质酸钠等精华液均为具有活性的营养成分，高水活度的湿润环境下易促进细菌或霉菌滋生，其保存期限较短，所以为了延长其保存周期，往往需要添加如羟基苯甲酸酯类、醇类的防腐剂。但防腐剂往往具有一定的刺激性，长期使用含有防腐剂的护肤品，可能使皮肤容易老化、抗氧化能力降低等，甚至可能导致过敏。冻干胶原面膜以干膜的形式提供，避免了防腐剂的添加，但是其基材上添加的胶原、透明质酸钠含量很少，一般达不到有效浓度，多以概念性添加为主，支撑面膜的骨架还是以无纺布、生物纤维、藻酸盐基材为主。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种胶原面膜纸的制备方法。本发明以动物组织(牛跟腱、牛皮或猪皮)中提取的高纯度胶原为面膜骨架，再辅以其他活性物质、乳化剂成分，制成胶原面膜。此面膜可以促进细胞再生，改善肌肤纹理，延缓皮肤衰老，促进皮肤损伤修复。

本发明的技术方案如下：

本发明的第一个目的是提供一种胶原面膜纸的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将动物组织表面剔除毛发或者剥去筋膜，去掉脂肪层后切成组织碎片、冷冻；

(2)将步骤(1)制得的组织碎片浸泡在氢氧化钠溶液中，置于10℃以下环境中，浸泡完后用纯化水清洗数次；

(3)将经过步骤(2)处理所得物料置于盐酸溶液中，置于10℃以下环境中，浸泡完后用纯化水清洗数次，制得胶原纤维丝；

(4)将步骤(3)制得的胶原纤维丝，用纯化水分散成一定浓度的胶原混悬液，在胶原混悬液中加入一定量的活性物质、乳化剂，混合均匀后倒入冻干模具中，冷冻干燥，制得胶原冻干海绵；

(5)将步骤(4)制得的胶原冻干海绵切割成薄片，即得胶原面膜纸。

在本发明的一个实施例中，步骤(1)中，动物组织为牛跟腱、牛皮、猪皮中的一种或多种。

在本发明的一个实施例中，步骤(2)中，氢氧化钠溶液的质量浓度为0.5％～2％，优选1.0％～1.5％；

组织碎片与氢氧化钠溶液的质量比为1:4～1:8，优选1:5；

浸泡时间为3～7d，优选5～6d；用纯化水清洗至料液pH至中性。

在本发明的一个实施例中，步骤(3)中，盐酸溶液的质量浓度为2％～5％，优选3％～4％；

经过步骤(2)处理所得物料与盐酸溶液的质量比为1:2～1:4，优选1:3；

料液pH为0.7-1.0，优选0.8；

浸泡时间为12～24h，优选18～20h；用纯化水清洗至料液pH至4.5～4.8。

在本发明的一个实施例中，步骤(3)中，以干品计，胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.2～0.4mmol/g。

在本发明的一个实施例中，步骤(4)中，胶原混悬液的质量浓度为1.5～2.5％，优选2％。

在本发明的一个实施例中，步骤(4)中，活性物质为透明质酸钠、银耳提取物、海藻糖、普鲁兰多糖中的一种或多种；活性物质的添加浓度为0.03～0.2％，优选0.08-0.1％。

在本发明的一个实施例中，步骤(4)中，乳化剂为PPG-26-丁醇聚醚-26、PPG-15硬脂醇醚、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-40失水山梨醇全油酸酯、甘油三(乙基己酸)酯中的一种或多种；

乳化剂添加浓度为0.5～1％，优选0.8％；

在本发明的一个实施例中，步骤(4)中，混合料液的pH为4～5，优选4.5；

冷冻干燥的具体方法为：将冻干模具密封好后置于-25℃盐水浴中冷冻2-3小时，而后取出模具，置于-5℃冰箱中储存12～24小时；

然后将冷冻好的物料在1.5mbar的真空下冷冻干燥，温度程序如下：0℃，4～6小时；10℃，20～25小时；20℃，30～35小时；40℃，4～6小时；100℃，35～40小时；

胶原冻干海绵的厚度为1.5～3cm，优选2cm。

在本发明的一个实施例中，步骤(5)中，胶原面膜纸的厚度为0.6～1mm，优选0.8mm。

本发明有益的技术效果在于：

本发明胶原面膜纸干的时候是一张薄的、表面细腻、有一定弹性的海绵纸，敷在脸上后滴上纯净水或精华水，里面的胶原及其他活性精华便会被激活，面膜纸变成半透明弹性的膜布紧贴在脸上，胶原精华能迅速渗透至皮肤深层，供给营养，使真皮层细胞结构更为紧密，改善肌肤纹理，平滑肌肤，并保持丰润；

本发明面膜纸可使衰竭细胞达到最佳含水量，抵抗自由基，并增加活力和再生的状态；给肌肤提供养分，延缓皮肤衰老，促进皮肤的损伤修复。可广泛应用于医学美容、化妆品行业。

附图说明

图1为本发明工艺流程示意图；

图2为实施例1制得胶原面膜纸外表面的扫描电镜图；

图3为实施例1制得胶原面膜纸内部的扫描电镜图；

图4为实施例1制得胶原纤维丝对成纤维细胞内抗衰基因表达量的检测结果；

图5为实施例1制得胶原纤维丝对

模型的组织形态改善检测结果；

图6为实施例1制得胶原纤维丝对

模型的组织活力改善检测结果。

具体实施方式

下面结合附图和实施例，对本发明进行具体描述。

实施例1

一种胶原面膜纸的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将牛跟腱用剖层机剖去外层筋膜和脂肪，清洗干净后用粉碎机切成碎片，冷冻备用；

(2)取预处理完成的牛跟腱碎片1000g，浸泡在5000g NaOH溶液(质量浓度1.0％)中，置于10℃环境下浸泡6d，然后用纯化水清洗数遍，清洗至物料pH为7；

(3)将经过步骤(2)处理所得物料(物料重量为1500g)，浸泡在4500g盐酸溶液(质量浓度4％)中，调节料液pH至0.8，置于10℃环境下浸泡20h，然后用纯化水清洗数遍，至料液pH为4.5，制得胶原纤维丝；经检测制得的胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.32mmol/g(以干品计)；

(4)取步骤(3)制得的胶原纤维丝(干物质含量为13％)200g，加入1100g纯化水配成浓度为2％的胶原混悬液，在混悬液中分别加入0.52g透明质酸钠、0.52g银耳提取物，用粉碎机混合均匀，再加入5.2g PPG-26-丁醇聚醚-26、2.6g PEG-40氢化蓖麻油、2.6g甘油三(乙基己酸)酯，混合均匀后，调节料液pH为4.5，之后倒入冻干模具中，密封好后置于-25℃盐水浴中冷冻3小时，而后取出模具，置于-5℃冰箱中储存18小时；然后将冷冻好的物料在1.5mbar的真空下冷冻干燥，温度程序如下：0℃，5小时；10℃，20小时；20℃，32小时；40℃，5小时；100℃，36小时；制得胶原冻干海绵，厚度为2cm；

(5)最后，用剖层机将胶原冻干海绵切割成0.8mm厚度的薄片，即得胶原面膜纸。

实施例2

一种胶原面膜纸的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(2)取预处理完成的牛跟腱碎片1000g，浸泡在5000g NaOH溶液(质量浓度1.5％)中，置于8℃环境下浸泡5d，然后用纯化水清洗数遍，清洗至物料pH为7；

(3)将经过步骤(2)处理所得物料(物料重量为1700g)，浸泡在3400g盐酸溶液(质量浓度5％)中，调节料液pH至1.0，置于8℃环境下浸泡24h，然后用纯化水清洗数遍，至料液pH为4.6，制得胶原纤维丝；经检测制得的胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.28mmol/g(以干品计)；

(4)取步骤(3)制得的胶原纤维丝(干物质含量为12％)200g，加入1400g纯化水配成浓度为1.5％的胶原混悬液，在混悬液中分别加入0.48g透明质酸钠，用粉碎机混合均匀，再加入10g PPG-26-丁醇聚醚-26、5g甘油三(乙基己酸)酯，混合均匀后，调节料液pH为4.6，之后倒入冻干模具中，密封好后置于-25℃盐水浴中冷冻3小时，而后取出模具，置于-5℃冰箱中储存16小时；然后将冷冻好的物料在1.5mbar的真空下冷冻干燥，温度程序如下：0℃，5小时；10℃，20小时；20℃，32小时；40℃，5小时；100℃，36小时；制得胶原冻干海绵，厚度为3cm；

(5)最后，用剖层机将胶原冻干海绵切割成1.0mm厚度的薄片，即得胶原面膜纸。

实施例3

一种胶原面膜纸的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将湿牛皮用剖层机剖去皮毛层和脂肪层，清洗干净后用粉碎机切成碎片，冷冻备用；

(2)取预处理完成的牛皮碎片1000g，浸泡在4000g NaOH溶液(质量浓度0.8％)中，置于6℃环境下浸泡4d，然后用纯化水清洗数遍，清洗至物料pH为7；

(3)将经过步骤(2)处理所得物料(物料重量为1300g)，浸泡在5200g盐酸溶液(质量浓度3％)中，调节料液pH至0.9，置于6℃环境下浸泡18h，然后用纯化水清洗数遍，至料液pH为4.7，制得胶原纤维丝；经检测制得的胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.38mmol/g(以干品计)；

(4)取步骤(3)制得的胶原丝状物(干物质含量为15％)200g，加入1000g纯化水配成浓度为2.5％的胶原混悬液，在混悬液中分别加入0.48g银耳提取物，用粉碎机混合均匀，再加入6.4g PPG-26-丁醇聚醚-26、3.2g PEG-40氢化蓖麻油，混合均匀后，调节料液pH为4.8，之后倒入冻干模具中，密封好后置于-25℃盐水浴中冷冻3小时，而后取出模具，置于-5℃冰箱中储存18小时；然后将冷冻好的物料在1.5mbar的真空下冷冻干燥，温度程序如下：0℃，5小时；10℃，20小时；20℃，32小时；40℃，5小时；100℃，36小时；制得胶原冻干海绵，厚度为2.5cm；

(5)最后，用剖层机将胶原冻干海绵切割成0.7mm厚度的薄片，即得胶原面膜纸。

实施例4

一种胶原面膜纸的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将湿猪皮用剖层机剖去皮毛层和脂肪层，清洗干净后用粉碎机切成碎片，冷冻备用；

(2)取预处理完成的猪皮碎片1000g，浸泡在5000g NaOH溶液(质量浓度2％)中，置于4℃环境下浸泡7d，然后用纯化水清洗数遍，清洗至物料pH为7；

(3)将经过步骤(2)处理所得物料(物料重量为1200g)，浸泡在3600g盐酸溶液(质量浓度4％)中，调节料液pH至0.7，置于4℃环境下浸泡24h，然后用纯化水清洗数遍，至料液pH为4.8，制得胶原纤维丝；经检测制得的胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.32mmol/g(以干品计)；

(4)取步骤(3)制得的胶原纤维丝(干物质含量为12.6％)200g，加入1200g纯化水配成浓度为1.8％的胶原混悬液，在混悬液中分别加入0.7g透明质酸钠、0.7g银耳提取物，用粉碎机混合均匀，再加入14g PPG-26-丁醇聚醚-26，混合均匀后，调节料液pH为4.7，之后倒入冻干模具中，密封好后置于-25℃盐水浴中冷冻3小时，而后取出模具，置于-5℃冰箱中储存20小时；然后将冷冻好的物料在1.5mbar的真空下冷冻干燥，温度程序如下：0℃，5小时；10℃，20小时；20℃，32小时；40℃，5小时；100℃，36小时；制得胶原冻干海绵，厚度为1.5cm；

(5)最后，用剖层机将胶原冻干海绵切割成0.9mm厚度的薄片，即得胶原面膜纸。

测试例：

一、实施例1制得胶原纤维丝对抗衰、屏障损伤修复功效评价

1.1抗衰功效

方法：(1)细胞接种：按1.8E⁵个/孔的接种密度接种成纤维细胞至6孔板，培养箱37、5％CO₂中孵育过夜。

(2)配液：以无血清培养基作为空白对照，配制0.5mg/mL胶原混悬液，作为受试物工作液。

(3)给药：待6孔板中细胞铺板率达到40％～50％时，进行分组给药，每孔给药量为2mL，每组设3个复孔。给药完成后将6孔板放置在培养箱(37℃、5％CO₂)中孵育培养24h。

(4)收样：2mL/孔PBS清洗两次，每孔加入1mL RNAiso Plus，吹打裂解细胞后收样。

(5)基因检测：依据试剂盒说明书，开展RNA提取、反转录及荧光定量PCR检测，采用2^-△△CT方法进行结果计算。

结果显示：与空白对照组(BC)相比，实施例1条件下制备得到的胶原纤维丝在0.5mg/mL的浓度下，对成纤维细胞内基因Collagen I、Collagen IV和CollagenⅦ的表达量具有明显的提升作用(p<0.01)。说明实施例1条件下制备得到的胶原纤维丝具有一定的抗衰功效。

1.2屏障损伤修复功效

方法：(1)、样品制备：

i.0.4％SLS母液配置：称取0.0080SLS溶于2mL PBS溶液中，0.22μm过滤，配制成0.4％SLS母液，备用。

ii.0.2％SLS工作液配置：吸取0.5mL 0.4％SLS溶液，加入0.5mL PBS配制成0.2％SLS工作液。

iii.阳性对照组(WY14643)工作液配置：称取10mg WY14643粉末溶于1mL DMSO中，配制成30mM WY14643母液；将8.3μL的WY14643母液(30mM)加入到5mL模型培养液中，配制成50μM的工作液，备用。

iv.样品配置：称取25mg的胶原纤维丝，放入5mL的PBS中，配成5mg/mL的胶原混悬液，备用。吸取样品母液500μL加入500μL 0.4％SLS母液，混匀备用。

(2)、给药操作：

i.将模型转移到6孔板中(提前添加0.9mL模型培养液)，在6孔板上标注测试组编号。

ii.取配置好的不同组工作液25μL加于模型表面，阴性对照组和阳性对照组表面添加0.2％的SLS溶液，样品组添加相应浓度的工作液，用镊子夹取尼龙膜覆盖在每个模型表面，使样品均匀分布于模型表面，置于CO₂培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中孵育24h。

iii.孵育结束后，用装有无菌PBS溶液的洗瓶清洗模型表面残留的受试物，用无菌棉签轻轻拭去模型内、外残留液体。

(3)、组织形态检测：取用于组织形态检测的模型用4％的多聚甲醛进行固定处理，固定24h后，将模型环切取下，进行H&E染色，显微镜下拍照观察，采集图片并分析。

(4)、组织活力检测：

i.根据实验分组，取用于组织活力检测的模型开展组织活力检测。

ii.MTT孵育：模型清洗结束后，根据模型数量准备24孔板，并做相应标记。每孔加入0.3mL的MTT工作液(1mg/mL)。将装有模型的24孔板放置于培养箱(37℃、5％CO₂、95％RH)中，孵育3h±5min。

iii.异丙醇浸提：MTT孵育结束后，PBS清洗模型外表面，并用无菌棉签擦干，转移到新的24孔板中，并标记。在模型内加入2mL异丙醇，用封口膜密封24孔板，在孔板振摇器上震荡2h。

iv.酶标仪读数：用200μL移液器枪头刺穿模型，使异丙醇浸提液从模型内流出到24孔板中。丢弃被刺穿的模型，吹打每孔内的异丙醇浸提液3次使其充分混匀。混匀后，从每孔中吸取2份200μL异丙醇浸提液，分别加入96孔板的对应孔中，做好标记。采用异丙醇作为调零孔。酶标仪570nm波长读取吸光度(OD)值。

v.计算：按以下公式计算各试验分组的相对组织活力：

Tissue Viability(％)＝(给药孔OD—调零孔OD)/(对照孔OD—调零孔OD)

图5为实施例1制得胶原纤维丝对

模型的组织形态改善检测结果，图6为实施例1制得胶原纤维丝对

模型的组织活力改善检测结果；

结果显示：在皮肤刺激损伤中，实施例1条件下制备得到的胶原纤维丝可明显提升组织活力，改善组织形态，说明实施例1条件下制备得到的胶原纤维丝具有一定的屏障损伤修复功效。

二、面膜纸性能测试

2.1实施例1-4所得的胶原面膜纸的部分性能如表1所示。

表1

2.2使用前后皮肤水分测试(实施例1条件下制备得到的胶原面膜纸)

采用皮肤水分测试仪(MDD4-Corneometer CM825)进行皮肤水分含量测试。皮肤水分的测试原理是基于水(81)和其它物质的介电常数(<7)变化相当大，按照含水量的不同，适当形状的测量用电容器会随着皮肤的电容量的变化而变化，而皮肤的电容量又是在测量的范围内，这样就可以测量出皮肤的水分含量。

受试人数：33人，男9名，女24名，年龄20-46岁(34.6±8.2)岁。

试用部位：面部。

使用方法：洁面后，取出胶原面膜纸，敷于面部，喷涂20-25mL纯净水使面膜纸完全浸润，静享15～20分钟后取下即可。每周使用3次。

观察时间点：使用产品前(D0)、使用产品后2天(D2)、使用产品后4天(D4)、使用产品后7天(D7)、使用产品后14天(D14)、使用产品后21天(D21)、使用产品后28天(D28)。

测试条件：受试者处于20℃、40％相对湿度环境下，进行皮肤水分含量(％)测试。检测结果如下表2所示：

表2

从水分测量数据来看，实施例1条件下制备得到的胶原面膜纸，对试用者皮肤水分含量的提升具有显著的作用，说明产品具有良好的补水保湿的功效。

2.3皮肤状态测试(实施例1条件下制备得到的胶原面膜纸)

通过消费者问卷调查方式，跟踪受试者在日常情况下使用产品28天后产品在提升皮肤水润度、皮肤平滑度、皮肤紧致度、改善皮肤泛红等方面的功效。

受试人数：33人，男9名，女24名，年龄20-46岁(34.6±8.2)岁。

试用部位：面部。

观察时间点：使用产品后7天(D7)、使用产品后14天(D14)、使用产品后28天(D28)。结果如下表3、4、5所示：

表3受试者自评结果统计表(使用产品后7天)

注：1、评分标准：“非常满意”为5分；“满意”为4分；“一般”为3分；“不满意”为2分；“非常不满意”为1分。2、评分≥4分的受试者占比即为受试者满意度(有效率)。

使用产品7天后，94％的受试者感觉产品可以提升皮肤水润度；91％的受试者感觉产品可以提升皮肤平滑度；91％的受试者感觉产品保湿效果良好；88％的受试者感觉产品可以提升皮肤紧致度；91％的受试者感觉产品可以改善皮肤泛红；94％的受试者感觉产品温和无刺激；100％的受试者感觉产品使用期间无不良反应。

表4受试者自评结果统计表(使用产品后14天)

使用产品14天后，94％的受试者感觉产品可以提升皮肤水润度；94％的受试者感觉产品可以提升皮肤平滑度；91％的受试者感觉产品保湿效果良好；91％的受试者感觉产品可以提升皮肤紧致度；94％的受试者感觉产品可以改善皮肤泛红；97％的受试者感觉产品温和无刺激；100％的受试者感觉产品使用期间无不良反应。

表5受试者自评结果统计表(使用产品后28天)

使用产品28天后，94％的受试者感觉产品可以提升皮肤水润度；94％的受试者感觉产品可以提升皮肤平滑度；94％的受试者感觉产品保湿效果良好；94％的受试者感觉产品可以提升皮肤紧致度；97％的受试者感觉产品可以改善皮肤泛红；100％的受试者感觉产品温和无刺激；100％的受试者感觉产品使用期间无不良反应。

从上述数据可以看出，实施例1条件下制备得到的胶原面膜纸具有良好的保湿功效，对提升皮肤的水润度、平滑度、紧致度，改善皮肤泛红均有很好的效果，且产品温和无刺激，使用过程中没有发生不良反应。

Claims

1.一种胶原面膜纸的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将动物组织表面剔除毛发或剥去筋膜，去掉脂肪层后切成组织碎片、冷冻；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，动物组织为牛跟腱、牛皮、猪皮中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，氢氧化钠溶液的质量浓度为0.5％～2％；组织碎片与氢氧化钠溶液的质量比为1:4～1:8；

浸泡时间为3～7d；用纯化水清洗至料液pH至中性。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，盐酸溶液的质量浓度为2％～5％；

经过步骤(2)处理所得物料与盐酸溶液的质量比为1:2～1:4；料液pH为0.7-1.0；

浸泡时间为12～24h；用纯化水清洗至料液pH至4.5～4.8。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，以干品计，胶原纤维丝的酰胺氮含量为0.2～0.4mmol/g。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，胶原混悬液的质量浓度为1.5～2.5％。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，活性物质为透明质酸钠、银耳提取物、海藻糖、普鲁兰多糖中的一种或多种；活性物质的添加浓度为0.03～0.2％。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，乳化剂为PPG-26-丁醇聚醚-26、PPG-15硬脂醇醚、PEG-40氢化蓖麻油、PEG-40失水山梨醇全油酸酯、甘油三(乙基己酸)酯中的一种或多种；乳化剂添加浓度为0.5～1％。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，混合料液的pH为4～5；

胶原冻干海绵的厚度为1.5～3cm。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，胶原面膜纸的厚度为0.6～1mm。