CN115326937A - 一种基因毒杂质捕捉用固相探针及其使用方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及基因毒杂质检测技术领域，尤其涉及一种基因毒杂质捕捉用固相探针及其使用方法与应用。所述固相探针由衍生试剂与固相载体通过化学键连接而成，其中，所述衍生试剂为含有能够与基因毒杂质反应的基团的物质。本发明提出的这种固相探针在捕捉到基因毒杂质后仍然为固体状态，进而可以方便地从待测液中分离出来后再进行检测，正是由于这种特点，有效地避免了待测液中的其他物质（占了绝大多数）造成堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物出峰等问题。
Description
技术领域
本发明涉及基因毒杂质检测技术领域，尤其涉及一种基因毒杂质捕捉用固相探针及其使用方法与应用。
背景技术
本发明背景技术中公开的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
基因毒性杂质是亲电性化合物或者是可以代谢为亲电性化合物的试剂，人体的遗传物质是DNA，DNA主要含有四个碱基，分别是腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶和胸腺嘧啶。嘧啶和嘌呤上面的氮氧都富有电子，与亲电性基因毒性杂质很容易发生取代等反应，导致这些基因毒性杂质被修饰的碱基引发基因突变。也就是说基因毒性杂质是一类可与DNA反应后造成DNA损伤，并在很低水平下即可诱发基因突变并可能致癌的物质，而这类物质在食品和药品中均有存在，如“M7(R1)Assessment and Control of DNA Reactive(Mutagenic)Impurities in Pharmaceuticals To Limit Potential Carcinogenic Risk”中记载的药品中存在的各类基因毒性杂。再如霉变的谷物、豆类中广泛存在的黄曲霉毒素等。
目前，通过衍生试剂与基因毒杂质反应生成衍生物，利用色谱技术分离衍生物与主成分，排除主成分对检测的干扰。然而，本发明人发现：对于这类检测方法，由于基因毒杂质在药品和食品中的含量低，样品中的主要成分可能析出、堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物检测等问题。
发明内容
针对上述的问题，本发明的目的是提供一种基因毒杂质捕捉用固相探针及其使用方法与应用，这种固相探针抗干扰能力强，有效克服了上述提及的现有检测方法中样品中主要成分析出、堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物检测等问题。为实现上述目的，本发明的技术方案如下。
在本发明的第一方面，公开一种基因毒杂质捕捉用固相探针，该固相探针由衍生试剂与固相载体通过化学键连接而成，其中，所述衍生试剂为含有能够与基因毒杂质反应的基团的物质。
进一步地，所述基因毒杂质包括能和DNA反应后造成DNA损伤的物质。
进一步地，所述衍生试剂与固相载体之间通过酯键、酰胺键等化学键连接。以便于在衍生试剂捕捉完基因毒杂质后，将该化学键切割使固相载体分离。
进一步地，所述固相载体包括Wang树脂、Merrifiled树脂、MBHA树脂、磁珠等中的任意一种。这些固相载体能够与衍生试剂之间发生反应而使两者连接在一起。
进一步地，所述能够与基因毒杂质反应的基团包括胺基等基团中的至少一种，如氨基酸、二肽、多肽等，这些物质能够与基因毒杂质之间发生烷基化、酰基化等反应，从而使基因毒杂质被探针捕捉。
在本发明的第二方面，公开所述基因毒杂质捕捉用固相探针的使用方法，包括如下步骤：
(1)将所述固相探针与含有基因毒杂质的待测液混合，待基因毒杂质与衍生试剂反应并结合在衍生试剂上后分离出固相探针，然后对该固相探针进行洗涤，得到目标固相探针。
(2)使目标固相探针上的固相载体与衍生试剂之间的化学键断裂，从而将固相载体从目标固相探针上分离下来，得到的衍生试剂-基因毒杂质复合体即为待测样品。
进一步地，步骤(1)中，所述含有基因毒杂质的待测液的制备方法包括：将待测物品溶解在溶剂中。
进一步地，步骤(1)中，所述分离出固相探针的方法包括过滤、离心等中的任意一种。由于本发明的这种探针为固体状态，在捕捉到基因毒杂质后仍然为固体状态，因此，可以通过过滤、离心等方法方便地从待测液中分离出来。
进一步地，步骤(1)中，所述洗涤用的溶剂包括水、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲醇、乙腈等中的任意一种。洗涤的主要目的是去除残留在固相载体上的待测液，避免这些待测液在后续检测中造成干扰。
进一步地，步骤(2)中，采用氢氟酸、三氟乙酸等酸液中的至少一种与所述目标固相探针反应，以将固相载体从目标固相探针上分离下来。
进一步地，步骤(2)中，将固相载体从目标固相探针上分离下来后，采用过滤、离心等方式中的任意一种将固相载体去除，得到含有衍生试剂-基因毒杂质复合体的液体，即为待测样品。本发明的固体探针是由于固相载体而保持固体状态，当将固相载体从目标固相探针上分离下来后，剩余的部分则可以与其他的反应液(如所述酸液)混溶在一起从而为液体状态。
进一步地，所述使用方法中，还包括对所述待测样品进行质谱分析的步骤，从而得出待测样品所捕捉到的基因毒杂质的浓度，进而得到待测物品中基因毒杂质的浓度。
在本发明的第三方面，公开所述基因毒杂质捕捉用固相探针在食品、药品检测等中的应用，从而可以判断待测物品中基因毒杂质的浓度，确保食品、药品的安全。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)本发明为了实现固相探针在捕捉到基因毒杂质后再进行检测的目的，采用了具有能够和衍生试剂结合后，又能够通过简单的化学分离的方法从两者的结合处又分离的固相载体和衍生试剂，同时这种衍生试剂又能够捕捉到待测液中微量的基因毒杂质，从而，由于固相载体不仅能够在溶液中保持固态状态，便于在探针捕捉基因毒杂质后再分离下来，得到携带着基因毒杂质的衍生试剂(记为待测样品)，便于进行检测；否则，固相载体会导致待测样品无法在质谱仪中进行质谱分析。
(2)本发明提出的这种新的固相探针放弃了传统的用色谱方法分离样品的主要成分和待检成分的技术思路，为此，本发明提出了一种固相探针，其在捕捉到基因毒杂质后仍然为固体状态，进而可以方便地将待检物从样品溶液中分离出来后再进行检测，正是由于这种特点，有效地避免了待测液中的主要成分(占了绝大多数)造成堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物检测等问题。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明实施例中固相探针的制备和使用流程图(以树脂作为固相载体为例)。
图2为本发明第一实施例中样品溶液中残留头孢呋辛酯的提取离子图。
图3为本发明第一实施例中对照溶液和回收率试验用溶液中衍生物的提取离子图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。本发明所使用的试剂或原料均可通过常规途径购买获得，如无特殊说明，本发明所使用的试剂或原料均按照本领域常规方式使用或者按照产品说明书使用。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。本发明中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
正如前文所述，传统的检测方法中，由于基因毒杂质在药品和食品中的含量低，高浓度的供试品可能析出、堵塞色谱柱、污染离子源、基质效应以及干扰待测物出峰等问题。为此，本发明提出一种固相探针及其制备方法，现根据说明书附图和具体实施方式对本发明进一步说明。
第一实施例
1、参考图1，一种基因毒杂质捕捉用固相探针的合成，包括如下步骤：
(1)将准确称取的Fmoc-对氨基苯甲酸(0.8mmol，4eq)和羟基苯并三氮唑(0.6mmol，3eq)置于10ml烧杯中，然后加入2ml二甲基甲酰胺溶解，溶解完成后缓慢加入二环己基碳二亚胺(0.8mmol，4eq)，在0℃下反应20min，得到活化酯溶液。
(2)将步骤(1)合成的衍生试剂倒入盛有王树脂(0.2mmol，1.13mmol/g)的10ml烧杯中，再加二甲氨基吡啶(0.08mmol，0.4eq)，然后在室温下反应3小时，使王树脂和Fmoc-对氨基苯甲酸连接。反应完成后进行过滤，将得到的固体产物A用二甲基甲酰胺循环洗涤3次，每次1min。
(3)由于上一步反应树脂上部分羟基基团没有完全反应，用乙酸酐封闭树脂上没有反应的羟基基团，因此，在洗涤完成的固体产物A中加入乙酸酐：二甲基甲酰胺(1:1)试剂5ml反应1h，完成后进行过滤，将得到的固体产物B用二甲基甲酰胺洗涤6次，每次1min。
(4)在洗涤完成的固体产物B中加入5mL哌啶和二甲基甲酰胺的混合液(哌啶的质量分数为20％)震荡反应30min以脱除Fmoc基团，得到含有王树脂-对氨基苯甲酸(记为固相探针1)。
王树脂固相探针的合成及与乙酰溴衍生示意图。
第二实施例
1、样品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取头孢呋辛酯1g，加乙腈至10ml，得100mg/ml头孢呋辛酯乙腈溶液。
(ii)在所述头孢呋辛酯乙腈溶液中加入0.1g本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物1。
(iii)在固体产物1中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物1上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相4，备用。
2、1μg/ml头孢呋辛酯乙腈溶液额制备：精密称定头孢呋辛酯10mg至10ml量瓶，加乙腈溶解并稀释至刻度；精密量取上述溶液0.1ml至100ml量瓶，加乙腈稀释至刻度，即得1μg/ml头孢呋辛酯乙腈溶液。
对本实施例获得的液相4进行质谱分析，具体地，采用的色谱条件为：色谱柱为Atlantis Hilic(2.1×100mm，3μm)；柱温为40℃；流动相A为10mM乙酸铵水溶液；流动相B为体积浓度0.1％的甲酸甲醇水溶液(甲酸和甲醇的体积比为1:1)；流速为0.3mL/小时；进样量为1μL；梯度洗脱程序；质谱条件：ESI正离子检测模式，全扫描，检测结果见图3。
为验证该方法是否可以去除待检溶液中样品的主要成分，本实施例检测了样品溶液中残留的头孢呋辛酯，从图3中可以看出，经本实施例的方法处理的样品溶液中头孢呋辛酯的浓度低于1μg/ml，这说明能够有效去除待检溶液中样品的主要成分。
第三实施例
1、样品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取头孢呋辛酯1g，加乙腈至10ml，得100mg/ml头孢呋辛酯乙腈溶液。
(ii)在所述头孢呋辛酯乙腈溶液中加入0.1g本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物1。
(iii)在固体产物1中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物1上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相1，备用。
2、回收试验用溶液制备，包括如下步骤：
(i)取头孢呋辛酯1g，加入1μg/ml乙酰溴乙腈溶液至10ml，然后加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物3。
(ii)在固体产物3中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物3上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相2，备用。
3、对照品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取10ml浓度为1μg/ml乙酰溴乙腈溶液，加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物2。
(ii)在固体产物2中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物2上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相3，备用。
对本实施例获得的液相1、液相2、液相3进行质谱分析，具体地，采用的色谱条件为：色谱柱为Atlantis Hilic(2.1x100mm，3μm)；柱温为40℃；流动相A为10mM乙酸铵水溶液；流动相B为体积浓度0.1％的甲酸甲醇水溶液(甲酸和甲醇的体积比为1:1)；流速为0.3mL/小时；进样量为1μL；梯度洗脱程序；质谱条件：ESI正离子检测模式，全扫描，检测结果见图2和表1。
表1
为了进一步证明样品中的主要成分对杂质的检测没有干扰，本实施例制备了回收试验用溶液，即在样品溶液的基础上人为加入乙酰溴这一基因毒杂质，并对得到的液相2进行了质谱分析，从表1的结果可以看出，回收率为97.3％，经处理后的样品中主要成分的残留对杂质的检测没有干扰。
第四实施例
(1)Merrifiled树脂固相探针合成：取Merrifiled树脂(0.2mmol，1.13mmol/g)、0.1g CsCO3、1mmol Fmoc-对氨基苯甲酸加至10ml的烧杯中，然后加入5ml二甲基甲酰胺溶液，室温震荡反应10h，分离出固体产物并用5ml水洗涤10次，用5ml二甲基甲酰胺溶液洗涤10次，用二氯甲烷洗涤10次，完成后用氮气吹干，得固体产物A。在洗涤完成的固体产物A中加入5mL哌啶和二甲基甲酰胺的混合液(哌啶的质量分数为20％)震荡反应30min以脱除Fmoc基团，得到含有Merrifiled树脂-对氨基苯甲酸(记为固相探针1)。
(2)MBHA树脂固相探针合成步骤同第一实施例。
(3)磁珠固相探针合成步骤同Merrifiled树脂固相探针合成。
样品溶液剂回收率试验用溶液、对照溶液参照第二实施例，本实施例合成的不同树脂的固相探针的回收率如表2所示。
表2
第五实施例
一种基因毒杂质捕捉用固相探针的合成，包括如下步骤：
(1)将准确称取的Fmoc-衍生试剂(苯丙氨酸、L-丙氨酸-L苯丙氨酸二肽、AFGAFF)(0.8mmol，4eq)和羟基苯并三氮唑(0.6mmol，3eq)置于10ml烧杯中，然后加入2ml二甲基甲酰胺溶解，溶解完成后缓慢加入二环己基碳二亚胺(0.8mmol，4eq)，在0℃下反应20min，得到活化酯溶液，即为能够与基因毒杂质反应的衍生试剂。
(2)将步骤(1)合成的衍生试剂倒入盛有王树脂(0.2mmol，1.13mmol/g)的10ml烧杯中，再加二甲氨基吡啶(0.08mmol，0.4eq)，然后在室温下反应3小时。反应完成后进行过滤，将得到的固体产物A用二甲基甲酰胺循环洗涤3次，每次1min。
(3)在洗涤完成的固体产物A中加入乙酸酐：二甲基甲酰胺(1:1)试剂5ml反应1h，完成后进行过滤，将得到的固体产物B用二甲基甲酰胺循环洗涤6次，每次1min。
(4)在洗涤完成的固体产物B中加入5mL哌啶和二甲基甲酰胺的混合液(哌啶的质量分数为20％)震荡反应30min，得到固相探针。
样品溶液剂回收率试验用溶液、对照溶液参照第二实施例，各衍生试剂的检测结果见表3。
表3
第六实施例：反应性基因毒性杂质检测
1、样品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取样品(头孢氨苄、阿莫兰特、罗替戈汀)1g，加乙腈至10ml，得100mg/ml样品溶液。
(ii)在所述样品乙腈溶液中加入0.1g本实施例1制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物1。
(iii)在固体产物1中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物1上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相1，备用。
2、回收试验用溶液制备，包括如下步骤：
(i)取样品1g，加入1μg/ml基因毒杂质(特戊酰氯、环氧乙烷、硫酸二甲酯)溶液至10ml，然后加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物3。
(ii)在固体产物3中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物3上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相2，备用。
3、对照品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取10ml浓度为1μg/ml基因毒杂质(特戊酰氯、环氧乙烷、硫酸二甲酯)乙腈溶液，加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物2。
(ii)在固体产物2中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物2上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相3，备用。反应性基因毒性杂质检测结果如表4。
表4
| 样品主成分 | 基因毒杂质 | 回收率％ | 主成分残留 |
| 头孢氨苄 | 特戊酰氯(酰卤类) | 98.5 | 小于1μg/ml |
| 阿莫兰特 | 环氧乙烷(环氧化合物类) | 97.2 | 小于1μg/ml |
| 罗替戈汀 | 硫酸二甲酯(磺酸酯类) | 99.1 | 小于1μg/ml |
第七实施例：酶促反应性基因毒杂质检测
1、样品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取样品(缬沙坦、茶叶)1g加pH7.4 10mmol/l tris-HCl缓冲液至10ml，得100mg/ml样品溶液，12000rpm离心10min，取上清0.22μm滤膜过滤，取续滤液500μl，加入活化后的500μl肝微粒体溶液(微粒体100ml(0.5mg/ml)，灭菌蒸馏水380ml，pH7.4 20mmol/ltris-HCl缓冲液500ml，辅酶II(NADP)4mmol，6-磷酸葡萄糖(G-6-P)5mmol)。
(ii)在所述样品溶液中加入0.1g本实施例制备的固相探针1然后在37℃震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml水重复洗涤10次，得到固体产物1。
(iii)在固体产物1中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物1上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相1，备用。
2、回收试验用溶液制备，包括如下步骤：
(i)取样品(缬沙坦、茶叶)1g，加入1μg/ml基因毒杂质(特戊酰氯、环氧乙烷、硫酸二甲酯)水溶液至10ml，加pH7.4 10mmol/l tris-HCl缓冲液至10ml，得100mg/ml样品溶液，12000rpm离心10min，取上清0.22μm滤膜过滤，取续滤液500μl，加入活化后的500μl肝微粒体溶液(微粒体100ml(0.5mg/ml)，灭菌蒸馏水380ml，pH7.4 20mmol/l tris-HCl缓冲液500ml，辅酶II(NADP)4mmol，6-磷酸葡萄糖(G-6-P)5mmol)。然后加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml乙腈重复洗涤10次，得到固体产物3。
(ii)在固体产物3中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物3上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相2，备用。
3、对照品溶液制备，包括如下步骤：
(i)取500μll浓度为1μg/ml基因毒杂质(特戊酰氯、环氧乙烷、硫酸二甲酯)水溶液，加入活化后的500μl肝微粒体溶液(微粒体100ml(0.5mg/ml)，灭菌蒸馏水380ml，pH7.420mmol/l tris-HCl缓冲液500ml，辅酶II(NADP)4mmol，6-磷酸葡萄糖(G-6-P)5mmol)。加入0.1g第一实施例制备的本实施例制备的固相探针1然后在室温震荡反应24h，完成后过滤出固体产物，并用5ml水重复洗涤10次，得到固体产物2。
(ii)在固体产物2中加入1ml质量分数为95％的三氟乙酸水溶液，震荡反应10min使王树脂从固体产物2上分离下来，过滤出王树脂，收集到液相3，备用。酶促反应性基因毒杂质检测结果如表5。
表5
| 样品主成分 | 基因毒杂质 | 回收率％ | 主成分残留 |
| 缬沙坦 | NDMA(亚硝胺类) | 95.3 | 小于1μg/ml |
| 茶叶 | 黄曲霉毒素 | 97.4 | / |
最后，需要说明的是，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。
Claims (10)
1.一种基因毒杂质捕捉用固相探针，其特征在于，该固相探针由衍生试剂与固相载体通过化学键连接而成，其中，所述衍生试剂为含有能够与基因毒杂质反应的基团的物质。
2.根据权利要求1所述的基因毒杂质捕捉用固相探针，其特征在于，所述基因毒杂质包括能和DNA反应后造成DNA损伤的物质。
3.根据权利要求1所述的基因毒杂质捕捉用固相探针，其特征在于，所述衍生试剂与固相载体之间通过酯键、酰胺键连接。
4.根据权利要求1所述的基因毒杂质捕捉用固相探针，其特征在于，所述固相载体包括Wang树脂、Merrifiled树脂、MBHA树脂、磁珠中的任意一种。
5.根据权利要求1-4任一项所述的基因毒杂质捕捉用固相探针，其特征在于，所述能够与基因毒杂质反应的基团包括胺基，优选为氨基酸、二肽、多肽中的任意一种。
6.一种权利要求1-5任一项所述的基因毒杂质捕捉用固相探针的使用方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将所述固相探针与含有基因毒杂质的待测液混合，待基因毒杂质与衍生试剂反应并结合在衍生试剂上后分离出固相探针，然后对该固相探针进行洗涤，得到目标固相探针；
（2）使目标固相探针上的固相载体与衍生试剂之间的化学键断裂，从而将固相载体从目标固相探针上分离下来，得到的衍生试剂-基因毒杂质复合体即为待测样品。
7.根据权利要求6所述的基因毒杂质捕捉用固相探针的使用方法，其特征在于，步骤（1）中，所述含有基因毒杂质的待测液的制备方法包括：将待测物品溶解在溶剂中；
或者，步骤（1）中，所述分离出固相探针的方法包括过滤、离心中的任意一种；
或者，步骤（1）中，所述洗涤用的溶剂包括水、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、甲醇、乙腈等中的任意一种。
8.根据权利要求6所述的基因毒杂质捕捉用固相探针的使用方法，其特征在于，步骤（2）中，采用氢氟酸、三氟乙酸中的至少一种与所述目标固相探针反应，将固相载体从目标固相探针上分离下来；
或者，步骤（2）中，将固相载体从目标固相探针上分离下来后，采用过滤、离心方式中的任意一种将固相载体去除，得到含有衍生试剂-基因毒杂质复合体的液体。
9.根据权利要求6-8任一项所述的基因毒杂质捕捉用固相探针的使用方法，其特征在于，还包括对所述待测样品进行质谱分析的步骤。
10.权利要求1-5任一项所述的基因毒杂质捕捉用固相探针或者权利要求6-8任一项所述的使用方法在食品或药品检测中的应用。
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