CN114748679A - 一种胶原蛋白海绵的制备方法 - Google Patents
一种胶原蛋白海绵的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114748679A CN114748679A CN202210309558.2A CN202210309558A CN114748679A CN 114748679 A CN114748679 A CN 114748679A CN 202210309558 A CN202210309558 A CN 202210309558A CN 114748679 A CN114748679 A CN 114748679A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- collagen
- solution
- achilles tendon
- reaction kettle
- bovine achilles
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000515 collagen sponge Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 210000001361 achilles tendon Anatomy 0.000 claims abstract description 78
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 74
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 60
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 36
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 claims abstract description 31
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims abstract description 30
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims abstract description 30
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims abstract description 30
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims abstract description 30
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 28
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 28
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 18
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 81
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 81
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 81
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 70
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 37
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 24
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 22
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 13
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 13
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 8
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 13
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 abstract description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 96
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- XMNIXWIUMCBBBL-UHFFFAOYSA-N 2-(2-phenylpropan-2-ylperoxy)propan-2-ylbenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C)(C)OOC(C)(C)C1=CC=CC=C1 XMNIXWIUMCBBBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004156 Azodicarbonamide Substances 0.000 description 3
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 3
- XOZUGNYVDXMRKW-AATRIKPKSA-N azodicarbonamide Chemical compound NC(=O)\N=N\C(N)=O XOZUGNYVDXMRKW-AATRIKPKSA-N 0.000 description 3
- 235000019399 azodicarbonamide Nutrition 0.000 description 3
- DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid;ethene Chemical compound C=C.OC(=O)CC=C DQXBYHZEEUGOBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000005038 ethylene vinyl acetate Substances 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 229920001200 poly(ethylene-vinyl acetate) Polymers 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 1
- 239000004840 adhesive resin Substances 0.000 description 1
- 229920006223 adhesive resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 description 1
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/0005—Ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
- A61L24/0036—Porous materials, e.g. foams or sponges
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
- A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
- A61L24/10—Polypeptides; Proteins
- A61L24/108—Specific proteins or polypeptides not covered by groups A61L24/102 - A61L24/106
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
- A61L2400/04—Materials for stopping bleeding
Abstract
本发明提供了一种胶原蛋白海绵的制备方法，以牛跟腱92份、蛋白酶24份、冰醋酸30份、六氟异丙醇16份、氯化钠液19份、毕赤酵母44份和戊二醛7份为原料，经过预处理、溶解处理、过滤、抽提处理、沉淀、发酵交联和冷冻处理等一系列工艺步骤，通过对牛跟腱溶液进行过滤，能够对牛跟腱内部杂质进行处理，而通过多种溶解原料对牛跟腱进行溶解，能够提高牛跟腱整体溶解效果，避免出现溶解不完全的情况，而通过毕赤酵母为菌体对胶原蛋白溶液进行发酵提纯，使得对胶原蛋白溶液内部成分进行重组，进而能够有效提高胶原蛋白海绵的稳定性和亲水性。
Description
技术领域
本发明涉及海绵制作技术领域，具体的，本发明涉及一种胶原蛋白海绵的制备方法的技术领域。
技术背景
胶原蛋白海绵采用牛跟腱为原料进行生物提纯后制得的胶原蛋白，为白色海绵状固体，胶原蛋白海绵适用于手术残腔充填，创面止血，能够促进创面愈合；
现有技术中有很多关于胶原蛋白海绵的制备方法，常用的方法是属于提纯干燥，该方法通过对牛跟腱内部胶原蛋白提纯，并利用模具冷冻干燥得到胶原蛋白海绵；
现有技术中通常采用单种溶解原料对牛跟腱进行溶解，易出现溶解不完全的情况，且牛跟腱溶解后无法利用毕赤酵母为菌体对胶原蛋白溶液进行发酵提纯，对胶原蛋白溶液内部成分进行重组，进而导致现有胶原蛋白海绵制备方法中制备的胶原蛋白海绵稳定性和亲水性较差。
发明内容
针对目前国内外关于胶原蛋白海绵的技术现状，本发明旨在于提供了一种胶原蛋白海绵的制备方法，具体采用步骤如下：
(1)预处理：将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为2-5min；
(2)溶解处理：将步骤(1)中处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为5-10min，牛跟腱溶解成浑浊液体；
(3)过滤：将步骤(2)中溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为100-200目数，且过滤次数为2-4次；
(4)抽提处理：将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-6～0℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为10-20min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌7-10min，混合反应得到胶原蛋白溶液；
(5)沉淀：将步骤(4)中处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为60-80min；
(6)发酵交联：将沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为20-25h，温度为-20～-10℃；
(7)冷冻处理：将步骤(6)中处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为10-20min，得到胶原蛋白海绵；
优选的，本发明中将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min。
优选的，本发明中处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体。
优选的，本发明中溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次。
优选的，本发明中过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液。
优选的，本发明中处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min。
优选的，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃。
优选的，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵。
通过实施本发明具体的发明内容，可以达到以下效果:
(1)本申请提供了一种胶原蛋白海绵的制备方法，以牛跟腱92份、蛋白酶24份、冰醋酸30份、六氟异丙醇16份、氯化钠液19份、毕赤酵母44份和戊二醛7份为原料，经过预处理、溶解处理、过滤、抽提处理、沉淀、发酵交联和冷冻处理等一系列工艺步骤，通过将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵，通过对牛跟腱溶液进行过滤，能够对牛跟腱内部杂质进行处理，而通过多种溶解原料对牛跟腱进行溶解，能够提高牛跟腱整体溶解效果，避免出现溶解不完全的情况，而通过毕赤酵母为菌体对胶原蛋白溶液进行发酵提纯，使得对胶原蛋白溶液内部成分进行重组，进而能够有效提高胶原蛋白海绵的稳定性和亲水性。
具体实施方式
下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。
本发明中使用的原料和试剂:牛跟腱、蛋白酶、冰醋酸、六氟异丙醇、氯化钠液、毕赤酵母和戊二醛均为市场常见原料。
本发明中使用的仪器：绞肉机(购自南京威利朗食品机械有限公司)、筛分设备(购自上海如昂超声波设备有限公司)、搅拌设备(购自新强搅拌机械有限公司)、反应釜(购自河南三峰化工设备有限公司)、冷冻箱(购自北京松雨冷藏科技有限公司)。
另外，在下述的说明中，如无特别说明，％皆指m/m质量百分比，本发明中选用的所有试剂、原料和仪器都为本领域熟知选用的，均可从市场购买获得，但不限制本发明的实施，其他本领域熟知的一些试剂和设备都可适用于本发明以下实施方式的实施。
实施例一：
本实施例提供一种胶原蛋白海绵的制备方法，按配方百分比计，该胶原蛋白海绵的制备方法包括牛跟腱80-100份、蛋白酶20-30份、冰醋酸25-35份、六氟异丙醇10-20份、氯化钠15-25份、毕赤酵母30-50份和戊二醛5-10份；
优选的，按配方百分比计，胶原蛋白海绵的制备方法包括牛跟腱92份、蛋白酶24份、冰醋酸30份、六氟异丙醇16份、氯化钠液19份、毕赤酵母44份和戊二醛7份。
实施例二：
本实施例提供一种胶原蛋白海绵的制备方法，具体采用步骤如下：
(1)预处理：将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为2-5min；
(2)溶解处理：将步骤(1)中处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为5-10min，牛跟腱溶解成浑浊液体；
(3)过滤：将步骤(2)中溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为100-200目数，且过滤次数为2-4次；
(4)抽提处理：将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-6～0℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为10-20min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌7-10min，混合反应得到胶原蛋白溶液；
(5)沉淀：将步骤(4)中处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为60-80min；
(6)发酵交联：将沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为20-25h，温度为-20～-10℃；
(7)冷冻处理：将步骤(6)中处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为10-20min，得到胶原蛋白海绵；
优选的，本发明中将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min。
优选的，本发明中处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体。
优选的，本发明中溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次。
优选的，本发明中过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液。
优选的，本发明中处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min。
优选的，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃。
优选的，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵。
实施例三：
首先乙烯乙酸乙烯酯、偶氮二甲酰胺和过氧化二异丙苯依次通过流化床，流化床内部吹入热风，流化床吹入的热风是由鼓风机吸风，在热风及料流的推动下悬浮在气流中边干燥边推进，干燥时间为10min，干燥后乙烯乙酸乙烯酯、偶氮二甲酰胺和过氧化二异丙苯落入振动筛，振动筛筛选1次，合格的粒料过筛后输入搅拌设备内部，在搅拌设备内部依次添加乙烯乙酸乙烯酯、偶氮二甲酰胺和过氧化二异丙苯，搅拌设备进行搅拌，搅拌时间为30min，处理好的混合原料添加至破碎设备内部，对混合原料进行破碎，破碎时间为20min，破碎完成的原料添加至反应釜内部，并将聚氨酯、发泡剂和粘合剂树脂添加至反应釜内部，通过反应釜进行加热搅拌，反应釜温度为100℃，搅拌时间为5min，处理好的混合原料添加至模具内部，并在模具内部添加硫化剂，将模具放置于烘箱内部加热反应，烘箱温度为180℃，反应时间为10min，反应完成后模具通过真空泵抽真空，使模具和胶原蛋白海绵的余热与水分全部抽空，同时抽掉部分发泡剂，避免海绵发胀，使模内形成负压，进而对模具内部胶原蛋白海绵进行脱模。
实施例四：
首先将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为2min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为5min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为100目数，且过滤次数为2次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-6℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为10min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌7min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为60min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为20h，温度为-20℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为10min，得到胶原蛋白海绵。
实施例五：
首先将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为7min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为130目数，且过滤次数为3次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-5℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为10min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌8min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为70min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为22h，温度为-15℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为15min，得到胶原蛋白海绵。
实施例六：
首先将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵。
实施例七：
首先将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为5min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为10min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为200目数，且过滤次数为4次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为0℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为20min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌10min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为80min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为25h，温度为-10℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为20min，得到胶原蛋白海绵。
实施例八：
根据上述实施例三至实施例七配比制备得出的胶原蛋白海绵，以稳定性和亲水性为评价标准，建立评分表，参见表1，对本发明各实施例制备的胶原蛋白海绵进行评分。
表1：胶原蛋白海绵评分结果
表1的结果表明，本发明制备的胶原蛋白海绵整体评价较高，最高评分高达95分，通过对牛跟腱溶液进行过滤，能够对牛跟腱内部杂质进行处理，而通过多种溶解原料对牛跟腱进行溶解，能够提高牛跟腱整体溶解效果，避免出现溶解不完全的情况，而通过毕赤酵母为菌体对胶原蛋白溶液进行发酵提纯，使得对胶原蛋白溶液内部成分进行重组，进而能够有效提高胶原蛋白海绵的稳定性和亲水性；
综上所述，本发明旨在于提供一种胶原蛋白海绵的制备方法，以牛跟腱92份、蛋白酶24份、冰醋酸30份、六氟异丙醇16份、氯化钠液19份、毕赤酵母44份和戊二醛7份为原料，经过预处理、溶解处理、过滤、抽提处理、沉淀、发酵交联和冷冻处理等一系列工艺步骤，通过将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min，处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体，溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次，将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液，处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min，沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃，处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵，通过对牛跟腱溶液进行过滤，能够对牛跟腱内部杂质进行处理，而通过多种溶解原料对牛跟腱进行溶解，能够提高牛跟腱整体溶解效果，避免出现溶解不完全的情况，而通过毕赤酵母为菌体对胶原蛋白溶液进行发酵提纯，使得对胶原蛋白溶液内部成分进行重组，进而能够有效提高胶原蛋白海绵的稳定性和亲水性。
如上所述，较好地实现本发明,上述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种改变和改进均应落入本发明确定的保护范围内。
Claims (8)
1.一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：具体采用步骤如下：
(1)预处理：将牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为2-5min；
(2)溶解处理：将步骤(1)中处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为5-10min，牛跟腱溶解成浑浊液体；
(3)过滤：将步骤(2)中溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为100-200目数，且过滤次数为2-4次；
(4)抽提处理：将过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-6～0℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为10-20min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌7-10min，混合反应得到胶原蛋白溶液；
(5)沉淀：将步骤(4)中处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为60-80min；
(6)发酵交联：将沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为20-25h，温度为-20～-10℃；
(7)冷冻处理：将步骤(6)中处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为10-20min，得到胶原蛋白海绵。
2.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述牛跟腱外侧脂肪剔除，并将牛跟腱通过绞肉机进行处理，处理时间为3min。
3.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述处理好的牛跟腱浸泡至氯化钠液内部，浸泡时间为8min，牛跟腱溶解成浑浊液体。
4.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述溶解的牛跟腱液体通过筛分设备进行筛分，筛分设备滤网目数为150目数，且过滤次数为3次。
5.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述过滤好的溶液放置于反应釜内部，并分别将蛋白酶和冰醋酸倾倒至反应釜的内部，反应釜内部温度为-4℃，将溶液和蛋白酶与冰醋酸搅拌反应，搅拌反应时间为14min，搅拌后将六氟异丙醇添加至反应釜内部，再次搅拌9min，混合反应得到胶原蛋白溶液。
6.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述处理好的胶原蛋白溶液沉淀，沉淀时间为75min。
7.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述沉淀后的胶原蛋白溶液内部添加毕赤酵母，毕赤酵母与胶原蛋白溶液发酵，发酵后胶原蛋白溶液与0.04％戊二醛常温交联，交联时间为24h，温度为-15℃。
8.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白海绵的制备方法，其特征在于：所述处理好的胶原蛋白添加至模具内部，并将模具放置于冷冻箱内部冷冻，冷冻时间为16min，得到胶原蛋白海绵。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210309558.2A CN114748679A (zh) | 2022-03-27 | 2022-03-27 | 一种胶原蛋白海绵的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210309558.2A CN114748679A (zh) | 2022-03-27 | 2022-03-27 | 一种胶原蛋白海绵的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114748679A true CN114748679A (zh) | 2022-07-15 |
Family
ID=82328069
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210309558.2A Pending CN114748679A (zh) | 2022-03-27 | 2022-03-27 | 一种胶原蛋白海绵的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114748679A (zh) |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11193210A (ja) * | 1997-12-26 | 1999-07-21 | Noevir Co Ltd | 皮膚外用剤 |
| CN102146135A (zh) * | 2010-12-23 | 2011-08-10 | 陕西九州生物医药科技园发展有限公司 | 一种重组类人胶原蛋白及其生产方法 |
| JP2012087091A (ja) * | 2010-10-19 | 2012-05-10 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| CN104721876A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-06-24 | 江苏博朗森思医疗器械有限公司 | 一种胶原蛋白海绵的制造方法 |
| CN108014370A (zh) * | 2017-12-12 | 2018-05-11 | 吕振木 | 一种促进脱套伤及撕脱伤皮肤成活的胶原蛋白材料 |
| CN109602943A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-04-12 | 杭州易文赛生物技术有限公司 | 一种牛腱来源的高纯度胶原蛋白海绵的制备方法 |
| JP2019085331A (ja) * | 2017-11-01 | 2019-06-06 | 日本コルマー株式会社 | コラーゲンのサッカロミセス属酵母発酵液を含有する皮膚外用剤 |
| CN111004319A (zh) * | 2019-03-19 | 2020-04-14 | 江苏悦智生物医药有限公司 | 重组人源胶原蛋白及其应用 |
| CN111187347A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-05-22 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 重组胶原蛋白、重组胶原海绵材料及其制备方法和应用 |
-
2022
- 2022-03-27 CN CN202210309558.2A patent/CN114748679A/zh active Pending
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH11193210A (ja) * | 1997-12-26 | 1999-07-21 | Noevir Co Ltd | 皮膚外用剤 |
| JP2012087091A (ja) * | 2010-10-19 | 2012-05-10 | Kyoei Kagaku Kogyo Kk | 化粧料 |
| CN102146135A (zh) * | 2010-12-23 | 2011-08-10 | 陕西九州生物医药科技园发展有限公司 | 一种重组类人胶原蛋白及其生产方法 |
| CN104721876A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-06-24 | 江苏博朗森思医疗器械有限公司 | 一种胶原蛋白海绵的制造方法 |
| JP2019085331A (ja) * | 2017-11-01 | 2019-06-06 | 日本コルマー株式会社 | コラーゲンのサッカロミセス属酵母発酵液を含有する皮膚外用剤 |
| CN108014370A (zh) * | 2017-12-12 | 2018-05-11 | 吕振木 | 一种促进脱套伤及撕脱伤皮肤成活的胶原蛋白材料 |
| CN109602943A (zh) * | 2018-12-20 | 2019-04-12 | 杭州易文赛生物技术有限公司 | 一种牛腱来源的高纯度胶原蛋白海绵的制备方法 |
| CN111004319A (zh) * | 2019-03-19 | 2020-04-14 | 江苏悦智生物医药有限公司 | 重组人源胶原蛋白及其应用 |
| CN111187347A (zh) * | 2020-01-17 | 2020-05-22 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 重组胶原蛋白、重组胶原海绵材料及其制备方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 何越等: "重组胶原蛋白海绵的制备及性状表征", 《中国组织工程研究》 * |
| 何越等: "重组胶原蛋白海绵的制备及性状表征", 《中国组织工程研究》, vol. 23, no. 06, 26 December 2018 (2018-12-26), pages 912 - 916 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103627761B (zh) | 一种制备富羟脯氨酸胶原蛋白肽的方法 | |
| CN110628857B (zh) | 一种牛皮中胶原蛋白的提取方法 | |
| CN108866137A (zh) | 鱼皮/鱼鳞胶原蛋白肽的制备方法 | |
| CN112062834A (zh) | 一种深海鱼鱼皮胶原蛋白肽及其提取制备方法 | |
| CN105779545A (zh) | 微波辅助酶法制备甲鱼蛋白源抗氧化肽的方法 | |
| CN105112478B (zh) | 一种鱿鱼皮活性多肽的制备方法 | |
| CN102086464A (zh) | 一种甲壳素的制备方法 | |
| CN109054053B (zh) | 一种高凝胶强度琼脂的加工工艺 | |
| CN110564802A (zh) | 一种耗牛跟腱骨胶原蛋白的提取方法 | |
| CN106722774B (zh) | 一种酶解酱油脚快速压滤工艺 | |
| CN114748679A (zh) | 一种胶原蛋白海绵的制备方法 | |
| CN104630319B (zh) | 生物酶法制备医用骨明胶的方法 | |
| CN108659143B (zh) | 一种褐藻胶的绿色提取纯化工艺 | |
| CN110724289A (zh) | 一种制备富含山楂果胶、明胶的可食性膜的方法 | |
| CN103504360B (zh) | 一种富含小分子胶原蛋白鱼皮即食食品的制作方法 | |
| CN115368454B (zh) | 一种明胶及其制备方法 | |
| CN108584147A (zh) | 一种环保型复合缓冲包装材料的制备方法 | |
| CN113201562A (zh) | 一种将海参酶解成多种氨基酸的工艺 | |
| CN108866132B (zh) | 一种超低温提取鱿鱼活性小肽的工艺 | |
| CN102887823A (zh) | 蛋壳真空中和制备乳酸钙的方法 | |
| CN112794896B (zh) | 一种胃膜素的制备方法 | |
| CN110613120A (zh) | 一种低温速溶琼脂的制作工艺 | |
| US1321480A (en) | Sadakichi satow | |
| CN109384841A (zh) | 一种完整肽链牛胶原蛋白的生产方法 | |
| CN108341893B (zh) | 一种从龙血竭药渣中提取多糖的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220715 |