CN1146543C - 凝血酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及具有式(I)的丝氨酸蛋白酶抑制剂，其中J为H、R1、R1-O-C(O)-、R1-C(O)-、R1-SO2-、R3OOC-(CHR2)P-、(R2a，R2b)N-CO-(CHR2)p-或Het-CO-(CHR2)P-；D是式-NH-CHR1-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)OR1]-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)N(R2a，R2b)]-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)Het]-C(O)-、D-1-Tiq、D-3-Tiq、D-Atc、Aic、D-1-Pig或D-3-Pig的氨基酸；E是-NR2-CH2-或片段(a)，其选择性地被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或苄氧基取代；R1选自(1-12C)烷基、(2-12C)链烯基、(2-12C)炔基、(3-12C)环烷基和(3-12C)环烷基(1-6C)亚烷基，这些基团可以被(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、氧代、OH、CF3或卤素选择性取代；和选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基、(8-16C)芳烯基和(14-20C)(双芳基)烷基，其中所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、CF3或卤素选择性取代；R2、R2a和R2b分别独立地选自H、(1-8C)烷基、(3-8C)链烯基、(3-8C)炔基、(3-8C)环烷基和(3-6C)环烷基(1-4C)亚烷基，它们可以分别被(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；和选自(6-14C)芳基和(7-15C)芳烷基，其中的芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；R3如R2定义或Het-(1-6C)烷基；R4是H或(1-3C)烷基；X和Y是CH或N，条件是它们不同时为N；Het是含有一个或多个选自O、N和S的杂原子的4-、5-或6-元杂环；m是1或2；p是1、2或3；q是1、2或3；t是2、3或4；及其前药；和它们的药学上可接受的加成盐和/或溶剂化物；并且涉及其在治疗中和在制备治疗或预防凝血酶介导和凝血酶相关疾病的药物中的应用。

Description

凝血酶抑制剂
本发明涉及含有醚键合精氨酸置换的丝氨酸蛋白酶抑制剂，含有它们的药物组合物，以及所述丝氨酸蛋白酶抑制剂在制备药物中的应用。
丝氨酸蛋白酶是在凝血级联中起重要作用的酶。除凝血酶和凝血因子Xa之外，此类蛋白酶的其它实例包括凝血因子VIIa、IXa、XIa、XIIa和蛋白质C。凝血酶在凝血级联中是最终的丝氨酸蛋白酶。凝血酶的主要功能是裂解血纤蛋白原生成血纤蛋白单体，它们交联形成不溶性凝胶。此外，凝血酶通过在级联早期激活凝血因子V和VIII来调节其自身的产生。它在细胞水平也具有重要作用，其中凝血酶在特定受体起作用引起血小板聚集、内皮细胞活化和成纤维细胞增殖。因而凝血酶右淤血栓形成中具有中心调节作用由于凝血酶的抑制剂具有广泛的治疗性用途，所以人们一直在尝试发现新的丝氨酸蛋白酶抑制剂。上述努力中存在的困难是发现一种可将治疗安全性、选择性、有效性与合成可行性相结合的化合物。特别是，口服途径给药的生物利用度对于选择性凝血酶抑制剂而言是难题。在WO 97/16444中公开了具有修饰的三肽序列苯丙氨酰-脯氨酰-精氨酸的凝血酶抑制剂，其中羧基存在于氨基末端并且精氨酸被通过醚键与脯氨酰类似物相连的碱性(氨基亚氨基甲基)苯基或碱性(氨基亚氨基甲基)吡啶基所置换。
本发明的目的是提供新的化学上可行的丝氨酸蛋白酶抑制剂，这些丝氨酸蛋白酶抑制剂具有良好的药理学和毒理学性能和足够的治疗用效能。
迄今已发现本目的可以通过式(I)的丝氨酸蛋白酶抑制剂，特别是凝血酶抑制剂来实现，
Figure C9981249600031
式(1)
其中
J为H、R1、R1-O-C(O)-、R1-C(O)-、R1-SO2-、R3OOC-(CHR2)p-、(R2a，R2b)N-CO-(CHR2)p-或Het-CO-(CHR2)p-；
D是式-NH-CHR1-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)OR1]-C(O)-、
-NR4-CH[(CH2)qC(O)N(R2a，R2b)]-C(O)-、
-NR4-CH[(CH2)qC(O)Het]-C(O)-、D-1-Tiq、D-3-Tiq、D-Atc、Aic、
D-1-Pig或D-3-Pig的氨基酸；
E是-NR2-CH2-或片段
其选择性地被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或苄氧基取代；R1选自(1-12C)烷基、(2-12C)链烯基、(2-12C)炔基、(3-12C)环烷基和(3-12C)环烷基(1-6C)亚烷基，这些基团可以被(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、氧代、OH、CF3或卤素选择性取代；和选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基、(8-16C)芳烯基和(14-20C)(双芳基)烷基，其中所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、CF3或卤素选择性取代；
R2、R2a和R2b分别独立地选自H、(1-8C)烷基、(2-8C)链烯基、(2-8C)炔基、(3-8C)环烷基和(3-6C)环烷基(1-4C)亚烷基，它们可以分别被(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；和选自(6-14C)芳基和(7-15C)芳烷基，其中的芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；
R3如R2定义或Het-(1-6C)烷基；
R4是H或(1-3C)烷基；
X和Y是CH或N，条件是它们不同时为N；
Het是含有一个或多个选自O、N和S的杂原子的4-、5-或6-元杂环；
m是1或2；
p是1、2或3；
q是1、2或3；
t是2、3或4；
及其前药；
和它们的药学上可接受的加成盐和/或溶剂化物。
特别是，本发明的化合物在口服给药后具有改进的生物利用度。
在本发明的优选实施方式中化合物具有式(I)，
其中
J为H、R1、R1-SO2-、R3OOC-(CHR2)p-、(R2a，R2b)N-CO-(CHR2)p-或Het-CO-(CHR2)P-；更优选是被(1-6C)烷氧基选择性取代的(3-12C)环烷基；或
D是式-NH-CHR1-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)OR1]-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)N(R2a，R2b)]-C(O)-、-NR4-CH[(CH2)qC(O)Het]-C(O)-的氨基酸；更优选是式-NH-CHR1-C(O)-的氨基酸或式-NR4-CH[(CH2)qC(O)N(R2a，R2b)-C(O)-的L-氨基酸；或E是-N(3-6)环烷基-CH2-或片段
它们被(1-6C)烷基、(1-6C)烷氧基或苄氧基选择性取代；更优选不被取代；或
R1选自(1-12C)烷基、(3-12C)环烷基和(3-12C)环烷基(1-6C)亚烷基，这些基团可以被(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基或氧代选择性取代，并且选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基和(14-20C)(双芳基)烷基，其中所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基、OH、CF3或卤素选择性取代；更优选选自(3-12C)环烷基和(3-12C)环烷基(1-6C)亚烷基，它们可以被(3-12C)环烷基-(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基和(14-20C)(双芳基)烷基，其中所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基或卤素选择性取代；或
R2是H；或
R2a和R2b分别独立地选自H、(1-8C)烷基、(3-8C)环烷基和(3-6C)环烷基(1-4C)亚烷基，它们可以分别被(3-6C)环烷基或(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(6-14C)芳基和(7-15C)芳烷基，其中的芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；或
R3选自H、(1-8C)烷基、(3-8C)环烷基和(3-6C)环烷基(1-4C)亚烷基，它们分别可以被(3-6C)环烷基或(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(7-15C)芳烷基，所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代；和选自Het-(1-6C)烷基；更优选选自(1-8C)烷基和(3-8C)环烷基，它们分别可以被(3-6C)环烷基或(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(7-15C)芳烷基，所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代，和选自Het-(1-6C)烷基；或
R4是H或(1-3C)烷基；或
X和Y是CH；或
Het是含有一个或多个选自O、N和S的杂原子的4-、5-或6-元杂环；
m是2；或
p是1；或
q是2；或
t是3或4；更优选是4。
在进一步优选的实施方案中，D是式-NH-CHR1-C(O)-的氨基酸或谷氨酰基[或它们的(1-6C)烷基酯]；
R1选自(3-12C)环烷基和(3-12C)环烷基(1-6C)亚烷基，它们可以被(3-12C)环烷基或(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(6-14C)芳基、(7-15C)芳烷基和(14-20C)(双芳基)烷基，所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-12C)环烷基、(1-6C)烷氧基或卤素选择性取代；和R3选自(1-8C)烷基和(3-8C)环烷基，它们分别可以被(3-6C)环烷基或(1-6C)烷氧基选择性取代，并且选自(7-15C)芳烷基，所述芳基可以被(1-6C)烷基、(3-6C)环烷基、(1-6C)烷氧基、CF3或卤素选择性取代，和选自Het-(1-6C)烷基。
特别优选的化合物是其中J为-CH2COO(1-6C)烷基、(3-8C)环烷基、-SO2-10-樟脑、-CH2CONH苯基或-CH2CONH(3-8C)环烷基。其它非常优选的化合物是那些其中D为D-环己基丙氨酰基、D-苯基丙氨酰基、D-二苯基丙氨酰基或谷氨酰基[或它们的(1-6C)烷基酯]的化合物。另外特别优选的其中E是片段
Figure C9981249600071
其中t是3或4的化合物。
本发明中术语具有下列含义：(1-12C)烷基、(1-8C)烷基、(1-6C)烷基、(1-3C)烷基是指分别具有1-12、1-8、1-6和1-3个碳原子的支链或非支链烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、己基、辛基等。
(2-12C)烯基和(2-8C)烯基是指分别含有2-12和2-8个碳原子的支链或非支链烯基，例如乙烯基、2-丁烯基等。
(2-12C)炔基和(2-8C)炔基是指分别具有2-12和2-8个碳原子的支链或非支链炔基，例如乙炔基、丙炔基等。
(1-6C)烷氧基是指具有1-6个碳原子的烷氧基，烷基部分具有如上定义的含义。
(3-12C)环烷基、(3-8C)环烷基、(3-6C)环烷基是指分别具有3-12、3-8和3-6个碳原子的一-或双环烷基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。
(1-6C)亚烷基、(1-4C)亚烷基是指分别含有1-6和1-4个碳原子的支链或非支链亚烷基，例如-(CH2)a-(其中a相当于碳原子的数量)-CH(CH3)-和-CH(CH3)-CH2-等。
(2-10C)亚烯基是指具有2-10个碳原子和一个或多个双键的支链或非支链烯基，例如-CH＝CH-CH2-、-(CH2)2-CH＝CH-CH(CH3)-、-CH-CH-CH-CH-CH2-等。
(6-14C)芳基、(6-12C)芳基是指分别具有6-14或6-12个碳原子的芳族烃基，例如苯基、萘基、四氢萘基、茚基等。
(7-15C)芳烷基是指具有7-15个碳原子的芳烷基，其中“烷基”表示(1-8C)亚烷基而芳基是(6-14C)芳基，两者如上述定义。
(8-16C)芳烯基是指具有8-16个碳原子的芳烷基，其中“烯基”表示(2-10C)亚烯基而芳基是(6-14C)芳基，两者如上述定义。
(14-20C)(双芳基)烷基是指在同-碳原子上或在不同碳原子上被两个独立选定的芳基取代的(1-3C)烷基，所述芳基如(6-12C)芳基所述定义，例如双苯基甲基。
卤素是指F、C1、Br或I。
Tiq是指1，2，3，4-四氢异喹啉-3-羧酸。
Atc是指2-氨基四氢萘-2-羧酸。
Aic是指2-氨基二氢茚-2-羧酸。
Pig是指全氢异喹啉基羧酸。
术语“前药”是指在给药后代谢为一种或多种具有式I的活性化合物的化合物。适用的前药例如是式I化合物的N-烷氧基羰基保护(优选N-乙氧基羰基)的衍生物。
由于氨基异喹啉、氨基喹唑啉或氨基酞嗪中的氨基所具有的碱性小于赖氨酸和精氨酸中的氨基，意外地是新发明的化合物具有足够的丝氨酸蛋白酶抑制功效。
如上所述，本发明的化合物是参与凝血级联的丝氨酸蛋白酶的抑制剂，特别是凝血酶和/或凝血因子Xa的抑制剂。这些化合物可以应用在临床和兽医治疗中，即用来治疗和预防凝血酶介导性和凝血酶相关性疾病。这包括许多其中凝血级联被激活的血栓形成和前血栓形成病症。此类疾病和病症是或伴随有例如深度静脉血栓形成、肺栓塞、血栓静脉炎、血栓形成或栓塞引起的动脉闭塞、血管成形术或血栓溶解期间或之后的动脉再闭塞、动脉损伤或侵入性心脏手术继发的再狭窄、术后静脉血栓形成或栓塞急性或慢性动脉粥样硬化、中风、心肌梗塞、某些类型的癌症和转移，以及某些种类的神经变性疾病。本发明的化合物也可以用作体外抗凝剂或用作体外血液循环的抗凝剂，例如在透析和外科手术中所必需的那些。
按照另一方面，本发明提供一种治疗和/或预防动物或人体中凝血酶介导和凝血酶相关性疾病的方法，该方法包括用治疗有效量的本发明化合物治疗损伤动物或人体。
本发明的化合物可以经肠道(例如口服、直肠经鼻或局部)或非肠道(例如经肌肉内、皮下、静脉内或腹膜内注射)给药。
这些化合物及其组合物的精确给药剂量和给药方案必然取决于本发明化合物所施用的个体对象的需要、药物的形式、病情的程度或需求以及医药人员的判断。通常，非肠道给药需要的剂量需要比其它给药方法较低的剂量，这更取决于吸收作用。然而，用于人体的日剂量优选是0.00 1-100mg/kg体重，更优选0.01-10mg/kg体重。
一个日剂量可以以一个或多个适合如口服、直肠、舌下或经鼻途径或经皮(如透皮贴剂，或膏剂形式)的剂量单位施用。
本发明化合物的另一种给药途径是通过其它方式将所述化合物引入(透析)循环中，例如渐进地或一次性地注射到透析膜的系统上游中，同时将血液引入该回路。而且，本发明的化合物可以提供给所述体外循环的线路和/或其它设备，优选通过涂层的方式(但不限于此)。另外，设备的部分材料中可以吸收有本发明的化合物，例如在透析用薄膜中。
本发明涉及一种在哺乳动物中抑制血小板聚集的丧失、抑制血纤蛋白的形成、抑制血栓形成和抑制栓塞物形成的药物组合物，该组合物含有本发明的化合物和适当的辅料。这些组合物可以选择性地含有抗凝剂、抗血小板剂和溶血栓药。可以将该组合物加入血液、血液制品或哺乳动物器官中以便产生预期的抑制作用。本发明还涉及一种预防或治疗哺乳动物中的不稳定心绞痛、顽固性心绞痛、心肌梗塞、暂时性局部缺血发作、心房纤维性颤动、血栓形成性中风、栓塞性中风、深度静脉血栓形成、播散性血管内凝血以及再造管血管的再闭塞和再狭窄的药物组合物，该组合物含有本发明的化合物。这些药物组合物可以选择性地含有抗凝剂、抗血小板剂和溶血栓药。本发明还涉及一种降低哺乳动物中表面的血栓形成性的方法，该方法通过共价或非共价地将本发明的化合物连接在表面上。
本发明进一步涉及一种与适合该组合物的包装材料相结合的药物组合物，该药物组合物如上所述，所述包装材料内带使用所述药物组合物的说明书。
为了制备给药形式，如丸剂、片剂、栓剂、(微)胶囊、散剂、乳剂、霜剂、软膏、植入物、喷雾剂、溶液或混悬液形式的注射制剂，可以采用适当的辅料如载体、填充剂、粘合剂、润滑剂、分散剂、乳化剂、稳定剂、表面活性剂、抗氧剂、着色剂、防腐剂等，如标准参考文献Gennaro等人的《Remington氏药物科学》(第18版，Mack发行公司，1990，尤其参见第8部分：药物制剂及其制备)中所述的。通常，任何不妨碍活性化合物功能的药学可接受辅料均适宜并且可采用。
适宜本发明活性剂给药的载体和填充剂包括，例如琼脂、醇、纤维素衍生物、脂肪、多糖、聚乙烯吡咯烷酮、二氧化硅、灭菌盐水等。
粘合剂是用来赋予药物组合物粘结性质的试剂，目的是减小药物组合物在生产和处理中的损耗。粘合剂例如是纤维素、淀粉类、聚乙烯吡咯烷酮等。
适合本发明活性剂给药的润滑剂例如是硬脂酸镁。
表面活性剂是化合物在不同物理环境如亲水性和疏水性环境中易于接触和迁移的试剂。多种表面活性剂是药物组合物制备领域中所公知的，例如公开在《Remington氏药物科学》(第18版，作者A.R.Gennaro，Mack发行公司，1990，Easton，宾西法尼亚)第19章中。在制备药物制剂过程中可采用的表面活性剂例如是聚乙二醇(PEG)等。
所述化合物也可用于可植入药物装置内，例如US专利4767628中所述的那些，其内容在此引入作为参考。所述装置应含有足够量的化合物以缓慢释放该化合物(例如一个月以上)。
式(I)的化合物可以由式(II)的化合物或其衍生物制得，其中位于芳基上的氨基(芳基氨基)被保护为尿烷如Alloc或酰胺如苯甲酰基，其中D、E、X、Y和m具有上述定义并且Pg是N-保护基(优选尿烷如Boc)。
本申请中所用的术语N-保护基是指肽化学中常用来保护α-氨基的基团，例如烯丙氧基羰基(Alloc)、叔丁氧基羰基(Boc)、苄氧基羰基(Z)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)或邻苯二甲酰基。可以以不同方式脱除保护基，这取决于那些保护基的性质。有关氨基保护基及其脱除方法的概述公开在上文提及的《肽、分析、合成、生物学》第3卷和T.W.Greene& P.G.M.Wuts的《有机合成中的保护基》第2版，(1991，John Wiley& Sons，Inc.，)中。
利用该领域中的已知方法如肽偶联、烷基化或还原胺化，脱除N-保护基Pg并且选择性修饰脱保护氨基可以得到式(I)的化合物。
式(II)的化合物可以由式(III)的化合物或其衍生物制得，其中芳基氨基被保护为尿烷如Alloc或酰胺如苯甲酰基，其中E、X、Y、m和Pg具有上述含义。脱除式(III)化合物中的N-保护基Pg并且使肽与式Pg-D-OH的化合物偶联可以生成式(II)的化合物，其中D和Pg具有上述含义。
Figure C9981249600112
另外，式(I)的化合物可直接由式(III)的化合物制得。脱除式(III)化合物中的N-保护基Pg并且使肽与式J-D-OH的化合物偶联可以生成式(I)的化合物，其中J和D具有上述含义并且可以选择性地含有附加保护基。
由式(IV)的那些化合物在标准Mitsunobu条件下(三丁基膦，二烷基偶氮二羧酸)通过与式J-D-E-(CH2)m-OH、Pg-D-E-(CH2)m-OH或Pg-E-(CH2)m-OH反应可得到式(I)、(II)和(III)的化合物或其衍生物，其中X和Y具有上述含义，其中芳基氨基被保护为尿烷如Alloc或酰胺如苯甲酰基，其中D、E、J、m和Pg定义如上并且选择性地含有保护基(R.L.Elliot，H Kopecka，D.E.Gunn，H.-N.Lin & D.S.Garvey，《生物有机、医学和化学通讯》(Bioorg.Med.Chem.Lett.)6.2283(1996)；K.Wisniewski，A.S.Koldziejczyk & B.Falkiewicz，《肽科学杂志)》(J.Pept.Sc.)4，1(1998))。
通过相应的胺R3NH2与丙烯酸乙酯共轭加成，用氢化锂铝还原酯官能团并且进而引入N-保护基Pg制备得到其中E＝-R3NCH2-和m＝2的式Pg-E-(CH2)m-OH类的醇。
通过与BBr3[J.F.W.McOmie & D.E.West，《有机合成合集》(Org.Synth.Collect.)第V卷，412(1973)]或EtSNa[A.S.Kende& J.P.Rizzi，《四面体通讯)》，22，1779(1981)]反应可以实现将式(V)的甲基芳基醚脱甲基化为式(IV)相应的酚类化合物。
Figure C9981249600122
适合制备式(V)化合物的起始原料是式(VI)的化合物，其中X和Y具有上式含义。式(VI)化合物的氯基通过与氨在加压下加热可以被直接转变为氨基。另外，通过与酚在碱性条件下反应可以使式(VI)化合物的氯基转化为苯氧基，随后用醋酸铵处理得到式(V)化合物的氨基。式(V)的化合物也可以通过用叠氮化钠处理式(VI)的化合物且进而用PPh3还原该叠氮芳烃来获得。
由式(VII)的化合物通过用磷酰氯处理可以获得其中X和Y定义如上的式(VI)的化合物。式(VII)的化合物公开在文献中；7-甲氧基-3H-喹唑啉-4-酮：Chapman等人《化学会志》890(1947)，6-甲氧基-2H-酞嗪-1-酮，Consonni P.& A.Omodei-Sale，Farmaco，Ed.Sci.，76，691(1976)(化学文摘85-177191)。通过例如用过酸(如间-氯过苯甲酸)使6-甲氧基-异喹啉(Hendrickson，J.B.；Rodriguez，C.；《有机化学杂志》1983，48，3344-3346)转化为N-氧化物盐，然后用HCl处理，并且此后令该N-氧化物盐与氯化试剂(如磷酰氯)反应(J.Robinson，《美国化学学会会志)》69，1941(1939))可以制备其中X ＝CH和Y＝CH的式(VI)化合物(1-氯-6-甲氧基-异喹啉)。
Figure C9981249600132
作为上述制备本发明化合物的方法中提及的一个过程步骤，肽偶联可以通过所属领域常用于偶合-或缩合-肽片段的已知方法来进行，例如通过叠氮法、混合酐法、活化酯法，或优选通过碳二亚胺法，尤其是催化和消旋抑制化合物如N-羟基琥珀酰亚胺和N-羟基苯并三唑的加入。适用的方法公开在：《肽、分析、合成、生物学》第3卷，E.Gross &J.Meienhofer编辑(Academic Press.New York，1981)，R.Knorr，A.Trzeciak，W.Bannwarth & D.Gillessen，《四面体通讯》，30，1927(1989)和L.A.Carpino，《美国化学学会会志》115，4397(1993)。
本发明的化合物可以是游离碱的形式，也可以是由反应混合物中分离出的药学可接受盐的形式。通过用有机或无机酸处理式I的游离碱也可以制得药学可接受盐，有机或无机酸例如是盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、磷酸、乙酸、丙酸、羟基乙酸、马来酸、丙二酸、甲磺酸、富马酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸和抗坏血酸。
本发明的化合物具有一个或多个手性碳原子，由此可能获得纯的对映异构体，或对映异构体的混合物，或含有非对映异构体的混合物。获得纯对映异构体的方法为所属领域所熟知，例如结晶由旋光酸和外消旋混合物获得的盐，或用手性柱层析。对于非对映异构体可以采用正相或反相柱。
本发明通过下列实施例举例说明。
实施例
使用下列缩写：
Alloc：烯丙氧基羰基
Boc：叔丁氧基羰基
洗脱剂：溶剂B中x-y％的溶剂A是指采用在溶剂B中含x％(v/v)溶剂A至在溶剂B中含y％(v/v)溶剂A的梯度洗脱剂。
实施例1
(2S)-1-(N-(-)-樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异 喹啉-6-氧基)-乙基)哌啶
1a. 6-甲氧基-异喹啉-N-氧化物盐酸盐
室温下将133g的间-氯过苯甲酸(纯度75％)分次加入6-甲氧基-异喹啉[Hendrickson，J.B.；Rodriguez，C.；《有机化学杂志)》1983，48，3344-3346；79.8g；500mmol]在1.2L二氯甲烷中的搅拌溶液内。连续搅拌3小时，随后加入甲醇(1L)。令体积减少至700ml，此后加入800ml存在于乙醚中的饱和氯化氢溶液。用1.5L乙醚稀释得到黄色结晶沉淀，通过过滤分离出结晶，用冰冷乙醚洗涤并且真空干燥。收率：85g(80％)；白色固体；熔点：189-191℃；(+)-FAB-MS：176(MH+-HCl)。
1b. 1-氯-6-甲氧基-异喹啉
90℃下小心地将6-甲氧基-异喹啉-N-氧化物盐酸盐(1a，85g；400mmol)分次加入磷酰氯(550ml)中，此后在90℃下搅拌该混合物6小时。真空除去过量的磷酰氯。残余白色固体用水洗涤，过滤和真空干燥。收率：68g(88％)；白色固体；熔点：72-74℃；EI-MS：193(M+)。
1c. 6-甲氧基-1-苯氧基-异喹啉
向1-氯-6-甲氧基-异喹啉(1b，16.8g，87mmol)和苯酚(67g)的混合物中加入粉状氢氧化钾(8.4g)。在氮气氛下将该混合物在140℃下加热3小时，冷却至室温，随后用280ml的3N氢氧化钠溶液和500ml的二氯甲烷稀释。有机层用2N氢氧化钠、水和盐水洗涤，硫酸镁干燥且减压下浓缩，得到21.3g(98％)白色固体。ESI-MS：251.8(M+H)+。Rf(硅胶：甲苯/乙醇，8/2，v/v)：0.75。
1d. 1-氨基-6-甲氧基-异喹啉
6-甲氧基-1-苯氧基-异喹啉(1c，21.3g，85mmol)和醋酸铵(55g)的混合物在氮气氛下加热至150℃并且搅拌过夜。令该混合物冷却至室温，此后搅拌下加入3N氢氧化钠溶液(280ml)。由此所得溶液用乙酸乙酯(2×300ml)提取，合并的有机层用2N含盐水盐酸(100ml)提取。随后，用2N氢氧化钠溶液将水层的pH调至12。用乙酸乙酯(300ml)提取得到有机层，用盐水(100ml)洗涤，干燥(硫酸镁)且减压下浓缩，得到11g的白色固体(75％)。ESI-MS：175.2(M+H)+，349.2(M+2H)2+。Rf(硅胶：甲苯/乙醇，8/2，v/v)：0.17。
1e. 1-氨基-6-羟基-异喹啉
10℃下将存在于20ml二氯甲烷中的三溴化硼(18.2ml；370mmol)溶液滴加到1-氨基-6-甲氧基-异喹啉(1d，11.0g；63mmol)在150ml二氯甲烷中的搅拌溶液内。室温下搅拌4天后，将反应混合物倾入冰中并且加入浓氨水调至pH9。过滤收集沉淀物并且真空干燥，得到8.9g(88％)标题化合物，其为白色固体；m.p.258-260℃；EI-MS：160(M+).1H NMR(DMSO-d6)：δ8.11(d，1H)，7.65(d，1H)，6.99(dd，1H)，6.86(d，1H)，6.80-6.63(m，4H)，5.2(bs，1H).
1f. (2S)-1-叔丁氧基羰基-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)- 哌啶
将由分解(2S)-2-(2-羟乙基)-哌啶[Beyerman，H.C.；《荷兰化学论文集》(Recl.Trav.Chim)Pays-Bas 1971，90，755-765]制备的(2S)-1-叔丁氧基羰基-2-(2-羟乙基)-哌啶[Ikeda，M.；Kudo，Y.；Sato，T.；《中国化学会志)》(J.Chem.Soc.Perkin Trans)1996，15，1819-1824；860mg，3.75mmol]、1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，480mg，3.0mmol)和三丁基膦(1.5ml，6.0mmol)溶解在四氢呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(4∶1，v/v，15mL)中。此后，滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.95ml，6.0mmol)在四氢呋喃(5ml)中的溶液。搅拌过夜后，用二氯甲烷(100ml)稀释该混合物，用2N氢氧化钠(2×50ml)洗涤，干燥(硫酸镁)，减压下浓缩。用硅胶色谱(洗脱剂：二氯甲烷中2-10％的甲醇)纯化残余物，得到827mg(60％)白色泡沫。ESI-MS：372.2(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9/1，v/v)：0.41。该反应也可以采用未分解1-叔-丁氧基羰基-2-(2-羟乙基)-哌啶(规模10mmol，收率63％)进行。
1g. (2S)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
向(2S)-(1-叔-丁氧基羰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1f，371mg，1.0mmol)在吡啶/二氯甲烷(1∶2，v/v，5ml)中的搅拌溶液内加入氯甲酸烯丙基酯(117μl，1.1mol)。搅拌2小时后，加入水中止该反应混合物，真空浓缩，再溶解在二氯甲烷(50ml中并且用饱和碳酸氢钠溶液(2×25ml)洗涤。硫酸镁干燥，减压下浓缩，得到460g(100％)的无色油，将其溶解在三氟乙酸/二氯甲烷(1∶1，v/v，10ml)中并且搅拌2小时。此后，真空浓缩该反应混合物并且进行硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷中2-12％的甲醇)，得到285mg(80％)标题化合物的白色泡沫。ESI-MS：356.4(M+H)+，281.4(M+H-Alloc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9/1，v/v)：0.62。
1h. N-(-)樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酸
将(-)-樟脑磺酰氯(3.0g，12mmol)滴加到D-环己基丙氨酸HCl-盐(2.08g，10mmol)、1，4-二噁烷(20ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)的搅拌混合物中。将该多相混合物搅拌过夜，此后用1N盐酸小心酸化(pH＝3)。用二氯甲烷(2×100ml)提取该混合物，硫酸镁干燥并且减压下浓缩，得到3.22g(84％)标题化合物的白色固体。ESI-MS：386.5(M+H)+，384.5(M-H)-。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9/1，v/v)：0.32。
  1i. (2S)-1-(N-(-)-樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙 氧基羰基-氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
将2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸(TBTU，321mg，1.0mmol)加入(2S)-1-叔-丁氧基羰基-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1g，285mg，0.80mmol)、N-(-)-樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酸(1h，308mg，0.80mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(348μl，2.0mmol)在二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液内。搅拌过夜后，用二氯甲烷(50ml)稀释该反应混合物，用饱和碳酸氢钠水溶液(25ml)和0.1N盐酸(25ml)洗涤，干燥(硫酸镁)，减压下浓缩。通过硅胶层析(洗脱剂：二氯甲烷中0-5％的甲醇)纯化残余物，得到480mg(83％)白色固体。ESI-MS：723.6(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，19/1，v/v)：0.34。
1j. (2S)-1-(N-(-)樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨 异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
在不间断的干燥氮气流下，将四(三苯基膦)钯(O)(30mg，0.03mmol)加入(2S)-1-(N-(-)-樟脑磺酰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1i，480mg，0.66mmol)和吗啉(0.26ml，3.0mmol)在四氢呋喃(5mL)中的搅拌溶液内。将该反应混合物搅拌2小时，随后真空浓缩。与1，4-二噁烷共蒸发除去残余的吗啉，混合物进行制备RP-HPLC(Delta Pak C18，100，15μm)：流动相：A＝0.5M NaH2PO4+H3PO4 pH 2.1；B＝H2O；C＝CH3CN/H2O(3∶2，v/v)。
梯度：
时间(分钟)    ％A    ％B   ％C
    0         20     60     20
    30        20     20     60
    32        20     0      80
    37        20     0      80
    50        20     60     20
收集适当馏分后，用0.1N盐酸将混合物脱盐，随后冷冻干燥，生成227mg(54％)的标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：693.6(M+H)+，637.6(M-H)-，673.4(M+Cl)-。分析HPLC(SupelcosilLC-18-DB 5um，250*2.1mm)：流动相：A＝0.5M NaH2PO4+H3PO4 pH2.1；B＝H2O；C＝CH3CN/H2O(3：2，v/v)。
梯度：
时间(分钟)    ％A    ％B   ％C
    0         20     60     20
    30        20     0      80
    40        0      0     100
    50        0      0     100
保留时间：39.27分钟(纯度96.0％)。
实施例2 N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-丙基)-环己基胺
2a. N-叔-丁氧基羰基-3-环己基氨基-丙酸乙酯
将丙烯酸乙酯(1.09ml，10mmol)加入环己基胺(1.14ml，10mmol)在乙醇/四氢呋喃(1∶1，v/v，30ml)中的搅拌溶液内。搅拌过夜后，依次加入吡啶和二碳酸二叔丁酯，将该混合物继续搅拌5小时。浓缩该反应混合物，此后通过硅胶层析(洗脱剂；乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)纯化残余物，得到2.18g(73％)标题化合物的白色泡沫。ESI-MS：300.2(M+H)+，244.2(M+H-C4H8)+，200.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1/4，v/v)：0.51。
2b. N-叔丁氧基羰基-3-环己基氨基-丙醇
向N-叔-丁氧基羰基-3-环己基氨基-丙酸乙酯(2a，2.18g，7.3mmol)在四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液内加入氢化锂铝(存在于四氢呋喃中的1.0M溶液，10ml)。搅拌该反应混合物1小时，此后缓慢加入乙酸乙酯(5ml)，用Et2O(2×100ml)提取该多相混合物。有机层用碳酸氢钠水溶液(1N，25ml)洗涤。硫酸镁干燥，减压下浓缩，利用硅胶层析(洗脱剂；乙酸乙酯/庚烷，3∶7，v/v)纯化，得到1.50g(80％)标题化合物，其为白色泡沫。ESI-MS：258.2(M+H)+，280.3(M+Na)，202.2(M+H-C4H8)+，158.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1/4，v/v)：0.31。
2c N-叔-丁氧基羰基-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基 胺
按照实施例1f所述Mitsunobu法由N-叔-丁氧基羰基-3-环己基氨基-丙醇(2b，257mg，1.0mmol)和1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，160mg，1.0mmol)制备本化合物。产量：260mg(65％)。ESI-MS：400.1(M+H)+，344.1(M+H-C4H8)+，300.1(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9/1，v/v)：0.28。
2d .N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺
按照实施例1g所述方法通过Alloc-保护且随后脱除N-叔-丁氧基羰基-3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺(2c，260mg，0.65mmol)的Boc，产量：177mg(71％)。ESI-MS：384.2(M+H)+，300.2(M+H-Alloc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，17∶3，v/v)：0.47。
2e D-环己基丙氨酸苄酯盐酸盐
向N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酸(2.71g，10mmol)在含1ml水的甲醇中的搅拌溶液内加入碳酸铯(1.63g，5.0mmol)。搅拌2小时后，真空浓缩该反应混合物并且再溶解在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中。此后，加入苯甲基溴(2.38ml，20mmol)并且将该反应混合物搅拌过夜。用乙酸乙酯(200ml)稀释该混合物，用碳酸氢钠水溶液(1M，2×50ml)洗涤，干燥(硫酸镁)，减压下浓缩。利用硅胶层析(洗脱剂：庚烷中0-30％的乙酸乙酯)纯化该残余物。真空浓缩合并馏分，随后用3M存在于1，4-二噁烷中的盐酸(50ml)处理。搅拌过夜后，减压下浓缩该反应混合物，得到2.94g(74％)标题化合物，其为白色泡沫。ESI-MS：262.4(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，19/1，v/v)：0.41。
2f .N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸苄酯
将溴乙酸正丙酯(1.05ml，8.1mmol)加入D-环己基丙氨酸苄酯HCl(2.94g，7.4mmol)和N，N-二异丙基乙基胺(3.5ml，20mmol)在乙腈(20ml)中的搅拌溶液内。将该反应混合物搅拌6天并且减压下浓缩。将残余物溶解在二氯甲烷(100ml)中并且用碳酸氢钠水溶液(1M，50ml)洗涤，干燥(硫酸镁)和真空浓缩。将粗品再溶解在二氯甲烷(20ml)中，随后用N，N-二异丙基乙基氨基(3.5ml，20mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.74g，8.0mmol)处理。搅拌4天后，减压下浓缩该反应混合物，通过硅胶层析(洗脱剂：庚烷中0-50％的乙酸乙酯)纯化，得到2.39g(70％)无色油状标题化合物。ESI-MS：461.5(M+H)+，407.5(M+H-C4H8)+，361.5(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1/3，v/v)：0.27。
2g .N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸
用活性炭载钯(10％Pd，250mg)处理N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸苄酯(2f，2.39g，5.2mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(25ml)中的溶液。常压下向后者的溶液中通入2小时氢气。此后，经硅藻土过滤该反应混合物，减压下蒸发滤液，得到1.90g(98％)标题化合物的白色固体。ESI-MS：371.2(M+H)+，369.2(M-H)-，315.2(M+H-C4H8)+，271.5(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9/1，v/v)：0.42。
2h. N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺
按照实施例1i所述肽偶联法由N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环己基胺(2d，192mg，0.50mmol)和N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸(2g，185mg，0.50mmol)制备本化合物。产量：221mg(60％)。ESI-MS：737.6(M+H)+，681.5(M+H-C4H8)+，637.6(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.68。
2i. N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺
按照实施例1i所述方法脱除烯丙基氧基羰基由N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环己基胺(2h，221mg，0.30mmol)制备标题化合物。随后，用二氯甲烷/三氟乙酸(1∶1，v/v，10mL)处理粗产物并且搅拌2小时，此后真空浓缩该反应混合物。按照实施例1j通过制备HPLC法纯化残余物。用0.1N盐酸脱盐，此后冷冻干燥，得到67mg(41％)标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：553.6(M+H)+，587.9(M+Cl)。分析HPLC的保留时间(实施例1j梯度)：27.91分钟(纯度95.8％)。
实施例3
N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-丙基)-环戊基胺
3a. N-叔-丁氧基羰基-3-环戊基氨基-丙酸乙酯
标题化合物是按照实施例2a由丙烯酸乙酯(1.09ml，10mmol)和环戊基胺(0.99ml，10mmol)制备。产量：2.28g(80％)。ESI-MS：286.2(M+H)+，230.2(M+H-C4H8)+，186.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.45。
3b. N-叔-丁氧基羰基-3-环戊基氨基-丙醇
利用实施例2b所述方法由N-叔-丁氧基羰基-3-环戊基氨基-丙酸酯(3a，2.28g，8.0mmol)制备标题化合物。产量：1.34g(69％)。
ESI-MS：244.2(M+H)+，266.3(M+Na)，188.2(M+H-C4H8)+，144.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.30。
3c. N-叔-丁氧基羰基-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环戊基 胺
按照实施例1f所述Mitunobu法由N-叔-丁氧基羰基-3-环戊基氨基-丙醇(3b，243mg，1.0mmol)和1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，160mg，1.0mmol)制备本化合物。产量：262mg(68％)。
ESI-MS：386.1(M+H)+，330.1(M+H-C4H8)+，286.1(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.25。
3d. N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环戊基胺
按照实施例1g所述方法、通过Alloc-保护和随后的N-叔-丁氧基羰基-3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环戊基胺(3c，262mg，0.68mmol)的Boc-脱除制备标题化合物。产量171mg(68％)。ESI-MS：370.2(M+H)+，286.2(M+H-Alloc)+，。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，17∶3，v/v)：0.44。
3e. N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环戊基胺
按照实施例1i所述的肽偶联法由N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环戊基胺(3d，185mg，0.50mmol)和N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸(2g，185mg，0.50mmol)制备本化合物。产量256mg(71％)。ESI-MS：723.6(M+H)+，667.5(M+H-C4H8)+，623.7(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9：1，v/v)：0.64。
3f. N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹
啉-6-氧基)·丙基))-环戊基胺
按照实施例2i所述方法由N-(N’-叔丁氧基羰基-N'-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环戊基胺(3e，256mg，0.35mmol)脱除Alloc和Boc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。产量：113mg(59％)标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：539.5(M+H)+，573.9(M+Cl)。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：25.84分钟(90.1％纯度)。
实施例4
N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-丙基)-环丁基胺
4a. N-叔-丁氧基羰基-3-环丁基氨基-丙酸乙酯
按照实施例2a由丙烯酸乙酯(1.09ml，10mmol)和环丁基胺(0.85ml，10mmol)制备标题化合物。产量：1.71g(63％)。
ESI-MS：272.2(M+H)+，216.2(M+H-C4H8)+，172.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.44。
4b .N-叔-丁氧基羰基-3-环丁基氨基-丙醇
利用实施例2b所述方法由N-叔-丁氧基羰基-3-环丁基氨基-丙酸酯(4a，1，71g，6.3mmol)制备本化合物。产量：0.94g(65％)。ESI-MS：230.2(M+H)+，252.3(M+Na)，174.2(M+H-C4H8)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.37。
4c. N-叔-丁氧基羰基-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丁基 胺
通过实施例1f所述Mitsunobu法由N-叔-丁氧基羰基-3-环丁基氨基-丙醇(4b，229mg，1.0mmol)和1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，160mg，1.0mmol)制备本化合物。产量：230mg(62％)。ESI-MS：372.1(M+H)+，316.1(M+H-C4H8)+，272.1(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9：1，v/v)：0.26。
4d. N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环丁基胺
按照实施例1g所述方法通过Alloc-保护和随后N-叔-丁氧基羰基-3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丁基胺(4c，230mg，0.62mmol)的脱Boc制备标题化合物。产量：166mg(75％)。ESI-MS：356.2(M+H)+，286.2(M+H-Alloc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，17∶3，v/v)：0.44。
4e. N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丁基胺
通过实施例1i所述肽偶联法由N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环丁基胺(4d，142mg，0.40mmol)和N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸(2g，148mg，0.40mmol)制备本化合物。产量：207mg(73％)。ESI-MS：709.5(M+H)+，653.5(M+H-C4H8)+，609.6(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.61。
4f. N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-丙基)-环丁基胺
按照实施例2i所述方法由N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丁基胺(4e，207mg，0.29mmol)脱除Alloc和Boc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。产量：36mg(24％)标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：525.5(M+H)+，559.9(M+Cl)。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：25.10分钟(97.5％纯度)。
实施例5
N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-丙基)-环丙基胺
5a. N-叔-丁氧基羰基-3-环丙基氨基-丙酸乙酯
按照实施例2a由丙烯酸乙酯(1.09ml，10mmol)和环丙基胺(0.69ml，10mmol)制备标题化合物。产量：2.06g(80％)。ESI-MS：258.2(M+H)+，202.2(M+H-C4H8)+，158.2(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.38。
5b. N-叔-丁氧基羰基-3-环丙基氨基-丙醇
利用实施例2b所述方法由N-叔-丁氧基羰基-3-环丙基氨基-丙酸酯(5a，2.06g，8.0mmol)制备本化合物。产量：1.22g(65％)。ESI-MS：216.2(M+H)+，160.2(M+H-C4H8)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/庚烷，1∶4，v/v)：0.21。
5c. N-叔-丁氧基羰基-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丙基 胺
通过实施例1f所述Mitsunobu法由N-叔-丁氧基羰基-3-环丙基氨基-丙醇(5b，215mg，1.0mmol)和1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，160mg，1.0mmol)制备本化合物。产量：226mg(63％)。ESI-MS：358.1(M+H)+，302.1(M+H-C4H8)+，258.1(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.19。
5d. N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环丙基胺
按照实施例1g所述方法通过Alloc-保护和随后N-叔-丁氧基羰基-3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丙基胺(5c，226mg，0.63mmol)的脱Boc制备标题化合物。产量：148mg(69％)。ESI-MS：342.2(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，17∶3，v/v)：0.36。
5e. N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丙基胺
通过实施例li所述肽偶联法由N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基))-环丙基胺(5d，136mg，0.40mmol)和N-叔-丁氧基羰基-N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸(2g，148mg，0.40mmol)制备本化合物。产量：221mg(78％)。ESI-MS：695.3(M+H)+，639.5(M+H-C4H8)+，595.3(M+H-Boc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.49。
5f. N-(N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-丙基)-环丙基胺
按照实施例2i所述方法由N-(N’-叔-丁氧基羰基-N’-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-N-(3-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环丙基胺(5e，221mg，0.31mmol)脱除Alloc和Boc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。产量：87mg(55％)标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：511.3(M+H)+，545.9(M+Cl)。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：24.02分钟(96.0％纯度)。
实施例6
(2S)-1-(N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异 喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷
6a. (2S)-1-叔-丁氧基羰基-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基) 吡咯烷
按照实施例1f所述Mitunobu法由N-叔-丁氧基羰基-L-β-高脯氨酸醇[Leyendecker，F.；Jesser，F.；Laucher，D.；《四面体通讯》1983，24，3513-3516；590mg，2.75mmol]和1-氨基-6-羟基-异喹啉(1e，320mg，2.0mmol)制备本化合物。产量：650mg(91％)。ESI-MS：358.0(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.37。6b.(2S)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷
按照实施例1g所述的Alloc-保护和随后的脱Boc由(2S)-1-叔-丁氧基羰基-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷(6a，650mg，1.8mmol)制备标题化合物。产量：558mg(69％)。ESI-MS：342.2(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.22。6c.(2S)-1-(N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷
通过实施例1i所述肽偶联法由N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酸(2g，925mg，2.5mmol)和(2S)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷(6b，558mg，1.63mmol)制备本化合物。产量：590mg(78％)，其为无色油。ESI-MS：695.6(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.41。
6d. (2S)-1-(N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基 -异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷
按照实施例2i所述方法由(2S)-1-(N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-吡咯烷(6c，590mg，0.85mmol)脱除Alloc和Boc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。产量：107mg(25％)标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：511.6(M+H)+。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：42.96分钟(96.4％纯度)。
实施例7
1-(N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-乙基)-哌啶
7a. 1-(N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酰 基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
通过实施例1i所述肽偶联方案由2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1g，330mg，0.75mmol)和N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酸(2g，273mg，0.75mmol)制备本化合物。产量：239mg(45％)，其为无色油。ESI-MS：709.7(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.56。
7b. 1-(N-丙氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
按照实施例1j所述方法由1-(N-丙氧基羰基甲基-N-叔-丁氧基羰基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(7a，239mg，0.34mmol)脱除Alloc和Boc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。产量：87mg(49％)标题化合物(两种非对映异构体)，其为白色蓬松固体。ESI-MS：525.4(M+H)+。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：25.88分钟(32.4％)和27.52分钟(66.6％)。
实施例8
1-(N-环辛基-γ-叔-丁基-L-谷氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧 基)-乙基)-哌啶
8a. N-环辛基-γ-叔丁基-L-谷氨酸
向γ-叔丁基-L-谷氨酸(4.06g，20.0mmol)和环辛酮(3.15g，25mmol)在N，N-二甲基甲酰胺/乙酸(99∶1，v/v，50mL)的搅拌溶液中以小份加入三乙酰氧基硼氢化物(6.36g，30.0mmol)并且将该混合物搅拌过夜。蒸发溶剂后，将残余物溶解在水(50ml)中。用2N氢氧化钠溶液调至pH9，随后用乙醚(50ml)提取。此后，用1.0M盐酸小心地将水层的pH调至2.5。用二氯甲烷提取得到有机层，干燥(硫酸镁)，减压下浓缩，得到4.82g(77％)标题化合物的白色固体。ESI-MS：314.2(M+H)+，336.2(M+Na)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水，63∶20∶6∶11，v/v)：0.80。
8b. 1-(N-环辛基-γ-叔-丁基-L-谷氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨 基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
通过实施例1i所述肽偶联方案由N-环辛基-γ-叔丁基-L-谷氨酸(8a，344mg，1.1mmol)和2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1g，391mg，1.1mmol)制备本化合物。产量：380mg(58％)，其为无色油。ESI-MS：651.3(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.23。
8c. 1-(N-环辛基-γ-叔丁基-L-谷氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6- 氧基)-乙基)-哌啶
按照实施例1j所述方法由1-(N-环辛基-γ-叔丁基-L-谷氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(8b，380mg，0.58mmol)脱除Alloc来制备标题化合物并且通过实施例1j所述方法纯化。产量：81mg(25％，在哌啶的C-2位存在两种非对映异构体)。ESI-MS：567.4(M+H)+。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：26.20分钟(47.2％)和27.07分钟(52.0％)。
实施例9
1-(N-环戊基氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
9a. N-烯丙氧基羰基-N-叔-丁氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸
向存在于1，4-二噁烷(50ml)中的N-叔-丁氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸[Hamada，Y.；Shibata，M.；Sugiura，T.；Kato，S.；Shioiri，T.；《有机化学杂志》1987，52，1252-1255；2.85g，10mmol]依次加入饱和碳酸氢钠水溶液(25ml)和氯甲酸烯丙酯(1.17ml，11mmol)。搅拌3天后，用1N盐酸小心酸化反应物混合物(pH＝3)，随后用二氯甲烷提取。硫酸镁干燥，减压下浓缩，得到目标化合物，其为白色固体(2.41g，65％)。ESI-MS：370.4(M+H)+，314.4(M+H-C4H8)+，230.3(M+H-C4H8-Alloc)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水，63/20/107，v/v)：0.69。
9b. 1-(N-烯丙氧基羰基-N-叔-丁氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
0℃下将2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸(TBTU，616mg，1.9mmol)加入2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1g，676mg，1.9mmol)和N-烯丙氧基羰基-N-叔-丁氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酸(9a，709mg，1.9mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(15ml)中的搅拌溶液内。用N，N-二异丙基乙基胺调至pH8。室温下搅拌过夜后，真空浓缩该混合物。残余物用乙酸乙酯(100ml)稀释，用5％碳酸氢钠水溶液(2×50ml)和盐水(50ml)洗涤，干燥(硫酸镁)，减压下浓缩。残余物通过硅胶层析(洗脱剂：庚烷中33-50％的乙酸乙酯)纯化。产量825mg(57％)的标题化合物，其为白色泡沫。ESI-MS：707.4(M+H)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水，232/31/18/7，v/v)：0.91。
9c. 1-(N-烯丙氧基羰基-N-羧甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯 丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
室温下将1-(N-烯丙氧基羰基-N-叔-丁氧基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(9b，825mg，1.3mmol)在三氟乙酸/二氯甲烷(2/3，v/v)中的溶液搅拌5小时。真空浓缩该反应混合物，得到0.76g(100％)褐色固体。ESI-MS：651.4(M+H)+，649.4(M-H)+。Rf(硅胶：乙酸乙酯/吡啶/乙酸/水，232/31/18/7，v/v)：0.31。
9d. 1-(N-烯丙氧基羰基-N-环戊基氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
利用实施例9b所述方法将1-(N-烯丙氧基羰基-N-羧甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(9c，189mg，0.29mmol)和环戊基胺(40.3μl，0.41mmol)缩合。产量:187mg(90％)的标题化合物。ESI-MS：718.4(M+H)+，716.4(M-H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，95/5，v/v)：0.72。9e. 1-(N-环戊基氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基- 异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
按照实施例1j所述方法(10mol％Pd，10当量吗啉)脱除1-(N-烯丙氧基羰基-N-环戊基氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(9d，187mg，0.26mmol)Alloc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。得到102mg(66％)标题化合物(两种非对映异构体)，其为白色蓬松固体。ESI-MS：550.4(M+H)+，272(C16H22N3O)+，251(C15H27N2O)+，548.4(M-H)-，584(M+Cl)-。分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：31.19分钟(44.4％)和33.31分钟(55.6％)。
实施例10
1-(N-苯氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉 -6-氧基)-乙基)-哌啶
10a. 1-(N-烯丙氧基羰基-N-苯氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰 基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
利用实施例9b所述方法将1-(N-烯丙氧基羰基-N-羟基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(9c，189mg，0.29mmol)和苯胺(38μl，0.41mmol)偶联。得到206mg(98％)。ESI-MS：726.4(M+H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，95/5，v/v)：0.73。
10b. 1-(N-苯氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
按照实施例1j所述方法(10mol％Pd，10当量吗啉)脱除1-(N-烯丙氧基羰基-N-苯氨基羰基甲基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(10a，206mg，0.28mmol)的Alloc保护基来制备标题化合物。残余物通过实施例1j所述的制备HPLC法纯化。用0.1N盐酸脱盐，随后冷冻干燥。得到80mg(51％)标题化合物(两种非对映异构体)，其为白色蓬松固体。ESI-MS：558.0(M+H)+，580.1(M+Na)+，272.2(C16H22N3O)+，259.3(C16H23N2O)+，556.0(M-H)-，592.3(M+Cl)-。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，95/5，v/v)：0.32。
分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：32.76分钟(43.5％)和34.52分钟(56.5％)。
实施例11
1-(N-环己基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)- 乙基)-哌啶
11a. N-环己基-D-环己基丙氨酸
将环己酮(1.55ml，15mmol)加入D-环己基丙氨酸·HCl盐(2.08g，10mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的搅拌溶液内，其中二甲基甲酰胺中含有0.1mL乙酸。随后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.18g，15mmol)，将反应混合物搅拌过夜。17小时后，减压下浓缩澄清溶液并且悬浮在水(15ml)中。将该多相混合物酸化为pH＝3.0后，加入二氯甲烷(150ml)并且机械搅拌该混合物30分钟。干燥有机层(硫酸镁)，减压下浓缩，得到1.57g(63％)标题化合物，其为白色固体。ESI-MS：254.2(M+H)+，252.1(M-H)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，8∶2，v/v)：0.29。
11b. 1-(N-环己基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基- 并喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶
通过实施例1i所述肽偶联方案由N-环己基-D-环己基丙氨酸(11a，127mg，0.50mmol)和2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(1g，178mg，0.50mmol)制备本化合物。得到224mg(76％)。ESI-MS：591.4(M+H)+，589.4(M-H)+，507.3(M+H-Alloc)+。Rf(硅胶：二氯甲烷/甲醇，9∶1，v/v)：0.69/72(在哌啶C-2位存在两种非对映异构体)。
11c. 1-(N-环己基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-氨基-异喹啉-6-氧 基)-乙基)-哌啶
按照实施例1j所述方法由1-(N-环己基-D-环己基丙氨酰基)-2-(2-(1-烯丙氧基羰基氨基-异喹啉-6-氧基)-乙基)-哌啶(11b，224mg，0.38mmol)脱除Alloc来制备标题化合物。通过实施例1j所述制备HPLC法纯化残余物。用0.1N盐酸脱盐并且随后冷冻干燥，产率102mg(53％)的标题化合物，其为白色蓬松固体。ESI-MS：507.3(M+H)+，623.4(M+Cl)。收率224mg(76％)。ESI-MS：507.3(M+H)+，分析HPLC保留时间(实施例1j梯度)：30.94分钟(41.2％)和32.20分钟(53.4％)。
实施例12
N-(N’-异-丙氧基羰基甲基-D-二苯基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹 啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺
按照上述实施例所述方法制备N-(N’-异-丙氧基羰基甲基-D-二苯基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺。将上述实施例的化合物(1.11g)与1ml二氯甲烷和9ml三氟乙酸混合。室温下搅拌16小时后，浓缩该反应混合物，用甲苯处理并且再次浓缩。残余物用叔丁醇和水的混合物处理，用乙醚洗涤并且浓缩。将乙醇加入残余物，过滤并且除去滤液中的乙醇，得到0.72g的N-(N’-羟基羰基甲基-D-二苯基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺。向0.34g该化合物中加入10ml的2丙醇和0.16ml的亚硫酰氯。60℃下搅拌18小时后，浓缩该反应混合物。残余物进行两次柱层析(硅胶：第一柱：二氯甲烷/甲醇＝9/1(v/v)；第二柱：甲苯/乙醇＝98/2梯度至95/5(v/v))。粗产物用乙醚研制得到45mg的标题化合物。ESI-MS：595(M+H)+，629(M+Cl)-。分析HPLC(Supelcosil LC-18-DB5um，250*2.1mm)：流动相：A＝0.5M NaH2PO4+H3PO4 pH 2.1；B＝H2O；C＝CH3CN/H2O(3∶2，v/v)。
梯度：
时间(分钟)    ％A    ％B    ％C
    0          20    60     20
   40          20    0      80
保留时间：34.9分钟和37.4分钟。
实施例13
N-(N’-环戊基氨基羰基甲基-D-二苯基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异 喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺
按照上述实施例所述方法由N-(N’-羟基羰基甲基-D-二苯基丙氨酰基)-N-(3-(1-氨基-异喹啉-6-氧基)-丙基)-环己基胺(380mg)制备标题化合物(56mg)。ESI-MS：620(M+H)+，654(M+Cl)-。分析HPLC(实施例12梯度)保留时间：37.2分钟。
实施例14a-f
按照上述实施例制备下列化合物：
Figure C9981249600331
实施例15
通过下列方法测定本发明化合物的生物活性。
抗凝血酶实验
凝血酶(因子IIa)是凝血级联中的一种因子。
通过分光光度分析法测量在凝血酶作用下显色底物s-2238的水解率可以评估本发明的抗凝血酶活性。这种在缓冲体系中的抗凝血酶活性实验用来评估试验化合物的IC50值。
试验介质：氨丁三醇-NaCl-聚乙二醇6000(TNP)缓冲液
参比化合物：12581(Kabi)
载体：TNP缓冲液
可以用二甲基亚砜、甲醇、乙醇、乙腈或叔丁醇促进溶解，它们在最终的反应混合物中浓度高达2.5％时也不产生不利影响。
技术：试剂*
1.氨丁三醇-NaCl(TN)缓冲液
缓冲液的组成：
氨丁三醇(Tris)    6.057g(50mmol)
NaCl              5.844g(100mol)
水至              1L
37℃下溶液的pH用HCl(10mmol.1-1)调至7.4
2.TNP缓冲液
将聚乙二醇6000溶解在TN缓冲液中得到浓度3g.l-1
3.S-2238溶液
将一瓶S-2238(25mg；Kabi Diagnositica，瑞典)溶解在20mlTN缓冲液中得到浓度1.25mg.ml-1(2mmol.l-1)
4.凝血酶溶液
将人凝血酶(16000nKat/瓶；Centraal Laboratorium voorBloedtransfusie，Amsterdam，The Netherlands)溶解在TNP缓冲液中得到储备液835nKat.ml-1。
使用前即时用TNP缓冲液稀释该溶液至浓度为3.34nKat.ml-1。
*-所用全部组分为分析级
-采用超纯水水溶液(Milli-Q质量)。
试验和参比化合物溶液的制备
将试验和参比化合物溶解在Milli-Q水中得到10-2mol.l-1的储备浓度。用载体分步稀释至各种浓度得到10-3、10-4和10-5mol.l-1。试验使用稀释液(包括储备溶液)(反应混合物中的终浓度分别为：3·10-3、10-3、3·10-4、10-4、3·10-5、10-5、3·10-6和10-6mol.l-1)
方法
室温下，将0.075ml和0.025ml试验化合物或参比化合物溶液或载体分别吸量至微量滴定平板的孔中并且分别用0.115ml和0.0165mlTNP缓冲液稀释这些溶液。将0.030mlS-2238溶液的等份试样加入各孔中，37℃下将平板在恒温箱(Amersham)中预热和预培养10分钟。预培养后，通过向各孔加入0.030ml的凝血酶引发S-2238的水解。37℃下培养平板。培养1分钟后，利用动力学微量滴定平板读数器(Twinreader plus，Flow Laboratories)在405nm下每2分钟测量各个样本的吸光度，共持续90分钟。
所有数据利用LOTUS-MEASURE采集在IBM个人计算机中。对于各种化合物浓度(表示为mol.l-1反应混合物)和空白对照，绘制吸光度与反应时间(分钟)的曲线。
反应的评估：对于各个最终浓度，由实验曲线计算出最大吸光度。按照Hafner等人所述方法(Arzneim，-Forsch，/药物研究(Drug Res.)1977；27(II)：1871-3)利用对数变换分析计算出IC50值(终浓度，表示为μmol.l-1，抑制50％的空白最大吸光度时)。
抗凝血酶活性：
    实施例     IC50(μmol.l-1)
    1     0.41
    8     0.61
    9     0.32
    10     1.35
    11     0.5

Claims (3)

1.具有式(I)的化合物，
式(1)
其中：
J为-CH2COO(1-6C)烷基、-(3-8C)环烷基、-SO2-10-樟脑、-CH2CONH苯基或-CH2CONH(3-8C)环烷基；
D为D-环己基丙氨酰基、D-苯基丙氨酰基、D-二苯基丙氨酰基、或谷氨酰基或其(1-6C)烷基酯；和
E是片段：
其中t是3或4；
X和Y是CH或N，条件是它们不同时为N；
m为1或2；
或它们的N-烷氧基羰基保护的衍生物；
和它们的药学上可接受的加成盐和/或溶剂化物。
2.一种药物组合物，含有权利要求1所述的化合物和适合药用的辅料。
3.权利要求1所述的化合物在制备治疗或预防凝血酶介导和凝血酶相关疾病的药物中的应用。
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Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10046272A1 (de) * 2000-09-19 2002-03-28 Merck Patent Gmbh Aminoheterocyclen (Faktor Xa Inhibitoren 14)
US6924285B2 (en) 2002-03-30 2005-08-02 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Bicyclic heterocyclic compounds, pharmaceutical compositions containing these compounds, their use and process for preparing them
US7479502B2 (en) 2002-12-03 2009-01-20 Pharmacyclics, Inc. 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1H-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor VIIA inhibitors
GB0309850D0 (en) 2003-04-30 2003-06-04 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
GB0322409D0 (en) 2003-09-25 2003-10-29 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
GB0326459D0 (en) 2003-11-13 2003-12-17 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
WO2005075439A1 (en) 2004-02-03 2005-08-18 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
AU2006264043B2 (en) 2005-06-28 2012-04-26 Sanofi-Aventis Isoquinoline derivatives as inhibitors of Rho-kinase
ATE521595T1 (de) 2005-07-26 2011-09-15 Sanofi Sa Cyclohexylaminisochinolonderivate als rho-kinase- inhibitor
PT1910333E (pt) 2005-07-26 2013-08-01 Sanofi Sa Derivados de isoquinolona substituída com piperidinilo como inibidores da rho-cinase
TWI389899B (zh) 2006-08-08 2013-03-21 Msd Oss Bv 具口服活性之凝血酶抑制劑
EP1921070A1 (de) 2006-11-10 2008-05-14 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Bicyclische Heterocyclen, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel, deren Verwendung und Verfahren zu ihrer Herstelllung
CA2673920C (en) 2006-12-27 2015-03-24 Sanofi-Aventis Cycloalkylamine substituted isoquinoline derivatives
KR20090094338A (ko) * 2006-12-27 2009-09-04 사노피-아벤티스 치환된 이소퀴놀린 및 이소퀴놀리논 유도체
NZ577980A (en) * 2006-12-27 2012-01-12 Sanofi Aventis Cycloalkylamine substituted isoquinolone derivatives
CA2673922C (en) 2006-12-27 2015-09-29 Sanofi-Aventis Cycloalkylamine substituted isoquinoline and isoquinolinone derivatives
MX2009005825A (es) * 2006-12-27 2009-06-16 Sanofi Aventis Derivados de isoquinolina e isoquinolinona sustituidos en calidad de inhibidores de rho-quinasa.
CN101573338B (zh) * 2006-12-27 2013-03-20 塞诺菲-安万特股份有限公司 环烷基胺取代的异喹诺酮和异喹啉酮衍生物
DK2132194T3 (da) * 2006-12-27 2011-06-27 Sanofi Aventis Substituerede isoquinoliner og deres anvendelse som Rho-kinase inhibitorer
JP5377332B2 (ja) 2007-02-06 2013-12-25 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 二環式へテロ環、それらの化合物を含む薬剤、その使用及びその製法
PL2245026T3 (pl) 2008-02-07 2013-01-31 Boehringer Ingelheim Int Spirocykliczne heterocykle, leki zawierające te związki, ich zastosowanie i sposób ich produkcji
ES2444128T3 (es) 2008-05-13 2014-02-24 Astrazeneca Ab Nueva SAL-554
RU2528229C2 (ru) * 2008-06-24 2014-09-10 Санофи-Авентис 6-ЗАМЕЩЕННЫЕ ИЗОХИНОЛИНЫ И ИЗОХИНОЛИНОНЫ ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Rho-КИНАЗЫ
WO2009156100A1 (en) * 2008-06-24 2009-12-30 Sanofi-Aventis Substituted isoquinolines and isoquinolinones as rho kinase inhibitors
NZ590067A (en) * 2008-06-24 2012-09-28 Sanofi Aventis Bi-and polycyclic substituted isoquinoline and isoquinolinone derivatives as rho kinase inhibitors
CA2733153C (en) 2008-08-08 2016-11-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Cyclohexyloxy substituted heterocycles, pharmaceutical compositions containing these compounds and processes for preparing them
KR20140068861A (ko) * 2011-06-28 2014-06-09 인히브릭스 엘엘씨 Wap 도메인 융합 폴리펩티드 및 이의 이용 방법
US10400029B2 (en) 2011-06-28 2019-09-03 Inhibrx, Lp Serpin fusion polypeptides and methods of use thereof
EP2726092B1 (en) * 2011-06-28 2019-06-19 Inhibrx, LP Serpin fusion polypeptides and methods of use thereof

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4473501A (en) * 1981-05-04 1984-09-25 G. D. Searle & Co. Dihydro azino isoquinolines
GB8908229D0 (en) * 1989-04-12 1989-05-24 Smithkline Beckman Intercredit Compounds
BR9708607A (pt) * 1996-04-13 1999-08-03 Astra Pharma Prod Composto composição farmacéutica utilização de um composto processo para tratamento ou redução do risco de doença inflamatória num paciente e para a preparação de um composto e intermediário químico
IL123986A (en) 1997-04-24 2011-10-31 Organon Nv Medicinal compounds
EP1065200A4 (en) * 1998-03-19 2003-01-02 Ajinomoto Kk Aminoisoquinoline DERIVATIVES

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CA2346990A1 (en) 2000-05-04
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