CN114432493B - 一种可注射生物降解温敏水凝胶及其应用 - Google Patents

一种可注射生物降解温敏水凝胶及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种可注射生物降解温敏水凝胶及其应用，该水凝胶能够提高间质干细胞在体内的存活率(在水凝胶内部存活和正常生长长达5天以上)，保持积雪草苷的生物活性并延长积雪草苷的药物作用时间(体外缓慢释放积雪草苷长达7天以上)；与传统水凝胶相比，能够通过调节材料的浓度，进而调节水凝胶的机械性能。

Description

一种可注射生物降解温敏水凝胶及其应用
技术领域
该技术是属于医用生物材料技术领域，具体涉及一种可注射生物降解温敏水凝胶。
背景技术
子宫瘢痕是指剖宫产术后子宫切口愈合不良，子宫瘢痕处肌层变薄，形成一与宫腔相通的凹陷或腔隙，导致部分患者出现一系列相关的临床症状，如异常阴道出血、继发性不孕、慢性盆腔痛、经期腹痛等。子宫瘢痕作为剖宫产术的远期并发症，发生率为19.4％～88.0％不等。子宫瘢痕是切口愈合不良，留下的后遗症，并非手术没做好，其形成的可能原因有：一、剖宫产切口对合不良、感染、缺血、出血、缝合等原因，形成于薄弱处，导致子宫内膜呈疝状，向肌层外突；二、子宫内膜切口异位症随着经期内膜的反复剥脱出血压力增加，向宫腔破裂形成憩室，三、宫腔内容物排出受阻，导致宫腔内压增加，使切口薄弱处向外膨出形成憩室。已经探索了一系列旨在改善子宫瘢痕的治疗方法，包括细胞因子、外源性雌激素、己酮可可碱、柠檬酸西地那非、维生素E、L-精氨酸和低剂量阿司匹林，但这些方法的临床疗效低和并存在一系列副作用。外源性雌激素的给药也与心血管疾病风险升高有关，而己酮可可碱可引起恶心，柠檬酸西地那非可引起头痛和低血压。
因此，迫切需要开发对剖宫产术后子宫瘢痕有效的治疗方法。
发明内容
本申请首次将脐带间充质干细胞(UCMSCs)、积雪草苷微球(AMs)和P127-CHO/AHA水凝胶三者联合应用于治疗子宫瘢痕，为提高临床上子宫瘢痕患者的治愈率及妊娠率提供可行的新疗法。
本发明一方面提供一种可注射生物降解温敏水凝胶，所述凝胶通过以下方法制备：将醛基化普朗尼克与氨基化透明质酸进行化学交联，其中所述醛基化普朗尼克分散于积雪苷微球溶液。本发明的水凝胶能够提高间质干细胞在体内的存活率(在水凝胶内部存活和正常生长长达5天以上)，保持积雪草苷的生物活性并延长积雪草苷的药物作用时间(体外缓慢释放积雪草苷长达7天以上)，能够通过调节材料的浓度，进而调节水凝胶的机械性能。
在一些实施方式中，所述氨基化透明质酸分散于间质干细胞悬液。在一些实施方式中，所述间质干细胞是脂肪间质干细胞、骨髓间质干细胞、脐带间质干细胞或牙髓间质干细胞。在一些实施方式中，所述间质干细胞悬液的浓度为1×105～10×105个/mL。
在一些实施方式中，其中所述普朗尼克的质量浓度为：1％～8％。在一些实施方式中，所述普朗尼克的质量浓度为2％～6％，优选地为4w/v％。
在一些实施方式中，所述氨基化透明质酸的质量浓度为：0.5％～4％。在一些实施方式中，所述氨基化透明质酸的质量浓度为：1％～3％，优选地为2w/v％。
在一些实施方式中，所积雪苷微球溶液中积雪苷微球浓度为50-200μg/mL，优选地为100μg/mL。
在一些实施方式中，所述醛基化普朗尼克为醛基化F127普朗尼克。
在一些实施方式中，所述醛基化F127普朗尼克的质量浓度为4％，氨基化透明质酸的质量浓度为2％，所积雪苷微球溶液中积雪苷微球浓度为100μg/mL，所述间质干细胞悬液的浓度为5×105个/mL。本发明的水凝胶能够提高间质干细胞在体内的存活率(在水凝胶内部存活和正常生长长达5天以上)，保持积雪草苷的生物活性并延长积雪草苷的药物作用时间(体外缓慢释放积雪草苷长达7天以上)，能够通过调节材料的浓度，进而调节水凝胶的机械性能。
本发明另一方面提供上述的可注射生物降解温敏水凝胶中的任一个在制备治疗剖宫产术后子宫瘢痕中的应用。
本发明的水凝胶能够提高间质干细胞在体内的存活率(在水凝胶内部存活和正常生长长达5天以上)，保持积雪草苷的生物活性并延长积雪草苷的药物作用时间(体外缓慢释放积雪草苷长达7天以上)；与传统水凝胶相比，能够通过调节材料的浓度，进而调节水凝胶的机械性能。
附图说明
图1为普朗尼克(F127)和醛基化普朗尼克(F127-CHO)的聚合物的核磁氢谱图。
图2为透明质酸(HA)和氨基化透明质酸(AHA)的聚合物的核磁氢谱图。
图3为实施例10制备的积雪草甘微球的扫描电镜图。
图4为实施例4-6制备的水凝胶的降解性能图。
图5为对比例1和实施例10制备的水凝胶体外释放累计积雪草苷曲线图。
图6为空白对照组、实施例5和实施例10细胞存活率示意图。
图7为实施例5和实施例10封装干细胞对应的细胞增殖示意图。
图8为子宫瘢痕模型大鼠的子宫代表性Masson染色图像。
具体实施方式
本发明的水凝胶
本发明提供了一种新型的负载脐带间充质干细胞和积雪草苷微球的可注射温敏水凝胶，用于子宫瘢痕的修复。其中醛基化普朗尼克(F127-CHO)和氨基化透明质酸(AHA)是一种可注射的温敏水凝胶以解决水凝胶注射困难的问题。本发明以温敏材料普朗尼克(Pluronic)两端修饰醛基作为交联剂，与氨基化的透明质酸反应,利用醛基和伯氨基的席夫碱反应制备了可注射温敏水凝胶。一方面该水凝胶利用普朗尼克的温敏特性，该水凝胶在室温下为液体，生理条件下凝胶化，可便于注射。另一方面，该水凝胶通过交联反应制得，具有足够的弹性，同时积雪草苷以微球的形式存在，包埋药物和细胞后，水凝胶可在体内原位凝胶化，具有缓慢释放药物和细胞的作用，克服了当前细胞封装存活率低或者细胞在水凝胶内部生长状态差的问题，以及药物释放过快等一系列问题。水凝胶治疗的优势除了具有持续释放间质干细胞性能外，还具有持续释放的间质干细胞的外泌体的潜力，导致在较长时间内维持较高的药理学重要化合物的局部浓度，减少在临床环境中重复给药的需要。
积雪草苷，是积雪草中的主要活性成分之一，其生物活性强。研究表明，积雪草苷能够以较低剂量刺激胶原，对葡萄糖胺聚糖生长有明显促进作用，其可以通过诱导加快细胞周期，促进真皮中成纤维细胞胶原组织的合成，改善组织创口愈合的速度，提高局部组织的张力。研究中还发现使用积雪草苷后人皮肤成纤维细胞的基因表达具有明显改变，与基因外形、mRNA、蛋白质产生都有显著的相关性。体外研究结果表明积雪草苷在30μg/mL浓度下可使人皮肤成纤维细胞中的54个基因(包括调控细胞增殖、周期等过程的基因)在多个时间点的表达上调，促进成纤维细胞在一定时间内增殖、迁移。研究发现，积雪草具有抑制瘢痕增生的药理作用，可通过降低TGFβ1mRNA的表达并增加TGFβ3mRNA的表达，引起金属基质蛋白酶抑制剂的表达明显减少，促进I型肢原的降解，进而抑制瘢痕增生。因此，积雪草苷在组织修复和抑制疤痕组织生成中均具有明显的作用，在创伤治疗具有较好的研究价值和应用前景。
术语“间质干细胞”包括脂肪间质干细胞、骨髓间质干细胞、脐带间质干细胞或牙髓间质干细胞。其中，脐带间充质干细胞(UCMSCs)的移植已被研究为一种再生子宫内膜的方法，因为它们能够分化为子宫内膜上皮细胞和基质细胞。然而通过静脉注射来移植干细胞，存在移植效率低、一定的全身意外性风险等缺陷。而通过局部注射干细胞则容易产生异位迁移或者注射不均匀等问题。
术语“分散”意指分散系是将一种或一种以上的物质分散到另一种物质所形成的混合体系。前一种物质称为分散相，后一种物质称为分散介质。按照分散质微粒大小，分散系可分为三种：溶液-微粒大小：<1nm；胶体-微粒大小：1nm～100nm；悬浊液、乳浊液-微粒大小：>100nm。在一些实施方式中，醛基化普朗尼克溶于积雪苷微球溶液。在一些实施方式中，所述氨基化透明质酸溶于间质干细胞悬液。
实施例1.本发明的可注射水凝胶的制备
本发明的可注射水凝胶的制备方法包括以下步骤：
S1：制备醛基化普朗尼克(F127-CHO)，具体操作如下：
将Pluronic F-127(12.3g，1mmol)溶解在70mL无水二氯甲烷中，然后加入30mL吡啶和1.14g(6mmol)对甲苯磺酰氯。体系在室温下反应24小时。之后，混合物用3mol/L盐酸萃取，有机相用10gNaHCO3洗涤。经四氢呋喃/乙醚混合溶剂重结晶，真空干燥后，得F-127对氨基苯磺酸酯。
将F-127对氨基苯磺酸酯(2.5g)溶解在50mL N,N-二甲基甲酰胺中，然后加入4-羟基苯甲醛(0.11g，0.9mmol)和K2CO3(0.12g，0.9mmol)。将混合物在80℃搅拌72小时，然后冷却至室温。加入50mL H2O后用二氯甲烷萃取反应溶液。有机层用MgSO4干燥，浓缩并在冷乙醚中沉淀(过量十倍)。过滤后，将F127-CHO在室温下真空干燥24小时。
S2：制备氨基化透明质酸(AHA)，具体操作如下：
将1g HA溶解在100mL纯水中形成2％的HA水溶液，然后将16g ADH加入到HA水溶液中，磁力搅拌约4小时以获得澄清溶液。将800mg EDC和700mg HoBt溶解于10mL的二甲亚砜/水(v/v＝1：1)溶液中。然后使用稀HCl溶液将上述溶液的pH调节至5.0。反应保持约24小时，然后将pH调节至7.0完成反应。将上述完成反应后的混和溶液置于去离子水中透析水3天，每天至少更换三次透析液，用截留分子量为8-15kDa纤维素透析袋进行透析。经-70℃冷冻干燥后得到冻干的AHA粉末。
S3：制备F127-CHO/AHA复合水凝胶，具体操作如下：
将步骤S1制备的F127-CHO和步骤S2制备的AHA分别溶于去离子水中，再将其置于48孔细胞孔板中，然后使用枪头轻轻搅拌混合物即凝胶化。最后再将孔板放入37度烘箱中5min，进一步二次交联，得到F127-CHO/AHA水凝胶。其中F127-CHO的质量浓度为2％，AHA的质量浓度为1％。
实施例2.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例2制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为2％，AHA的质量浓度为2％。
实施例3.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例3制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为2％，AHA的质量浓度为3％。
实施例4.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例4制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为4％，AHA的质量浓度为1％。
实施例5
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例5制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为4％，AHA的质量浓度为2％。
实施例6.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例6制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为4％，AHA的质量浓度为3％。
实施例7.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例7制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为6％，AHA的质量浓度为1％。
实施例8.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例8制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为6％，AHA的质量浓度为2％。
实施例9.
本实施例与实施例1唯一的区别在于，实施例9制备的F127-CHO/AHA复合水凝胶，其中F127-CHO的质量浓度为6％，AHA的质量浓度为3％。
实施例10.负载积雪草苷微球的可注射水凝胶的制备
本实施例提供一种负载积雪草苷微球的可注射水凝胶的制备方法，包括以下步骤：
S1：制备积雪草甘微球(AMs)，具体操作如下：
将100mg积雪草苷溶解在0.5mL乙醇溶液中，取0.5g PLGA溶于5mL二氯甲烷，溶解后构成内相，将积雪草苷乙醇溶液在搅拌状态下加入内相溶液中，将乳化剂聚乙烯醇0.5g加入到200mL去离子水中制成外相，然后将内相溶液缓缓滴入到外相溶液中，并于40℃条件下持续搅拌4h，并使二氯甲烷挥发，过滤后得到的多孔微球用蒸馏水洗涤以除去聚乙烯醇，洗净后冷冻干燥即得积雪草甘微球。
S2：制备负载积雪草苷微球的可注射水凝胶，具体操作如下：
将实施例1中步骤S1制备的F127-CHO和步骤S2制备的AHA以及积雪草苷微球(AMs)分别溶于去离子水中，再将其置于48孔细胞孔板中，然后使用枪头轻轻搅拌混合物即凝胶化。最后再将孔板放入37度烘箱中5min，进一步二次交联，得到F127-CHO/AHA/AMs水凝胶。其中F127-CHO的质量浓度为4％，AHA的质量浓度为2％，AMs的浓度为100μg/mL。
实施例11.F127-CHO/AHA/AMs/UCMSCs水凝胶的制备
首先将积雪草苷微球溶于DMEM培养基中配置成100μg/mL的积雪草苷微球溶液，UCMSCs细胞稀释到5×105个/mL的细胞悬液，然后将0.2mL F127-CHO(4％w/v的积雪草苷微球溶液)和0.2mL AHA(2％w/v的细胞悬液)置于48孔细胞孔板中，然后使用枪头轻轻搅拌混合物即凝胶化。再将孔板放入37度培养箱中5min，进一步二次交联，得到F127-CHO/AHA/AMs/UCMSCs水凝胶。
对比例1
首先将积雪草苷(AM)溶于实施例1中步骤S1制备的F127-CHO，然后将其与步骤S2制备的AHA混合，置于48孔细胞孔板中，然后使用枪头轻轻搅拌混合物即凝胶化。最后再将孔板放入37度烘箱中5min，进一步二次交联，得到F127-CHO/AHA/AM水凝胶。其中F127-CHO的质量浓度为4％，AHA的质量浓度为2％，AM的浓度为100μg/mL。
表1：实施例1～9制备的水凝胶F127-CHO、AHA质量浓度配比
组别 F127-CHO质量浓度(％) AHA质量浓度(％)
实施例1 2 1
实施例2 2 2
实施例3 2 3
实施例4 4 1
实施例5 4 2
实施例6 4 3
实施例7 6 1
实施例8 6 2
实施例9 6 3
对实施例1～10制备的水凝胶进行性能检测
一、核磁测试
分别称取15mg实施例1中步骤S1得到F127-CHO和和步骤S2得到AHA，将其溶解于1mL的氘代重水，然后装入干净的核磁管中，利用核磁共振光谱仪在室温条件下进行核磁结构测定，并采用MestReNova软件进行图谱分析。
从图1和图2核磁对比分析可知，F127-CHO在δ＝7.90和7.17ppm处的芳香环的新共振信号、在δ＝9.81ppm处的醛基，表明形成F127-CHO。HA的乙酰基在1.9ppm处出现峰值。在3.2ppm-4.0ppm观察到HA中碳水化合物重复单元的质子。AHA在1.61ppm和2.23ppm中出现ADH的亚甲基质子峰，表明ADH与HA成功偶联。综上所述，我们己经成功的制备了F127-CHO和AHA。
二、扫描电镜测试
将实施例10中步骤S1得到积雪草苷微球(AMs)和实施例4-6制备的冻干的水凝胶表面真空喷金后扫描电镜拍照，加速电压为5kV。
由图3可知，制备的积雪草苷微球呈圆形，说明微球制备成功。从图4可知，实施例4-6制备的水凝胶呈均匀的多孔网状结构，有利于细胞和血管的生长。三、溶胀性能测试
将水凝胶浸泡于pH＝7.4的PBS溶液中，置于37℃培养箱中；在预设的时间点，取出样品，并将样品表面过多的水用滤纸吸除，再进行称重。然后按下面公式计算丝胶蛋白水凝胶的吸水膨胀率。(其中Ws为膨胀状态下的重量，W0为水凝胶初始重量)。
Figure GDA0004126107710000091
如表2所示，实验表明复合水凝胶具有很好的溶胀性能，并且该水凝胶的溶胀性能可通过控制F127-CHO和AHA的比例调节。
表2水凝胶溶胀率
分组 溶胀率(100％)
实施例1 32.23±3.81
实施例2 38.77±3.96
实施例3 45.02±4.10
实施例4 57.91±9.26
实施例5 75.60±9.44
实施例6 84.56±5.24
实施例7 77.33±7.47
实施例8 86.50±6.92
实施例9 93.95±6.80
四、压缩性能测试
将高度与切面直径均为8mm的圆柱形水凝胶样品置于万能材料试验测试仪测量平台上，调节上下平板使与水凝胶刚好接触而不受力，然后以1mm/min压缩速率压缩至水凝胶断裂停止测试。每个样品进行3个平行样测试，测量后进行统计分析比较。组织修复的水凝胶应具有良好的弹性，以保持其使用时不会对周围其他组织造成挤压。实施例1～9制备的水凝胶的压缩性能如表3所示。可见当F127-CHO浓度固定为4％时，制备的水凝胶具有最大的压缩强度。
表3：实施例1～9制备的水凝胶的压缩模量
分组 压缩强度(kPa)
实施例1 1.4
实施例2 1.6
实施例3 1.9
实施例4 3.2
实施例5 3.8
实施例6 4.0
实施例7 1.2
实施例8 1.5
实施例9 2.1
五、体外积雪草甘的释放
采用累积释放测定不同时间点下积雪草苷微球、实施例5和实施例10制备的水凝胶中积雪草苷的释放曲线。具体方法为将积雪草苷微球和1个水凝胶(600μL)加入到含有10mL的PBS缓冲溶液的50mL离心管中，然后于37℃摇床中120rpm摇荡，每个设置时间点取100μL的PBS，冷冻保存，然后补加等量的PBS溶液。待收集完所有时间点的样品后，用HPLC方法测试出药物释放浓度，从而绘制药物累积释放曲线。
从结果可以看出，积雪草苷溶液在对比例1制备的水凝胶中释放比较迅速，90％的药物在2天之内释放，而积雪草苷微球能释放药物长达7天。与此同时，实施例10制备的负载积雪草苷微球的水凝胶在5天内以基本恒定的速度释放，累积释放量约为66.7％，具有缓释效果。其中1天内的释放速率略高于1天-5天的释放速率，这可能是由于之前多孔微球表面吸附的未包封药物释放和水凝胶外表面的微球导致。并且，本发明水凝胶的释放率也优于积雪草苷微球的释放速率，说明本发明凝胶体系能够协同提供微球的缓释能力。
六、生物相容性检测
将制备好的水凝胶浸入75％的酒精中，之后，用无菌去离子水清洗水凝胶3次。然后将水凝胶浸入DMEM/F12+GlutaMAX细胞培养基中，置于二氧化碳培养箱中12小时。UCMSCs分离并重新悬浮在培养基中，接种在处理过的水凝胶上，并在二氧化碳培养箱中培养5天，分别在UCMSCs种植后的第1天，第3天和第5天加入CCK-8工作液，在正常细胞培养条件下反应2h后测定OD450值，计算细胞存活率。
如图5所示，水凝胶用UCMSCs细胞做的细胞毒性数据图，可以发现，对于UCMSCs细胞来说，F127-CHO/AHA水凝胶体系都具有很低的细胞毒性，可以忽略不计，因此我们的水凝胶体系细胞毒性较低，具有较好的生物相容性和作为生物材料应用如组织工程等的可能性，可以用来负载UCMSCs进行相关实验研究。
七、细胞封装能力检测
首先，先准备好混合均匀的水凝胶预聚物溶液，然后将提前配置好的5μL UCMSCs悬浮液(2×105个/ml)，迅速加入到预聚物溶液中，迅速轻轻混合均匀，将负载了UCMSCs的凝胶转移至96孔板中，然后加入200μl培基，并且每隔24h更换一次培基。将每个时间点的孔板取出，用PBS溶液洗两次，取出其中负载细胞的凝胶，然后均匀地切碎。随后将混合物离心处理，留下上层清液，加入一定量的CCK-8试剂，继续恒温培养2h，后续操作与上述生物相容性测试一致。
图6展示了水凝胶封装UCMSCs的定量实验研究，从图中我们可以发现UCMSCs在水凝胶中的存活状态较好。而且如图7所示，随着时间的推移，UCMSCs有着一定程度的增殖生长，随着时间的增加，OD值呈现一定幅度的增长趋势。这也从另一方面显示了F127-CHO/AHA水凝胶体系具有很低的生物毒性。同时含有积雪草甘微球的水凝胶，细胞生长转态更好。
八、水凝胶治疗大鼠子宫瘢痕效果评价
在无菌环境下，用戊巴比妥(45mg/kg)麻醉大鼠，腹腔用碘消毒。沿腹部白线纵向切开3-4cm，进入腹腔，分离组织，确定子宫位置。取右侧子宫角，在子宫体与子宫角交界处纵切约1cm的切口，造成子宫宫腔刀伤，随后用5-0缝线缝合切口宫腔，注射加入各分组生物材料于宫腔内。左子宫角用同样的方法操作。用生理盐水冲洗腹腔，逐层封闭腹腔。将大鼠分为5组:1)假手术组；2)PBS模型组；3)实施例5制备的F127-CHO/AHA水凝胶治疗组；4)实施例10制备的F127-CHO/AHA/AMs水凝胶治疗组；5)实施例11制备的F127-CHO/AHA/AMs/UCMSCs水凝胶治疗组。
如图8所示，假手术组子宫腔及子宫内膜腺形态正常。但模型组宫腔部分闭锁，内膜萎缩，腺体数量减少，提示子宫瘢痕模型成功建立。与模型组比较，F127-CHO/AHA水凝胶组子宫腔封闭，内膜萎缩程度较轻。水凝胶可预防术后腹膜粘连。与模型组比较，GelMA/ColMA/hAMSCs水凝胶组宫腔较大，子宫内膜未见萎缩。
同时，F127-CHO/AHA/AMs和F127-CHO/AHA/AMs/UCMSCs水凝胶组恢复效果与假手术组基本一致。UCMSCs具有子宫内膜细胞分化潜能，水凝胶组可促进大鼠子宫内膜修复，且AMs中积雪草苷的释放有利于瘢痕修复。

Claims (5)

1.一种可注射生物降解温敏水凝胶，其特征在于，所述凝胶通过以下方法制备：将醛基化普朗尼克与氨基化透明质酸进行化学交联，其中所述醛基化普朗尼克分散于积雪苷微球溶液；所述氨基化透明质酸分散于间质干细胞悬液；
所述醛基化普朗尼克的质量浓度为4％；所述氨基化透明质酸的质量浓度为2％～3％；所述间质干细胞悬液的浓度为1×105～10×105个/mL；所积雪苷微球溶液中积雪苷微球浓度为50-200μg/mL。
2.根据权利要求1所述的可注射生物降解温敏水凝胶，其特征在于，所述间质干细胞是脂肪间质干细胞、骨髓间质干细胞、脐带间质干细胞或牙髓间质干细胞。
3.根据权利要求1或2所述的可注射生物降解温敏水凝胶，其特征在于，所述醛基化普朗尼克为醛基化F127普朗尼克。
4.根据权利要求3所述的可注射生物降解温敏水凝胶，其特征在于，所述醛基化F127普朗尼克的质量浓度为4％，氨基化透明质酸的质量浓度为2％，所积雪苷微球溶液中积雪苷微球浓度为100μg/mL，所述间质干细胞悬液的浓度为5×105个/mL。
5.权利要求1-4中任一项所述的可注射生物降解温敏水凝胶在制备治疗剖宫产术后子宫瘢痕材料中的应用。
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