CN114224925A - 一种调节肠道健康的益生菌组合物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种调节肠道健康的益生菌组合物及其制备方法，涉及医药生物技术领域。所述的组合物主要成分为益生菌、益生元和膳食纤维，无毒副作用，使用安全，不会对身体造成不了反应；在实施过程中将益生菌和益生元混合使用时，能够在保证有益菌正常繁殖的条件下，降低有害菌的含量，本发明采用质量比1:1:3‑5的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精作为益生元，以质量比为3:2:1的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌作为益生菌，两者混合能够发挥较好的调节肠道健康的效果。

Description

一种调节肠道健康的益生菌组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及医药生物技术领域，具体涉及一种调节肠道健康的益生菌组合物及其制备方法。
背景技术
益生菌是一类以通过改善宿主肠道微生物菌群的平衡而发挥作用的活性微生物，是人体肠道重要的生理细菌，具有改善肠道菌群结构、促进肠道中有益菌的增殖、抑制有害菌的生长、消除致癌因子、提高机体免疫力、降低胆固醇、减缓乳糖不耐症等重要生理功效。
双歧杆菌与乳杆菌是人肠道中益生菌的代表，有益菌在肠道内可以利用人体的代谢废物进行生长繁殖，产生抗生素、部分维生素、有机酸等有益成分，降低肠道pH，抑制韦永氏球菌、梭菌等腐败菌的增殖，减少腐败物质产生。有益菌还可以构建免疫防御系统，对保证人体健康，预防疾病具有重要作用。因此，保持肠道有益菌群的数量是宿主保持健康的关键。
肠杆菌属于条件致病菌，肠球菌和产气荚膜梭菌属于肠道有害菌，这些菌增多加上人体抵抗力不足会导致恶心、呕吐、腹泻等一系列疾病产生。
因此出现了很多调节肠道菌群的产品。如中药类产品：调脾胃、促消化为主，但是并没有起到改善肠道菌群的作用；中药加上益生菌产品：中药调脾胃，益生菌改善肠道，但是效果却并不理想。
如中国专利申请201710179071.6中公开了一种具有调节肠道菌群结构作用的组合物及其制备方法，它由地黄4-20重量份，茯苓1-5重量份和人参0.1-3重量份制成。该发明提供的天然植物组合物，通过大量试验筛选、优化得到最佳原料组成和用量配比，并经优选的现代制备工艺制备而成，该申请主要以中药为原料，虽然能够降低有害菌的含量，但是同时会很大程度上减少双歧杆菌与乳杆菌的含量。
在如中国专利申请201910161548.7中公开了一种调节肠道、预防便秘的益生菌组合物，其以植物乳杆菌菌粉体以及植物乳杆菌代谢物粉体为活性成分。该发明实施例提供一种调节肠道、预防便秘的益生菌组合物，其有效改善中老年人便秘腹/泻及带来的众多疾病，改善肠道的菌群环境，但是从其效果上看，效果不理想。
因此，需要开发一种能够更好调节肠道菌群平衡，能够更好的促进有益菌生长，减少有害菌繁殖的益生菌组合物。
发明内容
基于现有技术中存在的不足，本发明旨在提供一种能够更好调节肠道菌群平衡，能够更好的促进有益菌生长，减少有害菌繁殖的益生菌组合物及其制备方法。
为了实现以上目的，本发明采取以下技术方案：
一种调节肠道健康的益生菌组合物，所述的组合物按重量份数计，包括益生元5-15份、益生菌5-15份和膳食纤维20-50份；
优选地，所述的组合物按重量份数计，包括益生元6-12份、益生菌6-12份和膳食纤维30-48份；
再优选地，所述的组合物按重量份数计，包括益生元10-12份、益生菌10-12份和膳食纤维35-42份。
作为一些优选的实施方案，所述的益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4-8；
优选地，所述的益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4-6；
进一步优选地，所述的益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4。
其中，所述的益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、低聚甘露糖、菊粉、水苏糖、大豆低聚糖、β葡聚糖和抗性糊精中的一种或几种；
优选地，所述的益生元选自低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、菊粉、水苏糖、大豆低聚糖、β葡聚糖和抗性糊精中的一种或几种；
再优选地，所述的益生元选自菊粉、水苏糖、大豆低聚糖、β葡聚糖和抗性糊精中的一种或几种；
进一步优选地，所述的益生元为质量比1:1:3-5的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精。
在进一步优选地，所述的益生元为质量比1:1:4的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精。
所述的益生菌是由瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌组成的混合物；
所述的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌的质量比为3:2:1。
所述的益生菌为市售的瑞士乳杆菌Rosell-52、鼠李糖乳杆菌HN001和长双歧杆菌Rosell-175，所述的益生菌为有效活菌数为1-10×108cfu/g的菌剂。
所述的膳食纤维选自紫薯粉、芦笋粉、魔芋和胡萝卜粉中的一种或几种。
本发明在通过大量研究发现，当益生菌和益生元混合使用时，能够在保证有益菌正常繁殖的条件下，降低有害菌的含量，本发明采用质量比1:1:3-5的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精作为益生元，以质量比为3:2:1的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌作为益生菌，两者混合不仅能够发挥较好的润肠通便效果，而且与其余组分之间具有优异的协同作用。
本发明通过使用益生菌、益生元和膳食纤维混合使用，并控制其质量比，能够更好的起到调节肠道健康的效果。
在一些优选的实施方案中，所述的组合物中还含有芦荟多糖和橙皮苷，所述的芦荟多糖和橙皮苷的质量比为2-5:1；优选为3:1。
所述的芦荟多糖和橙皮苷的含量为益生菌含量的15-25％；优选为18-22％；再优选为20％。
本发明在实施过程中意外地发现在组合物中添加一定含量的芦荟多糖和橙皮苷能够更好的促进益生菌的稳定性，通过在组合物中添加益生菌含量10-20％的芦荟多糖和橙皮苷，能够使活菌数长时间保持在较高水平。
作为本发明一些优选的实施方案，所述的组合物按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000031
再优选地，所述的组合物按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000032
Figure BDA0003428846940000041
本发明还提供了上述组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)取膳食纤维混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
本发明提供的组合物可以作为防治消化不良或便秘的保健品直接服用，也可以加入保健品领域允许的辅料制备成产品。
本发明提供的组合物还可以用于制备防治消化不良、便秘等肠道相关疾病的药物，所述药物优选为口服剂型。作为一种优选方案，所述药物可以以所述组合物作为有效成分，再加入药学领域允许的辅料，制备成可口服的剂型。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供组合物主要成分为益生菌、益生元和膳食纤维，无毒副作用，使用安全，不会对身体造成不良反应；
(2)本发明在实施过程中将益生菌和益生元混合使用时，能够在保证有益菌正常繁殖的条件下，降低有害菌的含量，本发明采用质量比1:1:3-5的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精作为益生元，以质量比为3:2:1的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌作为益生菌，两者混合不仅能够发挥较好的润肠通便效果，而且与其余组分之间具有优异的协同作用。
(3)本发明通过控制益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4-6，并在组合物中添加一定含量的芦荟多糖和橙皮苷能够明显提高组合物的稳定性，长期放置益生菌依然能够保持较高的活性。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步阐述，但这些实施例不对本发明构成任何限制。
以下实施例中所述的瑞士乳杆菌Rosell-52购自广州能靓生物科技有限公司，单价1746元每公斤；鼠李糖乳杆菌HN001购自广州曼建新材料有限公司，单价24800元每公斤；短双歧杆菌M-16V购自广州市乐丽健康科技有限公司，单价18000元每公斤。
实施例1一种调节肠道健康的益生菌组合物
按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000051
制备方法：
(1)取紫薯粉和胡萝卜粉混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
实施例2一种调节肠道健康的益生菌组合物
按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000052
制备方法：
(1)取紫薯粉和胡萝卜粉混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
实施例3一种调节肠道健康的益生菌组合物
按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000061
制备方法：
(1)取芦笋粉和紫薯粉混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
实施例4一种调节肠道健康的益生菌组合物
按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000062
制备方法：
(1)取胡萝卜粉和紫薯粉混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
对比例1
与实施例4的区别在于：
不含芦荟多糖和橙皮苷，其他步骤和含量与实施例4相同。
对比例2
与实施例4的区别在于：
与实施例4的区别在于：不含有橙皮苷，芦荟多糖2.4份；其他步骤和含量与实施例4相同。
对比例3
与实施例4的区别在于：
益生菌仅为鼠李糖乳杆菌HN001和长双歧杆菌Rosell-175，即鼠李糖乳杆菌HN0018份和长双歧杆菌Rosell-175 4份；其他组分和含量与实施例4相同。
对比例4
与实施例4的区别在于：益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:3，即按重量份数计，包括：
Figure BDA0003428846940000071
对比例5
现有技术CN109287790A中公开的组合物。
效果实验
1、肠道菌群数量检测(该方法参考现有技术CN106942724A中公开的方法)
1.1实验样品：实施例1-4以及对比例1-5制备的益生菌组合物样品；
1.2实验动物：55只昆明小鼠，均为雄性，体重18-22g，由东阳光集团研究院生物所提供。
1.3、实验试剂：伊红美蓝琼脂、双歧杆菌选择性培养基(BBL)、乳杆菌选择性培养基(Lbs)、胰胨-亚硫酸盐-环丝氨酸琼脂基础(TSC)、D-环丝氨酸溶液、甘油、生理盐水，低聚果糖，乙酸，吐温80；
1.4分组及给药：55只小鼠随机分为11组。①空白对照组，以0.10mL/10g鼠重生理盐水每日2次灌胃，连续14d。②阳性对照组，用低聚果糖(OF)2.40g，用无菌蒸馏水稀释成20mg/mL，以0.10mL/10g鼠重生理盐水每日2次灌胃，连续14d。③药物组：用50g组合物，加无菌蒸馏水稀释至200mL，以0.10mL/10g鼠重生理盐水每日2次灌胃，连续14d。
在给药前，无菌采集小鼠粪便，加20％灭菌甘油生理盐水，以1：10稀释，制成均匀混悬液，1000转速离心，取上清，存于-80℃冰箱，待分析，最后一次给予组合物24h后，与实验前同样方式取直肠粪便，处理方法同上。
将采集到的肠道菌实验粪便样品，依次10倍递增稀释成一系列不同稀释度的含菌液至10-8，选择合适的稀释浓度分别接种在各培养基上。培养后，以菌落形态、格兰染色镜检、生化反应等鉴定计数菌落，计算出每克湿便中的菌落，取对数后进行统计学处理，具体检测数据见下表。
表1
Figure BDA0003428846940000081
实验结果：给药前后，小鼠均活泼好动，毛色正常，大便正常，且食欲良好。
表2实施例1-4及对比例1-5对小鼠肠道双歧杆菌和乳杆菌数量的影响log(x±S)cfu/g
Figure BDA0003428846940000091
注：*P＜0.05
根据上表2的检测数据可以看出，本发明制备的益生菌组合物相对于空白组能够提高双歧杆菌和乳杆菌的含量，尤其是实施例4制备的益生菌组合物，即采用质量比1:1:4的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精作为益生元，以质量比为3:2:1的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌作为益生菌，两者混合不仅能够发挥较好的润肠通便效果，而且与其余组分之间具有优异的协同作用，进而保证有益菌正常繁殖，增加肠道中有益菌的含量，达到调节肠道健康的效果。
表3实施例1-4及对比例1-5对小鼠肠道肠杆菌和产气荚膜梭菌的影响log(x±S)cfu/g
Figure BDA0003428846940000092
注：*P＜0.05
根据上表3的检测数据可以看出，本发明制备的益生菌组合物相对于空白组能够降低肠杆菌和产气荚膜梭菌的含量，尤其是实施例4制备的益生菌组合物，即采用质量比1:1:4的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精作为益生元，以质量比为3:2:1的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌作为益生菌，两者混合不仅能够发挥较好的润肠通便效果，而且与其余组分之间具有优异的协同作用，进而保证有益菌正常繁殖，降低肠道中有害菌的含量，达到调节肠道健康的效果。
1、稳定性试验
将制备的益生菌组合物在24±5℃条件下放置2年，分别在放置第0月，6月，12月和24月时随机取出样品，检测组合物活菌数，具体检测结果见下表2。
变化率％＝(0个月活菌数-24个月活菌数)/0个月活菌数×100％
表4实施例1-4及对比例1-2制备的组合物的活菌数(cfu/g)
实例 0个月 6个月 12个月 24个月 变化率％
实施例1 9.6×10<sup>8</sup> 4.5×10<sup>8</sup> 2.2×10<sup>8</sup> 1.08×10<sup>8</sup> 88.75％
实施例2 9.8×10<sup>8</sup> 4.7×10<sup>8</sup> 2.3×10<sup>8</sup> 1.12×10<sup>8</sup> 88.6％
实施例3 8.6×10<sup>8</sup> 6.5×10<sup>8</sup> 4.6×10<sup>8</sup> 2.3×10<sup>8</sup> 73.3％
实施例4 8.8×10<sup>8</sup> 6.6×10<sup>8</sup> 5.2×10<sup>8</sup> 3.1×10<sup>8</sup> 64.8％
对比例1 9.2×10<sup>8</sup> 4.2×10<sup>8</sup> 1.9×10<sup>8</sup> 9.86×10<sup>7</sup> 89.2％
对比例2 8.9×10<sup>8</sup> 4.4×10<sup>8</sup> 2.1×10<sup>8</sup> 9.76×10<sup>7</sup> 89.0％
根据上表4的检测数据可以看出，本发明实施例和对比例制备的益生菌组合物活菌数都会出现一定程度的降低，但是芦荟多糖和橙皮苷对益生菌组合物的稳定性具有明显影响，在益生菌组合物中添加益生菌含量的15-25％，质量比为2-5:1芦荟多糖和橙皮苷会使益生菌组合物的稳定性明显提高，放置24个月后活菌数量仍在108cfu/g数量级，尤其是在益生菌组合物中添加益生菌含量的20％，质量比为3:1芦荟多糖和橙皮苷会使益生菌组合物的稳定性明显提高，放置24个月益生菌组合物中活菌数变化率仅为64.8％，而实施例1-2以及对比例1-3中不添加芦荟多糖和橙皮苷，或者改变两者的质量比不在本发明保护范围内时，得到的益生菌组合物的稳定性明显降低。
以上所述，仅为本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制；凡本行业的普通技术人员均可按说明书所述和以上所述而顺畅地实施本发明；但是，凡熟悉本专业的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，可利用以上所揭示的技术内容而作出的些许更动、修饰与演变的等同变化，均为本发明的等效实施例；同时，凡依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何等同变化的更动、修饰与演变等，均仍属于本发明的技术方案的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种调节肠道健康的益生菌组合物，其特征在于：所述的组合物按重量份数计，包括益生元5-15份、益生菌5-15份和膳食纤维20-50份；
所述的益生菌是由瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌组成的混合物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述的组合物按重量份数计，包括益生元6-12份、益生菌6-12份和膳食纤维30-48份；
所述的益生菌是由瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌组成的混合物。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述的益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4-8。
4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于：所述的益生元、益生菌和膳食纤维的质量比为1:1:4。
5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：所述的益生元选自低聚果糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚木糖、低聚甘露糖、菊粉、水苏糖、大豆低聚糖、β葡聚糖和抗性糊精中的一种或几种。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于：所述的益生元为质量比1:1:3-5的菊粉、β葡聚糖和抗性糊精。
7.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述的瑞士乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和长双歧杆菌的质量比为3:2:1。
8.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述的组合物中还含有芦荟多糖和橙皮苷，所述的芦荟多糖和橙皮苷的质量比为2-5:1。
9.根据权利要求6-8任一项所述的组合物，其特征在于：按重量份数计，包括：
Figure FDA0003428846930000011
Figure FDA0003428846930000021
10.一种权利要求1-9任一项所述的组合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)取膳食纤维混合均匀，得到混合干粉；
(2)将步骤(1)中制备的混合干粉和芦荟多糖、橙皮苷混合均匀后，灭菌，再于与益生菌和益生元混合均匀即得到所述的组合物。
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