CN105533707A - 一种人参小分子营养成分制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，包括：步骤1：按照枯草芽孢杆菌15-30份、酿酒酵母菌20-35份、植物乳杆菌20-40份、嗜酸乳杆菌0-20份的重量配比混合得到复合菌，将所述复合菌在复合培养基中于25-35℃条件下密闭发酵18-72小时，得到微生物发酵剂；步骤2：将人参、蜜糖、水和所述微生物发酵剂混合均匀后，于25-35℃条件下密闭发酵10-15天，得到发酵物；步骤3：将所述发酵物于40-60℃条件下干燥，并粉碎过筛，得到所述人参小分子营养成分制剂。本发明所述制备方法主要是利用多种微生物发酵生产人参小分子营养成分的技术方法，有较好的免疫调节作用，工艺也相对简单易行。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术，具体涉及一种营养成分制剂，尤其涉及一种人参小分子营养成分制剂及其制备方法。
背景技术
人参，是一种五加科人参属草本植物人参(Panaxginsongc.A.Meyer)的干燥根，其主要成分为人参皂苷。目前已经从人参属植物中分离出50多种人参皂苷单体化合物，其具有抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老等功效。人参皂苷Rb1和Rg1在天然植物中含量较高，而Rg3、Rh2、compandK(20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20(S)-原人参二醇)等，虽然药效更为珍贵，但是含量甚微。许多药理研究表明，稀有人参皂苷(如Rh1、Rh2、Rg3、Rb3等)，在某些难治性疾病如肿瘤治疗方面显示出其独特的疗效。因此，如何获得大量的稀有人参皂苷并将其开发成新型抗肿瘤药物成为现代药学研究的重点。
目前来看，人们服用人参及人参制剂后，人参皂苷类几乎不被人体吸收，而是在体内肠道菌群的作用下完成分解、吸收、分布等代谢全过程而发挥功效。因此，利用微生物转化法对人参皂苷进行生物转化制备代谢产物稀有人参皂苷，找出一种能有效提高稀有人参皂苷含量的微生物转化方法，并应用于工业化生产，对医药产业的发展具有重大意义。
现在对人参研究的主要部位是人参根茎，发酵菌种大多数是以真菌为发酵菌株，部分研究选用肠道正常菌群，也有以大型药食兼用真菌做发酵菌株。其中，CN1738905公开了一种用乳酸菌发酵的人参、含有乳酸菌发酵人参的酸乳、及其制备过程中所用的乳酸菌；CN102366373A公开了一种具有增强美白作用的人参发酵提取物的制备方法；CN104585826A公开了一种人参发酵制品及其制备方法；其均是使用单一菌种对人参进行发酵，发酵产物的效果并不尽如人意。
发明内容
基于上述的背景技术，本发明的目的是提供一种人参小分子营养成分制剂及其制作方法，主要是利用多种微生物发酵生产人参小分子营养成分的技术方法，有较好的免疫调节作用，工艺也相对简单易行。
本发明的技术方案包括一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，其特征在于，包括：
步骤1：按照枯草芽孢杆菌15-30份、酿酒酵母菌20-35份、植物乳杆菌20-40份、嗜酸乳杆菌0-20份的重量配比混合得到复合菌，将所述复合菌在复合培养基中于25-35℃条件下密闭发酵18-72小时，得到微生物发酵剂；
步骤2：将人参、蜜糖、水和所述微生物发酵剂混合均匀后，于25-35℃条件下密闭发酵10-15天，得到发酵物；
步骤3：将所述发酵物于40-60℃条件下干燥，并粉碎过筛，得到所述人参小分子营养成分制剂。
进一步地，在本发明的实施例中，所述制备方法还包括菌种的培养，其中具体包括：
将枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为26-40℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为16-40h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将酿酒酵母菌菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为20-35℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为20-48h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将植物乳杆菌菌种和嗜酸乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中进行静置培养，其中，培养温度为25-40℃，培养时间为48-72h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用。
在本发明的实施例中，其中：
所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)为保藏编号为ACCC10619的菌种；
所述酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)为保藏编号为ACCC20065的菌种；
所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)为保藏编号为ACCC11118的菌种；
所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)为保藏编号为ACCC10637的菌种。
进一步地，所述复合培养基的组分及其重量配比为：糖蜜1-5份、蛋白胨0-1份、水94-99份。
所述复合菌与复合培养基的重量比为(5-20)：(80-95)。
所述步骤1中的发酵时间更优选为18-48小时。
在本发明的一个实施例中，步骤2中，所述人参、蜜糖、水和微生物发酵剂的重量配比为(50-84)：(1-5)：(10-25)：(5-20)，其中，优选地，所述人参经过清洗和粉碎的处理，成为人参粉。
在本发明的其中一个实施例中，所述过筛是40-100目筛。
最终得到的所述人参小分子营养成分制剂优选为黄色或棕色的固体。
本发明的技术方案还包括一种上述所述的制备方法制备得到的人参小分子营养成分制剂。
本发明所述的技术方案利用多种微生物对人参粉进行发酵，采用常温下的固体发酵工艺，生产设备要求少，能耗小，成本低。发酵所得的人参小分子营养成分具有独特的发酵香味，有较好的免疫调节作用。
具体实施方式
本发明提供了一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，其特征在于，包括：
步骤1：按照枯草芽孢杆菌15-30份、酿酒酵母菌20-35份、植物乳杆菌20-40份、嗜酸乳杆菌0-20份的重量配比混合得到复合菌，将所述复合菌在复合培养基中于25-35℃条件下密闭发酵18-72小时，得到微生物发酵剂；
步骤2：将人参、蜜糖、水和所述微生物发酵剂混合均匀后，于25-35℃条件下密闭发酵10-15天，得到发酵物；
步骤3：将所述发酵物于40-60℃条件下干燥，并粉碎过筛，得到所述人参小分子营养成分制剂。
进一步地，在本发明的实施例中，所述制备方法还包括菌种的培养，其中具体包括：
将枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为26-40℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为16-40h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将酿酒酵母菌菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为20-35℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为20-48h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将植物乳杆菌菌种和嗜酸乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中进行静置培养，其中，培养温度为25-40℃，培养时间为48-72h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用。
在本发明的实施例中，其中：
所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)为保藏编号为ACCC10619的菌种；
所述酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)为保藏编号为ACCC20065的菌种；
所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)为保藏编号为ACCC11118的菌种；
所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)为保藏编号为ACCC10637的菌种。
进一步地，所述复合培养基的组分及其重量配比为：糖蜜1-5份、蛋白胨0-1份、水94-99份。
所述复合菌与复合培养基的重量比为(5-20)：(80-95)。
所述步骤1中的发酵时间更优选为18-48小时。
在本发明的一个实施例中，步骤2中，所述人参、蜜糖、水和微生物发酵剂的重量配比为(50-84)：(1-5)：(10-25)：(5-20)，其中，优选地，所述人参经过清洗和粉碎的处理，成为人参粉。
在本发明的其中一个实施例中，所述过筛是40-100目筛。
最终得到的所述人参小分子营养成分制剂优选为黄色或棕色的固体。
本发明还提供了一种上述所述的制备方法制备得到的人参小分子营养成分制剂。
根据本发明的上述技术方案，现通过以下实施例对本发明的内容作进一步地解释和说明。
实施例1
一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，包括：
步骤1，枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的培养：将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤液体培养基中，在38℃，220rpm振荡培养24小时，待培养基浑浊后取出；将酿酒酵母菌菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，在30℃，220rpm振荡培养48小时，待培养基浑浊后取出；将植物乳杆菌菌种和嗜酸乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中，在37℃条件下培养48小时，待培养基浑浊后取出，分别放入4℃冰箱保存待用；
步骤2，按重量比枯草芽孢杆菌25％、酿酒酵母菌35％、植物乳杆菌30％、嗜酸乳杆菌10％比例混合，加入重量比为糖蜜5％，蛋白胨0.8％，水94.2％的培养基，菌种和培养基的重量比为1：10，在35℃条件下密闭发酵40小时，制得微生物发酵剂；
步骤3，将人参洗净并粉碎，与糖蜜、水和所述微生物发酵剂按重量比60：5：20：15混合，放入密封塑料桶或塑料袋内，在28℃发酵12天；
步骤4，发酵结束后，将物料放入干燥机中，在55℃温度下干燥后经粉碎机粉碎过100目筛后，即可得到所述人参小分子营养成分制剂，其为黄色固体。
实施例2
一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，包括：
步骤1，枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌的培养：将从中国农业微生物菌种保藏管理中心购买的枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤液体培养基中，在35℃，200rpm振荡培养30小时，待培养基浑浊后取出；将酿酒酵母菌菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，在30℃，180rpm振荡培养42小时，待培养基浑浊后取出；将植物乳杆菌菌种和嗜酸乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中，在35℃条件下培养60小时，待培养基浑浊后取出，分别放入4℃冰箱保存待用；
步骤2，按重量比枯草芽孢杆菌30％、酿酒酵母菌20％、植物乳杆菌30％、嗜酸乳杆菌20％比例混合，加入重量比为糖蜜5％，蛋白胨0.5％，水94.5％的培养基，菌种和培养基的重量比为1：9，在30℃条件下密闭发酵48小时，制得微生物发酵剂；
步骤3，将人参洗净并粉碎，与糖蜜、水和所述微生物发酵剂按重量比65：5：20：10混合，放入密封塑料桶或塑料袋内，在30℃发酵10天；
步骤4，发酵结束后，将物料放入干燥机中，在60℃温度下干燥后经粉碎机粉碎过90目筛后，即可得到所述人参小分子营养成分制剂，其为棕色固体。
检测实施例
1、小鼠脾细胞悬液的制备
将Balb/c小鼠拉颈处死，于75％乙醇中浸泡5min进行消毒处理，无菌分离完整脾脏，用PBS冲去浮血，剥除结缔组织及脂肪成分。采用注射器吸取约5mLPBS，轻轻插入脾内吹出细胞，重复操作数次至脾外膜透明，剩余脾组织剪成大小1mm3小块，剪碎后置于小烧杯上的200目不锈钢滤网上，用注射器针芯研磨，PBS液洗涤，收集冲洗液至离心管，1200rpm离心5min，弃上清液，加入3mL红细胞裂解液，静置2min，加入10mLPBS终止反应，1200rpm离心5min，弃上清，用PBS液洗两次，1200rpm离心5min，用RPMI-1640不完全培养基洗一次，1200rpm离心5min，弃上清，加适量RPMI-1640完全培养基(含10％胎牛血清、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素和10mMHepes)，调整细胞浓度至2×106个细胞/mL，台盼蓝染色。
2、各发酵制品对淋巴细胞增殖的影响
将实施例1制备的发酵制品和人参对照品水提后用纯净水分别进行梯度稀释，制得各自的梯度稀释液。将上述脾细胞悬液按100μL/孔加入到96孔培养板中，再分别添加10μLConA(5μg/mL)、10μLLPS(5μg/mL)、10μL上述各发酵制品的梯度稀释液，每个梯度做6次重复，将培养板置于37℃、5％CO2的培养箱中培养72h；同时设置空白对照(即添加10μL纯净水)。采用CCK-8试剂盒测定发酵制品对脾淋巴细胞增殖能力的影响(用增值率(％)＝实验组OD/对照组OD*100％表示)，结果如表1所示：
表1为人参发酵前后对T淋巴细胞和B淋巴细胞增值率的影响
| 样品浓度(ug/ml) | T细胞增值率(％) | B细胞增殖率(％) |
| 发酵5.12 | -39 | -34 |
| 发酵12.8 | -31 | -27 |
| 对照5.12 | -58 | -52 |
| 对照12.8 | -59 | -57 |
由表1可知：相对于人参对照制品，本发明实施例制备的人参发酵制品能够明显改善人参对小鼠T和B淋巴细胞增值率的影响，具有更优异的免疫调节功能。检测细胞存活率大于90％。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。
Claims (10)
1.一种人参小分子营养成分制剂的制作方法，其特征在于，包括：
步骤1：按照枯草芽孢杆菌15-30份、酿酒酵母菌20-35份、植物乳杆菌20-40份、嗜酸乳杆菌0-20份的重量配比混合得到复合菌，将所述复合菌在复合培养基中于25-35℃条件下密闭发酵18-72小时，得到微生物发酵剂；
步骤2：将人参、蜜糖、水和所述微生物发酵剂混合均匀后，于25-35℃条件下密闭发酵10-15天，得到发酵物；
步骤3：将所述发酵物于40-60℃条件下干燥，并粉碎过筛，得到所述人参小分子营养成分制剂。
2.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，还包括菌种的培养，其中具体包括：
将枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为26-40℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为16-40h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将酿酒酵母菌菌种接入马铃薯葡萄糖液体培养基中进行振荡培养，其中，培养温度为20-35℃，振荡培养的转数为180-220rpm，培养时间为20-48h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用；
将植物乳杆菌菌种和嗜酸乳杆菌菌种分别接入MRS液体培养基中进行静置培养，其中，培养温度为25-40℃，培养时间为48-72h，待培养基浑浊后取出，放入2-4℃冰箱保存待用。
3.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)为保藏编号为ACCC10619的菌种；所述酿酒酵母菌(Saccharomycescerevisiae)为保藏编号为ACCC20065的菌种；所述植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)为保藏编号为ACCC11118的菌种；所述嗜酸乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)为保藏编号为ACCC10637的菌种。
4.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述复合培养基的组分及其重量配比为：糖蜜1-5份、蛋白胨0-1份、水94-99份。
5.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述复合菌与复合培养基的重量比为(5-20)：(80-95)。
6.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述人参、蜜糖、水和微生物发酵剂的重量配比为(50-84)：(1-5)：(10-25)：(5-20)。
7.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述人参经过清洗和粉碎的处理，成为人参粉。
8.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述过筛是40-100目筛。
9.根据权利要求1所述的制作方法，其特征在于，所述人参小分子营养成分制剂优选为黄色或棕色的固体。
10.一种如权利要求1-9中任意一项所述的制备方法制备得到的人参小分子营养成分制剂。
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|---|---|
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Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108576807A (zh) * | 2018-04-04 | 2018-09-28 | 江瀚生物科技（上海）有限公司 | 一种有效提高老年人群钙质吸收率的小分子营养素及其制备方法 |
| CN108607013A (zh) * | 2016-12-13 | 2018-10-02 | 河南后羿实业集团有限公司 | 一种发酵型白头翁口服液及其制备方法 |
| CN108887680A (zh) * | 2018-08-03 | 2018-11-27 | 江瀚生物科技（上海）有限公司 | 一种高效促进肠道有益菌增殖的小分子营养制剂及其制备方法 |
| CN109123281A (zh) * | 2018-08-10 | 2019-01-04 | 江苏参源康生物科技有限公司 | 一种人参皂苷饮液的制备方法 |
| CN109123283A (zh) * | 2018-08-13 | 2019-01-04 | 江苏参源康生物科技有限公司 | 一种人参蛋白肽饮液的制备方法 |
| CN110973424A (zh) * | 2019-10-30 | 2020-04-10 | 通化力神保健品有限公司 | 一种人参小分子肽固体饮料及其制备方法 |
| CN112868963A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-06-01 | 台健生物科技(福建)有限公司 | 一种人参酵素的制备方法与应用 |
| CN113439838A (zh) * | 2020-03-26 | 2021-09-28 | 安琪纽特股份有限公司 | 发酵方法、发酵产物及包含其的试剂盒 |
| CN114365809A (zh) * | 2021-12-21 | 2022-04-19 | 昆明生物制造研究院有限公司 | 一种富含皂苷的人参发酵饮料及其制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004095949A1 (en) * | 2003-04-30 | 2004-11-11 | Jae Baeg Kim | Fermented red ginseng comprising metabolites of ginseng saponins by the action of human intestinal bacteria and the preparation method thereof |
| CN102657331A (zh) * | 2012-05-02 | 2012-09-12 | 金光洙 | 用枯草芽孢杆菌发酵的发酵人参、发酵人参纳豆及其提取物的应用 |
| CN103146592A (zh) * | 2013-01-31 | 2013-06-12 | 河南科技学院 | 一种转化人参皂苷Rb1生成Rd的酵母菌及其应用 |
-
2015
- 2015-12-28 CN CN201510999896.3A patent/CN105533707B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004095949A1 (en) * | 2003-04-30 | 2004-11-11 | Jae Baeg Kim | Fermented red ginseng comprising metabolites of ginseng saponins by the action of human intestinal bacteria and the preparation method thereof |
| CN102657331A (zh) * | 2012-05-02 | 2012-09-12 | 金光洙 | 用枯草芽孢杆菌发酵的发酵人参、发酵人参纳豆及其提取物的应用 |
| CN103146592A (zh) * | 2013-01-31 | 2013-06-12 | 河南科技学院 | 一种转化人参皂苷Rb1生成Rd的酵母菌及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张均田: "《人参冠百草：人参化学、生物学活性和药代动力学研究进展》", 31 October 2008, 化学工业出版社 * |
| 陈旸登: "植物乳杆菌发酵转化人参皂苷的研究", 《中国中药杂志》 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108607013A (zh) * | 2016-12-13 | 2018-10-02 | 河南后羿实业集团有限公司 | 一种发酵型白头翁口服液及其制备方法 |
| CN108576807A (zh) * | 2018-04-04 | 2018-09-28 | 江瀚生物科技（上海）有限公司 | 一种有效提高老年人群钙质吸收率的小分子营养素及其制备方法 |
| CN108887680A (zh) * | 2018-08-03 | 2018-11-27 | 江瀚生物科技（上海）有限公司 | 一种高效促进肠道有益菌增殖的小分子营养制剂及其制备方法 |
| CN109123281A (zh) * | 2018-08-10 | 2019-01-04 | 江苏参源康生物科技有限公司 | 一种人参皂苷饮液的制备方法 |
| CN109123283A (zh) * | 2018-08-13 | 2019-01-04 | 江苏参源康生物科技有限公司 | 一种人参蛋白肽饮液的制备方法 |
| CN110973424A (zh) * | 2019-10-30 | 2020-04-10 | 通化力神保健品有限公司 | 一种人参小分子肽固体饮料及其制备方法 |
| CN113439838A (zh) * | 2020-03-26 | 2021-09-28 | 安琪纽特股份有限公司 | 发酵方法、发酵产物及包含其的试剂盒 |
| CN112868963A (zh) * | 2021-02-02 | 2021-06-01 | 台健生物科技(福建)有限公司 | 一种人参酵素的制备方法与应用 |
| CN114365809A (zh) * | 2021-12-21 | 2022-04-19 | 昆明生物制造研究院有限公司 | 一种富含皂苷的人参发酵饮料及其制备方法 |
| CN114365809B (zh) * | 2021-12-21 | 2024-02-27 | 昆明生物制造研究院有限公司 | 一种富含皂苷的人参发酵饮料及其制备方法 |
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